A resistência insulínica (RI) é um importante componente da síndrome metabólica e do diabetes melito (DM). Apesar de importante nos pacientes diabéticos, a sua relevância como preditor de doença arterial coronariana (DAC) em pacientes normoglicêmicos ainda não é conhecida. Neste estudo avaliamos a resistência insulínica pelo teste de HOMA-IR e por testes baseados no Teste Oral de Tolerância à Glicose (TOTG) como preditores de doença coronariana significativa em pacientes não obesos, sem diabetes melito e com glicemia perto do normal encaminhados para coronariografia. Com essa finalidade, realizamos um estudo de casos e controles com 55 pacientes não diabéticos, normoglicêmicos encaminhados para coronariografia por suspeita clínica de doença arterial coronariana. DAC foi classificada pela presença ou não de estenose de 50% ou mais em algum vaso epicárdico. O TOTG foi realizado com dosagem de glicemia e insulinemia nos tempos 0, 30, 60, 90 e 120 minutos após 75g de glicose com intuito de calcular os testes de resistência insulínica (HOMA-IR e os índices de Stumvoll-ISI, Matsuda e OGIS) Resultados: pacientes com DAC tiveram uma prevalência significativamente maior de HOMA-IR acima do percentil 75 (valor>4.21) quando comparados aos pacientes sem DAC (PR:1.78; 95%CI:1.079-2.95; p=0.024). Os índices de sensibilidade insulínica não obtiveram relação significativa com a presença da DAC. Em conclusão, a resistência insulínica avaliada pelo HOMA-IR é um preditor significativo de DAC e deveria ser avaliado em estudos longitudinais como potencial estratificador de risco coronariano.

Introdução Tem sido demonstrado que o tratamento intensivo com insulina (TII) reduz morbidade e mortalidade em pacientes criticamente doentes. No entanto, ainda não está avaliado se este tratamento melhora o prognóstico de pacientes com trauma crânio encefálico (TCE) grave. Materiais e Métodos Nós realizamos um ensaio clínico randomizado no qual pacientes adultos, portadores de TCE contuso grave, com escala de coma de Glasgow ≤ 8, admitidos no centro de tratamento intensivo (CTI) do Hospital de Porto Socorro Municipal de Porto Alegre, foram randomizados para receber TII (com o objetivo de manter a glicemia capilar entre 80 e 110 mg/dl utilizando infusão contínua de insulina) ou tratamento convencional da glicemia (TCG) (com o objetivo de manter a glicemia menor do que 180 mg/dl com insulina subcutânea, no qual a infusão de insulina foi utilizada somente quando a glicemia ultrapassasse 220 mg/dl). O desfecho principal foi Escala de Glasgow de Desfecho 6 meses depois do trauma. Desfechos secundários foram: hipoglicemia, incidência de infecção e tempo de internação na CTI. Resultados Dos 88 pacientes randomizados, 42 foram designados para receber TTI e 46 foram designados para receber TCG. Houve, 3 exclusões no grupo de TTI e 6 no grupo de TCG. Houve um pequeno benefício para o grupo de TTI, com relação ao desfecho neurológico em 6 meses. O escore da Escala de Glasgow de Desfecho >3, que caracteriza um bom desfecho neurológico foi observado em 15 (39,5 %) pacientes no TII e em 13 (32,5%) pacientes no TCG respectivamente, mas esta pequena diferença não foi estatisticamente significativa (p= 0,63). Os pacientes do TII tiveram mais hipoglicemia: 23 (60,5%), comparado a 4 (10%) no grupo de TCG (p< 0,001). Não houve diferença no número de dias de internação na CTI (18,2 27,6 vs. 12,9 12,7) tampouco nas taxas de sepsis (84,6%vs 80%) entre os dois grupos. Conclusão Neste estudo, o TII não melhorou o desfecho neurológico dos pacientes com TCE grave mas aumentou o risco de hipoglicemia quando comparado ao TCG. / Introduction Intensive insulin therapy (IIT) has been shown to reduce morbidity and mortality in critical ill patients. Whether it improves the prognosis of patients with severe traumatic brain injury (STBI) has been little investigated. Materials and Methods We conducted a prospective controlled study where adult patients with blunt STBI, with Glasgow Coma Scale ≤ 8, admitted to the Intensive Care Unit (ICU) were randomly assigned to receive either IIT (maintenance of blood glucose between 80 and 110 mg/dl with continuous insulin infusion) or conventional glycemic therapy (CGT) (maintenance of blood glucose below 180 mg/dl with subcutaneous insulin and insulin infusion only if blood glucose levels exceeded 220 mg/dl). The main outcome was Glasgow outcome scale (GOS) 6 month after trauma. Secondary measures were: hypoglycemia, incidence of infections and days in ICU. Results Of the 88 patients randomized, 42 were assigned to IIT and 46 to CGT. There was no statistical difference (P=0.63) in neurological outcomes between treatment groups: GOS>3 was observed in 15 (39.5 %) patients in the IIT and in 13 (32.5%) patients in the CGT respectively. More patients in the IIT group had hypoglycemia: 23 (60.5%), compared to 4 (10%) in the CGT group (p<0.001). There were no differences in the number of days spent in the ICU (18.2 27.6 vs. 12.9 12.7) nor in the sepsis rates (84.6%vs 80%) between the groups. Conclusion In our study, IIT did not improve the neurological outcome of patients with STBI but did increase the risk of hypoglycemia compared to CGT.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3119_1.pdf: 2321356 bytes, checksum: 49c75aa223017a3b43c4f8a9e2b19c91 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / A Resistência à Insulina (RI), além de provocar alterações no metabolismo dos carboidratos, pode promover anormalidades no metabolismo lipídico, que apresentam uma forte relação com o desenvolvimento de doenças cardiovasculares (DCVs). Esses distúrbios lipídicos ainda não estão bem definidos, podendo elevar o risco de eventos coronarianos em uma determinada população. As razões triglicerídio (TG)/HDL-colesterol (HDL-c), não-HDL-colesterol (não-HDL-c)/HDL-c, Colesterol Total (CT)/HDL-c (Castelli I) e LDL-colesterol (LDL-c)/HDL-c (Castelli II) têm sido utilizadas como instrumentos para acessar o risco de surgimento de DCVs. O diagnóstico de RI é de alta complexidade para ser avaliado e, na região Nordeste do Brasil, atualmente não há levantamento epidemiológico nem indicações de sua contribuição para o risco de DCVs. Os objetivos deste trabalho consistem em pesquisar a prevalência de RI utilizando o método QUICKI (Índice para Checagem da Sensibilidade à Insulina), estabelecer o ponto de corte de QUICKI adequado à população do Nordeste do Brasil, avaliar a influência de RI sobre os índices lipídicos e sua relação com o risco de evento coronariano, acessado pelo clássico Escore de Risco de Framingham, além da relação com distúrbios da Síndrome Metabólica X. Foram coletadas amostras sanguíneas de 7128 voluntários (2124 homens e 5004 mulheres) normoglicêmicos, bem como foram aferidos seus níveis pressóricos, quantificados os parâmetros antropométricos e bioquímicos, tais como: Glicemia (G) e concentrações séricas de CT, HDL-c e TG, por metodologia enzimática; LDL-c e VLDLcolesterol (VLDL-c), através da equação de Friedewald; insulina plasmática (I), através de ensaio imunoenzimático de micropartículas (MEIA). O QUICKI foi construído para cada indivíduo e o ponto de corte adotado foi o do 25° percentil. Testes de &#61539;2, t de student, ANOVA, regressão logística, correlação de Pearson e testes z de comparação foram realizados (p < 0,05). Os dados foram apresentados como média ± erro padrão da média. Os pontos de corte encontrados foram 0,349 e 0,343 para homens e mulheres, respectivamente. A prevalência de RI foi 31,3% na população total, não havendo diferença significativa entre os sexos. Indivíduos que tiveram RI apresentaram níveis séricos de CT, LDL-c, VLDL-c, não-HDL-c e TG significativamente (p<0,0001) maiores que os indivíduos sem RI. Similarmente, foi observado aumento significativo (p<0,0001) nos índices de CT/HDL-c, LDL-c/HDL-c, TG/HDL-c e não-HDL-c/HDL-c. Contudo, observou-se redução significativa (p<0,0001) nos níveis de HDL-c nos indivíduos resistentes à insulina. Correlações negativas (p<0,0001) foram encontradas entre QUICKI e os índices lipídicos. A comparação entre os coeficientes de correlação demonstrou que VLDL-c (r = -0,279; p<0,0001), TG (r = -0,255; p<0,0001) e TG/HDL-c (r = -0,241; p<0,0001) foram os mais fortemente correlacionados com RI. Avaliação de regressão logística demonstrou uma razão de chance de 1,7 (p<0,0001) para alto risco de morte por evento coronariano em 10 anos em indivíduos com RI em comparação a insulino-sensíveis. Adicionalmente, foi observado que a razão de chance para a presença associada de quatro distúrbios metabólicos (hipertensão arterial sistêmica, obesidade, hipertrigliceridemia e baixos níveis de HDL-c) foi de 11,7 (p<0,0001). Estes resultados sugerem que um terço da população do Nordeste do Brasil apresenta RI e alto risco cardiovascular representado pela correlação de RI com anormalidades lipídicas

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-14T17:39:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_Versão Final com Ficha CCS.pdf: 4315685 bytes, checksum: 2ed39004011a2dc695f7b76af5a78a9f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T17:39:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_Versão Final com Ficha CCS.pdf: 4315685 bytes, checksum: 2ed39004011a2dc695f7b76af5a78a9f (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / CAPES / Com o objetivo de identificar a prevalência de resistência à insulina (RI) em adolescentes e sua associação com variáveis cardiometabólicas e com o consumo alimentar, foi conduzido um estudo de delineamento transversal de base escolar com 1081 adolescentes de 12 a 17 anos provenientes de amostragem complexa do ―Estudo de Riscos Cardiovasculares em Adolescentes‖ (ERICA). Na presente casuística foi avaliada uma subamostra da população total de adolescentes incluídos no ERICA, sendo englobados todos os estudantes elegíveis que estavam matriculados no turno da manhã das escolas analisadas na cidade do Recife, capital do Estado de Pernambuco. A coleta dos dados foi possível a partir do uso de questionários englobando perguntas referentes a variáveis demográficas, socioeconômicas e comportamentais, além de parâmetros antropométricos, bioquímicos e do consumo alimentar, os quais foram obtidos por profissionais devidamente capacitados. A presença da RI foi diagnosticada com uso do Homeostatic Model Assessment for Insulin Resistance (HOMA-IR), sendo confirmada quando HOMA-IR > Percentil 75 da distribuição. Para ajuste do delineamento amostral complexo inerente ao ERICA, todas as análises estatísticas foram realizadas no STATA versão 14.0, a partir do módulo “Survey”. Partindo-se de um modelo hierárquico de determinação da RI pré-definido, realizou-se a análise bivariada para verificar a associação entre a RI e as variáveis independentes por meio da regressão de Poisson simples. Nesta ocasião, as associações que apresentaram p<0,20 foram ajustadas com modelos de análise multivariada pela regressão de Poisson com ajuste robusto da variância, sendo consideradas estatisticamente significativas as variáveis com p≤0,05. A amostra final foi representativa para 99.221 adolescentes de 12 a 17 anos, matriculados no turno da manhã de escolas públicas e privadas do município estudado. A idade mediana foi de 14 anos (Intervalo interquartílico=13-16), havendo 50,4% de indivíduos do sexo masculino e 67,6% em estágio púbere da maturação sexual. A RI foi evidenciada em 25,3% dos adolescentes. Após ajustes estatísticos, as variáveis que se associaram significativamente com o índice HOMA-IR no modelo final foram: faixa etária, IMC por idade, triglicerídeos, HDL-Colesterol e o menor consumo alimentar de gordura saturada. No presente estudo, observou-se uma prevalência importante de RI na população analisada e o índice HOMA-IR se associou significativamente com variáveis cardiometabólicas e do consumo alimentar. A condução de pesquisas com adolescentes, envolvendo a temática abordada, permite a implementação de estratégias que incentivam a promoção da saúde desse grupo populacional pouco estudado e a identificação dos fatores de risco passíveis de modificação mais associados com a RI. / In order to identify the prevalence of insulin resistance (IR) in adolescents and its association with cardiometabolic variables and dietary intake, a cross-sectional school-based study of was carried-out with 1081 adolescents aged 12 to 17 years from the complex sample of the "Study of Cardiovascular Risk in Adolescents" (ERICA). It was evaluated a subsample of the total population of adolescents included in ERICA, which encompassed all eligible students who were enrolled in the morning shift of the schools analyzed in Recife, capital of Pernambuco. Data collection was possible through the use of questionnaires covering questions regarding demographic, socioeconomic and behavioral variables, and anthropometric parameters, biochemical and food intake, which were obtained by properly trained professionals. The presence of IR was diagnosed with use of the Homeostatic Model Assessment Insulin Resistance (HOMA-IR), and confirmed when HOMA-IR> 75th percentile of the distribution. For adjustment of the sampling design inherent to ERICA, all statistical analyzes were performed using STATA version 14.0, with the "Survey" module. Starting from a predefined hierarchical model for determining IR, bivariate analysis was used to assess the association between IR and the independent variables by Poisson regression. On this occasion, the associations with p <0.20 were adjusted with multivariate analysis models using Poisson regression with robust variance adjustment, which considered statistically significant variables with p≤0.05. The final sample was representative for 99,221 adolescents aged from 12 to 17 years, enrolled in the morning shift of public and private schools in the studied city. The median age was 14 years (interquartile range = 13-16), with 50.4% of males and 67.6% of individuals on pubertal stage of sexual maturation. The IR was found in 25.3% of adolescents. After statistical adjustments, the variables that were significantly associated with HOMA-IR index in the final model were age, BMI for age, triglycerides, HDL-cholesterol and saturated fat food intake. In the present study, there was an important prevalence of IR in the analyzed population and HOMA-IR index was significantly associated with cardiometabolic variables and dietary intake. The conduct of researches with adolescents using this selected theme, allows the implementation of strategies that encourage health promotion in this population group, which is less studied, and the identification of risk factors associated with the IR.

Submitted by carla santos (biblioteca.cp2.carla@bahiana.edu.br) on 2018-08-23T19:05:31Z No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) / Approved for entry into archive by JOELMA MAIA (ebmsp-bibliotecacp2@bahiana.edu.br) on 2018-08-24T14:27:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-24T14:27:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 corre????o dissereta????o final Candice.pdf: 6836056 bytes, checksum: 77987394ab8b8a333f33b5a3017717e7 (MD5) Previous issue date: 2017-09-22 / Introdu????o: Estudo observacionais apontam que mulheres em uso de contraceptivo oral combinado (COC) apresentam triglicer??deos de jejum e lipemia p??s-prandial mais elevados do que as que n??o usam. Esses mesmos estudos levantam a hip??tese de que isso se deve a diminui????o da produ????o e a????o da lipase lipoprot??ica. Por consequ??ncia, aventa-se a hip??tese de que mulheres em uso de contraceptivo oral apresentem diminui????o da sensibilidade insul??nica, j?? que, a insulina ?? o horm??nio que estimula a atividade e produ????o da lipase lipoproteica. Objetivo: Testar hip??tese de que existe diferen??a entre a sensibilidade insul??nica de mulheres que utilizam e n??o utilizam COC, bem como verificar se existe associa????o entre os ??ndices do HOMA-IR e HOMA-?? e o perfil lip??dico de jejum dessas mulheres. M??todos: Ap??s o c??lculo amostral, foram inclu??das 44 mulheres divididas igualmente entre os grupos. Inclu??das mulheres, idade entre 19 e 30 anos, eutr??ficas, que utilizavam ou n??o utilizavam COC, com triglicer??deos de jejum abaixo de 150mg/dL e irregularmente ativas. Exclu??das mulheres com comprometimento hep??tico, pancre??tico ou renal, em uso de corticoides, hipolipemiante, anabolizantes ou suplementos alimentares, fumantes, com diagn??stico de hipo ou hipertieroid??smo ou s??ndrome do ov??rio polic??stico. A amostra foi dividida em dois grupos: grupo COC (GCOC) formado por mulheres em uso de COC e grupo sem COC (GSCOC) formado por mulheres que n??o utilizam nenhum m??todo contraceptivo a base de horm??nios. Ap??s jejum de 12h foram coletados 5ml de sangue para dosagem do perfil lip??dico, da insulina e da glicemia. Posteriormente calculado com esses valores o HOMA-IR e HOMA-??. Estat??stica: Utilizado o Mann-Withney bidirecional para compara????o dos valores do HOMA-IR e HOMA-?? entre os grupos. Utilizado o teste de Sperman para verificar a correla????o entre as vari??veis do perfil lip??dico e o HOMA-IR e HOMA-??. Posteriormente foi realizada a an??lise multivariada, entrando no programa as vari??veis que apresentaram correla????o positiva com o HOMA-IR e HOMA-??. Resultados: A m??dia de idade, ??ndice de massa corporal, glicemia, insulina respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 23??1,3 vs 23??2,0 anos; 22??1,4 vs 22??1,0 kg/m2; 86??8,8 vs 84??7,9 mg/dL; 10.2??4.4 vs 6.4??2.9 uM/L. A m??dia das vari??veis do perfil lip??dico: triglicer??deos, colesterol total, LDL e HDL respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 88??72 vs 49??40mg/dL (p??0,01); 207??38 vs 183??30mg/dL (p=0,02); 134??36 vs 125??27mg/dL (p=0,34); 54??13 vs 48??11mg/dL (p=0,10). A m??dia do HOMA-IR e HOMA-?? respectivamente do GCOC e do GSCOC foram: 1,6 (1,1 ??? 2,5) vs 1,2 (0,9 ??? 1,5) (p=0,03); 207 (116 ??? 241) vs 101 (86 ??? 132) (p??0,01). Observada correla????o linear moderada e positiva entre o HOMAIR-IR e o colesterol total (r=0,34 e p=0,02). J?? na an??lise de correla????o do HOMA-?? verificou-se correla????o o linear moderada e positiva com os triglicer??deos (r=0,41 e p??0,01), com o colesterol total (r=0,40 e p??0,01) e com a LDL (r=0,30 e p=0,04). Quando realizada a an??lise de associa????o linear multivariada, verificou-se signific??ncia de associa????o independente entre o uso de COC e o HOMA-?? com raz??o de chance de 8,15 para um intervalo de confian??a de (1,02 - 64,94) e p=0,04. Conclus??o: Mulheres que utilizam COC apresentam HOMA-IR e HOMA-?? maior que mulheres que n??o utilizam COC. Isso sugere que essas mulheres apresentam menor sensibilidade insul??nica, o que corrobora com as altera????es lip??dicas encontradas nessa popula????o.

Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Nelson Durán / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T15:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_ThiagoMatosFerreirade_M.pdf: 9733852 bytes, checksum: 27ee6ec2038e928ab267ba8fb4ece0f8 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O Diabetes Mellitus é uma patologia cujos casos têm aumentado, devido aos maus hábitos de vida da sociedade. Inúmeras estratégias vêm sendo desenvolvidas para o tratamento do diabetes, especialmente a liberação controlada de fármacos. A utilização errônea da insulina como tratamento base do diabetes assume uma problemática, visto que a dose elevada do fármaco pode levar a quadros graves de hipoglicemia. O emprego do encapsulamento de fármaco por polímeros biodegradáveis e biocompatíveis vem sendo uma boa estratégia na liberação controlada de fármacos, permitindo que o agente seja liberado de modo contínuo e sustentado. Nesse contexto, a produção e caracterização de nanopartículas contendo insulina se apresentam como uma estratégica de liberação controlada desse hormônio. Sendo assim, este projeto consistiu na preparação e caracterização de nanopartículas biodegradáveis de poli (e-caprolactona) (PCL) como carreador de insulina e sua aplicação in vivo e in vitro. As nanopartículas foram preparadas pelo método de dupla emulsão a/o/a e evaporação de solvente. A caracterização das nanopartículas foi realizada pelo Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV), observando-se nanopartículas esféricas e com diferentes tamanhos. A eficiência de encapsulação foi de 90,6% (±1,6), analisada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) por via indireta. O diâmetro médio das nanopartículas foi de 796 nm (P.D.I. = 0,49) e o potencial zeta, medido através da mobilidade eletroforética, de -29,4 ± 2,7 mV. O estudo de viabilidade celular foi realizado em células (3 tumorais pancreáticas (MIN 6) em diferentes concentrações e tempos usando o método MTS. Observamos uma redução da viabilidade celular somente em 72h em todas as concentrações. A avaliação da liberação sustentada do fármaco foi realizada através de estudos in vivo, com ratos Wistar machos diabéticos tipo 1, os resultados confirmaram que as nanopartículas contendo insulina apresentam liberação contínua e sustentada se comparadas a insulina não encapsulada. Além disso, verificamos que o tratamento com as nanopartículas contendo insulina não promoveram hepatotoxicidade, através da avaliação da morte celular (clivagem da caspase 3), e estresse oxidativo (catalase, superóxido dismutase e peroxiredoxina). O emprego do nanoencapsulamento de insulina apresenta vantagens farmacocinéticas em relação ao uso de insulina livre, além de não apresentar hepatotoxicidade. Sendo assim, nossos resultados agregam valores importantes no tratamento clínico do diabetes tipo 1, levando a futuro promissor na utilização dessas nanopartículas poliméricas contendo insulina. / Abstract: Diabetes Mellitus is a disease whose cases have increased due to the bad habits of life of society. Several strategies have been developed for the treatment of diabetes, especially the controlled release of drugs. The erroneous use of insulin as basal treatment of diabetes takes a problem, since the high dose of the drug can lead to severe hypoglycemia. The use of drug encapsulation by biocompatible and biodegradable polymers has been a good strategy for the controlled release of drugs, allowing the agent to be released on a continuous and sustained. In this context, the production and characterization of nanoparticles containing insulin are presented as a strategy of controlled release of this hormone. Thus, this project consisted of the preparation and characterization of biodegradable nanoparticles of poly (e-caprolactone) (PCL) as a carrier of insulin and its application in vivo and in vitro. The nanoparticles were prepared by the method of double emulsion w / o / a and solvent evaporation. The characterization of nanoparticles was performed by Scanning Electron Microscope (SEM), observing and spherical nanoparticles with different sizes. The encapsulation efficiency was 90.6% (± 1.6), analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) via indirect. The average diameter of nanoparticles was 796 nm (PDI = 0.49) and zeta potential as measured by photon correlation spectroscopy (PCS) of -29.4 ± 2.7 mV. The cell viability was performed in tumoral pancreatic (3 cells (6 min) at different concentrations and times using the MTS. A decrease in cell viability only at 72 at all concentrations. The evaluation of sustained release of drug was performed by in vivo studies with male Wistar rats with type 1 diabetes, results confirmed that the nanoparticles containing insulin present continuous and sustained release as compared to non-encapsulated insulin. Furthermore, we found that treatment with nanoparticles containing insulin did not cause liver toxicity by evaluating cell death (caspase 3 cleavage), and oxidative stress (catalase, superoxide dismutase and peroxiredoxins). The use of insulin nanoencapsulated pharmacokinetic advantages over the use of insulin free, and no reported hepatotoxicity. Thus, our results add important values in the clinical treatment of type 1 diabetes, leading to a promising future in the use of these polymeric nanoparticles containing insulin. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: José Antonio Rocha Gontijo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T07:06:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Michelotto_JoaoBatista_D.pdf: 34170334 bytes, checksum: 36ae378e1f61326531b076b34ae09e4b (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O papel do SNC no controle da homeostase hidrosalina tem sido demonstrado por diversos estudos. Recentemente, várias evidências têm sugerido que a insulina pode exercer influência na modulação de várias funções cerebrais, tais como regulação da ingestão de alimentos, das funções reprodutiva e cardiovascular. Entretanto, são escassos os dados disponíveis abordandoo efeito da insulina injetada no SNC sobre o manuseio renal de sódio. Assim, nós hipotetizamos que uma possível ação central da insulina pode modular a atividade nervosa renal, levando a mudanças na excreção urinária de sódio. Com a finalidade de testar essa hipótese nós investigamos os efeitos da injeção aguda de insulinano ventrículo cerebral lateral sobre o manuseio tubular de sódio em ratos não anestesiados, não restritose desnervados e seus controles.Para examinar a influênciada desnervação renal durante a injeção aguda de insulina, os animais foram randomicamente separados em 4 grupos: 1. Ratos NDX (solução salina0,15M NaCI);2. Ratos NDX (injeçãoicv de insulina);3. Ratos DNX (injeção insulina) e 4. Ratos NDX (injeção sc de insulina). Nesses experimentos nós demonstramos que a injeção central de insulina produziu substancial e dose dependente aumento da excreção urinária de sódio(0,042?g.?l-0,042µg.µl-1:1189 ±308 ? % .min.; 0,42 µg.µl-1:1461± 594 ? % .min.e 4,2 µg.µl-1: 2055 ± 411 L % .min.) e potássio (0,042µg.µl-1:649 ±100 ? % .min.; 0,42 µg.µl-1: 671±175 ? % .min. e 4,2 µg.µl-1: 669 ±70 ? % .min.), confirmando a hipótese de que a insulina, centralmente administrada,induz excreção renal de íons, pelo menos em parte relacionada a mudanças na atividade nervosa renal. Em adição, nós mostramos que a natriurese promovida pela insulina ocorreu por aumento da rejeição pós proximal de sódio (FEPPNa),sem alteração da filtração glomerular(CCr)e proporcional a carga filtrada de sódio. Assim, nós observamos que o aumento da excreção de sódio e potássio deve ser devido a inabilidadedos túbulos renais em manusear eletrólitos,associada a quebra do balanço glomérulo-tubular.A administração de leptina icv não promoveu modificação em qualquer parâmetro funcionalavaliado. Entretanto, quando a leptina foi injetada associada à insulina no ventrículo lateral, o efeito na excreção urinária de sódio apresentou aumento ou diminuição nas doses de 0,3 3 ?g, respectivamente. Tendo em vista os dados apresentados,pode-se sugerir que um possível erro na sinalização eferente periventricular deve ter contribuído para as disfunções observadas.Novos estudos são necessários para elucidar esse envolvimento neuro hormonal na interação insulina-cérebro-rim / Abstract: The role of the central nervous system in the control of hydrosaline homeostasis has ben strikingly demonstrated by several studies. In recent times growing evidence has suggested that insulin may exert influence in the modulation of many brain functions, such as food intake regulation, reproductive function and cardiovascular function. However, there are no available data examining the central nervous system effect of insulin administration on renal sodium handIing. Also, we have hypothesized that a possible central insulin action may modulate the renal nerve activity, consequently changing the urinary sodium excretion. In order to test this hypothesis we investigated the effects of acute lateral cerebral ventricle insulin injection on tubule sodium handling of unanesthetized, unrestrained renal-denervated rats and their sham operated controIs. To examine the influence of renal denervation during i.c.v. administration of insulin rats were randomly assigned to one off our groups: (1) sham-operated Í.c.v. 0.15M NaCI injected, (2) sham-operated i.c.v. insulin-injected, (3) renal-denervated i.c.v. insulin-injected and (4) subcutaneously insulin-injected. In the current studies we demonstrated that centrally administered insulin produced substantial and dose-related increase in the urinary output of sodium (0.042µg.µl-1: 1189:808 ?%.min., 0.42 µg.µl-1: 1461± 594 ? %.min., and 4.2 µg.µl-1: 2055 ± 411? %.min.), and potassium (0.042µg.µl-1: 649 ±100 ?%.min., 0.42vg.µl-1: 671±175 ? %.min., and 4.2µg.µl-1: 669 ± 70 ? %.min.), confirming the hypothesis that centrally administered, insulin-induced renal ion excretion is, at least in part, related to changes in renal nerve activity. In oodition, we showed that insulin-induced natriuresis occurred by increasing post-proximal tubule sodium rejection (FEPPNa),despite an unchanged glomerular filtration rate (Ccr) and proportionate to the sodium 1000 filtered. Thus, the observed increase in renal sodium and potassium excretion may be due to the inability of renal tubules to handIe the electrolytes, with a promoted disruption in glomerotubular balance. Together, these findings may suggest that a possible misleading of periventricular efferent neural signalizing may contribute to renal, hemodynamic and peripheral metabolic dysfunction. Further studies are required to investigate this neurohumoral involvement in functional insulin-brain-kidneyinteraction / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Mario Jose Abdalla Saad, Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T23:40:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_ElianaPereirade_D.pdf: 1282393 bytes, checksum: 3f0af814a8ad75f3abbde4e9d917c3c1 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O substrato-1 do receptor de insulina (IRS-1) desempenha função importante na conexão entre os receptores de insulina (IR) e do fator de crescimento insulina-like-1 (IGF-1R), e as moléculas que participam das etapas subseqüentes da transdução dos sinais gerados pelos respectivos ligantes. No presente estudo, utilizou-se um oligonucleotídeo antisense para o IRS-1 (AS IRS-1), com a finalidade de inibir a expressão dessa proteína in vivo e avaliar as conseqüências desse bloqueio em diferentes tecidos de ratos Wistar. O tratamento com AS IRS-1 durante três dias reduziu a expressão desta proteína em cerca de 80%, 75% e 65% (p<0,05) respectivamente em fígado, músculo esquelético e tecido adiposo, sendo tal efeito acompanhado por uma redução de 40% (p<0,05) na constante de decaimento de glicose durante o teste de tolerância à insulina (ITT), por uma redução de 78% (p<0,05) no consumo de glicose durante o clamp euglicêmico-hiperinsulinêmico e por um aumento de 90% (p<0,05) nos níveis basais de insulina plasmática. Os efeitos metabólicos produzidos pelo AS IRS-1 foram acompanhados pela redução significativa da fosforilação induzida por insulina da Akt [Ser473] em fígado (85%, p<0,05), músculo esquelético (40% p<0,05) e tecido adiposo (85%, p<0,05), e uma redução significativa da fosforilação em tirosina da ERK induzida por insulina em fígado (20%, p<0,05) e músculo esquelético (30%, p<0,05). Entretanto, o tratamento com AS IRS-1 promoveu aumento (60%, p<0,05) da fosforilação da ERK em tirosina induzida por insulina em tecido adiposo. Por fim, em ratos tratados com AS IRS-1 por oito dias, observou-se um aumento de 100% (p<0,05) da massa relativa de tecido adiposo epididimal e um aumento de 120% (p<0,05) da expressão do receptor nuclear PPAR?. Portanto, a inibição da expressão de IRS-1 em ratos leva resistência à insulina acompanhada pela ativação de uma via de sinalização relacionada ao crescimento celular, exclusivamente em tecido adiposo branco / Abstract: Insulin receptor substrate-1 (IRS-1) has an important role as an early intermediary between the insulin and IGF-1 receptors and downstream molecules that participate in the insulin and IGF-1 signal transduction. We employed an antisense oligonucleotide (IRS-1 AS) to inhibit whole-body expression of IRS-1 in vivo and evaluate the consequences of short-term inhibition of IRS-1 in Wistar rats. Four days treatment with IRS-1 AS reduced the expression of IRS-1 by 80, 75 and 65% (P<0.05) in liver, skeletal muscle, and adipose tissue, respectively. This was accompanied by a 40% (P<0.05) reduction in the constant of glucose decay during an insulin tolerance test, a 78% (P<0.05) reduction in glucose consumption during a hyperinsulinemic-euglicemic clamp, and a 90% (P<0.05) increase in basal plasma insulin levels. The metabolic effects produced by IRS-1AS were accompanied by a significant reduction in insulin-induced [Ser473] Akt phosphorylation in liver (85%, P<0.05), skeletal muscle (40%, P<0.05), and adipose tissue (85%, P<0.05) and a significant reduction in insulin-induced tyrosine phosphorylation of ERK in liver (20%, P<0.05) and skeletal muscle (30%, P<0.05). However, insulin-induced tyrosine phosphorylation of ERK was significantly increased (60%, P<0.05) in adipose tissue of IRS-1 AS treated rats. Moreover, in rats treated with IRS-1 AS for 8 days, a 100% increase (P<0.05) in relative epididymal fat weight and a 120% (P<0.05) increase in nuclear expresssion of peroxisome proliferator-activated receptor-? were observed. Thus, acute inhibition of IRS-1 expression in rats leads to insulin resistance accompanied by activation of a gowth-related pathway exclusively in white adipose tissue / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

Orientador: Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T04:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MarcioPereirada_D.pdf: 4499897 bytes, checksum: ca6b7ea82771a3d1c8e260487fa8d105 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A exposição de animais homeotérmicos à baixa temperatura promove alterações fisiológicas que refletem o desvio do fluxo de energia para a produção de calor. A perda do controle coordenado sobre a ingestão alimentar e o gasto energético constitui mecanismo central no desenvolvimento da obesidade, um dos mais prevalentes problemas de saúde pública da atualidade. Uma vez que, sob exposição ao mo, alta ingestão alimentar está associada à elevada termogênese, perda de peso e baixos níveis de insulina, utilizou-se uma analise por cDNA- macroarray visando a identificação de proteínas hipotalâmicas que fossem moduladas em resposta à exposição ao mo (4°C). Esta análise revelou um aumento na expressão do neuropeptídeo orexigênico MCH (hormônio de concentração da melanina) em ratos expostos ao mo. Para avaliar o efeito da hiper-expressão hipotalâmica do MCH sobre a temperatura corpórea, a ingestão de alimentos e a variação de peso corpóreo em ratos expostos ao mo, foi utilizado um oligonuc1eotídeo antisense específico para bloqueio da síntese protéica de MCH, o qual não alterou a ingestão alimentar nem a temperatura corporal desses animais. Tal bloqueio promoveu queda significativa no peso corporal dos mesmos, bem como redução no glicogênio hepático e gordura epididi.ma4 aumento relativo na gordura corporal, hipertrofia do tecido adiposo marrom com aumento na expressão de UCPI (proteína desacopladora mitocondriall) neste tecido, além de aumento no consumo da massa corporal isenta de gordura. Deste modo, o aumento na expressão hipotalâmica de MCH em ratos expostos ao mo parece participar do processo que permite a utilização eficiente de energia para produção de calor durante a adaptação termogênica ao mo. Na parte final deste estudo avaliou-se o papel do MCH sobre produção e ação periférica da insulina e sobre etapas intermediárias fundamentais na transdução do sinal molecular deste hormônio em animai_ mantidos em temperatura ambiente. O estímulo com MCH exógeno promoveu aumento nos níveis de glicose tanto em condições basais quanto durante o GTT, sem alteração nos níveis de insulina, enquanto o tratamento com oligonucleotídeo antisense não alterou estes parâmetros. Assim, o tratamento com MCH parece contribuir para um comprometimento da resposta funcional à insulina. O tratamento com MCH induziu redução na ativação da Akt em músculo, sem modificação na resposta molecular à insulina nos demais tecidos, sugerindo que o MCH per se, e através de um efeito central, possa atuar de maneira primária sobre a modulação na ação periférica da insulina, por mecanismos que exerçam interferência na sinalização da insulina em tecidos chave na captação de glicose. O tratamento com MCH promoveu ainda redução na fosforilação da ERK induzida por insulina em tecido adiposo branco, enquanto o tratamento com oligonuc1eotídeo antisense MCH levou a um aumento na sua fosforilação em tecido adiposo marrom. Os resultados aqui apresentados trouxeram importantes informações não apenas no que se refere ao controle da ingestão alimentar e termogênese como também no controle central da ação periférica da insulina. Por fim, os resultados apresentados revelam o papel do neurotransmissor MCH como potencial alvo terapêutico na terapia da obesidade e diabetes mellitus tipo2 / Abstract: The exposure of homeothermic anima1_ to cold environment leads to physiological adaptations that are require to maintain a stable body temperature. Among these adaptations, the increase of food consumption accompanied by weight loss reflects the deviation of energy flow toward heat production. Loss of coordinator control of food ingestion and energy expenditure represents a central mechanism in the development of obesity, one of the most prevalent public health problems at the present time. Because, under cold exposure, high food consumption is association with increased thermo genesis, weight loss and decreased insulin and leptin levels, an analysis of cDNA-macroarray was employee to identify hypotha1amic proteins that are modulator in response to cold exposure (4°C). The cDNA macroarray ana1ysis, confumed by RT-PC_ mnnunoblot, and RIA, revealed that the hypotha1amic expression of the appetite-stimulating neuropeptide, meJanin-concentrating hormone (MCR), was increased by exposure of rats to cold enviromnent. To investiga te effects of elevation MCH hypoth_1::tmic expression on body temperature, food ingestion and body weight variation in cold exposed rats, a MCH antisense oligonucleotide was used to inlnoit MCH synthesis. The inhibition of hypotha1amic MCH expression in cold exposed rats promotion no changes in food intake and body temperature. However, MCH inanition 100 to a significant drop in body weight, which was accompaniOO by decreased liver glycogen and epididymal fat, increased relative body fat, increased absolute and relative interscapuJar brown adipose tissue mass, increased uncoupling protein 1 expression in brown adipose tissue and increased consumption oflean body mass. Thus, increased hypothalamic MCH expression in rats exposed to cold may participate in the process that allows for efficient use of energy to heat production during thermogenic adaptation to cold. In the second part of this work the effect of intracerebro ventricuJar infusion of MCH and antisense oligonucleotide to MCH was evaluatOO upon peripheral glucose homeostasis, insulin action and key steps of the insulin signal transduction pathway in liver, skeletal muscle, white and brown adipose tissues in rats maintainOO in thermoneutrality. MCH but not antisense oligonucleotide MCH treatment 100 to significant increase of glucose levels during a glucose tolerance test, no changes in insulin levels were detected. MCH treatment promotion a significant reduction of Akt serine phosphorylation in skeletal muscle and reduction of ERK tyrosine phosphorylation in white adipose tissue. On the other band, antisense oligonucleotide MCH treatment promotion mcreased ERK tyrosme phosphorylation m brown adipose tissue. The present study provides evidence that MCH participates m the central control of energy expenditure and potentially affects insulin action m peripheral tissues. This data supports the role of MCH as a candidate target for therapy m obesity and diabetes mellitus / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T19:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_SilviaCristinaCrepaldi_D.pdf: 4970540 bytes, checksum: caabd222e7acbf570b4567612f3ce6fe (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo aprofundar os conhecimentos sobre os mecanismos celulares envolvidos na maturação do acoplamento estímulo-secreção de insulina na fase de vida perinatal; e da função do lactogênio PRL neste processo. Para tanto, ilhotas de ratos neonatais foram mantidas em cultura durante períodos de tempo diferentes, recebendo ou não tratamento hormonal diário. À seguir, analisamos a expressão dos transportadores de glicose, a permeabilidade ao cálcio e a secreção de insulina estimulada por substâncias diferentes. Os dados obtidos nos indicam que em ilhotas neonatais o tratamento crônico com PRL e a concentração de glicose no meio de cultura, modulam o aumento na expressão do GLUT2. A expressão do GLUTl não é alterada pela PRL ou pela glicose. A permeabilidade ao 45Ca²+ é modificada após o tratamento prolongado com PRL, aproximando-se ao padrão do adulto. A PRL induz aumento no conteúdo de insulina e maturação da resposta secretória estimulada por glicose e aminoácidos. A maturação da resposta secretória estimulada por glicose é potencializada pelo tempo de tratamento hormonal. O tratamento com PRL parece não atuar nos mecanismos envolvidos na modulação muscarínica embora induza maturação no sistema PKC. O tempo de cultura "per se" induz uma maturação parcial da resposta secretória de insulina. A cultura por período de tempo prolongado torna as células B mais sensíveis à estimulação por Leu ou Arg. Finalmente, a comparação dos dados obtidos após cultura durante 7 ou 19 dias, indica que o tratamento prolongado com PRL atua em etapas importantes do mecanismo de secreção de insulina, favorecendo o acoplamento entre o metabolismo do nutriente, a despolarização da membrana da célula B, a elevação na concentração citosólica de Ca²+ e a resposta secretória. Portanto, ilhotas neonatais cultivadas em presença de PRL durante 19 dias, adquirem uma resposta secretória de insulina mais próxima ao padrão do adulto. Estes dados reforçam a importância da PRL no processo de maturação da resposta secretória de insulina, das células B-pancreáticas, na fase perinatal e sugerem um efeito tempo-dependente na ação do hormônio / Abstract: Maturation of the glucose sensing mechanism in mammals occurs during the perinatal life period. In rats, the poor secretory response to glucose obselVed during fetal period is rapidly converted to an adult response in few days after birth. This poor secretory response is ascribed to an uncoupling between glucose stimulation and membrane depolarization resulting in the opening of an insufficient number of voltage-sensitive Ca2+ -channels, and an impaired increase in cytosolic Ca²+ concentration. The obselVed uncoupling in fetal and neonatal islets seems to be also consequence of a reduced A TP generation by B cells. Growth and differentiation of the endocrine pancreas are controlled by many factors including the somatolactogenic hormones, especially prolactin (pRL). The present work aimed at investigating the cellular mechanisms envolved in the maturation of stimulus-response coupling of insulin secretion in the perinatal life phase and the functions of PRL in this processo For this purpose, islets trom neonatal rats were kept in culture during differents periods of time receiving or not daily hormonal treatment. Glucose transporter expression (GLUTI and GLUT2), Ca²+ membrane permeability and insulin secretion were analysed in these cultured neonatal islets. The PRL treatment and the glucose concentration in the culture medium affect GLUT2 expression. GLUTI expression is not modified by PRL or glucose. After prolonged PRL treatment 45Ca permeability in the neonatal islets are cio ser to that obselVed in adult islets. PRL induces increase in the insulin total content and accelerates the maturation of secretory response stimulated by glucose and aminoacids in a time-dependent fashion. The maturation of secretory response stimulated by glucose is accelerated by time of PRL treatment. The PRL treatment does not affect mechanisms controled by muscarinic receptors in B-cells. The PRL treatment induces maturation in the PKC system. The culture time "per se" induces partial maturation of insulin secretion response. B cells submited to prolonged period of culture become more sensitive to Leu or Arg stimulation. Finally, data obtained after culture during 7 or 19 days, show that a prolonged PRL treatment influence important steps of the insulin secretion mechanisms, favouring the coupling among nutrient metabolism, membrane B cell despolarization, increase in the [Ca²+]i and increase secretory response. Therefore, neonatal islets cultured in the presence of PRL during 19 days acquire an insulin response to the nutrients elo ser to the adult pattem. These data reinforce the importance of PRL in the maturation process of insulin secretion response by pancreatic B cells during the perinatal life period and suggest an effect time-dependent in the hormonal action / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas