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Exchange Bias em filmes de IrMn/Cu/CoNicolodi, Sabrina January 2007 (has links)
Medidas de magnetização (MAG) e de ressonância ferromagnética (FMR) foram usadas para estudar a interação de troca entre a camada antiferromagnética (AFM) de IrMn e a ferromagnética (FM) de Co no sistema IrMn/Cu/Co em função da espessura do Cu. Parâmetros importantes extraídos destas medidas foram comparados com os respectivos valores obtidos dos ajustes dos dados experimentais através de um modelo fenomenológico. Foi observada uma concordância muito boa entre os dados experimentais e os simulados numericamente. Os valores dos campos de anisotropia e de interação, obtidos pelas duas técnicas, MAG e FMR, foram comparados. Observou-se que, apesar das variações angulares experimentais dos campos de Exchange Bias coincidirem para todas as amostras, a intensidade de acoplamento J e os campos de anisotropia das camadas de Co (obtidos via simulação numérica) HU , são diferentes. Para todas as espessuras de Cu, vimos que J FMR > J MAG e FMR U H < MAG U H . Outro resultado importante é que J diminui exponencialmente com o aumento da espessura do espaçador, resultado de uma interação de curto alcance mediada por pinholes. Todas estas características foram explicadas através de um modelo que considera camadas magnéticas policristalinas com distribuições de eixos fáceis independentes, tomando em conta a anisotropia rodável. Conhecer o papel dos grãos AFM com diferentes tamanhos e diferentes estabilidades magnéticas também é essencial para entender as propriedades deste sistema. Os fatos dos HEB observados serem iguais (diferentemente dos resultados até agora conhecidos) e as interações assim como as anisotropias uniaxiais serem diferentes foram atribuídos ao fato de que as duas técnicas detectam processos diferentes. A medição estática, MAG, prioriza a amostra como um todo, enquanto a FMR (a qual depende da freqüência de oscilação da magnetização) detecta somente os momentos magnéticos cujos tempos de relaxação são menores do que o tempo de excitação da microonda. Quando não existe mais contato entre as camadas de IrMn e Co (e consequentemente, a interação), as diferenças entre as medidas não são mais observadas. / Magnetization (MAG) and ferromagnetic resonance (FMR) measurements were used to study the exchange interaction between the IrMn (antiferromagnetic, AFM) and Co (ferromagnetic, FM) layers in an IrMn/Cu/Co system as a function of the Cu spacer thickness. Important parameters, extracted from these measurements, were compared with the respective values obtained from the experimental data fittings through a phenomenological model, and a very good agreement between experiment and model was observed. The comparison between the anisotropy and interaction fields obtained from both techniques, MAG and FMR, showed that although the experimental angular variations of the exchange-bias fields, FMR eb H and MAG eb H coincide, the coupling strengths, J and the Co layers' anisotropy fields, U H , obtained via numerical simulations, are different. For all Cu thicknesses, it was estimated that J FMR > J MAG e FMR U H < MAG . U H Another important result is that J decreases exponentially with the spacer thickness and is a short-range interaction mediated by pinholes. All these characteristics were explained in the framework of a model considering polycrystalline magnetic layers with independent easy axis distributions and taking into account the rotatable anisotropy. The role of antiferromagnetic grains at the interface with different sizes and different magnetic stability is essential for understanding the behavior of this exchange-biased system. The facts that the observed FMR eb H and MAG eb H are equal (differently from all results known till now) and that the interactions as well as the uniaxial anisotropies are different were attributed to the different processes detected by the techniques. While the static MAG measurement ‘senses’ the sample as a whole, the FMR (which depends on the frequency of the oscillation of the magnetization) detects only the magnetic moments with relaxation times less than the period of the microwave excitation. There are no differences observed between the measurements when there is no contact (and consequently, the interaction) between the IrMn and Co layers.
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Interações sociais envolvendo crianças com transtorno do espectro do autismo em classes comuns: o olhar de seus professoresGuimarães, Arlete de Brito 30 March 2017 (has links)
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Saudações,
Auxiliadora
Biblioteca Anísio Teixeira on 2017-04-25T15:06:50Z (GMT) / Submitted by Arlete de Brito Guimarães (arlete.guimaraes@ufba.br) on 2017-04-26T01:25:47Z
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Dissertação Arlete_para edição abril_2017 (1).pdf: 1425417 bytes, checksum: 92364494443453926e6217d21c526e8f (MD5) / Esta pesquisa objetiva analisar o sentido dado pelos professores acerca das interações sociais de alunos com TEA e seus pares em sala comum. Nessa perspectiva, a questão norteadora desta investigação foi: Qual a percepção dos professores acerca das interações sociais entre alunos com TEA e seus pares em sala regular? Dessa questão derivam outras questões secundárias: Que recursos facilitam as interações dos estudantes com TEA? Como os professores percebem e promovem as interações sociais de alunos com TEA e seus pares em sala de aula regular? Temos por pressuposto que a inclusão das crianças com TEA é construída também a partir das interação sociais estabelecidas em sala de aula, o que reflete no desenvolvimento escolar desses alunos. A metodologia utilizada nesta pesquisa pautou-se numa abordagem qualitativa, com um enfoque fenomenológico, buscando estudar o fenômeno através da realidade percebida pelos professores que possuem estudantes com TEA em classe comum. Os dados para análise e discussão foram levantados em campo via a realização de entrevistas semiestruturadas com os professores do município baiano de Amargosa, cidade onde a pesquisadora viveu e onde existe um campus da Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, Centro de Formação de Professores, que destaca a cidade como local de formação inicial e continuada de professores. Os dados levantados foram discutidos a partir da análise de conteúdo e os resultados da pesquisa apontam que os professores consideram relevantes as interações sociais entre os alunos com TEA e seus pares em sala comum, pois percebem reciprocidade por parte dos alunos com TEA, embora essa se dê de modo mais efetivo quando a comunicação verbal está assegurada. Nesses casos, os professores afirmam haver resultados positivo das interações sociais na vida escolar dos alunos com TEA. Dentre as maiores dificuldades para o estabelecimento das interações sociais foram citadas: o comprometimento na linguagem verbal e a ausência do acompanhante especializado. Por fim, os professores descreveram algumas estratégias utilizadas para promoção das interações sociais dos alunos com TEA que vão desde a estimulação para comunicação, através do uso de imagens e quadros de rotina, até o uso de jogos, desenhos e outros recursos que favorecem essa interação. Desse modo, os professores se mostraram reflexivos e atentos às possibilidades de potencializar a inclusão de alunos com TEA na escola comum. / ABSTRACT
This research aims to analyze the sense given by teachers about the social interactions
of students with TEA and their peers in common room. Thus, the guiding question of
this research was: What is the teachers' perception about the social interactions
between students with ASD and their peers in the regular classroom? From this
question arise other secondary issues: What resources facilitate students' interactions
with ASD? How do teachers perceive and promote the social interactions of students
with ASD and their peers in the regular classroom? We assume that the inclusion of
children with ASD is also built from the social interactions established in the classroom,
which reflects in the school development of these students. The methodology used in
this research was based on a qualitative approach, with a phenomenological approach,
seeking to study the phenomenon through the reality perceived by the teachers who
have students with ASD in common class. The data for analysis and discussion were
collected in the field via semi-structured interviews with the teachers of the Bahia
municipality of Amargosa, city where the researcher lived and where there is a campus
of the Federal University of Recôncavo da Bahia, Teacher Training Center, which
highlights the city as a place for initial and continuing teacher training. The data
collected were discussed based on the content analysis and the results of the research
point out that the teachers consider relevant the social interactions between students
with ASD and their peers in common classroom because they perceive reciprocity by
students with ASD, although this be given in more effective way when verbal
communication is assured. In these cases, teachers affirm that there are positive
results of social interactions in the school life of students with ASD. Among the greatest
difficulties for establishing social interactions were cited: the impairment of verbal
language and an absence of specialized escort. Finally, the teachers described some
of the strategies used to promote the social interactions of students with ASD, ranging
from stimulation for communication, through the use of images and routine frames, up
to the use of games, drawings and other resources that favor this interaction. In this
way, the teachers showed up reflexive and attentive to the possibilities of potentiate
the inclusion of students with ASD in the common school.
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"Mostra a nossa voz"!Aires, João Paulo Gill de Barros de Machado 16 December 2011 (has links)
Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2013-04-08T19:07:08Z
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Previous issue date: 2011-12-16 / Esta dissertação é uma reflexão sobre a história de vida dos indivíduos que aproveitam o lixo como forma de subsistência: os catadores de materiais recicláveis. Foca em particular os catadores de lixo do município do Salvador, Bahia. Aborda a sociabilidade do trabalho e a prática da economia solidária. Discuti o problema da sustentabilidade na atividade econômica, a fragilidade das experiências empreendedoras bem como a observação da produção dos resíduos. Aborda conceitos da sociologia da arte e arte e sociedade no contexto contemporâneo, na dimensão crítica e reflexiva de Joseph Beuys. Cria poéticas visuais que causam impactos e suscitam o diálogo entre dois mundos: o mundo do consumo e o mundo do desperdício. A observação participativa é neste trabalho a base que dá origem a essa pesquisa. Com esta vivência tive a intenção de criar, através da arte, esse questionamento que da origem à reflexão sobre a temática, e, a partir da cooperação com os catadores, “Mostra a Nossa Voz” sobre um problema social. Compreende a importância do artista visual no mundo como agente social que desperte no público o interesse, a reflexão critica sobre os problemas sociais de ordem humanista. / Salvador
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Organização das comunidades locais de Apoidea em uma área de caatinga, Canudos-Ba.Pigozzo, Camila Magalhães January 2004 (has links)
p. 1-42 / Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-04-10T19:54:51Z
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Previous issue date: 2004 / Estudos têm evidenciado que fatores locais afetam o número e a abundância de espécies coexistentes. Em uma área restrita de caatinga, na Reserva Biológica de Canudos (9o56?34?S e 38o59?17?W), estimaram-se as variáveis de estrutura do hábitat: densidade de arbustos e herbáceas, altura média de arbustos e herbáceas; e as relacionadas aos recursos: riqueza de espécies vegetais floridas, número de indivíduos floridos e abundância de flores disponíveis. Utilizou-se a correlação múltipla (índice de correlação de Pearson (r) e significância de 0,05 para testar a relação entre as citadas variáveis ambientais e a riqueza e abundância de espécies de abelhas. As variáveis faunísticas não demonstraram associação com as variáveis de estrutura do hábitat. No entanto, a riqueza de abelhas mostrou-se associada à riqueza de plantas floridas (r=0,537; p=0,039), à abundância de indivíduos floridos (r=0,580; p=0,023) e à abundância de flores (r=0,538;p=0,039); enquanto a abundância de abelhas apresentou correlação negativa e significativa com as três variáveis (r=-0,559, p=0,03; r=-0,573, p=0,026; r=-0,611, p=0,015, respectivamente). Segundo o paradigma da heterogeneidade dos recursos, o número de espécies em uma comunidade é positivamente relacionado ao de recursos disponíveis, e a abundância relativa das espécies é ditada pela dos recursos necessários. Os resultados corroboraram a primeira previsão, mas revelou um comportamento oposto ao esperado para a abundância dos recursos. A correlação negativa encontrada parece ser fruto da presença massiva das populações de Apis mellifera, espécie altamente generalista que monopoliza as fontes mais produtivas de recursos, podendo causar a diminuição das populações de abelhas nativas. / Salvador
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Efeito da temperatura na infecção de Rhodnius prolixus por Trypanosoma cruzi e Trypanosoma rangeliRodrigues, Juliana de Oliveira January 2013 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-12-12T12:53:00Z
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Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou / A temperatura ambiental afeta diversos processos bioquímicos, fisiológicos e comportamentais, especialmente em animais ectotérmicos. Mudanças nesse parâmetro podem alterar o fitness de insetos vetores e sua distribuição no ambiente, modificando consequentemente, a dinâmica de transmissão de doenças. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da temperatura no desenvolvimento da infecção de Trypanosoma cruzi e Trypanosoma rangeli em Rhodnius prolixus. Os ensaios com T. rangeli foram desenvolvidos com parasitos submetidos a dois tratamentos.
T. rangeli T1 foram obtidos através de passagens em LIT por três meses. T. rangeli T2 foram mantidos em LIT por um mês após uma passagem triatomíneo-camundongo.
Inicialmente, o crescimento dos parasitos em meio de cultura submetidos a diferentes temperarturas (21, 24, 27 e 30°C) foi avaliado. O crescimento do T. cruzi foi termodependente, com um aumento de 28 vezes da população mantida em 30°C ao final de sete dias. A mortali dade ficou abaixo dos 10%, exceto para os parasitos mantidos a 21°C, onde esse valor ficou próximo aos 20%. Para os dois tratamentos de T. rangeli , o crescimento máximo foi observado a 27°C. Entretanto, as populações de T. rangeli T2 cresceram mais do que as de T. rangeli T1 e apresentaram taxas de mortalidade mais baixas, em torno de 5%. O próximo objetivo foi avaliar diferentes parâmetros fisiológicos de R. prolixus infectados pelos parasitos e submetidos às mesmas condições de temperaturas. A infecção por T. cruzi prolongou o período intermudas em todas as temperaturas e reduziu o número de insetos aparentemente saudáveis em 20%. A virulência do parasito foi dependente da temperatura e do estado nutricional dos insetos.
T. rangeli T1 foi mais virulento do que T. rangeli T2, particularmente nas temperaturas mais baixas.
Finalmente, o crescimento do T. cruzi no inseto foi quantificado por qPCR e câmara de Neubauer. Os resultados, ainda preliminares, corroboraram com os dados do crescimento do parasito em LI T. De maneira geral, os resultados sugerem que os dois parasitos podem ser patogênicos ao vetor na natureza dependo das condições a que são submetidos.
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GeDaNIC: um framework para gerenciamento de banco de dados em nuvem baseado nas interações entre consultas / GeDaNIC: a framework for database management cloud data based on interactions between queriesSiqueira Junior, Manoel Mariano January 2012 (has links)
SIQUEIRA JUNIOR, Manoel Mariano. GeDaNIC: um framework para gerenciamento de banco de dados em nuvem baseado nas interações entre consultas. 2012. 95 f. Dissertação (Mestrado em ciência da computação)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-11T18:53:56Z
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Previous issue date: 2012 / Cloud computing is a recent trend of technology aimed at providing services for Information Technology (IT) and demand-based payment in use. One of the main services provided by a computing platform cloud is the service data management, or simply data service. This service accepts responsibility for the installation, configuration and maintenance of database systems, as well as for efficient access to stored data. This work presents a framework, called GeDaNIC, for managing database systems cloud data. The proposed framework aims to provide software infrastructure required for the provision of data services in computing environments cloud. Accordingly, the search system designed to solve some problems still in the context of open systems database in the cloud, such as dispatch, scheduling appointments and resource provisioning. The approach extends the designed Previous work by adding important features such as: support to unforeseen workloads and use of information about the interactions between queries. The supporting seasonal workloads is related to one of the main properties of computing Cloud: rapid elasticity. Already interactions between queries can provide impacts significant performance of database systems. For this reason, the GeDaNIC uses information about these interactions in order to reduce the execution time of workloads submitted to the data service and thereby increase the profit of provider of this service. For this, three new approaches to model and measure the interactions between instances and types of queries are proposed. In order to demonstrate the efficiency of the proposed framework for experimental evaluation using the TPC-H on PostgreSQL was performed. The results show that the designed solution has the potential to increase the profit of the service provider cloud data. / Computação em nuvem é uma tendência recente de tecnologia cujo objetivo é proporcionar serviços de Tecnologia da Informação (TI) sob demanda e com pagamento baseado no uso. Um dos principais serviços disponibilizados por uma plataforma de computação em nuvem consiste no serviço de gerenciamento de dados, ou simplesmente, serviço de dados. Este serviço assume a responsabilidade pela instalação, configuração e manutenção dos sistemas de banco de dados, bem como pelo acesso eficiente aos dados armazenados. Este trabalho apresenta um framework, denominado GeDaNIC, para o gerenciamento de sistemas de banco de dados em nuvem. O framework proposto tem por objetivo fornecer a infraestrutura de software necessária para a disponibilização de serviços de dados em ambientes de computação em nuvem. Neste sentido, o mecanismo concebido busca solucionar alguns problemas ainda em aberto no contexto de sistemas de banco de dados em nuvem, tais como: despacho, escalonamento de consultas e provisionamento de recursos. A abordagem concebida estende os trabalhos anteriores adicionando importantes características, como: o suporte às cargas de trabalho imprevistas e a utilização de informações sobre as interações entre consultas. O suporte às cargas de trabalhos sazonais está relacionado a uma das principais propriedades da computação em nuvem: a elasticidade rápida. Já as interações entre consultas podem proporcionar impactos significativos no desempenho dos sistemas de banco de dados. Por este motivo, o GeDaNIC utiliza informações sobre essas interações com a finalidade de reduzir o tempo de execução das cargas de trabalho submetidas ao serviço de dados e, consequentemente, aumentar o lucro do provedor deste serviço. Para isso, três novas abordagens para modelar e mensurar as interações entre instâncias e tipos de consultas são propostas. Com o objetivo de demonstrar a eficiência do framework proposto uma avaliação experimental usando o benchmark TPC-H sobre o PostgreSQL foi realizada. Os resultados apontam que a solução concebida tem potencial para aumentar o lucro do provedor do serviço de dados em nuvem.
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Um modelo de interacão entre bacterias alelopaticas / A model of interaction between allelopathic bacteriaCarvalho, Sylvestre Aureliano 06 July 2015 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-05-25T14:27:55Z
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Previous issue date: 2015-07-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho propusemos e estudamos através de métodos analíticos e análise numérica, um modelo que descreve a interação entre duas cepas de bactérias considerando competicção por recursos e supressão alelopática. O fenômeno de interação alelopática pode ser encontrado em populaçõs de bactérias, algas, plantas e fungos e é caracterizado pela liberação de uma substância tóxica no meio que pode inibir ou matar a outra espécie. Especificamente no caso de bactérias como a Escherichilia coli, o processo de liberação e absorção de toxina envolve especialmente canais e receptores presentes na membrana celular. Essas toxinas ou alelequímicos são sintetizados e liberados sob estresse celular, difundem no ambiente extracelular se ligam a receptores celulares que direcionam a toxina até o DNA celular. Matematicamente, o modelo contém quatro equações diferenciais parciais do tipo reação-difusão e os resultados podem ser analisados considerando quatro cenários diferentes em relação à concentracão de toxina emitida por cada espécie. Se as duas cepas emitem microcina em regime de baixa concentração, a dinâmica espacialmente homogênea do sistema estacionário exibe biestabilidade entre dois pontos fixos distintos se existir alta competição interespecífica entre as duas cepas. A condição de coexistência das espécies é a baixa pressão competitiva e a vantagem de uma espécie sobre a outra é obtida quando uma espécie apresenta forte pressão competitiva e a outra fraca. Quando as duas espécies emitem toxina em regime de alta concentração ou apenas uma delas, as regiões de coexistência, biestabilidade e vantagem de uma espécie sobre a outra são alteradas, mas a biodiversidade é sustentada. Nestes casos, os parâmetros que descrevem a sensibilidade e a mortalidade pela toxina e são os responsáveis pelas alterações. O efeito da estrutura espacial foi estudado a partir das soluções do tipo ondas viajantes, bem como foram calculadas as velocidades de propagacão das frentes de ondas em função de alguns parâmetros relevantes da dinâmica. Por fim, foi investigado o efeito de diferentes focos inicialmente localizados, bem como os padrões de espalhamento alcançados descrevendo as configurações de coexistência e dominância de uma das espécies. / In this work we propose and study through analytical and numerical analysis a model that des- cribes the interaction between two bacterial strains considering competition for resources and allelopathic suppression. The allelopathic phenomenon can be found in populations of bacteria, algae, plants, fungi and is characterized by the release of toxic substances in the environment which may inhibit or kill other species. Specifically, in the case of bacteria, such as Escherichi- lia coli, the toxin release and absorption processes involve specialized channels and receptors present in the cell membrane. These toxins or allelochemicals are synthesized and released under cellular stress, diffuse into the extracellular medium and bind to the membrane recep- tors in other cells that direct the toxin to the cellular DNA. Mathematically, the model contains four partial differential equations of the reaction-diffusion type and the results can be analyzed considering four different scenarios associated to the toxin concentration released by each species. If the two strains release microcins in low concentration and there is a high interspeci- fic competition between the two strains, the spatially homogeneous dynamics of the stationary state exhibits bistability between two distinct fixed points. In turn, species coexistence occurs at low competitive pressure and the extinction of one species by the other is observed when one species is a strong and the other is a weak competitor. When the two species, or even just one of them, release toxins at high concentrations, the regions of coexistence, bistability and extinction of one species change, but species diversity can be sustained. In these cases, the parameters describing the sensitivity and mortality by the toxin are responsible for the changes. The effect of spatial structure was obtained by investigating the invasion of are species over the other which depends on several direct pressures. In this investigation we look for traveler type wave solutions. We determine the velocities of the invasion wavefronts as a function of some relevant dynamic parameters and study the diffusion from focus initially located.
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Correções relativísticas ao modelo de quarks no espalhamento J/ψ-nucleonFolador, Bruna Cesira January 2015 (has links)
O Método do Grupo Ressonante (RGM) é um método utilizado no estudo da interação hádron-hádron, na qual não são desprezados os graus de liberdade internos destas partículas. Nesta dissertação estudaremos os efeitos associados `a interação entre um quark pesado Q com outro leve q no potencial de troca de um gluón chamado de One Gluon Exchange Potencial (OGEP), tradicionalmente obtido a partir de um potencial relativístico de interação do modelos de quarks, fazendo uma expansão em potências de momentos nos espinores constituintes (potencial de Fermi-Breit). Faremos uma aproximação semi-relativística para o quark leve q, enquanto que o quark pesado Q será considerado não-relativístico. Este potencial semi-relativístico será usado no RGM para estudar a interação entre charmônios e nucleons como no caso da interação J/ψ-nucleon. / The Resonating Group Method (RGM) is used in hadron-hadron interactions, when internal degrees of freedom of composite particles can’t be neglected. In this dissertation we shall study the effects associated with the interaction between a heavy quark Q with a light quark q, using the the One Gluon Exchange Potential (OGEP) traditionally obtained from a relativistic interaction potential in the quark model, by an expansion in powers of momentum of the constituent spinors (potential Fermi-Breit). We will make a semi-relativistic approach for light quark q, while the heavy quark Q will be considered non-relativistic. This semi-relativistic potential will be used in the RGM to study the interaction between charmonia and nucleons as the case J/ψ-nucleon interaction.
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Composição de Microdomínios de Membrana de Paracoccidioides brasiliensis e Histoplasma capsulatum: Importância na infectividade de macrófagos alveolares / Membrane Microdomains composition of Paracoccidioides brasiliensis and Histoplasma capsulatum: Importance on alveolar macrophage infectivityTagliari, Loriane [UNIFESP] 25 March 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2009-03-25 / As membranas biológicas são formadas por uma mistura de várias classes de lipídeos, cujo empacotamento preferencial entre esfingolipídeos e esteróis formam junto com proteínas específicas, esta complexa organização conhecida como microdomínios de membrana. Com o intuito de verificar a presença de microdomínios de membrana em leveduras de fungos patogênicos como Paracoccidioides brasiliensis e Histoplasma capsulatum, as leveduras desses dois fungos foram lisadas com pérolas de vidro e incubadas com Brij 98 a 4°C. As frações de microdomínios de membrana foram separadas por ultracentrifugação em gradiente de sacarose e, seus componentes analisados por HPTLC, SDS-PAGE e “Western blotting”. As análises dos lipídeos de membrana mostram que aproximadamente 40% do ergosterol das duas espécies de leveduras analisadas estão presentes nos microdomínios de membrana. Enquanto as porcentagens de glicoesfingolipídeos presentes nessas frações correspondem a 42% e 25%, em leveduras de P. brasiliensis e H. capsulatum, respectivamente. Em conjunto com as análises lipídicas, verificou-se nas duas espécies, um enriquecimento protéico nas frações de microdomínios de membrana, entre estas proteínas podemos citar a Pma1p, uma proteína marcadora de microdomínios de fungos, e uma proteína de 30 kDa, capaz de se ligar a laminina. Para determinar a importância do ergosterol na manutenção da integridade dos microdomínios de membrana utilizou-se metil-beta-ciclodextrina (mβCD), que é capaz de complexar e retirar o ergosterol. Após o tratamento das leveduras com mβCD verificou-se a extração dos esteróis numa proporção de 80% e 70% para P. brasiliensis e H. capsulatum, respectivamente. No entanto, o perfil de distribuição dos glicoesfingolipídeos e fosfolipídeos, analisados por HPTLC, não apresentou mudanças significativas após o tratamento com a mβCD. As análises protéicas demonstraram o deslocamento de algumas proteínas para frações solúveis do gradiente de sacarose como Pma1p e uma proteína de 30 kDa. Por outro lado, a marcação com o anticorpo anti-α5-integrina mostra a presença de uma proteína de 50 kDa nos microdomínios de membrana, mesmo após o tratamento com a mβCD, sugerindo a existência de uma população de microdomínios de membrana que não depende do ergosterol para manutenção de sua integridade. A importância desses microdomínios de membrana foi testada na infectividade de macrófagos alveolares, onde uma redução de 53% na infectividade de macrófagos foi verificada após o tratamento das leveduras de H. capsulatum com mβCD. Os resultados apresentados nessa tese demonstram a existência de microdomínios de membrana em leveduras de P. brasiliensis e H. capsulatum, bem como sua importância para a interação levedura-macrófago. / Biological membranes are constituted by a mixture of several classes of lipids. In this enviroment, sphingolipids and sterols pack tightly to form together with specific proteins a complex membrane organization known as membrane microdomains. In order to detect the presence of membrane microdomains in yeast forms of pathogenic fungi, such as Paracoccidioides brasiliensis and Histoplasma capsulatum, yeast forms of both fungi were lysed by vortexing with glass beads and then incubated with Brij 98 at 4ºC. Fractions containing membrane microdomains were isolated by ultracentrifugation on sucrose gradient, and their components were analyzed by HPTLC, SDSPAGE and Western blotting. Analysis of membrane lipids showed that about 40% of ergosterol from both P. brasiliensis and H. capsulatum was present in the membrane microdomains, whereas the percentage of glycosphingolipids present in P. brasiliensis and H. capsulatum was 42% and 25%, respectively. Analysis by SDS-PAGE and Western blotting clearly showed a protein enrichment in the membrane microdomains fraction of both fungi. It is noteworthy the presence of Pma1p, a fungal microdomain marker, and also the presence of a 30 kDa (glyco)protein which binds to laminin. To investigate the requirement of ergosterol to mantain the integrity of membrane microdomains, it was used methylbeta- cyclodextrin (mβCD) an agent able to efficiently extract membrane sterols. After treatment of yeasts using mβCD, it was observed the removal of 80% and 70% of ergosterol in P. brasiliensis and H. capsulatum, respectively. After treatment with mβCD it was observed a shift of 25% of the glycosphingolipids from the insoluble to the soluble fraction, conversely the distribution profile of phospholipids remained unmodified after treatment with mβCD. The protein analysis showed the displacement of a few proteins to soluble fractions of the sucrose gradient, such as Pma1p and the (glyco)protein of 30 kDa. On the other hand, using an anti-α5-integrin antibody it was detected, even after the mβCD treatment, the presence of a 50 kDa protein in membrane microdomains, suggesting the existence of microdomains that do not depend on ergosterol for their integrity. These data strongly suggest the existence of two population of microdomains: i) dependent of ergosterol for integrity maintenance of microdomains and ii) microdomains non-dependent of ergosterol for the maintenance of their functional role. Furthermore, the biological importance of membrane microdomains was clearly demonstrated by a 53% reduction of infectivity of alveolar macrophage infectivity when yeast forms of H. capsulatum were treated with mβCD. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Comparação dos transcritos gênicos sob tensão físico- química entre Trypanosoma cruzi CL-Brener e um tripanossomatídeo monoxênicoSouza, Nathalia Pinho de January 2011 (has links)
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nathalia_p_souza_ioc_bp_0044_2011.pdf: 3450828 bytes, checksum: 39e189593b548a342a469c1a2132d938 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-23T17:30:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Os membros da família Trypanosomatidae são parasitos flagelados que podem
infectar vertebrados e ou invertebrados, e de acordo com o tipo e número de
hospedeiros são classificados como parasitas monoxênicos ou heteroxênicos. Neste
trabalho realizamos a comparação da detecção de transcritos entre Trypanosoma
cruzi clone CL-Brener, espécie heteroxênica, e Blastocrithidia culicis, como
representante dos tripanossomatídeos monoxênicos, ambos submetidos a tensões
físicas, químicas e nutricionais.
A questão proposta é se duas espécies de
tripanossomatídeos com estilos de vida distintos respondem à mesma pressão
ambiental (tensão em meio de cultivo) com os mesmos genes. Para tanto foi
realizado o crescimento de ambas as espécies em diferentes condições de tensão,
como alterações de temperatura, variações de pH, redução de nutrientes do meio,
adição de agentes químicos ao meio, entre outros. O perfil dos transcritos, obtidos,
através de RT-PCR com iniciador arbitrário selecionado (RNA fingerprinting), foi
comparado entre a condição padrão de crescimento (controle) e as condições
alteradas entre as duas espécies. Com isso, foram observados comportamentos
distintos dos tripanossomatídeos nas condições físicas impostas, como os extremos
de temperaturas. Com esta abordagem metodológica que deve apontar os genes
que mais respondem as condições de estresse nas células, obtivemos uma
representação do momento transcricional dos protozoários. Foram gerados 722
ESTs após o sequenciamento de fragmentos transcritos de T. cruzi e B. culicis sob
tensão, além de ESTs da condição padrão (controle) de B. culicis. Foi observada
alta transcrição de genes de proteínas de superfície (mucinas, trans-sialidades,
gp63, etc) sob tensão tanto em T. cruzi como B. culicis, além de proteínas
regulatórias da expressão gênica em menor quantidade. Ambas as espécies
apresentaram trans splicing de duas formas diferentes, através da utilização de
sítios adicionais (AG), antes da ORF, ou splicing alternativo ao gerar transcritos
internos às ORFs. Concluímos com isso que tripanossomatídeos de espécies e
estilos de vida distintos compartilham apenas poucos genes quando em condições
de estresse. Grande parte dos transcritos mostraram-se específicos para cada
espécie. / Os membros da família Trypanosomatidae são parasitos flagelados que podem
infectar vertebrados e ou invertebrados, e de acordo com o tipo e número de
hospedeiros são classificados como parasitas monoxênicos ou heteroxênicos. Neste
trabalho realizamos a comparação da detecção de transcritos entre Trypanosoma
cruzi clone CL-Brener, espécie heteroxênica, e Blastocrithidia culicis, como
representante dos tripanossomatídeos monoxênicos, ambos submetidos a tensões
físicas, químicas e nutricionais.
A questão proposta é se duas espécies de
tripanossomatídeos com estilos de vida distintos respondem à mesma pressão
ambiental (tensão em meio de cultivo) com os mesmos genes. Para tanto foi
realizado o crescimento de ambas as espécies em diferentes condições de tensão,
como alterações de temperatura, variações de pH, redução de nutrientes do meio,
adição de agentes químicos ao meio, entre outros. O perfil dos transcritos, obtidos,
através de RT-PCR com iniciador arbitrário selecionado (RNA fingerprinting), foi
comparado entre a condição padrão de crescimento (controle) e as condições
alteradas entre as duas espécies. Com isso, foram observados comportamentos
distintos dos tripanossomatídeos nas condições físicas impostas, como os extremos
de temperaturas. Com esta abordagem metodológica que deve apontar os genes
que mais respondem as condições de estresse nas células, obtivemos uma
representação do momento transcricional dos protozoários. Foram gerados 722
ESTs após o sequenciamento de fragmentos transcritos de T. cruzi e B. culicis sob
tensão, além de ESTs da condição padrão (controle) de B. culicis. Foi observada
alta transcrição de genes de proteínas de superfície (mucinas, trans-sialidades,
gp63, etc) sob tensão tanto em T. cruzi como B. culicis, além de proteínas
regulatórias da expressão gênica em menor quantidade. Ambas as espécies
apresentaram trans splicing de duas formas diferentes, através da utilização de
sítios adicionais (AG), antes da ORF, ou splicing alternativo ao gerar transcritos
internos às ORFs. Concluímos com isso que tripanossomatídeos de espécies e
estilos de vida distintos compartilham apenas poucos genes quando em condições
de estresse. Grande parte dos transcritos mostraram-se específicos para cada
espécie.
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