Orientador: Isabel Cristina Boleli / Banca: Alex Maiorka / Banca: Ana Vitória Fischer da Silva / Banca: Renato Luis Furlan / Banca: Vera Maria Barbosa de Moraes / Resumo: Foram avaliados parâmetros hematológicos e intestinais de pintos machos e fêmeas submetidos ao jejum de 24 e 48 horas pós-eclosão, seguido de alimentação até o 5º dia de idade. No Capítulo 2, foram avaliados a contagem global de hemácias, concentração de hemoglobina, taxa de hematócrito, volume corpuscular médio e contagem relativa de linfócitos e heterófilos para determinação da relação heterófilo/linfócito, concentração de glicose plasmática, concentração de proteína plasmática. No Capítulo 3, foram avaliados o peso corporal, comprimento do intestino delgado, área e altura de vilo, perímetro do vilo em corte transversal, densidade de vilo e profundidade de cripta, para duodeno, jejuno e íleo. No Capítulo 4, foi estudada a distribuição quantitativa de células caliciformes produtoras de mucinas neutras e ácidas, presentes nos vilos do intestino delgado. No Capítulo 5, foi avaliado se jejum póseclosão seguido de alimentação influencia a freqüência de vilos com apoptose nos diferentes segmentos do intestino delgado. Jejum pós-eclosão e posterior alimentação não permitiu a recuperação até o 5º dia de idade, da maioria dos parâmetros sangüíneos e intestinais, o que resultou em perda de peso corporal dos pintos. Os dados mostram que jejum de água e ração pós-eclosão deve ser evitado, pois afeta os parâmetros sangüíneos e intestinais, podendo comprometer o desempenho do frango e deixá-lo susceptível à ação de agentes patogênicos e doenças. / Abstract: The purpose of this present study was to evaluate physiological responses of male and female chicks submitted to fasting during 24 and 48 h posthatching, followed by feeding until 5 day of age on hemathological and intestinal parameters. In Chapter 2 were carried out the total red blood cell count, haemoglobin concentration, haematocrit volume, mean corpuscular volume, and specific lymphocytes count and heterophil to determine the heterophil/lymphocytes ratio, plasma glucose concentration and plasma protein concentration. In Chapter 3 were evaluated body weight, small intestine length, height and area villus, villus perimeter in transversal slice, villus density and crypt depth, to duodenum, jejunum and ileum. In Chapter 4 was studied quantitative distribution of goblet cells responsible for production and secretion of neutral and acid mucins of small intestinal. On the Chapter 5 was evaluated if fasting post-hatching followed by feeding has influence in frequency of apoptotic cells in villus located in different segments of small intestine. Fasting post-hatching of 24 and 48 h and subsequent feeding had not allowed the recovery until the 5 day of age, from the most of blood and intestinal parameters that resulted in chick’s reduced body weight. The results of this current experiment have show that delays in access to feed and water must be avoided because it affects blood and intestinal parameters having possibility to damage the subsequent performance and let them more susceptible to action of pathogenic agents and illness. / Doutor

Quarenta e duas vacas Holandesas, em gestação e multíparas, e os respectivos bezerros recém-nascidos foram utilizados para determinar se as concentrações de IGF-I no colostro e secreções lácteas podem ser alteradas em resposta à mudanças na concentração sérica de IGF-I pré-parto, avaliar comparativamente a flutuação sérica pré-parto de IGF-I em relação a IgG, bem como as flutuações séricas de IGF-I e IgG nos bezerros na primeira semana de vida e, adicionalmente, alterações na mucosa intestinal dos mesmos. As vacas foram distribuídas ao acaso em dois grupos de 21 animais, o grupo tratado recebeu 500 mg de somatotropina bovina recombinante (rbST) e o grupo controle recebeu injeções de vitamina E. Ambos tratamentos iniciaram 35 dias pré-parto e foram administrados em intervalos de 14 dias. Semanalmente, foi observado o escore corporal e foram coletadas amostras de sangue até a data de parição. Foram coletadas amostras do colostro e das secreções lácteas, diariamente, por sete dias pós-parto. Os bezerros recém-nascidos foram distribuídos ao acaso, em um arranjo fatorial 2X3, correspondendo ao tratamento das mães (controle ou rbST) e às datas de abate (ao nascimento, aos dois dias de idade e aos sete dias de idade). Diariamente, foram coletadas amostras de sangue até a data de abate. Para as análises estereológicas amostras foram coletadas de cinco regiões do intestino delgado. O escore corporal e a concentração sérica de ácidos graxos não-esterificados não diferiram entre os grupos durante todo o período experimental (P>0,05). Os grupos rbST e controle apresentaram diferenças significativas quanto às concentrações séricas de IGF-I na segunda e quarta semanas após o início do período experimental (P<0,05), em resposta às aplicações do rbST, no entanto não foram encontradas diferenças entre os tratamentos no parto (P>0,05). A concentração de IGF-I foi superior no colostro das vacas tratadas com rbST (P<0,05), não diferindo nas secreções subseqüentes. As concentrações séricas de IgG não diferiram entre os tratamentos durante todo o período experimental, bem como as concentrações de IgG do colostro e demais secreções lácteas (P>0,05). Não foram encontradas diferenças entre os tratamentos nas concentrações séricas de IGF-I dos bezerros até o sétimo dia de vida, como também não foram encontradas diferenças entre as concentrações séricas de IgG nos bezerros após 24 horas de vida (P>0,05). O peso dos órgãos e o volume parcial (Vv) da mucosa absortiva não diferiram entre os tratamentos nas três datas de abate, observando-se somente diferenças significativas entre as datas de abate. A porção do jejuno médio apresentou maior Vv em relação aos outros segmentos do intestino delgado ao nascimento e aos sete dias de vida. A aplicação de rbST no período seco influenciou somente a concentração de IGF-I no colostro, não alterando as concentrações séricas nos bezerros até o sétimo dia de vida, como também o Vv da mucosa absortiva do intestino delgado. / Forty-two Holstein cows, in gestation and multiparous, and their newborn calves were used to evaluate if insulin-like growth factor-I (IGF-I) in colostrum and subsequent mammary secretions could be influenced by changes in blood serum IGF-I and compare its temporal changes with the serum immunoglobulin G (IgG) in pre-partum period, as well as the temporal changes in serum IGF-I and IgG in newborn calves during the first week of life, and also, alterations in its intestinal mucosa. Cows were randomly assigned in two groups of twenty-one animals, treated group was injected 500 mg of recombinant bovine somatotropin (rbST), and the control group received vitamin E injection. Both treatments started 35 days pre-partum and were administered every 14 days until partum. Weekly body condition scores were measured and blood was collected until partum. Colostrum and mammary secretions were collected daily for seven days pos-partum. Newborn calves were randomly assigned to a 2X3 factorial arrangement, which the factors depended on mother’s treatment (control and rbST) and slaughter date (just after birth, two days of life and seven days of life). Blood was collected daily until slaughter. For stereological analysis samples were taken from five sites from small intestine. Body condition scores and nonesterified fatty acid concentration didn't differ between the groups during the experimental period (P>0,05). Groups differed about serum IGF-I during pre-partum (P<0,05), which showed differences on second and fourth weeks of experimental period in response to rbST administration. However, no treatment differences were found at partum (P>0,05). IGF-I concentration was higher in colostrum of cows treated with rbST (P<0,05), but it didn't differ in subsequent mammary secretions. IgG serum concentration didn't differ between treatments during the experimental period, neither IgG concentration in colostrum and subsequent mammary secretions (P>0,05). No differences were found either in calves’ IGF-I levels from birth to seven days old or in IgG serum concentration after 24 hours of life (P>0,05). Organ weight and mucosa partial volume (Vv) didn't differ between treatments in the three slaughter dates, only differences among the salughter dates were observed. Segment from the medium jejunum showed higher Vv in relation to others segments at birth and seven days old. The administration of rbST during the dry period influenced only IGF-I concentration in colostrum, however colostrum IGF-I didn’t affect calves’ serum concentration up to seven days old, neither the mucosa Vv of small intestine.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-07Bitstream added on 2014-06-13T20:37:05Z : No. of bitstreams: 1 000736245.pdf: 362401 bytes, checksum: db0d5c05d5ead7b8673fe2bf19b56ffd (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito das cascas do barbatimão verdadeiro (Stryphnodendron adstringens Mart.) Coville, sobre o desempenho de frangos de corte e a atividade terapêutica no controle da eimeriose aviária. Foi utilizado um total de 700 pintos Cobb, machos, de um dia que foram distribuídos aleatoriamente em cinco tratamentos com quatro repetições. Os tratamentos corresponderam ao controle negativo não infectado, um controle positivo infectado e não tratado, outro controle positivo infectado tratado com salinomicina e dois tratamentos infectados e tratados com 1,5 e 3,00 ppm de barbatimão. As aves foram desafiadas com cepas contendo a espécie de Eimeria maxima. Foram avaliados parâmetros clínicos através da contagem de oocistos nas fezes e mortalidade. Realizou-se a determinação do consumo de ração, conversão alimentar, ganho de peso, peso vivo e viabilidade criatória das aves. Nos índices zootécnicos avaliados houve diferença estatística no consumo de ração nas fases inicial e crescimento. Com 42 dias houve diferença na conversão alimentar, peso vivo e viabilidade criatória. Houve redução da contagem de oocistos nas fezes das aves tratadas com barbatimão 1,5 e 3,00 ppm. No escore de lesão os tratamentos controle positivo desafiado tratado com salinomicina e com barbatimão 3,00 ppm apresentaram as menores médias. Sendo assim, infere-se que o fitoterápico proveniente de cascas moídas de barbatimão nas doses testadas 1,5 e 3,00 ppm auxilia no controle da eimeriose aviária, de forma progressiva à dose utilizada, atuando na redução de oocistos eliminados e no escore de lesão / The objective of this study was to evaluate the effect of peels barbatimão true (Stryphnodendron adstringens Mart.) Coville on the performance of broilers and therapeutic activity in the control of avian eimeriosis. Was used a total of 700 Cobb chicks, males of a day that were randomly assigned to five treatments with four replications. The treatments corresponded to the uninfected negative control, a positive control infected and not treated, another positive control treated with salinomycin and infected two treatments infected and treated with 1.5 and 3, 00 ppm barbatimão. Birds were challenged with strains containing the species of Eimeria maxima. Clinical parameters were evaluated by counting oocysts in the feces and mortality. Was carried out to determine the feed intake, feed conversion, weight gain, weight alive and production viability of poultry. Indexes evaluated in statistical difference in feed intake in early and growth. With 42 days was no difference in feed conversion, live weight and production viability. Was reduction of oocyst count in feces of treated birds barbatimão with 1.5 and 3.00 ppm. Injury score in the positive control treatments challenged treated with salinomycin and barbatimão 3.00 ppm had the lowest averages. Accordingly, it is inferred that the herbal medicine from milled peels barbatimão the doses tested 1.5 and 3.00 ppm helps to control avian eimeriosis progressively the dose used, aimed at reducing oocysts eliminated and the lesion score

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5711.pdf: 887082 bytes, checksum: 2f6dabfb50d2965eaa1d19f975e6a2e7 (MD5) Previous issue date: 2012-11-21 / Financiadora de Estudos e Projetos / Sorghum is increasingly being used for animal feed replacing corn, due to their similar nutritional characteristics, but with a lower cost. However one factor that negatively influences the nutritional value of sorghum is the presence of tannin that is an anti-nutritional factor that affects the nutrients absorption by the animal. We evaluated the effect of the sorghum with high and low tannins concentrations and / or the addition of tannic acid in diets based on corn and soybean on the single jejunal (duodenum, jejunum and ileum) histomorphometric parameters in broilers. There were used 150 male chicks with 1 day old of Cobb lineage, they were created up to 42 days in cages, in a controlled environment and receiving isoproteic and isoenergetic diets. After the period, were collected fragments of the 3 single jejunal segments, where they were measured and analyzed through a microscope with a coupled camera, according with the established parameters (villus height, crypt depth, thickness of muscle layer and relationship between villus numbers and villus bifurcations numbers). The addition of tannin in diets caused histomorphometric modifications in all parameters, but they did not cause significant changes for affecting their productive performance, such as weight and carcass yield. / O sorgo vem sendo cada vez mais utilizado para alimentação animal em substituição ao milho, devido suas características nutricionais semelhantes, porém com um custo muito menor. No entanto um fator que influencia negativamente o valor nutricional do sorgo é a presença de tanino, um fator antinutricional que compromete a absorção de nutrientes pelo animal. Avaliou-se o efeito do sorgo com alto e baixo teor em taninos e/ou a adição do ácido tânico em dietas à base de milho e soja, sobre os parâmetros histomorfométricos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) em frangos de corte. Foram utilizados 150 pintos machos de 1 dia de idade da linhagem Cobb, criados até aos 42 dias de idade em gaiolas, em ambiente controlado e recebendo rações isoprotéicas e isoenergéticas. Após o período foram coletados fragmentos dos 3 segmentos do intestino delgado, onde foram analisados e mensurados através de um microscópio com câmera acoplada, de acordo com os parâmetros estabelecidos (altura de vilosidade, profundidade de cripta, espessura de camada muscular e relação entre números de vilosidades e números de bifurcações) . A adição de tanino nas dietas causou modificações histomorfométricas em todos os parâmetros avaliados, porém essas modificações não ocasionaram alterações significativas para que comprometessem o desempenho produtivo das aves, como peso e rendimento de carcaça.

Orientador: Antonio Carlos Alessi / Coorientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Francisco José Teixeira Neto / Banca: Renata Gebara Sampaio Dória / Banca: André Escobar / Banca: Guilherme de Camargo Ferraz / Resumo: O N-butilbrometo de hioscina é amplamente utilizado no tratamento das cólicas espasmódicas em equinos há mais de 20 anos (ROELVINK et. al., 1991; BERTONE et al., 2002). Este estudo teve por objetivo avaliar a eficácia analgésica e a segurança da infusão intravenosa contínua de hioscina em equinos. Sete equinos adultos foram submetidos à distensão de ceco por balão intraluminal e tratados com bolus de hioscina (0,3mg/kg, IV) associado a infusão intravenosa contínua do mesmo fármaco (0,3mg/kg/h, IV), HI, ou de cloreto de sódio 0,9% (0,015ml/kg/h, IV), HB, distribuídos ao acaso em um estudo cego, com intervalo de 7 dias entre os tratamentos. Os animais foram avaliados quanto ao controle da dor visceral, parâmetros cardiovasculares, respiratórios e hemagosométricos por 60 minutos após o início dos tratamentos. A motilidade intestinal foi avaliada por auscultação por até 360 minutos e a cinética de transito intestinal pelo marcador LIPE® de fase líquida de digesta por até 48h. A HI apresentou efeito analgésico prolongado em relação à HB. Houve aumento prolongado da frequência cardíaca da HI em relação à HB, 45 e 60 minutos após o início da infusão. Não houve alteração da pressão arterial média e parâmetros hemogasométricos entre os grupos e os momentos avaliados. Em relação à motilidade intestinal, houve diminuição apenas 5 minutos após o tratamento, no HB. Não houve diferença no tempo de retenção, taxa de passagem e tempo de trânsito da fase líquida da digesta dos HB e HI em relação ao grupo controle. Considerando os resultados encontrados podemos concluir que a infusão intravenosa contínua de hioscina foi capaz de prolongar o efeito analgésico e cronotrópico positivo da hioscina sem, no entanto, alterar a pressão arterial média, parâmetros hemogasométricos, motilidade e trânsito intestinal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hyoscine N-butylbromide is widely used in the treatment of spasmodic colic for over 20 years (ROELVINK et. al. 1991; BERTONE et al. 2002). This study aimed to evaluate the efficacy and safety of constant rate infusion of hyoscine in horses. Seven adult horses submitted to cecum distention with a intraluminal balloon were treated with hyoscine bolus (0.3 mg/kg, IV) associated with constant rate infusion of the same drug (0.3 mg/kg/h, IV), HB, or sodium chloride 0.9% (0.015 ml/kg/h, IV), HI. The horses were randomly distributed in a double-blinded study, and 7 day interval between treatments was allowed. Analgesic effects, cardiovascular parameters, respiratory and blood arterial gas analysis were evaluated for 60 minutes after treatment. The intestinal motility was assessed for up to 360 minutes by auscultation and intestinal kinetics was evaluated using LIPE®, a liquid phase maker, for up to 48h. The HI showed a longer analgesic effect than HB. The increase of heart rate was longer in HI than HB, after 45 and 60 minutes of infusion. There was no change in mean arterial pressure and blood gas analysis between groups at any time. Intestinal motility decrease only after 5 minutes of HB treatment. There was no difference between the total transit time of the liquid phase of the digesta in both comparing groups, and baseline. Considering these results, we can conclude that constant rate infusion was able to prolong the analgesic and chronotropic effect of hyoscine, however without changing mean arterial pressure and blood gas parameters, motility or intestinal transit. Thus, we can indicate that under experimental conditions, the constant... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-26Bitstream added on 2014-06-13T18:40:28Z : No. of bitstreams: 1 goncalvesjunior_i_dr_botfm.pdf: 14978707 bytes, checksum: bc384bf4e8557c0376c390efbcb98d16 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O uso de diferentes inibidores selectivos da COX-2 em vários estudos mostraram resultados conflitantes, relacionados principalmente a uma elevada taxa de deiscências nas suturas intestinal.Basedo na hipótese de que o uso de um antibiótico de largo espectro pode reduzir a carga bacteriana no sítio de lesão e, inversamente, reduzir a migração celular de PMNLs, o objetivo deste estudo foi determinar os efeitos do Paracoxibe, uma droga inibidora da COX- 2,disponível comercialmente, associada ou não ao Imipenem na cicatrização de anastomoses no ileo ecólon de ratos. Trezentos e sessenta e oito ratos brancos Wistar foram submetidos a laparotomia, a transecção do cólon esquerdo e do íleo terminalreanastomose randomizados para receber paracoxibe (0,66 mg / Kg), imipenem (30mg/Kg) ou solução salina (controles) por via intramuscular por 4 dias. Os ratos foram distribuídos em quatro grupos de 92 ratos: Grupo 1 (controle), grupo 2 (Paracoxib), grupo 3 (Imipenem) e grupo 4 (paracoxib / imipenem) Os animais em cada grupo foram sacrificados após 4,7,14 e 21 dias, sendo as anastomoses avaliadas por meio de medidas de força de ruptura e pelo exame histológico do processo de cicatrização. Doze animais do grupo paracoxibe (13%) e oito do grupo paracoxibe / Imipenem (8,7%) foram a óbito no 5° e 7° dia de pós operatóriopor deiscências da anastomose ileal. A força de ruptura nos ratos tratados com paracoxibe foi significativamente menor do que no grupo controle no 7°, 14° e 21° dias de pósoperatório das anastomoses do íleo (87,6 g, 184,3 g e 212,5 g<127,8 g, 243,6 g e 251G , P = 0,026) e no 4°,7°,14° e 21° dias de pós operatório as anastomoses de cólon (139,3 g, 170,4 g, 202,9 g e 299,9 g<203,3 g, 254,3 g, 364,2 g e 401g, p = 0,026). Não houve diferenças significativas entre os grupos paracoxibe, imipenem e paracoxib / imipenem. A tendência de aumento da força de... / The use of different selective COX-2 inhibitors in several studies showed conflicting results, related mostly from a high rate of dehiscence’s on intestinal sutures. Based on the hypothesis that the use of a broad spectrum antibiotic can decrease the bacterial load at the injured site and conversely reduce PMNLs cell migration, the aim of this study was to determine the effects of a new commercially available COX-2 inhibitor Paracoxib, associated or not to Imipenem on the healing of ileal and colonic anastomosis in rats. Three hundred and sixty eight white Wistar rats underwent laparotomy, ileal and left colon transection and reanastomosis and randomized to receive paracoxib (0,66 mg/Kg ), imipenem ( 30mg/Kg) or saline solution ( controls ) by intramuscular injections for 4 days. The rats were distributed in four groups of 92 rats: group1 (control); group 2 ( Paracoxib); group 3 ( Imipenem ) and group 4 (paracoxib/imipenem). Animals in each group were killed after 4,7,14 and 21 days, and the anastomosis evaluated by means of breaking strength measures and by histological examination of the healing process. Twelve animals in paracoxibe group (13% ) and eight on paracoxib/Imipenem group ( 8,7% ) died on on days 5 and 7 related to ileal anastomotic dehiscences. Breaking strength in rats treated with paracoxib was significantly lower than in the control group in post-operative day 7, 14 and 21 in ileal anastomoses ( 87,6g, 184,3g and 212,5g < 127,8g, 243,6g and 251g, p=0.026 ) and on days 4,7,14 and 21 in colonic anastomoses ( 139,3g, 170,4g, 202,9g and 299,9g < 203,3g, 254,3g, 364,2g and 401g, p=0.026 ). There were no significant diferences between imipenem, paracoxib and paracoxib/imipenem treated animals. A tendency of increased breaking strength were observed in paracoxib/imipenem group when compared to imipenem and paracoxib groups. The breaking strength increased progressivelly ... (Complete abstract click electronic access below)

Introdução: A lesão de isquemia e reperfusão (I/R) intestinal pode causar danos celular e tecidual local e em órgãos a distância. Alguns fatores podem estar envolvidos nesses processos, tais como: a geração de espécies reativas de oxigênio, mediadores inflamatórios, óxido nítrico (NO) e estresse do retículo endoplasmático (RE). Devido ao envolvimento do estresse oxidativo nas lesões de I/R intestinal, algumas opções terapêuticas com antioxidantes estão sendo estudadas e testadas nas lesões de I/R intestinal. Objetivo: Avaliar o efeito local e sistêmico da glutamina no intestino e fígado de animais submetidos à I/R intestinal. Métodos: Foram utilizados 20 ratos wistar machos divididos em quatro grupos: Sham operated (SO), Glutamina+Sham operated (G+SO), Isquemia e reperfusão intestinal (I/R); Glutamina+Isquemia e reperfusão intestinal (G+I/R). Os animais foram anestesiados e, após, realizada a laparotomia mediana e identificação da artéria mesentérica superior. A artéria foi clampeada por 30 e após esse tempo, os animais foram mantidos por mais 15 minutos em reperfusão intestinal. A glutamina foi administrada por via intraperitoneal, na dose de 25 mg/Kg diluída em 1 mL de solução fisiológica. O tratamento foi realizado uma vez ao dia, durante 48 horas antes da indução da isquemia. Foram realizadas análises séricas para a função de integridade hepática através das enzimas aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT) e fosfatase alcalina (FA) e danos ao DNA pelo ensaio cometa. Realizamos a análise histológica dos tecidos através da coloração de Hematoxilina-Eosina e imunohistoquímica para avaliar a quantidade de células marcadas com os anticorpos monoclonais IL-1β, IL-6, TNF-α e NF-B no intestino e fígado. O homogeneizado do intestino e fígado foram utilizados para a avaliação dos níveis de lipoperoxidação (LPO) através das substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), avaliação da atividade das enzimas antioxidantes catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), determinação dos níveis de glutationa (GSH), avaliação dos metabólitos do óxido nítrico (nitritos/nitratos) e para as análises moleculares das proteínas iNOS, NF-B, Nrf2, Keap1, SOD, NQO1, HSP70, GRP78 e ATF-6 por Western Blot. Resultados: O pré-tratamento com glutamina reduziu os níveis de LPO, óxido nítrico, danos ao DNA, bem como as enzimas de integridade hepática. Observamos que a glutamina foi eficaz na preservação da arquitetura tecidual do intestino e fígado dos animais submetidos a I/R intestinal, reduzindo parâmetros como infiltrado inflamatório, perda das vilosidades intestinais e necrose. Constatou-se que a glutamina ativou a via do Nrf2 e as enzimas antioxidantes, reduziu o dano celular, e inibiu o estresse do RE, além de reduzir os mediadores do processo inflamatório. Conclusão: Neste estudo, sugerimos que o pré-tratamento com a glutamina desempenhou um papel protetor tanto no intestino como no fígado dos animais submetidos a I/R intestinal, demonstrado pelas análises estudadas, possivelmente pela sua ação antioxidante e anti-inflamatória. / Background: Injury by intestinal ischemia and reperfusion (I/R) can cause local and cellular damage to tissues and organs at distance. Some factors may be involved in those processes, such as the generation of reactive oxygen species, inflammatory mediators, nitric oxide (NO) and endoplasmic reticulum stress. Due to the involvement of oxidative stress in intestinal I/R lesions, some therapeutic options with antioxidants are being studied and tested in order to reduce these damages. Objective: To evaluate the local and systemic effect of glutamine in the intestine and liver of animals submitted to intestinal I/R. Methods: Twenty male Wistar rats were divided into four groups: Sham operated (SO), Glutamine+Sham operated (G+SO), Intestinal Ischemia and reperfusion (I/R); Glutamine+intestinal ischemia and reperfusion (G+I/R). The animals were anesthetized and after we performed the median laparotomy and identification of the superior mesenteric artery. The artery was clamped for 30 minutes and after that the animals were maintained for another 15 minutes in intestinal reperfusion. Glutamine was administered intraperitoneally at a dose of 25 mg/kg diluted in 1 ml of saline solution. Treatment was performed once daily for 48 hours prior to induction of ischemia. Serum samples for hepatic integrity were collected, and the enzymes aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) and alkaline phosphatase (FA) were accessed. DNA damage was evaluated by the comet assay. We performed the histological analysis of the tissues through the staining of Hematoxylin-Eosin and immunohistochemistry, in order to evaluate the amount of cells labeled with the monoclonal antibodies IL-1β, IL-6, TNF-α and NF-B in the intestine and liver. The intestinal and liver homogenates were used to evaluate the levels of lipoperoxidation (LPO) through thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), evaluation of the activity of antioxidant enzymes catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx), determination of glutathione levels (GSH) and nitric oxide (nitrites/nitrates), and for the molecular analyzes of the iNOS, NF-B, Nrf2, Keap1, SOD, NQO1, HSP70, GRP78 and ATF-6 proteins we performed Western blot analysis. Results: Pretreatment with glutamine reduced levels of LPO, nitric oxide, DNA damage, as well as liver integrity enzymes. We observed that glutamine was effective in preserving the intestinal and liver tissue architecture of animals submitted to intestinal I/R, reducing parameters such as inflammatory infiltrate, loss of intestinal villi and necrosis. It was found that glutamine activated the Nrf2 pathway and antioxidant enzymes, reduced cell damage, and inhibited endoplasmic reticulum stress in addition to reducing mediators of the inflammatory process. Conclusion: In this study, we suggest that pretreatment with glutamine played a protective role in both intestine and liver of animals submitted to intestinal I/R, demonstrated by the present analyzes, possibly for its antioxidant and anti-inflammatory action.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-03-29T14:52:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_BARBARA COSTA PAULINO_Agosto2016.OFICIAL.pdf: 2162827 bytes, checksum: e76b8cfadd5a941840853d352a5bc159 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T14:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_BARBARA COSTA PAULINO_Agosto2016.OFICIAL.pdf: 2162827 bytes, checksum: e76b8cfadd5a941840853d352a5bc159 (MD5) Previous issue date: 2016-05-20 / CNPQ / A dieta ocidentalizada, rica em lipídeos, açúcar, sódio e alimentos processados e ultra processados tem sido apontada como um dos mais relevantes fatores associados ao excesso de peso/obesidade, comorbidades e distúrbios fisio-metabólicos observados em estudos epidemiológicos e experimentais em animais. O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos do soro de leite de cabra sobre o estado nutricional, microbiota, histologia intestinal e parâmetros bioquímicos de ratas e filhotes alimentados com dieta ocidentalizada. Foram utilizados 8 machos e 24 fêmeas da linhagem Wistar (da colônia do Departamento de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco) para o acasalamento dos animais. Ratas gestantes foram divididas em quatro grupos experimentais de acordo com a dieta: Controle ou Ocidentalizada e a suplementação ou não com soro de leite de cabra. Evolução ponderal e consumo alimentar das ratas seguiram por todo experimento. Ao desmame, as ratas e metade da prole de machos de cada ninhada foram eutanasiados para análise dos parâmetros bioquímicos, histologia intestinal, micro-organismos fecais. Metade dos filhotes foi submetida aos mesmos acompanhamentos e eutanasiados aos 45 dias de vida. A suplementação com soro de leite de cabra modificou poucos parâmetros nas ratas com exceção da alteração da quantidade de lactobacilos totais, que nos grupos controles com solução salina apresentaram uma média de 7,34±0,08 log.UFC/g-1 e 6,43±0,31 log.UFC/g-1 e no suplementado 7,79±0,30 log.UFC/g-1 e 6,94±0,45 log.UFC/g-1 para ratas com dieta ocidentalizada e padrão, respectivamente. Nos filhotes, a suplementação com soro de leite de cabra promoveu redução no ganho de peso e dos depósitos de gordura abdominal, alteração bioquímica, aumentou em 15% a contagem de lactobacilos e em 13% as enterobactérias. Além disso, minimizou o desgaste de células intestinais, limitando o processo inflamatório observado nos alimentados com dieta ocidentalizada. Dessa forma, pode-se sugerir que o soro de leite teve potencial efeito na microbiota fecal e morfologia intestinal, e que esses efeitos parecem depender da idade e do período de suplementação. / The westernized diet rich in fat, sugar, sodium and processed foods and processed ultra has been identified as one of the most important factors associated with overweight / obesity, comorbidities, and physiological and metabolic disorders observed in epidemiological and experimental studies in animals. The aim of this study was to investigate the effects of serum of goat milk on the nutritional status, microbiota, intestinal histology and biochemical parameters of rats and offispring fed westernized diet. Were used 8 male and 24 female Wistar (the colony of the Department of Nutrition at the Federal University of Pernambuco) for mating of animals. Pregnant rats were divided into four groups according to the diet: control or Westernized and supplemented or not with serum from goat milk. weight gain and food consumption of rats followed throughout the experiment. At weaning, rats, half male offspring in each litter were sacrificed for analysis of biochemical parameters, intestinal histology, faecal micro-organisms. Half of the pups was subjected to the same accompaniments and euthanized at 45 days of life. Supplementation with goat whey modified few parameters in rats with the exception of changing the amount of total lactobacilli that in control groups with saline had a mean of 7,34 ± 0,08 log.UFC/g-1 and 6, 43 ± 0,31 log.UFC/g1 and supplemented 7,79±0,30 log.UFC/g-1 and 6,94 ± 0,45 log.UFC/g-1 to rats with westernized diet and standard, respectively. In puppies, supplementation with goat whey promoted reduction of 200% in weight gain and deposits of abdominal fat, biochemical change, increased by 15% to lactobacillus count and 13% enterobacteria. In addition, minimized wear of intestinal cells by limiting the inflammatory process observed in fed westernized diet. Thus, it can be suggested that the whey had potential effect on fecal microbiota and intestinal morphology, and that these effects appear to depend on the age and supplementation period.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese2011_Luciana_Bradstetter.pdf: 2039765 bytes, checksum: fc789f9ab9e7cf36309b7d69f8c21304 (MD5) Previous issue date: 201-11-18 / Mechanic obstruction of blood vessels that irrigate the intestine leads to ischemia and intense reduction of oxygenation and tissue perfusion. If oxygenated blood flow returns abruptly to tissues before cellular death reperfusion injury occurs; this can be initiated by several mechanisms resulting in inflammatory response. Intestinal ischemia/reperfusion (I/R) injury has been widely associated to cell necrosis, although another distinct biochemical and morphological type of cell death, called apoptosis, is involved. Such conditions are mediated by signaling molecules in cellular surface, which lead to long term changes in gene expression. In the majority of cells, MAP (Mitogen Activated Protein) kinases (MAPK), which are part of a group of cytoplasmic enzymes, will transmit mitogenic and cell differentiation signs. Three MAPK that have been identified in mammalian cells participate in the signaling pathway: ERK, p38 and JNK. Activated p38 and JNK are usually related to apoptosis, while activated ERK 1/2 (P44/42) have a protection function inhibiting apoptosis. With the purpose of minimizing reperfusion injury after liver transplant, Carolina Rinse Solution (CRS) was designed by North Carolina University, USA. Although this solution has been used in horses to attenuate I/R injury in horse intestine, little is known about the eventual tissue protection mechanism. The present study aimed to investigate the effects of topical and intraluminal CRS in I/R injury, and the activation profile of p38 and ERK 1/2 MAPK, in rabbit jejunum. Fifteen New Zealand rabbits were allocated to three groups: Sham-operated (A), Ischemia and reperfusion (B) and CRS (C). Groups B and C were subjected to one hour of jejunal ischemia and two hours of reperfusion. In group C, ten minutes prior to reperfusion, the bowel lumen was filled with CRS, and the segment was immersed in CRS until reperfusion onset. Changes such as degeneration, necrosis, edema, hemorrhage, PMN infiltration and margination were not significantly different between groups B and C, showing that topical and intraluminal CRS did not attenuate deleterious effects of I/R in small intestinal of rabbits. I/R stimulated the phosphorylation of p44/42 MAPK and p38 MAPK pathways in some layers of jejunum. Progressive activation of p44/42 MAPK was chiefly localized to the crypts of Lieberkühn, circular and longitudinal muscle layers, whereas p38 MAPK was prominently activated in myenteric plexus and both muscle layers. All layers that did respond to I/R insult with activation increase of ERK 1/2 and p38, in all groups, showed low baseline phosphorylation levels as compared to those that did not react to the insult. The results of this work indicate that topical and intraluminal CRS does not interfere in ERK 1/2 and p38 activation profile in rabbit jejunum subjected to I/R. / A obstrução mecânica de vasos sanguíneos que irrigam o intestino leva à isquemia, com redução na oxigenação e perfusão teciduais. Se o fluxo sanguíneo oxigenado retorna aos tecidos bruscamente antes da morte celular, ocorre a chamada injúria de reperfusão, a qual pode ser iniciada por vários mecanismos, levando a uma resposta inflamatória. A injúria de isquemia e reperfusão (I/R) tem sido amplamente associada à necrose celular, apesar de um tipo bioquímico e morfológico distinto de morte celular, chamada de apoptose, também esteja envolvida. Tais processos são mediados por moléculas de sinalização na superfície das células, as quais levam a mudanças na expressão dos genes. Na maioria das células, as MAP (Mitogen Activated Protein) quinases (MAPK), as quais são parte de um grupo de enzimas citoplasmáticas, transmitem os sinais mitogênicos e de diferenciação. Três MAPK que foram identificadas em células de mamíferos participam do mecanismo de sinalização: ERK, p38 e JNK. As MAPK p38 e JNK ativadas normalmente estão associadas à apoptose, enquanto ERK 1/2 (P44/42) ativada tem função de inibição da apoptose. Com o propósito de minimizar a injúria de reperfusão após o transplante de fígado, a solução de Carolina Rinse (CRS) foi desenvolvida pela Universidade da Carolina do Norte nos EUA. Essa solução tem sido utilizada para minimizar os efeitos da I/R em intestino de eqüinos, mas pouco se sabe do seu possível mecanismo de ação protetora. O presente estudo objetivou investigar os efeitos do uso tópico e intraluminal da CRS na injúria de I/R e no perfil de ativação das MAPK p38 e ERK 1/2 no jejuno de coelhos. Quinze coelhos da raça Nova Zelândia foram alocados em três grupos: Instrumentado (A), Isquemia e reperfusão (B) e CRS (C). Os grupos B e C foram submetidos a uma hora de isquemia e duas horas de reperfusão de jejuno. No grupo C, dez minutos antes da reperfusão, o lumen do segmento foi preenchido com CRS e o mesmo foi imerso em CRS até o início da reperfusão. Mudanças como degeneração, necrose, edema, hemorragia, infiltrado e marginação de PMN não foram significativamente diferentes entre os grupos B e C, o que mostra que o uso tópico e intraluminal da CRS não atenuou os efeitos deletérios da I/R no intestino delgado de coelhos. A I/R estimulou a fosforilação das MAPK p44/42 e p38 em algumas camadas do jejuno. A ativação progressiva de p44/42 ocorreu principalmente nas criptas de Lieberkühn e nas camadas musculares circular e longitudinal, enquanto a MAPK p38 foi ativada principalmente no plexo mioentérico e em ambas as camadas musculares. Todas as camadas que responderam ao insulto da I/R com aumento da ativação de ERK 1/2 e p38, em todos os grupos, apresentaram baixos níveis basais de fosforilação, quando comparados àquelas que não responderam ao insulto. Os resultados desse estudo indicam que o uso tópico e intraluminal da CRS não interfere no perfil de ativação de ERK 1/2 e p38 no jejuno de coelhos submetidos à I/R.

Objetivos: Testar a hipótese de que a mucosa do intestino delgado proximal de crianças com diarréia persistente apresenta alterações morfométricas e estereológicas proporcionais ao estado nutricional. Métodos: estudo transversal, incluindo 65 pacientes pediátricos internados no período de maio de 1989 a novembro de 1991, com idade entre 4 meses e 5 anos , com diarréia de mais de 14 dias de duração, que necessitaram realizar biópsia de intestino delgado como parte do protocolo de investigação. A avaliação nutricional foi realizada pelos métodos de Gomez, Waterlow e pelos escores z para peso/ idade (P/I), peso/estatura (P/E) e estatura/idade (E/I), divididos em: eutróficos = z ≥ 2 DP e desnutridos z < -2dp; eutróficos = z ≥ 2 DP, risco nutricional = z < -1DP e desnutridos = z < -2DP; e de maneira contínua em ordem decrescente, utilizando-se as tabelas do NCHS. A captura e análise das imagens por programa de computador foi efetuada com o auxílio do patologista. Nos fragmentos de mucosa do intestino delgado, foram medidas a altura dos vilos, a profundidade das criptas, a espessura da mucosa, a espessura total da mucosa e a relação vilo/cripta, com aumento de 100 vezes. Com aumento de 500 vezes, foram medidas a altura do enterócito, a altura do núcleo e do bordo em escova. O programa computadorizado utilizado foi o Scion Image. A análise estereológica, foi feita com o uso de arcos ciclóides. Resultados: Para os escores z P/I, P/E e E/I, divididos em duas categorias de estado nutricional, não houve diferença estatisticamente significante quanto às medidas da altura dos vilos, profundidade das criptas, espessura da mucosa, espessura total da mucosa e relação vilo/cripta. A altura do enterócito foi a característica que apresentou maior diferença entre os grupos eutrófico e desnutrido, para os índices P/I e P/E, em 500 aumentos, sem atingir significância estatística. Quando os escores z foram divididos em 3 categorias de estado nutricional, a análise morfométrica digitalizada mostrou diferença estatisticamente significante para a relação vilo/cripta entre eutróficos e desnutridos leves e entre eutróficos e desnutridos moderados e graves (p=0,048). A relação vilo/cripta foi maior nos eutróficos. A avaliação nutricional pelos critérios de Waterlow e a análise estereológica não mostraram associação com o estado nutricional. Pelo método de Gomez, houve diferença estatisticamente significante para a altura do enterócito entre eutróficos e desnutridos de Grau III: quanto maior o grau de desnutrição, menor a altura do enterócito (r= -.3330; p = 0,005). As variáveis altura do enterócito, altura do núcleo do enterócito e do bordo em escova apresentaram uma clara associação com os índices P/I (r=0,25;p=0,038), P/E (r=0,029;p=0,019) e com o critério de avaliação nutricional de Gomez (r=-0,33;p=0,007), quando foram avaliadas pelo coeficiente de correlação de Pearson. A altura do núcleo mostrou associação com o índice P/I (r=0,24;p=0,054). A altura do bordo em escova mostrou associação com o índice P/I (r=0,26;p=0,032) e a avaliação nutricional de Gomez (r=-0,28;p=0,020). Conclusões: As associações encontradas entre o estado nutricional - avaliado de acordo com Gomez e os índices P/I e P/E - e as variáveis da mucosa do intestino delgado mostraram relação com o peso dos pacientes. Embora estas associações tenham sido de magnitude fraca a moderada, há uma tendência à diminuição do tamanho do enterócito, seu núcleo e seu bordo em escova à medida que aumenta o grau de desnutrição. / Objectives: To test the hypothesis that the proximal small intestinal mucosa of children with persistent diarrhea presents morphometric and stereologic changes, proportional to their nutritional status. Methods: We performed a cross-sectional study with 65 pediatric patients, with ages varying from 4 months to 5 years, who were admitted between May 1989 and November 1991 with persistent diarrhea for over 14 days. These patients were submitted to small intestinal biopsy, as part of the investigation protocol. The nutritional assessment was performed according to the methods proposed by Gomez, Waterlow, and through z-scores for weight/age (W/A), weight/height (W/H) and height/age (H/A) ratios, divided into: eutrophic = z ≥ 2SD and malnourished z < -2SD; eutrophic = z ≥ 2SD, nutritional risk z < -1SD and malnourished = z < -2SD; and continuously, in descending order, using the NCHS charts. Computer images were obtained and analyzed with a pathologist assistance. Villous height, crypt depth, mucosal thickness, total mucosal thickness, and villous/crypt ratio were measured in the fragments of the small intestinal mucosa, enlarged 100 times. When images were enlarged 500 times, enterocyte height, nuclear height and brush-border height were measured. The software used was Scion Image. Stereologic analysis was performed using cycloid arcs. Results: For W/A, W/H and H/A z-scores, divided into two nutritional status categories, no statistically significant difference was observed in regard to villous height, crypt depth, mucosal thickness, total mucosal thickness and villous/crypt ratio. Enterocyte height presented the most significant difference between eutrophic and malnourished groups, for the W/A and W/H ratios, with a 500x enlargement, although this difference was not statistically significant. When z-scores were subdivided into three nutritional status categories, a digital morphometric analysis showed a statistically significant difference for the villous/crypt ratio between the eutrophic and slightly malnourished group and the eutrophic and mild to severe malnourished group (P=0.048). The villous/crypt ratio was higher among eutrophic children. Nutritional assessment, according to Waterlow criteria, and stereologic analysis were not associated with nutritional status. According to Gomez’s method, a statistically significant difference in enterocyte height was observed between eutrophic and level III malnourished children: the higher the level of malnutrition, the more reduced the height of the enterocyte (r= -.3330; P=0.005). The variables enterocyte height, height of enterocyte nucleus and brush-border height presented a clear association with the W/A ratio (r=0.25; P=0.038), W/H ratio (r=0.029; P=0.019), as well as with Gomez’s criterion for nutritional status (r=-0.33; P=0.007), when evaluated through Pearson’s correlation coefficient. The height of the nucleus was associated with W/A ratio (r=0.24; p=0.054). Brush-border height was associated with W/A ratio and with Gomez’s nutritional assessment (r=-0.28; P=0.020). Conclusions: The observed associations between nutritional status – evaluated according to Gomez and W/A and W/H ratios – and the analyzed small intestinal mucosa variables showed a positive correlation with patients’ weight. Although these associations were of a slight to moderate magnitude, we observed a tendency of enterocyte size reduction, as well as a reduction in the size of its nucleus and brush-border, as the level of malnutrition increases.