En la presente investigación se estudian las propiedades, bioquímicas, biológicas, inmunológicas y moleculares de una isoforma básica de Fosfolipasa A2 presente en el veneno de la serpiente peruana Lachesis muta(PLA2básicaL.muta). La purificación se realizó mediante cromatografía de intercambio iónico, filtración y de alta performance; la enzima fue purificada 41,2 veces con un rendimiento de 64%. Se obtuvo una única banda proteica de 14,7 kDa por PAGE-SDS en condiciones reductoras y no reductoras, demostrando ser una proteína monomérica. Su pH óptimo es de 7,8 y es fuertemente inhibida por el PMSF, EDTA y glutatión. En cuanto a su acción biológica, se obtuvo la dosis hemolítica media (DH50) en 4,35µg, la dosis miotóxica mínima (DMM) en 18,96µg/ml y la dosis edemática mínima (DEM) 23,56μg. La enzima no mostró actividad hemorrágica ni acción anticoagulante. Adicionalmente las pruebas de inmunodifusión e inmunoelectroforesis revelaron que PLA2básicaL.muta es reconocida e inhibida parcialmente por el suero monovalente antilachésico (INSPerú). Empleando la metodología de RT-PCR se obtuvo la secuencia completa del cDNA de PLA2básicaL.muta, con 445 pb; análisis bioinformáticos indican que la secuencia posee un marco de lectura abierta de 414 nucleótidos que codifica un péptido señal de 16 aminoácidos y una proteína madura de 122 residuos, el peso molecular fue de 13,86 kDa y un pI de 8,316. La secuencia aminoacídica, contiene residuos conservados para el sitio catalítico, His48, Asp49, Tyr52 así como para unión al Ca+2, Tyr18, Gly30 y Gly32. El modelaje tridimensional de la PLA2, muestra que está formada por tres hélices-, una lámina- y un lazo de unión al Ca+2. PLA2básicaL.muta mostró alta homología estructural con otras sPLA2 de venenos de serpientes. Finalmente, los estudios revelan que la PLA2básicaL.muta pertenece al grupo sPLA2 [Asp49] básicas de bajo peso molecular. Este es el primer estudio que correlaciona la estructura y función de una enzima proveniente del veneno de una serpiente peruana. Palabras claves: Fosfolipasa A2, Isoenzima, Lachesis muta, sitio farmacológico, transcrito. / --- In the present research the biochemical, biological, immunological, as well as molecular properties of a basic isoform of Phospholipase A2 from venom of peruvian snake Lachesis muta (PLA2BasicL.muta), were studied. This enzyme was purified using ion exchange, filtration and high performance chromatographical steps, respectively. The enzyme was purified 41,2 times with a yield of 64%. SDA-PAGE analysis showed a unique protein band of 14,7 kDa under reducing and no reducing conditions indicating that the enzyme is a single polypeptide chain. Furthermore, the enzyme had a optimal pH of 7,8 and was inhibited by PMSF, EDTA and glutation. In relation to its biologic activity, a Medium Hemolytic Doses (DH50) of 4,35µg/tube, Minimum Miotoxic Doses (MMD) of 18,96µg/ml and the Minimum Edematic Doses (MED) of 91,5μg were obtained. For another hand, the PLA2 didn´t show either hemorrhagic or anticoagulant activities, and was recognized and partially inhibited by monovalent antilachesic serum (INS-Perú) by immunodiffusion and immunoelectrophoresis. Using RT-PCR methodology and bioinformátics analysis the complete cDNA sequence of PLA2basicL.muta with 445 bp and an open reading frames of 414 nucleotides, were obtained, which encodes a peptide signal of 16 amino acids and a matured protein of 122 residues with 13, 86 kDa and a pI value of 8,3, calculated by in silico analysis. The amino acidic sequence contains conserved residues of His48, Asp49, Tyr52 in the catalytic site, as well as Tyr18, Gly30 y Gly32 in the Ca+2 -binding site. Three-dimensional model of PLA2basicL.muta showed that was conformed by three α-helix, one β-sheet and one Ca+2 -binding ribbon. PLA2basicL.muta shows a high structural homology with other snake venom phospholipases. Finally, studies reveal that PLA2basicL.muta belongs to the group of lower molecular weigh basic sPLA2 [asp49]. This work is the first study that correlate the structure and function of a Peruvian snake venom enzyme. Key words: Phospholipase A2, Isoenzyme, Lachesis muta, pharmacologic site, transcript. / Tesis

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-21Bitstream added on 2015-04-09T12:47:34Z : No. of bitstreams: 1 000811200.pdf: 1923583 bytes, checksum: 84c931392978dc9e10b51b2550541665 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os camarões do gênero Macrobrachium (Crustacea, Decapoda, Palaemonidae), encontrados em ambientes de água doce, são amplamente distribuídos pelas regiões tropicais e subtropicais do mundo, inclusive em locais próximos ao litoral. Algumas espécies desse gênero, como por exemplo M. rosenbergii, apresentam valor econômico, sendo cultivadas e comercializadas como alimento. Na região Noroeste do Estado de São Paulo, são encontradas as espécies classificadas como M. amazonicum e M. jelskii, as quais são espécies exóticas de camarões dulcícolas recentemente introduzidas e amplamente disseminadas em reservatórios de usinas hidrelétricas desta região. Essas espécies possuem hábitos crípticos e noturnos, sendo predadores de larvas de peixes e também presas de peixes adultos e outros organismos. M. amazonicum e M. jelskii apresentam grande similaridade interespecífica em termos de caracteres morfológicos, o que pode dificultar a classificação taxonômica desses organismos. O objetivo deste estudo foi conduzir análises morfométricas, ultraestruturais, isoenzimáticas e moleculares em M. amazonicum e M. jelskii, na tentativa de obter-se novos dados para distinguí-los. Os camarões foram coletados das populações dos reservatórios de Sales/SP e Mendonça/SP. As análises morfométricas englobaram as medidas do télson, dos espinhos caudais internos e do rostro. As análises por microscopia eletrônica de varredura foram realizadas nas estruturas do télson, nos espinhos caudais internos e no apêndice masculino. As análises isoenzimáticas, realizadas por eletroforese em gel de poliacrilamida, abrangeram as enzimas álcool desidrogenase, octanol desidrogenase, glicose-6-fosfato desidrogenase, lactato desidrogenase, amilase e esterases do hepatopâncreas e tecido muscular. Análises moleculares envolveram a amplificação do espaçador intergênico interno ITS-1 (Internal Transcribed Spacer 1) do rDNA. Os fragmentos ... / Prawns of the genus Macrobrachium (Crustacea, Decapoda, Palaemonidae) can be found in freshwater environments, widely distributed throughout tropical and subtropical regions of the world, including regions near the coast. Some species of this genus, for example Macrobrachium rosenbergii, present economic value, which are reared and traded as food. In the northwest region of São Paulo State two exotic freshwater prawn species are found, classified as M. amazonicum and M. jelskii, which were recently introduced to the aquatic reservoirs of hydroelectric power plants and then, disseminated throughout reservoirs in this region of the State. These species have cryptic and overnight habits, being predators of fish larvae and also being prey to adult fishes and other organisms. M. amazonicum and M. jelskii present high rates of interspecific similarity in terms of morphological characters, which are generally used to distinguish them, what may induce mistakes in taxonomic identification. The objective of this study was to conduct morphometric, ultrastructural, isoenzymatic and molecular analyses of M. amazonicum and M. jelskii, in order to obtain more data about their differentiation. The prawns were collected in reservoirs of Sales/SP and Mendonça/SP. Morphometric analyses were performed involving the structures of telsons, internal caudal spines and rostrums. Scanning electron microscopy analyses were performed on structures of telsons, internal caudal spines and male appendices. Isoenzymatic analyses by polyacrylamide gel electrophoresis included the enzymes alcohol dehydrogenase, octanol dehydrogenase, glucose-6-phophate dehydrogenase, lactate dehydrogenase, amylase and esterases of hepatopancreas and muscle tissue. Molecular analyses were performed by amplification and sequencing of ITS-1(Internal Transcribed Spacer 1) intergenic spacer from rDNA. The amplificated fragments were used for analyzing length polymorphism restriction fragments ...

Orientador: Vera Nisaka Solferini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T22:41:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_SoniaCristinadaSilva_D.pdf: 14587285 bytes, checksum: 2a4ec18a37aa5d1a25489912a65439ec (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Uma das questões particularmente interessantes em Biologia é compreender o vínculo entre a ecologia e evolução das espécies. Avaliar a relação entre a capacidade de dispersão e a escala espacial na qual as populações diferem geneticamente é uma das formas de entender como esse vínculo é estabelecido. A variação espacial das freqüências alélicas em populações naturais pode ser resultado de isolamento por distância, história populacional ou seleção diversificadora. Análises populacionais em grande e pequena escala são relevantes para avaliar como essas freqüências podem variar espacial e temporalmente. O objetivo desse estudo foi investigar a distribuição da variabilidade em litorinídeos utilizando isozimas como marcador molecular. No primeiro capítulo, o padrão de desvio das proporções de Hardy- Weinberg foi analisado em três espécies de litorinídeos (Echinolittorina lineolata, Littoraria fiava e L. angulifera) em uma escala macrogeográfica ao longo da costa Brasileira (cerca de 4.000 km). Um teste de homogeneidade dentro das amostras mostrou que os valores dos FIS são, em sua maioria, heterogêneos. Este resultado exclui endogamia e efeito Wahlund como principais causas do excesso de homozigotos. Em todas as espécies, pelo menos um loco do sistema PGM apresentou valores homogêneos de desvio de Hardy- Weinberg em todas as amostras, sugerindo que essa enzima pode estar sob efeito de seleção natural ou em desequilíbrio de ligação com um loco sob seleção. No segundo capítulo, avaliamos a subdivisão em escala local em Littoraria flava a fim de testar se os desvios de Hardy-Weinberg podem ser explicados por estruturação genética em pequena escala, apesar de essa espécie possuir fase larval planctotrófica. As amostras foram coletadas em transectos horizontais no costão rochoso em três praias, três vezes em um período de cerca de um ano. Foi realizada uma análise hierárquica de 15 locos polimórficos comparando a estruturação de uma escala de 200 km em relação a uma escala de dezenas a poucas centenas de metros. Littoraria fiava apresentou maior estruturação dentro dos transectos e entre as diferentes coletas temporais do que entre as praias. Cerca de 18% dos testes de neutralidade de Ewens-Watterson apresentaram desvio significativo de neutralidade. Esses resultados sugerem um equilíbrio entre colonizações recorrentes e coeficientes seletivos variando no tempo e espaço sobre diferentes locos. No terceiro capítulo estão apresentados os resultados de uma avaliação do efeito do ambiente sobre a forma da rádula de L. fiava e L. angulifera. Além da caracterização da variação morfológica da rádula, foi realizado um experimento de transferência recíproca dos indivíduos entre o mangue e o costão. Nas duas espécies, foi observada menor variação na forma da rádula nos indivíduos coletados no mangue, indicando que cada ambiente tem um efeito diferente sobre esse caráter. No experimento de transferência, as rádulas de L. fiava apresentaram mudança de forma 40 dias após o início do experimento, apesar do tamanho da fita radular ser fortemente influenciado pelo substrato original (F6.22=17,13, p<0,001). Foram observadas mudanças na forma em diferentes intensidades, sugerindo plasticidade fenotípica da forma da rádula / Abstract: One of the main questions in biology is the link between a species ecology and its evolution. Evaluating the relationship between the geographical scale over which populations differ genetically and the species dispersal ability is a way to understand how this link is established. Spatial variation in allellic frequencies of natural populations may be explained by isolation by distance, population history or diversifying selection. Populational analyses at different scales are appropriate to evaluate how gene frequencies vary in time and space. The main goal of this study was to analyse the distribution of the genetic variability in littorinids using allozymes as molecular marker. In the first chapter, the pattern of heterozygote deficiency was evaluated in three littorinid species (Echinolittorina lineolata, Littoraria flava and L. angulifera) at a macrogeographic scale along the Brazilian coast (4,000 Km). A homogeneity test among loci showed heterogeneous FIS values in most populations. This result ruled out inbreeding and Wahlund effect as the main causes of departure of Hardy- Weinberg expectations. In the three littorinid species, at least one Pgm locus had homogeneous FIS values along all sampled populations, which suggests that this enzyme may have an important role in the fitness or may be linked to a locus under selection. In the second chapter, local-scale subdivision in Littoraria flava was investigated in order to test if Hardy- Weinberg deviations could be explained by micro-structuring, despite the planktotrophic larval phase. Samples were collected along horizontal transects in rocky shores of three different beaches, three times over a year. With this sampling design, and using 15 polymorphic allozymic loci, we searched for indications of any micro-scale or short-temporal subdivision in contrast with macrogeographic (200 Km) structuring. Littoraria flava samples presented significantly more structure within transects and along the temporal scale than at large-scale. Eighteen percent of the Ewens- Watterson neutrality test showed significant deviation of neutrality expectation. This suggested that there could be a balance among several recurrent colonizations by cohorts with different allelic frequencies, followed by a directional selection on different loci at different times and localities. In the last chapter, we assessed if environmental heterogeneity could affect radular form in L. flava and L. angulifera. We also made a reciprocal transfer experiment in natural conditions between mangrove and rocky shore locations, apart nearby 100 m. Individuals of both species from mangrove showed less variation in the shape of radula than those from rocky shores, implying in a different environmental effect in each species. In the natural transfer experiment, radulae morphology of L. flava individuals changed within 40 days, but the length of the radulae were strongly infIuenced by the original substrate (F6,22= 17 .13, p<0.00l). Changes in the shape had different intensities, suggesting that this trait could be subject to phenotypic plasticity / Doutorado / Genetica Animal e Evolução / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:24:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_FernandaDias_M.pdf: 1238730 bytes, checksum: 28d5c999aab93f179f9bdc1c99b7f95c (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A determinação das isoenzimas da CK (MM, MB e BB) é de fundamental importância em diagnósticos clínicos de diversas patologias, bem como a determinação da relação entre a razão da CK-MB/CK TOTAL, utilizada como marcador específico para o diagnóstico diferencial de lesão do miocárdio. O objetivo do estudo foi avaliar o perfil eletroforéticodas isoformasMM, MBe BB como marcador de lesões do trato gastrointestinal. Para tal, avaliamos um grupo de 95 pacientes, de ambos os sexos, com idade média de 44,63 :I: 1,81 anos, divididos em cinco grupos, dos quais 15 eram normais sendo utilizados como controle, 17 portadores de gastrite, 16 pacientes com úlcera péptica, 16 indivíduos com esofagite péptica, e 31 portadores de neoplasias esofágicas, gástricas ou de cólon/reto. As isoenzimas foram individualizadas e identificadas por eletroforese em gel de agarose. Nos portadores de gastrite, úlcera ou esofagite não foram observadas diferenças significativas da isoforma MM, quando comparada com o grupo controle. No entanto, em pacientes portadores de neoplasias foi observado um decréscimo de 24% desta isoforma. Em alguns destes pacientes verificou-se uma forma anômala de MM, denominada MiMi (mitocondrial). Uma redução dos níveis séricos de CK-MM pôde ser observada em pacientes portadores de neoplasias gastrointestinais, quando comparados com portadores de outras enfermidades digestivas ou controles sadios. O potencial diagnóstico desde achado, bem como as suas causas merecem uma investigação detalhada / Abstract: Not informed. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Robinson Antonio Pitelli / Banca: Janete Apparecida Desidério Sena / Banca: Ricardo Victoria Filho / Resumo: Estudos laboratoriais foram realizados com o objetivo de estudar a caracterização genética de plantas de Euphorbia heterophylla, provenientes de áreas em que a resistência aos herbicidas inibidores da ALS (Acetolactase) estava caracterizada (Santo Ângelo, RS), em processo de desenvolvimento (Sonora, MS) e onde nunca havia sido aplicado herbicida com este mecanismo de ação (Jaboticabal, SP). Testes preliminares comprovaram elevada resistência para as plantas provenientes de Santo Ângelo, moderada resistência para plantas de Sonora e elevada susceptibilidade para plantas provenientes de Jaboticabal. A análise dos resultados através das isoenzimas revelou que existem pequenas diferenças entre as três populações estudadas. A análise do DNA dos indivíduos das diferentes populações através de marcadores moleculares RAPD, permitiu a construção do Dendrograma de Cluster, que mostra uma similaridade mínima de 88% e máxima de 99% entre os diferentes indivíduos, quer pertencentes à mesma população, quer pertencentes às diferentes populações. Tal análise permitiu inferir que, apesar dos indivíduos analisados mostrarem grande similaridade entre si, apresentam variabilidade genética entre os indivíduos e as populações estudadas, de acordo com a conclusão obtida quando da utilização das isoenzimas. Crescendo em condições similares, o biótipo da Santo Ângelo apresentou maior absorção de fósforo em comparação com os demais, e maior absorção de potássio em relação ao biótipo de Jaboticabal. Comparando a densidade estomática, houve diferença estatística entre os três biótipos, sendo maior para o biótipo mais tolerante ao herbicida e menor para o susceptível. Não foi possível estabelecer qualquer relação confiável entre as características morfológicas e de crescimento das plantas e a resistência ao imazethapyr. / Abstract: Laboratory studies were carried out aim to characterize genetically Euphorbia heterophylla plants were collect in three regions. At Santo Ângelo (RS) region this plant is highly resistant to ALS inhibitors herbicides, but moderately at Sonora (MS) and susceptible at Jaboticabal region. Greenhouse tests confirmed the plants reaction in face of imazethapyr spraying. The isoenzymes studies showed small differences between the three populations. The DNA analysis using molecular markers make feasible the Cluster dendrogram showing 88-99% of similarity comparing plants, regardless the plant origin. Besides the high similarity index between the plants, it was possible to determine lower genetic variation in Jaboticabal and Santo Ângelo populations using isoenzymes technique. The nitrogen and potassium contents in the plants shoot was higher in the Santo Ângelo byotipe, although there was no difference between the K contents when the Jaboticabal and Sonora byotipes were compared. The stomata and trichomes densities decreased in the same order of the plant tolerance to herbicide: Santo Ângelo > Sonora > Jaboticabal. None correlation between biotype resistance to imazethapyr and the plant morphology features for the three biotypes studied. The differences in the plant feature may be attributable to the adaptative mechanism of the plant to the regional characteristics they were collected. / Mestre

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-27T13:30:36Z No. of bitstreams: 5 54.pdf: 760236 bytes, checksum: c96473cb1f96d0ebd32276b921d2f10d (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-27T19:26:35Z (GMT) No. of bitstreams: 5 54.pdf: 760236 bytes, checksum: c96473cb1f96d0ebd32276b921d2f10d (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-27T19:26:35Z (GMT). No. of bitstreams: 5 54.pdf: 760236 bytes, checksum: c96473cb1f96d0ebd32276b921d2f10d (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) Previous issue date: 2013 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / A cultura do crambe (Crambe abyssinica Hochst) tem se destacado no cen?rio nacional pelo seu potencial para produ??o de biodiesel devido ? facilidade de cultivo, qualidade do ?leo e possibilidades de uso dos subprodutos da extra??o do ?leo. Para o estabelecimento da cultura no pa?s ? necess?rio que sejam usadas sementes de qualidade. No entanto, as informa??es sobre metodologias para avalia??o da qualidade de sementes dessa cultura s?o escassas. Dessa forma, objetivou-se adequar as metodologias dos testes de envelhecimento acelerado e condutividade el?trica para avalia??o do vigor de sementes de crambe e investigar a atividade enzim?tica em rela??o ?s diferen?as de vigor. Foram utilizados cinco lotes de sementes da cultivar FMS Brilhante das safras 2008, 2009, 2010 e 2011. Foram realizadas a caracteriza??o morfol?gica de sementes e pl?ntulas e a composi??o centesimal da semente de crambe. Para caracteriza??o do perfil dos lotes realizou-se a determina??o do grau de umidade e os testes de primeira contagem de germina??o, germina??o, ?ndice de velocidade de germina??o, emerg?ncia, estande inicial, ?ndice de velocidade de emerg?ncia e sanidade. Foi tamb?m realizada a an?lise eletrofor?tica das isoenzimas super?xido dismutase, esterase, catalase, ?lcool desidrogenase e malato desidrogenase. Para o teste de envelhecimento acelerado, as sementes foram submetidas ao m?todo tradicional e com solu??o saturada de NaCl, pelos per?odos de envelhecimento de 0; 24; 48; 72 e 96 horas. No teste de condutividade el?trica, as sementes foram submetidas aos per?odos de 2; 4; 6; 8; 10; 12; 14; 16 e 18 horas de embebi??o utilizando-se 25 sementes em 25 mL e 50 mL e 50 sementes em 50 mL e 75 mL. Concluiu-se que ? poss?vel avaliar o vigor de sementes de crambe pelo m?todo tradicional do teste de envelhecimento acelerado a 42 ?C por 96 horas. O teste de condutividade el?trica n?o foi adequado para avalia??o da qualidade fisiol?gica de crambe. Quando associado ? atividade das isoenzimas observou-se que o lote de maior vigor teve maior atividade dos grupos enzim?ticos super?xido dismutase, catalase e esterase. O lote de menor vigor n?o teve atividade das enzimas isocitrato liase e ?lcool desidrogenase. N?o houve altera??o na atividade da isoenzima malato desidrogenase. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Produ??o Vegetal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013. / ABSTRACT Crambe (Crambe abyssinica Hochst) has been highlighted in the national scenery for its potential in producing biodiesel due to its ease of cultivation, quality of the oil and possibilities of use of the oil extraction byproducts. In order to establish the culture in the Country, the use of quality seeds is necessary. However, the information on methodologies for seed quality evaluation for this culture is scarce. Thus, we aimed at adapting the methodologies to the accelerated aging and electric conductivity tests to evaluate the vigor of crambe seeds and investigate the enzymatic activity in relation to the vigor differences. Five seed lots of cultivar FMS Brilhante of the 2008, 2009, 2010 and 2011 harvests were used. We performed the morphologic characterization of seeds and seedlings and the centesimal composition of crambe seeds. For the profile characterization of the lots, we performed the determination of the humidity degree and the tests for first germination count, germination, germination speed index, emergence, initial stand, emergence speed index and sanity. We also performed the electrophoretic analysis of the superoxide dismutase, esterase, catalase, alcohol dehydrogenase and malate dehydrogenase isoenzymes. For the accelerated aging test, the seeds were submitted to the traditional method and with NaCl saturated solution, for the aging periods of 0; 24; 48; 72 and 96 hours. In the electrical conductivity test, the seeds were submitted to the periods of 2; 4; 6; 8; 10; 12; 14; 16 and 18 hours of soaking using 25 seeds in 25 mL and 50 mL, and 50 seeds in 50 mL and 75 mL. We concluded that it is possible to evaluate crambe seed vigor by the traditional method of the accelerated aging test at 42 oC for 96 hours. The electric conductivity test was not adequate for evaluating crambe physiological quality. When associated with isoenzymes activity, we observed that the lot with highest vigor presented the highest activity of the superoxide dismutase, catalase and esterase isoenzymes groups. The lot of lowest vigor did not present activity of the isocitrate liase and alcohol dehydrogenase enzymes. There was no interaction of the activity of the malate dehydrogenase isoenzymes.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-20T11:17:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1166212 bytes, checksum: 19d143aed68804bce4b5d8bd833a1b17 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T11:17:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1166212 bytes, checksum: 19d143aed68804bce4b5d8bd833a1b17 (MD5) Previous issue date: 2005-08-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Porophyllum ruderale (Asteraceae), erva ruderal e aromática, conhecida popularmente como couve-cravinho. Na medicina popular é utilizada como cicatrizante e antiinflamatória, antifúngica, antibacteriana, calmante, no combate à hipertensão arterial, no tratamento de leishmaniose, no tratamento de edemas e traumatismos, no tratamento de picada de cobra, doenças reumáticas e dores em geral. A atividade cicatrizante tem sido relacionada à presença de teores variáveis de compostos fenólicos do tipo taninos. Os objetivos do trabalho foram descrever a anatomia da raiz, caule e folha de couve-cravinho e preceder a histolocalização dos compostos fenólicos e lipídicos. De cinco plantas cultivadas, em fase de pré-floração, foram coletadas e fixadas em FAA50 ou em sulfato ferroso em formalina neutra tamponada (para observação de compostos fenólicos), a raiz, o caule e as folhas. O laminário foi obtido utilizando-se metodologia tradicional. As raízes são tetrarcas, desenvolvem estrutura secundária precocemente, e possuem ductos secretores no córtex. Nos caules ductos também estavam presentes, entretanto somente nos jovens a reação de compostos fenólicos foi positiva. Nas folhas foram observados ductos delimitados por várias camadas de células epiteliais cujo conteúdo reagiu positivamente indicando a presença de compostos lipídicos e fenólicos. Conclui-se que os ductos são provavelmente as estruturas responsáveis pela secreção de taninos. As infecções micóticas de pele, de unha e de cabelo são comuns em vários países. Os fungos conhecidos como dermatófitos causam infecções crônicas e demandam tratamentos prolongados com drogas antimicóticas caras e às vezes pouco efetivas. O uso de plantas no tratamento de doenças de pele é prática antiga, entretanto são necessários estudos científicos visando a comprovação dos efeitos medicinais. Na terapêutica popular, Porophyllum ruderale é utilizada como antifúngica dentre outros usos. O óleo essencial e os taninos das folhas têm mostrado efeitos inibitórios sobre bactérias e fungos. O objetivo do trabalho foi verificar “in vitro” a atividade antifúngica do extrato das folhas de Porophyllum ruderale sobre dermatófitos (Trichophyton rubrum e T. mentagrophytes) e cândida (Cândida albicans, C. krusei e C. parapsilosis). As folhas utilizadas no preparo do extrato metanólico foram coletadas de plantas cultivadas em fase de pré-floração, secas à temperatura ambiente e trituradas. O extrato foi filtrado, pesado, concentrado, dissolvido em 5 mL de dimetilsulfóxido (DMSO), resultando nas diluições desejadas (0, 1, 2, 3, 4, 6, 8 e 10 mg/mL, e adicionado ao meio de cultura dos microrganismos. As concentrações de 8 e de 10 mg do extrato metanólico/mL do meio foram efetivas na redução do crescimento das colônias de T. rubrum e não reduziram o crescimento das espécies de cândida testadas. A concentração de 3 mg/mL reduziu significativamente as colônias de T. mentagrophytes quando comparada ao controle. Foi concluído que há evidência da couve-cravinho conter propriedades antimicóticas efetivas no tratamento de infecções causadas por T. mentagrophytes e T. rubrum, validando o uso popular da planta entre as pessoas que praticam terapêuticas tradicionais. Experiências do uso da homeopatia em vegetais vêm sendo realizadas por agricultores. São vários os benefícios da homeopatia no cultivo, destacando-se a obtenção de plantas livres de resíduos, o que é muito importante em plantas medicinais. O objetivo do trabalho foi determinar a resposta de plantas a preparados homeopáticos quanto ao teor de tanino nas folhas e nas raízes. O experimento foi instalado em blocos casualizados com três repetições e uma testemunha, sendo submetidos a análise de variância e regressão. Os preparados homeopáticos, tanto em altas quanto em baixas dinamizações, causaram efeito significativo no teor de tanino em folhas e raízes de Porophyllum ruderale, ora aumentando, ora reduzindo. Silicea (CH5) e Sulphur (C200), aplicadas, no intervalo de 10 dias, proporcionaram menor concentração de tanino na folha em relação à testemunha. A aplicação única de Sulphur, Natrum muriaticum, Kalium phosphoricum,e Calcarea carbonica, na dinamização CH4, incrementaram o teor de tanino entre 240 e 288 horas após a aplicação. Silicea e Magnésia carbonica, na mesma dinamização, incrementaram o teor de tanino entre 288 e 336 horas após a aplicação. Kalium phosphoricum e Calcarea carbonica foram os preparados homeopáticos que promoveram maior aumento no teor de tanino das folhas de Porophyllum ruderale quando comparados à testemunha. A aplicação de homeopatia nas plantas de couve-cravinho destinadas a alimentação humana reduz o teor de tanino, diminui a adstringência e aumenta a palatabilidade das folhas. Por outro lado, o uso de preparados homeopáticos que incrementam o teor de compostos fármaco-ativos, inclusive o tanino, interessa ä fitoterapia. A caracterização isoenzimática tem sido usada na abordagem inicial da diversidade de populações geneticamente pouco estudadas como Porophyllum ruderale, quanto a identificação de acessos/genótipos/variedades. O objetivo do trabalho foi caracterizar isoenzimaticamente e fitoquímicamente (quanto ao teor de óleo essencial e de tanino) seis acessos de Porophyllum ruderale. As plantas foram obtidas à partir de sementes colhidas nos municípios de Viçosa (MG), Goianá (MG), Coronel Pacheco (MG), Barra do Garça (MT), Rio Verde (GO) e Jaboticabal (SP). O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado e o tanino foi extraído pelo método recomendado pela AOAC. Os teores de óleo e de tanino não diferiram significativamente entre os acessos. Foram aplicados os seguintes sistemas isoenzimáticos: chiquimato desidrogenase (SKDH), isocitrato desidrogenase (IDH) e malato desidrogenase (MDH), na eletroforese em gel de amido. As amostras de tecidos radiculares e foliares foram coletadas de plantas adultas (aproximadamente 90 dias após a semeadura). Houve variação no número, na espessura e na intensidade de coloração das bandas nos três sistemas avaliados, sendo o sistema SKDH o que melhor separou os acessos. Ocorreram variações entre indivíduos do mesmo acesso, indicando que Porophyllum ruderale, como a maioria das plantas medicinais espontâneas, possui grande variabilidade genética devido ao fato de crescer em ambientes variados e ter reprodução sexuada. As espécies do gênero Porophyllum são amplamente utilizadas na medicina popular da América do Sul e Central, no entanto, poucas têm sido estudadas quimicamente, como é o caso da couve-cravinho. Sendo assim, o objetivo do trabalho foi identificar os constituintes químicos presentes nas folhas de Porophyllum ruderale por meio da triagem fitoquímica. Foi feita a cromatografia em camada delgada (CCD), os extratos foram preparados a partir da amostra vegetal seca e triturada, visando a identificação de alcalóides, polifenóis, flavonóides, taninos, antraquinonas, cardiotônicos, saponina, cumarina, antranóides e terpenos. Verificou-se nas amostras de Porophyllum ruderale analisadas a presença dos seguintes metabólitos secundários: flavonóides (rutina e provavelmente quercetina), taninos (dentre eles o ácido gálico), cumarinas, esteróides e terpenos (dentre eles o terpinol). / Porophyllum ruderale (asteraceae) is a ruderal aromatic herb also known as couve- cravinho. In popular medicine it is used in cicatrizing, anti-inflammatory, anti- fungicide, anti-bacterial and anti-stress treatments, to combat arterial hypertension and additionally in the treatment of leishimaniose, trauma, and snake bite, and for relief of rheumatic and general pain. The cicatrizing effect has been identified as being as a result of the presence of various phenolic composts, such as tannin.The objective of this study was to analyse the anatomy of the root, stem, and leaves of couve-cravinho and the location of the phenolic and lipidic composts. Five cultivated plants were picked during their pre-blossoming phase and fixed in either FAA50 or in a solution of ferrous sulphate in formalin (for observation of the phenolic composts) with respect to the root, stem, and leaves. Laminates were obtained using the usual methodology.The roots are tetrahedral and can be seen to develop an early secondary structure with cortex ducts. These were also present in the stem although only in young samples was the reaction of the phenol compost positive. In the leaves were observed ducts could be identified and were delimitated with respect to the differing layers of epithelial cells. These reacted positively, indicating the presence of lipidic and phenolic composts. As such it can be concluded that the ducts are most likely responsible for the secretion of tannin. Micotic infection of skin, nails and hair is common in many countries. Fungi such as dermatophytes may cause chronic infection and demand lengthy treatment involving expensive antimicotic drugs (and these are often ineffective). The use of plants in the treatment of skin disease is an ancient and established practice. Nevertheless scientific study is vital if medicinal effects are to be confirmed. In popular therapeutic treatment Porophyllum ruderale is utilized as an antifungal treatment. The essential oils and tannins from the leaves have an inhibitory effects on bacteria and fungi. The objective of this experiment was verify “in vitro” the antifungal effects of leaf extracts from Porophyllum ruderale on the above mentioned dermatophytes (Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum) and candida species (Candida albicans, Candida krusei and Candida parapsilosis). The leaves utilized in the preparation of the metanolic extracts were collected from cultivated plants in their pre-blooming phase, dried at room temperatures and powdered. The extracts were filtered, weighed, concentrated, dissolved in 5 mL of dimethyl sulphoxid (DMSO), diluted (0, 1 ,2 , 3, 4, 6, 8, and 10 mg/mL) and added to a culture of the subject micro-organisms. It was found that the 8 and 10 mg/mL concentrations of metanolic extract reduced the T. rubrum colony growth but not the candida growth. The 3 mg/mL concentration reduced significatively the T. mentagrophytes colony growth when compared with control tests. It can be concluded that there is evidence that couve-cravinho plants contain effective antimicotic proprieties in the treatment of infections caused by T. mentagrophytes and T. rubrum, thus validated the popular use of this species in traditional medicine. The use of herbs and plants in homeopathic medicine was first realized in the agricultural community and has shown many medicinal benefits, emphasing that the obtaining of plants free of residue is important in the use of plants within medicine. The objective of the experiment was to determine the response of plants to homeopathic preparations irrespective of the level of tannin in the leaves and roots. The experiment was undertaken in casualized blocks with a repetition of tree subjects and controls, and submitted to different levels of analysis and regression. The homeopathies at both high and low levels of dynamization show significative effects in the yields of tannin from Porophyllum ruderale leaves and roots, with these yields both decreasing and increasing. Silicea (CH5) and sulphur (C200) applied in ten day intervals decreased the yield of tannin in leaves when compared with control tests. The unique application of sulphur, natrum muriaticum, kalium phosphoricum and calcarea carbonica, all of them in CH4 dynamization, increased tannin yields during the period between 240 and 288 hours after application while silicea and magnesia carbonica, both in CH4 dynamization, increase tannin yields during the period between 288 and 336 hours after application. Kalium phosphoricum and calcarea carbonica was the homeopathy prepared that created the greatest increase in tannin yields from Porophyllum ruderale leaves when compared with control tests. The application of homeopathy to couve- cravinho plants intented for human alimentation can decrease tannin yields, the astringence of the plants and increase the palatability of leaves. On the other hand, the use of homeopathic preparations with increased pharmaco-active compounds such as tannin is of great interest to phytotherapy. The isoenzimatic characteristics of the plant have been used in initial approaches towards identifying the diversity of lesser studied genetic populations and groupings of Porophyllum ruderale in order to identify different genotypes and varieties. The objective of this study was to identify the isoenzimatic and phytochemical (essential oil and tannin) characteristics of six varieties of Porophyllum ruderale. The plants were obtained from seeds collected in Viçosa (MG), Goiana (MG), Coronel Pacheco (MG), Barra do Garça (MT), Rio Verde (GO) and Jaboticabal (SP). The essential oil was extracted by the modified instrument Clevenger and tannin was extracted using the AOAC recommended methods. The amount of oil and tannin do not differ significantly between varieties. The following izoenzimatic systems were applied: desidrogenase shiquimate (SKDH), desidrogenase isocitrate (IDH) and desidrogenase malate (MDH) in the gel electrophoresis of starch. The vegetal tissue (root and leaf) sample was collected from adult plants (approximately 90 days after seeding). There was some variation in the number, thickness and intensity of color bands in tree tested systems and the SKDH system was the one that was found to best separate differing varieties. There was some variation between individuals of the same type indicating that Porophyllum ruderale, as the most spontaneous of the medicinal plants, has significant genetic variability due to growing in different kind of environments and methods of sexual reproduction. The species of the genus porophyllum are extensively utilized in popular medicine throughout South America and Central America however few (such as couve-cravinho) of these species have been chemically studied. Therefore the objective of this study was to identify the chemical compounds present in Porophyllum ruderal leaves through phytochemical screening. This was done by way of thin layer chromatography (CCD), the extracts were prepared from vegetal samples, were dried and powdered, in order to identify alkaloids, phenols, flavonoids, tannins, quinones, cardiac glycosides, saponins, coumarins, antranoid and terpene. It was verified that the analysed samples of Porophyllum ruderale have some secondary metabolites: flavonoids (rutine and quercetine), tannins (among them gallic acid), coumarins, steroids and terpenes (among them terpinol).

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-03-29T14:20:47Z No. of bitstreams: 1 marcia_xg_rocha_ioc_mt_0013_2011.pdf: 3336146 bytes, checksum: 11a90a4e3dcfc5cc6e0dc5fb85018b79 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-29T14:20:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcia_xg_rocha_ioc_mt_0013_2011.pdf: 3336146 bytes, checksum: 11a90a4e3dcfc5cc6e0dc5fb85018b79 (MD5) Previous issue date: 2011-05-31 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Apesar de o Brasil ter recebido o certificado internacional de interrupção de transmissão vetorial da doença de Chagas em 2006 pela Comissão Intergovernamental do Cone Sul, esta via continua sendo muito importante na transmissão da doença de Chagas e portanto estudos focando o vetor são de extrema importância. No Brasil, especialmente o Estado de Pernambuco apresenta elevados índices de infestação domiciliar por triatomíneos do complexo Triatoma brasiliensis. Nesse Estado foi registrada a presença de T. brasiliensis macromelasoma infestando vários ecótopos artificiais e naturais. Costa e col. (2009a) sugerem que em Pernambuco pode haver uma área de hibridação natural de membros do complexo T. brasiliensis o que poderia gerar uma alta variabilidade fenotípica nessa área. Devido aos elevados índices de infestação domiciliar, o relato de casos crônicos da doença de Chagas e a possível existência de fenótipos intermediários no Estado de Pernambuco, foram realizadas capturas de triatomíneos em ecótopos domiciliares, peridomiciliares e silvestres em 10 localidades (Afrânio, Aguas Belas, Bodocó, Cabrobó, Iatí, Lagoa Grande, Ouricuri, Petrolina, Salgueiro, Sertânia) de três das cinco áreas fisiogeográficas. Os exemplares coletados foram caracterizados quanto ao padrão cromático pela técnica de morfometria geométrica e percentagem de positividade para T. cruzi – like através do exame de gotas de fezes observadas ao microscópio óptico. Também foram avaliadas as possíveis fontes alimentares através do teste de ELISA. A técnica de isoenzimas foi empregada na tentativa de se observar possíveis híbridos coletados no Estado. Entre os principais resultados destaca-se o encontro de 13 diferentes espécimes no Estado de Pernambuco, classificados qualitativamente em relação ao padrão de coloração do tórax, cabeça e pernas. De 180 insetos observados somente um espécime macho pertencendo ao padrão bras escuro apresentou o parasito T. cruzi pela microscopia ótica. A análise das possíveis fontes alimentares, feita através do teste imuno-enzimático ELISA evidenciou que esses insetos se alimentavam principalmente de sangue de aves e roedores. Em relação aos resultados morfométricos, foi possível observar que os espécimes com diferentes padrões de coloração mostram proximidade morfológica e possivelmente genética com T. b. macromelasoma e T. b. brasiliensis. No entanto, utlilizando a técnica das isoenzimas não encontramos polimorfismos nos diferentes loci examinados. Os diversos fenótipos encontrados e as correlações entre T. b. macromelasoma e T. brasiliensis corroboram a idéia de que no Estado de Pernambuco existe uma área de hibridação natural entre os membros do complexo T. brasiliensis. As implicações epidemiológicas relacionadas aos diferentes padrões cromáticos encontrados deverão ser investigadas principalmente, com relação à suscetibilidade ao T. cruzi e índices de infestação domiciliar. / ABSTRACT In spite of having received the international certification of combat against vectorial transmission of Chagas disease in 2006, Brasil still faces problems with this way of transmission and any effort in this regard is appreciated. The state of Pernambuco presents highly domestic infestation indexes by triatomines from the T. brasiliensis complex. The presence of T. b. macromelasoma has been detected infesting diverse artificial and natural ecotopes. In this regard, Costa et al. (2009a) have suggested that in this area, a natural hybridization of Triatoma brasiliensis complex might be taking place that would lead as a result to an increase of the phenotypic variability. Due to high indexes of domestic infestation, the report of chronic cases of the disease and the suspect presence of intermediate phenotypes in the state of Pernambuco, a series of collects of triatomíneos took place in domestic, peri-domestic and sylvatic ecotopes in three out of five physiogeographic areas of the state. The specimens were characterized through geometric morphometric techniques according to the chromatic pattern and examined for T. cruzi infection by microscopical observation. Later, possible food-source were analyzed by ELISA tests and finally isoenzimatic procedures were used to identify the presence of possible hybrids collected in Pernambuco. Among principal results, we can highlight thirteen different phenotypes qualitatively classified according to the thorax, head and legs chromatic pattern. From 180 studied insects, only in one male belonging to bras escuro pattern T. cruzi parasite was observed by optical microscopy. The analysis of possible food source by ELISA test showed that these insects fed mainly from birds and rodents blood. Morphometric analysis allowed us to observe that specimens with different chromatic pattern have morphological closeness and possibly genetic proximity with T. b. macromelasoma and T. b. brasiliensis. On the contrary, with isoenzimatic procedures we didn`t found any polymorphism in any loci studied. The diverse phenotypes found in the state of Pernambuco and the correlations evidenced with T. b. macromelasoma and T. b. brasiliensis support the idea that in this state exist an area of natural hybridization between members of T. brasiliensis complex. The epidemiologic implications of different chromatic patterns should be further investigated in relation to the susceptibility to T. cruzi and the index of domestic infestation.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:40:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) carlota_belisario_ioc_mest_2006.pdf: 1121044 bytes, checksum: 25daf8af9a2ba2cbded57e0f1f900c58 (MD5) Previous issue date: 2014-10-07 / Devido às suas grandes semelhanças morfológicas, Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata, que constituem para Carcavallo et al. (2000) o ´complexo maculata`, eram consideradas a mesma espécie até 1964 (Corrêa e Espínola, 1964). Essas espécies são alopátricas e, segundo Schofield (1988), T. maculata teria sido introduzida no Nordeste brasileiro por aves migratórias, com subseqüente especiação, e formação da espécie T. pseudomaculata. Estudos utilizando isoenzimas demonstraram grande distância genética entre as duas espécies e grande proximidade entre T. pseudomaculata e Triatoma wygodzinsky, com subseqüente proposta de reestruturação do ´complexo maculata`(Santos et al., 2003) Os estudos de cruzamentos entre em triatomíneos permitem a formulação de hipóteses acerca da origem e divergência de espécies e podem ajudar a entender a sistemática do grupo. O objetivo deste trabalho é determinar o grau de isolamento reprodutivo entre T. maculata e T. pseudomaculata, e caracterizar geneticamente as espécies e os híbridos obtidos pelos cruzamentos interespecíficos, permitindo o cotejamento de aspectos genéticos com características biológicas e comportamentais destes insetos. Os nossos resultados mostram que T. maculata e T. pseudomaculata não apresentam diferenças quanto à reprodução e são espécies que se cruzam produzindo híbridos inférteis. Os resultados dos cruzamentos intra e interespecíficos, da morfologia, da morfometria geométrica e da análise de RAPDs mostram T. maculata e T. pseudomaculata como espécies bem diferenciadas Os híbridos obtidos são mais semelhantes morfologicamente à T. maculata, entretanto, geneticamente estão mais próximos à T. pseudomaculata. T. wygodzinsky e os híbridos obtidos com estas espécies foram os que se apresentaram mais distantes dos demais grupos estudados. Os resultados indicam que independentemente de uma origem evolutiva comum entre essas três espécies, atualmente elas estão bastante diferenciadas geneticamente e não devem, portanto, constituir complexo entre elas / Due to its great morphological similarities, Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata , classified by Carcavallo et al. (2002) in the “maculata complex”, were considered the same species until 1964 (Corrêa e Espínola, 1964). These species are alopatric and, according to Schofield (1988), T. maculata would be introduced in the brazilian Northeastern by migratory birds, with subsequent speciation, forming the species T. pseudomaculata . Studies using isoenzymes showed great genetic distance among these two species and high affinity among T.pseudomaculata and Triatoma wygodzinsky , resulting in a new proposal of ́ maculata complex ` re-organization (Santos et al, 2003). Hybridization studies in Triatomines allo w the formulation of hypothesis about the origin and divergence of species and may help to understand the systematic of the group. Therefore, the objective of this work was to determine the level of reproductive isolation among T. maculata and T. pseudomaculata , and to characterize genetically the species an d hybrids obtained by the interspecific cross breeding, allowing the comparison of genetic aspects with other biological characteristics and behavior of these insects. T. maculata and T. pseudomaculata did not present difference in relation to the reproduction (eggs laid, time for eclosion and viability of the eggs) and are able to produce hybrids, but infertiles. The results obtained with the intra and interspecific cross breeding, morphological analysis, geometric morphometry and RAPDs showed T. maculata and T. pseudomaculata as well differentiated species. The hybrids obtained are morphologically more similar to T. maculata , but are genetically more close to T. pseudomaculata. T.wygodzinsky and the hybrids obtained with these species were the most distant from the other st udied groups. Our results indicate that, independent of the existence or not of a common evolutive origin among these species at present they are already genet ically well differentiated and would not constitute a complex

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-04-18Bitstream added on 2014-06-13T19:13:01Z : No. of bitstreams: 1 amaral_al_me_jabo.pdf: 755163 bytes, checksum: 38fef006637923d725907da11533302e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos laboratoriais foram realizados com o objetivo de estudar a caracterização genética de plantas de Euphorbia heterophylla, provenientes de áreas em que a resistência aos herbicidas inibidores da ALS (Acetolactase) estava caracterizada (Santo Ângelo, RS), em processo de desenvolvimento (Sonora, MS) e onde nunca havia sido aplicado herbicida com este mecanismo de ação (Jaboticabal, SP). Testes preliminares comprovaram elevada resistência para as plantas provenientes de Santo Ângelo, moderada resistência para plantas de Sonora e elevada susceptibilidade para plantas provenientes de Jaboticabal. A análise dos resultados através das isoenzimas revelou que existem pequenas diferenças entre as três populações estudadas. A análise do DNA dos indivíduos das diferentes populações através de marcadores moleculares RAPD, permitiu a construção do Dendrograma de Cluster, que mostra uma similaridade mínima de 88% e máxima de 99% entre os diferentes indivíduos, quer pertencentes à mesma população, quer pertencentes às diferentes populações. Tal análise permitiu inferir que, apesar dos indivíduos analisados mostrarem grande similaridade entre si, apresentam variabilidade genética entre os indivíduos e as populações estudadas, de acordo com a conclusão obtida quando da utilização das isoenzimas. Crescendo em condições similares, o biótipo da Santo Ângelo apresentou maior absorção de fósforo em comparação com os demais, e maior absorção de potássio em relação ao biótipo de Jaboticabal. Comparando a densidade estomática, houve diferença estatística entre os três biótipos, sendo maior para o biótipo mais tolerante ao herbicida e menor para o susceptível. Não foi possível estabelecer qualquer relação confiável entre as características morfológicas e de crescimento das plantas e a resistência ao imazethapyr. / Laboratory studies were carried out aim to characterize genetically Euphorbia heterophylla plants were collect in three regions. At Santo Ângelo (RS) region this plant is highly resistant to ALS inhibitors herbicides, but moderately at Sonora (MS) and susceptible at Jaboticabal region. Greenhouse tests confirmed the plants reaction in face of imazethapyr spraying. The isoenzymes studies showed small differences between the three populations. The DNA analysis using molecular markers make feasible the Cluster dendrogram showing 88-99% of similarity comparing plants, regardless the plant origin. Besides the high similarity index between the plants, it was possible to determine lower genetic variation in Jaboticabal and Santo Ângelo populations using isoenzymes technique. The nitrogen and potassium contents in the plants shoot was higher in the Santo Ângelo byotipe, although there was no difference between the K contents when the Jaboticabal and Sonora byotipes were compared. The stomata and trichomes densities decreased in the same order of the plant tolerance to herbicide: Santo Ângelo > Sonora > Jaboticabal. None correlation between biotype resistance to imazethapyr and the plant morphology features for the three biotypes studied. The differences in the plant feature may be attributable to the adaptative mechanism of the plant to the regional characteristics they were collected.