Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-14Bitstream added on 2014-06-13T19:08:51Z : No. of bitstreams: 1 delfino_db_me_araiq.pdf: 1550804 bytes, checksum: e3a406c927290ba804d64ea65eb89c6c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho descreve a síntese de peptídeos em fase sólida (SPFS) derivados de toxinas bacterianas, tais como CcdB e ParE, e a produção de sistemas nanoestruturados como lipossomas e microemulsões. As toxinas intracelulares, produzidas por sistemas de morte pós-segregacional (PSK) em bactérias são exemplos recentes de agentes inibidores de enzimas fundamentais para a reprodução do microrganismo. Resultados promissores foram obtidos em relação a inibição da atividade da DNA girase, por derivados peptídicos destas duas proteínas. In vitro, os valores de concentração inibitória têm sido abaixo de 5 μmol.L-1, porém ensaios in vivo não demonstraram reprodutibilidade, basicamente devido à baixa permeabilidade da membrana bacteriana a estes derivados. Desta forma, foram produzidos lipossomas e microemulsões com o objetivo de promover o acesso de moléculas peptídicas sintéticas, derivadas do CcdB e ParE, ao meio intracelular e, conseqüentemente, aos seus alvos: DNA girase ou topoisomerase IV. Lipossomas do tipo SUV (small unilamellar vesicles) foram preparados por extrusão a partir de fosfatidilcolina de soja e estearilamina e mostraram uma eficiência de encapsulação de 77% e inibiram o crescimento tanto de bactéria Gram positiva quanto Gram negativa em 58 e 75%, respectivamente. Sistemas microemulsionados a base de fosfatidilcolina de soja, Tween 20, etanol e ácido oléico apresentaram uma incorporação do peptídeo acima de 90% e a formulação com 15% de ácido oléico e CcdBET2 a 4 μmol.L-1 apresentou uma inibição do crescimento de bactéria Gram negativa de 75,5%. O diâmetro dos lipossomas foi medido por espalhamento dinâmico de luz e as microemulsões foram caracterizadas por microscopia de luz polarizada e sua viscosidade determinada por reologia. Portanto, lipossomas e microemulsões podem ser utilizados como sistemas de drug delivery para análogos peptídicos derivados do CcdB e do ParE / This work describes the synthesis of peptides derived from bacterial toxins, such as CcdB and ParE, by solid phase peptide synthesis (SPPS) and the production of nanostructured systems such as liposomes and microemulsions. Intracellular toxins produced by systems of killer post-segregational (PSK) in bacteria are recent examples of inhibitors of key enzymes for the reproduction of the microorganism. Promising results were obtained for the inhibition of DNA gyrase activity by peptide derivatives of these proteins. In vitro, the IC100 values have been below 5 μmol.L-1, but not demonstrated in vivo reproducibility, mainly due to the low permeability of the bacterial cell to these derivatives. Thus, the aim with this work was develop of liposomes and microemulsions to promote access of synthetic peptide molecules derived from the CcdB and ParE, to the intracellular medium and consequently to their targets: DNA gyrase and topoisomerase IV. Liposomes SUV type (small unilamellar vesicles) were prepared by extrusion from soybean phosphatidylcholine and estearilamina and showed an encapsulation efficiency of 77% and inhibited the growth of both Gram positive and Gram negative in 58 and 75% respectively. Microemulsion systems based soybean phosphatidylcholine, Tween 20, ethanol and oleic acid showed an incorporation of the peptide above 90% and the specific formulation with 15% oleic acid and the 4 μmol.L-1 CcdBET2 incorporate showed a growth inhibition of Gram negative of 75.5%. The diameter of liposomes was measured by dynamic light scattering and microemulsions were characterized by polarized light microscopy and its viscosity determined by rheology. Therefore, liposomes and microemulsions may be used as drug delivery systems for peptide analogues derived from the CcdB and ParE

Dysregulated microRNAs in osteoclasts could cause many skeletal diseases. The therapeutic manipulation of these pathogenic microRNAs necessitates novel, efficient delivery systems to facilitate microRNAs modulators targeting osteoclasts with minimal off-target effects. Bone resorption surfaces characterized by highly crystallized hydroxyapatite are dominantly occupied by osteoclasts. Considering that the eight repeating sequences of aspartate (D-Asp8) could preferably bind to highly crystallized hydroxyapatite, we developed a targeting system by conjugating D-Asp8 peptide with liposome for delivering microRNA modulators specifically to bone resorption surfaces and subsequently encapsulated antagomir-148a (a microRNA modulator suppressing the osteoclastogenic miR-148a), i.e. (D-Asp8)-liposome-antagomir-148a. Our results demonstrated that D-Asp8 could facilitate the enrichment of antagomir-148a and the subsequent down-regulation of miR-148a in osteoclasts in vivo, resulting in reduced bone resorption and attenuated deterioration of trabecular architecture in osteoporotic mice. Mechanistically, the osteoclast-targeting delivery depended on the interaction between bone resorption surfaces and D-Asp8. No detectable liver and kidney toxicity was found in mice after single/multiple dose(s) treatment of (D-Asp8)-liposome-antagomir-148a. These results indicated that (D-Asp8)-liposome as a promising osteoclast-targeting delivery system could facilitate clinical translation of microRNA modulators in treating those osteoclast-dysfunction-induced skeletal diseases.

O uso da nisina como conservante natural tem aumentado cada vez mais, assim como os estudos para aprimorar o uso desta. Este trabalho visa o aumento da eficiência da nisina na inibição de microorganismos, como a Listeria, através da encapsulação da mesma na forma de nanolipossomas com incorporação de polissacarídeos. Foram testados nanolipossomas de nisina e nanolipossomas de nisina com incorporação de quitosana e incorporação de sulfato de condroitina. As análises mostraram que estes lipossomas tiveram a mesma eficiência que a nisina livre na inibição da L. monocytogenes 4b* e da Listeria sp.* e uma maior eficiência na inibição da L. monocytogenes 4b ATCC 6477. As análises de potencial zeta indicaram que os lipossomas de nisina com e sem incorporação de polissacarídeos possuem carga em torno de -20mV e estes apresentaram estruturas esféricas e não esféricas quando observados através de TEM. Apesar dos nanolipossomas de nisina com incorporação de quitosana apresentarem uma eficiência de encapsulaçãos mais baixa, em torno de 10%, estes tiveram maior estabilidade e também maior eficiência na inibição da Listeria monocytogenes ATCC 7644, quando comparados aos nanolipossomas de nisina com e sem incorporação de sulfato de condroitina, no tempo final de 24h a redução obtida foi de 2 log comparando-se com os demais tratamentos e de 7 log comparando-se aos controles. / The use of nisin, as a natural preservative, has increased, as well as studies to enhance the use of that. The aim of this study is to increase the efficiency of nisin in inhibition of microorganisms such as Listeria, by encapsulating as nanolipossomes incorporated with polysaccharides. Nisin nanoliposomes and nisin nanoliposomes with incorporation of chitosan and chondroitin sulfate were analysed. The analyzes showed that these liposomes had the same efficiency as free nisin in inhibiting L. monocytogenes 4b and Listeria sp., both isolated from bovine carcass, and greater efficiency in inhibiting L. monocytogenes 4b ATCC 6477. The zeta potential analyzes indicated that nisin liposomes with and without incorporation of polysaccharides have a load around -20mV and these showed spherical and nonspherical structures when observed through TEM. Despite of the efficience of nisin nanoliposomes incorporating chitosan present lower values of encapsulation efficiency, around 10%, they were more stable and also more efficient in inhibiting Listeria monocytogenes ATCC 7644 compared to nisin nanoliposomes with and without incorporation of chondroitin sulfate. In the final time of 24 hours the reduction obtained was 2 log compared with the other treatments and 7 log comparing to the controls.

abstract: To mimic the membrane environment for the photosynthetic reaction center of the photoheterotrophic Heliobacterium modesticaldum, a proteoliposome system was developed using the lipids found in native membranes, as well as a lipid possessing a Ni(II)-NTA head group. The liposomes were also saturated with menaquinone-9 to provide further native conditions, given that menaquinone is active within the heliobacterial reaction center in some way. Purified heliobacterial reaction center was reconstituted into the liposomes and a recombinant cytochrome c553 was decorated onto the liposome surface. The native lipid-attachment sequence of cytochrome c553 was truncated and replaced with a hexahistidine tag. Thus, the membrane-anchoring observed in vivo was simulated through the histidine tag of the recombinant cytochrome binding to the Ni(II)-NTA lipid's head group. The kinetics of electron transfer in this system was measured and compared to native membranes using transient absorption spectroscopy. The preferential-orientation of reconstituted heliobacterial reaction center was also measured by monitoring the proteoliposome system's ability to reduce a soluble acceptor, flavodoxin, in both whole and detergent-solubilized proteoliposome conditions. These data demonstrate that this proteoliposome system is reliable, biomimetic, and efficient for selectively testing the function of the photosynthetic reaction center of Heliobacterium modesticaldum and its interactions with both donors and acceptors. The recombinant cytochrome c553 performs similarly to native cytochrome c553 in heliobacterial membranes. These data also support the hypothesis that the orientation of the reconstituted reaction center is inherently selective for its bacteriochlorophyll special pair directed to the outer-leaflet of the liposome. / Dissertation/Thesis / Masters Thesis Chemistry 2018

O uso da nisina como conservante natural tem aumentado cada vez mais, assim como os estudos para aprimorar o uso desta. Este trabalho visa o aumento da eficiência da nisina na inibição de microorganismos, como a Listeria, através da encapsulação da mesma na forma de nanolipossomas com incorporação de polissacarídeos. Foram testados nanolipossomas de nisina e nanolipossomas de nisina com incorporação de quitosana e incorporação de sulfato de condroitina. As análises mostraram que estes lipossomas tiveram a mesma eficiência que a nisina livre na inibição da L. monocytogenes 4b* e da Listeria sp.* e uma maior eficiência na inibição da L. monocytogenes 4b ATCC 6477. As análises de potencial zeta indicaram que os lipossomas de nisina com e sem incorporação de polissacarídeos possuem carga em torno de -20mV e estes apresentaram estruturas esféricas e não esféricas quando observados através de TEM. Apesar dos nanolipossomas de nisina com incorporação de quitosana apresentarem uma eficiência de encapsulaçãos mais baixa, em torno de 10%, estes tiveram maior estabilidade e também maior eficiência na inibição da Listeria monocytogenes ATCC 7644, quando comparados aos nanolipossomas de nisina com e sem incorporação de sulfato de condroitina, no tempo final de 24h a redução obtida foi de 2 log comparando-se com os demais tratamentos e de 7 log comparando-se aos controles. / The use of nisin, as a natural preservative, has increased, as well as studies to enhance the use of that. The aim of this study is to increase the efficiency of nisin in inhibition of microorganisms such as Listeria, by encapsulating as nanolipossomes incorporated with polysaccharides. Nisin nanoliposomes and nisin nanoliposomes with incorporation of chitosan and chondroitin sulfate were analysed. The analyzes showed that these liposomes had the same efficiency as free nisin in inhibiting L. monocytogenes 4b and Listeria sp., both isolated from bovine carcass, and greater efficiency in inhibiting L. monocytogenes 4b ATCC 6477. The zeta potential analyzes indicated that nisin liposomes with and without incorporation of polysaccharides have a load around -20mV and these showed spherical and nonspherical structures when observed through TEM. Despite of the efficience of nisin nanoliposomes incorporating chitosan present lower values of encapsulation efficiency, around 10%, they were more stable and also more efficient in inhibiting Listeria monocytogenes ATCC 7644 compared to nisin nanoliposomes with and without incorporation of chondroitin sulfate. In the final time of 24 hours the reduction obtained was 2 log compared with the other treatments and 7 log comparing to the controls.

Orientadores : Maria Helena Andrade Santana, Ricardo de Lima Zollner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-29T06:07:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanin_MariaHelenaAmbrosio_D.pdf: 3129739 bytes, checksum: 3bf129235472299864d6a448f93f8cab (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A importância farmacológica dos gangliosídios tem crescido nos últimos anos devido à identificação desses compostos como antígenos, produzindo anticorpos antigangliosídios que podem estar envolvidos em algumas doenças autoimunes ou neuropatias. Os estudos na literatura dos gangliosídios abrangem desde suas propriedades e funções nas membranas neuronais assim como a sua farmacologia no sistema nervoso central, quando injetados na forma pura em animais e humanos. Entretanto, o estudo de seus efeitos no sistema imunológico, quando associados aos lipossomas, ainda é escasso, o que motivou o desenvolvimento dessa pesquisa. Este trabalho compreendeu a preparação e caracterização de lipossomas multilamelares compostos de dipalmitoilfosfatidilcolina, colesterol, dihexadecilfosfato e gangliosídios, monossialogangliosídio (GM1) e Mist (mistura de GM1 21%, dissialogangliosídio (GD1a) 40%, dissialogangliosídio (GD1b) 16%, trissialogangliosídio (GT1b) 19%) e avaliação do efeito imunológico destes lipossomas quando injetados em camundongos. Os animais testados foram camundongos do tipo Balb/c, os quais receberam seis doses de lipossomas a cada duas semanas, perfazendo um total de doze semanas. Após este período os animais foram sacrificados e seus soros submetidos a testes ELlSA para avaliação da produção de anticorpos antigangliosídios, classes IgM e IgG. Em termos de significância estatística os lipossomas livres de gangliosídios e os associados à Mist não apresentaram imunogenicidade e alguns soros de animais tratados com lipossomas associados ao GM1 apresentaram algumas classes de imunoglobulinas. Porém, em termos de avaliação para diagnóstico de anticorpos, todas as formulações foram consideradas não imunogênicas quando considerada as unidades arbitrárias / Abstract: The pharmacological importance of gangliosides has increased in the last few years due to the identification of these compounds as antigens, producing antiganglioside antibodies, which may be involved in autoimmune diseases or neuropathy. Studies in ganglioside literature encompass their properties and functions in the neuronal membranes as well as their pharmacology in the central nervous system upon injection in pure ganglioside form in animais and humans. However, as associated to the liposomes, the studies of their effects on the immunological system are still scarce, which motivated the development of this research. This work includes the preparation and characterization of multilamellar liposomes consisting of dipalmitoyl phosphatidyl choline, cholesterol, dihexadecylphosphate and gangliosides, monosialoganglioside (GM1) and Mist (mixture of GM1 21%, disialoganglioside (GD1a) 40%, disialoganglioside (GD1b) 16%, trisialoganglioside (GT1b) 19%) and evaluation of immunologic effect of hese liposomes as administered in mice. The animais tested were Balb/c mice, which were treated with six liposome doses at 2 week-intervals during twelve weeks. After this period the animais were sacrificed and their sera were assayed by ELlSA tests in order to evaluate the production of antiganglioside antibodies of IgM and IgG classes. With respect to the statistical significance, the liposomes without gangliosides and the ones associated to the Mist were non immunogenic and some of animal sera, which were treated with liposomes associated to the GM1, showed some Immunoglobulin classes. H oweve r, in terms of evaluation of the antibody diagnostic, ali of liposome formulations were considered non immunogenic in regard to the arbitrary units / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Doutor em Engenharia Química

Orientador: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-14T22:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brescansin_EdeilzaGomes_D.pdf: 1646931 bytes, checksum: 9e5e045b99495a199511f36621650953 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: No presente trabalho, buscamos desenvolver formulação lipossomal sistêmica de nistatina (NYS) com o propósito de aplicações futuras na terapêutica de micoses sistêmicas, que tanto afligem indivíduos imunodeprimidos. Na primeira parte do projeto caracterizamos o fármaco através de análises térmicas (TGA e DSC), análises espectroscópicas (IV, UV e fluorescência), teste de solubilidade, avaliação da umidade segundo o método de Karl-Fischer e coeficiente de partição octanol/meio aquoso. Na segunda parte do trabalho procuramos desenvolver e otimizar formulações lipossomais, onde o fármaco apresentasse maior estabilidade química. Foram preparadas formulações lipossomais pelo método do filme lipídico que foram analisadas por HPLC. As preparações passaram por processo de diminuição de tamanho e separação entre fármaco livre e encapsulado. A terceira e última fase do projeto consistiu da caracterização de duas preparações, através de análises do raio hidrodinâmico, determinação da carga de superfície das partículas (potencial zeta), teor de fosfolipídios totais (teor de fosfato), eficiência e avaliação da encapsulação por análises de HPLC, anisotropia e supressão de fluorescência. Ainda na fase de caracterização investigamos a atividade biológica in vitro, destas formulações, pelo teste de susceptibilidade. As preparações foram desafiadas contra leveduras e dermatófitos. Pela seleção e otimização das formulações desenvolvidas concluímos que a melhor formulação foi a que apresenta uma composição de 70 % de Epikuron 200 SH; 20 % de Colesterol; 10 % de Diestearoilfosfatidilglicerol, 1,3 % de 2,6 - bis (1,1-dimetil) - 4 - metil fenol (BHT) e 7 % de NYS. Duas preparações foram caracterizadas L1 (hidratada a 55°C) e L2 (hidratada a 60°C). Os resultados para anisotropia e supressão de fluorescência evidenciam a encapsulação do fármaco nas preparações estudadas, tanto na bicamada lipídica quanto na superfície dos lipossomas. Verificamos também que L2 apresentou menor polidisperdidade de seu raio hidrodinâmico, maior carga de superfície e maior eficiência de encapsulação, evidenciando ser L2 a preparação, físico-quimicamente, mais estável. Todavia, a preparação L1 mostrou, após sonicação, atividade biológica in vitro maior que L2. Estes resultados podem refletir a possível degradação do fármaco, quando aquecido a 60°C. / Abstract: This study was designed to develop liposomal formulations containing Nystatin (NYS), looking forward its future applications in systemic mycosis therapy, which often affect immunodepressed individuals. In the first part of the project, the drug was characterized by means of thermal analyses (TGA and DSC), IR, UV/V and fluorescence spectroscopies, solubility tests, humidity contents evaluation (Karl-Fischer method) and octanol-water partition coefficient. In the second part of the study, liposomal formulations were developed and optimized, in which the drug presented improved chemical stability. Liposomal formulations were prepared by the dry lipid film hydration method and were analyzed by HPLC. The vesicles were submitted to the processes of size reduction and separation of non encapsulated drug. The last part of the project consisted in the characterization of the two formulations by means of analysis of the is hydrodynamic radius; determination of the particles superficial charge (zeta-potential); total phospholipids content (phosphate); degree of NYS with encapsulation by HPLC; degree of anisotropy and fluorescence quenching of NYS. Still during the characterization phase, the in vitro biological activity of the formulations was investigated by means of susceptibility tests. The formulations were challenged against some yeasts and filamentous fungi. Conclusions pointed that the best formulation was the one which presented in its compositions 70% Epikuron 200 SH, 20% Cholesterol, 10 % Distearoylphosphatidylglycerol, 1.3 % 2,6 - bis (1,1-dimethylethyl) - 4 - methylphenol (BHT) and 7 % NYS. Two formulations were characterized: L1 (hydrates at 55°C) and L2 (hydrated at 60°C). Results regarding the degree of anisotropy and fluorescence quenching evidenced by NYS encapsulation at the liposomal lipid bilayers. Moreover, it was observed that L2 presented lower polydispersity in size distribution, higher superficial load and higher encapsulation effectiveness, i.e. L2 presented higher physico-chemical stability. Nevertheless the L1 preparation showed, after sonication, higher biological activity in vitro than L2, which might reflect possible thermal degradation of NYS when heated to 60°C. / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Orientadores: Francisco Carlos Groppo, Eneida de Paula, Maria Cristina Volpato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Berto_LucianaAranha_M.pdf: 906309 bytes, checksum: 403019290dd30869537a79a4ff2e7c34 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficácia anestésica de duas formulações lipossomais injetáveis de articaína (3% e 4%), em dois modelos animais: bloqueio do nervo infra-orbital (BNIO) e bloqueio do nervo alveolar inferior (BNAI). Para cada experimento, 48 animais foram divididos em 6 grupos (n=8), que receberam a injeção de uma das seguintes formulações, no lado direito: Grupo 1: articaína 4% com epinefrina 1:100,000; Grupo 2: articaína 3% lipossomal; Grupo 3: articaína 4% lipossomal; Grupo 4: articaína 4%; Grupo 5: articaína 3% e Grupo 6: lipossomas 4mM sem anestésico local. O lado contralateral recebeu NaCl 0,9% (controle). Para BNIO, 0,1 mL da preparação foi injetado próximo ao forame infra-orbitário. Foi avaliada a duração da anestesia em tecido mole por pinçamento vigoroso do lábio superior, a cada 5 minutos, até que fosse obtido o primeiro sinal de resposta aversiva, indicando o final da anestesia. Para BNAI, 0,2 mL da preparação foi depositado próximo ao forame mandibular e os parâmetros latência e duração da anestesia pulpar foram avaliados por estímulo elétrico. Os dados foram submetidos ao teste de ANOVA, com nível de significância 5%. Para duração de anestesia em tecido mole, os grupos 1, 2 e 3 não diferiram entre si (p>0,05) e promoveram duração maior que os grupos 4 e 5 (p<0,05). O grupo 1 obteve menor latência da anestesia pulpar que os grupos 2, 3, 4 e 5 (p<0,05), que não diferiram entre si (p>0,05). O grupo 1 apresentou a maior duração de anestesia pulpar, seguido pelos grupos 2 e 3. Com relação à duração da anestesia pulpar, não houve diferença entre os grupos 2 e 3 e entre os grupos 4 e 5 (p>0,05). Grupo 6 não obteve efeito anestésico. A encapsulação em lipossomas permitiu aumento na duração da anestesia da articaína quando comparada à solução pura. Entretanto, a solução de articaína 4% com epinefrina promoveu maior duração de anestesia pulpar que as formulações lipossomais. / Abstract: Liposome encapsulation has been found to enhance the clinical efficacy of local anesthetics. This study evaluated the anesthetic efficacy of two liposomal formulations of articaine (3% and 4%) by means of two animal models: infraorbital nerve block (IONB) and inferior alveolar nerve block (IANB) in rats. For each experiment, 48 animals were divided in 6 groups (n=8), which received the injection of one of the following formulations, in the right side: Group 1: 4% articaine with 1:100,000 epinephrine; Group 2: 4% liposomal articaine; Group 3: 3% liposomal articaine; Group 4: 4% articaine; Group 5: 3% articaine and Group 6: 4mM liposome. The left side received NaCl 0.9% (control). For the IONB, 0.1 mL of the tested formulation was injected near the rat infraorbital foramen. The duration of soft tissue anesthesia was evaluated by pinching the upper lip, every 5 minutes, until the first sign of aversive response was observed. For the IANB, 0.2 mL of the tested formulations was injected near the rat mandible foramen and the parameters onset and duration of pulpal anesthesia were evaluated by means of an electrical pulp tester. Data were submitted to ANOVA test and significance level was set at 5%. Concerning soft tissue anesthesia, groups 1, 2 and 3 showed similar duration (p>0.05) which were longer than that of the groups 4 and 5 (p<0.05). Group 1 showed the shortest onset of pulpal anesthesia (p<0.05) and there was no difference among groups 2, 3, 4 and 5 (p>0.05). Group 1 promoted longer duration of pulpal anesthesia (p<0.05) followed by groups 2 and 3. Concerning duration of pulpal anesthesia, no significant difference was found between groups 2 and 3 and groups 4 and 5 (p>0.05). Liposome encapsulation prolonged anesthetic effects of articaine when compared to plain solution. However, the epinephrine-containing solution showed longer pulpal anesthesia duration than liposomal formulations. / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Orientadores: Francisco Carlos Groppo, Maria Cristina Volpato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:45:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nolasco_FabianaPinchetti_M.pdf: 1683899 bytes, checksum: b9140ed1fab0d06207e5a084fc6ea01e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia anestésica das formulações: prilocaína 3% encapsulada em lipossomas unilamelares (Prilo-LUV, concentração lipídica 4mM), prilocaína 3% encapsulada em lipossomas multilamelares (Prilo-MLV, concentração lipídica 8mM) e prilocaína 3% com felipressina 0,03UI/mL (Prilo-Feli), em três modelos, bloqueio do nervo infraorbital (BNIO), bloqueio do nervo alveolar inferior (BNAI) e infiltração subcutânea em ferida cirúrgica (ISFC). Foram usadas como controle formulações lipossomais unilamelar e multilamelar sem anestésico e solução de NaCl 0,9%. No BNIO e BNAI as formulações anestésicas foram injetadas do lado direito e os controles no esquerdo. Para o BNIO, 30 ratos (10 animais/grupo) receberam 0,1 mL de uma das formulações próximo ao forame infraorbital. Foi avaliada a duração da anestesia por pinçamento do lábio superior, a cada 5 minutos. Para o BNAI 45 ratos (15 animais/grupo) receberam 0,2 mL das formulações próximo ao forame mandibular. Foram avaliados sucesso, latência e duração da anestesia pulpar com estímulo elétrico ("pulp tester"). Para a ISFC 36 ratos (6 animais/grupo) foram submetidos à incisão na pata traseira direita e 24 horas após, receberam 0,1 mL das formulações nas duas patas traseiras (com e sem incisão); a anestesia foi avaliada pelo analgesímetro de von Frey. Os resultados foram submetidos aos testes de Log-Rank, Kruskal-Wallis, Student-Newman-Keuls e Friedman (?= 5%). No BNIO, a Prilo-Feli proporcionou duração de anestesia maior que a Prilo-LUV (p<0,05); Prilo-MLV não diferiu das demais (p>0,05). A Prilo-Feli proporcionou maior sucesso de anestesia (p<0,05) que a Prilo-LUV e Prilo-MLV, sem diferença entre estas (p>0,05). Para o BNAI Prilo-Feli proporcionou maior sucesso e duração de anestesia que as formulações lipossomais (p<0,05); Prilo-MLV apresentou maior sucesso de anestesia que Prilo-LUV (p<0,05), mas não diferiu desta com relação à duração da anestesia (p>0,05). Não houve diferenças entre formulações com relação à latência (p>0,05). Para a ISFC, nas patas com hipernocicepção Prilo-Feli proporcionou maior duração de anestesia que Prilo-LUV e Prilo-MLV (p<0,05), sem diferença entre estas (p>0,05); nas patas sem hipernocicepção não houve diferenças entre as formulações (p>0,05). Com relação ao sucesso da anestesia, em ambas as condições, com e sem hipernocicepção, Prilo-Feli mostrou maior sucesso que Prilo-LUV e Prilo-MLV (p<0,05), sem diferença entre estas (p>0,05). Conclui-se que a encapsulação da prilocaína em lipossomas unilamelares e multilamelares resultou em menor eficácia anestésica em comparação á solução de prilocaína com felipressina nos modelos avaliados / Abstract: The present study assessed the anesthetic efficacy of the following formulations: 3% prilocaine with 0.03 UI/mL felypressin (Prilo-Fely), 3% prilocaine encapsulated in unillamellar liposomes (Prilo-LUV, 4 mM lipid concentration) and 3% prilocaine encapsulated in multillamelar liposomes (Prilo-MLV, 8 mM lipid concentration) in three models, in rats: infraorbital nerve block (IONB), inferior alveolar nerve block (IANB), and subcutaneous infiltration in surgical wound (SISW). The following were used as controls: unillamelar liposomal suspension, multillamelar liposomal suspension and 0.9% NaCl solution. For IONB and IANB the anesthetic formulations were injected in the right side and the respective controls in the left side. For IONB, 30 rats (10 animals per group) received 0.1mL of the anesthetic formulations near the infraorbital foramen. The duration of anesthesia was assessed by upper lip pinching every 5 minutes. For IANB, 45 rats (15 animals per group) received 0.2mL of the anesthetic formulations near the right mandibular foramen. The success, onset and duration of pulpal anesthesia were assessed by electric pulp tester. For SISW, 36 animals (6 animals per group) were submitted to incision in the right hind paw and 24h after they received 0.1mL of the formulations in both hind paws (with and without incision). Anesthesia was evaluated with von Frey anesthesiometer. Data were submitted to Log-Rank, Kruskal-Wallis, Student-Newman-Keuls and Friedman tests (?= 5%). For IONB Prilo-Fely presented longer anesthesia duration than Prilo-LUV (p<0.05); Prilo-MLV did not differ from the others (p>0.05). Prilo-Fely promoted higher anesthesia success (p<0.05) than Prilo-LUV and Prilo-MLV, with no difference between these two formulations (p>0.05). For IANB Prilo-Fely provided higher success and duration of anesthesia than the liposomal formulations (p<0.05); Prilo-MLV presented higher anesthesia success than Prilo-LUV (p<0.05), but did not differ from the latter concerning anesthesia duration (p>0.05). No differences among the formulations were observed for BNAI anesthesia onset (p>0.05). For SISW in the hypernociceptive paws, Prilo-Fely provided longer anesthesia duration than Prilo-LUV and Prilo-MLV (p<0.05), with no difference between these two formulations (p>0.05); in the non hypernociceptive paws no differences were observed among the formulations (p>0.05). In both conditions, with and without hypernociception, Prilo-Fely presented higher anesthesia success (p<0.05) than Prilo-LUV e Prilo-MLV, whith no difference between these two formulations (p>0.05). It can be concluded that the encapsulation of prilocaine in unillamelar and multillamelar liposomes provided lower anesthetic efficacy when compared to prilocaine with feypressin in the evaluated models / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Doctor of Philosophy / Department of Chemistry / Viktor Chikan / This thesis focuses on exploring fast and controlled drug release from several liposomal drug delivery systems including its underlying mechanics. In addition, the construction of a pulsed high-voltage rotating electromagnet is demonstrated based on a nested Helmholtz coil design. Although lots of different drug delivery mechanisms can be used, fast drug delivery is very important to utilize drug molecules that are short-lived under physiological conditions. Techniques that can release model molecules under physiological conditions could play an important role to discover the pharmacokinetics of short-lived substances in the body. In this thesis, an experimental method is developed for the fast release of the liposomes’ payload without a significant increase in (local) temperatures. This goal is achieved by using short magnetic pulses to disrupt the lipid bilayer of liposomes loaded with magnetic nanoparticles. This thesis also demonstrates that pulsed magnetic fields can generate ultrasound from colloidal superparamagnetic nanoparticles. Generating ultrasound remotely by means of magnetic fields is an important technological development to circumvent some of the drawbacks of the traditional means of ultrasound generation techniques. In this thesis, it is demonstrated that ultrasound is generated from colloidal superparamagnetic nanoparticles when exposed to pulsed and alternating magnetic fields. Furthermore, a comparison between inhomogeneous and homogeneous magnetic fields indicates that both homogeneous and inhomogeneous magnetic fields could be important for efficient ultrasound generation; however, the latter is more important for dilute colloidal dispersion of magnetic nanoparticles. In strong magnetic fields, the ultrasound generated from the colloidal magnetic nanoparticles shows reasonable agreement with the magnetostriction effect commonly observed for bulk ferromagnetic materials. At low magnetic fields, the colloidal magnetic nanoparticle dispersion produces considerable amount of ultrasound when exposed to a.c. magnetic fields in the 20−5000 kHz frequency range. It is expected that the ultrasound generated from magnetic nanoparticles will have applications toward the acoustic induction of bioeffects in cells and manipulating the permeability of biological membranes