Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: José Correa de Lacerda Neto / Banca: Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Banca: Rafael Resende Faleiros / Banca: Rita de Cássia Campebell / Resumo: Inúmeros estudos vêm sendo realizados objetivando esclarecer os mecanismos da laminite aguda em eqüinos. Muitos destes esclarecendo ou suscitando dúvidas sobre teorias já descritas; outros sugerindo novos mecanismos cruciais no desenvolvimento da laminite. Modelos in vitro e in vivo, focados na inflamação, distúrbios hemodinâmicos, ativação enzimática no dígito e eventos gastrintestinais somam-se para explicar sinais clínicos observados na laminite. Apesar da existência de dados correlacionando alterações metabólicas, mudanças da microflora e do pH cecal com a fisiopatologia da laminite poucas são as medidas profiláticas ou terapêuticas que visam restabelecer ou manter a função cecal. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração intracecal de solução tampão contendo hidróxido de alumínio e hidróxido de magnésio (Al(OH)3 e Mg(OH)2) na evolução da laminite induzida por sobrecarga de CHO balizado em parâmetros clínicos e laboratoriais; quantificando e qualificando aminas bioativas do conteúdo cecal; comparando número, tipo, localização e distribuição de células apoptóticas epidermais laminares e comparando a expressão gênica de MMP-2 e MMP-9 em tecido laminar digital. Os animais que desenvolveram laminite tiveram sinais de claudicação de ocorrência mais tardia no grupo que recebeu solução tampão, porém, ambos os grupos expostos ao CHO exibiram alterações laboratoriais características deste modelo experimental. As concentrações cecais da putrescina e cadaverina, o número de células epidérmicas laminares apoptóticas e a expressão gênica das MMP-2 e MMP-9 apresentaram-se elevadas nos eqüinos expostos à sobrecarga de CHO em relação aos do grupo controle, no entanto, foram menos evidentes no grupo tratado com solução tampão...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A large number of studies have been undertaken aimed at furthering our understanding of the complex mechanisms of acute laminitis in the horse. Many of these studies have either reinforced or cast doubt on previously theories on the pathogenesis of this disease, while others have suggested new mechanisms which may play a key role in its development. Studies utilising in vitro and in vivo models of the disease, particularly addressing the areas of inflammation, haemodynamic disturbances and enzyme activation in the hoof, as well as the events occurring in the hindgut, have helped to explain many clinical observations of the disease. Instead of the existence of results linking the metabolic alterations, microflora and cecal pH changes with laminitis physiopatology there are no effective therapies and means of prevention to reestablish or maintain the cecal function. The aim of this study was evaluate the effects of an intracecal buffer solution composed of aluminum and magnesium hydroxide on the development of carbohydrate overload (CHO)-induced laminitis by characterization and comparison of clinical parameters, bioactives amines in cecal content, apoptotic epidermal cells and gene expression of MMP-2 e MMP-9 in digital laminar tissues. All CHO-treated horses developed lamenees, but it was significantly delayed in group that received buffering treatment. However, both CHO-treated group presented similar laboratorial changes which are particular to this experimental model. The cecal putrescine and cadaverine level, the number of laminar apoptotic epidermal cells, and gene expression of MMP-2 and MMP-9 were increased in CHO-treated horses compared to control group, but it was less in the buffer-treated group...(Complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Doutor

Resumo: As alterações ultra-estruturais ocorridas nas lâminas epidérmicas e dérmicas de eqüinos com laminite são responsáveis pela rotação ou afundamento da falange distal dentro do casco. Com o objetivo de prevenir esta ocorrência foram estudados os efeitos da sobrecarga de carboidratos (SCHO), assim como da utilização de trinitroglicerina na fase prodrômica da laminite, nas lâminas epidérmicas do casco de quinze eqüinos. A indução da laminite por meio da sobrecarga de carboidratos alterou siginificativamente as lâminas epidérmicas primárias e secundárias dos cascos dos eqüinos dos grupos induzidos (Grupo Laminite e Grupo Laminite + Trinitroglicerina) em comparação com o Grupo Controle, causando retração das lâminas epidérmicas primárias, alongamento das lâminas epidérmicas secundárias e estreitamento das lâminas epidérmicas primárias e secundárias. A indução da laminite por meio da sobrecarga de carboidratos diminuiu significativamente a área da célula basal assim como a área do núcleo dos dois grupos induzidos (Grupo Laminite e Grupo Laminite + Trinitroglicerina) em comparação com o grupo controle. Foi observado, pela análise estatística, que o Grupo Laminite obteve maior redução das áreas, tanto da célula como do núcleo, porém a porcentagem de ocupação do núcleo na célula não foi diferente nos dois grupos induzidos. Na avaliação histopatológica, foram observadas lesões lamelares nos grupos Laminite e Laminite + Trinitroglicerina, características de processo degenerativo das lâminas epidérmicas. Ocorreram diminuições nos números de hemidesmossomos dos grupos induzidos quando comparados com o Grupo Controle. A administração de trinitroglicerina não foi capaz de impedir o desenvolvimento de lesões nas lâminas epidérmicas e dérmicas, assim como, nas células basais e membrana basal em cavalos com laminite induzida por sobrecarga de carboidratos. / Abstract: Disruption of the lamellar ultrastructural is responsible for a cellular failure, that culminates in distal rotation of the distal phalanx within the hoof. Aiming to prevent such debilitating condition, effects of carbohydrate overload and glyceryl trinitrate (TNG) use during the prodromal stages of experimentally induced laminitis in fifteen horses hoof were studied. Laminitis induced by grain overload affected significantly primary and secondary lamellar structure from horse's hoof (Group II and III), which in turn led to primary epidermal retraction, basal cells became elongated and both primary and secondary epidermal lamellae clump together when compared to control group (GI). Equine that developed laminitis induced by carbohydrate overload had a significant reduction in basal cell nucleus in both GII and GIII groups, when compared to horses from GI. Horses from GII group had higher reduction in areas relative to both cell and nucleus, however, the percentage of nucleus position within cell was not different in both horses groups (GII and GIII). Histophatology of hooves revealed lamellae lesions in both horses groups (GII and GIII), characterized by a degenerative process present on epidermal lamellae. Lower number of hemidesmosome in both GII and GIII groups were observed. The administration of TNG was unable to prevent the development of lesions lamellae epidermal and dermal, as in the epidermal basal cells and the basement membrane in horses with laminitis induced by carbohydrate overload. / Orientador: José Correa de Lacerda Neto / Coorientadora: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Antonio Cezar de Oliveira Dearo / Banca: Raquel Yvonne Arantes Baccarin / Banca: José Wanderley Cattelan / Banca: Marcos Lania de Araujo / Doutor

Orientador: Luiz Carlos Marques / Banca: Annelise Carla Camplesi dos Santos / Banca: Paulo Ricardo Dell'armelina Rocha / Resumo: A ovinocultura de corte está em constante ascensão no Brasil e tal fato leva ao aumento do número de animais confinados, visando maior ganho de peso em curto período de tempo. Tal situação predispõe os ovinos a desordens como acidose láctica ruminal aguda (ALRA) e, consequentemente, laminite aguda, as quais geram problemas econômicos pelos custos do tratamento, menor produtividade do rebanho e descarte de animais. Dez ovelhas adultas foram induzidas à ALRA através da administração oral de sacarose; posteriormente foram avaliadas quando ao exame físico além das análises hemogasométricas arteriais, hematológicas, avaliação da glicose e lactato plasmáticos, proteinograma sérico e zimografia para detecção das metaloproteinases 2 e 9. Todos os animais tiveram sinais clínicos de ALRA, a frequência respiratória permaneceu elevada até às 36 horas, retornando à normalidade com 48 horas. Cinco animais apresentam sinais clínicos característicos de laminite aguda, porém não foi necessária a realização de tratamento clínico. Os valores da contagem de hemácias, volume globular, hemoglobina, leucócitos totais e neutrófilos bastonetes e segmentados elevaram-se nas 24 horas. Os teores de glicose aumentaram até as 8 horas pelo aumento da síntese dos ácidos graxos voláteis e posterior absorção sanguínea; o lactato apresentou aumento até as 24 horas, com posterior diminuição dos valores. A partir de 4 horas ocorreu elevação do pH, bicarbonato e excesso de base. Após 12 horas, os animais apresentaram acidose metabólica. Com 28 horas houve normalização dos parâmetros hemogasimétricos, sem necessidade de tratamento. No proteinograma sérico foram identificadas 13 proteínas: imunoglobulinas A (IgA) e G (IgG), ceruloplasmina (Cp), transferrina (Tf), albumina (Ab), 1-antitripsina ( 1AT), haptoglobina (Hp), 1-glicoproteína ácida ( 1GA), 95 (PPM95), 46 (PPM46), 36 (PPM36) e 31 (PMM31) kDa proteínas de... / Abstract: The sheep meet industry is constantly rising in Brazil and this fact leads to an increase on the number of confined animals, looking for greater weight gain in short period of time. This situation predisposes to disorders such as acute lactic ruminal acidosis (ARLA) and, consequently, acute laminitis, which causes economic problems by the treatment costs, reduced productivity and disposal of animals. Ten adult sheep were induced to ALRA by oral administration of sucrose; were further evaluated to physical examination, arterial blood gas analysis, hematological parameters, glucose and lactate plasma, serum protein profile and zymography for detection of metalloproteinases 2 and 9. All animals had clinical signs of ARLA, the respiratory rate remained high up to 36 hours, returning to normal in 48 hours. Five animals showed typical clinical signs of acute laminitis, however clinical treatment was not necessary. The values of the red blood cell count, packed cell volume, hemoglobin, total leukocytes and neutrophils and segmented rod rases in 24 hours. Glucose content increased up to eight hours by increasing the synthesis of volatile fatty acids and subsequent blood absorption; lactate has increased to 24 hours, with a subsequent decrease. From four hours there was an increase of pH, bicarbonate and base excess. After 12 hours, the animals had metabolic acidosis. At 28 hours there was normalization of the hemogasometry parameters without need of treatment. In serum protein were identified 13 proteins: immunoglobulins A (IgA) and G (IgG), ceruloplasmin (Cp), transferrin (Tf), albumin (Ab), 1-antitrypsin ( 1AT), haptoglobin (Hp), 1- acid glycoprotein ( 1GA), 95 (MWP95), 46 (MWP46), 36 (MWP36) and 31 (MWP31) kDa molecular weight protein In all animals with ARLA the total protein showed changes from 08 hours, coinciding with clinical signs of dehydration, which occurred up to 36 hours after induction. Although five animals shown clinical ... / Mestre

Orientador: Carlos Alberto Hussni / Banca: Celso Antonio Rodrigues / Banca: Marcos Jun Watanabe / Banca: Regina de Cássia Veronezi / Banca: André Luis Filadelpho / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_carlos_anselmo_dos_santos.pdf: 1427076 bytes, checksum: 1086b1dabfc021879cc96d4ab3af80a8 (MD5) Previous issue date: 2013-01-17 / The cardiovascular changes in horses with laminitis are described since the 70's, however few studies have been conducted to demonstrate such changes in pregnant mares with chronic laminitis. The present study aims to evaluate blood pressure, heart rate, serum cortisol levels, gestational age and placental changes of pregnant mares with chronic laminitis and its consequences for fetal morphometry. A prospective longitudinal case-control was conducted in 6 Thoroughbred horse farms in southern Rio Grande do Sul - Brazil. Were used a total of 20 multiparous mares (10 control animals and 10 animals with chronic laminitis). The selected animals were subjected to clinical examination, blood sample collection and blood pressure measurement on alternate days in the last month of pregnancy. Serum levels of cortisol were obtained by chemiluminescence, and blood pressure measurement by indirect method and apparatus for noninvasive oscillometric sphygmomanometer at the base of the tail. Assessment of placental was effected by using the histological method of Schlafer (2004) and morphometric using ImageJ® software. Mean control group regarding measurements of systolic blood pressure were 98,3 ± 1,41 mmHg. The average diastolic blood pressure was 62,2 ± 1,14 mmHg. The mean heart rate was 44 ± 0,53 bpm and the mean serum cortisol levels were 5,06 ± 0,14 &#956;g/dL. The group of pregnant mares with chronic laminitis kept the mean systolic blood pressure and heart rate higher than the control group, being respectively 116 ± 6,73 mmHg and 52 ± 4 bpm. The average values of diastolic blood pressure was 70 ± 7,3 mmHg and mean serum cortisol was 5,07 ± 0,19 &#956;g/dL with no difference compared to the control group. The placentas of pregnant mares with laminitis had higher number of chronic histological changes and higher wall thickness / lumen than the control group (p <0,05). The foals born from mares of the control group had higher birth weight than foals born from chronic laminitis s group mares (p <0,05). / As alterações cardiovasculares em cavalos com laminite são descritas desde a década de 70, porem poucos estudos foram realizados para demonstrar tais alterações em éguas gestantes com laminite crônica. O presente estudo tem como objetivo avaliar a pressão arterial, frequência cardíaca, níveis de cortisol séricos, tempo gestacional e alterações placentárias de éguas gestantes com laminite crônica e suas consequências sobre a morfometria fetal. Foi realizado um estudo prospectivo longitudinal de caso controle em 6 criatórios de equinos Puro Sangue Inglês na região sul do Rio Grande do Sul Brasil. Foram utilizados um total de 20 éguas multíparas (10 animais do grupo controle e 10 animais com laminite crônica). Os animais selecionados foram submetidos ao exame clínico, coletas de sangue e mensurações da pressão arterial em dias alternados no último mês de gestação. Os níveis séricos de cortisol foram obtidos pelo método de quimiluminescência, e a aferição da pressão arterial através do método indireto e não invasivo por aparelho de esfigmomanômetro oscilométrico na base da cauda. A avaliação placentária foi efetuada por meio histológico utilizando o método de Schlafer (2004) e morfométrico utilizando o programa de domínio público ImageJ. Os valores médios do grupo controle referentes às aferições da pressão arterial sistólica foram de 98,3 ±1,41mmHg. O valor médio da pressão arterial diastólica foi de 62,2 ±1,14mmHg. A frequência cardíaca média foi de 44 ±0,53 bpm e as médias dos níveis séricos de cortisol foram de 5,06 ±0,14 &#956;g/dL. O grupo de éguas gestantes com laminite crônica manteve as médias de pressão arterial sistólica e frequência cardíaca mais altas que ao grupo controle, sendo respectivamente, 116 ±6,73 mmHg e 52 ±4 bpm. Os valores médios obtidos da pressão arterial diastólica foi de 70 ±7,3 mmHg e a media dos níveis séricos de cortisol foi de 5,07± 0,19 &#956;g/dL não havendo diferença em relação ao grupo controle. As placentas do grupo de éguas gestantes com laminite crônica obtiveram maior número de alterações histológicas e maior relação de espessura parede/luz arterial que o grupo controle (p<0,05). Os potros provenientes das gestações de éguas do grupo controle obtiveram peso ao nascimento superior aos potros nascidos do grupo de éguas com laminite crônica (p<0,05).

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-10T11:33:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Fernanda_Pazinato.pdf: 1717141 bytes, checksum: 85ea4dd2cdaca042f7c8c423f2f8d128 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-10T13:42:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Fernanda_Pazinato.pdf: 1717141 bytes, checksum: 85ea4dd2cdaca042f7c8c423f2f8d128 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T13:42:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Fernanda_Pazinato.pdf: 1717141 bytes, checksum: 85ea4dd2cdaca042f7c8c423f2f8d128 (MD5) Previous issue date: 2015-04-02 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / Foram realizados dois estudos, com o objetivo de relacionar os aspectos anatomopatológicos da placenta de éguas Puro Sangue Inglês, com os dados da égua e peso do potro. O primeiro estudo descreve os achados histopatológicos das placentas de éguas PSI saudáveis e sua relação com a macroscopia placentária e dados das éguas. Foram utilizadas 188 éguas, cujas placentas foram avaliadas macro e microscopicamente As lâminas foram coradas por hematoxilina-eosina e ácido periódico de Schiff (PAS). Os dados avaliados nas éguas foram idade, número de partos, tempo de gestação, tempo de eliminação da placenta, comprimento do cordão umbilical, peso da placenta, e apresentação de sinais clínicos de placentite na gestação avaliada. Na macroscopia 79 placentas não demonstraram alteração, 87 apresentaram artefatos e 22 tinham placentite. Na histologia, observou-se que em 30 placentas o epitélio coriônico apresentava mais vacúolos, os quais se coravam pelo PAS. As éguas com esse tipo de placenta eram mais velhas e com maior número de partos. Observou-se 40 casos de placentites, sendo 19 crônicas e 21 agudas. Em 19 casos verificou-se hipoplasia de microcotilédones. Em 93% dos casos, os achados macroscópicos foram consistentes com a histologia placentária. A presença de sinais clínicos foi condizente com a histologia de placentite, entretanto, 19,3% das éguas com placentite na histologia, não demonstraram sinais clínicos. No segundo estudo avaliou-se a morfometria vascular da placenta de éguas PSI com laminite crônica. Foram utilizadas 26 éguas, 13 com apresentação de laminite crônica na gestação avaliada, e 13 éguas saudáveis. A pressão arterial sistólica e frequência cardíaca foram obtidas de 10 éguas, de cada grupo. As placentas eram avaliadas macroscopicamente e coletados fragmentos para histopatologia e morfometria. Foram obtidas imagens digitalizadas de corpo uterino, corno gravídico e corno não gravídico, e as medidas realizadas através do software NIH ImageJ 1.48r. As medidas dos vasos foram diâmetro vascular total, diâmetro de luz vascular e espessura de parede vascular. As medidas dos microcotilédones foram área total de microcotilédones, área capilar de microcotilédones e diferença entre área total de microcotilédones e capilar. Foram considerados idade da égua, tempo de gestação, número de partos, peso da placenta e peso do potro. As éguas com laminite crônica demonstraram quadro de hipertensão, com menor tempo gestacional, peso da placenta e do potro. Na morfometria estas demonstraram menor luz vascular, maior espessamento de parece vascular e menor área capilar nos microcotilédones. A laminite cursa com quadro hipertensivo, sendo este possivelmente responsável por alterações morfométricas vasculares. / Were made two studies, attempt to the relation between placental anatomopathologyc and data from Thoroughbreds mares and foal weight. The first study aimed to describe the histopathological features of the placentas of healthy Thoroughbred mares at foaling and to evaluate their relationship with the gross placental and mare’s data. The study was performed using 188 Thoroughbred mares, whose the placentas were grossly and histologic evaluated. The slides were stained using hematoxylin and eosin and periodic-acid-Schiff (PAS) reagents. The data from mares were age, number of parturition, gestational age, placental elimination time, umbilical-cord length and placental weight and signs of placentites. In grossly evaluation were observed 79 placentas without alterations, 87 with artifactuals findings and 22 placentites. In histology were observed 30 placentas with intense cytoplasmic vacuolization of the epithelial areolar cells, that stained by PAS. These mares were older and larger parturition number. In 40 of the placentas, the histopathological changes consisted of placentitis, 19 these with chronic placentites and 21 acute placentites. Also observed 19 placentas with hypoplasia/atrophy from microcotyledones. In 93% of cases the placental grossly were consistently with histologic findings. The mares that demonstrate clinical sings of placentitis showed correspondent histologic findings, however in 19,3% of mares have placentites in histology without presence of clinical sings. On second study the aim was evaluate the placental microcotyledonary and vascular morphometry, in Thoroughbreds mares with chronic laminitis. Twenty six mares divided in two groups were used, 13 these with chronic laminitis, and 13 mares healthy. Arterial systolic pressure and cardiac frequency were obtained in 30 days prefoaling. The placentas were submit to grossly evaluation and taken samples to histopathological and morphometric study. Digital images analysis was made from placental uterine body, gravid horn and non gravid horn, and measures by software ImageJ 1.48r. Measures of allantoic surface vessels was total vessel diameter, lumen vessel diameter and wall vessel thickness. In microcotyledons the measures was total area from microcotyledons, capillary area from microcotyledons, difference capillary/total area from microcotyledons and relation between these areas. The age of mare, gestational age, number of parturition, placental weight and foal weight were considered. The mares with chronic laminitis showed hypertension, lower gestational period, placental and foal weight. These mares showed lower lumen vessel diameter, thickness of wall vessel e less capillary area from microcotyledons.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-07Bitstream added on 2014-06-13T19:09:51Z : No. of bitstreams: 1 laskoski_lm_me_jabo.pdf: 647030 bytes, checksum: 950b1f5d5358b98ef4e5d3a67333637b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A laminite está associada a ativação inflamatória sistêmica, a qual ocorre em diversas afecções, principalmente as gastrointestinais. Sua patogenia este relacionada a ativação de metaloproteinases e degradação do colágeno e/ou hemidesmossomos. 0 objetivo deste estudo foi analisar alterações morfológicas, apoptose, metaloproteinases (MMP) 2 e 9 e infiltração leucocitária, pela pesquisa da lipocalina liberada por neutrófilos (NGAL), no tecido laminar de equinos submetidos a obstrução intestinal experimental. Os animais foram distribuídos nos grupos: controle (Gc), instrumentado (Gi), com procedimento de enterotomia sem obstrução; obstruído tratado com hidrocortisona (Gt) e obstruído não tratado (Gnt). 0 tecido laminar foi analisado pelas técnicas de microscopia em luz, imunohistoquímica e zimografia. Os animals dos grupos experimentais (Gi, Gt e Gnt) demonstraram alterações morfológicas, MMPs e substância formada pela M M P-9 e NGAL superiores aos resultados do Cc. A presença de apoptose não foi evidenciada pelo procedimento cirúrgico. 0 Gc não foi diferente quanto as alterações morfológicas quando comparado ao Gi, e também não diferiu do Gt em relação e MMP-9, principalmente associada a neutrófilos. Com estes resultados, conclui-se que: o modelo experimental pode causar alterações morfológicas associadas a laminite; a apoptose não participa da fase inicial de alterações laminares no córium laminar; a hidrocortisona pode ser utilizada para coibir os efeitos deletérios da ativação inflamatória associada a diversas doenças, sem comprometer o córium laminar. / The laminitis is associated to systemic inflammatory activation that occur in several diseases, mainly gastrointestinal. The pathogeny of the laminitis is related to matrix metalloproteinases (MMPs) activation with collagen or hemidesmossomos degradation. The aim of this study is evaluated of the morphologic alterations, apoptosis, MMPs 2 and 9 and leukocyte infiltration, for research of MMP-9 related to neutrophil gelatinase associated to lipocalin (NGAL) in laminar corium of horses subjected to intestinal obstruction experimental. The animals were divided in groups: control (Cc), instrumented (Gi), with enterotomy without obstruction; obstruction treated by hydrocortisone (Gt) and without treatment (Gnt). The laminar tissue was analyzed by optical microscopy, immunohistochemistry and zymography. The animals showed morphologic alterations, MM Ps expression and MMP-9 associated to NGAL greater the Gc. The presence of apoptosis was not evidend by cirurgical procedure. However, the Gc was not different to Gi about morphologic alterations, and too Gt, about MMP-9, mainly the form conjugated to NGAL. The results indicate that the experimental model can cause morphologic alterations associated with laminitis. The apoptosis is not prerequisite for laminar lesion. The hydrocortisone can be administrated to reduce the deleterious effects of inflammatory activation in several diseases, without to affect the laminar corium.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-30T11:13:52Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-30T12:42:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-30T12:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-03-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Digital diseases worries livestock industry and arouse interest in extensionists because of the economic losses and difficult control. Losses come from decrease in productive and reproductive performance and, in some cases, the premature culling of high value breeding animals. Besides these, lameness causes negative impact on animal welfare. Digital diseases assume different characteristics in distinct production systems, requiring specific solutions that fits each farms condition. Innovative treatments have been discussed, but are not always economically viable, however, in last years in Veterinary Medicine has increased the interest on the possibility of applying cell therapy in the treatment of diseases related to the locomotor systems, including digital diseases. In the equine, it has been studied its use in the repair of tendineous, articular and osseous lesions, and the perspective of application in other important diseases like laminitis. Considering the importance of digital diseases, especially laminitis, for cattle, cell therapy can represent an additional option for treatment. This study evaluated the development of digital lesions in cattle intensively managed and its response to the treatment with bone marrow mononuclear cells. Were used 15 animals, male, cross-bred (Bos taurus X Bos indicus), healthy, aging about 12 months and with average weight of151,6 ± 24,65 kg, divided in two groups (GT, n=7, GC, n=8). The study was developed in three stages divided in evaluation moments. On first stage, on second month of confinement, after adjustment of management over concrete floor and feeding of corn silage and concentrate, hooves were trimmed and started evaluation of digital disease wich extended to the tenth month. At this time, were observed digital lesions that developed in the period, their influence over behavior and was conducted radiographic examinations trying to establish relationship between external and internal lesions of digits. After ten months of study all animals had its hooves trimmed and all digital lesions, in decorrence of management, were surgically treated. At this time, started last stage in wich animals received cell therapy. To obtain material needed for the protocol, were harvested samples of bone marrow from animals belonging to treatment group (GT). After this, mononuclear cells were isolated and samples were injected at jugular vein. In the protocol for bone marrow harvest and isolation of mononuclear cells was used Ficoll-Paque. On animals from control group (GC), their lesions were treated during hoof trimming, but all anials were evaluated at twelfth month. To certify the effect of cell therapy, besides clinical examination, identification of possible recidivance or new lesions, were done histological examination for occurrence of hyperemia, hemorrhages or edema on dermis, presence of white blood cells inside or outside vessels and necrosis of basal cells from epidermis, and radiographic examination. On direct inspection were observed expressive occurrence of digital lesions like heel horn erosion, haematoma and erosions of sole and white line disease, however with no difference between groups. Major changes in behavior observed along time were decrease in eating time and increase in times lying down and in leisure. Radiographic evaluation didn´t show signs of distal phalanx rotation suggesting external alterations may not be related to internal alterations. Protocols for bone marrow aspiration and for cell isolation using Ficoll-Paque were effective, resulting in obtainance of mononuclear cells with satisfatory viability. But, since it wasn´t observed significative differences between groups related to digital lesions, histological and radiographical examinations, the reoccurrence and appearance of new lesions after cell therapy cannot be related to this treatment, because seem to be more related to management conditions. It can be concluded that applying of bone marrow derived mononuclear cells at jugular vein didn´t show benefits as auxiliary treatment of digital lesions in cattle. The control of risk factors and site of cell application seem to explain the apparent failure of the therapeutic protocol used. / As doenças digitais causam preocupação ao setor produtivo e despertam grande interesse nos técnicos ligados à bovinocultura em função do impacto econômico e do difícil controle. Os prejuízos decorrem de queda no desempenho produtivo, reprodutivo, tratamento oneroso e em alguns casos descarte prematuro de animais de alto mérito genético. Além disso, ameaçam seriamente o bem estar animal. Essas doenças assumem características distintas nos diversos sistemas de produção, o que em alguns casos demandam soluções específicas e tratamentos que atendam a realidade do criatório. Tratamentos inovadores têm sido discutidos, mas nem sempre são viáveis economicamente. Contudo, nos últimos anos, na Medicina Veterinária cresce o interesse na possibilidade de se empregar a terapia celular, que poderia ser aplicada como auxiliar no tratamento de várias enfermidades do aparelho locomotor, incluindo as enfermidades digitais. Em equinos, já se tem investigado seu emprego no reparo de lesões tendíneas, articulares e ósseas, havendo ainda a perspectiva de aplicação em outras doenças importantes como a laminite. Portanto, considerando a importância que as doenças digitais, em especial a laminite, assumem na espécie bovina, a terapia celular pode representar uma ferramenta adicional no tratamento. Esta pesquisa objetivou avaliar o desenvolvimento de lesões digitais em bovinos manejados intensivamente e sua resposta ao tratamento com células mononucleares da medula óssea. Foram empregados 15 bovinos machos, mestiços (Bos taurus X Bos indicus), hígidos com idade inicial aproximada de 12 meses e peso corporal médio de 151,6 ± 24,65 kg, alocados em dois grupos (Grupo tratamento, GT, n=7; Grupo controle, GC, n=8). O estudo foi desenvolvido em três etapas divididos em momentos de avaliação. Na primeira etapa, no 2o mês de confinamento após ajustar o manejo em piso de concreto e a alimentação a base de silagem de milho e concentrado, realizou-se ajuste nas medidas digitais dos animais e iniciou-se o acompanhamento para avaliar a ocorrência de doenças digitais, que se estendeu até o décimo mês. Nesse período, foram realizadas avaliações para diagnosticar as enfermidades que eventualmente surgissem. Estudou-se a influência delas sobre o comportamento diário dos bovinos e procedeu-se a análise macroscópica das lesões digitais e a avaliação radiográfica para se tentar estabelecer uma relação entre as lesões externas e internas dos dígitos. Após dez meses de confinamento, todos os animais tiveram as medidas digitais novamente ajustadas e as enfermidades digitais que surgiram na etapa anterior, em decorrência do manejo, foram tratadas cirurgicamente. Nesse momento iniciou-se a ultima etapa na qual os animais receberam a terapia celular. Para se obter o material necessário que o protocolo exigia colheu-se medula óssea dos bovinos pertencentes ao grupo tratamento (GT), na sequência, as células mononucleares foram isoladas e uma amostra destas foram aplicadas pela veia jugular em cada animal. No protocolo de colheita da medula óssea e isolamento celular empregou-se o Ficoll-Paque®. O grupo controle (GC) foi apenas submetido ao tratamento das lesões e tiveram as medidas dos cascos ajustadas, mas os bovinos de ambos os grupos foram reavaliados ao final do 12o mês do estudo. Para certificar o efeito da terapia celular, além do exame clínico, identificação de possível recrudescimento ou surgimento de novas lesões, realizou-se exame radiográfico, avaliação histológica da região coronária para avaliar presença de hiperemia, hemorragia ou edema da derme, presença de células brancas dentro ou fora dos vasos e necrose de células basais da epiderme. Na avaliação macroscópica foi observada ocorrência expressiva de lesões digitais como erosão de talão, hematoma e erosão de sola e lesão de linha branca, porém, sem diferenças entre grupos. As principais alterações de comportamento observadas ao longo das avaliações foram a redução no tempo de alimentação e aumento nos tempos em ócio e em decúbito, mas, sem diferenças entre grupos tratamento e controle. A avaliação radiográfica não mostrou ter ocorrido a rotação da falange distal indicando que as lesões externas podem não ter relação com as alterações internas. Os resultados obtidos indicam que o protocolo de aspiração de medula óssea e de isolamento celular usando Ficoll-Paque® foi eficaz, resultando na obtenção de células mononucleares com rendimento e viabilidade satisfatórios. Mas, como não foram observadas diferenças significativas entre grupos, tanto com relação as enfermidades como em relação aos resultados histológicos e radiográficos as recidivas ou o aparecimento de novas lesões após a terapia celular não podem ser imputadas a esse tratamento, pois parecem ter relação com o manejo. Conclui-se que a aplicação de células mononucleares da medula óssea pela veia jugular não apresentou benefícios no tratamento auxiliar de lesões digitais em bovinos, sendo que aspectos relacionados ao controle dos fatores de risco e local de aplicação das células parecem explicar a aparente falta de sucesso do protocolo terapêutico empregado.

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In the study was used seven crossbred (Bos indicus X Bos taurus) steers, non castrated, aging 12,6±0,9 months and weigthing 156±37,8 kg. Animals were sorted in two groups (GI and GII) receiving 13 and 17 g/kg respectively of intrarruminal oligofructose. Venography were done in the digit of cattle in five different moments, 15 days before (M0), 36 hours (M1), seven (M2), 15 (M3) and 30 (M4) days after intrarruminal administration of high fermentative carboidrate. Venography examination intended to evaluate topographic anatomy and possible vascular changes in the distal pelvic limb of the animals. Description of topographic anatomy was done based on radiographs obtained in all moments and to vascular changes in the distal limb was evaluated diferences among moments, having M0 as control. In the evaluation of vascular changes, main veins and regions like coronary corium were evaluated. Three veins were chosen to measurement of its diameter and data was analysed using ANOVA and T test at 5% significance level. Main veins and regions of coronary region, in diferente moments, were evaluated descriptively. Were identified changes in vascularization at diferente moments, like vasodilation 36 hours after oligofructose administration and vasoconstriction in the other moments, in the main veins and regions of coronary corium and bulbs. Animals from GII, changes were more accentuated. There was statistical difference for common digital dorsal III vein beteween M1 and M4 in each group, with dilation in M1 and constriction in M4. For the palmar branch to the digital cushion of medial digit the existing difference was between the groups in M4, with the constriction of the vein more accentuated in GII. It was concluded that venogtraphic exam of digits in pelvic limbs of young crossbred (Bos indicus X Bos taurus) cattle, examining before and after intrarruminal administration of oligofructose permited description of local vascular anatomy and identified changes compatible with laminits in this specie. / A etiopatogenia de várias doenças podais dos bovinos ainda é motivo de especulação. Mas não se pode ignorar que o comprometimento da irrigação e da drenagem sanguínea dos dígitos tem uma relação estreita com diversas alterações que acometem os dígitos dessa espécie animal. Portanto, o conhecimento sólido da vascularização da extremidade distal dos membros locomotores de bovinos pode nortear o entendimento de enfermidades como a laminite. Esse estudo objetivou descrever achados venográficos dos dígitos dos pés de bovinos jovens, mestiços (Bos indicus X Bos taurus), antes e após aplicação intrarruminal de oligofrutose como alternativas ao estudo da etiopatogenia da laminite e auxiliar no estudo da anatomia vascular dos dígitos. No estudo foram empregados, sete animais mestiços (Bos indicus X Bos taurus), inteiros, com 12,6±0,9 meses de idade e peso de 156±37,8 kg. Distribuiu-se por sorteio os animais em dois grupos (GI e GII) que receberam 13 e 17 g/kg de oligofrutose via intrarruminal, respectivamente. Realizou-se venografia dos dígitos dos bovinos, em cinco momentos distintos, sendo 15 dias antes (M0), 36 horas (M1), sete (M2), quinze (M3) e trinta (M4) dias após aplicação intrarruminal do carboidrato de alta fermentação. A venografia teve a finalidade de avaliar a anatomia topográfica e possíveis alterações vasculares da extremidade distal dos membros pélvicos destes animais. A descrição da anatomia topográfica foi realizada com base nas radiografias obtidas em todos os momentos. Para as alterações vasculares da extremidade distal avaliou-se as diferenças entre os momentos, tendo o M0 como controle. Nesta avaliação veias principais e regiões como a rede do cório coronário foram avaliadas. Escolheu-se três veias para proceder a mensuração dos seus diâmetros e analisá-los utilizando-se a Análise de Variância (ANOVA) e o Teste t, com nível de significância de 5%. As veias principais e da região do cório coronário, nos diferentes momentos, foram avaliados de forma descritiva. Identificaram-se alterações na vascularização nos diferentes momentos, como vasodilatação com 36 horas após aplicação de oligofrutose e vasoconstrição nos demais momentos, nas veias principais e das regiões do cório coronário e rede bulbar. Nos animais do GII as alterações foram mais acentuadas. Houve diferença estatística para a veia digital dorsal comum III entre M1 e M4 dentro de cada grupo, sendo que em M1 estava dilatada e M4 constrita. Para o ramo plantar para o coxim digital do dígito medial a diferença existente foi entre os grupos no momento M4, sendo a constrição desta veia mais acentuada no GII. Concluiu-se que o exame venográfico dos dígitos dos membros pélvicos de bovinos jovens, mestiços (Bos indicus X Bos taurus), realizado antes e após aplicação intrarruminal de oligofrutose possibilitou a descrição da anatomia vascular local e identificou alterações compatíveis com a laminite nessa espécie animal.

Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: José Corrêa de Lacerda Neto / Banca: Rafael Resende Faleiros / Resumo: A laminite está associada a ativação inflamatória sistêmica, a qual ocorre em diversas afecções, principalmente as gastrointestinais. Sua patogenia este relacionada a ativação de metaloproteinases e degradação do colágeno e/ou hemidesmossomos. 0 objetivo deste estudo foi analisar alterações morfológicas, apoptose, metaloproteinases (MMP) 2 e 9 e infiltração leucocitária, pela pesquisa da lipocalina liberada por neutrófilos (NGAL), no tecido laminar de equinos submetidos a obstrução intestinal experimental. Os animais foram distribuídos nos grupos: controle (Gc), instrumentado (Gi), com procedimento de enterotomia sem obstrução; obstruído tratado com hidrocortisona (Gt) e obstruído não tratado (Gnt). 0 tecido laminar foi analisado pelas técnicas de microscopia em luz, imunohistoquímica e zimografia. Os animals dos grupos experimentais (Gi, Gt e Gnt) demonstraram alterações morfológicas, MMPs e substância formada pela M M P-9 e NGAL superiores aos resultados do Cc. A presença de apoptose não foi evidenciada pelo procedimento cirúrgico. 0 Gc não foi diferente quanto as alterações morfológicas quando comparado ao Gi, e também não diferiu do Gt em relação e MMP-9, principalmente associada a neutrófilos. Com estes resultados, conclui-se que: o modelo experimental pode causar alterações morfológicas associadas a laminite; a apoptose não participa da fase inicial de alterações laminares no córium laminar; a hidrocortisona pode ser utilizada para coibir os efeitos deletérios da ativação inflamatória associada a diversas doenças, sem comprometer o córium laminar. / Abstract: The laminitis is associated to systemic inflammatory activation that occur in several diseases, mainly gastrointestinal. The pathogeny of the laminitis is related to matrix metalloproteinases (MMPs) activation with collagen or hemidesmossomos degradation. The aim of this study is evaluated of the morphologic alterations, apoptosis, MMPs 2 and 9 and leukocyte infiltration, for research of MMP-9 related to neutrophil gelatinase associated to lipocalin (NGAL) in laminar corium of horses subjected to intestinal obstruction experimental. The animals were divided in groups: control (Cc), instrumented (Gi), with enterotomy without obstruction; obstruction treated by hydrocortisone (Gt) and without treatment (Gnt). The laminar tissue was analyzed by optical microscopy, immunohistochemistry and zymography. The animals showed morphologic alterations, MM Ps expression and MMP-9 associated to NGAL greater the Gc. The presence of apoptosis was not evidend by cirurgical procedure. However, the Gc was not different to Gi about morphologic alterations, and too Gt, about MMP-9, mainly the form conjugated to NGAL. The results indicate that the experimental model can cause morphologic alterations associated with laminitis. The apoptosis is not prerequisite for laminar lesion. The hydrocortisone can be administrated to reduce the deleterious effects of inflammatory activation in several diseases, without to affect the laminar corium. / Mestre