The study comparing the effectiveness of a novel liquid-based Pap test (the PapSpin) with the conventional Pap smear. The impetus behind the study is meritorious: although the conventional Pap smear has been highly effective in diminishing mortality from cervical cancer, it is not perfect. It suffers from inconsistency in cell thickness and occasional obscuring blood, which hinder accurate evaluation. An alternative preparation method, one that would reduce the amount of blood and provide for a more consistent, thin layer of cells would make screening easiser and more accurate. The several performance characteristics examined in the study: Rate of unsatisfactory smears, rate of "atypical" smears (smears with an interpretation of "atypical squamous cells of undetermined significance"), sensitivity, specificity, positive predicitve value (PPV), and negative predictive value (NPV), based on histologic correlation and suitability for human papillomavirus (HPV) testing. The study consists of two principal parts. In the first part, the cervical sample collected was split into two preparations ("split sample"): a conventional smear was prepared first, then the residue left on the collection device was used to prepare a PapSpin slides. In the second part ("direct to vial"), the entire cervical sample was used to prepare a PapSpin slide. In the "split sample" study a significant reduction in the proportion of unsatisfactory and "atypical" cases was found when slides were prepared... [to full text] / Disertacijos objektas naujas citologinio gimdos kaklelio tyrimo panaudojus Shandon PapSpin skystąsias terpes efektyvumo įvertinimas. Žinoma, kad citologinis gimdos kaklelio tepinėlio tyrimas-efektyvus gimdos kaklelio vėžio kontrolės būdas, tačiau jis pasižymi nepakankamu jautrumu sąlygotu nepakankamos tyrimo kokybės. Skystųjų terpių citologinis tyrimas buvo įvertintas dviem etapais: tiriant dalytą gimdos kaklelio medžiagą ( angl.split-sample) fazėje ir nedalytą gimdos kaklelio medžiagą (angl. direct to vial). 2950 moterims buvo atlikti citologiniai tyrimai. Gauti citologinių tyrimų rezultatai buvo palyginti su atitinkamai konizuotosios gimdos kaklelio dalies histologinio tyrimo rezultatais apskaičiuojant citologinių metodų diagnostines vertes, sutarimą tarp citologinio tepinėlio tyrimų ir skystųjų terpių tyrimų. Disertacijoje keliamas klausimas ar citologiniai gimdos kaklelio tyrimai panaudojus skystąsiais terpes yra patikimas ikinavikinės gimdos kaklelio patologijos diagnostikos metodas. Disertacijoje konstatuojama, kad citologiniai gimdos kaklelio tyrimai panaudojus skystąsias terpes yra efektyvus diagnostikos metodas diagnozuojant ikinavikinius gimdos kaklelio pakitimus. Pagrindiniai metodo privalumai –statistiškai reikšmingas netinkamų ir ASC ( atipinių plokščiojo epitelio ląstelių) tyrimų kiekio sumažėjimas. Disertacijoje taip pat daug dėmesio skiriama Žmogaus papilomos viruso nustatymui iš skystosios likusios po citologinio tyrimo terpės ir konizuotosios gimdos... [toliau žr. visą tekstą]

A significant focus of toxicological research is the identification of electrophiles that covalently modify DNA to form addition products (adducts). These products can be generated when aryl radical species react at the C8-site of 2'-deoxyguanosine (dG) to form C8-aryl-dG adducts, which are mutagenic lesions. While this form of DNA modification is detrimental, C8-aryl-dG adducts also possess intriguing properties that can be exploited for beneficial purposes. This thesis is an investigation of one mechanism believed to contribute to the mutagenicity of C8-aryl-dG adducts, as well as a study of the photophysical properties of adducts that allow for their application as fluorescent probes. A common property of C8-aryl-dG adduction is accompaniment of abasic site formation. To determine how the C8-aryl moiety contributes to sugar loss, UV-Vis spectroscopy has been employed to determine hydrolysis kinetics, with C8-aryl-dG adducts found to be more prone than dG to acid-catalyzed hydrolysis. Despite adduct reactivity in acidic media, all adducts are relatively stable at pH 7, suggesting they are unlikely intermediates of abasic site formation at physiological pH. These results have allowed for development of a new rationale for depurination observed upon C8-aryl-dG adduction within duplex DNA. The determination of photophysical parameters of C8-heteroaryl-dG adducts reveals that these nucleosides behave as fluorophores with high fluorescence quantum yields (φfl). These adducts also exhibit emission sensitivity to their solvent environment and H-bonding interactions. C8-Heteroaryl-dG adducts were incorporated in the oligonucleotide 5'-CTCG1G2CG3CCATC, at the G1 and G3 sites, that contains the recognition sequence of the NarI Type II restriction enzyme. Hybridization of the modified NarI oligonucleotides to the complementary strand containing either the C or G nucleobase opposite the adduct allowed for characterization of duplex structures by circular dichroism (CD), UV melting temperature analysis and fluorescence spectroscopy. Results suggest that the C8-heteroaryl-dG adduct favours an anti conformation with base-paired with C, while a syn conformation is favoured when base-paired to G. Adduct conformation of bulky C8-dG adducts is believed to be correlated with their known mutagenic activity. C8-Heteroaryl-dG modified nucleosides could therefore be used as fluorescent models of these adducts to aid in elucidation of adduct-induced mutagenesis in biological systems. / NSERC

Le rôle du collicule inférieur dans les divers processus auditif demeure à ce jour méconnu chez l’humain. À l’aide d’évaluations comportementales et électrophysiologiques, le but des études consiste à examiner l’intégrité fonctionnelle du système nerveux auditif chez une personne ayant une lésion unilatérale du collicule inférieur. Les résultats de ces études suggèrent que le collicule inférieur n’est pas impliqué dans la détection de sons purs, la reconnaissance de la parole dans le silence et l’interaction binaurale. Cependant, ces données suggèrent que le collicule inférieur est impliqué dans la reconnaissance de mots dans le bruit présentés monauralement, la discrimination de la fréquence, la reconnaissance de la durée, la séparation binaurale, l’intégration binaurale, la localisation de sources sonores et, finalement, l’intégration multisensorielle de la parole. / The role of the inferior colliculus in human auditory processing is still poorly understood. We report the results obtained from a 12-year-old boy who suffered a very circumscribed lesion at the level of the right inferior colliculus without additional neurological damage. The child underwent an extensive battery of psychophysical and electrophysiological tests. Results revealed that tonal detection thresholds, speech recognition in the absence of competing auditory input and performance on binaural interaction tasks were unimpaired. However, the pattern of results suggests that auditory functions such as the recognition of low-redundancy speech presented monaurally, frequency discrimination, the recognition of tone-duration patterns, binaural separation, binaural integration, sound-source localization in space as well as mutlisensory integration depend on the integrity of the bilateral auditory pathways at the level of the inferior colliculus.

The capacity of the olfactory neuraxis to undergo neuronal replacement and axon targeting following injury, has led to scrutiny concerning the molecular and physical determinants of this growth capacity. This is because injury to the central nervous system, in contrast, leads to permanent disconnection of neurons with targets. Olfactory ensheathing cells (OECs), a specialized glial cell, may contribute to olfactory repair, and have been used to promote recovery from spinal cord injury. However, there mechanisms underlying OEC-induced regeneration are poorly appreciated. To understand these mechanisms, OECs from the lamina propria (LP OECs) or olfactory bulb (OB OECs) were transplanted into a lesion of the dorsolateral funiculus. While both cells demonstrated reparative capacities, LP and OB OECs differentially promoted spinal fibre growth; large-diameter neurofilament-positive, CGRP-positive, and serotonergic fibres sprouted in response to both LP and OB OEC transplantation, whereas substance-P and tyrosine hydroxylase-positive neurons grew more extensively following OB or LP OEC transplantation, respectively. To further understand the growth of spinal cord neurons in response to OECs, a proteomic analysis of OEC secreted factors was performed, identifying secreted protein acidic and rich in cysteines (SPARC) as a mediator of OEC-induced outgrowth in vitro. To test the contributions of SPARC to spinal cord repair after OEC transplantation, cultures of LP OECs from SPARC null and wildtype (WT) mice were transplanted into a crush of the dorsolateral funiculus. Substance P and tyrosine hydroxylase positive axon sprouting was significantly reduced in SPARC null OEC-treated animals, suggesting that individual factors may contribute to OEC-promoted regeneration. To investigate the effect of OECs on corticospinal (CST) neurons, an in vitro assay was developed using postnatal day 8 CST neurons. Coculture of CST neurons with OB OECs produced extensive axon elongation. Application of OB OEC secreted factors increased CST neurite branching, but did not increase axon elongation. In contrast, plating of CST neurons on OB OEC plasma membrane resulted in extensive axon elongation. Furthermore, the OB OEC plasma membrane could overcome CST neurite outgrowth inhibition induced by an outgrowth inhibitor. Together these findings provide insight into OEC mechanisms of neurite outgrowth and axon regeneration.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os receptores β1- e β2-adrenérgicos estão presentes em inúmeras células que participam do processo de reparo como fibroblastos, queratinócitos, células inflamatórias e células endoteliais. Diversos trabalhos demonstram que estes receptores modulam o processo de reparo tecidual. Entretanto, nenhum trabalho demonstrou se o bloqueio destes receptores compromete o reparo de úlceras de pressão. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos no reparo de úlceras de pressão em camundongos, para isto utilizamos um modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão. No presente estudo, utilizamos animais que foram tratados por gavagem com propranolol (um antagonista não seletivo dos receptores β1- e β2-adrenérgicos). A administração do antagonista teve início um dia antes do início dos ciclos de isquemia e reperfusão e se manteve diariamente até a eutanásia. Para desenvolver a úlcera de pressão, um par de magnetos foi aplicado no dorso dos animais previamente depilado. O período de permanência do magneto é caracterizado como período de isquemia, enquanto sua retirada é caracterizada como período de reperfusão. Os ciclos de isquemia e reperfusão foram repetidos duas vezes, e ao final do último ciclo, duas úlceras circulares foram criadas no dorso dos animais. Os animais foram mortos 3, 7, 14 e 21 dias após a lesão. Após o último ciclo de isquemia, o fluxo sanguíneo da área comprimida foi nulo, 7 horas após a compressão o fluxo sanguíneo estava elevado, com níveis superiores ao da pele normal. Após 24 e 48 horas, o fluxo sanguíneo estava reduzido e abaixo dos níveis da pele normal. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou os níveis de peróxidos lipídicos 3 dias após a lesão, comprometeu a migração dos queratinócitos, levando a um aumento da proliferação epitelial, resultando em uma re-epitelização atrasada. O retardo na formação da neo-epiderme induzido pelo bloqueio destes receptores prejudicou a remoção do tecido necrótico. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou o número de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), os níveis proteicos de elastase neutrofílica 3 dias após a lesão e reduziu os níveis proteicos de MCP-1 3 dias após a lesão e os níveis proteicos de MMP-12 7 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a proliferação celular e apoptose no tecido conjuntivo 7 dias após a lesão e aumentou a densidade de vasos sanguíneos 14 e 21 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos retardou a diferenciação miofibroblástica e reduziu os níveis proteicos de TGF-β 1/2/3 3 dias após a lesão e a contração da lesão. Vinte e um dias após a lesão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a espessura da neo-epiderme e a expressão de tenascina-C em fibroblastos e reduziu a deposição de colágeno. Em conclusão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos atrasa o reparo tecidual em úlceras de pressão. / β1- and β2-adrenergic receptors are present in several cells that participate in tissue repair such as fibroblasts, keratinocytes, inflammatory cells and endothelial cells. Several studies demonstrate that these receptors modulate cutaneous wound healing. However, neither study demonstrated if the blockade of theses receptors compromises the cutaneous wound healing of pressure ulcers. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of blockade of β1- and β2-adrenergic receptors in wound healing of pressure ulcer in mice using a noninvasive model of lesion induced by ischemia and reperfusion. In this study, animals were also treated with propranolol (a nonselective antagonist of β1- and β2-adrenergic receptors). Antagonism administration began one day before ischemia-reperfusion cycles and daily maintained until euthanasia. In order to develop a pressure ulcer, a shaved skin was placed between a pair of magnet disks. The period of magnet placement is characterized as ischemia period, whereas release period as reperfusion period. Two cycles of ischemia and reperfusion were performed, and after last cycle, two circular ulcers per animal were created in the animal dorsum. Animals were killed 3, 7, 14 and 21 days after wounding. After last ischemia cycle, blood flow of compressed area was nulled, 7 hours after compressed area underwent reperfusion during subsequent hours reaching blood flow 98% superior of normal skin. After 24 and 48 hours, blood flow of compressed area was again reduced when compared with normal skin. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the levels of lipid peroxydes 3 days after wounding, compromised keratinocyte migration leading to an increase epithelial proliferation and impairment in the re-epithelialization. The impairment in the neo-epidermis formation induced by β1- and β2-adrenergic receptor blockade delayed the necrotic tissue loss. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the inflammatory cell number (macrophages and neutrophils), protein levels of neutrophil elastase 3 days after wounding and reduced protein levels of MCP-1 3 days after wounding and protein levels of MMP-12 7 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased cell proliferation and apoptosis in connective tissue 7 days after wounding and blood vessel density 14 and 21 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors impaired myofibroblastic differentiation and reduced protein levels of TGF-β 1/2/3 3 days after wounding and lesion contraction. Twenty-one days after wounding, β1- and β2-adrenergic receptor blockade increased neo-epidermis thickness and tenascin-C-positive fibroblast number and reduced collagen deposition. In conclusion, blockade of β1- and β2-adrenergic receptors delays cutaneous wound healing of pressure ulcers.

Submitted by MARIA ÂNGELA LACERDA RANGEL ESPER null (angela_esper@hotmail.com) on 2016-04-13T16:41:11Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL ANGELA 2016.pdf: 1673462 bytes, checksum: 45fa78583c51eb4cc460fab26a8a4fc5 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-14T20:50:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 esper_malr_dr_sjc.pdf: 1673462 bytes, checksum: 45fa78583c51eb4cc460fab26a8a4fc5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-14T20:50:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 esper_malr_dr_sjc.pdf: 1673462 bytes, checksum: 45fa78583c51eb4cc460fab26a8a4fc5 (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / O trabalho in vitro avaliou a eficácia da inativação fotodinâmica (PDI) da eritrosina (E) e hematoporfirina IX (H), com 10 µM, utilizando LED azul, dose de 75 J/cm2 em células planctônicas e biofilme de S. mutans (UA 159). Suspensões padrões contendo 107 células/mL foram preparadas e submetidas a diferentes condições experimentais: a) hematoporfirina IX e LED (H+L+); b) eritrosina e LED (E+L+); c) apenas LED (F-L+); d) tratamento somente com hematoporfirina IX (H+L-); e) somente com eritrosina (E+L-); e f) grupo controle, sem tratamento com fotossensibilizador (F) e sem a utilização de LED (F-L-). As cepas foram semeadas em ágar MSBS para contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). Na segunda parte do trabalho foi realizado a PDI em biofilme de S. mutans sobre bráquetes metálicos e cerâmicos, com H a 10 µM e LED azul. Os resultados foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey (p<0,05) e demonstraram que a E sob efeito do LED (E+L+) não foi eficaz na PDI de células planctônicas, nos parâmetros usados (p=0,3644). No entanto, a H promoveu redução de 6,78 log10 (p<0,0001), no grupo de tratamento (H+L+). A PDI com a associação da H e LED foi efetiva na redução de 100% de culturas planctônicas de S. mutans, porém o mesmo não foi observado na associação com a E, na dosimetria utilizada no experimento. A PDI no biofilme de S. mutans sobre bráquetes metálicos, com a H e LED não foi eficaz nos parâmetros utilizados (p=0,1023), no entanto, ocorreu diminuição significativa de 53% sobre bráquetes cerâmicos (p=0,004). A H IX modificada é promissora como agente fotossensibilizador a ser empregado na técnica de PDI em associação ao LED azul, sendo necessários outros ensaios, em novas concentrações e/ou dosimetrias para se conseguir a inativação bacteriana. / The in vitro study evaluated the efficacy of photodynamic inactivation (PDI) with erythrosine (E) and hematoporphyrin (H) 10 µM, using a blue light-emitting diode (LED), a fluence of 75 J/cm2 , on planktonic cultures and biofilm of S. mutans (UA 159). Suspensions containing 107 cells/mL were prepared and were tested under different experimental conditions: a) hematoporphyrin IX and LED (H+L+); b) erythrosine and LED irradiation (E+L+); c) only LED (P-L+); d) only hematoporphyrin IX (H+L-); e) only erythrosine (E+L-); and f) control group, no LED irradiation or photosensitizer (P) treatment (P-L-). After treatment, the strains were seeded onto MSBS agar in order to determine the number of colony-forming units (CFU/mL). The second part of this work consisted of the PDI of S. mutans biofilm on metal and ceramic brackets with the H 10 μM and blue LED. The results were submitted to analysis of variance and the Tukey test (p<0.05) and showed that E under the effect of LED proved to be ineffective in the PDI of planktonic cultures with the parameters used (p=0.3644). H, however, caused a reduction of 6.78 log10 (p<0.0001) in the treatment group (H+L+). PDI with H and LED exerted antimicrobial effect of 100% of the S. mutans strain studied, whereas the same was not observed in the association with E in the dosimetry used in this work. PDI on S. mutans biofilm on metal brackets, with H and LED was not effective with the parameters used (p=0.1023), however on ceramic brackets caused a significant reduction of 53% (p=0,004). Modified H IX is a promising photosensitizer to be used in the PDI technique in combination with blue LED. Therefore, new tests with new concentrations and/or dosimetry are needed to achieve bacterial inactivation.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:18:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5258.pdf: 7048287 bytes, checksum: a29ea2c867092740240721084371d1d4 (MD5) Previous issue date: 2013-05-10 / Universidade Federal de Minas Gerais / Athlete´s shoulder most frequent lesions are anterior shoulder instability and superior labrum anterior and posterior lesion ( SLAP), altering structures and functions of the shoulder joint, leading to impairments in sports activity. The aim of this thesis was to evaluate functional and supraspinatus morphological adaptations of shoulder in athletes with anterior instability and SLAP lesion. Three studies were developed. The first study investigated functional differences regarding clinical complaints and the scoring systems of American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form (ASES) and the Athletic Shoulder Outcome Rating Scale (ASORS) in 249 athletes (153 with instability and 96 with SLAP lesion). The groups presented functional differences related mainly to sports activitiy and, even with more complaints of shoulder pain, SLAP lesion athlete´s tolerate more training hours compared to instability athletes. The second study evaluated isokinetic strenght and muscular control of shoulder rotators in four groups: instability group (n=10), instability control group (n=10), SLAP group (n=10) and SLAP control group (n=10). The torque steadiness and rotator cuff strength in 90 and 180°/s were evaluated. Athlete´s with anterior stability presented shoulder rotation weakness, while athletes with SLAP lesion showed higher torque fluctuation of shoulder internal rotation. The third study characterized the different fiber types of supraspinatus and shoulder function in those lesions. This study performed muscles biopsies in 10 athletes undergoing to arthroscopy repair of shoulder anterior instability and SLAP lesion. The volunteers were functionally evaluated with ASES and ASORS, and muscle samples were processed with histochemical reaction for myosin adenosine triphosphatase (mATPase). Muscles fibers were then characterized in type I, IIa, IIb and hybrid, and percentual and lesser diameter of each fiber type were calculated. In this study, volunteers presented evident functional limitations in sports activity and hypertrophy of all typees of muscles fibers. Most of the sample also presented a great number of type IIa and IIb in the supraspinatus muscle. In conjuction, those studies proves different functional and supraspinatus morphologic adaptations in athletes with anterior shoulder instability and SLAP lesion, justifying the need of different rehabilitations approaches. / As lesões mais frequentes presentes no ombro do atleta são a instabilidade anterior do ombro e a lesão do lábio glenoidal superior, anterior e posterior (Superior Labrum Anterior and Posterior- SLAP), que levam a alterações nas estruturas e funções do ombro, prejudicando a atividade esportiva. O objetivo desta tese foi avaliar as adaptações funcionais do ombro e morfológicas do músculo supraespinal em atletas com instabilidade anterior ou lesão SLAP. Para isso foram desenvolvidos três estudos. O primeiro estudo investigou as diferenças funcionais entre essas lesões por meio das queixas clínicas e os questionários do American Shoulder and Elbow Surgeons Standardized Shoulder Assessment Form (ASES) e a Escala de Resultados do Ombro do Esportista (EROE), em 249 atletas (153 com instabilidade e 96 com lesão SLAP). Os grupos apresentaram diferenças funcionais relacionadas especialmente às atividades esportivas, de forma que mesmo apresentando mais queixas de dor, os atletas com lesão SLAP toleraram mais horas de treinamento comparado aos atletas com instabilidade. O segundo estudo avaliou o torque isocinético e o controle muscular dos rotadores do ombro de quatro grupos: grupo instabilidade (n=10), grupo controle da instabilidade (n=10), grupo SLAP (n=10) e grupo controle do SLAP (n=10). Foram avaliados o controle da flutuação do torque isométrico submáximo e o torque de rotadores em 90 e 180°/s. Os atletas com instabilidade anterior apresentaram fraqueza na rotação do ombro, enquanto atletas com lesão SLAP demonstraram alterações no controle da força de rotação medial. O terceiro estudo permitiu caracterizar os diferentes tipos de fibras musculares do músculo supraespinal, assim como as atividades funcionais do ombro em atleta com essas lesões. Para tanto, foram realizadas biópsias do músculo supraespinal em 10 atletas submetidos ao reparo artroscópico da instabilidade anterior ou lesão SLAP. Os voluntários foram avaliados funcionalmente por meio da escalas ASES e EROE e fragmentos do músculo foram processados pela reação histoenzimológicas para Adenosina Trifosfatase Miofibrilar (mATPase). As fibras musculares foram então classificadas em tipo I, IIa, IIb e híbridas, e a porcentagem e o diâmetro menor de cada tipo de fibra foram calculadas. Os resultados mostraram que os voluntários apresentaram limitações funcionais mais evidentes nas atividades esportivas e uma hipertrofia de todos os tipos de fibras musculares. Além disso, na maioria da amostra, houve um maior número de fibras do tipo IIa e IIb no músculo supraespinal. Em conjunto, esses estudos comprovam a existência de diferentes adaptações funcionais e morfológicas do músculo supraespinal em atletas com instabilidade anterior e lesão SLAP, o que justifica a necessidade de diferentes enfoques na reabilitação dessas lesões.

This study evaluated the effect of Pratlenchus brachyurus and Fusarium verticillioides, and their relationship, on growth and development of two mayze hybrids (30F80 and 30K73). The experiment was conducted in greenhouse conditions at Pioneer Hi-bred Research Center in Itumbiara, GO, Brazil. The experimental design was randomized blocks with 15 treatments and 10 replications. Treatments included a non-inoculated control; inoculation of Fusarium in the seed and in the soil; three populations levels of Pratylenchus at sowing and at 30 days after planting (50, 100 and 500 nematodes/plot), with and without the inoculation of Fusarium in the soil; and three populations leves of Pratylenchus inoculated 30 days after sowing with Fusarium inoculated in seed at sowing. At plant maturity the following variables were evaluated: plant height and ear length, stalk diameter, root fresh and dry matter, stalk fresh and dry matter, reproduction factor and fusariosis severity on the stalk. Fusarium stalk colonization was evaluated in a scale from 1 to 9. The 30F80 hybrid had lower plant height and ear length, stalk diameter, stalk and root fresh matter when the seeds were inoculated with the suspension of Fusarium and sowing immediately after inoculation. The maize hybrids 30F80 and 30K73, showed the lowest root length, stalk fresh and dry matter, and root fresh and dry matter mainly when the soil was inoculated with Fusarium and sown in the same day, and the inoculation with 500 juveniles and/or adults of Pratylenchus, was done 30 days after sowing. The maize hybrid 30K73 obtained lower plant height and ear length when seeds were inoculated with the suspension of Fusarium and sown in the same day. Maize seeds inoculated with Fusarium verticillioides at planting decreased plant height, ear length, and root and shoot fresh weight on both hybrids. Stalk diameter of 30K73 hybrid and root length of hybrid 30K73 were also reduced. Soil inoculation of Fusarium verticillioides at planting and Pratylenchus brachyurus inoculated 30 days after planting (500 nematodes/plot) decreased root elongation and stalk, and root dry weights on both hybrids. However, plant height was only reduced on 30K73 hybrid. Future research is needed to better understand the relationship between Pratylenchus brachyurus and Fusarium verticillioides on maize growth and development. / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de Pratylenchus brachyurus e/ou Fusarium verticillioides e sua relação no desenvolvimento de dois híbridos de milho (30F80 e 30K73). O experimento foi conduzido em casa de vegetação no Centro de Pesquisa da Pioneer Sementes de Itumbiara-GO. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso com 15 tratamentos/por híbrido (totalizando 30 tratamentos) e 10 repetições. Os tratamentos foram: testemunha (sem inoculações), inoculação de fungo nas sementes e no solo; inoculação de três populações de nematóide na semeadura e 30 dias após a semeadura (50, 100 e 500 nematóides/vaso), com e sem inoculação do fungo no solo; e três níveis populacionais de nematóides inoculados 30 dias após a semeadura, com o fungo inoculado na semente. Após a maturação (estádio R7), foram avaliadas as características: altura de planta e de espiga, diâmetro de colmo, matéria fresca e seca de raiz, matéria fresca e seca de colmo, fator de reprodução do nematóide e severidade de fusariose no colmo do milho. Observou-se que o híbrido de milho 30F80 obteve uma menor altura de planta e de espiga, diâmetro de colmo, matéria fresca de colmo e de raíz, quando as sementes foram inoculadas com a suspensão de conídios de Fusarium verticillioides e semeadura realizada no mesmo dia dessa inoculação. Os híbridos de milho 30F80 e 30K73 apresentaram o menor comprimento de raiz, matéria fresca e seca de colmo, e matéria fresca e seca de raiz, principalmente quando o solo foi inoculado com Fusarium verticillioides, semeou-se no mesmo dia e a inoculação do nematóide na população de 500 juvenis e/ou adultos de Pratylenchus brachyurus realizada 30 dias após a semeadura. O híbrido de milho 30K73 obteve uma menor altura de planta e de espiga quando as sementes foram inoculadas com a suspensão de conídios de Fusarium verticillioides e semeadura realizada no mesmo dia dessa inoculação. Sementes de milho inoculadas com o fungo na semeadura diminuiram a altura de planta e de espiga e peso fresco de raiz e de parte aérea nos dois híbridos de milho. Diâmetro de colmo no híbrido 30F80 e comprimento de raiz no híbrido 30K73 também foram reduzidos. A inoculação do solo com o fungo na semeadura e nematóide inoculado 30 dias após (500) proporcionou menor comprimento de raiz e peso seco e fresco de raiz e colmo nos dois híbridos. Contudo, altura de planta foi reduzida somente no híbrido 30K73. Outros estudos de interações entre microrganismos, em especial de Pratylenchus brachyurus e Fusarium verticilliodes, deverão ser realizados, a fim de melhor entender o efeito desta combinação no prejuízo das plantas. / Mestre em Agronomia

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Non carious cervical lesions (NCCLs) are routine findings in clinical practice and are described as the loss of tooth tissue close to the cementum enamel junction. NCCLs have multifactorial etiology with main factors involved are stress, biocorrosion and friction. The different associations of these factors can lead to the weakening of the tooth structure in the cervical region, generating NCCLs. The aim of this study was to evaluate the association of etiologic factors (stress, biocorrosion and friction) on the microstructural formation of NCCLs, using finite element analysis, laser confocal microscopy and computed microtomography (micro-CT). Two three dimensional (3D), linear and elastic models of mandibular premolars were generated for stress distribution evaluation, using the finite element analysis (FEA). Two oblique loadings (50 N), were applied on the buccal cusp slope of the model. The occlusal loading (CO) was applied on the grinding region of the buccal cusp and the buccal loading (CV) on the smooth region of the same cusp. Both loads were applied at 45&#778; to the tooth long axis, simulating mandibular excursive movements. The displacement restriction was applied on the base and lateral surface of the model and the results were analyzed by the maximum principal criteria. Then, for analysis by confocal microscopy, forty intact human mandibular premolars were selected and allocated randomly into four groups, according to the factor association type (n=10): (TB) stress-biocorrosion, (TF) stress-friction, (BF) biocorrosion-friction, and (TBF) stress-biocorrosion-friction. In each group, the challenges were performed in an alternate way. The stress was simulated by cyclic fatigue loading, with specimens positioned in mechanical fatigue machine and subjected to oblique load (50N), on the smooth region of the buccal cusp for 6 x 105 cycles. The biocorrosive challenge was performed using the application of hydrochloric acid (2mL/10s). The friction (abrasion) was reproduced by using electric/powered toothbrushes (300g/20s), with Colgate Total 12 toothpaste. The roughness surface, angle and height of steps were measured before and after the treatments, using a 3D laser confocal microscope. The data were analyzed using the paired t-test, two-way analysis of variance and Tukey s test (&#945;=0.05). Then, three specimens of each group were taken to a micro-CT for the qualitative analyses. The CV loading promoted higher concentration of tensile stress in the cervical region compared to CO. The presence of biocorrosion was an important factor to roughness changes and abrasion promoted similar behavior among the groups. The TBF association promoted the greatest alterations in tooth structures. Enamel and dentin showed distinct performance according to the different interactions. The FEA results presented relationship with the experimental findings for TF,TB, TBF groups. The TBF was the more influent association on the microstructural formation of NCCLs, for enamel. For dentin, the association of at least two factors was sufficient to generate significant tissue degradation. All studied associations of etiological factors showed potential to promote NCCLs formation. / As lesões cervicais não cariosas (LCNCs) são achados rotineiros na prática clínica odontológica e são descritas como a perda de tecido dentário próximo à junção amelo cementária (JAC). Essas lesões apresentam etiologia multifatorial e tem como principais fatores envolvidos nesse processo tensão, biocorrosão e fricção. As associações desses fatores levam ao enfraquecimento da estrutura dental na região cervical, promovendo o surgimento de LCNCs. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das associações de fatores etiológicos (tensão, biocorrosão e fricção) na formação microestrutural de LCNCs, empregando método de elementos finitos (MEF), microscopia confocal a laser e microtomografia computadorizada (micro-CT). Dois modelos tridimensionais (3D), lineares e elásticos de pré-molares inferiores foram gerados para análise do padrão de distribuição de tensões na região cervical, pelo método de elementos finitos (MEF). Dois tipos de cargas de 50N, foram aplicadas obliquamente a cúspide vestibular do modelo. A carga oclusal (CO), foi aplicada na vertente triturante da cúspide vestibular e a carga vestibular (CV), na vertente lisa da mesma cúspide. As cargas foram posicionadas a 45º do longo do eixo do dente, e simularam interferências oclusais nos movimentos excursivos da mandíbula. A restrição do deslocamento foi realizada na base e laterais do modelo e a análise dos resultados conduzida por meio do critério de Tensão Máxima Principal. Para a análise por microscopia confocal, quarenta pré-molares inferiores humanos hígidos foram selecionados e distribuídos aleatoriamente em quatro grupos, de acordo com as seguintes associações de fatores (n=10): tensão-biocorrosão (TB), tensão-fricção (TF), e biocorrosão-fricção (BF) e tensão-biocorrosão-fricção (TBF). Para cada grupo, os desafios foram realizados de forma alternada. A tensão foi simulada por meio de ciclagem mecânica, com os espécimes posicionados em máquina de fadiga cíclica e submetidos a carregamentos oblíquos de 50N, na frequência de 2Hz, na vertente lisa e na vertente triturante da face vestibular, por 6 x 105 ciclos. Os desafios biocorrosivos foram realizados pela aplicação de 2mL de ácido hidroclorídrico por 10s. E os desafios de fricção (abrasão) foram reproduzidos com escovas elétricas (300g / 20s), com a utlização de pasta Colgate Total 12. A rugosidade da superfície, ângulo e altura dos degraus foram medidos antes e após os tratamentos, utilizando microscópio confocal a laser 3D. Para avaliação da distribuição e homogeineidade dos dados, foram realizados os testes de Shapiro Wilk e Levene. E posteriormente, aplicados o teste t-pareado, análise de variância em fator (ANOVA) e teste de Tukey (&#945; = 0,05). Em seguida, três amostras de cada grupo foram analisadas no micro-CT para as análises qualitativas de perda estrutural. O CV promoveu maior concentração de tensões de tração na região cervical do que o CO. A presença da biocorrosão foi fator importante na alteração de rugosidade e a abrasão resultou em comportamento semelhante entre os grupos. A associação TBF promoveu as maiores alterações nas estruturas dentais. Esmalte e dentina mostraram desempenho distinto de acordo com as diferentes interações. Foi verificada relação entre os resultados gerados pelo MEF e os achados experimentais para os grupos TF, TBF, TB. O grupo TBF foi mais influente na formação microestrutural das LCNCs, para esmalte. Para dentina, a associação de pelo menos dois fatores foi suficiente para gerar degradação significativa de tecido na região cervical. Todos as associações de fatores estudadas mostraram potencial para promover a formação de LCNCs. / Mestre em Odontologia

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos estão presentes em inúmeras células que participam do processo de reparo como fibroblastos, queratinócitos, células inflamatórias e células endoteliais. Diversos trabalhos demonstram que estes receptores modulam o processo de reparo tecidual. Entretanto, nenhum trabalho demonstrou se o bloqueio destes receptores compromete o reparo de úlceras de pressão. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos no reparo de úlceras de pressão em camundongos, para isto utilizamos um modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão. No presente estudo, utilizamos animais que foram tratados por gavagem com propranolol (um antagonista não seletivo dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos). A administração do antagonista teve início um dia antes do início dos ciclos de isquemia e reperfusão e se manteve diariamente até a eutanásia. Para desenvolver a úlcera de pressão, um par de magnetos foi aplicado no dorso dos animais previamente depilado. O período de permanência do magneto é caracterizado como período de isquemia, enquanto sua retirada é caracterizada como período de reperfusão. Os ciclos de isquemia e reperfusão foram repetidos duas vezes, e ao final do último ciclo, duas úlceras circulares foram criadas no dorso dos animais. Os animais foram mortos 3, 7, 14 e 21 dias após a lesão. Após o último ciclo de isquemia, o fluxo sanguíneo da área comprimida foi nulo, 7 horas após a compressão o fluxo sanguíneo estava elevado, com níveis superiores ao da pele normal. Após 24 e 48 horas, o fluxo sanguíneo estava reduzido e abaixo dos níveis da pele normal. O bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos aumentou os níveis de peróxidos lipídicos 3 dias após a lesão, comprometeu a migração dos queratinócitos, levando a um aumento da proliferação epitelial, resultando em uma re-epitelização atrasada. O retardo na formação da neo-epiderme induzido pelo bloqueio destes receptores prejudicou a remoção do tecido necrótico. O bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos aumentou o número de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), os níveis proteicos de elastase neutrofílica 3 dias após a lesão e reduziu os níveis proteicos de MCP-1 3 dias após a lesão e os níveis proteicos de MMP-12 7 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos aumentou a proliferação celular e apoptose no tecido conjuntivo 7 dias após a lesão e aumentou a densidade de vasos sanguíneos 14 e 21 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos retardou a diferenciação miofibroblástica e reduziu os níveis proteicos de TGF-&#946; 1/2/3 3 dias após a lesão e a contração da lesão. Vinte e um dias após a lesão, o bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos aumentou a espessura da neo-epiderme e a expressão de tenascina-C em fibroblastos e reduziu a deposição de colágeno. Em conclusão, o bloqueio dos receptores &#946;1- e &#946;2-adrenérgicos atrasa o reparo tecidual em úlceras de pressão. / &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors are present in several cells that participate in tissue repair such as fibroblasts, keratinocytes, inflammatory cells and endothelial cells. Several studies demonstrate that these receptors modulate cutaneous wound healing. However, neither study demonstrated if the blockade of theses receptors compromises the cutaneous wound healing of pressure ulcers. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors in wound healing of pressure ulcer in mice using a noninvasive model of lesion induced by ischemia and reperfusion. In this study, animals were also treated with propranolol (a nonselective antagonist of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors). Antagonism administration began one day before ischemia-reperfusion cycles and daily maintained until euthanasia. In order to develop a pressure ulcer, a shaved skin was placed between a pair of magnet disks. The period of magnet placement is characterized as ischemia period, whereas release period as reperfusion period. Two cycles of ischemia and reperfusion were performed, and after last cycle, two circular ulcers per animal were created in the animal dorsum. Animals were killed 3, 7, 14 and 21 days after wounding. After last ischemia cycle, blood flow of compressed area was nulled, 7 hours after compressed area underwent reperfusion during subsequent hours reaching blood flow 98% superior of normal skin. After 24 and 48 hours, blood flow of compressed area was again reduced when compared with normal skin. Blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors increased the levels of lipid peroxydes 3 days after wounding, compromised keratinocyte migration leading to an increase epithelial proliferation and impairment in the re-epithelialization. The impairment in the neo-epidermis formation induced by &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptor blockade delayed the necrotic tissue loss. Blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors increased the inflammatory cell number (macrophages and neutrophils), protein levels of neutrophil elastase 3 days after wounding and reduced protein levels of MCP-1 3 days after wounding and protein levels of MMP-12 7 days after wounding. Blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors increased cell proliferation and apoptosis in connective tissue 7 days after wounding and blood vessel density 14 and 21 days after wounding. Blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors impaired myofibroblastic differentiation and reduced protein levels of TGF-&#946; 1/2/3 3 days after wounding and lesion contraction. Twenty-one days after wounding, &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptor blockade increased neo-epidermis thickness and tenascin-C-positive fibroblast number and reduced collagen deposition. In conclusion, blockade of &#946;1- and &#946;2-adrenergic receptors delays cutaneous wound healing of pressure ulcers.