nÃo hà / O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de diferentes doses do Bokashi no crescimento das culturas de coentro, de cebolinha, em alguns atributos quÃmicos do solo e na atividade da biomassa microbiana do solo, para testar as hipÃteses de que a utilizaÃÃo do Bokashi no cultivo de cebolinha e coentro melhora o desenvolvimento das plantas em consequÃncia da melhoria do solo. A conduÃÃo do experimento foi realizada na casa de vegetaÃÃo do setor de horticultura do Departamento de Fitotecnia da Universidade Federal do CearÃ(UFC), situada no Campus do Pici, em Fortaleza, em um perÃodo de 60 dias apÃs o transplantio das mudas de cebolinha, das bandejas para os vasos plÃsticos contendo 4kg de solo e um perÃodo de 40 dias pro cultivo do coentro. O solo utilizado foi oriundo de Ãrea que predomina um Neossolo QuartzarÃnico, da comunidade do Coqueiro do Alagamar, no municÃpio de Pindoretama-CE. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, onde os tratamentos foram: T1- [4 kg Solo + 5g Bokashi + (20g composto orgÃnico = c.o.)]; T2- (4 kg Solo + 10g Bokashi + c.o.); T3-(4 kg Solo + 15g Bokashi + c.o.); T4- (4 kg Solo +20g Bokashi + c.o.); T5- (4 kg S + 20 g Bokashi); T6- (4 kg S + c.o.) e T7- Controle (solo natural). Foram avaliadas a altura e a massa da matÃria seca da parte aÃrea das plantas de cebolinha e do coentro e no solo, o pH, o Carbono orgÃnico total, o NitrogÃnio total e o FÃsforo disponÃvel, a colonizaÃÃo micorrÃzica arbuscular, a respiraÃÃo basal do solo, o quociente metabÃlico e o carbono da biomassa microbiana. Pelos resultados obtidos, o Bokashi, na dose de 20 g, foi o que mais favoreceu o desenvolvimento das plantas. NÃo houve influÃncia nos teores de NitrogÃnio total dos solo cultivados, mas os teores do carbono orgÃnico total e do carbono da biomassa microbiana tiveram um aumento significativo nos tratamentos T4 e T5. A quantidade de esporos de FMA nas amostras de solo analisadas foi menor nos tratamentos com Bokashi e mostrou-se estatisticamente diferente do T7 â Controle, que foi a que apresentou a maior quantidade de esporos. A colonizaÃÃo micorrÃzica arbuscular aumentou nos tratamentos T6 e T7 que nÃo usavam o Bokashi e foi menor nos tratamentos T4 e T5, que receberam a dose de 20g do Bokashi. / This study aimed to evaluate the effect of different doses of Bokashi in crop growth of coriander and chives, in some soil chemical properties and in microbial biomass activity of soil, to test the hypothesis that the use of the Bokashi in the cultivation of coriander and chives improve plant growth, increases the quality of the soil . The conduct of the experiment was accomplished in the greenhouse horticulture sector of the Department of Plant Science of the Federal University of Cearà (UFC), located in the Campus do Pici, Fortaleza, in a period of 60 days after transplanting the chives seedlings, from trays to plastic pots containing 4 kg of soil and for a period of 40 days pro cultivation of coriander. The soil used was from the area that predominates Quartzipsamments Neosol from the community of Coqueiro do Alagamar, in the municipality of Pindoretama-Ce. The experimental design was of completely randomized kind, consisting of seven treatments: T1- [4 kg Soil + 5g Bokashi + (20g organic compound = c.o)], T2-(4 kg soil+ 10g Bokashi + co) , T3-(4 kg soil+ 15g Bokashi + co), T4- (4 kg Solo +20 g Bokashi + co),-T5 (4 kg S + 20 g Bokashi), T6-(4 kg S + co) and T7 - (natural soil)Control. The characteristics evaluated were the height and dry mass of the aerial part of chives and coriander and in the soil, pH, total organic carbon, total nitrogen and available phosphorus, arbuscular mycorrhizal colonization, the soil basal respiration, metabolic quotient and microbial biomass carbon . By the results obtained the Bokashi at a dose of 20 g, was the one that most favored plant development. There was no influence on the levels of total nitrogen of the cultivated soil, but the levels of total organic carbon and microbial biomass carbon had a significant increase in T4 and T5 treatments. The number of AMF spores in the soil samples analyzed was lower in the treatments with Bokashi and was statistically different in T7 - Control, being the highest one. Mycorrhizal root colonization increased in treatments T6 and T7 which were not using the Bokashi and was lower in treatments T4 and T5, which received the dose of 20g of Bokashi.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-10-31T12:53:46Z No. of bitstreams: 1 Jessica de Oliveira Souza.pdf: 1861955 bytes, checksum: e627e866a520acc029a6fc86493af85f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-31T12:53:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jessica de Oliveira Souza.pdf: 1861955 bytes, checksum: e627e866a520acc029a6fc86493af85f (MD5) Previous issue date: 2018-08-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Arbuscular Mycorrhizal Fungi (AMF) are present in the soil of the most different environments, forming associations with higher plants that in response to this association show an improvement in the nutritional state of the plant and consequently a greater growth. Associations of plants with AMF allows plants to establish themselves even in locations with unfavorable conditions for plants, increasing their survival, as well as helping to restore degraded ecosystems, whose benefits can be even greater when native AMF are used. However there are need knowing the diversity of associations and the ecological role that each species plays in order to elaborate management plans and to improve the techniques of recovery of degraded areas. In this sense, the objective of this study was to analyze the occurrence and diversity of AMF, in different forest typologies of the state of Pernambuco, and to compare the occurrence and diversity of these fungi in Eucalyptus spp. variations between dry and rainy seasons in these environments. Eighty samples of rhizospheric soil were collected, and 20 samples were collected at Eucalyptus spp. and 20 in the native forest of the Experimental Station of Itapirema, IPA in Goiana, 20 soil samples in Eucalyptus spp. of the Petribu Factory, and 20 in the native forest fragment of EECAC of the municipality of Carpina. AMF spore extraction was carried out following the methodology proposed by Gerdemann and Nicolson (1963), followed by centrifugation and suspension in 50% sucrose (JENKINS, 1964.). Diversity, density and frequency analyzes were performed, as well as analysis of variance (ANOVA) and comparison test of means were also analyzed for richness and similarity. Twenty six morphospecies belonging to seven genera of AMF, Glomus, Gigaspora, Acaulospora, Racocetra, Rhizoglomus, Rhizophagus and Dentiscutata were found. with the highest absolute densities (except for the Eucalyptus spp. planting area of the Petribú Factory, during the rainy season). The areas differed in relation to the period climatic and vegetation type, finding a higher index of diversity in areas of native forest and a greater index of dominance in planting areas. Generally, larger amounts of spores were found in the dry period than in the rainy season. / Os Fungos Micorrízicos Arbusculares (FMAs) estão presentes no solo dos mais diferentes ambientes, formando associações com plantas superiores que, em resposta a essa associação, apresentam uma melhoria no estado nutricional da planta e consequentemente um maior crescimento. A associação de plantas com FMAs permite aos vegetais se estabelecerem até mesmo em locais com condições desfavoráveis para as plantas, aumentando sua sobrevivência o que pode ajudar na restauração de ecossistemas degradados, cujos benefícios podem ser ainda maiores quando com FMAs nativos, havendo, portanto, necessidade de se conhecer a diversidade de associações e o papel ecológico que cada espécie desempenha para elaborar planos de manejo e aperfeiçoar as técnicas de recuperação de áreas degradadas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi analisar a ocorrência e diversidade de FMA, em diferentes tipologias florestais do estado de Pernambuco, e comparar com a ocorrência e diversidade desses fungos existentes em plantios de Eucalyptus spp., nas proximidades da floresta nativa, observando as variações entre estação seca e chuvosa nesses ambientes. Foram coletadas 80 amostras de solo rizosférico, sendo 20 amostras no plantio de Eucalyptus spp. e 20 na mata nativa da estação Experimental de Itapirema, do IPA em Goiana, 20 amostras de solo no plantio de Eucalyptus spp. da Usina Petribu, e 20 no fragmento de mata nativa da EECAC do município de Carpina. A extração de esporos de FMA foi feita seguindo a metodologia proposta por Gerdemann e Nicolson (1963), com posterior centrifugação e suspensão em sacarose a 50% (JENKINS, 1964). Foram feitas análises de diversidade, densidade e frequência, além de análise de variância (ANOVA) e teste de comparação de médias, ainda foram realizadas análises de riqueza e de similaridade. Foram encontradas 26 morfoespécies pertencentes a sete gêneros de FMA, Glomus, Gigaspora, Acaulospora, Racocetra, Rhizoglomus, Rhizophagus e Dentiscutata, sendo o gênero Glomus o de maior riqueza (oito espécies) em comparação aos demais, ocorrendo em todas as áreas analisadas, apresentando as maiores densidades absolutas, com exceção da área de plantio de Eucalyptus spp. da Usina Petribú, no período chuvoso. As áreas diferiram entre si quanto ao período climático e ao tipo de vegetação, sendo encontrado um maior índice de diversidade em áreas de mata nativa e um maior índice de dominância nas áreas de plantios, além de serem encontrados, de modo geral, maiores quantidades de esporos no período seco do que no período chuvoso.

Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2017-11-22T19:30:42Z No. of bitstreams: 2 Dout_2017_Adriano_Mitio_Inagaki.pdf: 1950982 bytes, checksum: 0c974aadf10da4670cea7331baf30f39 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-22T19:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dout_2017_Adriano_Mitio_Inagaki.pdf: 1950982 bytes, checksum: 0c974aadf10da4670cea7331baf30f39 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work was to analyze the development and gas exchange of maize plants under fertilization and inoculation of Azospirillum brasilense in Arbuscular Microrrimal Fungi (AMF), as well as the residual effects of A. brasilense and for the production of phosphorus in corn. Response to nitrogen fertilization. In the greenhouse, no first experiment had two corn crops. For the first cultivation use the block design with four replications, in a 2x4 factorial scheme. Inoculation of A. brasilense and control and four doses of phosphate fertilization (0; 150; 300 and 450 mg dm-3) were tested, without nitrogen fertilization. In the second harvest, a residual effect of the inoculation and P doses was obtained, obtaining the same factorial scheme (2x4) composed of the same treatments, under successive maize cultivation, with nitrogen fertilization. In the second experiment, a randomized block design was used in a 2x5 factorial scheme and four replications. The first factor was the presence and absence of phosphate fertilization and the second factor was the combination of inoculation with A. brasilense and FMA species, resulting in the following treatments: control; Inoculation of A. brasilense; A. brasilense + Acaulospora scrobiculata; A. brasilense + Claroideoglomus etunicatum; E A. brasilense + Gigaspora margarita. Similar shapes of the following variables: stem diameter, leaf number, plant length, root volume, leaf dry matter mass, stem + hem, root, leaf area and SPAD index. Also evaluated were foliar content of N and P, populations of endophytic diazotrophic bacteria in the roots and number of AMF spores in the substrate. Net assimilation rate of CO2 (A), leaf transpiration (E), stomatal conductance (gs) and internal CO2 concentration (Ci). With the results of the first experiment, the inoculation of A. brasilense on corn seeds associated with phosphate fertilization, without addition of nitrogen, resulted in a higher development of the plants at 36 days after emergence (AED). At a dose of 300 mg dm-3 of P, maize plants with nitrogen fertilizer coverage and the remaining population of A. brasilense had a positive effect in relation to the development of the crop. As a consequence of the higher content of P and leaf chlorophyll, the plants showed higher A, E, gs and Ci resulting in higher water efficiency (A/E). In the second experiment, the treatments of A. brasilense + A. scrobiculata and A. brasilense + C. etunicatum resulted in a greater accumulation of leaf N in the absence of phosphate fertilization in relation to treatment without inoculation. The inoculation with increased insulation or foliar content of P when compared to the control treatment. The use of phosphate fertilization resulted in an increase in the gas exchange and, consequently, a greater development of plants. Roots of maize plants submitted to phosphate fertilization had a higher population of diazotrophic bacteria. In the present study, the mycorrhizal spores of A. scrobiculata, C. etunicatum and G. margarita were not observed on the substrate at 30 DAE. / O objetivo do trabalho foi analisar o desenvolvimento e trocas gasosas de plantas de milho conduzidas sob adubação fosfatada e inoculação de Azospirillum brasilense em associação aos fungos micorrízicos arbusculares (FMA), bem como os efeitos residuais do A. brasilense e do fósforo sob segundo cultivo de milho em resposta a adubação nitrogenada de cobertura. Em casa de vegetação, no primeiro experimento houve dois cultivos de milho. Para o primeiro cultivo utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso com quatro repetições, em esquema fatorial 2x4. Testou-se a inoculação de A. brasilense e tratamento sem inoculação, e quatro doses de adubação fosfatada (0; 150; 300 e 450 mg dm-3), desprovido da adubação nitrogenada. No segundo cultivo foi avaliado o efeito residual da inoculação e doses de P, obtendo o mesmo esquema fatorial (2x4) composto pelos mesmos tratamentos, sob cultivo sucessivo de milho, com adubação nitrogenada de cobertura. No segundo experimento utilizou-se delineamento em blocos ao acaso em esquema fatorial de 2x5 e quatro repetições. O primeiro fator foi composto pela presença e ausência de adubação fosfatada e o segundo pela combinação da inoculação com A. brasilense e espécies de FMA resultando nos seguintes tratamentos: sem inoculação; inoculação de A. brasilense; A. brasilense+Acaulospora scrobiculata; A. brasilense+Claroideoglomus etunicatum; e A. brasilense+Gigaspora margarita. Foram realizadas análises das seguintes variáveis: diâmetro de colmo, número de folhas, comprimento de plantas, volume de raiz, massa de matéria seca de folhas, colmo+bainha, raiz, área foliar e índice SPAD. Também se avaliou o teor foliar de N e P, população de bactérias diazotróficas endofíticas nas raízes e número de esporos de FMA no substrato. Avaliou-se ainda índices de trocas gasosas: taxa de assimilação líquida de CO2 (A), transpiração foliar (E), condutância estomática (gs) e concentração interna de CO2 (Ci). Com os resultados do primeiro experimento constatou-se que a inoculação de A. brasilense em sementes de milho associada à adubação fosfatada, sem adição de nitrogênio, proporcionou maior desenvolvimento de plantas aos 36 dias após emergência (DAE). Sob dose de 300 mg dm-3 de P, plantas de milho conduzidas com adubação nitrogenada de cobertura e população remanescente de A. brasilense, demonstraram efeito positivo em relação ao desenvolvimento da cultura. Em consequência do maior teor de P e clorofila foliar, as plantas apresentaram maior A, E, gs e Ci resultando em maior eficiência no uso da água (A/E). No segundo experimento, os tratamentos de A. brasilense+A. scrobiculata e A. brasilense+C. etunicatum resultaram maior acúmulo no teor foliar de N na ausência da adubação fosfatada, comparado ao tratamento sem inoculação. A inoculação com A. brasilense de forma isolada aumentou o teor foliar de P quando comparado ao tratamento sem inoculação. A utilização da adubação fosfatada resultou em aumento nas trocas gasosas e em consequência, maior desenvolvimento de plantas. Raízes de plantas de milho submetido à adubação fosfatada apresentaram maior população de bactérias diazotróficas. No presente estudo, não foi observado esporos micorrízicos de A. scrobiculata, C. etunicatum e G. margarita, no substrato aos 30 DAE.

Os fungos representam cerca de 75% da biomassa microbiana em áreas florestais, desempenhando funções importantes, desde a mineralização dos resíduos orgânicos até a disponibilização de nutrientes para plantas por meio das associações micorrízicas, o que influencia a ciclagem de nutrientes e, consequentemente, o crescimento das árvores. O objetivo desse trabalho foi avaliar a comunidade de fungos do solo, da rizosfera e do sistema radicular de Eucalyptus grandis e Acacia mangium plantados em monocultivos e em consórcio, e encontrar respostas para os padrões observados por meio da correlação com os atributos físicos, químicos, biológicos e a profundidade do solo. A coleta das amostras foi realizada na Estação Experimental de Ciências Florestais de Itatinga, em 2016, quando as plantas estavam com 2 anos de idade. Foram coletadas amostras em quatro tratamentos: monoculturas de E. grandis e de A. mangium e consórcios de E. grandis e de A. mangium, nos quais foram construídas trincheiras para coleta das amostras nas camadas de 0-10, 10-20, 20-50 e 50-100 cm de profundidade. Foram caracterizados os atributos físicos e biológicos do solo e os atributos químicos do solo, da rizosfera e das raízes. Para a avaliação micorrízica, foi quantificado o número de esporos de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) e as taxas de colonização radicular por FMA e por fungos ectomicorrízicos. Foi avaliada a morfologia das estruturas das micorrizas arbusculares e ectomicorriza (ECM). A estrutura da comunidade de fungos do solo e da rizosfera foi avaliada por meio da técnica de Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). Para isso, o DNA foi amplificado utilizando os primers ITS1f-FAM e ITS4 e a restrição dos fragmentos foi realizada com a enzima HaeIII. A abundância de cópias do gene ITS do solo e da rizosfera foi quantificada por PCR quantitativo (qPCR), utilizando os primers ITS1f e 5.8s. Os atributos físicos, químicos e biológicos tiveram poucas variações entre os tratamentos avaliados, sendo as maiores diferenças encontradas entre as profundidades. O número de esporos (<29) e as taxas de colonização micorrízica (<48%) foram baixos em todos os tratamentos, e se reduziram com o aumento da profundidade. As plantas de A. mangium não formaram micorrizas arbusculares. Nas raízes de E. grandis, não houve a formação de arbúsculos, mas foi verificada a presença de hifas enroladas (hyphal coils), estrutura de micorriza do tipo Paris. A anatomia das ECM confirmou a colonização destes fungos nas raízes das plantas estudadas. O qPCR mostrou maior abundância de genes ITS na rizosfera em relação ao solo, assim como nas camadas superficiais (0-10 cm) em relação às mais profundas (10 cm abaixo). A Análise de Coordenadas Principais revelou diferenças na estrutura das comunidades de fungos nos tratamentos estudados, principalmente para a região da rizosfera, diferenciando o perfil de fungos do monocultivo de E. grandis dos demais tratamentos, assim como a influência da A. mangium na estruturação da comunidade. A análise de redundância mostrou a influência de alguns atributos químicos nas taxas de colonização e estruturação da comunidade. Dessa forma, conclui-se que em sistema de consórcio, uma espécie de planta parece ser mais influente do que a outra na estruturação da comunidade de fungos e essa influência é mais evidente na rizosfera. Além disso, os atributos químicos são fatores importantes na organização da comunidade fúngica. / The fungi represent about 75% of the microbial biomass in forest areas, performing important functions, from the mineralization of the organic residues to the availability of nutrients to plants through mycorrhizal associations, which influences the nutrient cycling and, consequently, the growth of trees. The objective of this work was to evaluate the community of fungi of the soil, rhizosphere and root system of Eucalyptus grandis and Acacia mangium planted in monocultures and consortium, and to find explanations for the observed patterns through the correlation with physical and chemical soil attributes and soil depth. The samples were collected at the Experimental Station of Forest Sciences of Itatinga in 2016, when the plants were 2 years old. Samples were collected in four treatments: monocultures of E. grandis and A. mangium and consortia of E. grandis and A. mangium, in which trenches were constructed to collect samples in the 0-10, 10-20, 20 -50 and 50-100 cm deep. The physical and biological attributes of the soil and the chemical attributes of soil, rhizosphere and roots were characterized. For the mycorrhizal evaluation, the number of spores of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and the rates of root colonization by AMF and ectomycorrhizal fungi were quantified. The morphology of arbuscular mycorrhizal and ectomycorrhizal (ECM) structures was evaluated. The structure of the soil and rhizosphere fungi community by was evaluated by the technique of Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). For this, the DNA was amplified using primers ITS1f-FAM and ITS4 and restriction of the fragments was performed with the enzyme HaeIII. The abundance of ITS gene copies of soil and rhizosphere was quantified by quantitative PCR (qPCR), using primers ITS1f and 5.8s. The physical, chemical and biological attributes had few variations among the evaluated treatments, being the greatest differences found between the depths. The number of spores (<29) and mycorrhizal colonization rates (<48%) were low in all treatments, and reduced with increasing depth. A. mangium plants did not form FMA. In the roots of E. grandis, there was no formation of arbuscules, but we found the presence of hyphal coils, mycorrhizal structures of the Paris type. The anatomy of the ECM confirmed the colonization of these fungi in the roots of the studied plants. The qPCR showed higher abundance of ITS genes in the rhizosphere in relation to the soil, as well as in the superficial layers (0-10 cm) in relation to the deeper ones (10 cm below). The Principal Coordinates Analysis revealed differences in the structure of the fungal communities in the treatments studied, especially for the rhizosphere region, differentiating the fungal profile of the E. grandis monoculture from the other treatments, as well as the influence of A. mangium on the structure of the community. The redundancy analysis showed the influence of some chemical soil attributes on the rates of colonization and community structuring. Thus, it is concluded that in a consortium system, one plant species seems to be more influential than the other in structuring the fungal community, and this influence is more evident in the rhizosphere. In addition, chemical attributes are important factors in the organization of the fungal community.

Os solos brasileiros são predominantemente ácidos, ocorrência comum nas regiões tropicais. Esta condição, aliada a outros fatores abióticos e bióticos, pode resultar em toxicidade de manganês (Mn) às plantas, o que limita o seu desenvolvimento. A utilização de práticas agrícolas convencionais propicia o aumento da toxidez de Mn, à medida que reduz o teor de matéria orgânica. Para atenuar este problema, algumas práticas como a calagem e o melhoramento genético são amplamente utilizados. Entretanto, a utilização de alternativas de manejo da cultura através do uso da simbiose micorrízica, para induzir maior resistência das plantas a altos níveis de Mn, parece bastante promissora. Para investigar possíveis mecanismos de indução da resistência e interações de nutrientes no controle da toxicidade de Mn em soja, foram avaliados o crescimento, a absorção e a acumulação de Mn, Fe, P e Ca e a atividade de catalase, peroxidase, superóxido dismutase e oxidase de AIA, nas folhas e raízes das plantas micorrizadas e não micorrizadas, além do nível de colonização de raízes pelo fungo micorrízico arbuscular (FMA). A planta teste foi a soja (Glycine max L. Merr. CV. IAC 8-2). O experimento foi executado em casa de vegetação, em vasos preenchidos com 4 Kg de solo classificado como Neossolo Quartzarênico típico, previamente autoclavado para eliminar fungos micorrízicos arbusculares. O delineamento foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial, 4x5: dois isolados de FMA, Glomus etunicatum e Glomus macrocarpum, cada qual com 30 mg kg –1 de P adicionado ao substrato e dois controles não inoculados, sendo um com 30 mg kg –1 e outro com 50 mg kg –1 de P, 5 níveis de Mn (0, 5, 10, 20, 40 mg kg -1 ). Foram realizadas duas épocas distintas de colheita, aos 45 e 90 dias. As atividades enzimáticas foram avaliadas pelo método PAGE não-denaturante através de análise visual. Os resultados demonstram que níveis de Mn entre 10 e 40 mg kg -1 no substrato podem induzir respostas de toxidez de Mn em plantas de soja, acompanhadas de redução de crescimento e alterações no padrão de absorção de vários nutrientes vegetais. O aumento da dose de P e a presença da micorriza são fatores de atenuação da toxidez de Mn em soja, visto que plantas micorrizadas contêm menor concentração de Mn em seus tecidos e, de uma maneira geral, menor atividade enzimática de peroxidase (PO) e oxidase do ácido-indolacético (AIA) do que as plantas controles. Aumentos no nível de Mn do substrato podem causar um aumento da atividade de PO e de oxidase de AIA nas plantas, sendo que as plantas mais estressadas quase sempre apresentam maior atividade dessas enzimas. Apesar da superóxido dismutase (SOD) ser também enzima antioxidativa, apresenta um padrão eletroforético diferenciado da PO, sendo que na raiz sua maior atividade está correlacionada com a presença do FMA. / Brazilian soils are predominantly acid, which is considered a common incident in tropical regions. Soil acidity in combination with biotic and non-biotic factors can result manganese toxicity in plants, limiting their development. The use of conventional agricultural practices promotes an increase in Mn toxicity, as it reduces the soil content of organic matter. This problem can be minimized by the use of some tilling practicies like liming and breeding, which are widely used. However, crop management alternatives through the use of mycorrhizae to induce greater Mn tolerance in plants under high levels of Mn seem to be promising. In this work, plant growth, the absorption, distibution of Mn, Fe, P, Ca and activity of catalase, peroxidase, superoxide dismutase and indolacetic acid oxidase were evaluated in leaves and roots of plants inoculated with mycorrhizal fungi and non-inoculated ones, to invetigate a possible resistance induction mechanism and nutrient interactions in control of toxic levels of Mn. A greenhouse experiment was conducted with soybean plant (Glycine max L. Merr. CV. IAC 8-2) in a completely randomized factorial design 4x5: inoculation of two different arbuscular mycorrhizal fungi (AMF): Glomus etunicatum and Glomus macrocarpum, which received 30 mg kg –1 of P, and two non-inoculated controls, one that received 30 mg kg –1 and the other with 50 mg kg –1 of P; 5 levels of Mn (0, 5, 10, 20, 40 mg kg -1 ). There were two harvest periods, 45 and 90 days. The enzymatic activities were evaluated in non-denaturing polyacrilamyde gel eletrophoresis (PAGE). Manganese levels between 10 and 40 mg kg -1 in the substrate can induce Mn toxicity in soybean plants, that results in a growth reduction and in alterations in the nuttrient absorption alterations of the plants. The increase of P and the presence of mycorrhizae result in the alleviation of Mn toxicity in soybean plants. Micorrhizal plants present lower Mn concentration and generally less enzymatic activity of indolacetic acid oxidase and peroxidase than control plants. Although both, peroxidase and superoxide dismutase are antioxidant enzymes, they present differentiated electrophoretic standards. Most of the time peroxidase and indolacetic acid oxidase activities increase due to increasing Mn levels. Superoxide dismutase activity, however, is higher in the shoots of micorrhizal plants when compared to control plants.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-06-05T12:51:35Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1056418 bytes, checksum: a4f83dbd4ba9d8c5874aa1cc1d9000d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-05T12:51:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1056418 bytes, checksum: a4f83dbd4ba9d8c5874aa1cc1d9000d5 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A obtenção de mudas de qualidade é fundamental para o sucesso da implantação de um projeto florestal, pois o crescimento e a sobrevivência das plantas estarão atrelados à sua qualidade. A nutrição mineral e a seleção de microrganismos simbiontes a serem adicionados ao substrato de cultivo são de grande importância e influenciam a qualidade de uma muda. Contudo, para grande parte das espécies arbóreas nativas do Cerrado, esse conhecimento ainda não foi obtido, podendo dificultar ou inviabilizar a produção das mudas. O presente estudo teve como objetivo avaliar o crescimento inicial e a qualidade de mudas de Hancornia speciosa (mangabeira) e Brosimum gaudichaudii (mama-cadela) em resposta a doses de P e inoculação de microrganismos simbiontes provenientes do solo próximo às plantas matrizes e inóculo de fungos micorrízicos arbusculares (FMA). Foram avaliados dois experimentos, sendo ambos conduzidos no delineamento inteiramente casualizado (DIC). O experimento um foi composto por cinco doses de P (0, 100, 200, 300 e 400 mg dm -3 ), com seis repetições, totalizando 30 unidades experimentais por espécie, sendo o substrato uma mistura do solo rizosférico de plantas matrizes (SRPM) das espécies em estudo + horizonte subsuperficial de um Latossolo Vermelho-Amarelo distrófico autoclavado (LVAd-Aut) + substrato comercial Tropstrato Florestal® autoclavado (1:1:1,v:v:v). O experimento dois foi composto por quatro formulações de substrato contendo SRPM, LVAd-Aut e substrato comercial autoclavados (SC-Aut), onde esses receberam ou não a adição de inóculo de FMA (Mix), composto pelas espécies Gigaspora decipiens, Rhizophagus clarus e Scutellospora heterogama. Os tratamentos deste experimento consistiram de: T1 (LVAd-Aut + SC-Aut), T2 (LVAd-Aut + SC-Aut + Mix), T3 (LVAd-Aut + SC-Aut + SRPM) e T4 (LVAd-Aut + SC-Aut + SRPM + Mix), com seis repetições, totalizando 24 unidades experimentais por espécie. Ao final de cada experimento, realizou-se a determinação da taxa de colonização micorrízica (CM), a abundância de esporos presentes no substrato (AE) e as medições da altura total da parte aérea (H), diâmetro do coleto (DC), volume do sistema radicular (VR), massa de matéria seca da parte aérea (MSPA), raízes (MSR) e total (MST); relações H/DC, H/MSPA, MSPA/MSR, Índice de Qualidade de Dickson (IQD) e, para o experimento dois, foi quantificada, também, a dependência micorrízica (DM). No experimento um, plantas de mangabeira sofreram redução da CM em resposta aos níveis de P testados e tiveram resposta linear positiva à aplicação de P ao analisar as relações H/MSPA e MSPA/MSR, enquanto a relação H/DC não sofreu efeito do P. As demais variáveis em mudas de H. speciosa foram influenciadas negativamente pela aplicação de P. Em relação ao experimento dois, as espécies em estudo tiveram DM variando de moderada a alta quando o SRPM foi adicionado ao substrato de cultivo. A adição do SRPM gerou incremento na H, DC, VR, MSPA, MSR, MST e aumento da qualidade de mudas de H. speciosa e B. gaudichaudii, em comparação às plantas do tratamento controle. Para a produção de mudas de qualidade de H. speciosa e B. gaudichaudii, ao usar o substrato utilizado neste ensaio, a adubação fosfatada é desnecessária, sendo recomendada a utilização de solo rizosférico da planta matriz e, ou inoculação com FMA para garantir a produção de mudas de mangabeira e mama-cadela. / Obtaining seedlings of quality is essential to the successful implementation of a forestry project, because the growth and survival of plants will be tied to its quality. Mineral nutrition and selection of symbionts microorganisms to be added to the substrate of seedling production are of great importance and influence the quality of the seedlings. However, for most of the native tree species of Cerrado, this knowledge has not yet been obtained, and may hinder or derail the production of seedlings. The present study aimed to evaluate the initial growth and the quality of seedlings of Hancornia speciosa (mangabeira) and Brosimum gaudichaudii (mama-cadela) in response to P and inoculation doses of microorganisms symbionts from the soil around the plants and inoculum of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF). Two experiments were evaluated, both being conducted in completely randomized design (CRD). The experiment was composed of five doses of P (0, 100, 200, 300 and 400 mg dm -3 ), with six repetitions, totalizing 30 experimental units per species, being the substrate a mixture of rhizospheric soil coming from the mother plant species (RSMP) + subsurface horizon of a Latossolo Vermelho-Amarelo distrófico (Oxisol) autoclaved (LVAd-Aut) + commercial Forest substrate autoclaved (SC-Aut) (1:1:1, v:v:v). The experiment two was composed of four substrate formulations containing RSMP, LVAd-Aut and SC-Aut, where these had or had not received the addition of AMF inoculum (Mix), composed by the species Gigaspora decipiens, Rhizophagus clarus and Scutellospora heterogama. The treatments evaluated in experiment two were T1 (LVAd-Aut + SC-Aut), T2 (LVAd-Aut + SC-Aut + Mix), T3 (LVAd-Aut + SC-Aut + RSMP) and T4 (LVAd-Aut + SC-Aut + RSMP + Mix), with six repetitions, totalizing 24 experimental units per species. At the end of each experiment, the determination of the rate of mycorrhizal colonization (CM), the abundance of spores present in the substrate (AE) and measurements of the total height of shot (H), stalk diameter (DC), volume of the root system (VR), mass of shoot dry matter (MSPA), mass of roots dry matter (MSR), and total dry matter (MST),beyond their relationships, and the Dickson’s quality index (IQD) and, for the experiment two, was quantified also the mycorrhizal dependence (DM). In one experiment, plants of mangabeira suffered reduction of CM in response to P levels tested and had positive linear response to P application to analyze relations H/MSPA and MSPA/MSR, while the ratio H/DC suffered no effect of P. The other variables in seedlings of H. speciosa were influenced negatively by applying P. compared to experiment two, the studied species had DM ranging from moderate to high when the RSMP was added to the substrate. The addition of the RSMP generated increase in H, DC, VR, MSPA, MSR, and MST, and increased the quality of seedlings of H. speciosa and B. gaudichaudii, as compared to the control treatment seedlings. For the production of quality seedlings of H. speciosa and B. gaudichaudii, when using the substrate used in this test, the phosphate fertilization it is recommended to use of rhizospheric soil of the mother plant and, or inoculation with AMF for guarantee the seedling production of mangabeira and mama- cadela.

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Na natureza, as orquídeas são totalmente dependentes de fungos micorrízicos para germinar. Estes fungos podem penetrar nas células das raízes e formar pélotons, os quais, quando digeridos pela planta, providenciam açúcares simples para o embrião. Durante a fase aclorofilada de desenvolvimento da plântula, orquídeas são obrigatoriamente dependentes dos fungos; algumas continuam assim por toda vida enquanto outras se tornam facultativamente responsivas à colonização. O objetivo deste trabalho foi identificar quantos clados de fungos podem estabelecer associação micorrízica com Coppensia doniana (sin. Oncidium donianum), uma orquídea amplamente distribuída nos arredores de Campos do Jordão e, demonstrar como as características morfológicas dos isolados, quando analisadas com ferramentas de estatística multivariada, podem ser úteis para a taxonomia destes fungos. Dez plantas foram amostradas em um sítio com vegetação típica de campos de altitude, junto ao Parque Estadual de Campos do Jordão. Fungos foram isolados pela transferência asséptica de cortes de raízes contendo pélotons para meios de cultura BDA modificados. Três clados de fungos foram formados, tanto analisando as características qualitativas das culturas quanto as quantitativas. Os clados foram identificados como dois morfotipos do gênero Ceratorhiza (fase anamórfica de Ceratobasidium) e uma Rhizoctonia-uninucleada. O sequenciamento da região ITS produziu resultados idênticos a estes, mostrando os mesmos três clados. Todas as sequências tiveram alta correlação com sequências de Ceratobasidium depositadas no Genbank, o que sugere uma alta afinidade de Coppensia doniana com este gênero. Também ficou demonstrado que os dados morfológicos, quando associados à estatística multivariada são uma ferramenta útil na taxonomia polifásica de Rhizoctonia spp. As sequências dos isolados de Coppensia doniana também foram comparadas com as de isolados de outras orquídeas, dentro da subtribo Oncidiinae, incluindo: Ionopsis utricularioides e Psygmorchis pussila, coletadas na região do Valle del Cauca Colômbia e isolados de 10 Ionopsis utricularioides, Oncidium altissimum e Tolumnia variegata, estudados por Otero (2002, 2004, 2007), em diferentes regiões de Porto Rico, Costa Rica, Cuba e Panamá. Esta última análise veio a comprovar a preferência de orquídeas da subtribo Oncidiinae por fungos do gênero Ceratobasidium, apesar de que os clados obtidos no Brasil e na Colômbia foram distantes filogeneticamente dos clados previamente estudados na América Central. Representantes dos três clados obtidos de C. doniana em Campos do Jordão foram também testados quanto à capacidade de induzir germinação em suas sementes. Todos isolados testados tiveram sucesso na germinação das sementes, levando as plântulas a estádios avançados de desenvolvimento após 30 dias, o que indica um alto potencial para utilização biotecnológica destes isolados para a germinação das sementes destas orquídeas, tanto para a floricultura comercial quanto para programas de reintrodução de espécies de orquídeas ameaçadas de extinção. / In nature, orchids are fully dependent on mycorrhizal fungi for germination. These fungi can penetrate root cells and form pelotons, whose digestion provides simple sugars for the embryo. During the achlorophyllous seedling stage, orchids are obligatory dependent on the fungi, and some species remain so through life, while others become facultatively responsive to fungal infection. The aim of this study was to identify how many fungal clades can establish mycorrhizal associations with Coppensia doniana, a widespread orchid from Campos do JordãoBrazil, and to demonstrate how their morphological features, analyzed with multivariate statistics, can be useful for classification. Ten plants were sampled in an Araucaria forest near Campos do Jordão. Fungi were isolated by transferring surface disinfected root segments containing pelotons to PDA culture medium. Three main fungal clades were formed by qualitative and quantitative morphological data. They were identified as two morphotypes of Ceratorhiza (anamorphic stage of Ceratobasidium) and one uninucleated Rhizoctonia. The ITS sequencing corroborates this identification, since the same three clades were found. All sequences were highly correlated to Ceratobasidium ITS data deposited at the Genebank, suggesting a high affinity between this species of Oncidiinae and Ceratobasidium. It also could be shown that morphological data associated with multivariate statistics can be a useful tool in fungal multi-level taxonomy. C. doniana sequences were also compared to sequences obtained from isolates of other orchids, belonging to the sub-tribe Oncidiinae, including: Ionopsis utricuarioides and Psygmorchis pussila, collected in Valle del Cauca Colombia and isolated from I. utricularioides, Oncidium altissimum and Tolumnia variegata, studied by Otero (2002, 2004, 2007) in different regions of Puerto Rico, Costa Rica and other Caribbean islands. This last analysis confirmed the preference of this Oncidiinae sub-tribe for Ceratobasidium, although isolates obtained in Brazil or Colombia belong to different clades from those previously studied in Puerto Rico, Costa Rica, Panama and Cuba. 12 Fungi representing the three clades obtained from C. doniana in Campos do Jordão were also tested for their ability to induce germination of C. doniana seeds, with a positive response for all of them, being able to bring the seedlings to advanced development stages in 30 days. These results suggest a high biotechnological potential of these isolates, to be used in orchid symbiotic germination for commercial flower production or for the reintroduction of endangered Brazilian orchid species.

As micorrizas arbusculares (MAs) são associações simbióticas mutualísticas entre fungos da ordem Glomales e as raízes da maioria das plantas terrestres. Os mecanismos moleculares que controlam o desenvolvimento e a eficiência da simbiose são pouco conhecidos, dificultando sua aplicação agrícola em larga escala. No entanto, a análise sistemática e em larga escala de genes expressos em raízes colonizadas por fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) em diferentes condições ambientais poderia contribuir de forma significativa para o conhecimento da biologia dessa simbiose. O objetivo deste trabalho foi identificar genes com expressão induzida ou suprimida em raízes de cana-de-açúcar colonizadas por Glomus clarum em condições de baixo e alto fósforo (P) no substrato de cultivo, durante o desenvolvimento da simbiose. Usando hibridização subtrativa supressiva (\"Suppresive Subtractive Hybridization, SSH) foram encontrados 74 genes com expressão diferencial significativa em raízes micorrizadas de 12 semanas após inoculação (SAI). Por outra parte, um total de 386 genes foram arranjados em membranas de nylon e sua expressão diferencial avaliada por sondas sintetizadas a partir de cDNA extraído em 4 SAI e 12 SAI. A hibridização em macroarranjos mostrou na presença da micorriza acúmulo diferencial de transcritos de genes codificando proteínas putativas envolvidas no metabolismo de jasmonato (COI1) e de etileno (ET) em raízes com 4 SAI, e ácido salicílico (AS) em raízes com 12 SAI. Dos genes que apresentaram acúmulo de transcritos regulados pela micorrização foram escolhidos 12 genes: que codificam cisteina protease (meabolismo de proteínas); remorina (dinâmica celular); dehidroascorbato redutase, e proteína rica em hidroxiprolina (resposta ao estresse); duas proteína associadas a senecência; a horcolina (função não definida); COI1 (metabolismo de jasmonato); catalase, germina, glutationa (estresse oxidativo); quitinase (resposta de defesa), para analise de acúmulo de transcritos por qRT-PCR em 4, 6, 8, 10 e 12 SAI. Os resultados indicam que em etapas precoces do desenvolvimento das MAs são ativados genes que estão relacionados com a resposta ao estresse oxidativo e com metabolismo de fitohormônios, em etapas tardias esses genes mostraram diminução no acúmulo de transcritos. A análise dos padrões de expressão dos genes envolvidos no estabelecimento da simbiose poderia contribuir para elucidar os mecanismos genéticos que controlam a simbiose e poderiam facilitar a aplicação agrícola em larga escala dos FMAs / Arbuscular mycorrhizae (AM) are mutualistic symbiotic associations between fungi of the order Glomales and most of the terrestrial plants. The molecular mechanisms regulating AM development and efficiency are not well understood so that agricultural large scale application is so difficult. Although so many approaches are being used to the identification of differentially expressed genes in AMs, large scale analysis it must contributed to the knowledge of symbiosis molecular biology. The aim of this work was identify genes induced or suppressed in sugarcane roots colonized for G. clarum in low and high phosphorus (P) conditions, during symbiosis development. Using suppressive subtractive hybridization (SSH) was possible to detect 74 genes with differential significant expression in 12 weeks mycorrhized roots. In other hand a total of 386 genes were spotted into nylon membranes and differential expression was evaluated with probes of cDNA of 4 and 12 weeks. Macroarray hybridization shows increase of genes transcripts involved in jasmonate metabolism (COI1) and ethylene metabolism (ET) 4 weeks after inoculation, and in salycilic acid 12 weeks after inoculation. Twelve genes differentially expressed in mycorrhizal presences were choosen to analyse the expression with qRT-PCR in 4, 6, 8, 10 and 12 weeks after inoculation. A cistein protease (protein metabolism); a remorin (cellular dynamic), dehydroascorbate reductase, hidroxiproline rich protein (estress response); two proteins associated to senescence; a horcolin (unknown function); COI1 (jasmonate metabolism); catalase, germin, glutathione (oxidative estress); chitinase (defence response) were tested. The results showed that genes relationated with oxidative stress are activated in early stages of MAs development, and, in late stages these phytohormones metabolism related genes are suppressed. Patterns expression of genes involved in MAs development it must contributed to elucidate the genetics mechanisms controlling the symbiosis and it must facilitate large scale use of FMAs.

Micorrizas arbusculares (MAs) são simbioses mutualistas formadas entre fungos do solo e a maioria das plantas terrestres, principalmente angiospermas. Esta simbiose pode trazer uma série de benefícios para o hospedeiro vegetal, como uma maior absorção de fosfato, um aumento na tolerância ao estresse abiótico e biótico, e resistência a agentes patogênicos, resultando numa melhor adaptação ao meio. É possível que hormônios vegetais estejam envolvidos em eventos de sinalização entre fungos micorrízicos arbusculares e plantas hospedeiras, durante os processos de colonização das raízes e de desenvolvimento dos arbúsculos. Recentes estudos têm demonstrado que durante o estabelecimento da simbiose, ocorre uma reprogramação da expressão de um grande número de genes, e que essas alterações na expressão gênica podem estar associadas a alterações dos níveis de hormônios nas plantas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de MAs em mutantes de tomateiro cv Micro-Tom (MT) insensível ao ácido jasmônico (jai1-1), superprodutor de etileno (epi) e duplo mutante epijai1 inoculados com Glomus clarum em condições de baixa concentração de fósforo no substrato, e a expressão de genes relacionadas à biossíntese do ácido jasmônico (AJ) (OPR3 e AOC) e do etileno (ET) (ACO4 e ACS2). O mutante jai1-1 não apresentou colonização intrarradicular e o acúmulo de transcritos tanto para a via de biossíntese do AJ como do ET foi relativamente menor do que o controle MT o que sugere a importância do AJ para o desenvolvimento da simbiose.O mutante epi e o duplo mutante apresentaram colonização intraradicular reduzida em relação ao controle MT. O acúmulo de transcritos dos genes da via do ET (ACO4 e ACS2) e do AJ (OPR3 e AOC) foi maior no mutante epi. A insensibilidade ao AJ presente no duplo mutante não impediu o acúmulo de transcritos para as vias de biossíntese do AJ e do ET, o que sugere uma relação sinérgica entre os hormônios vegetais no estabelecimento da simbiose. / Arbuscular mycorrhizal (AM) symbioses are formed between mutualistic soil fungi and most land plants, particularly angiosperms. This symbiosis can bring many benefits to the host plant, such as increased absorption of phosphate, an increase in tolerance to abiotic and biotic stress, and resistance to pathogens, resulting in better adaptation to the environment. Its possible that plant hormones are involved in signaling events between mycorrhizal fungi and host plants during the processes of colonization of roots and development of arbuscules. Recent studies have shown that during the establishment of symbiosis, there is a reprogramming of the expression of a large number of genes, and that these changes in gene expression may be associated with altered levels of hormones in plants. The aim of this study was to evaluate the development of MA in mutants of tomato cv Micro-Tom (MT) insensitive to jasmonic acid (jai1-1), ethylene overproducer (epi) and double mutant epijai1 inoculated with Glomus clarum under low phosphorus concentration in substrate, and the expression of genes related to biosynthesis of jasmonic acid (JA) (and OPR3 AOC) and ethylene (ET) (ACO4 and ACS2). Jai1-1 mutant showed no intraradical colonization and the accumulation of transcripts for both the biosynthesis of JA and ET was less than the control MT suggesting the importance of JA for the development of epi and double mutant symbiosis. The mutant epi and the double mutant showed reduced intraradical colonization when compared to the control MT. The transcript accumulation of the ET (ACO4 and ACS2) and JA (OPR3 and AOC) genes was higher in the mutant epi. The insensitivity to the JA in this double mutant did not prevent the accumulation of transcripts for the biosynthetic pathways of JA and ET, suggesting a synergistic relationship between plant hormones for the establishment of symbiosis.