Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A fatty high diet causes inflammation in the hypothalamus, mainly in the neurons that control satiety and thermogenesis. Moreover, activation of apoptosis via TLR4 (toll like receptor 4) is observed in conjunction with inflammatory condition. The neuronal death is a process that involves the release of cytokines and glial activation. The microglia have immune function in nervous tissue, but the astrocytes, the main component of glia, is more involved in synaptic plasticity and chronic responses of the Central Nervous System. Moreover, these cells in the hypothalamus, which is the center of energy metabolism control, have specific characteristics, with receptors for fatty acids, glucose and leptin. In this context, we investigated the response of astrocytes after in vitro treatment with fatty acids on cortical and hypothalamic astrocytes. To that end, we made the dissociation of the cortex and hypothalamus of Swiss mice (1-2 days) and the cells were plated for procedures. Treatments were performed with different doses of stearate (100μM, 200μM and 2mM) and palmitate (200μM, 500μM and 5mM) for one week. Immunocytochemistry was performed with anti-GFAP (evaluates the astroglial reactivity) and anti-NFB (transcription factor that participates in the TLR-4 pathway) and TNF- dosage by ELISA. Dosage of 200μM medium were reserved after 3 days of contact with astrocytes that were treated with palmitate or stearate, for obtaining conditioned medium that were stocked for neurons culture treatment. Cultures of hypothalamic neurons (lineage CLU189) were treated for 3 or 6 days with conditioned medium, in sequence, in this cultures, were performed immunocytochemistry with caspase3 (apoptosis marker) and anti- Ki-67 (cell proliferation marker). The immunostaining was quantified and statistically treated for comparison of experimental and control groups. The results showed that treatment with stearate enhances the expression of GFAP and NFB only in astrocytes from the hypothalamus. The TNF- was upregulated in conditionated medium used for treatment of hypothalamic cells, however this augment did not interfere with apoptosis rate in CLU 189 cultures in first three days of contact with conditionated medium and, in the sixth day, in comparison to conditioned control medium only in astrocytes. Such results showed the protection provided for substances had released by reactived astrocytes from hypothalamus. Also, our results showed that neurons could respond to fatty acid without other cell intervention. / Uma dieta rica em gorduras provoca inflamação no hipotálamo, principalmente nos neurônios que controlam a saciedade e termogênese. Além disso, a ativação de apoptose via TLR4 (toll like receptor 4) também foi observada. A morte neuronal é um processo que envolve a ativação da glia e liberação de citocinas. A microglia tem a função imune no tecido nervoso, mas os astrócitos, o componente mais abundante das células gliais, está mais envolvido com a plasticidade sináptica e respostas crônicas do Sistema Nervoso Central. Além disso, essas células, no hipotálamo, que é o centro controlador do metabolismo energético, têm características específicas, apresentando receptores para ácidos graxos, glicose e leptina. Neste contexto, investigamos a reação dos astrócitos após o tratamento com ácidos graxos em culturas de astrócitos hipotalâmicos e corticais. Para tanto, foi feita a dissociação do córtex e hipotálamo de camundongos Swiss (1-2 dias) e os astrócitos foram plaqueados para os experimentos. Essas culturas foram tratadas com doses diferentes de estereato (100μM, 200μM e 2mM) e palmitato (200μM, 500μM e 5mM) durante uma semana. Foi realizada a imunocitoquímica com o anticorpo anti-GFAP (avalia a reatividade dos astrócitos) e anti- NFB (fator de transcrição que participa da via de ativação TLR-4) e a dosagem de TNF- por ELISA. O meio na dose de 200μM foi recolhido após 3 dias de contato com astrócitos tratados com estereato ou palmitato, para a obtenção de meio condicionado, o qual foi estocado para tratamento de culturas de neurônios. Foram utilizadas culturas de neurônios hipotalâmicos (linhagem CLU189) para o tratamento, por 3 ou 6 dias, com o meio condicionado, e posteriormente, nessas culturas, foi realizada a imunocitoquímica com os anticorpos anti-caspase3 (avalia morte celular por apoptose) e anti-ki-67 (marcador de célula em proliferação). As imunomarcações foram quantificadas e tratadas estatisticamente para comparação dos grupos experimentais e controles. Os resultados mostraram que o tratamento com estereato intensifica a expressão de GFAP e NFB somente em astrócitos do hipotálamo. O TNF- estava aumentado no meio condicionado usado no tratamento de células do hipotálamo, mas esse aumento não interferiu na apoptose nas culturas de CLU189 nos 3 primeiros dias para os meios condicionados, e no 6º dia, em relação ao meio condicionado somente em astrócitos. Mostrando certa proteção fornecida por substâncias produzidas pelos astrócitos hipotalâmicos. Ainda, nossos dados também mostraram que os neurônios respondem, sem mediação de outro tipo de célula, ao tratamento com ácido graxo. / Mestre em Biologia Celular e Estrutural Aplicadas

The Diabetes Mellitus (DM) is a group of metabolic diseases, with hiperglycemia resulting from defects in insulin secretion (type 1 DM) and / or action (type 2 DM), promoting the elevation of blood glucose levels, which can damage target organs (eyes, kidneys, nerves, heart). In the kidney presents as diabetic nephropathy (DN), characterized by increased levels of urinary albumin excretion (UAE), which could progress to end stage kidney disease. The renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) is an important mediator of the pathophysiological changes of DN. The pharmacological blockade of this system has been shown as a combined treatment of DN, decreasing urinary albumin excretion. The aim of this study was to evaluate the effects of triple RAAS blockade on kidney structure and function, as well as albuminuria in diabetic Wistar rats with DN in development. Induction of diabetes in rats was performed with intravenous administration of alloxan (50mg/kg) diluted in 0.9% saline and glycemia observed 24h after the induction of diabetes; animals with blood glucose greater than 200 mg/dL were considered diabetic and were divide into 5 groups: I) control group - no treatment (CG); II) experimental group 1 - treated with enalapril (EN) (angiotensin converting enzyme inhibitor - ACEI), III) experimental group 2 - treated with losartan (LO) (angiotensin receptor blocker - ARB), IV) experimental group 3 - treated with aliskiren (AL) (direct renin inhibitor - DRI); V) experimental group 4 - treated with triple blockade ACEIARB- DRI (EN+LO+AL). After 90 days of treatment, animals were placed in metabolic cages to collect 24-hour urine and thereafter for determination of blood, proteinuria, and glomerular filtration rate by creatinine clearance. Then, the animals were anesthetized and had their kidneys removed for histological and immunohistochemical studies (&#945;-SMA and PCNA). After induction, all animals that became diabetic, remained with high glycemic levels throughout the treatment period. Histology showed on CG glomerular collagen deposition and tubulointerstitial, tubular dilation, space capsule expansion and inflammatory infiltration; those changes were attenuated by treatments with EN, LO, AL and EN+LO+AL. The treatments reduced the expression of &#945;-SMA glomerular (EN p<0.01; LO p<0.01; AL p<0.05, EN+LO+AL p<0.01) and tubulointerstitial (EN p<0.05, AL p<0.01, EN+LO+AL p<0.05) compared to CG. There were no significant differences in the number of PCNA glomeruli positive cells and in the analysis of plasma concentrations of sodium, potassium and urea between groups. However, EN and LO preserved a largest number of proliferating tubulointerstitial cells. Rats treated with AL (p<0.05) and EN+LO+AL (p<0.05) had a higher glomerular filtration rate (GFR) when compared to CG, EN and LO. AL and EN+LO+AL significantly reduced proteinuria in these animals when compared to CG (p<0.01). The treatment with EN+LO+AL reduced the expression of &#945;-SMA glomerular and tubulointerstitial, preserved a greater number glomeruli, GRF and UAE. However, administration of AL resulted in similar data. / O Diabete Melito (DM) corresponde a um grupo de doenças metabólicas, com hiperglicemia resultante de defeitos na secreção (DM1) e/ou ação (DM2) da insulina, promovendo a elevação das taxas glicêmicas, que pode lesionar órgãos-alvo (olhos, rins, nervos ou coração). Nos rins manifesta-se como a nefropatia diabética (ND), caracterizada pelos níveis aumentados de excreção urinária de albumina (EUA), que poderá evoluir até a insuficiência renal crônica terminal, dialítica. O sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA) é um importante mediador das alterações fisiopatológicas da ND. O bloqueio farmacológico deste sistema tem-se mostrado como um aliado ao tratamento da ND, diminuindo a EUA. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do bloqueio triplo do SRAA na estrutura e função renais, bem como na proteinúria, de ratos Wistar diabéticos com ND em desenvolvimento. A indução do diabetes nos ratos foi feita com a administração intravenosa de aloxano (50mg/Kg) diluída em solução salina 0,9% e a glicemia verificada 12h, 24h e 48h após a indução do diabetes, animais com glicemia acima de 200mg/dL foram considerados diabéticos e divididos em 5 grupos: I) grupo controle sem qualquer tratamento (CO); II) grupo experimental 1 tratados com enalapril (EN) (iECA); III) grupo experimental 2 tratados com losartan (LO) (BRA); IV) grupo experimental 3 tratados com alisquireno (AL) (IR); V) grupo experimental 4 tratados com iECA-BRA-IR (EN+LO+AL). Após 90 dias de tratamento, os animais foram colocados em gaiolas metabólicas para coleta de urina 24 horas e, posteriormente, de sangue para determinação da proteinúria e taxa de filtração glomerular, através do clearance de creatinina. Em seguida, os animais foram anestesiados e tiveram seus rins retirados para estudos histológicos e imunohistoquímicos. Os animais de todos os grupos se apresentaram hiperglicêmicos após a indução e as glicemias se mantiveram elevadas durante todo o tempo de tratamento. A histologia mostrou no CO a deposição de colágeno glomerular e tubulointersticial, dilatação tubular, expansão do espaço capsular e presença de infiltrado inflamatório, alterações que foram atenuadas pelos tratamentos com EN, LO, AL e EN+LO+AL. Os tratamentos reduziram a expressão de &#945;-SMA glomerular (EN p<0,01; LO p<0,01; AL p<0,05; EN+LO+AL p<0,01) e tubulointersticial (EN p<0,05; AL p<0,01; EN+LO+AL p<0,05) quando comparados ao CO. Não houve diferenças significativas no número de células PCNA glomerulares positivas e nas análises das concentrações plasmáticas de sódio, potássio e uréia entre os grupos; entretanto, EN e LO preservaram o maior número de células em proliferação tubulointersticial. Os ratos tratados com AL (p<0,05) e EN+LO+AL (p<0,05) tiveram uma maior taxa de filtração glomerular, quando comparados ao CO, EN e LO. AL e EN+LO+AL reduziram significativamente a proteinúria desses animais, quando comparados ao CO (p<0,01). O tratamento com EN+LO+AL reduziu a expressão de &#945;-SMA glomerular e tubulointersticial, além de preservar um maior número de glomérulos, função renal e EUA, comuns nos quadros de ND. No entanto, a administração de AL resultou em dados semelhantes. / Mestre em Biologia Celular e Estrutural Aplicadas

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-23T17:50:16Z No. of bitstreams: 5 Tese - Thais Cidália Vieira - 2013.pdf: 1996022 bytes, checksum: 437252ae67c575163ee228463ab65230 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 01.pdf: 505776 bytes, checksum: a98ddeb01fb4364e324489157f0257d0 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 02.pdf: 300553 bytes, checksum: 033e986406f011061388dda4c9c0af3f (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 03.pdf: 342266 bytes, checksum: e5f53faff63d586fd7df2a4ef3682d45 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-30T20:47:54Z (GMT) No. of bitstreams: 5 Tese - Thais Cidália Vieira - 2013.pdf: 1996022 bytes, checksum: 437252ae67c575163ee228463ab65230 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 01.pdf: 505776 bytes, checksum: a98ddeb01fb4364e324489157f0257d0 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 02.pdf: 300553 bytes, checksum: 033e986406f011061388dda4c9c0af3f (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 03.pdf: 342266 bytes, checksum: e5f53faff63d586fd7df2a4ef3682d45 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-30T20:47:54Z (GMT). No. of bitstreams: 5 Tese - Thais Cidália Vieira - 2013.pdf: 1996022 bytes, checksum: 437252ae67c575163ee228463ab65230 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 01.pdf: 505776 bytes, checksum: a98ddeb01fb4364e324489157f0257d0 (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 02.pdf: 300553 bytes, checksum: 033e986406f011061388dda4c9c0af3f (MD5) Artigo - Thais Cidália Vieira - 03.pdf: 342266 bytes, checksum: e5f53faff63d586fd7df2a4ef3682d45 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-12-17 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / (Sem resumo em outra língua) / Os marcadores STRs tem sido amplamente utilizados com diferentes propósitos incluindo estudos populacionais e identificação humana. Sendo assim, o presente estudo tem como objetivo determinar as frequências alélilas e outros parâmetros estatísticos de 27 loci STR na população do Estado de Goiás, região central do Brasil, consolidando um banco de dados genético-molecular para aplicações na área forense e em testes de paternidade. Foram incluídos no estudo 1339 indivíduos participantes de investigações de vínculo genético realizadas no Laboratório de Citogenética Humana e Genética Molecular da Secretaria de Estado da Saúde de Goiás (SES-GO) e Laboratório Biocroma, no período de julho de 2010 a janeiro de 2013. A extração e quantificação do DNA foi realizada com conjunto de reagentes comerciais de acordo com as orientações do fabricante. As regiões genômicas foram amplificadas por PCR através do sistema multiplex PowerPlex®BIO 16 (Promega Corporation, EUA) para os loci autossômicos, TPOX, D3S1358, D5S818, FGA, CSF1PO, D7S820, D8S1179, TH01, vWA, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, Penta D e Penta E, e pelo sistema Powerplex®Y (Promega Corporation, EUA), para 12 marcadores STR-Y, sendo dez tetranucleotídeos - DYS19, DYS385a/b, DYS389I, DYS389II, DYS390, DYS391,DYS393, DYS437, DYS439 - um trinucleotídeo - DYS392 - e um pentanucleotídeo-DYS438. Os produtos amplificados foram detectados em analisadores genéticos automáticos, MegaBace® 1000 (Amersham Biosciences, UK) e ABI 3500® (Life Technology Applied Biosystems, EUA). Posteriormente, as frequências alélicas, diversidade gênica e haplotípica foram obtidas com o auxílio dos programas Arlequin 3.5 e Genetix 4.05. Os valores encontrados para os parâmetros estatísticos, tais como heterozigosidade observada (Ho) e esperada (He), demonstraram que os marcadores STRs autossômicos analisados estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg na população estudada, semelhante a outras populações de diferentes regiões do Brasil. O conteúdo de informação polimórfica (PIC), o poder de discriminação (PD) e o poder de exclusão (PE) obtidos para estes loci confirmam que estas regiões são bastante informativas para aplicações em identificação humana. As frequências alélicas e diversidade haplotípica obtidas dos STR-Y revelou 321 haplótipos únicos. O valor do Fst foi de 0,00951 demonstrando nenhuma diferença significativa entre as populações de Goiás e a amostra da população brasileira. Foi possível estimar uma taxa de mutação de 0,35x 10-4 a 0,63x 10-3 sendo a maioria de origem paterna e com ganho ou perda de apenas uma unidade de repetição. A caracterização genética-molecular da população do Estado de Goiás baseada nos marcadores STRs autossômicos e cromossomo Y demonstraram que este loci são altamente polimórficos e informativos, constituindo uma ferramenta útil para aplicações em identificação humana, reconstruções de perfis genéticos, bem como estudos populacionais e evolutivos.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-02-03T18:03:27Z No. of bitstreams: 2 Tese - Karla de Aleluia Batista - 2014.pdf: 4463046 bytes, checksum: 859650f3ccfef17ceeaddf20db728272 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-04T13:59:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Karla de Aleluia Batista - 2014.pdf: 4463046 bytes, checksum: 859650f3ccfef17ceeaddf20db728272 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-04T13:59:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Karla de Aleluia Batista - 2014.pdf: 4463046 bytes, checksum: 859650f3ccfef17ceeaddf20db728272 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-09-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Beans are legumes that present high content of protein, which make them one of the most important sources of nutrients in Brazil. Despite their excellent nutritional profile, changes in biochemical and physico chemical properties during storage leads to the hardening of grains, which compromise their texture and palata bility. It is known that bean’s hardening is responsible for losses about of 100.000-500.000 ton of beans per year. In addition, considering that per capita intake of beans in Brazil was 16 Kg/person/year, the content of discharged grains as function of hardening could feed 34 million of Brazilian. In this scenario, several processes have been tested aiming to provide na alternative of inclusion for these residues. In this work, hardened beans from gen us Phaseolus (Phaseolus vulgaris) and Vigna (Vigna unguiculata) were treated by autoclaving and extrusion and the products were tested regarding their applicability in biotechnological area. The extruded beans presented nutritional and technological properties that allowed their use as ingredients in bread production. Results evidenced that breads made using a mixture of extruded bean and wheat flours presented 10% higher protein and 2.5-hold higher fiber than breads made with 100% wheat flour. These results indicate that extruded bean flours constitute ingredie nts nutritionally and economically viable for technological application in breads elaboration, conferring improvement of nutritional characteristics without changing sensory attributes. The extruded hardened beans were also used as ingredient of culture me dium replacing the traditional nitrogen sources. Results evidenced that the use of extruded cowpea (Vigna unguiculata) flour is not promising since the optical density of microorganisms grown in culture medium containing extruded cowpea was 20% lower than the optical density observed in commercial media. On the other hand, the microorganisms grown in media containing extruded common bean (Phaseolus vulgaris) presented higher values of optical density and protein expression when compared to commercial broths. Alternatively, the grains were treated by autoclaving, with perspective of use the whole grain. Results evidence that after autoclaving the hardness of grains remained high, which disable their use of whole grain. However, the autoclaving process improve d the nutritional quality without modifying the technological properties. Finally, results evidenced that each genus presented a different behavior after treatment by extrusion or autoclaving. Thus, it is evident that the type and conditions processing use dwill depend of bean characteristics as well as the properties required to the proposal application. / O feijão é uma leguminosa com importante papel na nutrição humana, sendo uma das principais fontes de proteínas na alimentação dos brasileiros. Entretanto, as alterações pós-colheita que ocorrem durante o armazenamento ocasionam o endurecimento do grão, que perde suas características de textura e palatabilidade. Estima-se que o endurecimento ocasione perdas de 100-500 mil toneladas deste grão ao ano. Considerando que o consumo per capita de feijão em 2013 foi estimado em 16 Kg por habitante ao ano, as perdas relacionadas ao endurecimento alimentariam aproximadamente 34 milhões de brasileiros. Neste cenário, diversas alternativas têm sido testadas no intuito de reaproveitar os grãos endurecidos. Neste trabalho, feijões endurecidos dos gêneros Phaseolus (Phaseolus vulgaris) e Vigna (Vigna unguiculata) foram tratados por extrusão e autoclavagem no intuito de se estudar as possíveis aplicações dos produtos gerados.Os feijões extrusados apresentaram características nutricionais e tecnológicas que permitiram sugerir sua aplicação como ingrediente na formulação de pães e como fonte de nitrogênio para composição de meios de cultura. A utilização de farinhas mistas de feijão extrusado e trigo originou pães com 10% mais proteínas e 2,5 vezes mais fibras do que os pães produzidos apenas com farinha de trigo. Estes resultados evidenciaram que as farinhas de feijão extrusado constituem ingredientes nutricionalmente e economicamente viáveis para a aplicação tecnológica na elaboração de pães, melhorando as características nutricionais sem alterar os atributos sensoriais. As farinhas de feijão extrusado também foram utilizadas como fonte de nitrogênio em meios de cultura, avaliando-se o efeito da substituição na taxa de crescimento e expressão de proteínas. Os resultados evidenciaram que o uso de feijão caupi (Vigna unguiculata) extrusado não é uma alternativa promissora para o cultivo de bactérias, uma vez que os valores de densidade óptica foram 20% inferiores àqueles apresentados em meio comercial. Por outro lado, o feijão comum (Phaseolus vulgaris) extrusado mostrou-se uma eficiente fonte de nutrientes para o crescimento de bactérias e leveduras. Além disso, o uso de meios de cultura contendo feijão comum melhorou a taxa de produção de proteínas recombinantes tanto em bactérias, quanto em leveduras. Os grãos de feijão caupi e comum endurecidos também foram tratados por autoclavagem no intuito de se avaliar a possibilidade de reinclusão do grão inteiro na alimentação. Os resultados encontrados evidenciaram que, apesar dos valores de dureza não permitirem a reinclusão dos grãos inteiros na alimentação, a autoclavagem melhorou as características nutricionais dos feijões endurecidos, enquanto preservou suas propriedades tecnológicas. Por fim, os resultados obtidos neste trabalho evidenciar am que cada espécie de feijão apresenta um comportamento distinto frente a cada condição de processamento, seja por autoclavagem, seja por extrusão. Diante disso, fica evidente que o tipo e as condições de processamento a serem escolhidos dependerão da espécie de feijão utilizada e das propriedades requeridas para cada aplicação proposta.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-04-01T20:14:11Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Andrade Mourão - 2015.pdf: 2000857 bytes, checksum: 1da1abfc4f16d1970615dc3393d09323 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-04T14:50:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Andrade Mourão - 2015.pdf: 2000857 bytes, checksum: 1da1abfc4f16d1970615dc3393d09323 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T14:50:45Z (GMT). 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The present study sought to determine the involvement of the MnPO in cardiovascular and autonomic regulation in Wistar (WT) and spontaneously hypertensive rats (SHR). For these, rats of the lineages WT (n = 6) and SHR (n = 6), weighing between 250 and 300g were anesthetized with urethane (1.2 g / kg, iv.) after induction with halothane (2% in O2 100%). The right femoral artery and vein were cannulated for recording of mean arterial pressure (MAP), and infusion of drugs, respectively. Heart rate (HR) was calculated as instantaneous frequency signal electrocardiogram (ECG). The animals were positioned in a stereotaxic apparatus, and instrumented for recording renal sympathetic nerve activity (RSNA). The nanoinjections of saline (NaCl; 150 mM), kynurenic acid (glutamate receptor antagonist; 50 mM) and muscimol (GABA agonist; 4 mM) were also performed. As expected, saline nanoinjections did not change the values of MAP (WT: 0.4 ± 0.2 mmHg; SHR: 0.2 ± 0.4 mmHg), HR (WT: 0.7 ± 0.9 bpm; SHR, 1.1 ± 1.4 bpm) and RSNA (WT: 0.4 ± 0.2%; SHR: 0.2 ± 1.3%). In WT (n=6) rats, the blockade of the MnPO with muscimol promoted fall in MAP (-17.0 ± 1.2 mmHg), bradycardia (-55,4 ± 12,3 bpm) and reduces in RSNA (-37.5 ± 3.9 %). The muscimol nanoinjections into the MnPO in SHR (n=6) promoted hypotension (-31.6 ± 5.0 mmHg), bradycardia (-18.3 ± 7.2 bpm), and renal sympathoinhibition (-54.4 ± 6.2 %). The changes in cardiovascular and autonomic parameters were evaluated in WT and SH rats submitted to sinoartic denervation. In normotensive rats, the inhibition of the MnPO by muscimol promoted decrease of MAP in innervated rats (n=6) and denervated (-19.4 ± 1.9 vs. 20.9 ± 4.3 mmHg, respectively; 3min; n=6), which was maintained throughout the experimental period (13.5 ± 2.0 vs. 22.5 ± 4.3 mmHg, 30 min). Also did not evidenced differences in RSNA in WT innervated (-23.0 ± 1.5%; 3min) and denervated (-21.0 ± 4.9%; 3min) rats. In denervated hypertensive rats (n=5), the blocked of MnPO resulted in progressive decrease in MAP (-31.1 ± 6.7, ± 9.7 and -38.7 ± 7.1 -44.7 mmHg, respectively 3, 15 and 30 min after MnPO blockade). The changes observed in the HR (-1.3 ± 3.3; -21.5 ± 12.6 and -24.9 ± 12.2 bpm, respectively 3, 15 and 30 min after MnPO blockade) and RSNA (-16.4 ± 8.8; -37.3 ± 10.1 and -45.1 ± 8.7%, respectively 3, 15 and 30 min after MnPO blockade) also followed this pattern of response. Finally to identify the involvement of glutamatergic neurotransmission in the MnPO on the cardiovascular and autonomic control, nanoinjections of kynurenic acid were performed in this nucleus. The glutamatergic blockade promoted decrease in MAP (WT: -18.2 ± 4.1 mmHg; SHR: -21.0 ± 2.5 mmHg), bradycardia (WT: -7.1 ± 1, 9 bpm; SHR: -9.0 ± 6.0 bpm) and renal simpathoinhibition (WT: -19.7 ± 2.4%; SHR: -24.7 ± 2.4%) in normotensive and hypertensive rats. In summary, the results obtained on this study demonstrated that acute blockade of MnPO reduces blood pressure (BP), confirming recent data that indicate that this nucleus participates of tonic control on BP. Our data suggest the involvement of MnPO the tonic regulation of sympathetic activity in WT and SHR. In addition, suggest the participation of this nucleus in increased sympathetic activity and consequent arterial blood pressure in SHR. The results demonstrated that aortic and carotid afferent participates in the modulation of autonomic and cardiovascular responses induced by blockade the MnPO in SHR. Furthermore, our data suggest that glutamatergic neurotransmission in the MnPO is important for the tonic regulation of BP, HR and RSNA thus, bringing new evidence that this nucleus participates of the autonomic and cardiovascular control. / Estudos têm demonstrado que os neurônios do núcleo pré-óptico mediano (MnPO) desempenham um importante papel na regulação cardiovascular e hidromineral, principalmente, por meio de suas projeções para o núcleo paraventricular (PVN) do hipotálamo. O PVN, por sua vez projeta-se para a região rostroventrolateral do bulbo (RVLM) um dos principais núcleos geradores da atividade simpática vascular, renal e cardíaca. Todavia, as respostas autonômicas frente a inibição do MnPO, bem como vias centrais e/ou mecanismos envolvidos nessas respostas permanecem desconhecidos. O presente estudo buscou determinar a participação do MnPO na regulação autonômica e cardiovascular em ratos wistar (WT) e espontaneamente hipertensos (SHR). Para tanto, ratos das linhagens WT e SHR, pesando entre 250 e 350g foram anestesiados com uretano (1,2 g/kg, iv.) após a indução com halotano (2% em O2 100%). A artéria e veia femorais direitas foram canuladas para o registro da pressão arterial média (PAM), e a infusão de drogas, respectivamente. A frequência cardíaca (FC) foi calculada como frequência instantânea do sinal de eletrocardiograma (ECG). Os animais foram posicionados em um aparelho estereotáxico e instrumentalizados para registro da atividade nervosa simpática renal (ANSR), e nanoinjeções (100nl) de soro fisiológico (NaCl; 150mM); ácido quinurênico (antagonista glutamatérgico; 50mM) e muscimol (agonista gabaérgico; 4mM) no MnPO. Como esperado, as nanoinjeções de soro não alteraram os valores da PAM (WT: 0,4 ± 0,2 mmHg; SHR: 0,2 ± 0,4 mmHg), FC (WT: 0,7 ± 0,9 bpm; SHR; 1,1 ± 1,4 bpm) e da ANSR (WT: 0,4 ± 0,2 %; SHR: -0,2 ± 1,3 %).Em ratos WT (n=6), o bloqueio farmacológico do MnPO com muscimol promoveu queda na PAM (-17,0 ± 1,2 mmHg), bradicardia (-55,4 ± 12,3 bpm) e redução na ANSR (-37,5 ± 3,9 %). As nanoinjeções de muscimol no MnPO dos SHR (n=6) promoveram hipotensão (-31,6 ± 5,0 mmHg), bradicardia (-18,3 ± 7,2 bpm), e simpatoinibição renal (-54,4 ± 6,2 %). As variações dos parâmetros autonômicos e cardiovasculares induzidas pela inibição do MnPO também foram avaliadas em ratos WT e SHR submetidos à desnervação dos aferentes sinoaórticos. Nos ratos normotensos, a inibição do MnPO com muscimol promoveu queda na PAM nos ratos inervados (n=6) e desnervados (-19,4 ± 1,9 vs. -20,9 ± 4,3 mmHg, respectivamente; 3min; n=6), sendo esta mantida por todo período experimental (-13,5 ± 2,0 vs. -22,5 ± 4,3 mmHg; 30min). Também não foram evidenciadas diferenças na redução da ANSR nos ratos WT inervados (-23,0 ± 1,5 %; 3min) e desnervados (-21,0 ± 4,9 %; 3min). Nos ratos hipertensos desnervados (n=5), o bloqueio do MnPO promoveu uma progressiva redução na PAM (-31,1 ± 6,7; -38,7 ± 9,7 e -44,7 ± 7,1 mmHg; respectivamente 3, 15 e 30 min após o bloqueio do MNPO). As alterações promovidas na FC (-1,3 ± 3,3; -21,5 ± 12,6 e -24,9 ± 12,2 bpm; respectivamente 3, 15 e 30 min após o bloqueio do MNPO) e ANSR (-16,4 ± 8,8; -37,3 ± 10,1 e -45,1 ± 8,7 %; respectivamente 3, 15 e 30 min após o bloqueio do MNPO) também seguiram esse padrão de resposta. Por fim para identificarmos a participação da neurotransmissão glutamatérgica no MnPO sobre o controle cardiovascular e autonômico, nanoinjeções de ácido quinurênico foram realizadas neste núcleo. O bloqueio glutamatérgico no MnPO promoveu queda na PAM (WT: -18,2 ± 4,1 mmHg vs. SHR: -21,0 ± 2,5 mmHg), bradicardia (WT: -7,1 ± 1,9 bpm vs. SHR: -9,0 ± 6,0 bpm e simpatoinibição renal (WT: -19,7 ± 2,4 % vs. SHR: -24,7 ± 2,4 %). Em conjunto, os resultados obtidos nesse estudo demonstraram que o bloqueio agudo do MnPO reduz a pressão arterial (PA), corroborando com dados recentes que indicam que esse núcleo participa do controle tônico da PA. Nossos dados sugerem o envolvimento do MnPO na regulação tônica da atividade simpática em WT e SHR. Ademais, sugerem a participação desse núcleo no aumento da atividade simpática e consequente hipertensão arterial observada em SHR. Os resultados evidenciaram ainda, que os aferentes aórticos e carotídeos participam na modulação das respostas autonômicas e cardiovasculares induzidas pelo bloqueio do MnPO em SHR. Além disso, nossos dados sugerem que a neurotransmissão glutamatérgica no MnPO é importante para a regulação tônica da PA, FC e ANSR trazendo assim novas evidências de que esse núcleo participa do controle autonômico e cardiovascular.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-07-13T20:37:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-07-14T13:04:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T13:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayane Mendes de Lima - 2016.pdf: 1517541 bytes, checksum: 21e56d88c3ecbe596bbba9be9f3ea87e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-02 / Diabetic nephropathy is the leading cause of end-stage renal disease (ESRD) in developed countries and in the literature shows as oxidative stress possibly contributes to the development of the diseases. Glutathione S-transferases (GSTs) are a family of multifunctional enzymes that play an important role in the cellular detoxification and excretion of numerous substances and can also work as one of the antioxidants. The genetic polymorphism of deletion in GSTT1 and GSTM1 gene, when homozygous, show lack of activity of these isoforms, known as null genotype. Looking for a possible relationship between diabetic nephropathy and polymorphisms mentioned above, this study was made for the case-control and genotyping using real-time PCR (qPCR) and melting curve. Clinical and laboratorial data of 65 patients (diagnosed with diabetic nephropathy and were on hemodialysis) and 90 controls were collected through interviews and consultation with medical records (patients) and the results of recent surveys (controls). It was found that in the group if there is a risk associated with deletion polymorphism, where the GSTT1-null genotype (p = 0,0230) causes an increased risk of about 2,9 times in developing the disease (diabetic nephropathy) compared to carriers of the genotype GSTT1-present. There was no association of GSTM1 (p = 0.3860) with susceptibility to disease in this population. Analysis of the influence of the deletion of GSTT1 and GSTM1 about the biochemical and clinical changes in the group case did not result in a significant association in any of the clinical variables analyzed. These results suggest that the GSTM1 deletion polymorphism may be associated with risk of developing the disease, but not with the biochemical changes that were analyzed. Further studies may clarify the relationship of this polymorphism with diabetic nephropathy and help in the treatment of this disease. / A nefropatia diabética é a principal causa de Estágio Final de Doença Renal (ESRD) em países desenvolvidos e evidências tem apontado o estresse oxidativo como unificador de várias vias de dano celulares em condições de hiperglicemia, que resultaria no desenvolvimento e complicações da doença. As glutationa-S-transferases (GSTs) são uma família de enzimas multifuncionais que desempenham um papel importante na desintoxicação celular e eliminação de numerosas substâncias e também pode funcionar como um dos antioxidantes. O polimorfismo genético de deleção nos genes GSTT1 e GSTM1, quando em homozigose, apresentam ausência de atividade dessas isoformas, conhecido como genótipo nulo. Procurando estabelecer uma possível relação entre nefropatia diabética e os polimorfismos acima mencionados, foi feito um estudo por caso-controle e a genotipagem por meio de PCR em tempo real (qPCR) e curva de melting. Dados clínico-laboratoriais de 65 pacientes (diagnosticados com nefropatia diabética e que estavam em hemodiálise) e 90 controles foram coletados, por meio de entrevistas e consulta a prontuários (pacientes) e a resultados de exames recentes (controles). Foi verificado que no grupo caso existe um risco associado ao polimorfismo de deleção, onde o genótipo GSTT1-nulo (p=0,0230) provoca um risco aumentado de aproximadamente 2,9 vezes em desenvolver a doença (nefropatia diabética) em relação aos portadores do genótipo GSTT1-presente. Não houve associação de GSTM1 (p=0,3860) com a susceptibilidade a doença na população estudada. A análise da influência da deleção de GSTT1 e GSTM1 sobre as alterações bioquímicas e clínicas no grupo caso não resultou em uma associação significativa de nenhuma das variáveis clínicas analisadas. Estes resultados sugerem que o polimorfismo de deleção de GSTT1 pode estar associado ao risco de desenvolvimento da doença, mas não com as alterações bioquímicas que foram analisadas. Novos estudos poderão esclarecer a relação desse polimorfismo com a nefropatia diabética e auxiliar no tratamento desta doença.

Alterações nutricionais na gestação podem ter consequências no organismo materno e na prole, as quais podem ser esclarecidas por meio da análise dos componentes uterinos durante a gestação em modelos animais. Dentre estes componentes, podemos destacar as células Natural Killer uterinas (uNK) que representam 70% da população linfocitária no útero gestante de murinos e seres humanos. O presente trabalho teve o fito de avaliar os efeitos da alteração nutricional durante a gestação de camundongos por meio de estudo morfológico e comportamental. Foram utilizados camundongos prenhes os quais receberam a partir do 1º dia de gestação (ddg) ração controle (RC), hipercalórica (HC)- carboidrato 77,7%, hiperlipídica (HL)- gordura 32,5%, hiperproteíca (HP)- proteína 31,26% e foram submetidos a restrição alimentar (RA)- 4g de RC/dia. Todos os animais foram sacrificados no 10º ddg. Foram realizadas análises relacionadas à ingestão, comportamentais, morfológicas, citoquímicas, imunocitoquímicas, morfométricas e estereológicas com enfoque nas uNK. Os resultados mostraram que não ocorreu alteração na ingestão e na glicemia dos grupos experimentais, embora tenha ocorrido aumento do peso de animais HL e diminuição em RA. Na análise comportamental o grupo RA apresentou um estado ansiolítico, já HL exibiu estado semelhante à apatia. Parte das fêmeas RA e HC apresentaram falha gestacional, e em RA foram identificados sítios de implantação (SI) em reabsorção. As análises por meio da citoquímica de lectina DBA, estereológica e imunocitoquímica demonstraram que as rações HL e HC foram capazes de causar as alterações mais marcantes nas uNK, diminuindo a expressão de N-acetil-D-galactosamina (Nac-D-Gal) na superfície e grânulos das uNK, o que possibilitou a observação de um subtipo alterado destas células (uNKa), com grânulos menos reativos à perforina em seus interiores. No endométrio, ocorreu aumento da reatividade para Casp-3 e diminuição na expressão de α-actina da musculatura de seus vasos. Em animais HP e RA as alterações foram menos proeminentes com relação às uNK. Em HP ocorreram menor número de células uNKa, aumento dos subtipos morfologicamente senescentes, pequena identificação de casp-3, e grande expressão de α-actina vascular. À semelhança dos animais controle, em RA, as uNKa eram raras e não houve alteração na expressão de perforina e α-actina dos vasos, no entanto, parece ter ocorrido atraso na diferenciação das células uNK e aumento na presença de casp-3. Tais resultados demonstraram, pela primeira vez, que alterações na dieta de camundongos, até o 10º ddg, são capazes de desencadear a resposta das uNK DBA reativas no microambiente uterino. / Nutritional changes during pregnancy can be harmful to the mother's body and have direct effects in offspring, which can be clarified by uterine components analyses during pregnancy in animal models. Among these components, we can highlight the uterine natural killer cells (uNK), which representing 70% of the lymphocyte population in the murine and humans pregnant uterus. This work aims to evaluate the effects of nutritional changes during mice pregnancy through morphological and behavioral studies. Pregnant mice have received from 1st gestation day (gd) control diet (CD), high- carbohydrate (HC) carbohydrate- 77.7%, high-fat (HF) - 32.5% fat, high-protein (HP) - protein 31.26% and were exposed to food restriction (FR) – 4g CD/day. The animals are killed at 10th gd. Intake, behavior, morphology, cytochemistry, immunocytochemistry, morphometry and stereological Analyzes was undertaken by focusing on uNK. Our data showed that food intake and blood glucose levels of all experimental groups didn’t change, although the weight increased in the HF and decreased in the FR animals. Behavioral analysis in the FR group showed an anxiolytic state, since HF exhibited similar apathy state. Part of the female FR and HC had gestational failure, and implantation sites (SI) resorption were identified in the FR. Analyses by DBA lectin cytochemistry, immunocytochemistry and stereological studies showed HF and HC diets were able to cause marked changes in uNK, decreasing the expression of uNK surface and granules Gal-D-NAc, which enabled the observation of an DBA-lectin altered kind of uterine NK cell (uNKa), with less reactivity to the perforin in their granules. In the endometrium, there was an increased reactivity for Casp-3 and a decreased expression of the α-actin vessels. The changes were less prominent in the uNK from HP and RA animals. HP uNKa were smaller in number than in HF and HC, and had increased morphological senescent uNK subtype, weak casp-3 reaction and strong blood vessels α-actin expression. Similarly to the control animals, in FR, the uNKa were rare, and there was not changes in the perforin or actin vessels expression. However, the FR animals showed a apparently delay in the uNK differentiation as large presence of casp-3. These results showed for the first time different diets could triggering uNK DBA-reactive response as can change mouse uterine microenvironment up to 10th gd. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Submitted by JACIARA CRISTINA ALMEIDA DO AMARAL (jaciaramaral@ufpa.br) on 2019-01-30T14:12:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) / Approved for entry into archive by JACIARA CRISTINA ALMEIDA DO AMARAL (jaciaramaral@ufpa.br) on 2019-01-30T14:13:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-30T14:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) Previous issue date: 2018-11-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Fluconazol é um antifúngico triazólico de amplo espectro que é bem estabelecido como tratamento de primeira linha para infecções por Candida albicans. Apesar de seu uso extensivo, os relatos sobre seus efeitos genotóxicos / mutagênicos são controversos, portanto, mais estudos serão necessários para melhor esclarecimento de tais efeitos. Células de rim de macaco verde africano (Vero) foram expostas in vitro a diferentes concentrações de Fluconazol e foram avaliadas quanto a diferentes parâmetros, tais como: citotoxicidade (ensaio MTT e morte celular por corantes fluorescentes), genotoxicidade / mutagenicidade (teste do cometa e teste do micronúcleo) e indução de estresse oxidativo (ensaio do DCFH-DA). O Fluconazol foi utilizado nas concentrações de 81,6; 163,2; 326,5; 653; 1.306 e 2.612,1μM para o ensaio do MTT e 81,6; 326,5 e 1.306μM para os demais ensaios. Os resultados do MTT mostraram que a viabilidade celular diminuiu à partir da concentração de Fluconazol de 1.306μM (85,93%), sendo estatisticamente significativa (P <0,05) na concentração de Fluconazol de 2.612,1μM (35,25%), em comparação com o controle (100%). O Fluconazol também induziu necrose (P <0,05) quando as células foram expostas às concentrações de 81,6; 3.26,5 e 1.306μM para ambos os tempos de tratamento testados (24 e 48h) em comparação com o controle negativo. Com relação à genotoxicidade / mutagenicidade, os resultados mostraram que o Fluconazol aumentou significativamente (P <0,05) o índice de dano ao DNA, avaliado pelo ensaio do cometa, à 1.306μM (ID = 1,17) em comparação ao controle negativo (ID = 0,28). A frequência de micronúcleos também aumentou até atingir signficância estatística (P <0,05) em 1.306μM de Fluconazol (com 42MN / 1000 células binucleadas) em relação ao controle negativo (13MN / 1000 células binucleadas). Finalmente, a formação significativa (P <0,05) de espécies reativas de oxigênio foi observada em 1.306μM de Fluconazol (DO = 40,9), em comparação ao controle negativo (DO = 32,3). Nossos resultados mostraram que o Fluconazol foi citotóxico e genotóxico nas condições avaliadas. É provável que tais efeitos possam ser devidos às propriedades oxidativas do Fluconazol e / ou à presença de FMO (Flavina monoxigenase) em células Vero. / Fluconazole is a broad-spectrum triazole antifungal that is well-established as the first-line treatment for Candida albicans infections. Despite its extensive use, reports on its genotoxic/mutagenic effects are controversial; therefore, further studies are needed to better clarify such effects. African green monkey kidney (Vero) cell line were exposed in vitro to different concentrations of Fluconazole and were then evaluated for different parameters, such as cytotoxicity (MTT/cell death by fluorescent dyes), genotoxicity/mutagenicity (comet assay/micronucleus test), and induction of oxidative stress (DCFH-DA assay). Fluconazole was used at concentrations of 81.6, 163.2, 326.5, 653, 1306, and 2612.1μM for the MTT assay and 81.6, 326.5, and 1306μM for the remaining assays. MTT results showed that cell viability reduced upon exposure to Fluconazole concentration of 1306μM (85.93%), being statistically significant (P<0.05) at Fluconazole concentration of 2612.1μM (35.25%), as compared with the control (100%). Fluconazole also induced necrosis (P<0.05) in Vero cell line when cells were exposed to all concentrations (81.6, 326.5, and 1306μM) for both tested harvest times (24 and 48 h) as compared with the negative control. Regarding genotoxicity/mutagenicity, results showed Fluconazole to increase significantly (P<0.05) DNA damage index, as assessed by comet assay, at 1306μM versus the negative control (DI=1.17 vs DI=0.28, respectively). Micronucleus frequency also increased until reaching statistical significance (P<0.05) at 1306μM Fluconazole (with 42MN/1000 binucleated cells) as compared to the negative control (13MN/1000 binucleated cells). Finally, significant formation of reactive oxygen species (P<0.05) was observed at 1306μM Fluconazole vs the negative control (OD=40.9 vs OD=32.3, respectively). Our experiments showed that Fluconazole is cytotoxic and genotoxic in the assessed conditions. It is likely that such effects may be due to the oxidative properties of Fluconazole and/or the presence of FMO (flavin-containing monooxygenase) in Vero cells. / FAPAN - Faculdade Pan Amazônica

Submitted by Samira Prince (prince@ufpa.br) on 2012-11-19T14:58:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNeuropatologicaLesao.pdf: 1797804 bytes, checksum: 6eb30f7e8dd12dcc8685e4445a1e9195 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-11-19T18:13:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNeuropatologicaLesao.pdf: 1797804 bytes, checksum: 6eb30f7e8dd12dcc8685e4445a1e9195 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-19T18:13:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNeuropatologicaLesao.pdf: 1797804 bytes, checksum: 6eb30f7e8dd12dcc8685e4445a1e9195 (MD5) Previous issue date: 2012 / A resposta inflamatória pode exacerbar o processo lesivo após desordens neurais agudas. O dimorfismo sexual gerado pelas diferentes presenças hormonais existentes entre macho e fêmea têm demonstrado habilidades neuroprotetoras endógenas opostas, apresentando uma melhor preservação da integridade do tecido nervoso na fêmea, putativamente, devido à presença dos hormônios ginógenos. Não existem investigações comparando como essa diferença pode afetar a resposta inflamatória durante o AVE. No presente estudo, investigaram-se as diferenças nos processos inflamatórios agudos do dimorfismo sexual de ratos adultos, de ambos os sexos, submetidos à lesão isquêmica aguda induzida por Endotelina (ET1) no corpo estriado. Seis grupos experimentais foram delineados: Animais machos de 24 horas de sobrevida (n= 8); machos de 72 horas de sobrevida de (n=8); machos de 7 dias de sobrevida (n=8); e fêmeas de 24 horas de sobrevida (n= 8); fêmeas de 72 horas de sobrevida de(n=8); fêmeas de 7 dias de sobrevida. A análise histopatológica geral foi realizada em secções coradas pela violeta de cresila. Macrófagos, astrócitos e neurônios foram identificados por imuno-histoquímica com anticorpos específicos para estas células inflamatórias (ED1, anti-GFAP e Anti-NeuN, respectivamente). Realizou-se contagem de micróglia/macrófagos ativados e corpos neuronais nos grupos experimentais mencionados. Não se notou diferença quantitativa entre os diferentes sexos, contudo houve uma aparente queda na quantidade de macrófagos/micróglia em 3 dias, tanto para os machos quanto para as fêmeas, apresentando alguma diferença na ativação astrocitária mais forte em machos. Os resultados sugerem que as diferenças sexuais na linhagem Lister Hooded, não são suficientes para causar diferenças significativas na preservação do tecido nervoso e em alguns aspectos da resposta inflamatória após a indução de isquemia cerebral por meio de ET1. / The inflammatory response may exacerbate the process harmful after acute neural disorders. Sexual dimorphism generated by different hormonal attendance between male and female have demonstrated neuroprotective abilities endogenous opposite, showing a better preservation of the integrity of the nervous tissue in female, putatively due to the presence of gynoid hormones. However, there is no research work comparing how this difference might affect the inflammatory response during stroke. In the present study, we investigated the differences in acute inflammatory processes of sexual dimorphism in adult rats of both sexes subjected to acute ischemic injury induced by endothelin (ET1) in the striatum. Six experimental groups were designed: male animals survival 24 hours (n = 8); male survival of 72 hours (n = 8); male survival of 7 days (n = 8) and female 24 hours survival (n = 8), females 72 hours of survival (n = 8); female seven days of survival. Histopathologic analysis was performed in the general sections stained with violet cresila. Macrophages, astrocytes, and neurons were identified by immunohistochemistry with antibodies specific for these inflammatory cells (ED1, anti-GFAP and Anti-NeuN, respectively). We conducted counts activated microglia / macrophages and neuron bodies mentioned in the experimental groups. No difference was observed quantitatively between different sexes, but there was an apparent decrease in the amount of macrophages / microglia at 3 days but in males and in females, presenting apparently some difference in the activation of astrocytes was stronger in males. The results suggest that sex differences, at least in lineage Lister hooded is not enough to cause significant differences in the preservation of nerve tissue and in some aspects of the inflammatory response after induction of cerebral ischemia by ET1.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-12-04T17:38:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ReducaoVolumeHipocampal.pdf: 1321121 bytes, checksum: bc14f6e04a97ebc0301ad75aa7e5cf36 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-12-05T17:04:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ReducaoVolumeHipocampal.pdf: 1321121 bytes, checksum: bc14f6e04a97ebc0301ad75aa7e5cf36 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-05T17:04:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ReducaoVolumeHipocampal.pdf: 1321121 bytes, checksum: bc14f6e04a97ebc0301ad75aa7e5cf36 (MD5) Previous issue date: 2013 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O consumo de etanol (EtOH) é considerado um problema de saúde pública do Brasil e no mundo, sendo alvo de pesquisas epidemiológicas e de seus efeitos no organismo durante as várias etapas do desenvolvimento humano. Neste contexto, torna-se necessário o entendimento dos efeitos do EtOH no Sistema Nervoso Central, mais especificamente sobre a formação hipocampal, pois embora seja conhecida como uma estrutura particularmente sensível aos seus efeitos deletérios do EtOH, os mecanismos subjacentes aos efeitos de exposição crônica são pouco estabelecidos. O presente estudo objetiva verificar quais as repercussões da exposição crônica ao EtOH em ratos, desde a adolescência até a idade adulta, sobre os padrões morfométricos e morfologia hipocampal. Ratos Wistar, fêmeas, receberam EtOH por gavagem (6,5 g/kg/dia, 22,5% V/v), do 35º ao 90º dia pós-natal, sendo comparado com grupo controle, o qual recebeu apenas água destilada. Foi realizada análise morfométrica e estereológica, bem como histoquímica e imunoistoquímica. Para a marcação imunoistoquímica, utilizou-se os anticorpos Anti-NeuN, Anti-GFAP e Anti-Iba1. Verificou-se perda neuronal significativa em CA1 e hilo, com CA3, apresentando diminuição não significante no número de células Neu-N+. Também foi encontra redução significativa da população microglial em todas as áreas investigadas, com ativação destas células. Houve redução no número de astrócitos em animais expostos ao EtOH em todas as áreas, embora não de forma significativa em CA1. Análise estereológica evidenciou redução de volume na formação hipocampal de ratos expostos ao EtOH em relação ao grupo controle. Desta forma, conclui-se que animais expostos cronicamente ao EtOH, sofrem redução volumétrica e perdas neuronal e glial na formação hipocampal.