No contexto atual dos centros de transplante de célula-tronco hematopoética (TCTH), as complicações precoces e tardias relacionadas ao transplante têm preocupado as equipes médicas, pois aumentam as taxas de morbi-mortalidade, elevando também os custos operacionais dos estabelecimentos de saúde. Neste sentido, a atenção dada as condições de saúde bucal dos pacientes que se submetem ao TCTH tem merecido nos últimos anos uma maior preocupação, embora ainda de uma maneira muito despadronizada, unidirecional e generalizada. Frente a evidência de que as condições intrabucais sofreriam modificações em função do protocolo do TCTH, a questão da influência da presença de infecções bucais nas complicações relacionadas ao TCTH recebeu maior atenção. Por conseguinte, iniciaram-se um número maior de investigações, direcionadas para o tipo e quantidade de infecção presente na cavidade oral. Objetivo: neste contexto o presente estudo foi desenvolvido no sentido de avaliar, mais precisamente, o impacto da presença da atividade inflamatória periodontal, assim como a presença de reconhecidas bactérias associadas à infecção periodontal, nas complicações relacionadas ao TCTH. Métodos: estudo prospectivo, observacional, em 105 pacientes candidatos ao TCTH autólogo e alogênico [condicionamento mieloablativo ou de intensidade reduzida (RIC)] do Serviço de Hematologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), sobre a presença da atividade inflamatória periodontal, definida por profundidade de sondagem e sangramento gengival, diagnosticada na avaliação bucal de rotina prétransplante e sua relação com mucosite oral, neutropenia, dias de febre, pega e Doença do Enxerto versus Hospedeiro (DECH) aguda. A associação foi aferida por ferramentas estatísticas uni e multivariadas, para p<= 0,05. Resultados: dos 91 pacientes com dados avaliáveis, 86,8% tinham atividade inflamatória periodontal (pelo menos um sítio com profundidade de sondagem>= 3 mm associada ao sangramento) e estavam igualmente distribuídos entre todas as modalidades de transplante. Devido ao fato que os desfechos avaliados foram superponíveis entre os grupos que receberam células-tronco de sangue periférico CTSP (autólogo e alogênico com RIC), as análises foram realizadas de acordo com a origem das células-tronco, com exceção da DECH aguda. A presença da atividade inflamatória periodontal aumentou significativamente os dias de mucosite nos pacientes submetidos ao TCTH com célula-tronco da medula óssea (MO) quando comparado ao TCTH de CTSP (p = 0.023), e este efeito permaneceu significativo (p = 0.03) mesmo quando controlado para o regime de condicionamento com Irradiação Corporal Total. Conclusão: a presença da atividade inflamatória periodontal levou a um aumento significativo na duração da mucosite oral nos pacientes que receberam TCTH de MO. Estes achados devem ser confirmados em um grupo maior de pacientes.

O uso de células da medula óssea no tratamento da insuficiência hepática aguda é uma alternativa promissora, visto que o único tratamento disponível atualmente é o transplante hepático o qual, devido à falta de órgãos para transplante e complicações pós-cirúrgicas, está associado a uma alta mortalidade. O interesse na identificação de populações celulares capazes de se diferenciar em células tipo-hepatócitos tem ganhado grande atenção, não somente como uma promissora fonte de células para terapia celular de doenças hepáticas, mas também como potencial fonte celular para modelos in vitro de testes pré-clínicos de medicamentos, modelos para estudo da hepatogênese, e desenvolvimento de fígados bioartificiais. O presente estudo teve como objetivo identificar a capacidade de diferentes populações de células da fração mononuclear da medula óssea (FMMO) de se diferenciar em células tipo-hepatócitos. Para isso, utilizamos um sistema de co-cultivo, onde as células da fração aderente e nãoaderente da FMMO eram mantidas em contato com o meio de hepatócitos derivados de animais com ou sem lesão por Tetracloreto de Carbono (CCl4). Nossos resultados mostram que células da fração não-aderente são capazes de adquirir características típicas de hepatócitos após 24 horas de exposição às células do tecido lesionado, tais como expressão gênica de Albumina e Citokeratina-18, e produção e secreção de uréia. Foi identificada a presença de microvesículas carregando material genético específico de hepatócitos no sobrenadante das células diferenciadas, indicando um possível mecanismo molecular na indução da diferenciação. Este trabalho permitiu o estudo da diferenciação celular in vitro e análise do papel do microambiente de lesão neste processo. / Cell therapy using bone marrow-derived cells is a promising approach for the treatment of acute liver failure, as liver transplant is associated to high mortality due to lack of organs and post-surgical complications. The identification of cell populations capable of generating hepatocyte-like cells has gained immense interest, not only as a promising cell source for cell-based therapy of liver diseases, but also as a potential cell source for in vitro models of drug safety testing, models for studying hepatogenesis, and development of bioartificial livers. In the present study, we investigated the capability of different populations from the bone marrow mononuclear cells (BMMC) to differentiate into hepatocyte-like cells. For that, adherent and non-adherent cells from the BMMC were co-cultured with hepatocytes obtained from animals with or without Carbon Tetrachloride (CCl4)-induced liver injury. Our results showed that non-adherent BMMC presented signs of differentiation, such as Albumin and Cytokeratin-18 expression and urea production, after 24 hours of co-culture with damaged hepatocytes. Microvesicles carrying hepatocyte-specific genetic material were detected in the supernatant from differentiated cells, thus suggesting a mechanism of differentiation. In summary, this study assessed in vitro differentiation of BMMC and analyzed the role of injury micro-environment in cell plasticity.

Orientador: Sara Teresinha Ollala Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T23:41:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luzo_AngelaCristinaMalheiros_D.pdf: 6304878 bytes, checksum: b63321671c0c64c404503f26c1bd336a (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A reconstituição da linhagem hematopoiética é um procedimento comum no tratamento de várias doenças hematológicas e não hematológicas. A medula óssea tem sido a principal fonte de obtenção de células tronco nos últimos 50 anos. Recentemente, células tronco obtidas de sangue periférico pós-mobilização e células mononucleares de sangue de cordão umbilical humano têm sido utilizadas com sucesso. Entretanto, as células tronco parecem ter características diferentes. Vários estudos foram publicados, recentemente, analisando a expressão gênica de sub populações de células tronco de linhagem hematopoiética de medula óssea, sangue periférico e de sangue de cordão. Tendo em vista que os procedimentos de terapia celular e transplante são realizados com a infusão de sangue total, o objetivo deste trabalho foi de analisar a expressão gênica das células mononucleares totais de sangue de cordão umbilical humano, a partir da técnica de análise seriada de expressão gênica (SAGE), e compará-Ia com a biblioteca de células mononucleares de medula óssea depositada on fine no Sagemap database. A expressão das proteínas de ciclo celular foi estudada através do método de "immunobfotting': a partir de células de sangue de cordão de recém nascidos prematuros e de termo, submetidas a cultura líquida de curta duração e em cultura em meio sem i-sólido de metilcelulose, suplementados com fatores estimulantes de crescimento. As células foram analisadas de quatro em quatro horas durante 24 horas e após, a cada 24 horas até 96 horas. A leitura das culturas em metilcelulose foi realizada no 7° e no 14o. dia. A análise de expressão gênica das células mononucleares de sangue de cordão evidenciou: 44.924 tags totais (15.519 tags únicas; 7772 genes conhecidos; 3935 seqüências preditas ou anotadas e 3812 genes desconhecidos) A medula apresentou 36577 tags totais (13075 tags únicas, 6711 genes conhecidos; 3371 seqüências preditas ou anotadas e 2993 genes desconhecidos). A análise funcional foi realizada através dos programas Gene Ontofogy Consortium e David. A distribuição por categoria foi similar nas duas bibliotecas. A análise detectou 48 genes com diferença na abundância de expressão ~ 10 e :510 e classificados no programa UniGene. Trinta e cinco foram mais expressos em sangue de cordão e estavam relacionados com resposta imune, ciclo celular e migração trans endotelial (homing). A validação do SAGE foi realizada através do método de reação em cadeia da polimerase, em tempo real quantitativo (qPCR), em 11 genes diferencialmente expressos, confirmando os resultados obtidos em 10 dos 11 genes validados, apresentando uma porcentagem de confirmação de 90%. Os resultados de alfa, beta e gama globina foram comparáveis aos da ontogenia da linhagem hematopoiética. F11 receptor, CDC25B, TGFA, SMARCC2, SKP1A, e NKG7 foram mais expressos em sangue de cordão e S100-A8 na medula óssea. A análise dos ensaios clonogênicos evidenciou um aumento significativo no número de colônias no i e no 14° dia nas culturas de sangue de neonatos prematuros, com significância estatística. Houve um aparecimento precoce das colônias no sétimo dia de cultura. As características morfológicas das culturas das células dos prematuros, no sétimo dia, eram semelhantes as das culturas de termo no décimo quarto dia. As culturas de prematuros no décimo quarto dia apresentavam grande quantidade de fibroblastos e se assemelharam, em número e morfologias, às de recém nascidos de termo com vinte e um dias de cultura. A análise da expressão das proteínas de ciclo celular demonstrou aumento de expressão de p130 à partir de 4 horas, cumulativo, desaparecendo ou diminuindo a partir de 24 horas. A expressão de p107 ocorreu após as 24 horas de cultura, acumulando até 96 horas. Entretanto, as expressões de p130 e p 107 foram maiores nas células de sangue de cordão que nas da medula óssea. Estes resultados sugeriram que as células de sangue de cordão umbilical de recém nascidos prematuros poderiam apresentar uma rápida progressão em ciclo celular. Os resultados aqui obtidos abrem novas perspectivas na caracterização funcional destes genes que poderão contribuir para um maior conhecimento da biologia das células de sangue de cordão umbilical / Abstract: Haematopoietic reconstitution is a common procedure for many haematological and non-haematological diseases. Up to now, total mononuclear bone marrow cells have been the main source for this procedure. Lately, total mononuclear peripheral and cord blood cells have also been successfully used. Many studies of gene expression profile of bone marrow, peripheral or cord blood manipulated cells have been performed during the last few years but, as total mononuclear cells have usually been used in clinical practice, the present study had the aim to compare, using serial analysis of the gene expression (SAGE), cord blood mononuclear cells with the bone marrow mononuclear celllibrary already deposited in Sagemap database. The cell cycle proteins expression were analysed by immunoblotting proceeding with umbilical cord blood cells from premature and full term neonates, submitted to clonogênic assays performed with short liquid culture and semi-solid methylcellulose culture, supplemented with growth factors. The cells were collected and analysed each four hours during the first 24 hours. Then, they were collected and analysed each 24 hours till 96 hours Cord blood revealed 44.924 tags (total) representing 15.519 unique tags (7772 known genes; 3935 sequence predicted or annotated; 3812 no matches). Bone marrow showed 36577 tags (total) representing 13075 unique tags (6711 known genes; 3371 sequence predicted or annotated; 2993 no matches). Genes were annotated using Gene Ontology Consortium. Category distribution was similar in both libraries. We found 48 genes with fold change difference ~ 10 and ~ 10 and UniGene number. Thirty-five were most expressed in cord blood and were related with immune response, cell cycle and homing. SAGE validation was performed by quantitative real time polymerase chain reaction (qPCR) of 11 differentially expressed genes confirming the SAGE results in 10 genes with a confirmation rate of 90%. Alpha, beta and gamma globin results were comparable with haematopoiesis ontogeny. F11 receptor, CDC25B, TGFA, SMARCC2, SKP1A, and NKG7 were most expressed in cord blood and S100-A8 in bone marrow. Fourteen highly expressed genes were function described. The semi-solid cultures analysis demonstrated that the cells of premature neonates had an early growth of CFU-E/BFU-E, CFU-GM and CFU-GEMM on the 7thday of culture, and the number of these colonies on the 7thand 14thday of culture was higher than fuI! term neonate's cells culture with statistic significance. The morphological characteristics on ih day of culture were comparable to those from full term neonates obtained on the 14thday. The premature cells cultures on the 14thday showed even fibroblasts and were comparable to those of full term neonates on the 21st day in terms of number and morphology of the colonies. The cell cycle protein expression analysis demonstrated the expression of p130 increased after the first 4 hours and accumulated, disappearing, or diminishing after 24 hours. On the other hand the p107 expression appeared after 24 hrs and accumulated until 96 hrs. However, the p130 and p107 expression was twofold higher in premature cells compared to full term cells. These results suggest that premature cells have a rapid exit from GO/G1 to S-phase Thus, homing, cell cycle differentiation, and immune response related genes seem to be highly expressed in cord blood cells. Further studies verifying the role of these genes may contribute for greater knowledge regarding cord blood cell biology / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Maria Luiza Moretti-Branchini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T12:40:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trabasso_Plinio_D.pdf: 33454772 bytes, checksum: 929d6b15891369e193a83b4f0a4d2cc1 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Receptores de transplante de medula óssea constituem uma população de alto risco para ocorrência de infecções fúngicas invasivas (IFI). O conhecimento das características epidemiológicas locais é fundamental para a defInição das estratégias de prevenção. Foi feito um estudo retrospectivo que envolveu 115 pacientes, 91 receptores de enxerto alogênico e 24 receptores de enxerto autólogo, nos quais foram detectadas 15 (13,0%) IFI, 8 (53,3%) delas com identificação microbiológica do patógeno. As fungemias (n=8; 53,3%) e as sinusites (n=4; 26,7%) foram as localizações mais freqüentes. Cinco (62,5%) infecções foram causadas por espécies de Candida e 2 (25,0%) foram causadas por Fusarium sp. Dentre as espécies de Candida, 60,0% eram não-albicans. Cinqüenta e dois (45,2%) pacientes apresentaram colonização fúngica; receptores de enxerto alogênico apresentaram maior proporção (52,7%) de colonização do que receptores de enxerto autólogo (16,7%) (p=O,003). O fator de risco independente para ocorrência de IFI nos receptores de enxerto alogênico, identificado por regressão logística multivariada, foi neutropenia prolongada (p<0,001; OR=I,17 [IC95%=1,04-1,24]), enquanto que a não realização de irradiação corporal total no condicionamento agiu como fator independente de proteção ao desenvolvimento de IFI (P=O,021; OR=0,16 [IC95%=0,03-0,76). Através de análise de regressão logística multivariada, encontramos que mucosite prolongada foi fator de risco independente para ocorrência de colonização fúngica entre os receptores de enxerto alogênico (P=O,014; OR=I,l1 [IC95%=1,02-1,21]). A mortalidade atribuível à IFI foi 20,0%. Não houve diferença na sobrevida entre pacientes com ou sem IFI (P=0,173) / Abstract: Bone marrow transplant (BMT) recipients are at high risk for developing invasive fungal infections. Deep and prolonged immunosupression have been associated conditions to increase the number of invasive fungal infections in this population. The study of the local and specific epidemiology of these immunosuppressive patients has been an important issue for the treatment and application of preventive measures to reduce the risk of infections. The aim of this study was to evaluate the epidemiology of fungal infections in patients hospitalized in the BMT unit of the Hospital das Clínicas-UNICAMP. Diagnose of invasive fungal infections were made according to the EORTCINIAID criteria. One hundred and fifteen BMT patients, 91 allogenic and 24 autologous recipients were evaluated. Fifteen invasive fungal infections were detected and 8 (53.3%) had microbiological identification of the pathogens. Fungemia (n=8) and sinusitis (n=4) were the most prevalent funga! infections in our study. Five (62.5%) invasive fungal infections were caused by Candida spp. (C. parapsilosis=3) and two (25.0%) by Fusarium sp. Fifty-two (45.2%) patients had fungal colonization. Fungal colonization was more frequent in allogeneic BMT recipients (52.7%) than in autologous recipients (16.7%) (p=O.003). Independent risk factors for invasive fungal infections in allogeneic recipients, identified by multivariate analysis, were prolonged neutropenia (p<0.001) and total body irradiation in the conditioning regimen (P=O.021).The attributable mortality due to fungal infection was 20.0%. There was no difference in survival between patients with or without deep fungal infections (P=O.173) / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Maria Leticia Cintra, Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-29T04:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Villar_CristinaCunha_M.pdf: 3307979 bytes, checksum: c4e54d6d6ec2b6dd6955628c3fc8dfd5 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O líquen plano (LP) é uma doença mucocutânea crônica, de causa desconhecida, que freqüentemente afeta a mucosa oral. Histologicamente, o LP apresenta diferentes graus de acantose e atrofia, com desorganização da camada basal e infiltrado inflamatório subepitelial em banda, composto principalmente de linfócitos T. Lesões semelhantes ao líquen plano, chamadas reações liquenóides, podem acometer a mucosa oral. As reações liquenóides podem estar associadas à desordens sistêmicas, como na doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (GVHDc). Os achados histológicos da reação liquenóide associada à GVHDc são semelhantes aos encontrados no LP. O objetivo deste trabalho foi comparar as características microscópicas do LP e da GVHDc em boca. As alterações epiteliais e no tecido conjuntivo foram avaliadas em 40 casos de LP e 31 de GVHDc, assim como a presença de mastócitos, macrófagos e células de Langerhans (CL). As maiores diferenças entre as lesões foram observadas na região da junção epitélio tecido conjuntivo. No LP, o infiltrado inflamatório foi mais intenso, porém a desorganização e vacuolização das células da camada basal foram menos evidentes. Os mastócitos foram mais numerosos no LP, e apresentaram menor quantidade de grânulos quando observados no infiltrado inflamatório. As CL foram mais freqüentes no LP, e os macrófagos na GVHDc. A expressão de laminina foi similar nos dois grupos. Estes resultados mostram que a lesão liquenóide associada a GVHDc difere do LP, particularmente na junção epitélio-tecido conjuntivo. No LP, o infiltrado inflamatório é mais intenso, mas a expressão antigênica, possivelmente menor, gera alterações epiteliais mais discretas / Abstract: Lichen planus (LP) is a chronic mucocutaneous disease of unknown etiology, that frequently affects the oral mucosa. Microscopically, LP is characterized by areas of epithelial acantosis and atrophy, with disorganization of the basal layer, and by a subepithelial band-like mononuclear inflammatory infiltrate. Lichenoid lesion are diseases that present a similar pattern to LP, that can affect the mouth and skin, as Lichenoid lesions may be associated with chronic Graft versus Host Disease (cGVHD). The objective of this work was to compare the microscopic characteristics of LP and those of cGVHD in the oral mucosa. Epithelial and connective tissue alterations were evaluated in 40 cases of LP and in 31 cases of cGVHD, as well as the presence of mast cells, Langerhans cells (CL) and macrophages. The main differences found between the two diseases were at dermal-epithelial junction area. In LP the inflammatory infiltrate was more intense, but disorganization and vacuolization of the epithelial basal cells were less evident. Mast cells were more numerous in lichen planus, and showed less granules when observed in the inflammatory infiltrated. LC were more numerous in lichen planus and macrophages in cGVHD. The laminin expression was similar in both groups. From these observations it was concluded that lichenoid lesions of cGVHD of the oral mucosa differs from LP, particularly at the dermal-epithelial junction region. In LP the inflammatory infiltrate is more intense, but the antigenic expression possibly is less than in cGVHD, causing a more discrete epithelial cells alterations / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador: Maria Leticia Cintra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T17:26:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_VanessaNascimento_M.pdf: 2864833 bytes, checksum: 3ee9e69bb5f58fae7867132642bdf6e6 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O líquen plano oral (LPO) e o acometimento oral da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc) apresentam características clínicas e histológicas semelhantes, apesar da etiologia distinta. A apoptose, induzida por linfócitos T citotóxicos, tem sido proposta como o tipo de morte dos ceratinocitos, em ambas as doenças. A citotoxidade celular é mediada, dentre outros mecanismos, por grânulos contendo granzima B e perforina. Poucos trabalhos foram desenvolvidos demonstrando o papel destas moléculas no líquen plano; dentre estes, alguns estudaram a interação das células que expressam estas moléculas com os demais componentes do infiltrado. Contudo, há raros estudos sobre este tema na DECHc. Considerando que as características em comum podem refletir similaridades nos mecanismos imunológicos, o objetivo do nosso estudo foi correlacionar os achados morfológicos e imuno-histoquímicos do LPO e da DECHc oral, na tentativa de compreender melhor a patogênese destas doenças. Foram analisadas 29 amostras de LPO e 27 de DECHc oral, coletadas no período de 1994 a 2007, de pacientes atendidos no Hospital das Clínicas e na Unidade de Transplante de Medula Óssea da UNICAMP. Novos cortes foram corados por H&E e pela técnica imuno-histoquímica para CD4, CD8, MAC 387, ICAM-1, granzima B e perforina. O número de células CD4-positivas foi estatisticamente maior no LPO do que na DECHc (p<0,0001), enquanto as médias totais (do epitélio + do tecido conjuntivo) de células positivas para granzima B e perforina foram maiores na DECHc que no LPO (p<0,05). Foi observado também que, quanto maior o número de células perforina+, maior era o número de células granzima B+, tanto no epitélio como no tecido conjuntivo, nos dois grupos de doenças (p<0,05). No LPO, o número de corpos apoptóticos isolados mostrou uma correlação positiva com a granzima B e negativa com a perforina do tecido conjuntivo (p<0,01). Inversamente, nas lesões orais da DECHc, o número de corpos apoptóticos agrupados apresentou uma correlação positiva com a perforina do tecido conjuntivo. Não houve diferença entre o LPO e a DECHc oral com relação ao número de corpos apoptóticos (isolados ou agrupados), nem quanto à extensão da degeneração hidrópica da camada basal, e nem mesmo com relação ao número de células imunomarcadas para CD8, ICAM-1 e MAC 387. Estes achados indicam que a apoptose, no LPO, parece correlacionar-se com a ação da granzima B, enquanto que, na DECHc oral, a perforina parece ser mais atuante. Embora o LPO e a DECHc oral apresentem similaridades clínicas e histológicas, parece haver diferenças na patogênese destas doenças. Os resultados encontrados podem ser úteis para aprimorar a compreensão dos mecanismos imunológicos, bem como podem embasar o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para o controle da apoptose e redução da morbidade associada a estas doenças. / Abstract: Oral lesions in lichen planus (OLP) and chronic graft-versus-host disease (cGVHD) have similar clinical and histological features, but distinct etiology. Apoptosis induced by cytotoxic T lymphocyte has been proposed as the form of keratinocytes death. The cell cytotoxicity is mediated, among other mechanisms, by granules containing granzyme B and perforin. Few studies have been published showing the role of those molecules in lichen planus, as well as their relationship with other inflammatory infiltrate components. However, rare works were reported about this theme in cGVHD. Since common features can reflect similarities in immunological mechanisms, the purpose of our study was to correlate the morphological and immunohistochemical findings of OLP and cGVHD to better understand the pathogenesis of these diseases. We analyzed 29 samples of OLP and 27 of oral cGVHD collected in the period between 1994 and 2007, from patients treated at the University Hospital and Bone Marrow Transplant Unit of UNICAMP. Additional sections were obtained and stained for H&E and immunohistochemical technique targeting CD4, CD8, MAC 387, ICAM-1, perforin and granzyme B. The number of CD4-positive cells number was significantly higher in OLP than in cGVHD (p<0,0001), while the total means (epithelium plus connective tissue number) of the granzyme B- and perforin-positive cells were significantly higher in cGVHD (p<0,05). Also, it was found that the higher the number of perforin+ cells, the higher the number of granzyme-B + cells in the epithelium and in the connective tissue for both groups (p<0.05). In OLP, the number of single apoptotic bodies had a positive correlation with connective tissue granzyme B immunostaining and a negative correlation with perforin (p<0.01). On the contrary, in oral cGVHD, the number of apoptotic body clusters presented a positive correlation with connective tissue perforin (p<0.01). Our findings indicate that apoptosis in OLP seems to be correlated with granzyme B release, while in oral cGVHD, perforin seems to be more important. There were no significant differences between OLP and cGVHD oral regarding the following features: the amount of apoptotic bodies (isolated o clusters), the extension of hydropic basal cell degeneration, and the number of positive cells for CD8, ICAM-1 and MAC-387. These results indicate that apoptosis, in OLP, seems to correlate with granzyme B release while, in oral cGVHD, perforin is preponderant. Although OLP and oral cGVHD present clinical and histological similarities, differences seem to exist in the athogenesis of these diseases. Our results might help to better understand the immunological mechanisms of these two conditions, as well as supporting the development of new therapeutic strategies for controlling apoptosis and reducing morbidity associated with them. / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Afonso Celso Vigorito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_ClarissaVasconcellosde_M.pdf: 2809498 bytes, checksum: ac6c5e1a4f9ab38a684ec0a6a1a664a6 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O procedimento de transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) pode causar perdas funcionais que dificultam atividades diárias que requeiram habilidades físicas. Nosso objetivo foi avaliar a função dos pacientes pré e após o TCTH utilizando uma avaliação em ambiente ambulatorial. De novembro de 2008 a Novembro de 2010, 50 pacientes, 29 (58%) mulheres, mediana de idade de 48 anos (24-67), foram arrolados no estudo. A coleta foi realizada pré e pós TCTH alogênico ou autólogo. Os instrumentos utilizados foram o teste de caminhada de 2 minutos (TC2M), saturação de oxigênio (SatO2), freqüência cardíaca (FC) e escala modificada de Borg (EMB) antes e depois do TC2M para avaliação da performance da marcha, teste de força de preensão (TFP) para avaliação de força muscular, teste de Schober (TS) para avaliação de mobilidade de coluna lombar e escala máxima e adaptada de atividade (EMA e EAA) do questionário Perfil de Atividade Humana (PAH) para avaliação da função física. Cinqüenta pacientes foram avaliados pré TCTH; 6 não foram submetidos ao TCTH; 3 morreram previamente, 1 se recusou e 2 foram excluídos. Quarenta e quatro de 50 (88%) foram submetidos ao TCTH, 21 alogênicos e 23 autólogos. Trinta e três de 44 (75%) pacientes foram submetidos à ambas as avaliações, 11/44 (25%) pacientes não foram submetidos: 9 morreram e 2 foram excluídos. Entre os grupos que foram submetidos às duas avaliações, achamos valores estatisticamente menores na avaliação pós para TC2M (p= 0,004), TFP para mão direita e esquerda (p= 0,004 e < 0,0001), TS, EMA e EAA (p< 0,0001); e valores maiores para FC (p= 0,01) antes do TC2M e SatO2 (p= 0,02) após o TC2M. Também encontramos diferenças estatisticamente significantes entre os grupos de pacientes autólogo e alogênico nas variáveis Hemoglobina (Hb), EMA (p= 0,002) e EAA (p= 0,008) no pós TCTH. Estas diferenças indicam um decréscimo no condicionamento aeróbico antes do stress físico, redução da performance da marcha, da força muscular, da flexibilidade da coluna e na função em atividades de vida diária no pós TCTH, mostrando perdas físicas nesta população. Ademais, o prejuízo funcional e físico foi mais severo nos pacientes submetidos ao procedimento alogênico no pós TCTH. Concluindo, o entendimento da intensidade e a especificidade dessas perdas físicas podem ajudar a conduzir melhor um programa de reabilitação no pós TCTH / Abstract: Hematopoietic stem cell transplant (HSCT) procedure may cause functional losses that impair daily tasks that require physical skills. Our aim was to evaluate function of patients pre and post HSCT using an assessment in outpatient basis. From November 2008 to November 2010, 50 patients, 29 (58%) female, median age 48 years (24-67), were enrolled in the study. Collection was performed pre and post autologous or allogeneic HSCT. Instruments were 2 minutes walking test (2MWT), oxygen saturation (Sa02), heart rate (HR) and Borg Scale (BS) before and after 2MWT for gate performance evaluation; Grip Strength (GS) for strength evaluation, Schober Test (ST) for spine mobility testing and maximum and adapted activity score (MAS and AAS) of Human Activity Profile (HAP) questionnaire for function role evaluation. Fifty patients were evaluated pre HSCT; 6 did not undergo HSCT; 3 died, 1 refused, and two were excluded. Forty four out of 50 (88%) underwent HSCT, 21 allogeneic, 23 autologous. Thirty three out of 44 (75%) patients performed both evaluations, 11/44 (25%) patients did not: 9 died and 2 were excluded. Among groups who performed both evaluations, we found significant lower values in the post evaluation for 2MWT (p= 0.004), GS for right and left hand (p= 0.004 and <0.0001 respectively), ST, MAS and AAS (p< 0.0001); and higher HR (p= 0.01) before 2MWT and Sa02 (p=0.02) after 2MWT. We also found statistically differences between allogeneic and autologous groups of patients for hemoglobin (Hb), MAS (p= 0.002) and AAS (p= 0.008) variables on post HSCT. Those differences indicate decrease on aerobic conditioning before physical stress, decline of gate performance, hand strength, spine flexibility and on function role on daily activities post HSCT, showing physical losses in this population. Moreover, functional and physical prejudice was more severe in patients that underwent allogeneic procedure on post HSCT. In conclusion a better understanding of intensity and specificity of those physical losses may help to conduct a better rehabilitation program on post HSCT period / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientadores: Carmino Antonio de Souza, Irene Lorand-Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T07:39:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vigorito_AfonsoCelso_D.pdf: 4352247 bytes, checksum: e10430c1c5080d3ae894381270e3bbe2 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Este é um estudo randomizado, desenvolvido com base na comparação entre os transplantes alogênicos de medula óssea (MO) e aqueles de células progenitoras periféricas (CPP), os quais são utilizados no tratamento de doenças hematológicas malignas. Para tal, deu-se ênfase à pega, à doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) aguda e crônica, bem como às sobrevidas dos pacientes. De 02/1995 até 10/1997, 40 pacientes receberam um transplante HLA idêntico, originado da MO (grupo A) ou CPP (grupo B). O total de pacientes avaliáveis no final do estudo foi de 19 (grupo A) e 18 (grupo B), respectivamente. A mediana de idade foi de 35 anos (17-56) no grupo A e 29,5 (9-51) no grupo B (P=0,17). O regime de condicionamento utilizado foi Bu (16)/Cy (120) em 16 pacientes no grupo A e 17 no grupo B; Bu (16)/ Cy (120)/ VP-16 (40) em 3 pacientes no grupo A e Cy (120)/ irradiação corporal total (ICT) (13,2 Gy) em 1 paciente no grupo B. A profilaxia da DECH utilizada foi ciclosporina (CSP)/Metotrexato em 16 pacientes no grupo A e em 18 pacientes no grupo B; e 3 pacientes receberam CSP/prednisona no grupo A. As CPP foram mobilizadas com G-CSF, lO~gIkgldia, durante 5 dias e colhidas no quinto dia, em uma única sessão de aférese, na maioria dos pacientes. O conteúdo mediano de células CD 34+ x 106 !Kglreceptor foi de 5,26 (1,19-17,55) no Wpo A e 4,71 (1,26-71,61) no grupo B (P=0,40). A mediana de dias para se atingir o número absoluto de neutrófilos (NAN) > 0,5 X }Q9/l foi de 18 (13-30) no grupo A e 16 (11-25) no grupo B (P=0,15). As contagens de plaquetas > 20 x 109/1 ocorreram no dia + 17 (10-40) no grupo A e + 12 (9-36) no grupo B (P=O,OI). A mediana do dia para a alta hospitalar foi +26 (18-48) no grupo" A e +21 (18-42) no grupo B (P=0,08). A probabilidade de DECH aguda;:;:: grau 2 foi de 19% no grupo A e 27% no grupo B, respectivamente (P=0,53). Nossos dados sugerem que a grande maioria dos pacientes que receberam CPP apresentarão DECH crônica, com uma tendência estatística superior nesse grupo (P=0,08). A forma extensa da doença ocorreu em 50% e 100%, nos grupos da MO e CPP, respectivamente (P=0,05). A estimativa de sobrevida global (SG) para os grupos A e B, em 1000 dias, foi de 51% e 47%, respectivamente (P=0,67). A sobrevida livre de doença (SLD) em 1000 dias foi de 52% e 58%, respectivamente (P=0,50). Em conclusão, a pega do enxerto foi similar em ambos os grupos, exceto para a recuperação de plaquetas que ocorreu mais precocemente no grupo que recebeu CPP (P=0,01); a alta hospitalar foi mais precoce no grupo da CPP, porém sem significado estatístico; não houve diferença de acometimento da DECH aguda. Nossos dados sugerem que a grande maioria dos pacientes do grupo que recebeu CPP apresentará DECH crônica, com predomínio da forma extensa. Não houve diferença quanto a SG e SLD em ambos os grupos / Abstract: This is a prospective, randomized study comparing allogeneic bone marrow (BM) and peripheral blood progenitor celI (PBPC) transplantation in the treatment of hematologic malignancies focusing on engraftment, acute and chronic graft versus host disease (GVHD) and survival. From 23/02/1995 until 16/10/1997, 40 patients received HLA identical sibling BM (group A) or PBPC (group B). Evaluable patients at the end were 19 (A) and 18 (B). The median age was 35 (17-56) in A and 29,5 (9-51) in B, respectively (P=O,17). The conditioning regimen was Bu (16) 1 Cy (120) in 16 patients in A and 17 patients in B; Bu (16) 1 Cy (120) 1 VP-16 (40) in 3 patients in A and Cy (120) 1 total boby irradiation (13,2 Gy) in 1 patient in B. The GVHD prophylaxis was cyc1osporin (CSA) 1 methotrexate in 16 patients in A and 18 patients in B. Three patients received CSA 1 Prednisone in A. The donors were treated with G-CSF 10llglkg/day during 5 days and the PBPC were harvested in the fifth day in a single apheresis in the majority of them. The median content o~CD 34+ celIs x 1061 Kg Ireceptor was 5,26 (1,19-17,55) in A and 4,71 (1,26-71,61) in B (P=O, 40). The median of days for an absolute neutrophil count (ANC) > 0,5 x 109/1 was 18 (13-30) in A and 16 (11-25) in B (P=O,15). Platelets counts > 20 x 109/1 occured at + 17 (10-40) in A and + 12 (9-36) in B (P=O,Ol). Median day ofhospital discharge was +26 (18-48) in A and +21 (18-42) in B (P=0,08). The probability of~ 2 grade a-GVHD was 19% (A) and 27% (B) (P=0,53). The probabi1ity of alI grade c-GVHD was 70% with BM. Although the small number in PBPC, our data suggest the great majority will have c-GVHD (P=0,08); extensive disease was present in 50% aIld 100% in A and B, respective1y (P=0,05). The estimates of overalI survival (OS) for A and B at 1000 days are 51% and 47% respectively (P=0,67); disease ftee survival (DFS) at 1000 days are 52% and 58% respectively (P=0,50). In conc1usion, the engraftment was similar for both groups, except for platelet recovery (earlier for PBPC); although no significant, the discharge was earlier for PBPC; there was no difference in acute GVHD. Our data suggest the great majority in the PBPC group wilI have c-GVHD, and more extensive disease has been seen in this group. No differences in OS and DFS have seen so faro / Doutorado / Doutor em Clínica Médica

Orientador : Benedicto de Campos Vidal / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T14:21:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Telis_CeliaMariaTurri_M.pdf: 2474872 bytes, checksum: c96f1e23a463fb24e21c2c5325d53c46 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: A Ciclofosfamida é uma agente alquilante que inibe a síntese de ácidos mucleicos e portanto reduz o número de células que estão se dividindo. Vários tecidos sofrem o efeito tóxico desta droga, principalmente bexiga, trato gastrintestinal e medula óssea. No estudo citológico da medula óssea, observou-se que 24 horas após o uso de Ciclofosfamida, a celularidade total diminuiu intensamente e restaram apenas neutrófilos maduros, eritroblastos ortocromáticos, linfócitos, plasmócitos e histiócitos. Na análise citofotométrica da série vermelha verificou-se que a quase totalidade dos eritroblastos estavam na fase G1 do ciclo celular. Persistiram portanto, somente células que não se multiplicam mais e que por isso não sofrem ação da droga. No grupo de ratos sacrificado após 72 horas do uso de Ciclofosfamia, houve regeneração celular, às custas, principalmente, da série granulocítica, o que foi visto pelo grande número de mieloblastos e pró-melócitos. Observou-se também o aparecimento de eritroblastos jovens (pró-eritroblastos e eritroblastos basófilos) com características megaloblásticas e que apresentaram valores Feulgen/DNA muito baixos, ou seja, eram hipodiplóides. O achado de células com conteúdo de DNA inferior ao do grupo controle foi interpretado como decorrente de inibição parcial da síntese de DNA pela Ciclofosfamia. Ela teria causado quebras cromossômicas e as células -filhas receberam menor quantidade de material genético... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-28T22:47:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Rosivania Silva Mota.pdf: 2096527 bytes, checksum: c2bf113b3ef63f3e3e91b1bc8f1d7c61 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-11-20T22:34:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Rosivania Silva Mota.pdf: 2096527 bytes, checksum: c2bf113b3ef63f3e3e91b1bc8f1d7c61 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-20T22:34:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Rosivania Silva Mota.pdf: 2096527 bytes, checksum: c2bf113b3ef63f3e3e91b1bc8f1d7c61 (MD5) Previous issue date: 2017-08-30 / Existem muitos relatos de alterações hematológicas medulares em portadores crônicos do HCV, entretanto os estudos realizados até o momento se destinaram a pacientes infectados e sintomáticos de doença hepática e/ou hematológica que foram encaminhados a atendimento médico terciário para investigação de citopenias. Nenhum estudo foi encontrado que abordasse a avaliação das alterações em medula óssea, numa fase mais precoce da infecção, com pacientes ainda assintomáticos do ponto de vista hematológico e hepático. Os objetivos deste estudo foram descrever as alterações hematológicas periféricas e medulares em indivíduos infectados pelo vírus da hepatite C (HCV) e assintomáticos de doenças hepática e hematológica, ainda não submetidos a tratamento específico e correlacioná-las com a carga viral plasmática, genótipos e graus de fibrose hepática. Estimar a frequência das alterações hematológicas periféricas e medulares e verificar a associação entre as alterações hematológicas periféricas e medulares com carga viral, genótipos e graus de fibrose hepática. Trata-se de estudo descritivo analítico, onde foram selecionados 30 pacientes de ambos os sexos, com idade entre 18 a 60 anos, atendidos nos ambulatórios de hepatologia e infectologia do Estado da Paraíba no período de 01/2016 a 03/2017. Foi realizada uma entrevista para obtenção dos dados sócios demográficos, os clínico-laboratoriais foram obtidos a partir dos registros em prontuários e realizado a coleta do aspirado de medula óssea. A média de idade foi de 43,93, sendo 60,0% mulheres. A frequência das alterações hematológicas periféricas foi de 20,0% (6/30) e das alterações medulares de 90,0% (25/30), observou-se associação entre os indivíduos com alterações hematológicas periféricas e os graus de fibrose (p=0,014), sem associação com a carga viral e os genótipos. O genótipo 1 foi presente em 80,0% (24/30) dos pacientes e alta viremia em 64,4% (16/30) e 66,7% (20/30) com graus iniciais de fibrose hepática de F0 a F2. 80,0% (24/30) dos pacientes não tinham alterações no exame sanguíneo periférico, entretanto na análise do mielograma56,7% (17/30) apresentavam algum tipo de alteração na celularidade geral e/ou específica por série, 83,3% (25/30) tinham alteração de maturação das linhagens celulares, predominando a desproporção maturativanúcleo citoplasmática e os retardos maturativos. Trata-se de estudo pioneiro com pacientes assintomáticos de doença hepática, infectados pelo HCV, assim apesar da baixa frequência das alterações periféricas, houve associação com os graus de fibrose e por outro lado as alterações hematológicas medulares foram altas, mas sem associação com a carga viral, os genótipos e o grau de fibrose, ressalta-se a importância do acompanhamento hematológico desses pacientes, uma vez que podem se beneficiar com uma abordagem mais precoce de sua doença hepática com o tratamento especifico, bloqueando a progressão desses distúrbios hematológicos antes de tornarem-se irreversíveis. / There are many reports of hematological changes in peripheral blood and bone marrowin chronic HCV infected patients, however, the studies carried out so far have been aimed at patients infected and symptomatic of liver and / or hematological disease who were referred to tertiary medical care withcytopenias to be investigated. No study was found to address the evaluation of bone marrow changes, at an earlier stage of infection, with patients still asymptomatic from a hematological and hepatic point of view. The aims of this study were to describe hematological changes in peripheral blood and bone marrow in infected individuals with hepatitis C virus infection and asymptomatic of hepatic and hematological diseases, not yet submitted to specific treatment and correlate them with viral load, genotype and degree of hepatic fibrosis. To estimate the frequency of peripheral and medullary hematological changes and to verify the association between peripheral and medullary hematological changes with viral load, genotypes and degrees of hepatic fibrosis. This is an analytical descriptive study, in which 30 patients of both sexes, aged between 18 and 60 years old, attended at the outpatient clinics of hepatology and infectology of the State of Paraíba were selected from 2016, january to 2017, march. An interview was carried out to obtain the socio-demographic data, the clinical-laboratory ones were obtained from the medical records and the bone marrow aspirate was collected. The mean age was 43.93, with 60.0% women. The frequency of peripheral hematological alterations was 20.0% (6/30) and the medullary changes of 90.0% (25/30), an association was observed between individuals with peripheral hematological alterations and degree of fibrosis (p=0,014), without association with viral load and genotype. Genotype 1 was present in 80.0% (24/30) of the patients and high viremia in 64.4% (16/30) and 66.7% (20/30) with initial degrees of hepatic fibrosis from F0 to F2. 80.0% (24/30) of the patients had no alterations in the peripheral blood test; however, in the analysis of the myelogram 56.7% (17/30) presented some type of alteration in general and / or specific series cellularity, 83, 3% (25/30) had maturational alterations of the cell lineages, predominating maturative nucleus cytoplasmatic disproportion and maturative delays. This is a pioneer study with asymptomatic patients of liver disease, infected with HCV, thus, despite the low frequency of peripheral alterations was low, there was an association with the degree of fibrosis and, on the other hand, the hematological changes in bone marrow were high but with no association with viral load, genotype and degree of fibrosis, however the importance of hematologic follow-up of these patients is emphasized, since they may benefit from an earlier approach to their liver disease with specific treatment, blocking the progression of these hematological disordersbefore they become irreversible.