A validação dos métodos de análises em situações fora da rotina, em P&D pesquisa e desenvolvimento, pode tornar-se um processo de difícil solução, em oposição àquelas de rotina, onde as concentrações são conhecidas. Nesta última situação, o método analítico é validado e aprovado com simplicidade. Apesar dos elementos de qualidade básicos para análises em P&D serem os mesmos adotados nas análises de rotina, fatores como o comportamento imprevisível da amostra, a composição desconhecida da matriz e interdependência com o analito, mesmo a incerteza a respeito da escolha do método instrumental, requer uma atenção renovada nos elementos de qualidade existentes. A razão pode ser atribuída à imprevisibilidade do procedimento analítico e a extensão do esforço adicional dos elementos de qualidade. As incertezas das análises em P&D requerem uma cuidadosa consideração do problema, assim como a disponibilidade de técnicas analíticas. Ao mesmo tempo, devem-se observar o planejamento e organização do trabalho, a supervisão do desenvolvimento analítico e a adequação dos aspectos técnico e organizacional - no trabalho de P&D, a definição de responsabilidades e a competência do corpo técnico. A garantia da qualidade nas indústrias farmacêuticas é estabelecida pelo desenvolvimento de especificações apropriadas para matérias-primas, produtos intermediários e produtos finais. A importância de especificações adequadas foi estabelecida e exemplos foram dados no desenvolvimento de especificação típica para produtos farmacêuticos, tais como a vacina e matéria prima. Isto incluiu uma discussão dos tipos de parâmetros que precisam ser controlados e uma indicação dos valores numéricos ou faixas esperadas para muitos materiais utilizados. A metrologia analítica que necessita ser aplicada para demonstrar a observância com as especificações foi discutida, com as implicações de desempenho do método para diferenciar variações na qualidade do produto e a simples variabilidade analítica. Esse trabalho foi escrito para laboratórios, com a finalidade de dar um suporte na implementação da validação de métodos analíticos e introduzir o conceito de incerteza da medida nas análises de rotina. O objetivo foi fornecer de uma maneira compreensível e prática a metodologia dos cálculos das medidas de incerteza baseados principalmente em dados de controle de qualidade e de validação já existentes. Exemplos práticos retirados diretamente do Laboratório de Metrologia e Validação, FIOCRUZ / Bio-Manguinhos, foram apresentados. Entretanto, o tratamento usado neste trabalho é genérico e pode ser aplicável a outros laboratórios químicos / Contrary to routine analysis, where the sample matrix and concentration range of the analyte are known, the analytical method has been validated the method is fit-to-purpose analysis in non-routine situation and in R&D research and development may be a tortuous problem to solve. Although many basic quality elements are the same as in routine analysis, unknown factors such as unpredictable behavior of the sample, unknown composition of the matrix and interdependence with the analyte, but (due to the unpredictability of the analytical procedure and extent of effort ) also additional organizational quality elements, even uncertainty about the choice of the instrumental method. The uncertainties in non-routine analysis and R&D require careful consideration of the problem, requiring available analytical techniques, planning and organization of work, supervision of the analytical progress and adequate aspects both technical and organizational or non-routine and R&D work and define responsibility and competences of the personnel. Assessment and assurance of quality within the field of pharmaceutical manufacture is established by the development of appropriate specifications for raw materials and products. The importance of suitable specifications was established and examples were given for the development of a typical specification for a pharmaceutical drug substance like as vaccine or raw material. This included discussion of the types of parameters which needed to be controlled and an indication of the numerical values or ranges expected for most materials. The analytical metrology which needs to be applied to demonstrate compliance with the specification were discussed, along with the implications of method performance necessary in order to distinguish between variations in product quality and simple analytical variability. This work is written for analytical laboratories, in order to give support to the implementation of the validation of analytical methods and the concept of measurement uncertainty for routine work. The aim is to provide a practical, understandable and common way of performing measurement uncertainty calculation, based mainly on preexisting quality control and validation data. Practical examples taken directly from the Laboratório de Validação de Métodos, FIOCRUZ / Bio-Manguinhos were presented and explained. However, the approach is very general and should be applicable to most testing laboratories in chemical field

A validação dos métodos de análises em situações fora da rotina, em P&D pesquisa e desenvolvimento, pode tornar-se um processo de difícil solução, em oposição àquelas de rotina, onde as concentrações são conhecidas. Nesta última situação, o método analítico é validado e aprovado com simplicidade. Apesar dos elementos de qualidade básicos para análises em P&D serem os mesmos adotados nas análises de rotina, fatores como o comportamento imprevisível da amostra, a composição desconhecida da matriz e interdependência com o analito, mesmo a incerteza a respeito da escolha do método instrumental, requer uma atenção renovada nos elementos de qualidade existentes. A razão pode ser atribuída à imprevisibilidade do procedimento analítico e a extensão do esforço adicional dos elementos de qualidade. As incertezas das análises em P&D requerem uma cuidadosa consideração do problema, assim como a disponibilidade de técnicas analíticas. Ao mesmo tempo, devem-se observar o planejamento e organização do trabalho, a supervisão do desenvolvimento analítico e a adequação dos aspectos técnico e organizacional - no trabalho de P&D, a definição de responsabilidades e a competência do corpo técnico. A garantia da qualidade nas indústrias farmacêuticas é estabelecida pelo desenvolvimento de especificações apropriadas para matérias-primas, produtos intermediários e produtos finais. A importância de especificações adequadas foi estabelecida e exemplos foram dados no desenvolvimento de especificação típica para produtos farmacêuticos, tais como a vacina e matéria prima. Isto incluiu uma discussão dos tipos de parâmetros que precisam ser controlados e uma indicação dos valores numéricos ou faixas esperadas para muitos materiais utilizados. A metrologia analítica que necessita ser aplicada para demonstrar a observância com as especificações foi discutida, com as implicações de desempenho do método para diferenciar variações na qualidade do produto e a simples variabilidade analítica. Esse trabalho foi escrito para laboratórios, com a finalidade de dar um suporte na implementação da validação de métodos analíticos e introduzir o conceito de incerteza da medida nas análises de rotina. O objetivo foi fornecer de uma maneira compreensível e prática a metodologia dos cálculos das medidas de incerteza baseados principalmente em dados de controle de qualidade e de validação já existentes. Exemplos práticos retirados diretamente do Laboratório de Metrologia e Validação, FIOCRUZ / Bio-Manguinhos, foram apresentados. Entretanto, o tratamento usado neste trabalho é genérico e pode ser aplicável a outros laboratórios químicos / Contrary to routine analysis, where the sample matrix and concentration range of the analyte are known, the analytical method has been validated the method is fit-to-purpose analysis in non-routine situation and in R&D research and development may be a tortuous problem to solve. Although many basic quality elements are the same as in routine analysis, unknown factors such as unpredictable behavior of the sample, unknown composition of the matrix and interdependence with the analyte, but (due to the unpredictability of the analytical procedure and extent of effort ) also additional organizational quality elements, even uncertainty about the choice of the instrumental method. The uncertainties in non-routine analysis and R&D require careful consideration of the problem, requiring available analytical techniques, planning and organization of work, supervision of the analytical progress and adequate aspects both technical and organizational or non-routine and R&D work and define responsibility and competences of the personnel. Assessment and assurance of quality within the field of pharmaceutical manufacture is established by the development of appropriate specifications for raw materials and products. The importance of suitable specifications was established and examples were given for the development of a typical specification for a pharmaceutical drug substance like as vaccine or raw material. This included discussion of the types of parameters which needed to be controlled and an indication of the numerical values or ranges expected for most materials. The analytical metrology which needs to be applied to demonstrate compliance with the specification were discussed, along with the implications of method performance necessary in order to distinguish between variations in product quality and simple analytical variability. This work is written for analytical laboratories, in order to give support to the implementation of the validation of analytical methods and the concept of measurement uncertainty for routine work. The aim is to provide a practical, understandable and common way of performing measurement uncertainty calculation, based mainly on preexisting quality control and validation data. Practical examples taken directly from the Laboratório de Validação de Métodos, FIOCRUZ / Bio-Manguinhos were presented and explained. However, the approach is very general and should be applicable to most testing laboratories in chemical field

Orientadores: Paulo Cesar Rodrigues Palma, Miriam Dambros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T11:35:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiel_RosanedoRocioCordeiro_D.pdf: 1514733 bytes, checksum: edd855efa491eefd2b54bddb5c81e6be (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A avaliação da qualidade de vida tem sido cada vez mais utilizada na área da saúde e tornou-se uma ferramenta de mensuração desde que foi considerada medida válida e reprodutível. Uma das formas mais empregadas de avaliação são os questionários. A grande maioria dos instrumentos foi formulada na língua inglesa mas, em virtude do crescente número de ensaios clínicos multicêntricos, surgiu a necessidade de desenvolver medidas para utilização em outros idiomas. Também não basta que o instrumento seja simplesmente traduzido, é necessário realizar, além da tradução e da adaptação transcultural, a avaliação de suas propriedades de medida. Tendência atual propõe a utilização de instrumentos validados em oposição ao desenvolvimento de novas escalas. O crescente interesse pelo estudo da sexualidade encontra como obstáculo, além da dificuldade de avaliar os diferentes aspectos da resposta sexual, grande diversidade de métodos, o que dificulta a generalização de informações e compromete as propostas de tratamento. O intuito desse trabalho foi realizar a validação de um questionário para avaliar a resposta sexual feminina de mulheres e desse processo resultou um artigo científico. A escolha do instrumento considerou a literatura científica até junho de 2006 e até essa data não havia registro de instrumento específico e validado na Língua Portuguesa para avaliar a resposta sexual na mulher. O ¿Female Sexual Function Index (FSFI)¿ foi escolhido porque é questionário breve e multidimensional que avalia a resposta sexual feminina, considerando seus domínios. O questionário original foi traduzido para Língua Portuguesa por dois tradutores brasileiros, retrovertido por dois tradutores nativos na língua inglesa. As diferenças foram harmonizadas por profissionais da saúde bilíngües e a versão originada foi pré-testada. A versão final em português (do Brasil) foi aplicada em 100 mulheres, juntamente com um questionário de avaliação da qualidade de vida SF-36. A mediana de idade foi de 21 anos (variou de 19 a 69 anos). Foram testadas propriedades psicométricas: confiabilidade [consistência interna (Alfa de Cronbach), re-teste (Coeficiente de Correlação Intraclasses)], validade de constructo (Coeficiente de Correlação de Pearson) e concorrente (Mann-Whitney e Kruskal-Wallis). Após quatro semanas da primeira entrevista, foi realizado o re-teste (FSFI). O Alfa de Cronbach geral foi 0,96 e a confiabilidade foi 1,00. Dados finais mostraram que a versão do FSFI em Português é válida para avaliação da resposta sexual em mulheres brasileiras e está indicado para uso em pesquisas clínicas / Abstract: The evaluation of the quality of life (QoL) has been increased in use in the Health area and has become a measurement tool since it was considered as a valuable and reproducible measure. One of the most used ways of evaluation is the questionnaire. The majority of the instruments were questioned in the English language but considering the multicentrics clinical essays, it emerged the need of developing measures of usage in other languages. It is not enough that the instrument would be simply translated, it is necessary to adequate the evaluation of the properties of the measurement, besides the translation and the transcultural adaptations implied. The actual trend proposes the usage of instruments validated in contrast of the development of new scales. The increased interest in the study of sexuality is seen as an obstacle, not mentioning the difficulty in evaluate the different aspects of the sexual response, big diversity of methods that come as a complexity of the generalization of information and endangers the proposals of the treatment. The aim of this work is to achieve the validation of a questionnaire to evaluate the female sexual response of women and, from this process it comes out a scientific article. The choice of the instrument considered the scientific literature until June 2006 and, until this present date, there was no register of a specified instrument and validated in Portuguese language to evaluate the sexual response in women. The ¿Female Sexual Function Index (FSFI)¿ was chosen because it is a brief and multidimensional questionnaire that evaluates the female sexual response, considering its domains. The original questionnaire was translated to Portuguese language by two Brazilian translators, retroverted by two English translators. Health bilingual professionals harmonized the differences and the original version was pre-tested. The final version in Portuguese (from Brazil) was applied in a hundred women, as well as the evaluation questionnaire of life quality SF-36. The age average was 21 years old (it varied from 19 to 69). It was also tested psychometrical properties: reliability [internal consistency (Alpha of Cronbach), re-test (Interclass Correlation Coefficient)], validation of constructo (Pearson Correlation Coefficient), and competence (Mann-Whitney and Kruskal-Wallis). After four weeks of the first interview, the re-test was re-applied (FSFI). The general Alpha of Cronbach was 0,96 and the reliability was 1,00. Final datas showed that the version of FSFI in Portuguese is valid for the evaluation of sexual response in Brazilian women and it is certainly indicated to the use in clinical researches / Doutorado / Pesquisa Experimental / Doutor em Cirurgia

Studies of the ancient history of infectious diseases have been facilitated greatly by development of a succession of novel analytical methods. In particular, laboratory analytical methods that are based on high-throughput ancient deoxyribonucleic acid sequencing have received considerable attention in this respect. Even so, significant environmental caveats remain. There are many means by which microbes move through soil, often fairly readily. Thus, the depositional component of the postmortem environment, especially with respect to unshielded animal or human remains, is a fertile arena for many microbes that can contaminate archaeological specimens well after deposition and decay of soft tissues. The huge number of pathogenic and nonpathologic genera and species clearly dictate renewed interest and research into the long-term biological activities of soil-covered remains. In a tuberculosis context, we focus on various depositional concerns and limitations, such as contamination prior to archaeological discovery (perhaps many years prior), various means of microorganism movement in soil, the influence of these factors on differential diagnosis, and real hazards for misinterpretation of investigational results.

Orientador: José Wilson Magalhães Bassani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Elétrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-26T12:41:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_JoaoCarlosMartinsde_M.pdf: 13918269 bytes, checksum: 78378428b79af0919ecab395a454bf98 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O estudo urodinâmico tem importante papel na determinação da necessidade de pacientes portadores de sintomas do trato urinário inferior (STUI) se submeterem à cirurgia da próstata. O estudo pressão-fluxo pode contribuir muito para a quantificação dos STUI, porém é invasivo, demorado e de custo elevado. Métodos alternativos têm sido desenvolvidos procurando minimizar o procedimento invasivo necessário para medição da pressão vesical. Um método alternativo foi desenvolvido no Centro de Engenharia Biomédica da UNICAMP e consiste num dispositivo denominado conector uretral (Pat. N. PI 0502171-5). Trata-se de um dispositivo cilíndrico e vazado, que permite o escoamento de urina por seu interior. O paciente é orientado a introduzir o conector na uretra antes de iniciar a micção e, ao urinar, solicitado a ocluir a saída do dispositivo, interrompendo o fluxo urinário por um curto intervalo e permitindo o registro da pressão dentro da bexiga urinária. Neste trabalho, uma instrumentação e uma nova versão do conector uretral foram desenvolvidas para medir a pressão vesical em homens. Aplicado em testes clínicos em indivíduos com sintomas de obstrução infravesical decorrente de hiperplasia benigna da próstata, o conjunto demonstrou capacidade de diferenciar indivíduos com obstrução de indivíduos não obstruídos sem diferença significativa do que se obtém no estudo pressão-fluxo (p > 0,05). O conector apresentou sensibilidade e especificidade de 66,7%, valores similares aos dos métodos alternativos descritos na literatura. Além disso, 88,5% dos indivíduos relataram preferir o conector uretral ao estudo pressão-fluxo, indicando a importância do conector como método alternativo minimamente invasivo ao estudo urodinâmico convencional / Abstract: Urodynamic assessment has an important role in the decision of patients complaining of lower urinary tract symptoms (LUTS) to undergo prostate surgery. Pressure-flow study may contribute to the evaluation of LUTS, but its procedure is invasive, time-consuming and expensive. Alternative methods have been developed aiming at measuring vesical pressure in a less invasive manner. An alternative method was developed in the Center for Biomedical Engineering at UNICAMP and consists of a device named urethral connector (Pat. N. PI 0502171-5). The device has a cylindrical shape and an internal longitudinal hole that permits urine to pass through it. The patient is instructed to insert the urethral connector into his urethra before starting to urinate. During micturition, he is instructed to occlude the urine outlet of the device for a short period of time so that vesical pressure may be measured. In this work, an instrumentation and a new version of the urethral connector were developed to measure vesical pressure in men. The device and instrumentation were applied in clinical tests in individuals reporting LUTS secondary to infravesical obstruction due to benign prostatic hyperplasia. It was shown that this new method is capable of differentiating obstructed individuals from nonobstructed ones. Results were not significantly different from those obtained when conventional pressure-flow study was applied (p > 0.05). The urethral connector had a sensibility and specificity of 66.7%, values similar to those found by the alternative methods described in the literature. About 88.5% of the individuals evaluated reported to prefer the new method instead of the conventional assessment which reinforces the importance of the urethral connector as a less invasive and alternative method to the conventional urodynamic study / Mestrado / Engenharia Biomedica / Mestre em Engenharia Elétrica

A esquistossomose ou bilharziose, é uma doença produzida por trematódeos do gênero Schistosoma. Dentre as 19 espécies reconhecidas, cinco infectam primariamente o homem: S. mansoni, S. haematobium, S. intercalatum, S. japonicum e S. Mekongi.O número de pessoas com infecção esquistossomótica, em todo o mundo, foi estimado em 200 milhões sendo sua maioria na Ásia e África. Na América do Sul e Caribe encontram-se vários milhões de casos sendo uma estimativa de mais de seis milhões de casos no Brasil. Os fármacos utilizados para o tratamento desta enfermidade são o praziquantel e o oxamniquina, sendo este último o princípio ativo do produto Mansil® cápsulas produzido pela indústria farmacêutica Pfizer. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver e validar métodos analíticos por eletroforese capilar (CE) e por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), rápidos, seletivos e confiáveis para a determinação de oxamniquina em formulações farmacêuticas e de sua impureza (uk-3883), quando houver. A separação cromatográfica foi realizada usando a coluna Thermo® Nucleosil C18 (150 mm x 4,6 mm x 5 &#181;m), com fase móvel constituída por água acidificada com 0,1% ácido ortofosfórico:metanol (40:60 v/v), trabalhando com vazão de 1,0 mL min-1 e volume de injeção de 2 &#181;L. A temperatura da coluna foi controlada em 20 ºC e a detecção foi realizada na região do UV em 254 nm. O tempo de retenção da oxamniquina foi de 1,9 min e da uk-3883 5,1 min. O método por eletroforese capilar de zona (CZE) foi desenvolvido utilizando capilar de sílica fundida de 20 cm (comprimento efetivo) x 50 &#181;m d.i. e eletrólito constituído da solução tampão fosfato de sódio monobásico 30 mmol L-1, pH 2,5 ajustado com ácido orto-fosfórico 10%: metanol 18% v/v. Injeção hidrodinâmica 0,5 psi/3 s; voltagem aplicada de +25 kV, temperatura de 20 ºC e detecção no UV de 254 nm. Os métodos analíticos foram validados de acordo com os requerimentos vigentes da ANVISA, ICH e Farmacopéia Americana. Portanto, os métodos propostos demonstraram linearidade (R2>0,99), precisão (%DPR < 2%), exatidão (>98%, expressado em porcentagem de recuperação) e adequabilidade para a quantificação da oxamniquina em formas farmacêuticas comerciais. / Schistosomiasis or bilharzia, is a disease caused by trematodes of the gender Schistosoma. Among the 19 recognized species, five primarily infect humans: S. mansoni, S. haematobium, S. intercalatum, S. japonicum and S. mekongi. The number of people with schistosomiasis infection worldwide was estimated at 200 million being mostly living in Asia and Africa. In South America and the Caribbean are several million of cases and in Brazil it is stimated of more than six million of cases. The drugs used for the treatment of this disease is praziquantel and oxamniquine, the latter being the active principle of the Mansil® capsules produced by Pfizer pharmaceutical industry. This study aimed to develop and validate fast, selective and reliable analytical methods through capillary electrophoresis (CE) and high-performance liquid chromatography (HPLC), for the determination of oxamniquine in pharmaceutical formulations and its impurity (UK-3883) if any. The chromatographic separation was performed using a Thermo® Nucleosil C18 column (150 mm x 4.6 mm x 5 &#181;m) the mobile phase was composed of water with 0.1% orthophosphoric acid: methanol (40:60 v/v); the flow rate was 1.0 ml min-1. The column temperature was controlled at 20 ° C and the detection was performed with UV detector at 254 nm. The retention time for oxamniquine and its impurity (uk-3883) were 1.9 and 5.1 minutes, respectively. The capillary zone electrophoresis method was developed using an uncoated fused-silica capillary of 20 cm effective length x 50 &#181;m i.d. the electrolyte was composed of 30 mmol L-1 sodium phosphate monobasic buffer solution, pH 2.5 adjusted with ortho-phosphoric acid 10%: 18% methanol v(/v). Samples were injected hydrodynamically at 0.3 psi for 3 s, the detection was made by UV absorption at 254 nm, the capillary temperature was 20ºC and the applied voltage was +25 kV. Analytical methods were validated in accordance with the ANVISA, ICH and United States Pharmacopoeia guidelines. Therefore, the porposed methods showed linearity (R2>0,99), precision (%RSD <2%), accuracy (>98%, expressed as recovery percentage) and suitability for the quantification of oxamniquine in commercial dosage forms.

A esquistossomose ou bilharziose, é uma doença produzida por trematódeos do gênero Schistosoma. Dentre as 19 espécies reconhecidas, cinco infectam primariamente o homem: S. mansoni, S. haematobium, S. intercalatum, S. japonicum e S. Mekongi.O número de pessoas com infecção esquistossomótica, em todo o mundo, foi estimado em 200 milhões sendo sua maioria na Ásia e África. Na América do Sul e Caribe encontram-se vários milhões de casos sendo uma estimativa de mais de seis milhões de casos no Brasil. Os fármacos utilizados para o tratamento desta enfermidade são o praziquantel e o oxamniquina, sendo este último o princípio ativo do produto Mansil® cápsulas produzido pela indústria farmacêutica Pfizer. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver e validar métodos analíticos por eletroforese capilar (CE) e por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), rápidos, seletivos e confiáveis para a determinação de oxamniquina em formulações farmacêuticas e de sua impureza (uk-3883), quando houver. A separação cromatográfica foi realizada usando a coluna Thermo® Nucleosil C18 (150 mm x 4,6 mm x 5 &#181;m), com fase móvel constituída por água acidificada com 0,1% ácido ortofosfórico:metanol (40:60 v/v), trabalhando com vazão de 1,0 mL min-1 e volume de injeção de 2 &#181;L. A temperatura da coluna foi controlada em 20 ºC e a detecção foi realizada na região do UV em 254 nm. O tempo de retenção da oxamniquina foi de 1,9 min e da uk-3883 5,1 min. O método por eletroforese capilar de zona (CZE) foi desenvolvido utilizando capilar de sílica fundida de 20 cm (comprimento efetivo) x 50 &#181;m d.i. e eletrólito constituído da solução tampão fosfato de sódio monobásico 30 mmol L-1, pH 2,5 ajustado com ácido orto-fosfórico 10%: metanol 18% v/v. Injeção hidrodinâmica 0,5 psi/3 s; voltagem aplicada de +25 kV, temperatura de 20 ºC e detecção no UV de 254 nm. Os métodos analíticos foram validados de acordo com os requerimentos vigentes da ANVISA, ICH e Farmacopéia Americana. Portanto, os métodos propostos demonstraram linearidade (R2>0,99), precisão (%DPR < 2%), exatidão (>98%, expressado em porcentagem de recuperação) e adequabilidade para a quantificação da oxamniquina em formas farmacêuticas comerciais. / Schistosomiasis or bilharzia, is a disease caused by trematodes of the gender Schistosoma. Among the 19 recognized species, five primarily infect humans: S. mansoni, S. haematobium, S. intercalatum, S. japonicum and S. mekongi. The number of people with schistosomiasis infection worldwide was estimated at 200 million being mostly living in Asia and Africa. In South America and the Caribbean are several million of cases and in Brazil it is stimated of more than six million of cases. The drugs used for the treatment of this disease is praziquantel and oxamniquine, the latter being the active principle of the Mansil® capsules produced by Pfizer pharmaceutical industry. This study aimed to develop and validate fast, selective and reliable analytical methods through capillary electrophoresis (CE) and high-performance liquid chromatography (HPLC), for the determination of oxamniquine in pharmaceutical formulations and its impurity (UK-3883) if any. The chromatographic separation was performed using a Thermo® Nucleosil C18 column (150 mm x 4.6 mm x 5 &#181;m) the mobile phase was composed of water with 0.1% orthophosphoric acid: methanol (40:60 v/v); the flow rate was 1.0 ml min-1. The column temperature was controlled at 20 ° C and the detection was performed with UV detector at 254 nm. The retention time for oxamniquine and its impurity (uk-3883) were 1.9 and 5.1 minutes, respectively. The capillary zone electrophoresis method was developed using an uncoated fused-silica capillary of 20 cm effective length x 50 &#181;m i.d. the electrolyte was composed of 30 mmol L-1 sodium phosphate monobasic buffer solution, pH 2.5 adjusted with ortho-phosphoric acid 10%: 18% methanol v(/v). Samples were injected hydrodynamically at 0.3 psi for 3 s, the detection was made by UV absorption at 254 nm, the capillary temperature was 20ºC and the applied voltage was +25 kV. Analytical methods were validated in accordance with the ANVISA, ICH and United States Pharmacopoeia guidelines. Therefore, the porposed methods showed linearity (R2>0,99), precision (%RSD <2%), accuracy (>98%, expressed as recovery percentage) and suitability for the quantification of oxamniquine in commercial dosage forms.

Resumo: O terpinen-4-ol é o principal componente da M. alternifólia, apresenta atividade antiinflamatória, antibacteriana e antifúngica; em estudos recentes in vitro a atividade antineoplásica para linhagens celulares de melanoma (M14) foi demonstrada. O objetivo específico deste trabalho foi verificar a atividade farmacológica in vitro dos isômeros óticos (-) terpinen-4-ol e (+) terpinen-4-ol e do óleo de Melaleuca alternifolia em nove linhagens diferentes de células tumorais, incluindo a célula UACC-62 do melanoma que ainda não havia sido estudada, e a concentração eficaz para o desenvolvimento de formulação que possa ter ação contra o melanoma. Após realização dos ensaios farmacológicos in vitro verificou-se que o (-)terpinen-4-ol apresentou melhor atividade nas linhagens celulares de melanoma, sendo o princípio ativo de escolha para as duas formulações que foram desenvolvidas, testadas e comprovadas a qualidade e estabilidade. Para caracterização das formulações foram efetuados os ensaios reológicos, sendo comprovado que as emulsões desenvolvidas são adequadas para o uso tópico no que diz respeito às suas características reológicas, sendo que as duas apresentaram comportamento de fluxo semelhante, diferindo apenas na área de histerese. Posteriormente foram feitos testes de permeação e retenção cutânea in vitro, para verificar qual formulação permite que o princípio ativo atinja em maior concentração a camada de interesse para atividade contra o melanoma. O método proposto para quantificação do (-)-terpinen-4-ol foi validado e utilizado nos ensaios de estabilidade acelerada, liberação, permeação e retenção cutânea in vitro. Os ensaios de liberação demonstraram que as duas formulações apresentam cinética de zero ordem, com fluxo de 14,62 µg/cm2 /h para formulação 1 e de 6,70 µg/cm2 /h para formulação F2. Na retenção cutânea ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The terpinen-4-ol is the major component of M. alternifolia, has anti-inflammatory, antibacterial and antifungal, in recent studies in vitro anticancer activity for melanoma cell lines (M14) was demonstrated. The specific objective of this study was to assess the in vitro pharmacological activity of optical isomers (-) terpinen-4-ol and (+) terpinen-4-ol and oil of Melaleuca alternifolia in nine different tumor cell lines, including cell UACC -62 melanoma that had not yet been studied, and effective concentration for the formulation development that may have action against melanoma. After performing the in vitro pharmacological tests showed that the (-) terpinen-4-ol showed better activity in melanoma cell lines, with the active ingredient of choice for the two formulations were developed, tested and proven quality and stability. For characterization of the formulations were made the rheological tests and confirmed that the developed emulsions are suitable for topical use in relation to their rheological characteristics, and the two had similar flow behavior, differing only in the area of hysteresis. Subsequent tests were performed permeation and skin retention in vitro, to determine which formulation allows the active ingredient reaches higher concentration in the layer of interest for activity against melanoma. The proposed method for quantification of (-)-terpinen-4-ol was validated and used in accelerated stability testing, release, skin permeation and retention in vitro. The release assays demonstrated that both formulations have zero order kinetics at a rate of 14.62 g/cm2/h for formulation 1 and 6.70 g/cm2/h for formulation F2. In vitro skin retention was found that the F1 showed retention of terpinen-4-ol smaller in the stratum corneum, compared to F2. Conversely, the retention in the epidermis over the dermis of terpinen-4-ol was higher in F1. It was found that formulation F1 ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Virgínia Scarpa / Coorientador: Marcos Antonio Corrêa / Banca: Leila Aparecida Chiavacci / Banca: Renata Fonseca Vianna Lopez / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-08Bitstream added on 2014-06-13T18:57:11Z : No. of bitstreams: 1 maccari_flr_me_arafcf.pdf: 1400540 bytes, checksum: 7bc406a11537837c7f75cdf60b68c782 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O terpinen-4-ol é o principal componente da M. alternifólia, apresenta atividade antiinflamatória, antibacteriana e antifúngica; em estudos recentes in vitro a atividade antineoplásica para linhagens celulares de melanoma (M14) foi demonstrada. O objetivo específico deste trabalho foi verificar a atividade farmacológica in vitro dos isômeros óticos (-) terpinen-4-ol e (+) terpinen-4-ol e do óleo de Melaleuca alternifolia em nove linhagens diferentes de células tumorais, incluindo a célula UACC-62 do melanoma que ainda não havia sido estudada, e a concentração eficaz para o desenvolvimento de formulação que possa ter ação contra o melanoma. Após realização dos ensaios farmacológicos in vitro verificou-se que o (-)terpinen-4-ol apresentou melhor atividade nas linhagens celulares de melanoma, sendo o princípio ativo de escolha para as duas formulações que foram desenvolvidas, testadas e comprovadas a qualidade e estabilidade. Para caracterização das formulações foram efetuados os ensaios reológicos, sendo comprovado que as emulsões desenvolvidas são adequadas para o uso tópico no que diz respeito às suas características reológicas, sendo que as duas apresentaram comportamento de fluxo semelhante, diferindo apenas na área de histerese. Posteriormente foram feitos testes de permeação e retenção cutânea in vitro, para verificar qual formulação permite que o princípio ativo atinja em maior concentração a camada de interesse para atividade contra o melanoma. O método proposto para quantificação do (-)-terpinen-4-ol foi validado e utilizado nos ensaios de estabilidade acelerada, liberação, permeação e retenção cutânea in vitro. Os ensaios de liberação demonstraram que as duas formulações apresentam cinética de zero ordem, com fluxo de 14,62 µg/cm2 /h para formulação 1 e de 6,70 µg/cm2 /h para formulação F2. Na retenção cutânea... / The terpinen-4-ol is the major component of M. alternifolia, has anti-inflammatory, antibacterial and antifungal, in recent studies in vitro anticancer activity for melanoma cell lines (M14) was demonstrated. The specific objective of this study was to assess the in vitro pharmacological activity of optical isomers (-) terpinen-4-ol and (+) terpinen-4-ol and oil of Melaleuca alternifolia in nine different tumor cell lines, including cell UACC -62 melanoma that had not yet been studied, and effective concentration for the formulation development that may have action against melanoma. After performing the in vitro pharmacological tests showed that the (-) terpinen-4-ol showed better activity in melanoma cell lines, with the active ingredient of choice for the two formulations were developed, tested and proven quality and stability. For characterization of the formulations were made the rheological tests and confirmed that the developed emulsions are suitable for topical use in relation to their rheological characteristics, and the two had similar flow behavior, differing only in the area of hysteresis. Subsequent tests were performed permeation and skin retention in vitro, to determine which formulation allows the active ingredient reaches higher concentration in the layer of interest for activity against melanoma. The proposed method for quantification of (-)-terpinen-4-ol was validated and used in accelerated stability testing, release, skin permeation and retention in vitro. The release assays demonstrated that both formulations have zero order kinetics at a rate of 14.62 g/cm2/h for formulation 1 and 6.70 g/cm2/h for formulation F2. In vitro skin retention was found that the F1 showed retention of terpinen-4-ol smaller in the stratum corneum, compared to F2. Conversely, the retention in the epidermis over the dermis of terpinen-4-ol was higher in F1. It was found that formulation F1 ... (Complete abstract click electronic access below)

Plectranthus grandis (Cramer) Willense, à uma planta medicinal conhecida popularmente no Cearà como boldo-grande, utilizada pela populaÃÃo em substituiÃÃo a P. barbatus (boldo), que apresenta atividade gastroprotetora jà comprovada para a planta e para alguns diterpenos isolados, validando cientificamente desta forma seu uso popular. Este trabalho descreve os procedimentos analÃticos utilizados e resultados obtidos, visando contribuir para a padronizaÃÃo quÃmica de quatro espÃcies de Plectranthus. Os diterpenos barbatusina e 3&#946;-hidroxi-3-desoxibarbatusina foram isolados atravÃs de tÃcnicas cromatogrÃficas, sendo possÃvel desenvolver um mÃtodo de extraÃÃo seletiva para a barbatusina, o que possibilitou obter quantidade significativa desta substÃncia. Foram realizadas reaÃÃes de derivatizaÃÃo, obtendo-se a 3-hidroxi-3-desoxibarbatusina, que possui atividade gastroprotetora, in vivo, jà reportada na literatura, e a oxima da barbatusina, inÃdita na literatura, com atividade citotÃxica mais potente do que sua precursora. As elucidaÃÃes estruturais foram realizadas atravÃs de espectroscopia na regiÃo do infravermelho, RMN 1H e RMN 13C, em comparaÃÃo com dados da literatura. Utilizando CLAE-DAD desenvolveu-se mÃtodos para a quantificaÃÃo de barbatusina e 3&#946;-hidroxi-3-desoxibarbatusina, em que foram encontrados parÃmetros adequados de linearidade (r2 > 0,99), para as duas substÃncias analisadas. O mÃtodo foi validado e apresentou linearidade (r2 = 0,9931 para a barbatusina e r2 = 0,9966 para a 3&#946;-hidroxi-3-desoxibarbatusina), seletividade, precisÃo intra-dia (DPR < 2,8% para a barbatusina e DPR < 3,5% para a 3&#946;-hidroxi-3-desoxibarbatusina), exatidÃo (recuperaÃÃo entre 81,7% e 115,1%). Os mÃtodos entÃo desenvolvidos foram aplicados aos extratos das folhas de P grandis, P. barbatus, P. amboinicus, P. ornatus. O potencial larvicida e citotÃxico das quatro espÃcies de Plectranthus foram avaliados, bem como dos compostos puros, apresentando promissora atividade citotÃxica para trÃs linhagens de cÃlulas tumorais. / Plectranthus grandis (Cramer) Willense is a medicinal plant popularly known in Cearà as boldo-grande, used by population in substitution of P. barbatus (boldo), it shows gastroprotective activity already proven for herb and for some isolated diterpenes, scientifically validating this way its popular use. This work describes the analytical procedures used and obtained results, aiming to contribute to chemical standardization of four Plectranthus species. Barbatusin and 3&#946;-hydroxy-3-deoxobarbatusin diterpenes were isolated by chromatographic techniques, being possible to develop selective extration method of barbatusin, which enabled to obtain significant amount of this substance. Derivatization reactions were performed, getting 3-hydroxy-3-deoxobarbatusin, having gastroprotective activity, in vivo, already reported in the literature, and oxyimine product of barbatusin, unpublished in the literature, with cytotoxic activity more potent than its precursor. Estrutural elucidation were performed by infra-red spectroscopy, NMR 1H and NMR 13C, compared with literature data. Using HPLC-DAD, methods were developed for quantification of barbatusin and 3&#946;-hydroxy-3-deoxobarbatusin, in wich suitable parameters have been found of linearty (r2 > 0,99), for both analytes. The method was validated and presented linearty (r2 = 0,9931 for barbatusin and r2 = 0,9966 for 3&#946;-hydroxy-3-deoxobarbatusin), selectivity, within-day precision (RSD < 2,8% for barbatusin and RSD < 3,5% for 3&#946;-hydroxy-3-deoxobarbatusin), accuracy (recovery between 81,7% a 115,1%). The methods so developed have been applied to the leaves extracts of P. grandis, P. barbatus, P. amboinicus and P. ornatus. The larvicidal and cytotoxic potential of the four Plectranthus species were evaluated, as well as the purà compounds, showing promising cytotoxic activty for three strains of tumor cells.