Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Botânica, 2008. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-09-30T12:02:09Z No. of bitstreams: 1 2008_ZanderluceGomesLuis.pdf: 3475618 bytes, checksum: a8fa428a1896161456141e72a7552fdc (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-09T00:18:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_ZanderluceGomesLuis.pdf: 3475618 bytes, checksum: a8fa428a1896161456141e72a7552fdc (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-09T00:18:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_ZanderluceGomesLuis.pdf: 3475618 bytes, checksum: a8fa428a1896161456141e72a7552fdc (MD5) Previous issue date: 2008-04 / O murici (B. basiloba) é um arbusto do Cerrado, cujos frutos são bastante apreciados, sendo consumidos in natura ou processados artesanalmente. Esta planta apresenta dificuldades de propagação sexuada. O objetivo do presente trabalho foi otimizar um protocolo de micropropagação para esta espécie, através de gemas apicais e adventícias obtidas de plântulas germinadas in vitro. Sementes de B. basiloba foram esterilizadas e germinadas em água e ágar. Gemas apicais e axilares adjacentes foram utilizadas na multiplicação em cinco subculturas. Para multiplicação foi utilizado meio MS e ½ MS, suplementado com BAP (6-benzilaminopurina) ou combinado com AIB (ácido indol-3- butírico) e cinetina, acrescido de 20 g.L-1 de sacarose, 0,1 g.L-1 de inositol e 7 g.L-1 de ágar. Testou-se também a influência de carvão ativado. Não houve diferença entre o meio MS pleno e o diluído. A combinação BAP, AIB e CIN produziu maior quantidades de brotos, nas concentrações 0,5, 1,0 e 0,2 mg.L-1 respectivamente. Para aumentar a eficiência na produção de brotos utilizando carvão ativado adicionado ao meio, é necessário aumentar as concentrações hormonais, caso contrário o meio promove apenas o alongamento dos brotos. O uso do carvão ativado foi essencial antes da etapa de enraizamento. Utilizou-se a mistura de talco neutro e AIB na base dos brotos, para o enraizamento ex vitro, que resultou em 47% dos brotos enraizados e aclimatados. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The murici (B. basiloba) is a shrubby plant of the Cerrado biome, and its fruits are consumed fresh or as homemade sweeties. This species is difficult to be propagated by sexual reproduction. Therefore, the purpose of this work is to optimize a micropropagation protocol for this plant species using as explants the apical and adventitious buds taken from in vitro germinated seeds. Seeds of B. basiloba were sterilized and germinated in agar water medium. The apical and the adjacent buds were micropropagated in five subsequent multiplication subcultures. The multiplication medium was either MS or ½ MS, supplemented with 6- benzylaminopurine (BAP) alone or in combination with indole- -butyric acid (IBA) or kinetin (KIN) plus 20 g.L-1 of sucrose, 0.1 g.L-1 myo-inositol, 7.0 g.L-1 of agar. Furthermore, the influence of activated charcoal was tested during explant multiplication and elongation. There were no significant differences between the two media tested (MS and ½ MS) in the explant multiplication rate. The combination of 0.5 mg.L-1 BAP, 1.0 mg.L-1 IBA, and 0.2 mg.L-1 KIN was the most effective in inducing sprouting. The activated charcoal was essential to elongate the explants before rooting. Nonetheless, to keep a high rate of multiplication after the addition of activated charcoal in the medium it was necessary to increase the concentration of the hormones. Rooting was induced ex vitro with a mixture of talcum powder and IBA at the basal region of the sprout, and 47% of the explants were rooted and acclimatized.

O gênero Byrsonima é caracterizado pela alta plasticidade fenotípica e composição florística na América do Sul. B. verbascifolia e B. intermedia, popularmente conhecidas como Murici-cascudo e Murici-pequeno, respectivamente, são espécies conhecidas pela presença rica de taninos, saponinas, catequinas, flavonoides, triterpenos e glicolipídios, que são metabólitos secundários importantes para o desenvolvimento e sobrevivência das plantas e agindo como compostos alelopáticos. A alelopatia é conhecida como interação bioquímica entre vegetais no meio ambiente causando interação planta/planta por meio da competição podendo ser testada por meio de bioensaios utilizando diversos parâmetros. Lactuca sativa L. é uma espécie amplamente utilizada como bioteste, por apresentar grande sensibilidade mesmo quando exposta a baixas concentrações de amostras ambientais e tóxicas. Esta dissertação é apresentada em forma de capítulos de maneira que, o capítulo 1 apresenta uma breve revisão sobre a caracterização botânica de Byrsonima spp., metabólitos secundários de Byrsonima spp., alelopatia e quimioecologia, bioensaios com Lactuca sativa L. para estudos de fitotoxicidade e formas de extração. O capítulo 2 apresenta-se em forma de artigo I e artigo II. No artigo I objetivou-se estudar as propriedades fitotóxicas e citogenotóxicas das folhas e frutos de B. verbascifolia e B. intermedia em L. sativa L. utilizando o método sanduiche. Verificou-se que frutos de B. intermedia são responsáveis pela maior inibição da germinação de alface em relação às folhas dessa espécie. O alongamento de raiz de alface exposta aos órgãos de B. verbascifolia demonstrou efeitos estimulatórios e os órgãos de B. intermedia apresentaram efeitos inibitórios no crescimento das raízes. O índice mitótico evidenciou efeito alelopático de Byrsonima spp. pela redução da divisão celular no meristema radicular de alface, sendo o estímulo no alongamento de raízes provocado por B. verbascifolia compreendido como consequência de expansão celular e não de atividade mitótica. Foi observado efeito aneugênico das espécies de Byrsonima spp. sendo a maior frequência de C-metáfase e stickness em frutos de B. verbascifolia e folhas de B. intermedia. O artigo II apresenta um trabalho cujo objetivo foi averiguar a fitotoxicidade de diferentes extratos foliares de B. verbascifolia e B. intermedia em bioensaio com Lactuca sativa L. Os resultados evidenciaram que os extratos de folhas de B. verbascifolia e B. intermedia, sobretudo o extrato etanólico, possuem potencial fitotóxico e citotóxico. Esses efeitos diferem em função da forma de extração (aquoso frio, quente e etanólico), provavelmente devido à composição dos metabólitos secundários. / The Byrsonima genus is characterized by high phenotypic plasticity and composition in South America. B. verbascifolia and B. intermedia, popularly known as Murici-cascudo and Murici-pequeno, respectively, are known species by the rich presence of tannins, saponins, catechins, flavonoids, triterpenes and glycolipids, secondary metabolites that are important for the development and survival of plants, and act as allelopathic compounds. Allelopathy is known as plant biochemical interaction between the environment causing interaction plant/plant through competition can be tested by bioassay using various parameters. Lactuca sativa L. is a species widely used as a bioassay for presenting high sensitivity even when exposed to low concentrations of toxic and environmental samples. This work is presented in the form of chapters so that, Chapter 1 provides a brief review of the botanical characterization Byrsonima spp., secondary metabolites of Byrsonima spp., allelopathy and quimioecology, bioassays with Lactuca sativa L. for phytotoxicity studies and forms of extraction. Chapter 2 presents in the form of paper I and paper II. Paper I aimed to study the phytotoxic properties and cytogenotoxic of leaves and fruits of B. verbascifolia and B. intermedia in L. sativa L. using the sandwich method. It was found that fruits of B. intermedia are responsible for the inhibition of germination of lettuce leaves with regard to this species. The lettuce root elongation organs exposed to B. verbascifolia showed stimulatory effects and organs of B. intermedia showed inhibitory effects on the growth of roots. The mitotic index showed allelopathic effect of Byrsonima spp. the reduction of cell division in root meristem of lettuce, and stimulating the roots stretching caused by B. verbascifolia understood as a consequence of cell expansion and not of mitotic activity. It was observed effect aneugenic of Byrsonima spp. being the highest frequency of C-metaphase and stickness in fruits of B. verbascifolia and leaves of B. intermedia. Paper II presents a work whose purpose was to determine the phytotoxicity of different plant extracts of B. verbascifolia and B. intermedia in bioassay Lactuca sativa L. The results showed that the extracts of leaves of B. verbascifolia and B. intermedia, especially ethanol extract, have phytotoxic and cytotoxic potential. These effects are different depending on the extraction form (aqueous cold, hot and ethanol), probably due to the composition of secondary metabolites. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

LOURENÇO, I. P. Potencial de utilização de frutos de genótipos de muricizeiros cultivados no litoral do Ceará. 2008. 98 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2008. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-07-09T21:33:39Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_iplourenco.pdf: 2965566 bytes, checksum: 14100f4f5814e1a3a958ccabab647e03 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-07-16T20:22:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_iplourenco.pdf: 2965566 bytes, checksum: 14100f4f5814e1a3a958ccabab647e03 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-16T20:22:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_iplourenco.pdf: 2965566 bytes, checksum: 14100f4f5814e1a3a958ccabab647e03 (MD5) Previous issue date: 2008 / The objective of this work was to evaluate fruits of nance (Byrsonima dealbata), from different genotypes, by means of the physical and physical-chemical characterization. Fruits of nance were collected of from genotypes of the three experimental station of EMBRAPA - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, in Ceará, Brazil. Eighteen genotypes of nance, of which seven had been deriving of the Pacajus city (PAC0, PAC1, PAC2, PAC3, PAC5, PAC6, PAC7), four of the Fortaleza city (EM1, EM3, EM4, EM5) and seven of the Paraipaba city (PAR3, PAR4, PAR5, PAR7, PAR 9, PAR 11 and PAR 12), all in the State of the Ceará. To evaluate the commercial potential of the genotypes joined and multivaried statistical analyses had been carried through. The genotype EM4 presented the greatest weight. For all the studied genotypes of nance, except EM3, were observed that the diameter is greater than the length, characterizing oblong fruits. The general average for vitamin C was of 61.58 mg/100 g. In general, the fruit is acid, with high levels of total soluble sugars, starch, total and soluble pectin and low levels of carotenoids and yellow flavonoids. The physical chemical characteristics analyzed presented high coefficients of determination and medium to high coefficients of repeatability therefore, needing a low number of measurements for prediction of the real value of the characteristics. The high values of the estimates of repeatability indicates that there is a genetic variability in this germplasm. The group analysis made by means of the Tocher Optimization, the analysis of main components and the dissimilarity of the genotypes, could be used to guide the election of promising genotypes on programs of genetic improvement. / Este trabalho teve por objetivos avaliar frutos de muricizeiros (Byrsonima dealbata), oriundos de diferentes genótipos, por meio da caracterização física e físico-química. Os frutos utilizados no experimento foram provenientes de campos experimentais da Embrapa Agroindústria Tropical. Analisou-se 18 genótipos de muricizeiros, dos quais sete foram oriundos do município de Pacajus (PAC0, PAC1, PAC2, PAC3, PAC5, PAC6, PAC7), quatro do município de Fortaleza (EM1, EM3, EM4, EM5) e sete do município de Paraipaba (PAR3, PAR4, PAR5, PAR7, PAR 9, PAR 11 e PAR 12), todos no Estado do Ceará. Para avaliação do potencial comercial dos genótipos foram realizadas análises estatísticas uni e multivariadas. O genótipo EM4 apresentou maior peso. Para todos os genótipos de muricizeiros estudados, exceto EM3, observou-se que o diâmetro é maior que o comprimento, caracterizando frutos oblongos. A média geral para vitamina C foi de 61,58 mg/100 g. De modo geral, o fruto é ácido, contém elevado teor de açúcares solúveis totais, amido, pectina total e solúvel e baixo teor de carotenóides e flavonóides amarelos. As características físico-químicas analisadas apresentaram altos coeficientes de determinação e coeficientes de repetibilidade de intermediários a altos, tendo, portanto, baixo número de medições necessário para predição do valor real da característica. Os elevados valores das estimativas de repetibilidade são indicativos de que existe variabilidade genética observada nesse germoplasma. A análise de agrupamento, feita por meio da otimização de Tocher, a análise de componentes principais e a dissimilaridade dos genótipos, poderão ser utilizados para orientar a seleção de genótipos promissores para possíveis programas de melhoramento genético.

Orientador: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Mirim Sannomiya / Banca: Denise Crispim Tavares / Resumo: O cerrado brasileiro contém inúmeras plantas utilizadas no tratamento popular de várias enfermidades onde destacamos as espécies do gênero Byrsonima. Os relatos de seu uso são diversos: tratamento de infecções fúngicas e bacterianas, feridas crônicas, doença de Chagas, contra tuberculose, como diurética, antiemética e etc. Na literatura, há comprovação para atividades: antioxidante, antiprotozoário, depressor no Sistema Nervoso Central (SNC), antihiperglicêmicas e antihiperlipêmica. O perfil fitoquímico demonstra taninos, flavonóides, triterpenos, ésteres aromáticos, entre outros, o que indica o potencial farmacológico deste gênero. Sabe-se que o uso não padronizado de plantas pode ser danoso aos usuários, devido a propriedades desconhecidas ou por conterem contaminantes ambientais. Embora haja diversos estudos abordando o potencial biológico das plantas deste gênero, amplamente utilizadas na medicina popular, ainda há poucos estudos sobre sua segurança Por esta razão, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades mutagênica, antimutagência e estrogênica de extratos etanólicos padronizados (70%) de folhas de quatro espécies: Byrsonima verbascifolia, Byrsonima coccolobifolia, Byrsonima correifolia e Byrsonima ligustrifolia. A atividade mutagênica foi realizada pelo Teste de Ames, utilizando o ensaio de pré-incubação, na ausência e presença de ativação metabólica (S9). As linhagens utilizadas foram TA98, TA97a, TA100 e TA102 e foram testadas cinco concentrações de cada amostra. A atividade antimutagênica foi testada apenas para as amostras negativas para o teste de Ames (B. verbascifolia e B. correifolia), com a diferença que sempre foi associada a um agente mutagênico conhecido. A atividade estrogênica foi avaliada por dois testes: -Recombinant Yeast Assay (RYA) que utiliza a levedura Saccharomyces cerevisiae (linhagem BY4741) modificada geneticamente, contendo um gene para receptor e... / Abstract: The Brazilian cerrado contain several native plants used in folk medicine for treating many diseases. Plants of the genus Byrsonima are one of them. There are several reports of its use: the treatment of fungal and bacterial infections, chronic wounds, Chagas disease, tuberculosis, as a diuretic and antiemetic. In literature there is evidence for activities: antioxidant, antiprotozoal, depressing CNS, antihiperglicemic and antihiperlipemic. The phytochemical profile shows tannins, flavonoids, triterpenes, aromatic esters and others, which indicates the pharmacological potential of this genus. It is known that the use of non-standard plant can be harmful to users due to unknown properties or for containing environmental contaminants. Although there are several studies about the biological potential of plants of this genus, widely used in folk medicine, there are few studies about their safety. For this reason, the aim of this study was to investigate the mutagenic, antimutagenic and estrogenic activities of standardized ethanolic extracts (70%) of leaves of four species: Byrsonima verbascifolia, Byrsonima correifolia, Byrsonima coccolobifolia and Byrsonima ligustrifolia. Mutagenic acivity was evaluated by Ames Test, performed according to preincubation assay, in absence and presence of metabolic activation system (S9). TA98, TA97a, TA100 and TA102 strains were used and five concentrations of each sample, in triplicates, were tested. For antimutagenicity assay were used only the samples negative in Ames Test (B. verbascifolia and B. correifolia), with the difference that samples were associated a known mutagenic agent The estrogenic activity was evaluated by two assays: -The Recombinant Yeast Assay (RYA) uses the yeast Saccharomyces cerevisiae (BY4741 strain)genetically modified, containing a gene for human estrogen receptor and a plasmid which expresses the β-galactosidase enzyme of Escherichia coli and - Escreen, a test that evaluates ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-22Bitstream added on 2014-06-13T19:15:01Z : No. of bitstreams: 1 000736635.pdf: 2331643 bytes, checksum: 167aba47cf2d8bdfb0a675d7f72c523f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O cerrado brasileiro contém inúmeras plantas utilizadas no tratamento popular de várias enfermidades onde destacamos as espécies do gênero Byrsonima. Os relatos de seu uso são diversos: tratamento de infecções fúngicas e bacterianas, feridas crônicas, doença de Chagas, contra tuberculose, como diurética, antiemética e etc. Na literatura, há comprovação para atividades: antioxidante, antiprotozoário, depressor no Sistema Nervoso Central (SNC), antihiperglicêmicas e antihiperlipêmica. O perfil fitoquímico demonstra taninos, flavonóides, triterpenos, ésteres aromáticos, entre outros, o que indica o potencial farmacológico deste gênero. Sabe-se que o uso não padronizado de plantas pode ser danoso aos usuários, devido a propriedades desconhecidas ou por conterem contaminantes ambientais. Embora haja diversos estudos abordando o potencial biológico das plantas deste gênero, amplamente utilizadas na medicina popular, ainda há poucos estudos sobre sua segurança Por esta razão, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades mutagênica, antimutagência e estrogênica de extratos etanólicos padronizados (70%) de folhas de quatro espécies: Byrsonima verbascifolia, Byrsonima coccolobifolia, Byrsonima correifolia e Byrsonima ligustrifolia. A atividade mutagênica foi realizada pelo Teste de Ames, utilizando o ensaio de pré-incubação, na ausência e presença de ativação metabólica (S9). As linhagens utilizadas foram TA98, TA97a, TA100 e TA102 e foram testadas cinco concentrações de cada amostra. A atividade antimutagênica foi testada apenas para as amostras negativas para o teste de Ames (B. verbascifolia e B. correifolia), com a diferença que sempre foi associada a um agente mutagênico conhecido. A atividade estrogênica foi avaliada por dois testes: -Recombinant Yeast Assay (RYA) que utiliza a levedura Saccharomyces cerevisiae (linhagem BY4741) modificada geneticamente, contendo um gene para receptor e... / The Brazilian cerrado contain several native plants used in folk medicine for treating many diseases. Plants of the genus Byrsonima are one of them. There are several reports of its use: the treatment of fungal and bacterial infections, chronic wounds, Chagas disease, tuberculosis, as a diuretic and antiemetic. In literature there is evidence for activities: antioxidant, antiprotozoal, depressing CNS, antihiperglicemic and antihiperlipemic. The phytochemical profile shows tannins, flavonoids, triterpenes, aromatic esters and others, which indicates the pharmacological potential of this genus. It is known that the use of non-standard plant can be harmful to users due to unknown properties or for containing environmental contaminants. Although there are several studies about the biological potential of plants of this genus, widely used in folk medicine, there are few studies about their safety. For this reason, the aim of this study was to investigate the mutagenic, antimutagenic and estrogenic activities of standardized ethanolic extracts (70%) of leaves of four species: Byrsonima verbascifolia, Byrsonima correifolia, Byrsonima coccolobifolia and Byrsonima ligustrifolia. Mutagenic acivity was evaluated by Ames Test, performed according to preincubation assay, in absence and presence of metabolic activation system (S9). TA98, TA97a, TA100 and TA102 strains were used and five concentrations of each sample, in triplicates, were tested. For antimutagenicity assay were used only the samples negative in Ames Test (B. verbascifolia and B. correifolia), with the difference that samples were associated a known mutagenic agent The estrogenic activity was evaluated by two assays: -The Recombinant Yeast Assay (RYA) uses the yeast Saccharomyces cerevisiae (BY4741 strain)genetically modified, containing a gene for human estrogen receptor and a plasmid which expresses the β-galactosidase enzyme of Escherichia coli and - Escreen, a test that evaluates ...

Orientadora : Profª Drª Rosemary Hoffmann Ribani / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos. Defesa: Curitiba, 27/08/2015 / Inclui referências : f. 91-102 / Resumo: Murici vermelho (Byrsonima ligustrifolia) é um fruto pequeno, suculento e adstringente cuja cor muda durante o processo de maturação de verde para vermelho, vinho e, por último, roxo quase negro. Como outras berries, apresenta potencial para ser uma fonte de compostos bioativos. O teor desses compostos em frutas pode aumentar, diminuir ou não mudar significativamente durante o amadurecimento, e a determinação da melhor combinação de solventes é necessária para uma extração eficiente de fitoquímicos. Assim, o presente trabalho determinou a melhor combinação entre três solventes (acetona, metanol e água) para otimização da extração de compostos fenólicos, por meio do modelo estatístico Simplex-centroid design com três pontos axiais e triplicata no ponto central. Em seguida, a capacidade antioxidante de frutos de B. ligustrifolia ao longo do processo de maturação foi avaliada pelos métodos de Folin-Ciocalteu, ABTS e DPPH. Compostos fenólicos foram identificados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) acoplada ao detector de espectrometria de massa (MS/MS) e quantificados por HPLC equipado com detector de arranjo de diodos (DAD). Além disso, foram analisados flavonóides totais (TF), antocianinas monoméricas totais (TMA) e ácido ascórbico (AA). Os resultados mostraram que a mistura de acetona:metanol (20:80) acidificada com 2% de ácido acético foi mais eficiente na extração de compostos fenólicos. HPLC-MS/MS permitiu identificar em B. ligustrifolia: cianidina-3-glicosídeo, pelargonidina-3-glicosídeo, peonidina-3-glicosídeo, delfinidina-3-glicosídeo, ácido gálico, ácido protocatequínico, ácido p-hidroxibenzóico, ácido cafeico, ácido pcumárico, quercetina e catequina. Seis compostos fenólicos foram quantificados por HPLC-DAD: cianidina-3-glicosídeo, pelargonidina-3-glicosídeo, ácido gálico, ácido phidroxibenzóico, ácido p-cumárico e catequina. TF e ácidos fenólicos diminuíram com o processo de maturação e apresentaram correlação positiva com a capacidade antioxidante. TMA, cianidina-3-glicosídeo e ácido gálico encontram-se em B. ligustrifolia em níveis que são difíceis de encontrar em outras berries. AA não mostrou correlação com a atividade antioxidante. Com estes resultados, pode-se afirmar que frutos de B. ligustrifolia apresentam potencial como alimento funcional. Palavras-chave: Byrsonima ligustrifolia; maturação; otimização de extração; simplex-centroid design; compostos fenólicos; antocianinas; capacidade antioxidante; HPLC-MS/MS; HPLC-DAD. / Abstract: Byrsonima ligustrifolia is an astringent fleshy berry fruit whose colour changes during the maturation process from green to red, vinaceous, and then purple at over-ripe. Like other berries, it can be a source of antioxidant phytochemicals. These compounds in fruits can increase, decrease or not change significantly during successive ripening, and determining the best solvents combination is necessary for an efficient extraction of these compounds. So, the present work determined the best combination between three extraction solvents (acetone, methanol, and water), using Simplex-centroid design with axial points and two replicates at the center point. After that, the antioxidant capacity of B. ligustrifolia fruit throughout maturation process was evaluated by Folin-Ciocalteu, ABTS, and DPPH methods, and phenolic compounds were identified by high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to mass spectrometry detector (MS/MS) and quantified by HPLC equipped with diode arrangement detector (DAD). Besides that, total flavonoids (TF), total monomeric anthocyanins (TMA), and ascorbic acid (AA) were analysed. Results showed that acetone:methanol (20:80) with acetic acid (2%) worked better in extracting phenolic compounds. HPLC-MS/MS allowed identify in B. ligustrifolia: cyanidin-3-glucoside, pelargonidin-3-glucoside, peonidin-3-glucoside, delphinidin-3- glucoside, gallic acid, protocatechuic acid, p-hidroxybenzoic acid, caffeic acid, pcoumaric acid, quercetin, and catechin. Six polyphenolic compounds were quantified by HPLC-DAD: cyanidin-3-glucoside, pelargonidin-3-glucoside, gallic acid, phydroxybenzoic acid, p-coumaric acid, and catechin. TF and phenolic acids decreased with maturation process and had positive correlation with antioxidant capacity. TMA, cyanidin-3-glucoside and gallic acid are presented in B. ligustrifolia in levels that are difficult to find in other berries. AA did not show correlation with antioxidant activity. With these results, there is a great potential to improve human health through consumption of B. ligustrifolia fruit. Keywords: Byrsonima ligustrifolia; maturation; extraction optimization; simplexcentroid design; phenolic compounds; anthocyanins; antioxidant capacity; HPLCMS/ MS; HPLC-DAD.

Orientador: Daniel Rinaldo / Coorientadora: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Kelly Johana Dussan Medina / Banca: Miriam Sannomiya / Resumo: As espécies Byrsonima intermedia ("murici-mirim") e Terminalia catappa ("castanholas") apresentam comprovadamente atividades antimicrobiana, anti-inflamatória, antiulcerogênica, analgésica e cicatrizante e possuem em sua composição taninos, flavonóides e ácidos fenólicos. Essas espécies são potenciais candidatas para a produção de fitoterápicos e dessa forma são necessárias metodologias de análise que identifiquem a constituição química dessas espécies, como impressões digitais (fingerprintings), para comprovação da identidade e controle de qualidade utilizando, por exemplo, a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Apesar da importância atribuída a essa técnica, grandes volumes de solventes tóxicos são gerados por ano, como a acetonitrila (MeCN) e metanol (MeOH), aumentando os custos de tratamento desses resíduos além da sua manipulação poder ocasionar danos à saúde dos analistas. Uma alterativa eficiente de reduzir esses impactos é a aplicação dos conceitos da Química Verde (QV). Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi substituir o MeOH por etanol (EtOH) em análises por CLAE-DAD para a obtenção de fingerprintings de extratos hidroalcoólicos das folhas de B. Intermedia e T. catappa, utilizando uma abordagem multiparamétrica, aplicando os conceitos da QV. Para isso foi empregada a quimiometria nas análises por CLAE-DAD, utilizando Planejamento Fatorial Fracionário e Planejamento do Composto Central. Após a otimização do modelo foram identificadas as substâncias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The species Byrsonima intermedia ("murici-mirim") and Terminalia catappa ("castanets") have shown antimicrobial, anti-inflammatory, antiulcerogenic, analgesic and cicatrizant activities and have tannins, flavonoids and phenolic acids in their composition. These species are potential candidates for the production of phytotherapics, and therefore, analytical methodologies are needed to identify the chemical constitution of these species, such as fingerprintings, for proving identity and quality control using, for example, High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Despite the importance attached to this technique, large volumes of solvents are generated per year, such as the toxic solvent, acetonitrile, increasing the costs of treatment of the waste generated and its handling can cause damages to health and the environment, and an efficient way to reduce these impacts is the application of the concepts of Green Chemistry. Despite the importance attached to this technique, large volumes of toxic solvents are generated per year, such as acetonitrile (MeCN) and methanol (MeOH), increasing the costs of treatment of these wastes and their manipulation may cause damage to the health of analysts. An efficient alteration to reduce these impacts is the application of the concepts of Green Chemistry (GC). In this context, the objective of this work was to replace the MeOH by ethanol (EtOH) in CLAE-DAD analyzes to obtain fingerprintings of hydroalcoholic extracts from the leaves of B.... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6648.pdf: 4219788 bytes, checksum: 80aac49ad1c6f625b5a97327943740ca (MD5) Previous issue date: 2015-03-26 / Universidade Federal de Sao Carlos / A primeira etapa deste trabalho de pesquisa envolveu uma triagem de extratos de plantas do cerrado paulista através de ensaios frente à arginase (ARG) de Leishmania amazonensis. Os resultados de inibição enzimática da ARG apresentados pelos extratos, levaram ao fracionamento biodirecionado dos extratos de acetato de etila (folhas e galhos) de Byrsonima coccolobifolia Kunth. (Malpighiaceae). Alguns compostos bioativos foram isolados (flavonóides, ácido galoilquínicos, uma lignana, uma fenatrenona e uma ortoquinona) o que indicou que estes compostos seriam os responsáveis pela diminuição da atividade enzimática da ARG observada nos extratos de B. coccolobifolia. Os flavonoides e os ácidos galoilquínicos apresentaram modo de inibição do tipo não-competitivo da ARG, com atividade inibitórias significativas (IC50 = 0,13 à 4,8 μM) e com forte afinidade (valores de Ki variando entre 0,10 à 3,80 μM). Os estudos de relação entrutura atividade (SAR) revelaram que o grupo catecol dos flavonóides, tanto como a unidade galoila das estruturas dos ácidos galoilquínicos, forneceram importantes características em relação as interações ARG inibidor. Na segunda parte deste trabalho, experimentos subsequentes foram realizados para investigar os produtos naturais frente a proteases, as quais possuem funções importantes na patogenicidade de virus e parasitas, tais como: as serino proteases NS2B-NS3 dos vírus da dengue serotipos 2 e 3 (dengue), a rodesaína de Trypanosoma brucei rhodesiense (tripanossomíase africana), a cruzaina de Trypanosoma cruzi (doença de chagas), a catepsina L de Leishmania mexicana (leishmaniose) e a falcipaina-2 de Plasmodium falciparum (malária). Através destes estudos foram descobertos alguns inibidores das proteases NS2B- NS3 dos vírus da dengue (tipo 2 e 3) e da catepsina L (r-CPB2.8) de L. mexicana. Os flavonóides agatisflavona, miricetina, e quercetina (Ki = 11,1; 4,7; e 20,7 μM; respectivamente) mostraram inibição do tipo não-competitiva frente à NS2B-NS3. Também foram realizados, um experimento de termoforese em microescala (MST) (ensaio livre de substrato) e um estudo in silico, de forma a obter maiores informações sobre as interações biomoleculares envolvidas. Os metabólitos secundários, agatisflavona e ácido 3-oxo-urs-12-en- 28-óico, foram determinados serem inibidores do tipo não-competitivo parcial da catepsina L do tipo r-CPB2.8, e a tetrahidrorobustaflavona como um inibidor incompetitivo desta catepsina L (r-CPB2.8), com valores de Ki na faixa de micromolar (Ki = 0,14−1,26 μM). / The early phase of this work involved a screening of plant extracts of São Paulo cerrado using assays with arginase (ARG) from Leishmania amazonensis. The results of enzymatic inhibition of ARG by the extracts led to the bioactivity-guided fractionation of the ethyl acetate extracts (leaves and stems) of Byrsonima coccolobifolia Kunth. (Malpighiaceae). Thereafter, several bioactive compounds were isolated (flavonoids, galloylquinic acids, a lignan, a phenathrenone and an orthoquinone) indicating that these compounds may are the responsible for the decrease in ARG activity observed in B. coccolobifolia extracts. The flavonoids and galloylquinic acids showed to be noncompetitive inhibitors of ARG with significant inhibitory activities (IC50 = 0.13 to 4.8 μM) and strong affinity (Ki values ranging from 0.10 to 3.8 μM). Additionally, structure activity relationship study (SAR) revealed that catechol group in flavonoids, likewise as galloyl unit in galloylquinic acids structures yielded important features for ARG inhibitor interactions. In the second part of this work, subsequent experiments were performed to investigate the natural products against proteases. These enzymes play pivotal roles in the pathogenicity of virus and parasites, such as: serine proteases NS2B-NS3 from dengue virus serotype 2 and 3 (dengue fever), rhodesain from Trypanosoma brucei rhodesiense (African trypanosomiasis), cruzain from Trypanosoma cruzi (chagas disease), cathepsin L from Leishmania mexicana (leishmaniasis), and falcipain-2 from Plasmodium falciparum (malaria). Through these studies were discovered inhibitors of NS2B-NS3 proteases of dengue virus and inhibitors of the L. mexicana cathepsin L-like r- CPB2.8.