Evidências indicam uma interação na comunicação glia-neurônio. E sabido que a isquemia e reperfusão intestinal (I/R) são eventos clínicos graves. Este projeto visa estudar os efeitos de Brilliant Blue G (BBG) e de Probenecida (PB) nas células gliais entéricas (CGE). Os vasos ileais foram ocluídos por 45 min. Os períodos de reperfusão foram de 24 h, 14 e 28 dias.Os animais foram tratados com BBG, PB ou Salina. Os dados mostraram que o receptor P2X7 estava em CEG e neurônios, que há fenótipos diferentes de CGE e Panx-1 estava em CEG (GFAP). As densidades mostraram diminuição do número de células-IR ao receptor P2X7, Panx-1 e Hu no grupo I/R Salina, porém nos grupos tratados houve recuperação do número dessas células e com as CGE ocorreu um aumento no grupo I/R Salina. A área do perfil celular apresentou alterações em neurônios e CGE. Houve alterações na expressão proteica de P2X7 e Panx-1 e na atividade contrátil do intestino. O uso de BBG e de PB têm sido eficaz na recuperação de CGE e neurônios e podem ser alvos terapêuticos para doenças do trato gastrintestinal. / Evidence indicates an interaction in glia-neuron communication. It is known that intestinal ischemia and reperfusion (I/R) are serious clinical events. This project aims to study the effects of Brilliant Blue G (BBG) and Probenecida (PB) on enteric glial cells (CGE). The ileal vessels were occluded for 45 min. Reperfusion periods were 24 h, 14 and 28 days. Animals were treated with BBG, PB or Saline. The data showed that the P2X7 receptor was in CEG and neurons, that there are different phenotypes of CGE and Panx-1 was in CEG (GFAP). The densities showed a decrease in the number of cells-IR to the P2X7 receptor, Panx-1 and Hu in the Salina I/R group, but in the treated groups there was a recovery in the number of these cells and with the CGE there was an increase in the Salina I/R group. The cell profile area presented changes in neurons and CGE. There were changes in the protein expression of P2X7 and Panx-1 and in the contractile activity of the intestine. The use of BBG and PB has been effective in the recovery of CGE and neurons may be therapeutic targets for diseases of the gastrointestinal tract.

Os últimos anos se caracterizaram pelo aumento significativo da população idosa mundial. Por esta razão, a preocupação com o idoso está se tornando uma constante em nossa sociedade, uma vez que o envelhecimento resulta em comprometimento das funções fisiológicas, acompanhado ou não de alterações estruturais. No trato gastrointestinal (TGI), o processo de envelhecimento pode provocar alterações morfofuncionais significativas. A regulação da motilidade do TGI é controlada principalmente pelos neurônios mioentéricos do sistema nervoso entérico. A diminuição na densidade destes neurônios no cólon pode levar à redução na frequência e na amplitude da contração colônica manifestada como constipação. As ações que visam diminuir os efeitos do envelhecimento no TGI incluem aquelas relacionadas à dieta alimentar, entre as quais se destaca a restrição calórica. A restrição calórica, além de apresentar efeito protetor nos neurônios mioentéricos durante o envelhecimento, também é responsável pela diminuição da morte neuronal por apoptose, processo este acentuado com o envelhecimento. Assim sendo, este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos de diferentes níveis de restrição calórica sobre a plasticidade dos neurônios mioentéricos NADPH e acetilcolinesterase positivos do cólon de ratos Wistar durante o processo de envelhecimento por meio das análises ultraestrutural (microscopia eletrônica de transmissão) e morfoquantitativa. Para tanto foram utilizados 40 ratos machos (Rattus norvegicus), da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos (n= 10/grupo): CI- animais de seis meses; SR- animais de 18 meses alimentados com dieta normal; RCI- animais de 18 meses alimentados com dieta com 12% de restrição calórica; RCII- animais de 18 meses submetidos à restrição calórica de 30%. Aos seis meses de idade, os animais foram transferidos para o biotério setorial, onde permaneceram até aos 18 meses sob condições ambientais controladas de temperatura e de iluminação e água ad libitum. Foi possível observar que a RC em nível de 30% minimizou de forma eficaz os efeitos deletérios do envelhecimento nos neurônios mioentéricos, podendo ser adotada como alternativa contra os distúrbios gastrointestinais comuns em indivíduos idosos. / The last years were characterized by a significant increase in the elderly population. For this reason, concern for the elderly is becoming a constant in our society, since the aging results in impairment of bodily function, or not accompanied by structural changes. In the gastrointestinal tract (GI), the aging process can cause significant morphological changes. The regulation of motility of the gut is controlled mainly by myenteric neurons of the enteric nervous system. The decrease in the density of neurons in the colon can lead to a reduction in the frequency and amplitude of contraction expressed as colonic constipation. The actions aimed at reducing the effects of aging on the GI system include those related to diet, among which stands out caloric restriction. Caloric restriction, and have a protective effect on the myenteric neurons during aging, is also responsible for the decrease of neuronal death by apoptosis, a process accentuated with aging. Thus, this study was to evaluate the effects of different levels of calorie restriction on the plasticity of myenteric neurons NADPH and acetylcholinesterase positive of the colon of rats during the aging process by means of ultrastructural (transmission electron microscopy) and morphoquantitative analysis. Therefore, we used 40 male Wistar rats (Rattus norvegicus), divided into four groups (n = 10): CI- animals six months; SR- animals 18 month fed a normal diet; RCI - animals 18 months fed a diet with 12% caloric restriction; RCII- animals 18 months fed a diet with 30% caloric restriction. At six months, the animals were transferred to the vivarium sector, where they remained up to 18 months under controlled conditions of temperature and light and water ad libitum. It was observed that the RC level of 30% effectively minimized the deleterious effects of aging on myenteric neurons, which may be adopted as an alternative against the common gastrointestinal disorders in the elderly.

A fome e a subnutrição estão entre os mais devastadores problemas sociais e de saúde pública nos países em desenvolvimento, estando relacionadas a problemas socioeconômicos como pobreza, miséria, baixo nível educacional, ausência de programas de saúde, déficit no saneamento básico e tabus alimentares. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da dieta básica da população de Moçambique (DM) e da renutrição proteica, nos componentes do plexo mioentérico dos segmentos proximal e distal do intestino grosso de ratos Wistar de 21 e 42 dias. Para tanto, os animais foram divididos em sete grupos: o controle, dieta AIN-93G com adição de 20% de caseína (NN21 e NN42); Dieta de Moçambique (DM21 e DM42); Dieta Moçambique suplementada, acrescida de 20% de caseína (NM21 e NM42) e o grupo renutrido (RM42), animais do grupo DM21 que, a partir do 22º dia, receberam a dieta NM até atingirem 42 dias de vida. As amostras dos segmentos proximal e distal do intestino grosso, foram coletadas e submetidas às técnicas histoquímicas da NADH-diaforase e NADPH-diaforase e imunohistoquímica (ChAT, Substância P e VIP), para avaliação qualitativa e quantitativa dos neurônios do plexo mioentérico. A estrutura, ultraestrutura e morfometria dos componentes ganglionares e da parede e mucosa intestinal, foram avaliadas com o uso de técnicas rotineiras de histologia (HE, Picro-sírius e Weigert) e de microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e, dependendo do parâmetro a ser avaliado, utilizados dois ou três fatores (grupo, idade e segmento do intestino). Quando necessário, comparações múltiplas pelos métodos de Bonferroni ou Tukey foram aplicadas, com nível de significância p<0,05. A análise qualitativa mostrou que todos os grupos experimentais, independentemente da idade (21 e 42 dias) e segmento intestinal (proximal e distal), apresentaram as camadas histológicas e seus constituintes preservados. Os animais do grupo DM apresentaram os menores valores para: peso e comprimento; dados metabólicos; área da parede e mucosa intestinal; comprimento e área do intestino. A renutrição não foi capaz de recuperar esses parâmetros. As fibras colágenas do tipo I predominaram no grupo DM e as do tipo III no grupo RM. As fibras elásticas não foram detectadas na cápsula dos gânglios mioentéricos do grupo DM aos 21 e 42 dias. A imunorreatividade dos neurônios mioentéricos à ChAT, SP e VIP, mostrou-se fraca no grupo DM. Sob o aspecto ultraestrutural, o grupo DM exibiu um atraso no desenvolvimento celular. A densidade de neurônios reativos à NADH-d e NADPH-d foi maior em todos os grupos de 21 em comparação aos grupos de 42 dias, independente do segmento. O grupo DM apresentou uma densidade numérica neuronal maior em relação aos outros grupos, independente do segmento e idade. Por outro lado, quando se avaliou a área do perfil neuronal, os grupos de 42 dias exibiram uma área maior em relação aos animais de 21 dias, independente do segmento. Entre os grupos da mesma faixa etária, independente do segmento, a área neuronal dos animais foi maior no grupo NN, e menor no grupo DM. O grupo RM não recuperou esse parâmetro. A estimativa do número total de neurônios da NADH-d aumentou com a idade em todos os grupos. Considerando a mesma faixa etária, não foram detectadas diferenças entre os grupos. Já a estimativa neuronal para a NADPH-d foi maior no grupo DM, independentemente da idade. / Hunger and malnutrition are among the most devastating social and public health problems in developing countries, being related to socioeconomic problems such as poverty, misery, poor education, absence of health programs, deficit in basics sanitation and food taboos. The aim of the present study was to evaluate the effects of Mozambique populations regular diet (DM) and the protein refeeding in the components of the myenteric plexus of proximal and distal segments of the large intestine of Wistar rats 21 and 42 days old. Animals were divided into seven groups: control, AIN-93G diet with 20% casein addition (NN21 and NN42); Diet Mozambique (DM21 and DM42) and Diet Mozambique supplemented with 20% casein (NM21 and NM42) and re-nourished group (RM42), animals from DM21 group, 22 days old, that received the NM diet until they reach 42 days old. Proximal and distal segments samples of the large intestine were collected and submitted to NADH-diaforase and NADPH-diaforase histochemical techniques and to immunohistochemistry (ChAT, Substance P and VIP), in order to demonstrate myenteric neurons. The structure and ultra-structure of ganglion components and intestinal wall were assessed using routine histology techniques (HE, Picrosirius and Weigert) and scanning and transmission electron microscopy. Data was analyzed by the analysis of variance (ANOVA) and, depending on the parameter to be assessed, two or three factors were used (group, age and bowel segment). When necessary, multiple comparisons by Bonferroni or Tukey methods were applied, considering p <0.05 as significance level. Qualitative analysis showed that all groups, regardless of age (21 and 42 days), and intestinal segments (proximal and distal) showed histological layers and their constituents preserved. RM group did not recovered this parameter. DM group animals showed the smallest values for the following parameters: weight and length; metabolic data; intestinal mucosa and wall area; intestine length and area. Refeeding did not recovered these parameters. Type I collagen fibers were most frequent in DM group, whereas type III prevailed in RM group. Elastic fibers were not detected in the capsule of myenteric ganglion of DM group at 21 and 42 days. DM group showed low immune reactivity of myenteric neurons to ChAT, SP and VIP. As regards to ultrastructural aspects, DM group showed slow cellular development. Besides, NADH-d and NADPH-d analysis exhibited increased numeric neuronal density in 21 days old animals compared to 42 days old animals, despite segments. DM group showed higher neuronal numeric density than other groups, regardless of segment and age. On the other hand, when evaluating the neuronal profile area, 42 days groups showed greater area than 21 days animals, with both techniques and regardless of segment. Furthermore, DM group showed significantly lower neuronal area compared to the other groups, regardless of intestinal segment. RM group did not recovered this parameter. Total number of neurons directly increased according to age in all groups. No difference was found between groups of same age. NADPH-d neuronal estimative was higher in DM group, regardless of age.

No trato digestório a colite ulcerativa apresenta necrose no intestino como processos patofisiológicos. Este projeto visou estudar neurônios com códigos químicos do sistema nervoso entérico (SNE) e a morfologia estrutural do intestino grosso de animais com colite ulcerativa. Grupos: a) Colite: injetados com TNBS, b) PBS: injetados com PBS e c) controle. Os tecidos foram preparados por métodos imunohistoquímicos de duplas marcações do receptor P2X7 com NOS, ChAT, Calb, Calr, anti-HuC/D (pan-neuronal) e S100 (células glias). No grupo Colite, no plexo mioentérico, o receptor P2X7 estava diminuído. No tecido lesado apresentou aumento de neutrófilos e da lâmina própria, alteração de colágeno e destruição do epitélio e células caliciformes. Reduziram colocalizações de neurônios com receptor no plexo mioentérico e aumento no plexo submucoso. Houve reduções nas densidades e áreas dos neurônios no SNE. Conclui-se que a colite afetou os neurônios entéricos e células gliais, causou alterações morfológicas, sendo assim, pode afetar motilidade intestinal. / In the digestive tract ulcerative colitis have a bowel necrosis as pathophysiological processes. This project aimed to study neurons with their respective chemicals codes the enteric nervous system (ENS) as well as structural morphology of the distal colon of animals with ulcerative colitis. Groups: a) colitis: TNBS injected, b) PBS: PBS injected and c) control. The tissues were prepared by immunohistochemical methods for double marking with P2X7 receptor, ChAT, Calb, Calr, anti-HUC / D (pan-neuronal) and S100 (glial cells). In the colitis group, the myenteric plexus, the P2X7 receptor decreased. In the injured tissue showed increased neutrophils, alteration and destruction of collagen and epithelial goblet cells. There were reduced colocalizations of neurons with receptor in myenteric plexus and increase in submucosal plexus. There were reductions in the densities and areas neurons of ENS. Concluded that colitis affected enteric neurons and glial cells, causing morphological changes and could be affect intestinal motility.

A isquemia aguda mesentérica é uma condição de grande emergência vascular, que é fatal na população mundial em 60% a 80% dos casos. O objetivo desse trabalho foi estudar, os efeitos da isquemia/reperfusão intestinal sobre o receptor P2X2 e diferentes classes neuronais no plexo mioentérico. Foram analisados o íleo de ratos: controle, Sham e isquemia/reperfusão intestinal (I/R-i) com de 24h e 1 semana de reperfusão. Foram realizadas colocalização do receptor P2X2 com a NOS, ChAT, Calb, Calr, S100 e anti-HuC/D. Os resultados mostraram diminuição de neurônios P2X2-ir colocalizados com a NOS, ChAT e Hu, e um aumento com S100 no grupo I/R-i 1 semana. A densidade apresentou um aumento de células P2X2-ir e S100 e diminuição de ChAT e Hu no grupo I/R-i de 1 semana. O perfil neuronal apresentou um aumento nos neurônios NOS-ir, ChAT, Calb (Dogiel Tipo II) e Calr. Conclui-se que a isquemia levou a alterações diferenciadas no receptor P2X2, células gliais e neurônios entéricos, que podem causar disfunções gastrintestinais, como por exemplo, problemas na motilidade intestinal. / The acute mesenteric ischemia is a vascular condition of extreme emergency, which is fatal in the world population by 60% to 80% of cases. The aim of this work was to study the effects of intestinal ischemia/reperfusion on the P2X2 receptor and different neuronal classes in the myenteric plexus. We analyzed the ileum of rats: control, Sham and ischemia/reperfusion (I/R-i) with 24 hours and 1 week of reperfusion. The colocalization were performed by P2X2 receptor with NOS, ChAT, Calb, Calr, S100 and anti-HUC/D. The results showed a decrease of P2X2-ir neurons colocalizated with ChAT and Hu, and an increase in the group with S100 in the I/R-i 1 week group. The density of cells showed an increase of P2X2-ir and S100 and a decrease of Hu and ChAT in I/R-i 1 week group. The profile area showed an increase in NOS-ir, ChAT-ir, Calb (Dogiel Type II) and Calr-ir neurons. We conclude that ischemia led to different changes in P2X2 receptor, enteric neurons and glial cells, which can cause gastrointestinal disorders, such as intestinal motility disorder.

O Sistema nervoso entérico está localizados entre as camadas constituintes das paredes do trato gastrintestinal, entre as camadas musculares longitudinal e circular, que se estende por todo o trato digestório, desde o esôfago até o reto. Desordens gastrintestinais são complicações comuns causadas pela lesão térmica. A presente pesquisa avalia, em estômagos de ratos alterações na mucosa e no plexo mioentérico submetidos à lesão térmica corporal. O número de neurônios NADH-d e NADPH-d aumentaram significativamente nos animais queimados. Analisando a média da área do perfil dos neurônios NADH-dr e NADPH-dr evidenciaram uma diminuição significativa de 26% e 24%, respectivamente, na área do perfil dos neurônios dos animais queimados. Assim, associados o VIP o NO e a acetilcolina se apresentaram de maneira a interferir no esvaziamento gástrico causando ulcerações que foram observadas pela técnica da MEV na mucosa gástrica. Com esses dados, pode-se concluir que a LTC interfere no plexo mioentérico do estômago de ratos causando uma gastroparesia. / The enteric nervous system is located among the layer constituents of the gastrintestinal tract. Between the longitudinal and circular muscle layers, which extend throughout the digestory tract from the esophagus to the rectum. Gastrintestinal disorders are common complications caused by burn injury. This research evaluates, in stomach of rats changes in the mucosal and myenteric plexus, subjected burn injury. The number of neurons NADH-d and NADPH-d significantly increased in burned animals. Analyzing the average area of the profile of the neurons NADH-dr and NADPH-dr, showed a significant decrease of 26% and 24%, respectively, in the area of the profile of the neurons of the burned animals. Thus, the association of VIP, NO and acetylcholine is presented so as to interfere with gastric emptying causing changes in the mucosal wich were observed by the technique of MEV. With this data, it can be conclude that the burn injury interferes in the myenteric plexus of the stomach of rats causing a gastroparesis.

Os últimos anos se caracterizaram pelo aumento significativo da população idosa mundial. Por esta razão, a preocupação com o idoso está se tornando uma constante em nossa sociedade, uma vez que o envelhecimento resulta em comprometimento das funções fisiológicas, acompanhado ou não de alterações estruturais. No trato gastrointestinal (TGI), o processo de envelhecimento pode provocar alterações morfofuncionais significativas. A regulação da motilidade do TGI é controlada principalmente pelos neurônios mioentéricos do sistema nervoso entérico. A diminuição na densidade destes neurônios no cólon pode levar à redução na frequência e na amplitude da contração colônica manifestada como constipação. As ações que visam diminuir os efeitos do envelhecimento no TGI incluem aquelas relacionadas à dieta alimentar, entre as quais se destaca a restrição calórica. A restrição calórica, além de apresentar efeito protetor nos neurônios mioentéricos durante o envelhecimento, também é responsável pela diminuição da morte neuronal por apoptose, processo este acentuado com o envelhecimento. Assim sendo, este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos de diferentes níveis de restrição calórica sobre a plasticidade dos neurônios mioentéricos NADPH e acetilcolinesterase positivos do cólon de ratos Wistar durante o processo de envelhecimento por meio das análises ultraestrutural (microscopia eletrônica de transmissão) e morfoquantitativa. Para tanto foram utilizados 40 ratos machos (Rattus norvegicus), da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos (n= 10/grupo): CI- animais de seis meses; SR- animais de 18 meses alimentados com dieta normal; RCI- animais de 18 meses alimentados com dieta com 12% de restrição calórica; RCII- animais de 18 meses submetidos à restrição calórica de 30%. Aos seis meses de idade, os animais foram transferidos para o biotério setorial, onde permaneceram até aos 18 meses sob condições ambientais controladas de temperatura e de iluminação e água ad libitum. Foi possível observar que a RC em nível de 30% minimizou de forma eficaz os efeitos deletérios do envelhecimento nos neurônios mioentéricos, podendo ser adotada como alternativa contra os distúrbios gastrointestinais comuns em indivíduos idosos. / The last years were characterized by a significant increase in the elderly population. For this reason, concern for the elderly is becoming a constant in our society, since the aging results in impairment of bodily function, or not accompanied by structural changes. In the gastrointestinal tract (GI), the aging process can cause significant morphological changes. The regulation of motility of the gut is controlled mainly by myenteric neurons of the enteric nervous system. The decrease in the density of neurons in the colon can lead to a reduction in the frequency and amplitude of contraction expressed as colonic constipation. The actions aimed at reducing the effects of aging on the GI system include those related to diet, among which stands out caloric restriction. Caloric restriction, and have a protective effect on the myenteric neurons during aging, is also responsible for the decrease of neuronal death by apoptosis, a process accentuated with aging. Thus, this study was to evaluate the effects of different levels of calorie restriction on the plasticity of myenteric neurons NADPH and acetylcholinesterase positive of the colon of rats during the aging process by means of ultrastructural (transmission electron microscopy) and morphoquantitative analysis. Therefore, we used 40 male Wistar rats (Rattus norvegicus), divided into four groups (n = 10): CI- animals six months; SR- animals 18 month fed a normal diet; RCI - animals 18 months fed a diet with 12% caloric restriction; RCII- animals 18 months fed a diet with 30% caloric restriction. At six months, the animals were transferred to the vivarium sector, where they remained up to 18 months under controlled conditions of temperature and light and water ad libitum. It was observed that the RC level of 30% effectively minimized the deleterious effects of aging on myenteric neurons, which may be adopted as an alternative against the common gastrointestinal disorders in the elderly.

No trato digestório a colite ulcerativa apresenta necrose no intestino como processos patofisiológicos. Este projeto visou estudar neurônios com códigos químicos do sistema nervoso entérico (SNE) e a morfologia estrutural do intestino grosso de animais com colite ulcerativa. Grupos: a) Colite: injetados com TNBS, b) PBS: injetados com PBS e c) controle. Os tecidos foram preparados por métodos imunohistoquímicos de duplas marcações do receptor P2X7 com NOS, ChAT, Calb, Calr, anti-HuC/D (pan-neuronal) e S100 (células glias). No grupo Colite, no plexo mioentérico, o receptor P2X7 estava diminuído. No tecido lesado apresentou aumento de neutrófilos e da lâmina própria, alteração de colágeno e destruição do epitélio e células caliciformes. Reduziram colocalizações de neurônios com receptor no plexo mioentérico e aumento no plexo submucoso. Houve reduções nas densidades e áreas dos neurônios no SNE. Conclui-se que a colite afetou os neurônios entéricos e células gliais, causou alterações morfológicas, sendo assim, pode afetar motilidade intestinal. / In the digestive tract ulcerative colitis have a bowel necrosis as pathophysiological processes. This project aimed to study neurons with their respective chemicals codes the enteric nervous system (ENS) as well as structural morphology of the distal colon of animals with ulcerative colitis. Groups: a) colitis: TNBS injected, b) PBS: PBS injected and c) control. The tissues were prepared by immunohistochemical methods for double marking with P2X7 receptor, ChAT, Calb, Calr, anti-HUC / D (pan-neuronal) and S100 (glial cells). In the colitis group, the myenteric plexus, the P2X7 receptor decreased. In the injured tissue showed increased neutrophils, alteration and destruction of collagen and epithelial goblet cells. There were reduced colocalizations of neurons with receptor in myenteric plexus and increase in submucosal plexus. There were reductions in the densities and areas neurons of ENS. Concluded that colitis affected enteric neurons and glial cells, causing morphological changes and could be affect intestinal motility.

A isquemia aguda mesentérica é uma condição de grande emergência vascular, que é fatal na população mundial em 60% a 80% dos casos. O objetivo desse trabalho foi estudar, os efeitos da isquemia/reperfusão intestinal sobre o receptor P2X2 e diferentes classes neuronais no plexo mioentérico. Foram analisados o íleo de ratos: controle, Sham e isquemia/reperfusão intestinal (I/R-i) com de 24h e 1 semana de reperfusão. Foram realizadas colocalização do receptor P2X2 com a NOS, ChAT, Calb, Calr, S100 e anti-HuC/D. Os resultados mostraram diminuição de neurônios P2X2-ir colocalizados com a NOS, ChAT e Hu, e um aumento com S100 no grupo I/R-i 1 semana. A densidade apresentou um aumento de células P2X2-ir e S100 e diminuição de ChAT e Hu no grupo I/R-i de 1 semana. O perfil neuronal apresentou um aumento nos neurônios NOS-ir, ChAT, Calb (Dogiel Tipo II) e Calr. Conclui-se que a isquemia levou a alterações diferenciadas no receptor P2X2, células gliais e neurônios entéricos, que podem causar disfunções gastrintestinais, como por exemplo, problemas na motilidade intestinal. / The acute mesenteric ischemia is a vascular condition of extreme emergency, which is fatal in the world population by 60% to 80% of cases. The aim of this work was to study the effects of intestinal ischemia/reperfusion on the P2X2 receptor and different neuronal classes in the myenteric plexus. We analyzed the ileum of rats: control, Sham and ischemia/reperfusion (I/R-i) with 24 hours and 1 week of reperfusion. The colocalization were performed by P2X2 receptor with NOS, ChAT, Calb, Calr, S100 and anti-HUC/D. The results showed a decrease of P2X2-ir neurons colocalizated with ChAT and Hu, and an increase in the group with S100 in the I/R-i 1 week group. The density of cells showed an increase of P2X2-ir and S100 and a decrease of Hu and ChAT in I/R-i 1 week group. The profile area showed an increase in NOS-ir, ChAT-ir, Calb (Dogiel Type II) and Calr-ir neurons. We conclude that ischemia led to different changes in P2X2 receptor, enteric neurons and glial cells, which can cause gastrointestinal disorders, such as intestinal motility disorder.

O plexo mioentérico é uma vasta rede de nervos e gânglios localizado entre as camadas longitudinal e circular da túnica muscular externa de todo o trato gastrintestinal (TGI). A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma miopatia ligada ao cromossomo X causada pela ausência da distrofina que, além dos evidentes efeitos degenerativos no músculo esquelético, causa severas alterações do TGI. No entanto as causas dessas alterações não são claras. Pesquisadores demonstraram que a distrofina é expressa nas fibras musculares lisas e também nos neurônios do plexo mioentérico, todavia não existe um consenso sobre o papel desta nessas estruturas. Desta forma pretende-se estudar os componentes do plexo mioentérico do intestino delgado de camundongos mdx (o modelo animal da DMD) nas idades de 4 e 10 semanas e de seus respectivos controles, camundongos C57BL/10. Os animais de ambos os grupos tiveram o intestino delgado retirado e seccionado em segmentos oral, médio e aboral para posterior avaliação através das técnicas histoquímicas de evidenciação neuronal: NADH-d, NADPH-d e AChE. Além disso, a musculatura lisa e os neurônios do plexo mioentérico foram analisados por MET. A análise quantitativa mostrou que o grupo MDX4 apresentou uma área total do intestino delgado significativamente maior que o C4 (p<0,05). Para as técnicas da NADH-d e NADPH-d foi observado um gradiente crescente de densidade numérica neuronal, no sentido oral-aboral, para todos os grupos estudados. O grupo MDX4 apresentou uma densidade neuronal significativamente menor que o C4 (p<0,05), todavia MDX10 e C10 foram iguais. Além disso, a densidade neuronal dos grupos de 10 semanas foi significativamente menor que dos de 4 semanas para ambas as técnicas (p<0,05). Em relação à estimativa do número total de neurônios, MDX10 e C10 apresentaram uma significativa redução de neurônios NADH-d positivos, quando comparada à dos grupos MDX4 e C4 (p<0,05), porém, para os neurônios NADPH-d positivos, a estimativa dos grupos de 10 semanas foi estatisticamente superior que à dos de 4 semanas (p<0,05). O grupo MDX4 apresentou uma área do perfil de neurônios nitrérgicos significativamente maior que o C4 (p<0,05). Na técnica da NADH-d, não foi detectada diferença significativa relativa à esse aspecto. Comparativamente ao grupo C4, os neurônios do grupo MDX4 não apresentaram intensa reatividade a AChE, mas foram iguais em 10 semanas. Referente à ultra-estrutura dos neurônios, esta apresentou-se preservada em todos os grupos, no entanto as fibras musculares lisas do grupo MDX apresentaram alterações morfológicas. / The myenteric plexus is an extensive network of nerve strands and ganglia located between the outer longitudinal and inner circular muscle layers of the external muscle coat of the gastrointestinal tract (GI). Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a X-linked degenerative muscular myopathy caused by the absence of dystrophin which, apart from the obvious degenerative effects in skeletal muscle, causes severe alterations of gastrointestinal (GI) tract. However the causes of these changes remain unclear. Researchers have shown that dystrophin is expressed in both smooth muscle fibers and myenteric plexus neurons, however there is no consensus on the role of it in these structures. Thus, we intend to study the components of the myenteric plexus of the small intestine of mdx mice (an animal model for DMD) at the ages of 4 and 10 weeks and their respective controls, C57BL/10 mice. The animals of both groups had the small intestine removed and sectioned into oral, middle and aboral segments for further evaluation by histochemical techniques of neuronal evidencing: NADH-d, NADPH-d and AChE. In addition, smooth muscle and myenteric plexus neurons were analyzed by TEM. The quantitative analysis showed that the MDX4 group had a significantly higher small intestine total area than the C4 (p <0.05). For the techniques of NADH-d and NADPH-d was observed an increasing gradient of neuronal numerical density, in the oral-aboral direction, for all groups. The MDX4 group showed a significantly lower neuronal density than C4 (p<0.05), however MDX10 and C10 were the same. In addition, the neuronal density of 10 weeks groups was significantly lower than those of 4 weeks for both techniques (p <0.05). Considering the total estimative number of neurons, MDX10 and C10 showed a significant reduction of NADH-d positive neurons, compared to groups MDX4 and C4 (p <0.05), but for the NADPH-d positive neurons, the estimative of 10 weeks groups was statistically higher than that of 4 weeks (p <0.05). The MDX4 group showed an nitrergic neurons profile area significantly higher than the C4 (p <0.05). In the technique of the NADH-d, no significant difference was detected on this aspect. Compared to the C4 group, neurons of MDX4 group did not show intense AChE reactivity, but they were equal in 10 weeks. Concerning the neurons ultrastructure, it was preserved in all groups, however the smooth muscle fibers of MDX group showed morphological changes.