Normal intestinal functions are coordinated by enteric neurons within the enteric nervous system (ENS). In the embryonic and neonatal gut, enteric neuron survival is dependent on the expression of glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) from its targets of innervation - the intestinal smooth muscle cells (ISMC). In the inflamed adult intestine, enteric neuron loss is immediately followed by ISMC proliferation, resulting in severe disruption of normal intestinal functions. Although GDNF can support the survival of postnatal enteric neurons, whether adult ISMC can secrete GDNF and support neuron survival is unclear. Results from qPCR analysis showed that freshly isolated adult ISMC have acquired the ability to express GDNF at the onset of proliferation, in vitro. Western blot analysis indicates that GDNF continues to be upregulated in ISMC at Passage 2 (P2), but its expression is decreased after long periods of proliferation at Passage 10 (P10). A neuron survival bioassay suggests that GDNF expression is correlated with enteric neuron survival. Results showed that P2 ISMC or conditioned media (CM) - but not P10 ISMC and CM, significantly increased enteric neuron survival. In subsequent experiments, the RET tyrosine kinase inhibitor vandetanib was used to block GDNF receptor-ligand interactions, and anti-GDNF neutralizing antibody was used to sequester soluble GDNF within the culture media. Both methods were successful at decreasing myenteric neuron survival. Furthermore, abolishing GDNF expression in P2 ISMC with GDNF siRNA also resulted in a decreased myenteric neuron survival. The above observations suggest that ISMC-derived GDNF is important in supporting myenteric neuron survival in vitro. / Thesis (Master, Neuroscience Studies) -- Queen's University, 2012-09-28 09:43:23.968

Embora diversos trabalhos relatem as alterações fisiológicas que ocorrem no trato gastrointestinal com a senescência e com o exercício físico, poucos são os relatos morfológicos a respeito destas duas variantes. Portanto, o objetivo deste trabalho foi verificar qual a influência da atividade física (corrida em esteira) na ultraestrutura, na densidade neuronal (neurônios/mm2) e na área do perfil do corpo celular (µm2) dos neurônios mioentéricos do jejuno de ratos com a idade. Para tanto, foram utilizados 45 ratos Wistar divididos em três grupos: C (controle com seis meses), S (sedentário com 12 meses) e T (treinado com 12 meses) sendo utilizado 5 animais para cada técnica/grupo. Os preparados de membrana do jejuno foram corados com as técnicas histoquímicas de NADH e NADPH para estimar o número de neurônios e a área do perfil neuronal. Os resultados alcançados nos testes de esforço (TEMs) forçam sempre maiores no grupo T do que no grupo S. O peso dos animais do grupo T foi menor que os do grupo S. A área do jejuno-íleo foi mensurada e não presentou diferença significativa (P>0,05) entre os animais dos grupos C, S e T. Com exceção da membrana basal que apresentou-se menos definida e da região periganglionar que encontrava-se mais espassada nos animais do grupo S, não foram identificadas alterações ultraestruturais e no arranjo do plexo mioentéricos entre os grupos. A densidade dos neurônios reativos a NADH-diaforase foi menor (P<0,05) nos animais do grupo S (67,76±3,7) em relação aos animais dos grupos C (104,8±5,86) e T (95,18±7,18). Para os neurônios NADPH-diaforase, observou-se menor densidade neuronal nos grupos S (32,32±1,7) e T (27,39±1,2) comparado com o grupo C (44,53±4,5), mas diferenças significativas não foram evidencias entre os grupos S e T. A área do perfil do corpo celular (µm2) dos neurônios NADH- diaforase positivos diminuiu no grupo S (103,4±8,68) e aumento no grupo T (198,4±8,22) em relação ao grupo C (167±6,93). A área neuronal mensurada nos neurônios NADPH-diaforase positivos foi estatisticamente menor entre os grupos T (129,9±9,55) e C (186,8±9,34), mas não foram observadas diferenças entre estes grupos com o grupo S (157,3±3,64). Contudo, as alterações observadas indicam poucas são as influências do envelhecimento em animais com 12 meses de idade. / Although several works tell the physiologic alterations that they happen in the treatment gastrointestinal with the aging and with the physical exercise, few are the morphologic reports regarding these two variants. Therefore, the objective of this work was to verify which the influence of the physical activity (treadmill workout) in the ultrastructural, in the in the neuronal density (neurons/mm2) and in the profile area of the cellular body (µm2) of the myenteric neurons of the jejunum of rats with aging. For so much, 45 Wistar rats were used and they were divided in three groups: C (controls with six months), S (sedentary with 12 months) and T (trained with 12 months) being used 5 animals for each technique/group. The whole mounts of the jejunum were stained with the NADH and NADPH histochemistry techniques to estimate the density and the profile area of the myenteric neurons. The results of the maximal exercise test (METs) they always bigger in the T group than S group. The weight of the animals of the T group was smaller than S group. The jejunum-ileum area was measured and it didn\'t present significant difference (P>0.05) among the animals of the C, s and T groups. Except for the basal membrane that it came less defined and of the periganglionic area that was more scattered in the animals of the S group, they were not identified ultrastructural alterations and in the arrangement of the myenteric plexus among the groups. The density of the NADH-diaphorase neurons was smaller (P<0.05) in the animals of the S group (67.76±3.7) in relation to the animals of the C (104.8±5.86) and T (95.18±7.18) groups. For the NADPH- diaphorase neurons, smaller neuronal density was observed in the S (32.32±1.7) and T (27.39±1.2) groups compared with the C group (44.53±4.5), but the significant differentiate didn\'t evidence among the S and T groups. The profile area (µm2) of the NADH-diaphorase neurons decreased in the S group (103.4±8.68) and increase in the T group (198.4±8.22) in relation to the C group (167±6.93). The profile area of the NADPH-diaphorase neurons was smaller statically among the T (129.9±9.55) and C (186.8±9.34) groups, but differences were not observed among these groups with the S group (157.3±3.64). However, the observed alterations indicate little are the influences of the aging in animals with 12 months age.

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é um tipo de miopatia grave, degenerativa e progressiva, geneticamente determinada e ligada ao cromossomo X. Além dos graves distúrbios cardiorrespiratórios e da motricidade, o paciente apresenta disfunções do sistema digestório, caracterizadas pelas desordens da motilidade. Entretanto, sabe-se que tais disfunções não ocorrem no camundongo MDX. O objetivo deste estudo foi estimar a densidade numérica por área da população total de neurônios (QA[T]) e dos neurônios nitrérgicos (QA[N]); assim como a área de secção transversal média do corpo celular destes neurônios (A[T] e A[N]) do plexo mioentérico esofágico e a largura média das fibras estriadas (L) das camadas musculares. Foram utilizados 40 camundongos machos da linhagem C57BL/10 nas idades de 4 e 10 semanas, distribuídos entre grupos experimentais (MDX4 e MDX10), e controles (C4 e C10). As estimativas foram analisadas em preparados de membrana dos esôfagos, e técnicas histoquímicas de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d) foram utilizadas para evidenciar toda a população de neurônios e os neurônios nitrérgicos, respectivamente. Os resultados mostraram que a QA[T] foi significativamente maior no grupo MDX10 em relação ao C10 (p<0.05); enquanto a QA[N] foi menor no grupo MDX4 em relação ao C4 (p<0.05). A A[T] foi menor no grupo MDX10 em relação ao MDX4 e ao C10 (p<0.05); enquanto que para a A[N] não houve diferença significativa entre os grupos controle e experimental, e tampouco entre os grupos de 4 e de 10 semanas. A variável L foi maior nos grupos MDX4 e MDX10 em relação aos seus respectivos controles de mesma idade (p<0.05). Concluímos que no plexo mioentérico esofágico de camundongos MDX existe uma redução dos neurônios mediadores do relaxamento, especialmente em animais jovens (MDX4), provavelmente porque o organismo tenta manter íntegra a função peristáltica do órgão. Esse fato pode explicar a adaptação e ausência de disfunções esofágicas durante quase toda a vida desses animais. / Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is the most common and the most severe muscular dystrophy of childhood. DMD is degenerative, progressive and a genetic X-linked disease. Besides the cardiomyopathy and the movement disorders, the patients have serious disfunctions in the alimentary system, characterized by motility disorders. However, it is known that such changes do not exist in MDX mice. The aim of this study was to estimate the neuronal numerical density/area of total (QA[T]) and nitregic neurons (QA[N]), the average cross-sectional area of total (A[T]) and nitregic (A[N]) neurons in myenteric plexus of the oesophagus and the average width of striped muscle of muscular layer (L). Forty C57BL/10 male mice were studied from four to ten weeks of age, divided into four groups: MDX mice formed the experimental groups (MDX4 and MDX10) and C57BL/10 male mice without the mutation formed the control groups (C4 and MDX10). Whole mounts preparations were obtained from the samples and histochemistry for NADH-diaphorase (NADH-d) and NADPH-diaphorase (NADPH-d) were used for morphometric evaluation. The results showed a significant increase of the QA[T] in the MDX10 than C10 (p<0.05), and a decrease of the QA[N] in MDX4 comparing to C4 (p<0.05). The A[T] decreased significantly in MDX10 comparing to both MDX4 and C10 (p<0.05), while no significant differences were observed among all the groups regarding the A[N]. The groups MDX4 and MDX10 showed a significant increase in L when compared to its controls at the same age (p<0.05). We conclude that in the myenteric plexus of the oesophagus in MDX mice there is a reduction of the inhibitory neurons, manly in the young animals (MDX4), probably to keep normal the peristaltic functions. Thus, it may explain the adaptation and the absence of oesophageal disfunction during almost the whole life in this animal model.

Para evitar a presença de microorganismos nas rações fornecidas para animais de laboratório, são utilizados processos de esterilização como a autoclavagem, porém esta ocasiona perda de nutrientes, como as proteínas, devido à alta temperatura usada. A deficiência protéica pode afetar a atividade celular, provocando diferentes alterações nos tecidos. Por estes fatos, objetivou-se avaliar a ação da ração autoclavada sobre os neurônios do plexo mioentérico do jejuno de ratos em período de crescimento. Para tanto, foram utilizados ratos em período dedesmame (21 dias) provindos de mães que receberam ração autoclavada ou não autoclavadadurante a gestação e lactação e ratos em período de pós-desmame (21 a 70 dias) alimentados com o mesmo tipo de dieta que as mães recebiam. Para a mensuração do perfil do corpo celular e contagem do número de neurônios por área, estes foram evidenciados pelo método de nadh-diaforase. O peso corpóreo dos animais não apresentou diferença significativa em relação ao tipo de alimentação (p > 0,05). Houve uma diminuição do comprimento jejuno-íleo em ratos alimentados com ração autoclavada (p > 0,05). O número de neurônios por área aumentou aproximadamente 10% para ratos que receberam ração autoclavada (p > 0,05). Já a área do perfil dos corpos dos neurônios apresentou um aumento para ratos alimentados com ração autoclavada, sendo este significativo para animais em período de desmame. Todos os fatores observados apresentaram diferença significativa em relação às idades / Autoclaving is the most common sterilization process to avoid the presence of pathogens in the diet of laboratory animals. However, it may cause the loss of nutrients such as proteins due to the high temperature used. The protein deficiency can affect cellular activity, leading todifferent changes in the tissues. Due to these facts, this research aimed to verify the effect of autoclaved diet in the jejunum neurons of the myenteric plexus in rats during their growing phase. The experiment groups were constituted by rats in weaning period (21 days) from mothers that received autoclaved or not diets during the gestation and lactation, and rats in post weaning period (21 to 70 days) fed the same diet the mothers received. In order to measure the neurons body profile and to quantify the number of neurons by area, they were stained by the nadh-diaphorase method. No significant changes were observed to the weight body in animals with autoclaved diet (p > 0.05). There was a decrease in the length of jejunum-ileum in rats treated with autoclaved diet (p > 0.05). The number of neurons by area increased approximately 10% in the rats supplied with autoclaved diet (p > 0.05). The neuron body profile area increased in the rats that received autoclaved diet and it was significant in the animals in weaning period. Nevertheless, all factors observed showed significant differences when related to animal age

O ácido 2,4 diclorofenoxiacético (2,4-D) é um herbicida amplamente utilizado na agricultura sendo moderadamente tóxico para os seres humanos e demais animais. Apresenta neurotoxicidade, mas seu mecanismo de ação no sistema nervoso não está totalmente esclarecido. Há indícios de que este herbicida atue nos neurônios serotoninérgicos e dopaminérgicos de maneira seletiva, mas não há estudos suficientes para afirmarem sua exata ação sobre o sistema nervoso periférico. Entre os efeitos advindos da intoxicação com 2,4-D estão manifestações gastrointestinais. O presente trabalho teve como objetivo verificar os efeitos da administração do 2,4-D diluído em água nos neurônios mioentéricos do duodeno de ratos. Para tanto, 36 ratos (Rattus norvegicus) foram separados em três grupos (n = 12): controle (C); tratamento com 2,5 &#956;g/Kg de 2,4-D (B) e tratamento com 5 &#956;g/Kg de 2,4-D (A). Após 15 dias de experimento, os animais foram anestesiados, eutanasiados e seus duodenos foram retirados. Os neurônios mioentéricos foram evidenciados por meio de preparados de membrana corados pelo método de Giemsa e pela técnica de evidenciação neuronal pela ação da NADH-diaforase. Estes preparados de membrana foram analisados ao microscópio de luz para contagem dos neurônios e através de programa computadorizado de análise de imagens foi feita a mensuração do perfil do corpo celular (PCC) desses neurônios. A análise quantitativa demonstrou diminuição no número de neurônios do duodeno nos animais que receberam 2,4-D, em ambas as técnicas (p<0,05). Predominaram nos três grupos de animais neurônios de tamanho entre 101 e 300&#956;m2. A incidência de neurônios grandes (entre 301 e 600 µm2) foi significantemente maior (p<0,05) nos animais tratados com 2,4-D. Os resultados sugerem que o 2,4-D afeta o plexo mioentérico, sendo sua ação neurotóxica manifestada pela diminuição no número de neurônios e aumento no número de neurônios grandes. / The 2,4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) it is a herbicid thoroughly used in the agriculture and it is poisonous for the human beings and other animals. It presents neurotoxicity but its action mechanism in the nervous system is not totally known. There are evidences that herbicid actuate on selective mode in serotoninergics and dopaminergics neurons, but there isn?t significant studies to prove its discuss action on the peripheric nervous system. Among the effects succeeding of the intoxication with 2,4-D are gastrointestinal manifestations. The present work had as objective verifies the effects of the administration for 15 days of 5 &#956;g and 2,5 &#956;g/Kg of body weight of 2,4-D diluted in water in the duodenum myenteric neurons of the rats. In order to do so, 15 rats (Rattus norvegicus) were divided into three groups (n = 12): controls (C); treatment with 2,5&#956;g/Kg of 2,4-D (B); and treatment with 5&#956;g/Kg of 2,4-D (A). 15 days later, the animals were anesthetized, killed without pain and your duodenums were removed. The myenteric neurons were stained employing the Giemsa and the NADH-diaforase methods by means of whole mounts preparations. These whole mounts preparations were analyzed in light microscope to count the neurons and through image analysis software to measured the cellular body profile (CBP) of these neurons. The quantitative analysis evidenced reduction in the number of duodenum neurons in animals which received 2,4-D, in both techniques (p<0,05). Predominated in three groups neurons with size between 101 and 300 &#956;m2. Incidence of big neurons (between 301 e 600 &#956;m2) was significantly higher (p<0,05) in the treated with 2,4-D. The results suggest that the 2,4-D affect the myenteric plexus, and its action is expressed by reduction in neurons number and increase in incidence of big neurons.

The enteric nervous system (ENS) is an incredibly complex neural network that is extensively integrated within the neuroimmunoendocrine system through countless signalling pathways that have yet to be fully characterized. In the last decade we have discovered that many more neurotransmitters are at work in the ENS than was originally thought. This opens up new avenues of research into physiological phenomena traditionally thought to be associated only with the central nervous system, such as NMDA receptor-induced excitotoxicity, and how these may influence immune interactions. In particular, the kynurenine pathway of the tryptophan catabolism produces many neuro-active and immuno-active constituents whose effects are unknown in the ENS but are of great consequence in many neurodegenerative disorders of the CNS. Our study hypothesized that co-culture of the enteric neurons with mast cells would increase neuronal survival through kynurenic acid production in quinolinic acid (QUIN)-induced excitotoxic conditions. This study developed a novel in vitro co-culture system of enteric neurons and glia grown from murine longitudinal muscle-myenteric plexus tissue and bone marrow-derived mast cells. In addition, a pipeline in image analysis software CellProfiler was designed and optimized in order to reduce human bias and error in subsequent immunocytochemical image analysis. Furthermore, we identified the genetic expression of subunits of the NMDA glutamate receptor in cultured enteric neurons via PCR, which suggests that these cultured neurons may be susceptible to excitotoxicity. PCR analysis of cultured mast cells seemed to indicate that our cultured mast cells do not express KAT-III, the enzyme needed to produce the neuroprotective KYNA. Overall, co-culture with mast cells seemed to decrease neuronal survival. This project developed a novel methodology for the in vivo study of mast cell-nerve interactions, and lays the groundwork for future studies in excitotoxicity in the ENS. / Thesis / Master of Science (MSc) / The enteric nervous system is a vast web of nerves and immune cells that innervates the gut and interacts with the central nervous system through the gut-brain axis. An important mediator in this system is the mast cell, a type of immune cell often involved in protective responses to venoms and allergens. Intriguingly, in normal physiological conditions these cells are in close contact with nerves in the periphery, despite their potential to release damaging constituents. While mast cells are well-known for inciting inflammation and releasing toxic granules, they can also synthesize and release potentially beneficial neuroactive compounds, such as neurotransmitters or growth factors. The aim of this study was to characterize mast cell-nerve interactions in neurotoxic conditions, to see if the proximity of mast cells to nerves might serve a neuroprotective purpose.

O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da suplementação com ácido ascórbico (AA) sobre os aspectos morfológicos do plexo mioentérico de camundongos mdx jovens. Foram utilizados camundongos mdx e controles C57BL/10 machos divididos em seis grupos (n=5): GC30 (Grupo controle com 30 dias de idade); GC60 (Grupo controle com 60 dias de idade); GCS60 (Grupo controle suplementado com ácido ascórbico, com 60 dias de idade); GD30 (Grupo distrófico com 30 dias de idade); GD60 (Grupo distrófico com 60 dias de idade) e GDS60 (Grupo distrófico suplementado com AA, com 60 dias de idade). Após a eutanásia, os segmentos orais do jejuno (SOJ) foram coletados e submetidos a técnicas histoquimicas de evidenciação neuronal: NADH-diaforase, NADPH-diaforase e AChE. Os resultados demonstraram um aumento significativo do peso corporal para os animais distróficos (grupos GD30 e GD60) quando comparados aos seus respectivos controles (grupos GC30 e GC60). A análise quantitativa demonstrou que os animais do grupo GD60 possui área total do intestino delgado significativamente maior que os animais do grupo GC60; Não houve diferenças significativas entre os grupos GCS60 e GDS60. Em todos os grupos de animais com 60 dias, exceto para a densidade de neurônios nitrérgicos que se apresentou maior no grupo GCS60, todos os demais parâmetros (densidade e área do perfil neuronal) foram semelhantes entre os grupos, tanto controle (GC60 e GCS60) como distrófico (GD60 E GDS60), nas duas metodologias de coloração utilizadas (NADH-d e NADPH-d). A análise qualitativa demonstrou que componentes do plexo mioentérico dos animais distróficos suplementados com AA (GDS60) evidenciados positivos a NADPH-d e AChE apresentaram manutenção dos aspectos normais do plexo mioentérico quando comparados aos animais do grupo GD60. / The aim of this study was assessment of the effects of ascorbic acid (AA) supplementation on morphoquantitative aspects of myenteric plexus of jejunum young mdx mice. Dystrophic mdx and control C57BL/10 animals were used and divided in six groups (n = 5): GC30 (control group with 30 days of age); GC60 (control group with 60 days of age); GCS60 (control group supplemented with ascorbic acid, 60 days of age); GD30 (dystrophic group 30 days of age); GD60 (dystrophic group 60 days of age) and GDS60 (dystrophic group supplemented with AA, 60 days of age). After euthanasia, the oral segments of the jejunum (SOJ) were collected and submitted to the histochemical techniques of neuronal evidencing: NADH-diaphorase, NADPHdiaphorase and AChE. The results showed a significant increase of weight in dystrophic mice (groups GD30, GD60 and GDS60) compared to its controls (groups GC30, GC60 and GCS60). The quantitative analysis showed that the GD60 group had a significantly higher small intestine total area than the GC60; no differences significant between GCS60 and GDS60 groups. All groups of animals with 60 days of age, except for the density of nitrergic neurons showed higher in GCS60 group, in all other parameters (the neuronal density and neuronal profile area) were similar between groups, controls (GC60 and GCS60) and dystrophic (GD60 e GDS60), for techniques of the NADH-d e NADPH-d.Morphological analysis of the components of myenteric plexus of dystrophic animals supplemented with AA (group GDS60) and evidenced by the techniques of NADPH-d and AChE, showed repair of the myenteric plexus aspects compared to animals of group no supplemented (GD60).

A fome e a subnutrição estão entre os mais devastadores problemas sociais e de saúde pública nos países em desenvolvimento, estando relacionadas a problemas socioeconômicos como pobreza, miséria, baixo nível educacional, ausência de programas de saúde, déficit no saneamento básico e tabus alimentares. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da dieta básica da população de Moçambique (DM) e da renutrição proteica, nos componentes do plexo mioentérico dos segmentos proximal e distal do intestino grosso de ratos Wistar de 21 e 42 dias. Para tanto, os animais foram divididos em sete grupos: o controle, dieta AIN-93G com adição de 20% de caseína (NN21 e NN42); Dieta de Moçambique (DM21 e DM42); Dieta Moçambique suplementada, acrescida de 20% de caseína (NM21 e NM42) e o grupo renutrido (RM42), animais do grupo DM21 que, a partir do 22º dia, receberam a dieta NM até atingirem 42 dias de vida. As amostras dos segmentos proximal e distal do intestino grosso, foram coletadas e submetidas às técnicas histoquímicas da NADH-diaforase e NADPH-diaforase e imunohistoquímica (ChAT, Substância P e VIP), para avaliação qualitativa e quantitativa dos neurônios do plexo mioentérico. A estrutura, ultraestrutura e morfometria dos componentes ganglionares e da parede e mucosa intestinal, foram avaliadas com o uso de técnicas rotineiras de histologia (HE, Picro-sírius e Weigert) e de microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e, dependendo do parâmetro a ser avaliado, utilizados dois ou três fatores (grupo, idade e segmento do intestino). Quando necessário, comparações múltiplas pelos métodos de Bonferroni ou Tukey foram aplicadas, com nível de significância p&lt;0,05. A análise qualitativa mostrou que todos os grupos experimentais, independentemente da idade (21 e 42 dias) e segmento intestinal (proximal e distal), apresentaram as camadas histológicas e seus constituintes preservados. Os animais do grupo DM apresentaram os menores valores para: peso e comprimento; dados metabólicos; área da parede e mucosa intestinal; comprimento e área do intestino. A renutrição não foi capaz de recuperar esses parâmetros. As fibras colágenas do tipo I predominaram no grupo DM e as do tipo III no grupo RM. As fibras elásticas não foram detectadas na cápsula dos gânglios mioentéricos do grupo DM aos 21 e 42 dias. A imunorreatividade dos neurônios mioentéricos à ChAT, SP e VIP, mostrou-se fraca no grupo DM. Sob o aspecto ultraestrutural, o grupo DM exibiu um atraso no desenvolvimento celular. A densidade de neurônios reativos à NADH-d e NADPH-d foi maior em todos os grupos de 21 em comparação aos grupos de 42 dias, independente do segmento. O grupo DM apresentou uma densidade numérica neuronal maior em relação aos outros grupos, independente do segmento e idade. Por outro lado, quando se avaliou a área do perfil neuronal, os grupos de 42 dias exibiram uma área maior em relação aos animais de 21 dias, independente do segmento. Entre os grupos da mesma faixa etária, independente do segmento, a área neuronal dos animais foi maior no grupo NN, e menor no grupo DM. O grupo RM não recuperou esse parâmetro. A estimativa do número total de neurônios da NADH-d aumentou com a idade em todos os grupos. Considerando a mesma faixa etária, não foram detectadas diferenças entre os grupos. Já a estimativa neuronal para a NADPH-d foi maior no grupo DM, independentemente da idade. / Hunger and malnutrition are among the most devastating social and public health problems in developing countries, being related to socioeconomic problems such as poverty, misery, poor education, absence of health programs, deficit in basics sanitation and food taboos. The aim of the present study was to evaluate the effects of Mozambique populations regular diet (DM) and the protein refeeding in the components of the myenteric plexus of proximal and distal segments of the large intestine of Wistar rats 21 and 42 days old. Animals were divided into seven groups: control, AIN-93G diet with 20% casein addition (NN21 and NN42); Diet Mozambique (DM21 and DM42) and Diet Mozambique supplemented with 20% casein (NM21 and NM42) and re-nourished group (RM42), animals from DM21 group, 22 days old, that received the NM diet until they reach 42 days old. Proximal and distal segments samples of the large intestine were collected and submitted to NADH-diaforase and NADPH-diaforase histochemical techniques and to immunohistochemistry (ChAT, Substance P and VIP), in order to demonstrate myenteric neurons. The structure and ultra-structure of ganglion components and intestinal wall were assessed using routine histology techniques (HE, Picrosirius and Weigert) and scanning and transmission electron microscopy. Data was analyzed by the analysis of variance (ANOVA) and, depending on the parameter to be assessed, two or three factors were used (group, age and bowel segment). When necessary, multiple comparisons by Bonferroni or Tukey methods were applied, considering p &lt;0.05 as significance level. Qualitative analysis showed that all groups, regardless of age (21 and 42 days), and intestinal segments (proximal and distal) showed histological layers and their constituents preserved. RM group did not recovered this parameter. DM group animals showed the smallest values for the following parameters: weight and length; metabolic data; intestinal mucosa and wall area; intestine length and area. Refeeding did not recovered these parameters. Type I collagen fibers were most frequent in DM group, whereas type III prevailed in RM group. Elastic fibers were not detected in the capsule of myenteric ganglion of DM group at 21 and 42 days. DM group showed low immune reactivity of myenteric neurons to ChAT, SP and VIP. As regards to ultrastructural aspects, DM group showed slow cellular development. Besides, NADH-d and NADPH-d analysis exhibited increased numeric neuronal density in 21 days old animals compared to 42 days old animals, despite segments. DM group showed higher neuronal numeric density than other groups, regardless of segment and age. On the other hand, when evaluating the neuronal profile area, 42 days groups showed greater area than 21 days animals, with both techniques and regardless of segment. Furthermore, DM group showed significantly lower neuronal area compared to the other groups, regardless of intestinal segment. RM group did not recovered this parameter. Total number of neurons directly increased according to age in all groups. No difference was found between groups of same age. NADPH-d neuronal estimative was higher in DM group, regardless of age.

O Sistema nervoso entérico está localizados entre as camadas constituintes das paredes do trato gastrintestinal, entre as camadas musculares longitudinal e circular, que se estende por todo o trato digestório, desde o esôfago até o reto. Desordens gastrintestinais são complicações comuns causadas pela lesão térmica. A presente pesquisa avalia, em estômagos de ratos alterações na mucosa e no plexo mioentérico submetidos à lesão térmica corporal. O número de neurônios NADH-d e NADPH-d aumentaram significativamente nos animais queimados. Analisando a média da área do perfil dos neurônios NADH-dr e NADPH-dr evidenciaram uma diminuição significativa de 26% e 24%, respectivamente, na área do perfil dos neurônios dos animais queimados. Assim, associados o VIP o NO e a acetilcolina se apresentaram de maneira a interferir no esvaziamento gástrico causando ulcerações que foram observadas pela técnica da MEV na mucosa gástrica. Com esses dados, pode-se concluir que a LTC interfere no plexo mioentérico do estômago de ratos causando uma gastroparesia. / The enteric nervous system is located among the layer constituents of the gastrintestinal tract. Between the longitudinal and circular muscle layers, which extend throughout the digestory tract from the esophagus to the rectum. Gastrintestinal disorders are common complications caused by burn injury. This research evaluates, in stomach of rats changes in the mucosal and myenteric plexus, subjected burn injury. The number of neurons NADH-d and NADPH-d significantly increased in burned animals. Analyzing the average area of the profile of the neurons NADH-dr and NADPH-dr, showed a significant decrease of 26% and 24%, respectively, in the area of the profile of the neurons of the burned animals. Thus, the association of VIP, NO and acetylcholine is presented so as to interfere with gastric emptying causing changes in the mucosal wich were observed by the technique of MEV. With this data, it can be conclude that the burn injury interferes in the myenteric plexus of the stomach of rats causing a gastroparesis.

O plexo mioentérico é uma vasta rede de nervos e gânglios localizado entre as camadas longitudinal e circular da túnica muscular externa de todo o trato gastrintestinal (TGI). A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma miopatia ligada ao cromossomo X causada pela ausência da distrofina que, além dos evidentes efeitos degenerativos no músculo esquelético, causa severas alterações do TGI. No entanto as causas dessas alterações não são claras. Pesquisadores demonstraram que a distrofina é expressa nas fibras musculares lisas e também nos neurônios do plexo mioentérico, todavia não existe um consenso sobre o papel desta nessas estruturas. Desta forma pretende-se estudar os componentes do plexo mioentérico do intestino delgado de camundongos mdx (o modelo animal da DMD) nas idades de 4 e 10 semanas e de seus respectivos controles, camundongos C57BL/10. Os animais de ambos os grupos tiveram o intestino delgado retirado e seccionado em segmentos oral, médio e aboral para posterior avaliação através das técnicas histoquímicas de evidenciação neuronal: NADH-d, NADPH-d e AChE. Além disso, a musculatura lisa e os neurônios do plexo mioentérico foram analisados por MET. A análise quantitativa mostrou que o grupo MDX4 apresentou uma área total do intestino delgado significativamente maior que o C4 (p<0,05). Para as técnicas da NADH-d e NADPH-d foi observado um gradiente crescente de densidade numérica neuronal, no sentido oral-aboral, para todos os grupos estudados. O grupo MDX4 apresentou uma densidade neuronal significativamente menor que o C4 (p<0,05), todavia MDX10 e C10 foram iguais. Além disso, a densidade neuronal dos grupos de 10 semanas foi significativamente menor que dos de 4 semanas para ambas as técnicas (p<0,05). Em relação à estimativa do número total de neurônios, MDX10 e C10 apresentaram uma significativa redução de neurônios NADH-d positivos, quando comparada à dos grupos MDX4 e C4 (p<0,05), porém, para os neurônios NADPH-d positivos, a estimativa dos grupos de 10 semanas foi estatisticamente superior que à dos de 4 semanas (p<0,05). O grupo MDX4 apresentou uma área do perfil de neurônios nitrérgicos significativamente maior que o C4 (p<0,05). Na técnica da NADH-d, não foi detectada diferença significativa relativa à esse aspecto. Comparativamente ao grupo C4, os neurônios do grupo MDX4 não apresentaram intensa reatividade a AChE, mas foram iguais em 10 semanas. Referente à ultra-estrutura dos neurônios, esta apresentou-se preservada em todos os grupos, no entanto as fibras musculares lisas do grupo MDX apresentaram alterações morfológicas. / The myenteric plexus is an extensive network of nerve strands and ganglia located between the outer longitudinal and inner circular muscle layers of the external muscle coat of the gastrointestinal tract (GI). Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a X-linked degenerative muscular myopathy caused by the absence of dystrophin which, apart from the obvious degenerative effects in skeletal muscle, causes severe alterations of gastrointestinal (GI) tract. However the causes of these changes remain unclear. Researchers have shown that dystrophin is expressed in both smooth muscle fibers and myenteric plexus neurons, however there is no consensus on the role of it in these structures. Thus, we intend to study the components of the myenteric plexus of the small intestine of mdx mice (an animal model for DMD) at the ages of 4 and 10 weeks and their respective controls, C57BL/10 mice. The animals of both groups had the small intestine removed and sectioned into oral, middle and aboral segments for further evaluation by histochemical techniques of neuronal evidencing: NADH-d, NADPH-d and AChE. In addition, smooth muscle and myenteric plexus neurons were analyzed by TEM. The quantitative analysis showed that the MDX4 group had a significantly higher small intestine total area than the C4 (p <0.05). For the techniques of NADH-d and NADPH-d was observed an increasing gradient of neuronal numerical density, in the oral-aboral direction, for all groups. The MDX4 group showed a significantly lower neuronal density than C4 (p<0.05), however MDX10 and C10 were the same. In addition, the neuronal density of 10 weeks groups was significantly lower than those of 4 weeks for both techniques (p <0.05). Considering the total estimative number of neurons, MDX10 and C10 showed a significant reduction of NADH-d positive neurons, compared to groups MDX4 and C4 (p <0.05), but for the NADPH-d positive neurons, the estimative of 10 weeks groups was statistically higher than that of 4 weeks (p <0.05). The MDX4 group showed an nitrergic neurons profile area significantly higher than the C4 (p <0.05). In the technique of the NADH-d, no significant difference was detected on this aspect. Compared to the C4 group, neurons of MDX4 group did not show intense AChE reactivity, but they were equal in 10 weeks. Concerning the neurons ultrastructure, it was preserved in all groups, however the smooth muscle fibers of MDX group showed morphological changes.