Introducció: La dieta és un determinant fonamental del nostre estat de salut/malaltia, i és un dels principals factors que contribueixen al desenvolupament de l’obesitat. Per això, seria interesant disposar de biomarcadors de fàcil obtenció per determinar com afecta la dieta al nostre metabolisme. Interessen especialment els biomarcadors primerencs d’obesitat, ja que permetrien aplicar estratègies de prevenció abans de que aparegui la malaltia. L’objectiu principal d’aquest projecte de tesi consisteix en analitzar la utilitat d’una fracció de cèl•lules de la sang, les cèl•lules mononuclears de sang perifèrica (PBMC) com a eina en la recerca de biomarcadors per la prevenció o tractament de l’obesitat utilitzant rosegadors com a model experimental. Contingut de la investigació: En primer lloc hem estudiat la capacitat de les PBMC de reflectir les alteracions de la homeòstasi energètica durant el desenvolupament d’obesitat induïda per dieta, analitzant la seva resposta a canvis en les condicions d’alimentació (dejuni i realimentació), així com hem avaluat si les PBMC poden reflectir la pèrdua de pes i la recuperació metabòlica quan es substitueix una dieta obesogénica per una dieta equilibrada i saludable. Els resultats obtinguts mostren que les PBMC son un bon indicador de les adaptacions metabòliques al dejuni i realimentació, així com de la insensibilitat a canvis en les condicions d’alimentació que es dona a animals obesos, des de l’inici del desenvolupament de la malaltia. A més, aquestes cèl•lules poden reflectir la recuperació metabòlica associada a la pèrdua de pes, com la recuperació de la resposta al dejuni a nivell de paràmetres sèrics i d’expressió gènica. Les PBMC d’animals obesos alimentats amb dietes hiperlipídiques reflecteixen també alteracions en l’expressió basal de gens implicats en diferents rutes metabòliques relacionades amb el control del pes corporal i en els processos inflamatoris, proporcionant un perfil obesogènic característic. Per una altre banda hem analitzat si les PBMC poden reflectir l’activació del teixit adipós marró o la marronització del teixit adipós blanc (noves dianes d’interès en el tractament de l’obesitat) en resposta a la ingesta de dietes obesogèniques o com a resultat de l’exposició al fred. Els resultats d’aquest segon objectiu mostren com, tant les dietes obesogèniques com l’exposició al fred indueixen l’expressió de marcadors de adipòcits marrons i d’adipòcits brite en PBMC, reflectint la marronització que es produeix en el teixit adipós blanc. Aquestes cèl•lules sanguínies es perfilen doncs com un material biològic d’interès per analitzar components nutricionals o farmacològics que puguin induir la remodelació del teixit adipós blanc a marró o bé activar el teixit adipós marró augmentant així la capacitat dissipadora d’energia, obrint noves perspectives en el tractament de l’obesitat. Conclusió: Les PBMC son una eina idònia per l’estudi de la homeòstasis energètica, y constitueixen una font biomarcadors primerencs d’obesitat de fàcil obtenció, útils per estudiar el desenvolupament d’estratègies per la prevenció i tractament d’aquesta patologia i les seves complicacions. A més, les PBMC reflecteixen el procés de marronització del teixit adipós induït per diferents estímuls, tals com la ingesta de dietes riques en greixos o bé la exposició al fred. En base a aquests resultats, podem afirmar que les PBMC generen noves possibilitats terapèutiques i proporcionen un material interesant per la identificació de biomarcadors primerencs de malalties que poden resultar d’utilitat a humans. / Introducción: La dieta es un determinante fundamental de nuestro estado de salud/enfermedad, y es uno de los principales factores que contribuyen al desarrollo de la obesidad. Por ello, sería interesante disponer de biomarcadores de fácil obtención para determinar cómo afecta la dieta a nuestro metabolismo. Interesan especialmente los biomarcadores tempranos de obesidad, ya que permitirían aplicar estrategias de prevención antes de que aparezca la enfermedad. El objetivo principal de este proyecto de tesis consiste en analizar la utilidad de una fracción de células de la sangre, las células mononucleares de sangre periférica (PBMC), como herramienta en la búsqueda de biomarcadores para la prevención o tratamiento de la obesidad usando roedores como modelo experimental. Contenido de la investigación: En primer lugar hemos estudiado la capacidad de las PBMC de reflejar las alteraciones de la homeostasis energética durante el desarrollo de obesidad inducida por dieta, analizando su respuesta a cambios en las condiciones de alimentación (ayuno y realimentación), y hemos evaluado si las PBMC pueden reflejar la pérdida de peso y la recuperación metabólica cuando se sustituye una dieta obesogénica por una dieta equilibrada y saludable. Los resultados obtenidos muestran que las PBMC son un buen indicador de las adaptaciones metabólicas al ayuno y realimentación, así como de la insensibilidad a cambios en las condiciones de alimentación que se dan en animales obesos, alimentados con una dieta obesogénica (dieta de cafetería), desde el inicio del desarrollo de esta enfermedad. Además, estas células son capaces de reflejar la recuperación metabólica asociada a la pérdida de peso, como la respuesta al ayuno a nivel de parámetros séricos y de expresión génica. Las PBMC de animales obesos alimentados con dietas hiperlipídicas reflejan también alteraciones en la expresión basal de genes implicados en diferentes rutas metabólicas relacionadas con el control del peso corporal y en los procesos inflamatorios, proporcionando un perfil obesogénico característico. Por otra parte hemos analizado si las PBMC son capaces de reflejar la activación del tejido adiposo marrón o la marronización del tejido adiposo blanco (nuevas dianas de interés en el tratamiento de la obesidad) en respuesta a la ingesta de dietas obesogénicas o como resultado de la exposición al frío. Los resultados de este segundo objetivo muestran como, tanto las dietas obesogénicas como la exposición al frío inducen la expresión de marcadores de adipocitos marrones y de adipocitos brite en PBMC, reflejando la marronización que se produce en el tejido adiposo blanco. Estas células sanguíneas se perfilan pues como un material biológico de interés para analizar componentes nutricionales o farmacológicos que puedan inducir la remodelación del tejido adiposo blanco a marrón o bien activar el tejido adiposo marrón aumentando así la capacidad disipadora de energía, lo cual abre nuevas perspectivas en el tratamiento de la obesidad. Conclusión: Las PBMC son una herramienta idónea para el estudio de la homeostasis energética, y constituyen una fuente fácilmente obtenible de biomarcadores tempranos de obesidad, útiles para estudiar el desarrollo de estrategias para la prevención y tratamiento de esta patología y sus complicaciones. Además las PBMC reflejan el proceso de marronización del tejido adiposo inducido por diferentes estímulos, tales como ingesta de dietas ricas en grasa o bien la exposición al frío. En base a estos resultados, podemos afirmar que las PBMC generan nuevas posibilidades terapéuticas y proporcionan un material interesante para la identificación de biomarcadores tempranos de enfermedad que pueden resultar de utilidad en humanos. / Introduction: Diet is a major determinant of our health/disease status, and it is one of main factors contributing to the development of obesity. Then, it would be interesting to dispose of easily obtainable biomarkers to determine how the diet affects our metabolism. Particularly, early biomarkers of obesity are of special interest, since they would allow implementing prevention strategies before the appearance of the disease. This thesis is focused in the analysis of the utility of a blood cell fraction, the peripheral blood mononuclear cells (PBMC), as a source of obesity biomarkers, used for the prevention or treatment of obesity using rodents as animal model. Research content: First, we have studied the ability of PBMC to reflect energy homeostatic impairment during the development of diet-induced obesity, testing their response to changes in feeding conditions (fasting and re-feeding), as well as testing PBMC capacity to reflect metabolic recovery associated to weight lost in after switching an obesogenic to a control balanced diet. Our results show that PBMC are good indicators of metabolic adaptations to fasting and re-feeding, as well as of fasting insensibility observed in cafeteria-obese animals since early stages of obesity development. Moreover, these cells are able to reflect the metabolic recovery associated to weight loss, as recovery of fasting response of serum parameters and of gene expression. PBMC of animals fed hyperlipidic diets also reflect alteration in basal expression of genes involved in different pathways related to body weight control and in inflammatory processes, providing a characteristic obesogenic gene expression profile. On the other hand, we have analysed the ability of PBMC to reflect brown adipose tissue activation or white adipose tissue browning (new focus of interest in obesity treatment) in response to the intake of obesogenic diets or as a result of cold exposure. The results of this second aim show how the intake of obesogenic diets, as well as cold exposure, can induce the expression of brown/brite adipocyte markers in PBMC, reflecting the browning process that occurs in white adipose tissue. Thus, these blood cells constitute a suitable biological material for the analysis of nutritional or pharmacological compounds that could induce white to brown adipose tissue remodelling or activate brown adipose tissue, increasing in this way energy dissipating capacity, opening new perspectives for obesity treatment. Conclusion: PBMC are a good tool for energy homeostatic studies, and constitute an easily obtainable source of early obesity biomarkers useful to study the development of strategies for the prevention and treatment of obesity and related diseases. Moreover, PBMC reflect the white adipose tissue browning process induced by different stimuli, such as the intake of fat-rich diets or cold exposure. According to these results we can state that PBMC offer new therapeutic possibilities and provide an interesting material to identify early markers of disease, which can be useful in human studies.

Introduction A growing body of evidence, from epidemiological studies in humans and animal models, indicate that maternal health and nutritional status during gestation and lactation can program the propensity to develop obesity in their offspring. Huge efforts are now being directed toward understanding the molecular mechanisms underlying this developmental programming. Identification of these mechanisms could give some clues about potential strategies to prevent or revert programmed propensity to develop obesity, and may help in the identification of early biomarkers. Therefore, the main aim of this PhD-Thesis has been: To characterize in rats the programming effects of moderate maternal energy restriction during pregnancy or lactation on the metabolic health of their offspring in terms of obesity and related metabolic alterations, as well as to identify new preventing strategies against programmed obesity and early biomarkers of metabolic health. Investigation content We have characterized an animal model previously described to exhibit higher propensity to develop obesity and related metabolic alterations ― the offspring of rat dams exposed to moderate food restriction during gestation (CRG) ― to find out some of the potential mechanisms underlying their negative outcomes. Expression levels of key energy homeostasis-related genes in the hypothalamus and adipose tissue, and the measurement of some circulating parameters, showed that these animals were programmed, already from early ages, for a lower capacity to respond to insulin and to central leptin action. This could explain the hyperphagia observed in these animals and the greater propensity for obesity, manifested particularly in males. Some of these programmed disturbances, such as the impaired insulin and leptin sensitivity, and the increased systolic blood pressure, characteristic of CRG-animals, were reverted by enhancing hepatic fatty acid oxidation at early ages, through adeno-associated virus-mediated gene transference of the cDNA of Cpt1am (encoding for a permanently active form of CPT1A insensitive to its physiological inhibitor malonyl-CoA). Unlike calorie restriction during gestation, we show here that moderate calorie restriction in rat dams during lactation protects their offspring (CRL) against diet-induced obesity and related metabolic alterations, such as dyslipidemia, insulin resistance and hyperleptinemia. This condition during lactation determines early changes at gene expression level in WAT and liver, affecting lipogenic and oxidative capacity and increasing their sensitivity to the peripheral effects of leptin and insulin. Some of these adaptations were partially maintained in adulthood. Adult CRL-animals showed gender-dependent changes at gene expression level in adipose tissue and hypothalamus, suggesting that males were more protected against high-fat diet induced peripheral insulin resistance and they also showed improved capacity to respond centrally to leptin, while CRL-females were programmed for a better sensitivity to the peripheral actions of leptin and to the central action of insulin. We used this animal model to identify early transcriptome-based biomarkers of improved metabolic health by whole-genome microarray analysis in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Concerning the factors potentially involved in the benefits of maternal calorie restriction during lactation on their offspring, the diminished content of markers of protein damage by oxidation and glycation found in breast milk from CRL-dams, in comparison to milk from controls, could be relevant. Conclusion Maternal nutrition during the perinatal period may be an important determinant of insulin and leptin sensitivity in their offspring. While calorie restriction during pregnancy programs their offspring for a lower capacity to respond to insulin and to central leptin action, the offspring of calorie restricted lactating dams show enhanced sensitivity to these hormones. Expression levels in blood cells of a set of genes are proposed as potential early biomarkers of metabolic health, and hence may provide a valid biological readout for the study of metabolic processes in humans. / Introducción Numerosas evidencias, procedentes de estudios epidemiológicos en humanos y de modelos animales, indican que la salud materna y su estado nutricional durante la gestación y la lactancia pueden programar la propensión a desarrollar obesidad en la descendencia. Se están llevando a cabo grandes esfuerzos para entender los mecanismos moleculares responsables de dicha programación metabólica. La identificación de los mecanismos responsables podría dar ciertas pistas para el desarrollo de estrategias que permitan prevenir o revertir dicha propensión a desarrollar obesidad, y también podría ayudarnos en la identificación de biomarcadores tempranos de salud metabólica. Por consiguiente, el principal objetivo de esta tesis doctoral ha sido: Caracterizar en ratas los efectos de una restricción energética materna moderada durante la gestación o la lactancia sobre la salud metabólica de la descendencia, en relación a la obesidad y las alteraciones metabólicas asociadas, así como también identificar nuevas estrategias de prevención frente la programación de la obesidad y nuevos biomarcadores tempranos de salud metabólica. Contenido de la investigación Hemos caracterizado un modelo animal, que previamente se había descrito que presentaba una mayor propensión a desarrollar obesidad y alteraciones metabólicas asociadas – las crías de ratas sometidas a una restricción calórica moderada durante la gestación (CRG) – para identificar algunos de los mecanismos potencialmente responsables de sus efectos negativos. Los niveles de expresión de genes claves relacionados con la homeostasia energética en el hipotálamo y el tejido adiposo, y el análisis de ciertos parámetros circulantes, revelaron que estos animales estaban programados, ya desde edades tempranas, para una menor respuesta a la insulina y a la acción central de la leptina. Esto podría explicar la hiperfagia observada en estos animales y la mayor propensión a la obesidad, que presentan particularmente los machos. Algunas de estas alteraciones programadas, tales como la alteración de la sensibilidad a la insulina y a leptina, y la elevada presión sistólica, característica de los animales CRG, se vieron revertidas al favorecer el incremento de la oxidación hepática de ácidos grasos, en edades tempranas, a través de la transferencia génica, mediada por vectores virales adeno-asociados, del ADNc de la Cpt1am (que codifica para una forma permanentemente activa de la CPT1A, insensible a su inhibidor fisiológico malonil-CoA). A diferencia de la restricción calórica durante la gestación, observamos que la restricción calórica moderada en ratas madre durante la lactancia protege a su descendencia (CRL) frente al desarrollo de obesidad inducida por la dieta y frente al desarrollo de alteraciones metabólicas asociadas, tales como la dislipidemia, la resistencia a la insulina y la hiperleptinemia. Esta condición durante la lactancia determina cambios tempranos a nivel de expresión génica en el tejido adiposo y el hígado, afectando la capacidad lipogénica y oxidativa, e incrementando la sensibilidad a la acción periférica de la insulina y la leptina. Algunas de estas adaptaciones se mantuvieron parcialmente en edad adulta. Los animales CRL adultos mostraron cambios a nivel de expresión génica en el tejido adiposo y en el hipotálamo que fueron dependientes del sexo, sugiriendo que los machos estaban más protegidos frente a la resistencia periférica a la insulina inducida por una dieta hiperlipídica, así como también mostraron una capacidad mejorada para responder a la leptina a nivel central; en cambio, las hembras CRL estaban programadas para una mejor sensibilidad a la acción periférica de la leptina y a la acción central de la insulina. Utilizamos este modelo animal para identificar marcadores tempranos de transcripción indicadores de salud metabólica mejorada mediante el análisis por microarray de células mononucleares de sangre periférica (PBMCs). Con respecto a los factores que podrían estar potencialmente implicados en los efectos beneficiosos de la restricción calórica durante la lactancia sobre las crías, el menor contenido de marcadores de daño proteico por oxidación y glicación hallado en la leche de madres CRL, en comparación con la leche de madres control, podría ser relevante. Conclusión La nutrición materna durante el periodo perinatal puede ser un determinante importante de la sensibilidad a la insulina y la leptina de sus crías. Mientras que la restricción calórica durante la gestación programa a las crías para una menor capacidad de respuesta a la inulina y a la acción central de la leptina, las crías de madres expuestas a una restricción calórica moderada durante la lactancia muestran una sensibilidad mejorada a estas hormonas. Se han identificado un grupo de genes cuyos niveles de expresión en células sanguíneas podrían considerarse como potenciales marcadores tempranos de salud metabólica, pudiendo proporcionar una herramienta biológica válida para el estudio de procesos metabólicos en humanos. / Introducció Nombroses evidències, procedents d’estudis epidemiològics en humans i de models animals, indiquen que la salut materna i el seu estatus nutricional durant la gestació i la lactància poden programar la propensió de la descendència a desenvolupar obesitat. S’estan duent a terme grans esforços per entendre els mecanismes moleculars responsables d’aquesta programació metabòlica. La identificació d’aquests mecanismes podria donar-nos certes pistes per al desenvolupament d’estratègies que permetin prevenir o revertir la propensió programada a desenvolupar obesitat, i també podria ajudar-nos en la identificació de biomarcadors primerencs de salut metabòlica. Per això, el principal objectiu d’aquesta tesis doctoral ha estat: Caracteritzar en rates els efectes d’una restricció energètica moderada a les mares durant la gestació o la lactància sobre la salut metabòlica de la descendència, en relació a l’obesitat i les alteracions metabòliques associades, així com també identificar noves estratègies de prevenció enfront a la programació de l’obesitat i nous biomarcadors primerencs de salut metabòlica. Contingut de la investigació Hem caracteritzat un model animal, que prèviament se va veure que exhibia una major propensió a desenvolupar obesitat i alteracions metabòliques associades – les cries de rates sotmeses a una restricció calòrica moderada durant la gestació (CRG) – per identificar alguns dels mecanismes potencialment responsables dels seus efectes negatius. Els nivells d’expressió de gens clau relacionats amb la homeòstasi energètica a l’hipotàlem i al teixit adipós, i l’anàlisi de certs paràmetres circulants, varen mostrar que aquests animals estaven programats, ja des d’etapes primerenques de la vida, per una menor resposta a la insulina i a la acció central de la leptina. Això podria explicar la hiperfàgia observada en aquests animals i la major propensió a l’obesitat, que presenten particularment els mascles. Algunes d’aquestes alteracions programades, com ara l’alteració de la sensibilitat a la insulina i a la leptina, i l’elevada pressió sistòlica, característica dels animals CRG, es van veure revertides en afavorir l’increment de la oxidació hepàtica dels àcids grassos, a edats primerenques, a través de la transferència gènica, mitjançant vectors virals adeno-associats, de l’ADNc de la Cpt1am (que codifica per una forma permanentment activa de la CPT1A, insensible al seu inhibidor fisiològic, el malonil-CoA). A diferència de la restricció calòrica durant la gestació, observarem que la restricció calòrica moderada en rates mare durant la lactància, protegeix a la seva descendència (CRL) enfront del desenvolupament d’obesitat induïda per la dieta i el desenvolupament d’alteracions metabòliques associades a l’adultesa, com ara la dislipèmia, la resistència a la insulina i la hiperleptinèmia. Aquesta condició durant la lactància determina canvis primerencs a nivell d’expressió gènica en el teixit adipós i en el fetge, afectant la capacitat lipogènica i oxidativa, i incrementant la sensibilitat a la acció perifèrica de la insulina i la leptina. Algunes d’aquestes adaptacions se varen mantenir parcialment en edat adulta. Els animals adults CRL varen mostrar canvis en els nivells d’expressió gènica en el teixit adipós i a l’hipotàlem, que varen ser dependents del sexe, suggerint que els mascles estaven més protegits enfront a la resistència perifèrica a la insulina induïda per una dieta hiperlipídica, i també mostraren una capacitat millorada per respondre a la leptina a nivell central; en canvi, les femelles CRL estaven programades per a una millor sensibilitat a l’acció perifèrica de la leptina i a la acció central de la insulina. Utilitzarem aquest model animal per a la identificació de biomarcadors primerencs de transcripció, indicadors de salut metabòlica millorada, mitjançant l’anàlisi per microarray en cèl•lules mononuclears de sang perifèrica (PBMCs). Pel que fa als factors que podrien estar potencialment implicats en els efectes beneficiosos de la restricció calòrica materna durant la lactància sobre la descendència, el menor contingut de marcadors de dany proteic per glicació i d’oxidació trobat a la llet de mares CRL, en comparació amb la llet de mares control, podria ser rellevant. Conclusió La nutrició materna durant el període perinatal pot ser un determinant important de la sensibilitat a la insulina i a la leptina de les seves cries. La restricció calòrica durant la gestació programa a les cries per a una menor resposta a la insulina i a la acció central de la leptina; en canvi, les cries de mares exposades a una restricció calòrica moderada durant la lactància mostren una major sensibilitat a aquestes hormones. S’han identificat un grup de gens, els nivells de expressió dels quals en cèl•lules sanguínies se poden considerar com a potencials marcadors primerencs de salut metabòlica, podent proporcionar una eina biològica vàlida per a l’estudi dels processos metabòlics en humans.

En aquesta tesis s’ha estudiat la possibilitat d’emprar un sistema de destil•lació discontinu que consisteix en una columna de rebliment, formada d’una malla de coure, que permet augmentar l’eficàcia de separació, tant de l’etanol com d’altres compostos volàtils de fermentats de fruites como de vinasses del sector vitivinícola. En el treball experimental aquest sistema s’ha comparat amb la destil•lació tradicional amb alambí tipus charantais construït en coure. Las matèries primeres emprades han estat fermentats de pera de tres varietats diferents (Blanquilla, Conferencia i Bartlett), fermentats de kiwi de la varietat Hayward, i vinasses de raïm principalment de les varietats Albariño i Catalan Roxo. Els destil•lats obtinguts pels dos procediments han estat comparats tant analíticament como sensorialment. Els resultats obtinguts han mostrat que amb la columna de rebliment, els destil•lats de varietats de peres menys aromàtiques, como són la blanquilla i la conferencia, poden millorar el seu perfil aromàtic, i obtenir productes similars als de la pera Bartlett, més aromàtica. Respecte els destil•lats de kiwi, els productes obtinguts amb la columna de rebliment han estat millor valorats pels consumidors, presentant perfils aromàtics amb més concentració d’aromes positius, i menors aromes negatius. Respecte els destil•lats de vinassa la tendència mostrada ha estat similar als destil•lats de fruites. Finalment destacar el major rendiment obtingut en la destil•lació amb columna en etanol recuperat, permetent augmentar també la productivitat mitjançant la utilització de la columna de rebliment. / En esta tesis se ha estudiado la posibilidad de emplear un sistema de destilación discontinuo específicamente una columna empacada de un relleno formado con una malla de cobre que permite aumentar la eficacia de separación, tanto del etanol como de otros compuestos volátiles de fermentados tanto de frutas como de orujos del sector vitivinícola. En el trabajo experimental este sistema se ha comparado con la destilación tradicional con alambique tipo charantais construido en cobre. Las materias primas empleadas han sido fermentados de pera de tres variedades diferentes (Blanquilla, Conferencia y Bartlett), fermentados de kiwi de la variedad Hayward, y orujos de uva principalmente de las variedades Albariño y Catalan Roxo. Los destilados obtenidos por los dos procedimientos han sido comparados tanto analíticamente como sensorialmente. Los resultados obtenidos han mostrado que con la columna empacada, los destilados de variedades de peras menos aromáticas, como son la blanquilla y la conferencia, pueden mejorar su perfil aromático, y obtener productos similares a los de la pera Bartlett, más aromática. Respecto los destilados de kiwi, los productos obtenidos con la columna empacada han sido mejor valorados por los consumidores, presentando perfiles aromáticos con más concentración de aromas positivos, y menores aromas negativos. Respecto los destilados de orujo la tendencia mostrada ha sido similar a los destilados de frutas. Finalmente destacar el mayor rendimiento obtenido en etanol recuperado en la destilación con columna, permitiendo aumentar también la productividad mediante el empleo de la columna empacada. / This thesis studied the feasibility of using a discontinuous distillation system that consisted of a packed column (copper mesh in order to increase the separation efficiency, for both ethanol and other volatile compounds, of fermented fruits and grape pomace. In this experimental work the packed column has been compared with a traditional copper alembic (charantais). The raw materials employed have been fermented pear of three different varieties (Blanquilla, Conference and Bartlett), fermented kiwi (Hayward variety), and grape pomace (mainly Albariño and Catalan Roxo varieties). The distillates obtained by the two methods were compared both analytically and sensorially. The obtained results have shown that packed column distillation improves the aromatic profile of less aromatic pear varieties, such as Blanquilla and Conference, thus making possible to obtain similar distillates as with the Bartlett pear, a more aromatic variety. Regarding kiwi distillates, the products obtained with the packed column have been better appreciated by consumers, featuring aromatic profiles with more concentration of positive aromas, and minor negative aromas. With respect to grape pomace distillates, the trend has been similar to fruit distillates. Finally, it is worth to remark the greater yield obtained in recovered ethanol, thus allowing an increased productivity by means of packed column distillation.

This work is a contribution to a measuring system based on ultrasonic techniques to analyse and monitor, in real time, malolactic fermentation (MLF) in red wine, both at industrial and semi-industrial level. In the wine sector, MLF is of great importance due to its influence over wine organoleptic and sensory profiles, for it largely defines the quality of the final product. This process, whose main feature is that lactic acid bacteria (LAB) convert malic acid into lactic acid, is monitored, generally, in labs with analytical techniques. These techniques have several drawbacks, however, regarding costs, response times and chances to be included in production lines (they are off-line). On the contrary, the characteristics of the ultrasonic measuring method developed in this Thesis overcomes those and provides other advantages associated to this kind of technology (non-invasive, non-destructive, hygiene and accuracy among others). The main measuring instrument is the ultrasonic sensor, which has been designed and manufactured for measures ultrasonic propagation velocity. It is based on a transmission and reflection of ultrasonic waves technique (pulse-echo). Besides, a buffer rod is used to allow both signal conditioning (echoes) and also the coupling and start of the system in the big stainless steel tanks where the wine is kept during its production. Moreover, several methods to process the collected ultrasonic information are compared and classified according to their computing cost-precision relationship in order to facilitate selection depending on available resources. Regarding lab experiments, the system has proved an appropriate accuracy to detect variations when, in aqueous and hydroalcoholic solutions, lactic and malic acid levels of concentration are changed. It also works in the ultrasonic characterization of hydroalcoholic solutions when temperatures vary with different alcohol concentrations or to detect parameter changes such as turbidity. Regarding field tests, the behaviour of the ultrasonic propagation velocity is clearly related to several conventional parameters that are measured during MLF (malic and lactic acid concentrations, volatile acidity, bacteria population, etc.), which proves the usefulness of the system when predicting the end of the malolactic process on-line. This prediction shows a constant behaviour in ultrasonic propagation velocity when MLF is reaching the end, or none at all when LABs do not perform the process. The breaking point of the system in field tests is control over wine temperature. This parameter is influenced by variations on room temperature and changes generated by the process itself. Temperature must be precisely monitored in order to apply, when necessary, the corresponding compensations to ultrasonic results. The results confirm the feasibility of using ultrasonic waves to monitor the MLF of red wine, even the possibility to include them in a real time control system. / En este trabajo, se ha contribuido al desarrollo de un sistema de medida basado en técnicas de ultrasonidos para el análisis y monitorización, en tiempo real, de la fermentación maloláctica (FML) en el vino tinto elaborado a nivel semi-industrial e industrial. En el sector vinícola, la importancia e interés por la FML se debe a la gran influencia que ésta ejerce sobre los perfiles organolépticos y sensoriales del vino, ayudando a definir, en gran parte, la calidad del producto final. Caracterizado, principalmente, por la conversión del ácido málico en ácido láctico llevada a cabo por las bacterias ácido-lácticas (BAL), este proceso suele ser monitorizado a través de técnicas analíticas en laboratorios; técnicas que presentan algunos inconvenientes en cuanto a costes, velocidad de respuesta y oportunidad de ser incorporadas a líneas de producción (son off-line). Por el contrario, las características del método de medida por ultrasonidos desarrollado en esta Tesis, ofrecen la oportunidad de superar estas dificultades aportando, además, otras ventajas asociadas a esta clase de tecnología (no invasiva, no destructiva, higiene, precisión, etc.). Como pieza fundamental del sistema de medida, se lleva a cabo el diseño y fabricación de un sensor ultrasónico, que mide velocidad de propagación, basado en una técnica de transmisión y reflexión de ondas de ultrasonidos (pulso-eco). Igualmente, se aprovechan las ventajas aportadas por el mecanismo conocido como buffer rod para facilitar, por un lado, el acondicionamiento de las señales de interés (ecos) y por otro, el acoplamiento y puesta en marcha del sistema en los grandes tanques de acero inoxidable donde se deposita el vino durante su elaboración. Además, se realiza un estudio comparativo de diversos métodos aptos para el procesado de la información ultrasónica recopilada, clasificándolos por su relación precisión-coste computacional de tal forma que facilite una correcta elección de acuerdo a los recursos del sistema de medida donde se pretendan aplicar. En cuanto a los experimentos realizados, en laboratorio el sistema demuestra una adecuada sensibilidad para la detección de cambios cuando, sobre soluciones acuosas e hidroalcohólicas, se llevan a cabo variaciones en los niveles de concentración de los ácidos málico y láctico. Igualmente, su funcionamiento es adecuado para la caracterización ultrasónica de soluciones hidroalcohólicas cuando varía la temperatura ante diferentes concentraciones de alcohol o para detectar cambios en parámetros como la turbidez de las mezclas. A nivel de pruebas de campo, el comportamiento de la velocidad de propagación ultrasónica muestra una alta correlación con varios de los parámetros convencionales que suelen medirse durante la FML (concentraciones de ácidos málico y láctico, acidez volátil, población de bacterias, etc.), demostrando la utilidad del sistema en la predicción on-line del final del proceso maloláctico. Predicción que se caracteriza por un comportamiento prácticamente invariable de la velocidad cuando la FML va llegando a su final, o nulo cuando las BAL no cumplen con el proceso. Como punto crítico en la aplicación del sistema de medida en campo, encontramos el difícil control sobre la temperatura del vino, parámetro que se ve influenciado por las variaciones de la temperatura ambiente y por los propios cambios que genera el proceso en sí. Este aspecto obliga a monitorizar detalladamente dicho parámetro para, de ser necesario, aplicar las correspondientes compensaciones a los resultados ultrasónicos. Con todos los resultados obtenidos, se demuestra la viabilidad de utilizar ondas de ultrasonidos para la monitorización de la FML del vino tinto, con posibilidades de inclusión en un sistema de control en tiempo real.

Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de mortalidad a nivel mundial. Aunque su origen es multifactorial, entre los factores de riesgo más destacables se encuentran el sobrepeso y la obesidad, así como niveles elevados de lípidos en sangre (dislipemias), cuyas causas más frecuentes son la inactividad física y los malos hábitos alimentarios. Más concretamente, las dietas malsanas suelen caracterizarse por un elevado consumo de calorías, sobre todo en forma de hidratos de carbono y grasa, y un bajo consumo de frutas y verduras. En consecuencia, existe un amplio consenso en torno a la importancia de reducir el consumo de alimentos con un alto contenido en grasa, especialmente en forma de grasas saturadas, trans y colesterol, ya que tienen un efecto hipercolesterolémico; y aumentar el consumo de frutas y verduras, debido a que son una buena fuente de micronutrientes esenciales y fibra. Sin embargo, las estadísticas demuestran que en la mayoría de países industrializados el consumo real de estos alimentos se aleja preocupantemente de las cantidades recomendadas. El consumo de dietas con una elevada presencia de fibra alimentaria se ha correlacionado con un descenso en la incidencia de las enfermedades cardiovasculares. Esto es debido a que su consumo está asociado a numerosos efectos beneficiosos, como la capacidad de reducir la absorción de grasa y los niveles de lípidos plasmáticos. No obstante, es importante tener en cuenta que no todas las fibras presentan las mismas propiedades beneficiosas y que el efecto sobre el metabolismo lipídico que tienen los ácidos grasos, principales constituyentes de la grasa de la dieta, puede diferir considerablemente. En base a estos antecedentes, en la presente Tesis Doctoral se estudió y comparó la capacidad de reducir de manera selectiva la absorción de grasa de fibras con diferentes características fisicoquímicas. Más concretamente, se estudió en cobayas el efecto de la goma guar parcialmente hidrolizada, la maltodextrina resistente a la digestión y el quitosano. Para ello, se determinó el efecto de estas fibras sobre la excreción de lípidos, haciendo especial énfasis en la excreción de esteroles neutros, ácidos biliares y, sobretodo, ácidos grasos. Adicionalmente, se evaluó su repercusión sobre el perfil lipídico de muestras biológicas como el plasma o el hígado. Los resultados demuestran que todas las fibras estudiadas presentan capacidad hipolipidémica, aunque ésta puede ser atribuible a diferentes mecanismos. De las fibras estudiadas sólo la fibra quitosano presenta capacidad fat-binding (ligando de grasa) selectiva, ya que muestra menor afinidad por los ácidos grasos saturados de cadenas largas en comparación con aquellos de cadenas más cortas o a los ácidos grasos insaturados. Como resultado de la capacidad fat-binding selectiva del quitosano se observan cambios en el perfil de ácidos grasos del hígado, y sobre todo del plasma, debido a que puede alterar la relación entre ácidos grasos poliinsaturados n-6 y n-3. En conclusión, la presente Tesis Doctoral permite obtener un mayor conocimiento sobre la capacidad hipolipidémica y los mecanismos de acción de fibras de gran interés en la industria alimentaria debido a su posible incorporación en alimentos o a su uso como complementos alimenticios. / Study of the selective fat-binding capacity of dietary fibers and its repercussion on lipid metabolism. Cardiovascular diseases are the leading cause of death in the world. Although its aetiology is multifactorial, high intakes of calories and fats, especially cholesterol-rich fats as well as saturated and trans fatty acids, are widely accepted as major contributing factors. Evidence shows that dietary fiber may play an important role in the prevention of CHD due to its capacity to lower plasma lipid concentrations. In general terms, this effect has mainly been associated with the capacity of dietary fiber to reduce carbohydrate absorption, fat digestibility and bile acid circulation. However, it is widely known that fatty acids, the main constituents of dietary fat, elicit different lipid metabolism responses. Moreover, the beneficial effect of dietary fiber depends on its physicochemical properties. The main aim of this Thesis was to compare the hypolipidemic effect and selective fat-binding capacity of different dietary fibers, namely partially hydrolyzed guar gum, digestion-resistant maltodextrin and chitosan. For this purpose, the effect of these fibers on fatty acid absorption and on neutral sterols and bile acid excretion was determined in guinea pigs. The repercussion of these fibers on the lipid profile of plasma and liver was also evaluated. All the dietary fibers in the study were able to increase lipid excretion, and thus reduce plasma lipids. However, only chitosan was able to selectively reduce fat absorption as its effect on fatty acid excretion was dependent on the chain length and unsaturation degree of the fatty acid. Consequently, chitosan was able to modify the fatty acid profile of liver and plasma, due to changes in the ratio of n-6 and n-3 polyunsaturated fatty acids. In conclusion, these results confirm that dietary fiber can exert different effects on lipid absorption and metabolism, and provide new insight into the hypolipidemic mechanisms of partially hydrolyzed guar gum, digestion-resistant maltodextrin and chitosan.

In food and pharma industry, fish oils are highly demanded due to the many associated health benefits of omega-3 fatty acids. However, the delivery of fish oil through food is a major challenge as this oil is susceptible to oxidation and to produce off-flavors. To prevent these undesired effects, microencapsulation techniques are used. Typically oil encapsulation is carried out by two steps (i) emulsion preparation (ii) drying. The main objective is to study the effect of the emulsification method, emulsion formulation, membrane type and microcapsule formulation on relevant physic-chemical parameters of fish oil microcapsules.The approach of the project is to combine, for the first time, the advantages of using a low energy emulsification technique (membrane emulsification) and spray drying to obtain food-grade fish oil microcapsules. The results show a clear improvement in the oil encapsulation efficiency (OEE) when decreasing the droplet size of the emulsion and increasing the amount of wall material. The combination of a polysaccharide with a protein has been found to improve protection against oxidation during storage of the microcapsules, while the addition of denatured proteins as a part of the microcapsule wall material enhances OEE but does not improve the mechanical strength of the microcapsules. / El aceite de pescado es altamente valorado en la industria alimentaria por su demostrada actividad en la prevención y tratamiento de numerosas patologías, asociada a su contenido en ácidos grasos omega-3. La incorporación de aceite de pescado en alimentos presenta algunas dificultades relacionadas con su rápida oxidación y su característico aroma y sabor. La encapsulación del aceite de pescado retrasa la oxidación y permite enmascarar sus propiedades sensoriales. Tradicionalmente, la encapsulación se lleva a cabo combinando una etapa de emulsificación seguida de secado por atomización. El objetivo principal del trabajo es estudiar el efecto del método de emulsificación y la formulación de la emulsión y las microcápsulas en los parámetros físico-químicos más relevantes de las microcápsulas. En este proyecto se combina por primera vez la emulsificación por membranas con el secado por atomización para obtener microcápsulas de aceite de pescado aplicables a la industria alimentaria. Los resultados muestran una clara mejora en la eficiencia de encapsulación del aceite cuando se reduce el tamaño de gota de la emulsión y se incrementa la cantidad de material de pared de las microcápsulas. La combinación de un polisacárido con una proteína para la formación de la pared mejora la estabilidad oxidativa de las microcápsulas durante el almacenamiento. Por otra parte la adición de proteínas desnaturalizadas para reforzar las paredes de las microcápsulas ha resultado en una mejora de la eficiencia de encapsulación de aceite pero no ha mejora su resistencia mecánica

Els extractes comercials de polifenols són molt utilitzats para formular aliments. La seva efectivitat, però, depèn de la seva capacitat per mantenir l’estabilitat i biodisponibilitat dels ingredients actius. L’encapsulació és una estratègia que permet aconseguir-ho. S’han investigat dos sistemes per encapsular un extracte ric en procianidines: emulsions aigua-en-oli-en-aigua (W1/O/W2) i microcàpsules sòlides (obtingudes per atomizació d’emulsions W1/O/W2). Per produir les emulsions s’utilitzà emulsificació amb membranes (ME) premix i, en particular, l’estudi es centrà en com la capa interfacial (O–W2) afecta l’estabilitat de les emulsions i l’alliberament de procianidines. Mitjançant ME premix es produïren emulsions O/W i W1/O/W2 estabilitzades amb un fracció proteica de sèrum de llet (WPI) i amb complexos WPI-carboximetil cel•lulosa (WPI–CMC), WPI-goma aràbiga (WPI–GA) i WPI–Quitosà (WPI–Chi). Mesures d’absorció mostraren que els complexos WPI–polisacàrid formen interfases de major gruix però menor densitat que les formades únicament per WPI. Les emulsions W1/O/W2 enriquides amb procianidines i estabilitzades amb complexos WPI–CMC, WPI–GA, o WPI–Chi retingueren al menys el 70% de las procianidines inicials en acabar el procés de ME premix. L’estabilitat de l’emulsió va dependre del tipus d’interfase i del pH de la fase W2. La velocitat d’alliberament de procianidines es va correlacionar amb el gruix de la interfase formada per WPI–polisacàrid: les interfases de major gruix disminueixen la velocitat d’alliberament. Totes les emulsions W1/O/W2 varen permetre produir microcàpsules de procianidines després d’una etapa d’atomització i recuperar l’estructura pròpia d’una emulsió doble en rehidratar-se. La composició de la interfase determinà la mida de partícula de les emulsions W1/O/W2 després de la rehidratació. En particular, el complex WPI–CMC fou capaç d’estabilitzar les gotes d’oli durant les distintes etapes de la producció de microcàpsules, malgrat que va retenir moderadament la migració de procianidines a través de la interfase O–W2. . / Los extractos comerciales de polifenoles son muy utilizados para formular alimentos. Su efectividad, sin embargo, depende de su capacidad para mantener la estabilidad y biodisponibilidad de los ingredientes activos. La encapsulación es una estrategia que permite conseguirlo. Se han investigado dos sistemas para encapsular un extracto rico en procianidinas: emulsiones agua-en-aceite-en-agua (W1/O/W2) y microcápsulas sólidas (obtenidas por atomización de emulsiones W1/O/W2). Para producir las emulsiones se empleó emulsificación por membranas (ME) premix y, en particular, el estudio se centró en cómo la capa interfacial (O–W2) afectó la estabilidad de las emulsiones y la liberación de procianidinas. Con ME premix se produjeron emulsiones O/W y W1/O/W2 estabilizadas con un fracción proteica de suero de leche (WPI) y con complejos WPI-carboximetil celulosa (WPI–CMC), WPI–goma arábiga (WPI–GA) y WPI–Quitosano (WPI–Chi). Medidas de adsorción mostraron que los complejos WPI–polisacáridos forman interfases de mayor espesor pero menor densidad que las formadas únicamente por WPI. Las emulsiones W1/O/W2 enriquecidas en procianidinas y estabilizadas con complejos WPI–CMC, WPI–GA, o WPI–Chi retuvieron al menos el 70% de las procianidinas iniciales tras el proceso de ME premix. La estabilidad de la emulsión dependió del tipo de interfase y del pH de la fase W2. La velocidad de liberación de procianidinas se correlacionó con el espesor de la interfase formada por WPI–polisacáridos: las interfases de mayor espesor disminuyen la velocidad de liberación. Todas las emulsiones W1/O/W2 permitieron producir microcápsulas de procianidinas después de una etapa de atomización y recuperar la estructura propia de una emulsión doble tras la rehidratación. La composición de la interfase determinó el tamaño de partícula de las emulsiones W1/O/W2 después de la rehidratación. En particular, el complejo WPI–CMC fue capaz de estabilizar las gotas de aceite durante las distintas etapas de la producción de microcápsulas pese a que retuvo, moderadamente, la migración de procianidinas a través de la interfase O–W2. / Commercial extracts rich in polyphenols are extensively used to formulate foods. Nevertheless, their effectiveness depends on preserving the stability and bioavailability of the active ingredients. Encapsulation is a strategy to meet these requirements. We have investigated two encapsulation systems to entrap a procyanidin-rich extract: water-in-oil-in-water (W1/O/W2) emulsions and solid microcapsules (spray dried W1/O/W2 emulsions). While premix membrane emulsification (ME) was used to produce these emulsions, we focused on how the interfacial layer (O–W2) affected emulsion stability and procyanidin release. Premix ME enabled to produce single and double emulsions stabilized with whey protein isolate (WPI), and WPI–Carboxymethyl cellulose (WPI–CMC), WPI–Gum Arabic (WPI–GA) and WPI–Chitosan (WPI–Chi) complexes. Adsorption measurements showed that WPI–polysaccharides interfaces form thicker but less dense layers than only WPI. In O/W emulsions, different interfacial structures made of WPI and CMC led to large differences in lipid oxidation. The negatively charged droplets of the emulsions stabilized with WPI–MC would attract positively charged transition metals, promoting lipid oxidation. Procyanidin-loaded W1/O/W2 emulsions stabilized by WPI–CMC, WPI–GA, or WPI–Chi complexes retained at least 70% of the initial procyanidins at the end of premix ME. Emulsion stability depended on the interfacial layer and the pH of the W2 phase. The release rate of procyanidins was correlated to the interfacial thickness of the WPI–polysaccharide layer: thicker layers lowered the release rate. All the W1/O/W2 emulsions were able to produce procyanidin-loaded microcapsules after spray drying and could all recover their W1/O/W2 emulsion structure upon rehydration. The interfacial composition affected particle size of W1/O/W2 emulsions after microcapsule rehydration. Particularly, WPI–CMC complex was able to truly stabilize the W1/O droplets during the different stages of microcapsule production although it moderately retained the migration of procyanidins through the O–W2 interface. For each type of encapsulation system, a tailor-made hydrophilic emulsifier is required to comply with the type of protection needed, the addenda used and the delivery conditions.

The aim of this study was to determine whether NIRS technology would be suitable to develop a control system to correct drying conditions in order to avoid the appearance of defects in the product. Several predictive models for moisture, aw, and the salt content on the surface of the products (dry-cured sausages and dry-cured hams) have been obtained for the entire process, and an on-line control of the drying process have been developed. / L’objectiu d’aquest treball ha estat determinar si la tecnologia NIRS és una tècnica adequada per poder desenvolupar un sistema de control de l’assecat que corregeixi les condicions de treball dels assecadors evitant l’aparició de defectes en el producte. S'han obtingut models de predicció de la humitat, la aw i el contingut de sal a la superfície dels productes (llonganissa i pernil curat) en tot el procés d’elaboració i s'ha desenvolupat un sistema de control on-line del procés d’assecat.

La documentació més antiga i extensa sobre la viticultura i l'elaboració del vi prové d'Egipte. on des de fa sis mil anys la vinya ja es cultivava al Delta del Nil. Malgrat això, el seu estudi històric i arqueològic encara presenta aspectes desconeguts. Amb el desenvolupament de les tècniques analítiques, tenim les eines per intentar conèixer les llacunes d'una part de la cultura de la civilització mediterrània més antiga: la cultura del vi a l'antic Egipte.El vi era un producte de prestigi a Egipte que consumien les classes benestants i la família reial. Des del Període Pre-dinàstic [4.000-3.150 aC] a les tombes egípcies s'hi dipositaven àmfores de vi com a ofrena per tal que el mort en pogués disposar també en el Més Enllà. Gràcies a què l'elaboració del vi es troba representada en escenes pintades a les parets de les tombes, podem conèixer com el preparaven. Durant el Regne Nou [1.543-1.078 aC] les àmfores s'identificaven de la mateixa manera com ara es fa amb les ampolles de vi. El nom del producte que trobem és vi [irp], però curiosament mai s'indicava si era blanc o negre. També existia un altre tipus de beguda anomenada Shedeh, que no té traducció, i de la qual no es coneix la seva matèria primera. És a partir d'aquestes omissions on s'inicia aquest estudi.Els objectius del treball són:1. Realitzar un estudi bibliogràfic sobre la viticultura i l'enologia a l'antic Egipte. 2. Verificar analíticament la presència de vi en àmfores de l'antic Egipte.- Realitzar anàlisis de l'àcid tartàric, compost característic del vi, en mostres procedents d'àmfores egípcies. - S'estudiaran àmfores d'entre tres i cinc mil anys d'antiguitat de les col·leccions del Museu Egipci del Caire i del Departament de l'Antic Egipte i Sudan del Museu Britànic de Londres. 3. Investigar quin vi s'elaborava a Egipte, blanc o negre. - Posar a punt un nou mètode per a la determinació de marcadors de vi en mostres arqueològiques. - Realitzar anàlisis de residus trobats a l'interior d'àmfores egípcies. 4. Conèixer quina era la matèria primera del producte que els antics egipcis guardaven en àmfores i anomenaven Shedeh. - Realitzar anàlisis d'un residu trobat a l'interior d'una àmfora inscrita Shedeh per saber si aquest s'elaborava a partir de raïm. RESULTATS I APLICACIONSMitjançant el nou mètode d'anàlisi de residus arqueològics per LC/MS/MS es pot demostrar la presència de vi en mostres arqueològiques [tant rascades de la ceràmica com residus secs dipòsits] identificant l'àcid tartàric. El mètode és adequat en l'estudi de mostres arqueològiques per la seva alta sensibilitat i gran selectivitat. La quantitat necessària per l'anàlisi és de només 2 mg.S'ha demostrat per primer cop en mostres arqueològiques que, mitjançant una oxidació alcalina l'àcid siríngic procedent de la malvidina, present en raïms i vins negres joves, s'allibera del polímer complex format al llarg del temps i es pot establir com a marcador de vi negre en residus arqueològics. Per primera vegada, s'ha estudiat el color del vi mitjançant la identificació de dos compostos marcadors de vi en arqueologia: l'àcid tartàric i l'àcid siríngic. Aquest treball també ha permès conèixer que a l'antic Egipte, durant la Dinastia XVIII [1.543-1.292 aC], s'elaborava vi blanc i vi negre, ambdós sota la mateixa denominació: irp. També s'ha pogut constatar que la matèria primera de la beguda egípcia Shedeh era el raïm negre. NOTA: Aquesta tesi ha estat publicada en suport paper per l'editorial Archaeopress: (http://www.archaeopress.com/searchBar.asp?QuickSearch=Guasch) / Wine was a highly appreciated drink in Ancient Egypt. Since the Early Dynastic period (3150-2900 BC), wine jars were placed in royal tombs as funerary meals. Wine offerings to deities performed by the Pharaoh were often shown on the walls of Egyptian temples. From the Old Kingdom period (2700-2200 BC,) Egyptian private tombs were decorated with daily scenes like the grape harvest and the winemaking. The color of the wine was not referred to on texts, papyrus or inscriptions on amphorae.A new method for the identification of tartaric acid, as a wine marker, and for the first time syringic acid, as a red wine marker, in archaeological samples from Egyptian vessels has been developed. The technique used combines the liquid chromatography with the mass spectrometry in tandem (LC/MS/MS). Owing to the special characteristics of the samples, such as the dryness and the small quantity available for analysis, it was necessary the method to be very sensitive and highly specific to detect these compounds at trace levels in the residues. Samples of residues found in wine jars belonging to king Tutankhamun's collection, at the Egyptian Museum in Cairo, have been analyzed. The results reveal that red and white wines were made at the end of the 18th Dynasty (about 1400 BC). Moreover, the botanical origin of the "shedeh" drink has been studied using the new method for archaeological samples. The analysis of a residue inside a well-preserved shedeh amphora from Tutankhamun's Burial chamber, revealed that the "shedeh" drink was made from red grapes, confirming the characteristic of "shedeh" was its particular elaboration. NOTE: Doctoral dissertation published in English by Archaeopress, "Wine in Ancient Egypt: a Cultural and Analytical Study", British Archaeological Reports, Internationl Series 1851, Oxford 2008, iX-72 p.http://www.archaeopress.com/searchBar.asp?QuickSearch=Guasch

OBJETIVOS: Determinar el efecto de una dieta enteral hipercalórica e hiperproteica sobre el crecimiento y la composición corporal en prematuros extremos. Valorar la aparición de efectos adversos secundarios. METODOS: Se plantea un estudio clínico longitudinal de asignación sistematizada tipo cohorte con cuatro grupos (LM, A, B y C) desde enero 2006 a enero 2008. Cada paciente es seguido durante 21 días. El estudio es aprobado por el Comité ético de investigación clínica del Hospital Clínic i Provincial de Barcelona. 25 prematuros extremos en recuperación son incluidos una vez son alimentados exclusivamente de forma enteral. Los pacientes alimentados mediante lactancia materna continúan siendo alimentados con leche humana fortificada (grupo LM). Los paciente alimentados con fórmula artificial son asignados de forma sistematizada a 3 grupos alimentados con fórmulas con diferente contenido proteico-calórico: Grupo A (leche estándar de prematuro: 130 kcal/kg/d y 3,7 g/kg/d), grupo B (150 kcal/kg/d y 4.2 g/kg/d), grupo C (150 kcal/kg/d y 4.7 g/kg/d). Se realiza una valoración antropométrica (peso, talla y perímetro craneal) y de composición corporal (masa grasa y masa libre de grasa) al inicio, a los 14 y 21 días de estudio. La composición corporal se determina mediante bioimpedanciometría. Se realizan controles clínicos y analíticos en busca de efectos adversos. RESULTADOS: La nutrición fue bien tolerada desde el punto de vista clínico y analítico, sin evidenciarse efectos adversos. El incremento de peso y de perímetro craneal fue superior en los grupos B y C que en los grupos A y LM. Mientras que el incremento de talla fue superior en los grupos LM, B y C que en el grupo A. La mayor ganancia de peso en los grupos B y C se produjo a expensas de una mayor acreción de masa grasa y masa libre de grasa. A pesar de un mayor aporte de proteínas en el grupo C que en el grupo B no se evidenció una mayor acreción de masa magra en el grupo C con respecto al grupo B. CONCLUSIÓN: Mayores aportes de proteína y calorías promueve un mayor crecimiento y una mayor acreción de masa grasa y masa libre de grasa sin efectos adversos secundarios. PALABRAS CLAVE: Prematuros extremos, nutrición, crecimiento, composición corporal, bioimpedanciometría eléctrica.