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As proteínas TKS-4 e TKS-5, formadoras de invadopódios, são expressas no ameloblastoma e tumor odontogênico cístico calcificanteHORTA, Moema Ferreira dos Reis 09 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-09 / Clínica Odontológica Especializada Atelier do Sorriso / Objetivos: O ameloblastoma é uma neoplasia odontogênica de grande relevância clínica, que embora raramente sofra transformação maligna, destrói de forma agressiva o tecido ósseo, além de apresentar altas taxas de recorrência. A invasividade local de neoplasias tem sido associada às proteínas TKs-4 e TKs-5 e à presença de invadopódios, que são protrusões que se formam na membrana celular. TKs-4 e TKs-5 participam na formação dessas protrusões que penetram na matriz extracelular e promovem a sua degradação.
Métodos e resultados: Neste estudo, a expressão de TKs-4 e TKs-5 foi avaliada, por imunohistoquímica, em 20 casos de ameloblastoma e 7 casos de tumor odontogênico cístico calcificante (TOCC). Os dois tumores expressaram essas proteínas, no entanto, houve uma maior expressão no ameloblastoma quando comparado ao TOCC (p<0,05). Quando se avaliou a expressão de TKs-4 e TKs-5 em células neoplásicas de ameloblastoma em relação ao estroma desta neoplasia foi encontrada uma diferença estatisticamente significante (p<0,001), sendo mais expressa nas células neoplásicas. Conclusões: Esses resultados indicam um possível papel de TKs-4 e TKs-5 na formação de invadopódios e no comportamento biológico do ameloblastoma.
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Efeitos da terapia fotodin?mica com aluminio ? cloro ftalocianina sobre a peroxida??o lip?dica e produtos antioxidantes em tecidos inflamados animaisVasconcelos, Roseane Carvalho 24 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / A terapia fotodin?mica (TFD) envolve a administra??o de um agente fotossensibilizador (FS) seguida pela aplica??o do laser, com comprimento de onda adequado, resultando em uma sequ?ncia de processos fotoqu?micos e fotobiol?gicos, que geram esp?cies reativas de oxig?nio (EROs). Este estudo avaliou, os efeitos da TFD com nanoemuls?o de alum?nio-cloro ftalocianina (AlClFc) sobre os n?veis de malondilde?do (MDA), glutationa (GSH), super?xido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), que representam indicadores envolvidos no estresse oxidativo e defesas antioxidantes. Para tanto, o estudo utilizou 120 ratas da esp?cie Rattus norvegicus, ra?a Wistar, distribu?das em 5 grupos experimentais: Saud?veis (S), com doen?a periodontal (DP), com doen?a periodontal e tratamento com o FS (F), com doen?a periodontal e tratamento com o laser (L) e com doen?a periodontal e tratamento com TFD (FL). Foi utilizado um modelo experimental de doen?a periodontal (DP) induzida por ligadura. Ap?s sete dias, da indu??o da DP, foram institu?dos os tratamentos, conforme os grupos. No grupo tratado, com TFD, foi aplicado 40?l do FS (5?M), seguida da irradia??o do laser diodo fosfeto de ?ndio-g?lio-alum?nio (InGaAlP - 660nm, 100J/cm2). As ratas sofreram eutan?sia no 7? e no 28? dia, ap?s o tratamento. Os esp?cimes teciduais foram removidos para an?lises histol?gicas, ensaios bioqu?micos e imuno-histoqu?mica. Os resultados histol?gicos exibiram, altera??es inflamat?rias, desorganiza??o do tecido conjuntivo e perda ?ssea alveolar, nos grupos com DP induzida. Os ensaios demonstraram, que os n?veis de MDA estavam mais elevados, nos grupos com DP induzida, que no grupo saud?vel. N?o existindo diferen?as estat?sticas significantes (p>0,05). N?veis elevados de GSH foram encontrados nas ratas saud?veis, com diferen?as estat?sticas significativas, nos grupos L (p=0,028) e FL (p=0,028), quando comparados com o grupo DP. Imuno-histoquimicamente, a SOD apresentou maior imunomarca??o nos grupos L e FL, comparados ao grupo saud?vel. Sem diferen?as estat?sticas significativas (p>0,05). GPx mostrou imunomarca??o significativamente menor no grupo DP, comparado ao saud?vel (p=0,05) e no grupo F, comparado ao DP (p<0,05). Os resultados apresentados sugerem discreta participa??o da TFD mediada por nanoemuls?o contendo AlClFc no estresse oxidativo. O protocolo utilizado, neste experimento, demonstrou maior influ?ncia da TFD sobre os mecanismos antioxidantes. / Photodynamic therapy (PDT) consists of a non-toxic photosensitizing agent (FS) administration followed by a laser source resulting in a sequence of photochemical and photobiological processes that generate reactive oxygen species (ROS) that damaging cells. The present work evaluated the effects of PDT nanoemulsion-aluminum chloride phthalocyanine (AlClFc) mediated on malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) levels, which represent indicators involved in oxidative stress and antioxidant defenses. For this purpose, this study used 120 female rats of the Rattus norvegicus species, Wistar race, divided into 5 groups: Healthy (H), with periodontal disease (PD), with periodontal disease and treatment with FS (F), with periodontal disease and treatment with the laser (L); and periodontal disease and treatment with PDT (FL). An experimental model for represent periodontal disease (PD) was induced by ligature (split-mouth). Seven days later the induction of PD, the treatments were instituted according to the groups. In the group treated with PDT was applied 40?l FS (5?M) followed by laser irradiation diode InGaAlP (660nm, 100J / cm2). The rats were sacrificed on the 7th and 28th day after treatment and tissue specimens were removed and subjected to histological, immunohistochemical methods and enzymatic colorimetric measurements with detection by UV / VIS spectroscopy. Inflammatory changes, connective tissue disorganization and alveolar bone loss were displaying in groups with PD induced. The enzyme dosages showed that MDA levels were higher in PD induced groups, with no statistically significant differences (p> 0.05). High levels of GSH were found in groups L (p = 0.028) and FL (p = 0.028) compared with PD group, with statistically significant differences. Immunohistochemistry for SOD showed higher immunostaining in L and FL groups, compared to the PD group without statistically significant differences (p> 0.05). GPx showed lower immunoreactivity in the DP group when compared to the other groups and statistically significant differences were observed between the DPxL groups (p <0.05). TFD administered in this experiment did not induce elevation of MDA levels significantly increased the GSH levels and showed intense immunostaining pada SOD and GPx, showing that this therapy does not accentuated lipid peroxidation, however, it was able to induce effects on the antioxidant defenses processes. The LBI therapy appeared to show photomodulatory promoting effects reduction of the MDA levels, increasing GSH levels and with intense immunostaining for SOD and GPx, demonstrating that laser therapy induced antioxidant effects.
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An?lise do comportamento das linhagens celulares SCC-25, SAS e HSC-3 frente ? presen?a dos exossomos derivados dos macr?fagos (TAMs) dos subtipos M1 e M2Demeda, Clarissa Favero 17 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Os exossomos s?o respons?veis pela comunica??o c?lula-c?lula e podem influenciar na progress?o tumoral, met?stase e efic?cia terap?utica. Dentre as c?lulas capazes de secretar exossomos est?o as c?lulas tumorais e as c?lulas imunes. Sabe-se que a presen?a das c?lulas imunes ? importante para erradicar os tumores. No entanto, achados recentes demonstram que a inflama??o pode promover o crescimento tumoral. Os macr?fagos associados a tumores (TAMs) s?o conhecidos por apresentarem diferentes subtipos, M1 e M2, capazes de secretarem exossomos. O presente estudo se prop?s a observar o comportamento dos exossomos derivados dos TAMs, dos subtipos 1 e 2, frente a cultura de c?lulas humanas SCC-25, HSC-3 e SAS derivadas de CE de l?ngua, por meio da an?lise da capacidade de invas?o, prolifera??o e viabilidade das c?lulas tumorais na presen?a dos exossomos. Observou-se que as microves?culas derivadas dos TAMs apresentam positividade para CD63, caracterizando-as como exossomos. Os exossomos dos TAMs do subtipo M2 foram os ?nicos a apresentarem marca??o para TGF-?, quando em compara??o com os exossomos M1, THP1 e das linhagens celulares de CE, sugerindo que os exossomos M2 podem ser respons?veis pela express?o de TGF-? nas c?lulas tumorais, uma vez que s?o internalizados. Nos ensaios de migra??o, observou-se que as c?lulas SCC-25 em presen?a de meio de cultura DMEM F/12, apresentaram maior capacidade de invas?o frente aos exossomos M2 (p?0,001), para concentra??o de 0,1 ?g/ml. Para as c?lulas HSC-3 e SAS, n?o foi observada rela??o estatisticamente significante entre a presen?a de exossomos cultivados juntamente com as c?lulas tumorais e a capacidade de invas?o celular (p>0,05). Quando os exossomos foram colocados no compartimento inferior do transwell, as c?lulas HSC-3 em presen?a dos exossomos M2 (1,0 ?g/ml) apresentaram maior capacidade de invas?o (p?0,001). O teste de viabilidade demonstrou que as c?lulas HSC-3 tornam-se mais vi?veis frente ? presen?a dos exossomos M2 (p?0,001) na concentra??o de 50 ?g/ml. Para as c?lulas SCC-25, o resultado foi o mesmo (p?0,05). A imunofluoresc?ncia demonstrou a internaliza??o dos exossomos nas linhagens celulares estudadas. Os achados sugerem que a presen?a de exossomos M2, frente ?s culturas de c?lulas de CE de l?ngua, pode ser um campo de pesquisa importante para futuros estudos com terapias-alvo. / Squamous cell carcinoma (SCC) of the oral tongue is one of the most common malignant lesions in the oral cavity and is characterized by presenting a locally invasive and aggressive behavior. The exosomes are responsible for cell-cell communication and may influence tumor progression, metastasis and therapeutic efficacy. Among the cells that can secrete exosomes are tumor cells and immune cells. It is known that the presence of immune cells is important to eradicate tumors. However, recent findings suggest that inflammation may promote tumor growth. The tumor associated macrophages (TAMs) are known to have subtypes, M1 and M2, that secrete exosomes. This study?s goal was to observe the behavior of derivatives TAMs exosomes, subtypes 1 and 2, against human cell culture SCC-25, HSC-3 and SAS derived from SCC of oral tongue, through the analysis of invasiveness, proliferation and viability of tumor cells in the presence of exosomes. It was observed that the microvesicles derived from TAMs are positive for CD63, characterizing them as exosomes. The exosomes of the M2 subtype TAMs were the only ones to present TGF-? marking, as compared with M1 exosomes, THP1 and SCC cell lines, suggesting that M2 exosomes may be responsible for TGF-? expression in tumor cells. In the migration tests, it was found that the SCC-25 cells in the presence of culture medium DMEM F / 12 showed higher invasion capacity in the presence of M2 exosomes (p?0,001) to a concentration of 0.1 ?g/ml. For HSC-3 and SAS cells, there was no significant statistical relationship between the presence of exosomes and invasiveness (p> 0.05) for the exosomes derived from TAMs. When the exosomes were placed in the lower compartment of the transwell, the HSC-3 cells in the presence of M2 exosomes (1.0 ?g/ml) had higher invasiveness (p?0,001). The viability test showed that HSC-3 cells became more viable in the presence of M2 exosomes (p?0.001) at a concentration of 50 ?g/ml. For SCC-25 cells, the result was the same (p?0.05). Immunofluorescence showed the internalization of exosomes in the cell lines studied. These findings suggest that the presence of M2 exosomes in the SCC of the oral tongue cell cultures may be an important research field for future studies of targeted therapies.
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Imunossupressão das proteínas XPF e XRCC1 em carcinoma epidermoide de língua oral e lábio inferiorMoreira, Deborah Gondim Lambert 23 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-23 / O sistema de reparo do DNA envolve genes e proteínas essenciais à manutenção da
integridade do genoma e consequente controle de diversos processos celulares. Alterações
nesses genes e proteínas estão envolvidas no desenvolvimento de tumores, em sua evolução e
na resistência a tratamentos radio e quimioterápicos. O objetivo deste trabalho foi analisar a
imunoexpressão das proteínas de reparo do DNA, XPF e XRCC1 em carcinoma epidermoide
de lábio inferior (CELI) e de língua oral (CELO) e investigar possíveis associações com os
parâmetros clínicos e histopatológicos. Foram selecionados 80 casos de CELI e CELO
analisados morfologicamete por meio dos sistemas de gradação propostos por BrandweinGensler
et al. (2005) e Almangush et al. (2014). A expressão imuno-histoquímica foi
realizada de forma semi-quantitativa, utilizando para a análise estatística os testes de Quiquadrado,
ou quando aplicável, o teste exato de Fisher, para investigar a associação entre as
expressões das proteínas com as características clínico-patológicas. A alta expressão nuclear
de XPF foi observada em 72,5% dos casos de CELO e em 70% dos casos de CELI. Quanto à
imunoexpressão de XRCC1 nos casos de CELO, alta expressão foi observada em 60% dos
casos e nos CELI 70% apresentaram alta expressão nuclear, não sendo observada expressão
citoplasmática. Foram observadas associações estatisticamente significativas (p < 0,05) entre
a imunoexpressão de proteínas com alguns parâmetros clínicos e histopatológicos, no entanto,
não se verificaram associações com o prognóstico dos pacientes. A alta expressão das
proteínas XPF e XRCC1 nos casos de CELO e CELI sugere sua importância no
desenvolvimento e progressão destes tumores. Os resultados desta pesquisa indicam que a
imunoexpressão dessas proteínas não está associada a parâmetros clínicos e histopatológicos
determinantes para o comportamento biológico tumoral. / The DNA repair system involves genes and proteins essential for the maintenance of genome
integrity and consequent control of various cellular processes. Alterations in these genes and
proteins are involved in the development of tumors, in their evolution and resistance to radio
and chemotherapy treatments. The aim of this study was to analyze the immunoexpression of
DNA repair proteins, XPF and XRCC1 in squamous cell carcinoma of the lower lip (SCCLL)
and oral tongue (SCCOT) and investigate possible associations with the clinical and
histopathological groups. For this purpose, 80 cases of SCCLL and SCCOT were selected and
evaluated by grading systems proposed by Brandwein-Gensler et al. (2005) and Almangush et
al. (2014). The immunohistochemical expression was performed semi-quantitatively, was
used for statistical analysis the Chi-square tests, or when applicable, Fisher's exact test, to
evaluate an association between the expressions of the proteins as clinical-pathological
characteristics. A high nuclear expression of XPF was observed in 72.5% of cases of SCCOT
and in 70% of cases of SCCLL. Regarding the XRCC1 immunoexpression in cases of
SCCOT, high expression was observed in 60% of the cases and in the SCCLL 70% presented
high nuclear expression, and no cytoplasmic expression was observed. Statistically significant
associations were observed between immunoexpression of proteins with some clinical and
histopathological parameters (p<0.05), however, there were no associations with the
prognosis of the patients. The high expression of XPF and XRCC1 proteins in the cases of
SCCOT and SCCLL suggest its importance in development and progression of these tumors.
The results of this research indicate that immunoexpression of the studied proteins is not
associated with a clinical and histopathological characteristics determinant for the biological
tumor behavior.
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Relação entre mastócitos e e-caderina em ceratocistos odontogênicos e cistos radicularesPinheiro, Juliana Campos 27 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-27 / Os mastócitos são células secretoras que liberam diferentes mediadores químicos, dentre
eles a triptase, participando tanto de estímulos fisiológicos quanto patológicos. A Ecaderina
é um elemento da família das caderinas conhecida por desempenhar um papel
importante na regulação da adesão intercelular em tecidos epiteliais. O presente estudo se
propôs a avaliar a relação entre mastócitos e a expressão da E-caderina em ceratocistos
odontogênicos e cistos radiculares. A avaliação imuno-histoquímica da triptase consistiu
na quantificação de mastócitos degranulados e não degranulados em 15 campos, sendo 5
no tecido epitelial, 5 no tecido conjuntivo superficial e 5 campos no tecido conjuntivo
profundo. A avaliação da E-caderina foi realizada de forma semi-quantitativa, utilizando
os escores: 1 (0 a 50%) e 2 (>50%), sendo observado também o padrão de
imunorreatividade celular (membranar, citoplasmática, membranar e citoplasmática) além
da verificação do tamanho das lesões a partir da coleta de dados nas fichas clínicas dos
pacientes. A análise das lesões císticas estudadas revelou maior média total de mastócitos
nos cistos radiculares, quando comparados aos ceratocistos odontogênicos (IC 95%). No
que diz respeito a quantidade de mastócitos no componente epitelial, verificou-se maior
mediana nos cistos radiculares em relação aos ceratocistos odontogênicos, já no tecido
conjuntivo constatou-se que os ceratocistos odontogênicos apresentaram a maior mediana.
Ao verificar a densidade de mastócitos degranulados e não degranulados através do teste
não paramétrico de Kruskal-Wallis, constatou-se que as maiores concentrações estavam
relacionadas a mastócitos degranulados no epitélio de cistos radiculares (KW=30,343;
p=0,000), sendo que nos ceratocistos odontogênicos as maiores densidades desses tipos
celulares degranulados foram encontrados no tecido conjuntivo (KW=0,092; p=0,762). Ao
se examinar a expressão da E-caderina no componente epitelial, observou-se uma
similaridade entre as lesões císticas com maior expressão nos ceratocistos odontogênicos
(p=0,798) que apresentaram marcação membranar em 63.3% dos casos. Realizando a
análise da correlação de Spearman (r) foi observada uma correlação negativa entre a
expressão da E-caderina e o número total de mastócitos (r= -0,311; p= 0,016), número de
mastócitos degranulados (r= -0,255; p= 0,049) e a localização desses tipos celulares no
tecido conjuntivo total e profundo tanto nos cistos radiculares quanto nos ceratocistos
odontogênicos. Observou-se também, outra correlação negativa entre os mastócitos intraepiteliais
(r= -0,265; p=0,016) e o tamanho das lesões císticas. Diante desses achados, verificamos que a maior concentração de mastócitos nos cistos radiculares confirma a sua
natureza inflamatória, destacando a maior quantidade de mastócitos degranulados no
componente epitelial, refletindo em menor expressão de e-caderina quando comparados
aos ceratocistos odontogênicos, sugerindo desta forma, uma possível atuação da triptase na
alteração das junções de adesão e consequente aumento na permeabilidade epitelial. No
que diz respeito ao tamanho das lesões, verificou-se que as maiores densidades
mastocitárias no componente epitelial foram identificadas em lesões menores, sugerindo
uma atuação desses tipos celulares em uma etapa inicial de crescimento das lesões císticas
estudadas. / Mast cells are secretory cells that release different chemical mediators, among them
tryptase, participating in both physiological and pathological stimuli. E-cadherin is an
element of the cadherin family known to play an important role in the regulation of
intercellular adhesion in epithelial tissues. The present study aimed to evaluate the
relationship between mast cells and E-cadherin expression in odontogenic keratocysts and
radicular cysts. The immunohistochemical evaluation of tryptase consisted of the
quantification of degranulated and non-degranulated mast cells in 15 fields, 5 in the
epithelial tissue, 5 in the superficial connective tissue and 5 fields in the deep connective
tissue. The evaluation of E-cadherin was performed semi-quantitatively, using the scores:
1 (0 to 50%) and 2 (> 50%), also observing the cellular immunoreactivity pattern
(membrane, cytoplasmic, membrane and cytoplasmic) in addition to the verification of
the size of the lesions from the data collection in the clinical records of the patients. The
analysis of the cystic lesions studied revealed a higher total mean number of mast cells in
the radicular cysts when compared to odontogenic keratocysts (95% CIs). With regard to
the amount of mast cells in the epithelial component, a higher median was observed in
the radicular cysts in relation to odontogenic keratocysts; in the connective tissue,
odontogenic keratocysts were the largest median. When verifying the density of
degranulated and non-degranulated mast cells through the Kruskal-Wallis non-parametric
test, it was found that the highest concentrations were related to degranulated mast cells
in the epithelium of radicular cysts (KW = 30,343; p = 0,000). Odontogenic keratocysts
the highest densities of these degranulated cell types were found in connective tissue (KW
= 0,092; p = 0,762). When examining the expression of E-cadherin in the epithelial
component, a similarity was observed between cystic lesions with greater expression in
odontogenic keratocysts (p = 0,798), which presented membrane marking in 63.3% of the
cases. Spearman's correlation analysis showed a negative correlation between E-cadherin
expression and total mast cells (r = -0,311; p = 0,016), number of degranulated mast cells
(r = -0,255; p = 0,049) and the location of these cell types in total and deep connective
tissue in both radicular cysts and odontogenic keratocysts. There was also another
negative correlation between intraepithelial mast cells (r = -0,265; p = 0,016) and cystic
lesion size. In view of these findings, we observed that the higher concentration of mast
cells in the radicular cysts confirms their inflammatory nature, highlighting the greater amount of degranulated mast cells in the epithelial component, reflecting less e-cadherin
expression when compared to odontogenic keratocysts. Possible tryptase activity in the
alteration of adhesion joints and consequent increase in epithelial permeability. Regarding
the size of the lesions, it was verified that the higher mast cell densities in the epithelial
component were identified in smaller lesions, suggesting an action of these cell types in
an initial stage of growth of cystic lesions studied.
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Imunoexpressão de CLIC4 e α-SMA em carcinoma de células escamosas oral e carcinoma verrucoso oralXerez, Mariana Carvalho 26 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-26 / Dentre as neoplasias malignas que acometem a cavidade oral destacam-se o carcinoma de
células escamosas oral (CCEO), por ser o mais frequente e apresentar altas taxas de morbidade
e mortalidade, e o carcinoma verrucoso oral (CVO) que exibe um comportamento distinto,
tratando-se de uma variante de baixo grau do carcinoma de células escamosas oral. O
desenvolvimento e a progressão destas neoplasias malignas estão relacionados ao desequilíbrio
na regulação da divisão e morte celular, associado ao microambiente tumoral. A proteína CLIC4
está relacionada à regulação do ciclo celular, sendo supraregulada em resposta a apoptose e
também participando do processo de transdiferenciação dos fibroblastos em fibroblastos
associados ao câncer (FAC), que passam a expressar α-SMA. Os FACs são os principais
componentes celulares do microambiente tumoral, tendo sido relacionados com a agressividade
e o prognóstico de diversos tumores. O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente a
imunoexpressão das proteínas CLIC4 e α-SMA em carcinomas orais. A amostra consistiu em
20 casos de CCEO, 15 casos de CVO e 5 casos de MO. A partir dos prontuários, foram coletados
dados clínicos referentes à idade, gênero e localização da lesão. Foi realizada uma análise
morfológica em HE e semiquantitativa da expressão imuno-histoquímica das proteínas CLIC4
e α-SMA em amostras de material parafinado das lesões. Para verificar associações foram
utilizados os testes do Qui-quadrado de Pearson e Exato de Fisher, assumindo uma significância
de 5%. Para buscar correlação foi utilizado o teste de Spearman. Resultados: Dentre os CCEO
a maioria ocorreu em pacientes do sexo masculino (n=11/55,0%), com idade media de 66,95
anos e a localização anatômica mais acometida foi língua (n=9/45,0%). Para o CVO o sexo com
maior frequência foi o feminino (n=9/60,0%), a idade media foi de 61,71 anos, e a localização
mais acometida foi o rebordo alveolar (n=4/26,7%) e a mucosa labial (n=4/26,7%). Para a
análise da expressão de CLIC4 foi considerada sua localização celular. Comparando as lesões
para a marcação de CLIC4 no núcleo, citoplasma e núcleo/citoplasma das células epiteliais
tumorais não foi observada diferença significativa. Quando comparada a expressão de CLIC4
no estroma dos CCEO e CVO foi observada diferença significativa (p<0,0001). A análise da
imunomarcação de α-SMA nas células mesenquimais dos CCEO e CVO revelou um aumento
da expressão desta proteína no estroma tumoral de ambos os tumores, não sendo observada
diferença significativa entre as lesões. Quando comparada a imuno-expressão de αSMA e
CLIC4 no estroma dos CCEO e CVO foi observada correlação positiva, mas não significativa
no CCEO (r: 0,350 e p: 0,130). Já no CVO foi observada uma correlação positiva e significativa
entre as proteínas CLIC4 e α-SMA (r: 0,612 e p: 0,015). Em conclusão, os resultados do
presente estudo sugerem que a diminuição ou ausência da marcação nuclear da proteína CLIC4,
associada ao aumento de expressão desta proteína no estroma tumoral parece contribuir para o
processo de carcinogênese e progressão do CCEO e CVO e pode ter influência na expressão de
α-SMA. / Among the malignant neoplasias affecting the oral cavity, oral squamous cell carcinoma
(OSCC) is the most frequent presenting high rates of morbidity and mortality, and oral
verrucous carcinoma (OVC), which exhibits a behavior distinct from a low grade variant of oral
squamous cell carcinoma. The development and progression of these malignant neoplasms are
related to the imbalance in the regulation of cell division and death associated to the tumor
microenvironment. CLIC4 protein is related to the regulation of the cell cycle, being
supraregulated in response to apoptosis and also participating in the process of
transdifferentiation of fibroblasts in cancer-associated fibroblasts (CAF), which now express αSMA.
CAFs are the main cellular components of the tumor microenvironment, having been
related to the aggressiveness and prognosis of several tumors. The aim of this study was to
evaluate the immunoexpression of CLIC4 and α-SMA proteins in oral carcinomas. The sample
consisted of 20 cases of OSCC, 15 cases of OVC and 5 cases of OM. From the medical records,
clinical data regarding the age, gender and location of the lesion were collected. A
morphological analysis was performed on HE and semiquantitative immunohistochemical
expression of the CLIC4 and α-SMA proteins in samples of paraffin-shaped lesion material.
Pearson's Chi-square test and Fisher's exact test were used to verify associations. The Spearman
test was used to search for correlation. Significance was set at of 5%. Results: Among the
OSCC, the majority occurred in male patients (n = 11; 55.0%), with a mean age of
66.95 years and the most affected anatomic location was tongue (n = 9; 45.0%). The OVC was
the female sex (n = 9; 60.0%), the mean age was 61.71 years, and the alveolar ridge was the
most affected (n = 4; 26.7%) and lip mucosa (n = 4; 26.7%). For the analysis of CLIC4
expression, its cellular location was considered. Comparing the lesions for CLIC4 labeling in
the nucleus, cytoplasm and nucleus /cytoplasm of tumor epithelial cells, no significant
difference was observed. When comparing CLIC4 expression in the OSCC and OVC stroma, a
significant difference was observed (p <0.0001). The analysis of α-SMA immunostaining in
mesenchymal cells of OSCC and OVC revealed an increase in the expression of this protein in
the tumor stroma of both tumors, and no significant difference was observed between the
lesions. When comparing the immunoexpression of αSMA and CLIC4 in the stroma of OSCC
and OVC, a positive correlation was observed but not significant in OSCC (r: 0.350 and p:
0.130). In the OVC, a positive and significant correlation was observed between the CLIC4 and
α-SMA proteins (r: 0.612 and p: 0.015). In conclusion, the results of the present study suggest
that the decrease or absence of CLIC4 protein nuclear marking associated with increased
expression of this protein in the tumor stroma seems to contribute to the process of
carcinogenesis and progression of CCEO and CVO and may have an influence on expression
of α-SMA.
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Análise da proteína de choque térmico 27 (HSP27) em carcinomas de células escamosas de língua oralTorres, Ondina Karla Mousinho Rocha 20 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / O carcinoma de células escamosas de língua oral (CCELO) apresenta altas taxas de
morbidade e mortalidade. Novos métodos de detecção precoce e avaliação de risco
estão sendo estudados com o intuito de predizer o prognóstico dos pacientes e
direcionar um tratamento diferenciado. Neste contexto, vários biomarcadores
moleculares têm sido investigados com esta finalidade, dentre eles a heat shock protein
27 (HSP27). Esta pesquisa objetivou analisar se a HSP27 exerce alguma influência nos
CCELOs, além de correlacionar a sua imunoexpressão com parâmetros
clinicopatológicos e com a sobrevida dos pacientes. A amostra foi constituída por 55
casos de CCELO e 20 espécimes de mucosa oral normal. Para o estudo
histomorfológico foram utilizados os sistemas de gradação de malignidade propostos
pela OMS em 2005, por Brandwein-Gensler et al. (2005) e por Almangush et al.
(2014). A expressão da HSP27 foi avaliada através do Sistema de Escore de
Imunorreatividade (IRS). Para verificar a associação de imunopositividade da HSP27
com os parâmetros clinicopatológicos foram utilizados os testes estatísticos de Quiquadrado
de Pearson e o Exato de Fisher. As curvas para análise de sobrevida foram
realizadas pelo método de Kaplan Meier. Para todas as avaliações foram considerados
valores significativos com p<0,05. Foi observado um maior IRS para a mucosa oral
normal quando comparado aos casos de CCELO (p<0,001), indicando que há uma
redução de expressão desta proteína nestas neoplasias, embora este achado seja
documentado na literatura, os mecanismos envolvidos não são esclarecidos, estudos
moleculares específicos são necessários a fim de elucidar os eventos genéticos e
epigenéticos envolvidos na redução da expressão da HSP27 nos casos de CCELO. Não
foram encontradas associações significativas entre a imunomarcação desta proteína com
os parâmetros clinicopatológicos e com a sobrevida dos pacientes, sugerindo que esta
proteína parece não influenciar o prognóstico dos pacientes com CCELO. / Oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC) presents high rates of morbidity and
mortality. New methods of early detection and risk assessment have being studied
aiming to predict the prognosis of patients and directing a differentiated treatment. In
this context, several molecular biomarkers have been investigated for this purpose
among them the heat shock protein 27 (HSP27). This study aimed to analyze whether
HSP27 has some influence on the OTSCC, in addition to correlating its
immunoexpression with clinicopathological parameters and patient survival. The
sample consisted of 55 cases of OTSCC and 20 specimens of oral normal mucosa. For
the histomorphological study, it was used the malignancy grading systems proposed by
WHO in 2005, by Brandwein-Gensler et al. (2005) and by Almangush et al. (2014). The
expression of HSP27 was evaluated through the Immunoreactive Scoring System (IRS).
To verify the association of HSP27 immunopositivity with the clinicopathological
parameters, it was used the Pearson’s chi-square and Fisher’s exact test. The curves for
survival analysis were performed using the Kaplan Meier method. For all evaluations,
the significance values were set at p<0.05. A higher IRS for the oral normal mucosa was
observed when compared to OTSCC cases (p<0.001), indicating that there is a
reduction of expression of this protein in these neoplasms, despite this finding is
documented in the literature, the involved mechanisms are unclear, so, specific
molecular studies are needed to elucidate the genetic and epigenetic events involved in
the reduction of HSP27 expression in OTSCC cases. No significant associations were
found between the immunostaining of this protein and the clinicopathological
parameters and patient survival suggesting that this protein does not seem to influence
the prognosis of OTSCC patients.
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Efeito da fotobiomodulação na proliferação de células-tronco da polpa de dentes decíduos esfoliados cultivadas sobre filmes de ácido polilácticoMacedo, Rômulo Augusto de Paiva 23 February 2018 (has links)
Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-05T21:48:08Z
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Previous issue date: 2018-02-23 / A fotobiomodulação (PBM) estimula a proliferação de diferentes tipos celulares,
incluindo células-tronco. A células-tronco da polpa do dente decíduo esfoliado
(SHEDs) apresentam um potencial de diferenciação maior do que as demais célulastronco
mesenquimais, sendo o foco de diversas pesquisas na área da engenharia
tecidual. Para que as células proliferarem e se diferenciem in vitro é necessário o
desenvolvimento de um microambiente favorável, o qual pode ser fornecido por um
biomaterial que mimetize a matriz extracelular natural, destacando-se para esta
finalidade o ácido poliláctico (PLA) por suas propriedades de biocompatibilidade e
biodegradabilidade, além do baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito
da PBM em diferentes doses na proliferação e viabilidade de SHEDs cultivadas sobre
arcabouços bidimensionais de PLA. As SHEDs foram cultivadas sobre os filmes e
divididas em três grupos: (C) controle não irradiado; (L1) irradiadas com dose de 1
J/cm2; e (L4) irradiadas com dose de 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas com
laser diodo InGaAlP, com comprimento de onda de 660 nm e potência de 30 Mw, em
dose única. A viabilidade e a proliferação celular foram avaliadas nos intervalos de 24,
48 e 72 horas após a irradiação, através do ensaio do Alamar Blue, enquanto a
morfologia e a distribuição das células na superfície dos filmes foram avaliadas por
MEV no intervalo de 72 horas. Os dados quantitativos foram submetidos a testes
estatísticos não paramétricos. Os dados do ensaio do Alamar Blue mostraram que os
grupos L1 e L4 exibiram uma maior proliferação celular em comparação ao grupo C,
sendo as diferenças significativas entre L1 e C em 48 e 72 h (p<0,0001) e entre L4 e
C em 24 (p<0,01), 48 (p<0,001) e 72 h (p<0,0001). O percentual de redução do Alamar
blue mostrou-se significativamente maior em L4 em comparação com L1 em 24 e 72
h (p<0,05). A análise das amostras por MEV mostrou que nos grupos irradiados as
células apresentavam uma distribuição mais homogênea ao longo da superfície dos
filmes e uma maior densidade celular em comparação com o grupo C, sendo esta
diferença ainda mais evidente no grupo L4. Conclui-se que a PBM nos parâmetros
estudados, especialmente na dose de 4 J/cm2, estimula a proliferação de SHEDs em
contato com filmes de PLA, constituindo assim uma ferramenta metodológica com
potencial aplicação nas técnicas de engenharia tecidual / Photobiomodulation (PBM) stimulates the proliferation of different cell types,
including stem cells. Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs)
present a greater differentiation potential compared to other mesenchymal stem cells,
being the focus of several studies in the field of tissue engineering. In order for cells to
proliferate and differentiate in vitro it is necessary to develop a favorable
microenvironment, which can be provided by a biomaterial that mimics the natural
extracellular matrix, with polylactic acid (PLA) being distinguished for this purpose due
to its properties of biocompatibility and biodegradability, as well as low cost. The aim
of this study was to evaluate the effect of PBM in different doses on the proliferation
and viability of SHEDs cultured on two-dimensional PLA scaffolds. SHEDs were
cultured on the films and divided into three groups: (C) non-irradiated control; (L1)
irradiated with a dose of 1 J/cm2; and (L4) irradiated with a dose of 4 J/cm2. The
irradiations were performed with an InGaAlP diode laser, with wavelength of 660 nm
and power of 30 Mw, in a single dose. Cell viability and proliferation were evaluated at
24, 48 and 72 h after irradiation by Alamar Blue assay, while cell morphology and
distribution on the surface of the films were evaluated by SEM at 72 hours. The
quantitative data were submitted to non-parametric statistical tests. Data from Alamar
blue assay showed that groups L1 and L4 exhibited greater cell proliferation compared
to group C, with significant differences between L1 and C at 48 and 72 h (p<0.0001)
and between L4 and C in 24 (p<0.01), 48 (p<0.001) and 72 h (p<0.0001). The
percentage of reduction of Alamar blue was significantly higher in L4 compared to L1
at 24 and 72 h (p<0.05). Analysis of the samples by SEM showed that in the irradiated
groups the cells had a more homogeneous distribution along the surface of the films
and a higher cell density compared to the group C, with this difference being even
more evident in the group L4. We conclude that PBM in the studied parameters,
especially with the dose of 4 J/cm2, stimulates the proliferation of SHEDs in contact
with PLA films, thus constituting a methodological tool with potential application in
tissue engineering techniques.
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Estudo da expressão imunohistoquímica de SO2, FGF-10 e WNT-1 em lesões odontogênicas epiteliais benignasNascimento, Marcelo Anderson Barbosa 02 February 2018 (has links)
Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-26T17:29:42Z
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Previous issue date: 2018-02-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Os dentes desenvolvem-se a partir de interações sequenciais entre o epitélio e o mesênquima
derivado da crista neural em diferentes estágios de histodiferenciação e morfodiferenciação.
Ao final da odontogênese, espera-se que as estruturas que participaram da formação destes
tecidos desapareçam ou permaneçam quiescentes. Não é incomum que os remanescentes
epiteliais da odontogênese originem lesões, como cistos e tumores odontogênicos. No
desenvolvimento dentário precoce, a manutenção das células-tronco é regulada por uma série
de fatores de transcrição específicos, que inclui OCT-4, SOX-2, Nanog, Stat-3 e c-Myc e
diversos outros genes Homeobox e vias de transcrição (SHH, Wnt/β-catenina, FGF, BMP)
contribuem para o destino e diferenciação celular. No entanto, há a participação destes genes
e vias na patogênese de vários tipos de tumores. O objetivo do presente estudo foi avaliar a
imunoexpressão de SOX2, FGF-10 e Wnt-1 em uma série de casos de lesões odontogênicas e
alguns espécimes de germes dentários. A amostra consistiu de 20 Ceratocistos Odontogênicos
(CO), 20 Ameloblastomas sólidos (AM), 20 Tumores odontogênicos adenomatoides (TOA),
10 Tumores odontogênico epitelial calcificante (TOEC) e 05 casos de germes dentários
usados comparativamente. A imunoexpressão foi avaliada de acordo com o percentual de
células epiteliais imunomarcadas e intensidade de células positivas resultando na pontuação
de imunomarcação total (PIT) que variou de 0 a 7. A análise da imunoexpressão da SOX2
revelou positividade na maioria dos casos das lesões estudadas. A pontuação de
imunomarcação para SOX2 revelou haver diferença estatisticamente significativa entre os
grupos de lesões estudadas, com maior frequência em CO e TOEC (p <0,001). Após o
pareamento, observou-se diferença significativa entre AM e CO, AM e TOEC, CO e TOA,
CO e TOEC e, TOA e TOEC (p <0,05). A análise da imunoexpressão da FGF-10 e Wnt-1
revelou positividade em todos os casos das lesões estudadas, mas sem diferença
estatisticamente significativa entre os grupos de lesões estudadas (p = 0,628). Houve
diferença significativa em relação aos escores de positividade para Wnt-1 (p <0,001) com
maior frequência em CO e TOA. Após o pareamento, observou-se existir diferença
estatisticamente significativa entre AM e CO, AM e TOEC, CO e TOEC e, TOA e TOEC (p
<0,05). O padrão de expressão de SOX2, FGF-10 e Wnt-1, em germes dentários e nas lesões
odontogênicas aqui avaliadas, confirma a participação destas vias na odontogênese e também
no desenvolvimento das lesões odontogênicas. / Dental development occurs from sequential interactions between the epithelium and the
mesenchyme derived from the neural crest at different stages of histodifferentiation and
morphodifferentiation. At the end of tooth development, the structures that participated in the
formation of these tissues are expected to disappear or remain quiescent. It is not uncommon
that the epithelial remnants of the tooth development originate lesions such as odontogenic
cysts and tumors. In early tooth development, stem cell maintenance is regulated by specific
transcription factors, which includes OCT-4, SOX-2, Nanog, Stat-3 and c-Myc and several
other Homeobox genes and transcription pathways (SHH, Wnt/β-catenin, FGF, BMP)
contribute to cell fate and differentiation. However, there is involvement of these genes and
pathways in the pathogenesis of several types of tumors. The aim of the present study was to
evaluate the immunoexpression of SOX2, FGF-10 and Wnt-1 in a case series of odontogenic
lesions and some specimens of dental germs. The sample consisted of 20 Odontogenic
Keratocysts (OK), 20 solid ameloblastomas (AM), 20 adenomatoid odontogenic tumors
(AOT), 10 calcifying epithelial odontogenic tumors (CEOT) and 5 dental gerns for
comparison. Immunoexpression was evaluated according to the percentage of immunostained
epithelial cells and intensity of the positive cells resulting in total immunostaining score (PIT)
ranging from 0 to 7. The analysis of SOX2 immunoexpression revealed positivity in most
cases of the lesions studied. The immunostaining score for SOX2 revealed a statistically
significant difference between the groups of lesions studied, with a higher frequency in OK
and CEOT (p < 0.001). After pairing, we observed a significant difference between AM and
OK, AM and CEOT, OK and AOT, OK and CEOT, and AOT and CEOT (p <0.05). Analysis
of the FGF-10 and Wnt-1 immunoexpression revealed positivity in all cases of the lesions
studied, with no statistically significant difference between the groups of lesions studied (p =
0.628). There was a significant difference in relation to the positivity scores for Wnt-1 (p
<0.001) with higher frequency in OK and AOT. After pairing, there was a statistically
significant difference between AM and OK, AM and CEOT, OK and CEOT and, AOT and
CEOT (p <0.05). The expression pattern of SOX2, FGF-10 and Wnt-1 in dental germs and
odontogenic lesions evaluated here confirms the participation of these pathways in the tooth
development as well as in the development of odontogenic lesions.
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Imunoexpressão das proteínas APE1, XRCC1, p53 e Ki67 em carcinoma de células escamosas de língua oralOliveira, Viviane Alves de 25 January 2018 (has links)
Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-15T21:32:04Z
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VivianeAlvesDeOliveira_TESE.pdf: 3374047 bytes, checksum: 44d9876dbb2ee4424f40958d76b2c3ba (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-06-19T22:23:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2018-01-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / O carcinoma de células escamosas oral (CCEO) resulta de processos de
descontroles de eventos celulares provocados por mutações decorrentes de agentes
genotóxicos, o que pode levar, dentre outros fatores, à perda de controle do
processo de proliferação celular, sendo este considerado um dos precursores do
câncer oral. A busca por biomarcadores para o CCEO constitui alvo de várias
pesquisas, dentre as quais destacam-se proteínas de reparo do DNA como a
XRCC1 e APE1 e proteínas do ciclo celular como p53 e Ki67. Assim, o objetivo
desta pesquisa foi analisar a expressão imunoistoquímica das proteínas de reparo
APE1, XRCC1 e das proteínas envolvidas no ciclo celular p53 e ki67, associando-as
entre si e com parâmetros prognósticos clínicos e histopatológicos, em carcinoma de
células escamosas de língua oral (CCELO), visando contribuir para o melhor
entendimento da participação dessas proteínas no desenvolvimento desta neoplasia.
A expressão imunoistoquímica de APE1 e XRCC1 foi avaliada de forma
semiquantitativa e a de p53 e ki67 de forma quantitativa, em 58 casos de Carcinoma
de células escamosas de língua oral (CCELO). Os dados clínicos foram coletados
nos prontuários médico de cada paciente e a gradação histopatológica de
Brandwein-Gensler efetuada para cada caso. Para a análise estatística foram
realizados os testes de Qui-quadrado e Exato de Fisher e adotou-se significância de
p<0,05. A maioria dos casos apresentou alta imunoexpressão para APE1 (n = 36;
62,1%), assim como para XRCC1 (n = 38; 65,5%). Já para as proteínas Ki67 e p53,
houve uma distribuição igual quando os casos foram categorizados em baixa e alta
expressão (n = 29, 50%). A imunoexpressão de XRCC1 foi significativamente maior
nos casos de lesão em estágio inicial I e II (n = 23; 62,2%) em relação aos estágios
avançados III e IV (n=16, 80%, p = 0,05). A imunoexpressão de p53 foi
significativamente maior nos casos de lesão em estágio avançado (n = 19; 65,5%) e
baixa em estágios iniciais (n=17, 60,7%; p = 0,047). Nenhuma das proteínas
estudadas mostrou associação entre si, nem com os demais parâmetros clínicos e a
gradação histopatológica. Apesar da associação significativa da maior
imunoexpressão de XRCC1 com melhor estadiamento clínico e da p53 com o pior
estadiamento clínico, estas não foram embasadas quando analisado o desfecho dos
pacientes. Os resultados desta pesquisa indicam que XRCC1 e APE1 participam do
processo de carcinogênese do CCELO, porém, a expressão imunoistoquímica
destas e de p53 e Ki67 não mostraram associação com parâmetros prognósticos. / Oral squamous cells carcinoma (OSCC) results from processes of decontrol of
cellular events caused by mutations due genotoxic agents, which may lead, among
other factors, to loss of control of the cellular proliferation process, being considered
as one of the precursors of oral cancer. Searching biomarkers for OSCC is the target
of several studies, among the markers it is highlighted the DNA repair proteins, such
as XRCC1 and APE1, and cell cycle proteins, such as p53 and Ki67. Thus, the aim
of this study was to analyze the immunohistochemical expression of APE1, XRCC1
and the proteins involved in the cell cycle, p53 and ki67, associating them with
clinical and histopathological prognostic parameters in oral tongue squamous cell
carcinoma (OTSCC), in order to contribute to the better understanding of the
participation of these proteins in the development of this neoplasia. The
immunohistochemical expression of APE1 and XRCC1 was evaluated
semiquantitatively and the expression of p53 and ki67 quantitatively, in 58 cases of
OTSCC. Clinical data were collected from the medical records of each patient and
the histopathological grading of Brandwein-Gensler was carried out for each case.
For the statistical analysis, Chi-square and Fisher's exact test were performed, and
significance was set at p <0.05. The majority of cases showed high
immunoexpression of APE1 (n = 36; 62.1%), as well as of XRCC1 (n = 38; 65.5%). In
relation to the Ki67 and p53 proteins, there was an equal distribution when the cases
were categorized into low and high expression (n = 29, 50%). XRCC1
immunoexpression was significantly higher in cases of early stage lesions I and II (n
= 23; 62.2%) compared to advanced stages III and IV (n = 16, 80%, p = 0.05). The
Immunoexpression of p53 was significantly higher in cases of advanced lesion (n =
19; 65.5%) and low in early stages (n = 17, 60.7%, p = 0.047). None of the studied
proteins showed association with each other, nor with the other clinical parameters
and histopathological grading. Despite the significant association of the highest
XRCC1 immunoexpression with better clinical staging and of p53 with the worst
clinical staging, these results were not supported when the patients' outcome were
analyzed. The results of this study indicate that XRCC1 and APE1 participate in the
process of carcinogenesis of OTSCC, but the immunohistochemical expression of
these proteins and also p53 and Ki67 did not show any association with prognostic
parameters.
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