Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-01Bitstream added on 2015-04-09T12:47:44Z : No. of bitstreams: 1 000815629.pdf: 3612183 bytes, checksum: a0dcded8d5c5e1ee59f6fc9150c62163 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O amido resistente é um polissacarídeo que apresenta elevada estabilidade térmica e baixa solubilidade. A gelana é um polissacarídeo natural com importantes propriedades bioadesivas. Ambos os polímeros podem formar hidrogéis capazes de controlar a liberação de fármacos. A associação desses polissacarídeos naturais pode permitir o aperfeiçoamento das características físico-químicas desses materiais que muitas vezes são inexistentes nos polímeros isolados. A mistura de gelana/amido retrogradado, bem como a reticulação desses polímeros bioadesivos permite a modificação de importantes propriedades como resistência mecânica, intumescimento e mucoadesividade e desta forma, representam uma estratégia importante para aperfeiçoar o desempenho de sistemas de liberação sítio-específica de fármacos. No presente trabalho, hidrogéis de gelana/amido retrogradado foram utilizadas para obtenção de micropartículas pelo método de geleificação ionotrópica ou reticulação iônica (interações entre íons de cargas opostas) e dupla reticulação (introdução de ligações covalentes). A caracterização físico-química dos hidrogéis foi realizada através das análises de textura (dureza, adesividade e coesividade), propriedades reológicas, morfologia e difração de raiosx. Na análise do comportamento de textura foi verificado que as maiores concentrações de polímeros melhoraram as propriedades mecânicas dos hidrogéis e que a reticulação iônica contribuiu para o aumento da dureza e coesividade, enquanto a dupla reticulação aumentou a adesividade. A análise reológica demonstrou que as técnicas de reticulação contribuíram para obtenção de sistemas de caráter predominantemente elástico, sendo que a dupla reticulação originou estruturas com maior grau de elasticidade. As análises da estrutura interna dos hidrogéis evidenciaram a formação de estruturas mais densas e compactas na presença do ... / Resistant starch exhibits high thermal stability and low solubility. Gellan gum is a natural polysaccharide with important bioadhesive properties. Both polymers can build hydrogels able to control drug release rates. The blending of these natural polysaccharides can improve the physicochemical characteristics of these materials that are often absent in the isolated polymers. Gellan gum/retrograded starch association and crosslinking reaction should promote important modification of properties of these materials such as mechanical strength, swelling and mucoadhesiveness and thus, these strategies can improve the performance of site-specific drug delivery systems. In this study, hydrogels of gellan gum/retrograded starch were used to obtain microparticles by ionotropic gelation or ionic crosslinking (interactions between oppositely charged ions) and dual crosslinking (introducing covalent bonds) methods. The physicochemical characterization of the hydrogels was performed by analysis of profile (hardness, adhesiveness and cohesiveness), rheological properties, morphology and X-ray diffraction. Texture analysis of the behavior was found that higher concentrations of polymer improved the mechanical properties of hydrogels and that the ionic crosslinking improved the hardness and cohesiveness of hydrogels, while the dual crosslinking increased adhesiveness. The set of rheological properties showed that the crosslinking techniques contributed to the elastic character of the systems, and the dual crosslinking originated structures with the most elasticity degree. SEM analysis showed that denser and more packed structures were built in the presence of the ketoprofen. According to the XRD data, the microparticles showed semicrystalline structures and the DR increased the crystallinity. Physicochemical characterization of microparticles was performed by analyzes as moisture content, yield, encapsulation efficiency, size and shape. Ionotropic ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-31Bitstream added on 2014-11-10T11:58:41Z : No. of bitstreams: 1 000789413.pdf: 1283329 bytes, checksum: 1fa8f20ec4090688a4540f469f5f5256 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Polissacarídeos são empregados em diversos segmentos industriais como espessantes, detergentes, laxantes, fibras, e coberturas de alimentos. Novas pesquisas tem enfocado o potencial anti-inflamatório, anti-mutagênico e imunomodolador de exopolissacarídeos (EPS) microbianos, bem como sua aplicação em sistemas de liberação controlada de medicamentos. Diversas pesquisas têm empregado β-glucanas fúngicas e verificado diversas atividades biológicas. O objetivo do presente projeto foi estudar a ação imunomoduladora do EPS de Lasiodiplodia theobromae, avaliar a capacidade do exopolissacarídeo na forma de blendas com látex de atuarem como carreadores de medicamentos e algumas propriedades mecânicas do EPS em blendas com látex. O micro-organismo foi cultivado em meio Vogel, com sacarose 50 g/L, a 28°C, 180 rpm, por 72 h. O EPS foi precipitado com etanol (3:1v/v), dialisado e purificado por congelamento/degelo e ultrafiltração. O rendimento em EPS em cada cultivo foi em média de 1,9 g/L. A ação imunomoduladora in vitro foi realizada apenas com a fração de EPS β- glucana (1→6) purificada, adicionando diferentes concentrações de polissacarídeo a macrófagos humanos de linhagem U937 e verificando-se viabilidade celular e perfil de citocinas (TNF-α e IL-10). Quanto aos ensaios de imunomodulação, o EPS purificado β- glucana (1→6) se mostrou capaz de ativar a resposta de macrófagos com a liberação da citocina TNF-α nas primeiras 24h , decaindo em 48h, sem apresentar ativação da resposta de IL-10, o que sugere uma resposta pró-inflamatória e anti-tumoral. Os filmes foram avaliados quanto a espessura, perda de umidade, solubilidade em água e resistência mecânica. A avaliação dos filmes como carreador de medicamento foi realizada pela adição de cetoprofeno a blenda EPS e látex, e acompanhamento da liberação do fármaco por espectrofotometria Os filmes apresentaram espessuras entre 2 a 3,5 mm; mínima perda de... / Polysaccharides are employed in various industries as thickeners, detergents, laxatives, fiber and food toppings . New research has focused on the anti - mutagenic anti-inflammatory and imunomodulator potential of microbial exopolysaccharides (EPS), as well as in their application in controlled drug delivery systems. Several studies have employed fungal β -glucans and verified high biological activity. The goal of this project is to study the immunomodulatory action of EPS produced by Lasiodiplodia theobromae, evaluate the ability to act as drug carriers of blends formed by exopolysaccharide and latex and also some mechanical properties of these blends. The micro-organism was grown on Vogel medium with sucrose 50 g / L at 28 ° C, 180 rpm for 72 h. The EPS was precipitated with ethanol ( 3:1 v/v), dialyzed and purified by freezing / thawing and ultrafiltration. The yield of EPS in each culture was on average 1.9 g / L. The study of the immunomodulating effects was performed in vitro, only with the fraction of EPS β- glucan ( 1 → 6 ) purified by adding different concentrations of polysaccharide in human U937 macrophages lineage and verifying cell viability and cytokine ( TNF - α and IL – 10 profile ). Concerning the tests of immunomodulation, the EPS purified β- glucan ( 1 → 6 ) has shown to be capable of activate the macrophage response to the release of TNF - α cytokine in the first 24h , decreasing after 48h, without showing response activation of IL - 10 , which suggests a pro-inflammatory and anti- tumor response. The films were evaluated for thickness, moisture loss, water solubility and mechanical strength. The evaluation of the films as a carrier of drugs was performed by the addition of ketoprofen to EPS and latex blend, and monitoring of drug release by spectrophotometry. The films presented thicknesses between 2 and 3.5 mm; minimal moisture loss (between 0.5 and 3%); solubility varying from 3 to 6,5 and good mechanical...

Orientador: Crispin Humberto Garcia-Cruz / Banca: Vanildo Luiz Del Bianchi / Banca: Hamilton Cabral / Resumo: A levana é um polissacarídeo formado basicamente de unidades de frutose ligadas em (2 6). Este biopolímero possui diversas aplicações tanto na indústria alimentícia quanto na área da saúde. A levana é produzida pela bactéria Gram-negativa Zymomonas mobilis. Por fermentação de um meio contendo sacarose, esse microrganismo lança ao meio de cultura duas enzimas extracelulares: a sacarase extracelular e a levanasacarase. A enzima sacarase extracelular (SacC) tem uma alta atividade específica de hidrólise de sacarose e a enzima levanasacarase (SacB) é responsável tanto pela hidrólise do dissacarídeo quanto pela formação de levana. Dentre os fatores que regulam as atividades enzimáticas podemos citar o tampão utilizado (pH), a temperatura, a concentração de sacarose e a presença de íons metálicos. O presente projeto teve por objetivos determinar os melhores parâmetros para a produção do biopolímero levana e seu extrato enzimático, após fermentação do meio de cultura por Zymomonas mobilis CCT 4494. Além disso, foi caracterizado o extrato enzimático quanto à atividade de hidrólise de sacarose e de formação de levana. Os resultados obtidos mostraram que a maior produção de levana ocorreu em 96horas de fermentação, num meio contendo 200g/L de sacarose, incubado a 30°C, 200rpm e pH inicial de 6,0. Entretanto, o extrato enzimático bruto com maior atividade de sacarase foi obtido num meio com 200g/L de sacarose, 200rpm, 30°C, pH inicial de 7,0 e 6 horas de incubação. Para a caracterização deste extrato enzimático bruto, quanto a sua atividade de hidrólise de sacarose, inicialmente determinou-se o período ideal de reação com o substrato, sendo o mesmo definido como 10 minutos. Posteriormente foram determinados o pH, a temperatura e a concentração de sacarose ótimos, sendo de 4,0, 40°C e 0,15M, respectivamente. O sistema enzimático teve a maior... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The levan is a polysaccharide formed basically of units of fructose connected in (2 6). This biopolymer has many applications in both the food industry as in health. The levan is produced by Gram-negative bacteria Zymomonas mobilis. By fermentation of a medium containing sucrose, this microorganism launches to the middle of culture two enzymes extracellular: the extracellular sucrase and levansucrase. The enzyme extracellular sucrase (SacC) has a high specific activity of hydrolysis of sucrose and the enzyme levansucrase (SacB) is responsible for hydrolysis of both disaccharides as the formation of levan. Among the factors that regulate the enzymatic activities can cite the buffer used (pH), the temperature, concentration of sucrose and the presence of metal ions. This project aimed at determining the best parameters for the production of the biopolymer levan and its enzymatic extract, after fermentation of the mean of culture by Zymomonas mobilis CCT 4494. Moreover, was characterized the enzymatic extract as the activity of hydrolysis of sucrose and training of levan. The results showed that the majority production of levan occurred on 96hours of fermentation, in a medium containing 200g/L of sucrose, incubated at 30°C, 200rpm and initial pH of 6.0. Meanwhile, the crude enzymatic extract with higher activity of sucrase was achieved in a medium with 200g/L of sucrose, 200rpm, 30°C, initial pH of 7.0 and 6 hours of incubation. For the characterization of this crude enzymatic extract, as its activity in hydrolysis of sucrose, initially it was determined the ideal period of reaction with the substrate, being the period defined as 10 minutes. Later were determined the pH, the temperature and the concentration of sucrose great, being 4.0, 40°C and 0,15M respectively. The enzymatic system was more stable at pH 4.0, keeping 100% of your activity of sucrase, and pH values of 5,5 and 6,5... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: Arctium lappa, conhecida popularmente como bardana, é uma planta medicinal originária do Japão e aclimatada no Brasil. Ela é utilizada na medicina popular para tratamento de infecções, inflamações, febre, problemas crônicos de pele, gota, cálculo renal, úlcera gástrica, queimaduras e outras enfermidades. Este trabalho apresenta a extração, purificação, caracterização estrutural e avaliação da atividade gastroprotetora e anti-inflamatória de polissacarídeos das folhas de A. lappa. Além disso, mostra o fracionamento bioguiado por atividade antiúlcera gástrica dos compostos de baixa massa molar. De maneira geral, as frações polissacarídicas apresentaram-se constituídas majoritariamente pelos monossacarídeos Rha, Ara, Glc, Gal e GalA e, de acordo com análises de RMN e metilação, são compostas por dois polissacarídeos principais: ramnogalacturonana tipo I (RG I) e arabinogalactana tipo II (AG II). Polissacarídicas de A. lappa apresentaram atividade anti-inflamatória, mas não apresentaram nenhum efeito gastroprotetor. A fração contendo compostos de baixa massa molar (fração FSE) apresentou-se composta principalmente por ácidos fenólicos, entre os quais os ácidos 1-O-cafeoilquínico, neo-clorogênico, clorogênico, crypto-clorogênico, 1,3-O-dicafeoilquínico, 3,4-O-dicafeoilquínico, 3,5-O-dicafeoilquínico e 4,5-O-dicafeoilquínico, além dos flavonóides rutina e quercetina-ramnosídeo. Esta fração apresentou atividade antiúlcera gástrica de maneira dose dependente. O processo de fracionamento bioguiado de FSE gerou uma única fração com efeito antiúlcera gástrica, a fração FSE-AE, composta principalmente por ácidos dicafeoilquínicos.

Resumo: Estudos prévios realizados no Laboratório de Química de Carboidratos - Algas Marinhas demonostraram que heteroramnanas sulfatadas (OX-6) e seus produtos de menor massa molar (OX-6S, OX-6Sb e OX-6Sc) possuem atividade antitumoral contra linhagens U87MG de glioma humano. Com base nesses resultados, o objetivo do presente trabalho foi investigar o mecanismo pelo qual esses polissacarídeos provocam a diminuição na viabilidade das células de glioma humano. Para tanto, foi avaliado o efeito das frações OX-6, OX-6S, OX-6Sb e OX-6Sc no ciclo, migração e recuperação celular, correlacionando com os níveis de RNAm de p21, p53 e p19. Foi verificado por análise de citometria de fluxo que o tratamento das células U87MG com os polissacarídeos promovem um aumento no número de células da fase G1 do ciclo celular, sem alteração no número de células na fase sub-G1. Ainda, não foi observado alteração na migração celular e na recuperação da proliferação das células após a retirada do tratamento. A análise do perfil de expressão gênica (investigada através do ensaio de PCR quantitativo em Tempo Real) indicou tendência de modulação de p21 e p53. Apesar de não terem sido observadas diferenças em relação ao mecanismo de atividade antitumoral dessas frações, foi observado, dentre os produtos de degradação controlada de Smith homogêneos (OX-6Sb e OX-6Sc) que a fração OX-6Sc é mais citotóxica quando comparada com a fração OX-6Sb. Análises químicas (metilação) realizadas previamente demonstraram que essas frações apresentam diferenças estruturais entre si, o que pode justificar a diferença observada na atividade biológica. Com o objetivo de confirmar os dados estruturais, a fração OX-6Sc foi submetida a uma nova abordagem de metilação, denominada trideuteriometilação. Essa análise confirmou os dados de estrutura química previamente obtidos. Ainda, foram obtidas novas frações polissacarídicas de G. oxysperma, as quais foram caracterizadas quimicamente e mostraram-se semelhantes aos produtos de degradação controlada de Smith utilizados na atividade biológica, demonstrando assim, a reprodutibilidade deste processo.

Orientador : Prof. Dr. Diogo R. Bazan Ducatti / Co-orientador : Prof. Dr. Alan Guilherme Gonçalves / Co-orientadora : Profª. Drª. Maria Eugênia Duarte Noseda / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 25/03/2015 / Inclui referências / Resumo: Polissacarídeos de algas vermelhas (agaranas e carragenanas) têm atraído muita atenção devido à suas diversas aplicações e abundante estoque marinho. O objetivo deste trabalho foi realizar a modificação seletiva de C6 da unidade de ?-D-Galp para a síntese do derivado amino carboxilado da agarose, através de uma síntese em quatro etapas. Para isso, foi realizada a inserção dos grupamentos tosil, azido, amino e carboxila nesta posição do polissacarídeo gerando derivados da agarose que possuem potencial no desenvolvimento de materiais com aplicação tecnológica e farmacêutica, tais como na área biotecnológica, como suporte para imobilização de enzimas, na indústria química em síntese orgânica e na área biomédica na confecção de biomateriais. Além disso, foi realizada a caracterização química de todos os derivados sintetizados. A primeira reação da síntese foi a reação de tosilação. Esta reação foi realizada em meio básico, assim, primeiramente a agarose foi submetida à reação com NaBH4 para redução de seus terminais redutores. As reações preparativas de tosilação, em condições otimizadas, geraram dois derivados tosil da agarose com grau de substituição por grupo tosila de 0,25 e 0,91 (frações 2a e 2b), respectivamente e rendimentos de 97% para ambos os derivados. O derivado 2b apresentou preferência para a posição C6 da unidade de ?-D-Galp, apresentando um grau de substituição de 0,57 para esta posição. Os derivados azido da agarose foram sintetizados, em escala preparativa, em condições otimizadas, com um rendimento de 84% e 52% (frações 3a e 3b). Para a amostra 3b o grau de substituição pelo grupo azido foi de 0,50 para a posição C6 da unidade de ?-D-Galp. Os derivados amino foram sintetizados através da reação de Staudinger, utilizando trifenilfosfina e água. O derivado amino 4a e o derivado 4b apresentaram um rendimento de 76% e de 52%, respectivamente, após purificação em sohxlet para remoção do excesso trifenilfosfina e do subproduto óxido de trifenilfosfina. O grau de substituição para o grupo amino para o derivado 4b foi de 0,28. Os derivados carboxilados, foram sintetizado com os reagentes TEMPO/TCCA promovendo a oxidação seletiva das hidroxilas de C6 da unidade de ?-D-Galp não substituídas por amino. Os resultados indicaram 100% de oxidação das hidroxilas nas frações 4a e 4b e os rendimentos foram de aproximadamente 50% para ambas as frações. Dessa forma, a rota de síntese utilizada se mostrou eficiente, sendo produzido, na maioria das reações, produtos na escala de gramas e as análises dos espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) indicaram que a substituição do grupo tosila por azido e a redução deste a amino foi preferencial em C6 da unidade de ?-D-Galp da agarose. Palavras-chave: Polissacarídeos. Agarose. Modificação química. Derivados da Agarose. / Abstract: Polysaccharides of red algae (agaranas and carrageenan) have attracted much attention due to its various applications and abundant marine stock. The objective of this work was the selective modification of C6 of ?-D-Galp unit for the synthesis of amino carboxylate of agarose, through a synthesis of four steps. For this, was inserted tosyl, azide, amino and carboxyl groups in this position of the polysaccharide, generating agarose derivatives that show potential in the development of materials technology and pharmaceutical applications, such as in the biotechnology area, as support for the immobilization of enzymes, in chemical industry in organic synthesis and in the biomedical field in the production of biomaterials. Furthermore, was realized the chemical characterization of all synthesized products. The first reaction of the synthesis was the tosylation. This reaction was carried out in basic medium, therefore, it was first performed the reaction of agarose with NaBH4 to reduction the polysaccharide reducing terminals. The preparative tosylation reactions, under optimized conditions, generated two tosyl derivative from agarose with a degree of substitution of tosyl group of 0.25 and 0.91 (fractions 2a and 2b), respectively, and 97% yields for both derivatives. The derivative 2b show preference for the C6 position of the ?-D-Galp unit, having a degree of substitution of 0.57 for this position. The azido derivatives of agarose were synthesized in preparative scale in optimal conditions, with a yield of 84% and 52% (fractions 3a and 3b). For the sample 3b the degree of substitution by azido group was 0.50 for the C6 position of the ?-D-Galp unit. The amino derivatives were synthesized via the Staudinger reaction using triphenylphosphine and water. The amino derivative 4a and 4b show a yield of 76% and 52%, respectively, after purification in sohxlet to remove the excess of triphenylphosphine and triphenylphosphine oxyde byproduct. The degree of substitution for the amino group to the derivative 4b was 0.28. The carboxylated derivatives were synthesized with reagents TEMPO / TCCA promoting the selective oxidation of the C6 hydroxyl of the ?-D-Galp unit unsubstituted amino. The results showed 100% oxidation of the hydroxyl fractions 4a and 4b and the yields were approximately 50% for both fractions. Thus, the synthesis route used is efficient, agarose derivatives was produced in gram scale, in most of the reactions and the analysis by nuclear magnetic resonance (NMR) indicated that the substitution of the tosyl group by azide and reduction of this to amine was preferential in C6 of ?-D-Galp unit of agarose. Keywords: Polysaccharides. Agarose. Chemical modification. Derivatives of Agarose.

Orientador : Marcello Iacomini / Co-orientador : Philip A.J. Gorin / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Biológicas, Programa de Pós-Graduaçao em Bioquímica e Biologia Molecular. Defesa: Curitiba, 2005 / Inclui bibliografia / Resumo: As estruturas de polissacarídeos obtidas de 15 espécies de fungos liquenizados (Cladina arbuscula, C. confusa, C. substenius, Dictyonema glabratum, Leptogium azureum, Leptogium sp., Parmotrema austrosinense, P. delicatulum, P. schindlerii, P. mantiqueirense, P. tinctorum, Rimelia cetrata, R. reticulata, Roccella decipiens e Umbilicaria mammulata) foram estudadas. Exceto liquens dos gêneros Roccella, Leptogium e Dictyonema que apresentam a alga Trentepohlia ou cianobactérias dos gêneros Nostoc e Scytonema, respectivamente, como fotobiontes, os demais contêm algas dos gêneros Trebouxia ou Asterochloris, sendo estes os mais estudados. A partir dos talos destes liquens, foram isoladas glucanas, xilanas, mananas, galactomananas, galactoglucomananas, galactomanoglucanas e um heteropolissacarídeo ácido. Os homopolímeros encontrados correspondem a uma ?? -D-glucana contendo ligações glicosídicas alternadas do tipo (1_ 3)- e (1_ 4) (1:1; nigerana), _ -D-glucana contendo ligações do tipo (1_ 3)- e (1_ 4) (1:3.1; liquenana), ?? -glucana (1_ 3) (pseudonigerana), _ -glucana (1_ 3) (laminarana), _ -glucana (1_ 6) (pustulana) podendo conter grupamentos O-acetil, _ -D-xilana linear ligada (1_ 4) e uma _ -Dmanana linear contendo ligações do tipo (1_ 6). As galactomanoglucanas isoladas apresentaram cadeia principal contendo unidades de _ -D-Glcp ligadas (1_ 3) e especialmente substituídas em O-2,6 por cadeias laterais contendo unidades de Galf e Manp. Por outro lado, as galactoglucomananas e a maioria das galactomananas apresentaram uma cadeia principal composta por unidades de ?? -D-Manp contendo ligações glicosídicas do tipo (1_ 6), as quais encontram-se principalmente substituídas em O-2, O-4 e/ou O-2,4 por diferentes cadeias laterais. Além dos polissacarídeos clássicos observados em liquens, foi ainda caracterizada uma galactomanana, obtida de L. azureum, altamente substituída em O-2 por terminais não redutores de ?? -D-Manp e/ou _ -D-Galp. As unidades de _ -D-Galp substituem as unidades de ?? -D-Manp da cadeia principal em O-4 e não em O-2, como geralmente observado. Além destes, foram ainda isolados polissacarídeos contendo estruturas ainda não descritas em liquens, como galactomananas altamente ramificadas de R. decipiens, apresentando uma cadeia principal composta por unidades de ?? -Manp (1_ 4) ligadas, parcialmente substituídas em O-2 por cadeias laterais de unidades de ?? -Manp (1_ 2) e (1_ 6)- ligadas. As duas galactomananas apresentaram conteúdo variável de Galf. Uma das estruturas apresentou as unidades de Galf como terminais não-redutores, substituindo as unidades de Manp das cadeias laterais em O-6, enquanto que, a outra estrutura apresentou uma maior proporção de unidades de Galf como 5-O-, 6-O- e 5,6-di-Osubstituídas. Uma _ -D-manana linear contendo ligações do tipo (1_ 6) e uma pseudonigerana foram caracterizadas de D. glabratum. Os liquens do gênero Leptogium apresentaram polissacarídeos com características não usuais, como a presença das unidades de 3-O-Me-Galp e de altos teores de grupamentos ácidos. Os dados obtidos reforçam a utilização dos polissacarídeos como marcadores quimiotaxonômicos e sugerem um possível envolvimento do fotobionte na biossíntese de polissacarídeos liquênicos, uma vez que estruturas não descritas anteriormente foram encontradas em liquens que apresentam as algas Trentepohlia, Nostoc e Scytonema como fotobiontes. / Abstract: The structures of polysaccharides from 15 species of lichenized fungi (Cladina arbuscula, C. confusa, C. substenius, Dictyonema glabratum, Leptogium azureum, Leptogium sp., Parmotrema austrosinense, P. delicatulum, P. schindlerii, P. mantiqueirense, P. tinctorum, Rimelia cetrata, R. reticulata, Roccella decipiens, and Umbilicaria mammulata) were studied. Except for lichens of the genera Roccella, Leptogium, and Dictyonema that contain the algae Trentepohlia, Nostoc and Scytonema as photobionts, the other genera have algae from the well-studied genera Trebouxia and Asterochloris. Glucans, xylans, mannans, galactomannans, galactoglucomannans, galactomannoglucans, and an acidic heteropolysaccharide were isolated from the thalli of the lichens. Characterized homopolymers were an ?? -Dglucan, with alternate (1_ 3)- and (1_ 4)-linkages (1:1; nigeran), a _ -D-glucan with (1_ 3)- and (1_ 4)-linkages (1:3.1; lichenan), a (1_ 3)-linked ?? -glucan (pseudonigeran), a (1_ 3)-linked _ -glucan (laminaran), a (1_ 6)-linked _ -glucan (pustulan) with possible O-acetyl groups, a linear (1_ 4)-linked _ -D-xylan and a (1_ 6)-linked _ -D-mannan. The isolated galactomannoglucans contained a main chain of (1_ 3)-linked _ -D-Glcp units, substituted at O-2,6 by side chains of Galf and Manp units. In contrast, the galactoglucomannans and most of the galactomannans had a main chain of (1_ 6)-linked ?? -D-Manp units, mainly substituted at O-2, O-4 and/or O- 2,4 by various side chains. In addition to well-known lichen polysaccharides, some unusual ones were also characterized, such as a galactomannan from L. azureum, highly substituted at O-2 by non-reducing end units of ?? -D-Manp and/or _ -D-Galp. _ - D-Galp units substituted the ?? -D-Manp units of the main chain at O-4 and not at O-2, as usually observed. Also found were two highly substituted galactomannans from R. decipiens that have not been previously observed. The main chain of these polymers is composed of (1_ 4)-linked ?? -Manp units, partially substituted at O-2 by (1_ 2) and (1_ 6)-linked ?? -Manp side-chains. These galactomannans had different contents of Galf units. One of them had Galf units as non-reducing ends, which substituted Manp units of the side chains at O-6, while the other contained a higher proportion of Galf units as 5-O-, 6-O- e 5,6-di-O- substituted units. A linear (1_ 6)-linked _ -D-mannan and pseudonigeran were also found in D. glabratum. Lichens from the genus Leptogium contained unusual polysaccharides, containing 3-O-methyl-galactopyranose units and high percentage of acidic groups. The data reinforce the use of polysaccharides as a chemotaxonomic tool and suggest an involvement of lichen photobionts in the biosynthesis of polysaccharides since new structures were found in lichens that have the algae Trentepohlia, Nostoc and Scytonema as photobionts.

Resumo: O tamarillo (Solanum betaceum), conhecido também pelo nome popular de tomate de árvore, é um fruto tropical exótico nativo dos Andes, de alto valor nutricional e utilizado em diversas preparações culinárias. Na medicina popular existem relatos de seu uso principalmente como antinociceptivo e anti-inflamatório. Como não existem na literatura trabalhos que caracterizem a estrutura química dos polissacarídeos presentes no fruto e que os relacionem com propriedades biológicas, este trabalho teve como objetivo elucidar a estrutura química dos polissacarídeos presentes na polpa do fruto maduro do tamarillo, bem como verificar o efeito antinociceptivo de uma galactoarabinoglucuronoxilana purificada. Os frutos, descascados e sem sementes, foram liofilizados e moídos, e após a deslipidificação com clorofórmio-metanol (1:1), a polpa foi submetida à extrações aquosas e alcalinas (KOH 10%) sob refluxo. A partir do extrato aquoso foi isolada e caracterizada (a) uma arabinana linear (1?5) ligada (PTW-Amil), (b) uma fração péctica contendo uma homogalacturonana (HG) altamente metil esterificada (DE = 71%, e DA = 1,3%) (PPF), provavelmente com inserções de ramnogalacturonana tipo I (RG-I) contendo cadeias laterais constituídas principalmente por arabinogalactanas tipo I (AG-I), e (c) uma arabinogalactana do tipo I presente nas frações AG-I 50E e 50R, contendo uma cadeia principal formada por unidades de ?-D-Galp (1?4) ligadas, parcialmente substituídas em O-3 por unidades de ?-L-Araf. Já a partir do extrato alcalino foram purificadas e caracterizadas duas galactoarabinoglucuronoxilanas (STK-1000R e PF), contendo uma cadeia principal constituída por unidades de ?-D-Xylp (1?4) ligadas, exclusivamente ramificadas em O-2. Aquela presente em STK-1000R é menos ramificada que a encontrada na fração PF, com cadeias laterais formadas por unidades de ?-L-Araf (1?5) ligadas, ?-D-GlcpA (1?4) ligadas e terminais não redutores formados por ?-L-Araf, ?-Arap, ?-D-Galp, ?-D-GlcpA e 4-O-Me-?-D-GlcpA. A administração intraperitonial da fração STK-1000R mostrou redução significativa na contorção abdominal induzida por 0,6% de ácido acético e na fase inflamatória da nocicepção induzida por 2,5% de formalina em camunondongos, indicando que o efeito da galactoarabinoglucuronoxilana na dor é através de mecanismos anti-inflamatórios.

Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade de ligacao in vitro a bacterias enteropatogenicas (Salmonella sp.) dos extratos nativos e quimiotransformados isolados de farelo de soja. Para obtencao dos extratos foram adotadas cinco estrategias de extracao: estrategia 1 para obtencao de extratos nativos; estrategias 2 e 4 para obtencao de extratos quimiotransformados e estrategias 3 e 5 como controles das estrategias 2 e 4. Na estrategia 1 o farelo de soja foi submetido a extracoes aquosas sequenciais (25 oC e 80 oC; 4 h). Nas estrategias 2 e 3, uma solucao de farelo de soja teve seu pH ajustado para 2,0 e 7,0, respectivamente, e foi submetida a autoclavacao (121 oC, 1 atm, 1 h). Apos filtracao, neutralizacao e centrifugacao o sobrenadante obtido foi submetido a um novo processo de autoclavacao (121 oC, 1 atm, 15 min). Nas estrategias 4 e 5, uma solucao de farelo de soja teve seu pH ajustado para 2,0 e 7,0, respectivamente, e foi submetida a autoclavacao (121 oC, 1 atm, 1 h). Apos filtracao, neutralizacao e centrifugacao o sobrenadante obtido foi submetido a um novo processo de autoclavacao (121 oC, 1 atm, 15 min). A solucao final foi entao tratada com TCA 80% (p/v) e em seguida os polissacarideos foram precipitados com etanol. As extracoes aquosas a 25 e 80 oC (Estrategia 1) nao foram eficientes para a extracao de polissacarideos. As fracoes obtidas a partir desta estrategia sao compostas por alto teor de proteinas (66,0 - 87,2%) e baixos teores de carboidratos (3,6 - 8,2%), com excecao da fracao FS-1, a qual apresentou o maior teor de carboidratos (42,5%), sendo estes oligossacarideos, majoritariamente sacarose. A estrategia 2 originou um polissacarideo quimiotransformado, inedito na natureza, uma ?-galactana, composta principalmente por unidades de -D-Galp-(1 4)-ligadas. Os polimeros extraidos com as estrategias 3 e 5, estrategias controle, sao constituidos de um polissacarideo do tipo pectina com unidades de -D-GalpA-(1 4)-ligadas e cadeias laterais de -LAraf-( 1 5)-ligadas e -D-Galp-(1 4)-ligadas, confirmando que a condicao de extracao utilizada para estrategia 2 e capaz que quimiotransformar a estrutura polissacaridica nativa. As fracoes obtidas da estrategia 4 apresentam alto conteudo de acido galacturonico, galactose, xilose, arabinose e ramnose, o que sugere a presenca de pectinas. Os diversos extratos obtidos das diferentes estrategias de extracao foram avaliados quanto a sua capacidade de ligacao a bacterias enteropatogenicas (Salmonella sp.). Os resultados obtidos foram comparados aos do produto comercial hoje existente (BioMosR). Os extratos nativos (estrategia 1) diferenciaram-se significativamente do produto comercial, apresentando resultados ate 3000% maiores. As fracoes obtidas das estrategias 2 e 3 apresentaram capacidade de ligacao semelhante ao produto comercial, mostrando-se como potenciais substitutos. A capacidade de ligacao evidenciada para soja e dita comumente como resultado da presenca de manose e sua respectiva ligacao as lectinas da bacteria. No entanto os teores de manose determinados no presente trabalho sao baixos (0 - 2,3%) o que pode indicar que as proteinas tambem possam estar envolvidas no processo de ligacao. Estes resultados demonstram o potencial uso biotecnologico do farelo de soja.

Orientador: Valéria Marta Gomes do Nascimento / Coorientador: Karina Alves de Toledo / Banca: Fhernanda Ribeiro Smiderle / Banca: Aneli de Melo Barbosa / Resumo: Polissacarídeos são empregados em diversos segmentos industriais como espessantes, detergentes, laxantes, fibras, e coberturas de alimentos. Novas pesquisas tem enfocado o potencial anti-inflamatório, anti-mutagênico e imunomodolador de exopolissacarídeos (EPS) microbianos, bem como sua aplicação em sistemas de liberação controlada de medicamentos. Diversas pesquisas têm empregado β-glucanas fúngicas e verificado diversas atividades biológicas. O objetivo do presente projeto foi estudar a ação imunomoduladora do EPS de Lasiodiplodia theobromae, avaliar a capacidade do exopolissacarídeo na forma de blendas com látex de atuarem como carreadores de medicamentos e algumas propriedades mecânicas do EPS em blendas com látex. O micro-organismo foi cultivado em meio Vogel, com sacarose 50 g/L, a 28°C, 180 rpm, por 72 h. O EPS foi precipitado com etanol (3:1v/v), dialisado e purificado por congelamento/degelo e ultrafiltração. O rendimento em EPS em cada cultivo foi em média de 1,9 g/L. A ação imunomoduladora in vitro foi realizada apenas com a fração de EPS β- glucana (1→6) purificada, adicionando diferentes concentrações de polissacarídeo a macrófagos humanos de linhagem U937 e verificando-se viabilidade celular e perfil de citocinas (TNF-α e IL-10). Quanto aos ensaios de imunomodulação, o EPS purificado β- glucana (1→6) se mostrou capaz de ativar a resposta de macrófagos com a liberação da citocina TNF-α nas primeiras 24h , decaindo em 48h, sem apresentar ativação da resposta de IL-10, o que sugere uma resposta pró-inflamatória e anti-tumoral. Os filmes foram avaliados quanto a espessura, perda de umidade, solubilidade em água e resistência mecânica. A avaliação dos filmes como carreador de medicamento foi realizada pela adição de cetoprofeno a blenda EPS e látex, e acompanhamento da liberação do fármaco por espectrofotometria Os filmes apresentaram espessuras entre 2 a 3,5 mm; mínima perda de... / Abstract: Polysaccharides are employed in various industries as thickeners, detergents, laxatives, fiber and food toppings . New research has focused on the anti - mutagenic anti-inflammatory and imunomodulator potential of microbial exopolysaccharides (EPS), as well as in their application in controlled drug delivery systems. Several studies have employed fungal β -glucans and verified high biological activity. The goal of this project is to study the immunomodulatory action of EPS produced by Lasiodiplodia theobromae, evaluate the ability to act as drug carriers of blends formed by exopolysaccharide and latex and also some mechanical properties of these blends. The micro-organism was grown on Vogel medium with sucrose 50 g / L at 28 ° C, 180 rpm for 72 h. The EPS was precipitated with ethanol ( 3:1 v/v), dialyzed and purified by freezing / thawing and ultrafiltration. The yield of EPS in each culture was on average 1.9 g / L. The study of the immunomodulating effects was performed in vitro, only with the fraction of EPS β- glucan ( 1 → 6 ) purified by adding different concentrations of polysaccharide in human U937 macrophages lineage and verifying cell viability and cytokine ( TNF - α and IL - 10 profile ). Concerning the tests of immunomodulation, the EPS purified β- glucan ( 1 → 6 ) has shown to be capable of activate the macrophage response to the release of TNF - α cytokine in the first 24h , decreasing after 48h, without showing response activation of IL - 10 , which suggests a pro-inflammatory and anti- tumor response. The films were evaluated for thickness, moisture loss, water solubility and mechanical strength. The evaluation of the films as a carrier of drugs was performed by the addition of ketoprofen to EPS and latex blend, and monitoring of drug release by spectrophotometry. The films presented thicknesses between 2 and 3.5 mm; minimal moisture loss (between 0.5 and 3%); solubility varying from 3 to 6,5 and good mechanical... / Mestre