A doença Huanglongbing (HLB) associada a bactéria Candidatus Liberibacter spp., que coloniza os vasos do floema, é considerada uma das mais graves doenças de citros. Uma importante estratégia para o controle desta doença consiste na produção de plantas transgênicas, expressando genes que codificam peptídeos antibacterianos especificamente no local de colonização do patógeno. O objetivo deste trabalho foi obter plantas transgênicas de laranja doce, expressando o gene que codifica o peptídeo antibacteriano atacina A (attA) dirigido por promotores específicos para a expressão gênica no floema. O trabalho foi iniciado com a elaboração de construções gênicas contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 (transportador de sacarose), AtPP2 (proteína de floema 2), clonados de Arabidopsis thaliana, ou CsPP2 (proteína de floema 2), clonado de Citrus sinensis. Os experimentos de transformação genética foram realizados com C. sinensis cv. \'Hamlin\', \'Valência\', \'Pêra\' e \'Natal\', via Agrobacterium tumefaciens, utilizando-se segmento de epicótilo como explante. A identificação de plantas transgênicas foi realizada por meio da análise de PCR. Plantas PCR+ foram aclimatizadas e transferidas para casa-de-vegetação específica para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de Southern e Northern blot foram realizadas em plantas aclimatizadas, confirmando-se a integração e transcrição do gene attA, respectivamente. A expressão do gene attA também foi confirmada pela análise de RT-qPCR. Plantas de laranja \'Hamlin\' contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 ou AtPP2 foram propagadas por enxertia, para futura avaliação da resistência a Candidatus Liberibacter asiaticus / Huanglongbing (HLB) associated to Candidatus Liberibacter spp., which colonizes the phloem, is considered one of the most serious diseases of citrus. One important strategy to control this disease consists of producing transgenic plants expressing, in the bacteria colonization tissue, genes encoding antibacterial peptides. The objective of this work was to produce transgenic sweet orange plants expressing genes encoding the antibacterial peptide attacin A (attA) driven by phoem-specific promoters. The work started with the development of the gene constructs, containing the attacin A gene (with or without signal peptide) controlled by either sucrose transporter gene (AtSuc2) or phloem protein 2 gene promoters (AtPP2) from Arabidopsis thaliana, or phloem protein 2 gene promotor (CsPP2) from Citrus sinensis. The genetic transformation of C. sinensis \'Hamlin\', \'Valencia\', \'Pera\' and \'Natal\' cultivars was done via Agrobacterium tumefaciens. Epicotyls segments collected from in vitro germinated seedlings were used as explants. Transgenic plants were identified by PCR analyses. PCR positive plants were acclimatized and transferred to specific greenhouse. Integration and transcription of the attA gene was confirmed in acclimatized transgenic plants by Southern and Northern blot analysis, respectively. The attA gene expression was validated by RT-qPCR analysis. \'Hamlin\' transgenic cultivars containing the AtSuc2 or AtPP2 promoters controlling the expression of attA (with or without signal peptide) were propagated by grafting, for future evaluation of Candidatus Liberibacter asiaticus resistance

Devido as suas características funcionais, as proteínas vêm sendo cada vez mais utilizadas em diferentes áreas e atividades da sociedade humana como: alimentícia, indústria, têxtil, papel e celulose, química e médica. A produção industrial de proteínas de valor comercial para diversas aplicações, vem sendo cada vez mais conduzida através do desenvolvimento de sistemas de expressão em diferentes hospedeiros, como Saccharomyces cerevisiae. O presente trabalho teve por objetivo desenhar um sistema de expressão metabolicamente independente induzido pelo hormônio estradiol que, em S. cerevisiae, seja capaz de produzir e secretar com eficiência proteínas homólogas e/ou heterólogas de interesse industrial. Para tanto, foi desenhado e construído um plasmídeo regulador (que expressa o fator de transcrição quimérico c-mycGal4(DBD)hERα(LBD)VP16(AD) e um plasmídeo de expressão (que contém o promotor quimérico p5xUASGAL-UARcb1, o qual será induzido pelo fator de transcrição quimérico, regulando a expressão da proteína repórter celobiohidrolase I - cbh1 de Trichoderma reesei). Ambos plasmídeos foram utilizados para transformar a cepa ScW303-1A/pdr5Δ(construída neste trabalho) e induzido com diferentes concentrações de estradiol. Para analisar a habilidade do promotor em dirigir a expressão da proteína repórter cbh1, foi feito o teste de DNS, com os transformantes selecionados, utilizando carboximetilcelulose 1% como substrato. A maior atividade enzimática ocorre na indução do sistema com 5 μM de 17-β-estradiol e DES (dietilestilbestrol). Os resultados mostram que o sistema de expressão induzido por 17-β-estradiol e DES, funciona de forma eficiente em S. cerevisiae e que o mesmo pode ser utilizado na produção biotecnológica de outras proteínas de interesse. / Due to its functional characteristics, the proteins are being increasingly used in different areas and activities of human society: food, industry, textile, pulp and paper, chemical and medical. The industrial production of commercially valuable proteins for various applications is increasingly being conducted through the development of systems of expression in different hosts such as Saccharomyces cerevisiae. This study aimed to design a metabolically independent expression system induced by estradiol hormone in S. cerevisiae is able to produce and secrete effectively homologous proteins and / or heterologous of industrial interest. Thus, it was designed and built a regulatory plasmid (expressing the chimeric transcription factor c-myc-Gal4 (DBD) -hERα (LBD) - VP16 (AD) and an expression plasmid (which contains the chimeric promoter 5xUASGAL- UARcb1, which is induced by the chimeric transcription factor, regulating the expression of the reporter protein cellobiohydrolase I - cbh1 of Trichoderma reesei). Both plasmids were used to transform ScW303-1A / pdr5Δ strain (constructed in this work) and induced with different concentrations of estradiol. To analyze the ability of the promoter to direct the expression of the reporter protein cbh1, the DNS testing, with the selected transformants was done using 1% carboxymethylcellulose as a substrate. The highest enzymatic activity occurs in the induction system with 5 μM of 17-β-estradiol and DES (diethylstilbestrol). The results show that the expression system induced by 17-β-estradiol and DES operates efficiently in S. cerevisiae and that it can be used for the biotechnological production of other proteins of interest.

Angiopoietin-2 (Ang-2) wirkt gefäßdestabilisierend und ist Voraussetzung für das Aussprossen von Gefäßen am Anfang der angiogenen Kaskade. Die Expression des Antagonisten der endothelialen Rezeptor-Tyrosin-Kinase Tie-2 ist streng gewebsspezifisch reguliert. Trotz des Zusammenhangs von Ang-2 und pathologischer Angiogenese sind die molekularen Mechanismen der ang-2 Regulation noch unverstanden. Mittels Microarray wurden die genomweiten Expressionsänderungen in endothelialen Zellen nach Behandlung mit dem demethylierenden 5-Aza-2’-deoxycytidine (5-Aza-dC) untersucht. Unter den induzierten Genen wurde ang-2 mit dem Fokus auf angiogeneserelevante Gene identifiziert. Obwohl die Endothelzellen unter Kontrollbedingungen ang-2 exprimieren, wurde die Expression durch Demethylierung weiter gesteigert. Es wurden jedoch keine potentiellen CpG-Inseln in unmittelbarer Nähe des Transkriptionsstarts identifiziert. Diese Daten lassen auf einen methylierungsunabhängigen Effekt von 5-Aza-dC auf die ang-2 Expression schließen. Zur molekularen Untersuchung der ang-2 Expression wurden 3kb der 5´-flankierenden Sequenz des humanen ang-2 Gens kloniert und der Transkriptionsstartpunkt (TS) bestimmt. Durch funktionelle 5´-Deletionsanalyse und zielgerichtete Mutagenese wurden regulatorische Promotorelemente identifiziert. Die Promotorregion -105 bis +51 relativ zum TS war ausreichend für die Vermittlung der basalen ang-2 Expression. Mittels Bindungsstudien wurden die Transkriptionsfaktoren Sp1 und Sp3 als Proteine, die primär an den ang-2 Minimalpromotor binden, identifiziert. Die Basen -78 bis -74 relativ zum TS sind eine essentielle Sp-Bindestelle für die Regulation der ang-2 Expression. Durch Mutation von potentiellen Bindungsstellen für Proteine der ETS-Familie wurde die ang-2 Promotoraktivität signifikant reduziert. Jedoch konnte die Spezifität von ETS-Proteinen in Bindungsstudien nicht bestätigt werden. Die Ergebnisse dieser Arbeit haben neue Einblicke in die ang-2 Regulation offenbart und zeigen, dass die Sp1/Sp3-abhängige Aktivierung des proximalen Promotorbereichs (-105/-56) entscheidend für die transkriptionelle ang-2 Regulation in Endothelzellen ist. / Angiopoitein-2 (Ang-2) acts destabilizing on blood vessels and is mandatory for the onset of the angiogenic cascade. The expression of the antagonistic ligand of the endothelial cell tyrosine kinase receptor Tie-2 is tightly regulated. Despite the accumulating evidence confirming the involvement of Ang-2 in pathologic angiogenesis, the molecular mechanisms controlling ang-2 expression are still unclear. Using microarray analysis, the global changes of gene expression were investigated after treatment of endothelial cells with the demethylating agent 5-aza-2’-deoxycytidine (5-aza-dC). Focusing on angiogenesis related genes, ang-2 was identified among the upregulated ones. Although endothelial cells expressed ang-2 under control conditions already the expression was further increased by drug-induced demethylation. A screen for CpG-islands revealed no putative islands surrounding the transcription initiation site. These data indicate a methylation-independent effect of 5-aza-dC on the ang-2 expression. To elucidate underlying molecular mechanisms of ang-2 expression, 3kb of the human ang-2 gene were cloned and the transcription start site (TS) determined. Regulatory promoter elements were identified by functional 5’-deletion analysis and site-directed mutagenesis. The promoter region -105 to +51 relative to TS was recognized as sufficient and necessary for the ang-2 gene transcription. Electrophoretic Mobility Shift Assays revealed Sp1 and Sp3 as dominant nuclear proteins binding to the ang-2 promoter. The region spanning -78/-74 was identified as essential Sp1/3 site regulating ang-2 expression. The mutation of potential ETS-binding sites resulted in a significant decrease of ang-2 promoter activity. However, the binding of ETS-proteins could not be confirmed by means of EMSA. The results of this thesis revealed new insights of ang-2 regulation and strongly suggest that Sp1/Sp3-dependent activation of an upstream enhancer at -105 to -56 is crucial for the regulation of ang-2 expression in endothelial cells.

Após a reunião de Kyoto ficou estabelecido o sistema de \"crédito carbono\" no qual as indústrias que reduzissem a emissão de gás carbônico para o ambiente aufeririam algumas vantagens. Neste sentido já há uma procura por parte de algumas empresas em reduzir esta emissão. Na maioria dos casos esta emissão é reduzida por meio da absorção do CO2 através de uma base, por exemplo, soda, amônia, cal, aminas, entre outras. O caso da amônia e da soda é interessante para empresas que possuem outros efluentes com estas bases em concentrações bem baixas, resultando assim soluções bem diluídas dos sais correspondentes. Soluções muito diluídas ou são descartadas no meio ambiente, que atualmente é proibido, ou são concentradas. A concentração, dessas soluções, usando vapor como meio de aquecimento torna-se um contra-senso por exigir a emissão de CO2 decorrente da queima de óleo combustível em caldeiras. Técnicas bem mais compatíveis com a preservação ambiental serão bem vindas daqui por diante, principalmente aquelas que não emitem CO2. Observando este fato este trabalho visa desenvolver um evaporador com promotor de película, em escala de laboratório para concentrar soluções diluídas, empregando energia solar como meio de aquecimento. O procedimento proposto não emite CO2, sendo mais compatível com a preservação ambiental. O equipamento construído consta de: coletor solar tipo placa plana com inclinação ajustável, promotor de película (aderido ao coletor),distribuidor de líquido, coletor de concentrado e acessórios. Foram estudadas as influências das variáveis: inclinação do coletor, vazão de alimentação e condições meteorológicas, na taxa de evaporação. As condições meteorológicas não podem ser controladas, mas foram constantemente monitoradas. Obtiveram-se maiores eficiências, quando a inclinação do coletor foi ajustada mensalmente, com valores até 36,4% maiores do que quando o coletor permanece fixo. / The system of Carbon Credits established by the 1997 Kyoto Protocol benefits companies that reduce their emissions of carbon into the environment with some advantages. Since the Protocol was signed, many companies have sought new ways to reduce their emissions. In most cases, these emissions are reduced through CO2 absorption by a base, e.g., soda, ammonia, lime and amines, among others. Ammonia and soda are interesting bases for companies that produce other effluents containing these products in much lower concentrations, resulting in highly diluted solutions of the corresponding salts. Highly diluted solutions are either discharged into the environment, which is forbidden today, or they are concentrated. Concentrating these solutions using vapor, as a means of heating is unfeasible since that would involve the emission of CO2 from burning oil in boilers. Therefore, from now on, attention will focus increasingly on more environmentally friendly techniques, especially techniques that do not cause CO2 emissions. A solar energy powered falling film evaporator with film promoter was developed for concentrating diluted solutions (industrial effluents). The procedure proposed here does not emit CO2, making it a viable alternative to the method of concentrating solutions. This novel device consists of the following components: a flat plate solar collector with adjustable inclination, a film promoter (adhering to the collector), a liquid distributor, a concentratecollector, and accessories. The evaporation rate of the device was found to be affected both by the inclination of the collector and by the feed flow. The meteorological variables cannot be controlled, but were monitored constantly to ascertain the behavior of the equipment in response to the variations occurring throughout the day. ) Higher efficiencies were attained when the inclination of the collector was adjusted monthly, showing up to 36.4% higher values than when the collector remained in a fixed position.

Submitted by Kelson Anthony de Menezes (kelson@ucb.br) on 2016-12-19T17:43:43Z No. of bitstreams: 1 PhilippedeCastroLinsDissertacao2015.pdf: 2365075 bytes, checksum: c5628aa72f1ff54c00d7f8617a9d41dd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-19T17:43:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PhilippedeCastroLinsDissertacao2015.pdf: 2365075 bytes, checksum: c5628aa72f1ff54c00d7f8617a9d41dd (MD5) Previous issue date: 2015-04-10 / Gene promoters regulate gene expression quantitatively and qualitatively. The regulatory sequences have cis elements and with trans acting that will direct and correctly position the RNA polymerase which is the process of DNA transcription. Genetic engineering of plants by transforming plants expressing genes of interest, use in most studies, constitutive CaMV35S promoter character. A new promoter isolated from soybeans, which is called uceS8.3 showing a constitutive promoter driving expression in different plant tissues. The analysis of the expression of the uidA gene, GUS, demonstrated that the expression profile uceS8.3 controlled by the promoter is comparable or superior to the CaMV35S promoter in plant tissues such as flower buds and roots. Were identified following the uceS8.3 promoter cis regulatory elements that may be responsible for gene expression profile controlled by this promoter. Modules of this promoter, when compared with the CaMV35S promoter and the uceS8.3 itself demonstrated a difference in expression in plant tissues. Cis regulatory elements as ROOTMOTIFPABOX1, POLLEN1LELAT52, MRE, Sp1 and Ibox. The set of specific cis elements located in the promoter uceS8.3 modules may be the minimum necessary elements to control expression in leaf and flower bud tissues. The quantitative expression analysis and fluorometric GUS assays leaf and root tissues have demonstrated a correlation between transcript levels and the specific activity levels of a ??-glucuronidase enzyme in module 2 (720pb), but there is a difference in the balance of these levels between uceS8.3 promoter and Module 4 (170pb). The studies presented here demonstrated that the promoter and its modules has high ability to drive expression in flower tissues and roots, may be used and applied to different types of biotechnologically biotic stresses, including insect pests and nematodes. / Promotores g??nicos regulam a express??o de genes, quantitativamente e qualitativamente. As sequ??ncias regulat??rias possuem elementos cis e trans atuantes que v??o direcionar e posicionar corretamente a RNA polimerase para que haja o processo de transcri????o do DNA. A engenharia gen??tica de plantas, por meio da transforma????o de plantas, expressando genes de interesse, vem utilizando, na maioria dos estudos, o promotor CaMV35S de car??ter constitutivo. Um novo promotor isolado de soja, denominado uceS8.3 ?? tamb??m um promotor constitutivo demonstrando conduzir a express??o em diferentes tecidos vegetais. A an??lise da express??o do gene uidA, GUS, demonstrou que o perfil de express??o controlada pelo promotor uceS8.3 ?? compar??vel ou superior ao promotor CaMV35S em tecidos vegetais, como bot??o floral e raiz. Foram identificados, na sequ??ncia do promotor uceS8.3, elementos cis regulat??rios que podem ser respons??veis pelo perfil de express??o g??nica controlada por esse promotor. Os m??dulos desse promotor, quando comparados com o promotor CaMV35S, e o pr??prio uceS8.3 demonstraram uma diferen??a de express??o nos tecidos vegetais. Elementos cis regulat??rios como ROOTMOTIFPABOX1, POLLEN1LELAT52, MRE, Sp1 e I-box. O conjunto de elementos cis espec??ficos, localizados nos m??dulos do promotor uceS8.3, podem ser os elementos m??nimos necess??rios para controlar a express??o em tecidos de folha e bot??o floral. A an??lise de express??o quantitativa e de ensaios fluorim??tricos de GUS nos tecidos folha e raiz, demonstraram uma correla????o entre os n??veis de transcrito e os n??veis de atividade espec??fica da enzima ??-glucuronidase no m??dulo 2 (720pb), por??m h?? uma diferen??a na correla????o destes n??veis entre o promotor uceS8.3 e o m??dulo 4 (170pb). Os estudos aqui apresentados demonstraram que o promotor uceS8.3 e seus m??dulos possuem alta capacidade de conduzir express??o em tecidos florais e ra??zes, podendo ser utilizado e aplicado biotecnologicamente para diferentes tipos de estresses bi??ticos, incluindo insetos-praga e nemat??ides.

Um conjunto de quadros clínicos conhecidos genericamente por Leishmaniose, que representa um sério problema de Saúde Pública, tem como agentes etiológicos protozoários do gênero Leishmania. Em seu ciclo de vida, o parasita apresenta dois hospedeiros, um vertebrado e um invertebrado. O gênero Leishmania é dividido em dois subgêneros: Leishmania (Leishmania) e LeishmaniaViannia), de acordo com a posição ocupada pela forma promastigota no tubo digestivo do hospedeiro invertebrado. Genes que codificam RNA ribossômico são exclusivamente transcritos pela RNA polimerase I. A região promotora dessa polimerase é conhecida como espécie-específica. Estudos anteriores, baseados em ensaios de expressão transiente com construções nas quais a expressão do gene repórter CAT era dirigido por diferentes regiões do promotor mostraram que em Leishmania há um reconhecimento espécie-específico, mas que espécies filogeneticamente relacionadas reconhecem melhor o promotor do que a espécie homóloga. A caracterização estrutural da região promotora de RNA pol I de L. (V.) braziliensis possibilitou mapear o sítio de início de transcrição e definir a provável região promotora de RNA pol I desse organismo. Quando comparamos o 5´ ETS da região estudada, com a região correspondente das demais espécies do subgênero L. (Leishmania), notamos uma alta similaridade tanto no tamanho, quanto na seqüência de nucleotídeos. Já na região IGS os blocos de repetição apresentam tamanho similar, porém seqüências distintas, assim como a seqüência à montante do ETS. Não foi determinado o número de blocos de repetição presente em cada cístron de L.(V.) braziliensis. Os estudos de ligação de fatores nucleares à região central do promotor mostraram que houve um reconhecimento diferencial dessa região entre a espécie homóloga L. (V.) braziliensis e as espécies heterólogas L. (V.) guyanensis, pertencente ao mesmo subgênero e L. (L.) amazonenis. Os complexos protéicos associados a essa região central apresentaram maior afinidade com a espécie heteróloga L. (V.) guyanensis. O fato de ser o ensaio de CAT trabalhoso e demorado levou à busca de outro repórter que evidenciasse a funcionalidade da região promotora ao mesmo tempo em que permitisse a quantificação dessa expressão, de modo a medir a força do promotor. Neste trabalho iniciamos a padronização para utilizar GFP como gene repórter no estudo da funcionalidade de promotores. Foi possível mostrar que a GFP é detectável em microscopia confocal e que as células que expressam GFP podem ser quantificadas em FACS, no entanto, essas detecções só foram possíveis em parasitas selecionados por uma marca de seleção, ou seja, numa transfecção estável. Assim, substituir o gene repórter CAT pelo gene GFP foi inadequado para os ensaios de transfecção transiente, impedindo que fosse medida a atividade da região promotora de L. (V.) braziliensis em diferentes espécies. / Leishmaniasis is the generic name of a serious public health problem that is caused by protozoa of the genus Leishmania. In its lifecycle, the parasite has two hosts, a vertebrate and an invertebrate. The genus Leishmania is divided into two subgenera: Leishmania (Leishmania) and Leishmania (Vianna), according to the position occupied by the promastigotes form at the gut of the invertebrate host. Genes that encode ribosomal RNA are exclusively transcribed by RNA polymerase I. The promoter region of the RNA polymerase I is known to present a species-specific recognition. Previous studies, based on transient expression assays with constructions in which the expression of the reporter gene CAT was directed by different regions of the promoter showed that RNA pol I promoter in Leishmania is species-specific, but in phylogenetically related species the expression of the reporter gene is higher than in the homologous species. The structural characterization of the promoter region of RNA pol I of L. (V.) braziliensis enabled to map the site of initiation of transcription and to define the promoter region of RNA pol I. The comparison of the determined 5\' region of the ETS region, with the corresponding region of other species of the subgenus L. (Leishmania), showed a high similarity both in size, as in the sequence of nucleotides. However, the IGS region and the repetitive blocks of nucleotides have similar size but different sequences. The studies of binding of nuclear factors to the central region of the promoter showed that there was a recognition between the species counterpart L. (V.) braziliensis and the heterologous species L. (V.) guyanensis, belonging to the same subgenus and L. (L.) amazonensis, that belongs to another subgenus. The complex protein associated with this central region showed greater affinity with the heterologous species L. (V.) guyanensis. The fact that to quantify the CAT expression represents a laborious and time consuming test lead us to search for another reporter that could identified the functionality of the promoter region and at the same time allowed the quantification of expression in order to measure the strength of the promoter. In the present work, we began the standardization for the use of GFP gene as reporter in the study of the functionality of promoters. It was possible to show that GFP is detectable in confocal microscope and the cells that express GFP can be quantified in FACS, however, these findings were made possible only in parasites selected by the mark, ie in a stable transfection. So, the replacement of CAT by GFP reporter showed to be inadequate for testing promoters in transient transfection. This prevented the measure of the activity of the promoter region of L. (V.) braziliensis in different species.

Após a reunião de Kyoto ficou estabelecido o sistema de \"crédito carbono\" no qual as indústrias que reduzissem a emissão de gás carbônico para o ambiente aufeririam algumas vantagens. Neste sentido já há uma procura por parte de algumas empresas em reduzir esta emissão. Na maioria dos casos esta emissão é reduzida por meio da absorção do CO2 através de uma base, por exemplo, soda, amônia, cal, aminas, entre outras. O caso da amônia e da soda é interessante para empresas que possuem outros efluentes com estas bases em concentrações bem baixas, resultando assim soluções bem diluídas dos sais correspondentes. Soluções muito diluídas ou são descartadas no meio ambiente, que atualmente é proibido, ou são concentradas. A concentração, dessas soluções, usando vapor como meio de aquecimento torna-se um contra-senso por exigir a emissão de CO2 decorrente da queima de óleo combustível em caldeiras. Técnicas bem mais compatíveis com a preservação ambiental serão bem vindas daqui por diante, principalmente aquelas que não emitem CO2. Observando este fato este trabalho visa desenvolver um evaporador com promotor de película, em escala de laboratório para concentrar soluções diluídas, empregando energia solar como meio de aquecimento. O procedimento proposto não emite CO2, sendo mais compatível com a preservação ambiental. O equipamento construído consta de: coletor solar tipo placa plana com inclinação ajustável, promotor de película (aderido ao coletor),distribuidor de líquido, coletor de concentrado e acessórios. Foram estudadas as influências das variáveis: inclinação do coletor, vazão de alimentação e condições meteorológicas, na taxa de evaporação. As condições meteorológicas não podem ser controladas, mas foram constantemente monitoradas. Obtiveram-se maiores eficiências, quando a inclinação do coletor foi ajustada mensalmente, com valores até 36,4% maiores do que quando o coletor permanece fixo. / The system of Carbon Credits established by the 1997 Kyoto Protocol benefits companies that reduce their emissions of carbon into the environment with some advantages. Since the Protocol was signed, many companies have sought new ways to reduce their emissions. In most cases, these emissions are reduced through CO2 absorption by a base, e.g., soda, ammonia, lime and amines, among others. Ammonia and soda are interesting bases for companies that produce other effluents containing these products in much lower concentrations, resulting in highly diluted solutions of the corresponding salts. Highly diluted solutions are either discharged into the environment, which is forbidden today, or they are concentrated. Concentrating these solutions using vapor, as a means of heating is unfeasible since that would involve the emission of CO2 from burning oil in boilers. Therefore, from now on, attention will focus increasingly on more environmentally friendly techniques, especially techniques that do not cause CO2 emissions. A solar energy powered falling film evaporator with film promoter was developed for concentrating diluted solutions (industrial effluents). The procedure proposed here does not emit CO2, making it a viable alternative to the method of concentrating solutions. This novel device consists of the following components: a flat plate solar collector with adjustable inclination, a film promoter (adhering to the collector), a liquid distributor, a concentratecollector, and accessories. The evaporation rate of the device was found to be affected both by the inclination of the collector and by the feed flow. The meteorological variables cannot be controlled, but were monitored constantly to ascertain the behavior of the equipment in response to the variations occurring throughout the day. ) Higher efficiencies were attained when the inclination of the collector was adjusted monthly, showing up to 36.4% higher values than when the collector remained in a fixed position.

A influência dos tensoativos lauril sulfato de sódio, cloreto de cetil trimetil amônio e álcool láurico etoxilado com 12 moles de óxido de etileno sobre o stratum corneum da pele de muda das cobras Bothrops jararaca e Spilotis pullatus foi avaliada através das técnicas biofísicas de PAS-FTIR, FT-Raman e DSC. Foram utilizadas soluções dos tensoativos em concentrações acima e abaixo da cmc e tratamentos por 4 e 8 horas (stratum corneum íntegro) e por 12 horas (stratum corneum após a remoção mecânica das camadas superficiais de células com fita adesiva). A presença do lauril sulfato de sódio e do cloreto de cetil trimetilamônio no stratum corneum foi detectada e a principal alteração observada para ambos foi o aumento do conteúdo hídrico do tecido; o álcool láurico etoxilado com 12 moles de óxido de etileno não promoveu aumento do conteúdo hídrico, apresentando ação de extração de lipídeos. A remoção mecânica das camadas superficiais de células com fita adesiva mostrou ser um procedimento útil para tratamento do stratum corneum da pele de muda de cobra, tornando a membrana mais adequada para estudos da ação de promotores de permeação. / The influence of the surfactants sodium lauryl sulfate, cetyl trimethyl ammonium chloride and lauryl alcohol ethoxylate (12 moles ethylene oxide) was evaluated on the stratum corneum of shed snake skin (Bothrops jararaca and Spilotis pullatus) through the biophysical techniques PAS-FTIR, FT-Raman and DSC. The surfactants were used in solutions above and below the cmc and the stratum corneum samples were pre-treated for periods of 4 and 8 hours (whole stratum corneum) and for 12 hours (stratum corneum after tape stripping procedure). The presence of the surfactants sodium lauryl sulfate and cetyl trimetyl ammonium chloride could be detected in the stratum corneum and the main change promoted by both was the increase of the water content of the membrane; the lauryl alcohol ethoxylate (12 moles ethylene oxide) did not promote increase in the hydration but showed some action as far as lipid extraction. The tape stripping procedure showed to be useful for the treatment of the stratum corneum of shed snake skin, making the membrane more adequate than the whole stratum corneum for the studies of the action of permeation enhancers.

Este trabajo estudia las distintas modalidades de promoción de viviendas para uso propio (la autopromoción individual, la autopromoción colectiva en régimen de comunidad de propietarios y en régimen de cooperativas de viviendas) y sus características diferenciales respecto de la promoción inmobiliaria desarrollada por sociedades mercantiles. La tesis analiza las obligaciones y responsabilidades que el ordenamiento jurídico privado impone a todo promotor inmobiliario, especialmente las responsabilidades derivadas de vicios y defectos constructivos, examina su fundamento y cuestiona su aplicación a aquellos sujetos que actúan ajenos al ejercicio de una actividad empresarial. La tesis también estudia la figura del gestor de comunidades de propietarios y de cooperativas de viviendas, así como el alcance de su responsabilidad cuando interviene en fraude de ley. / This dissertation aims at discussing the different methods of housing development for personal uses (individual housing development, collective housing development in coownership or through cooperative housing) and at highlighting their distinctive characteristics in respect to housing development by real estate or construction companies. The thesis analyzes the legal duties and liabilities that Spanish private law vests upon all real estate developers, specifically liabilities arising from construction defects, as well as their legal basis. Moreover, the dissertation questions the application of this legal regime to individuals acting for purposes not related to his or her trade, business or profession. Finally, problems related with professionals working as independent representatives of collective housing developers and their liability when acting in fraus legis are examined

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the effect of inclusion of concentrated dietary fiber as prebiotic agent in diets on metabolic, immune responses, performance parameters, deposition of nutrients and production of digestive enzymes of juvenile silver catfish. Concentrates were prepared from dietary fiber citrus pulp, biomass of yeast brewery and grain included in linseed and mixed diets followed a diet containing the prebiotic commercial mananoligossacarids base Actigen® and control treatment without added prebiotic agent. For 50 days, 600 juvenile silver catfish with average initial weight of 3.54±0.53 g were kept in a water recirculation system with two biological filters, settling box, heating and 20 tanks with a capacity of 230 liters. Were randomly assigned to 30 fish per experimental unit, which were fed the experimental diets, three times a day (8:00, 13:00 and 17:00) to apparent satiation. At the end of the experiment the animals were subjected to biometrics were collected blood, liver, mucous, intestine and data length and weight, beyond a sample of fish. The experimental design was a randomized, with five treatments and four replications, the data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test (P<0.05). Cholesterol levels, total protein, globulin and mucoprotein were higher in animals fed yeast autolysate and linseed fiber in the diet. A higher amount of liver glycogen in fish fed with control diet and Actigen®, the liver protein content was higher (P<0.05) in a diet containing linseed fiber. Fish fed diets containing yeast autolysate and linseed fiber were superior (P<0.05) to the other treatments tested, as well as higher crude protein values and deposited body fat. Animals fed diets containing citrus pulp showed lower performance and nutrient deposition. The yield of body, digestive indices and production of digestive enzymes were not affected by the tested treatments. The yeast autolysate and linseed fibers provide a prebiotic effect when added to diets for juvenile silver catfish, since they benefit the immune system and provide improved performance and deposition of nutrients by the animal. / Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da inclusão de fibra alimentar concentrada como agente prebiótico em dietas sob as respostas metabólicas, imunológicas, parâmetros de desempenho, deposição de nutrientes e produção de enzimas digestivas de juvenis de jundiá. Foram avaliados concentrados de fibra alimentar preparados a partir da polpa cítrica, biomassa de levedura de cervejaria e grão de linhaça e incluídos em dietas mistas, além de uma dieta contendo o prebiótico comercial a base de mananoligossacarídeos Actigen® e uma dieta controle sem adição de agente prebiótico. Durante 50 dias, 600 juvenis de jundiá com peso médio inicial de 3,54±0,53g foram mantidos em um sistema de recirculação de água dotado de dois filtros biológicos, caixa de decantação, reservatório de água, aquecimento e 20 tanques com capacidade de 230 litros. Distribuiu-se ao acaso 30 peixes por unidade experimental, os quais receberam as dietas experimentais, três vezes ao dia (8:00, 13:00 e 17:00 horas) até a saciedade aparente. Ao final do experimento os animais foram submetidos a biometria onde coletou-se sangue, fígado, muco e intestino dos peixes, além de dados de peso e comprimento e uma amostra de peixes. O delineamento experimental o inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e quatro repetições, os dados foram submetidos a análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P<0,05). Os níveis de colesterol, proteína total, globulina e mucoproteína, foram superiores nos animais alimentados com autolisado de levedura e fibra de linhaça na dieta. Observou-se maior quantidade de glicogênio hepático nos peixes alimentados com dieta controle e Actigen®, o conteúdo de proteína hepática foi superior (P<0,05) para os animais que receberam dieta contendo fibra de linhaça. Os peixes alimentados com dietas contendo autolisado de levedura e linhaça fibra apresentaram desempenho superior (P<0,05) aos demais tratamentos testados, bem como maiores valores de proteína bruta e gordura corporal depositada. Animais alimentados com dietas contendo polpa cítrica mostraram menor desempenho e deposição de nutrientes. O rendimento de carcaça, índices digestivos e produção de enzimas digestivas não foram afetados pelos tratamentos testados. O autolisado de levedura e a fibra de linhaça proporcionam efeito prebiótico quando adicionados a dietas para juvenis de jundiá, uma vez que beneficiam o sistema imune e proporcionam maior desempenho e deposição de nutrientes pelos animais.