Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-07T13:31:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2953489 bytes, checksum: e27c4a2febab7908bf620dcad47424ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T13:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2953489 bytes, checksum: e27c4a2febab7908bf620dcad47424ff (MD5) Previous issue date: 2005-09-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Atualmente, o TDZ é conhecido como indutor morfogênico, atuando como um substituto de auxinas e citocininas, na embriogênese e organogênese em várias espécies. Com base no exposto, foram realizados estudos com explantes hipocotiledonares cultivados em meio com adição de TDZ e BAP, e sem combinação entre os mesmos. Na primeira e segunda fases, avaliou-se a influência da posição do explante, da polaridade fisiológica e da orientação dos explantes no meio de cultura. Na terceira fase, avaliou-se o potencial do TDZ, como indutor da embriogênese em segmentos hipocotiledonares do maracujazeiro. No final dos estudos, constatou-se que a resposta morfogênica e a rota morfogênica em segmentos hipocotiledonares de maracujazeiro são dependentes da presença e da natureza química das citocininas adicionadas ao meio de cultura em interação com o modo pelo qual o explante é inserido no meio de cultura; a polaridade fisiológica que se estabelece nos extremos dos segmentos hipocotiledonares, bem como a magnitude desta polaridade, pode ser alterada pela natureza química da citocinina, aplicada ao meio de cultivo, e pela orientação do explante nesses meios. Na presença do TDZ, a polaridade não se estabeleceu; não houve gradiente de resposta morfogênica entre os segmentos. Segmentos hipocotiledonares podem ser induzidos à formação de uma massa de células semelhantes à proembriões e estruturas organogênicas sob influência do TDZ, sendo estas rotas morfogênicas dependentes da concentração deste fitorregulador. / TDZ is known morphogenic inductor acting as auxin and cytokinin on embryogenesis and organogenesis of several species. Based in this statement, several studies were conducted with passion fruit hypocotyledonary explants, cultivated in a medium with TDZ and BAP without combinations. In the first and the second phase of studies the influence of explant position, physiological polarity and explant orientation were studied. In the third phase of studies the TDZ potentiality as somatic embryogenesis inductor in passionfruit hypocotyledonary segments were studied. Finally, it was observed that the morphogenic response and the morphogenic rote in passion fruit hypocotyledonary segments are dependent on the presence and the chemical nature of the cytokinin in the interaction with position, polarity and orientation of the explant. In the presence of TDZ, the polarity did not establish. There have no gradient of morphogenic response among segments. Under the influence of TDZ and depending on the dose of the same the segment can be induced to form cell masses similar to proembryogenic masses or organogenic structures.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-23T17:11:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 570593 bytes, checksum: 26e088d152e90872585fd3e758d48c4a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-23T17:11:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 570593 bytes, checksum: 26e088d152e90872585fd3e758d48c4a (MD5) Previous issue date: 2005-08-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivando avaliar o efeito de doses de nitrogênio aplicadas em substrato sobre a produção de mini-tubérculos de sementes de batata (Solanum tuberosum L.) a partir de plântulas advindas de cultura de tecido, de brotos de tubérculos e de mini-tubérculos, da cultivar Monalisa, foram realizados três experimentos, simultaneamente, em ambiente protegido no Departamento de Fitotecnia da Universidade Federal de Viçosa. Nos experimentos 1, 2 e 3, o material propagativo foi plântula micropropagada, broto de tubérculos-semente e mini- tubérculo, respectivamente, plantado em vaso de 3 L contendo substrato. Nos experimentos 1 e 2 foram utilizadas duas plantas por vaso e no experimento 3 foi plantado um mini-tubérculo por vaso. Em cada experimento foram avaliadas cinco doses de nitrogênio: 0; 50; 100; 200 e 400 mg kg-1 de N, na forma de NH4NO3, dispostos em blocos ao acaso e cinco. O índice SPAD, medido na quarta folha (LQ), aumentou com o aumento da dose de N e diminuiu com a idade da planta. O teor de N-NO ̄3 na matéria seca da LQ, associado à máxima produção de mini- tubérculos, foi 0,015; 1,370 e 2,090 dag kg-1, nos experimentos 1, 2 e 3, respectivamente. No experimento 1, as máximas massa seca dos mini-tubérculos (MSTB), massa seca total da planta (MST) e produção de mini-tubérculos (PT) foram 25,74; 31,93 e 138,8 g vaso-1, respectivamente, com a dose de 0 mg kg-1 de N. No experimento 2, com 177 mg kg-1 de N, que propiciou a máxima PT (178 g vaso-1), as massas secas de folha (MSF), caule (MSC) e raízes (MSR) foram 5,03; 1,40 e 0,44, respectivamente. No experimento 3, com 225 mg kg-1 de N, que propiciou a máxima PT (194,8 g vaso-1) , as massas secas de folha (MSF), caule (MSC), tubérculos (MSTB) e massa seca total da planta (MST) foram 6,18; 1,96; 37,15 e 46,10, respectivamente. / In order to evaluate the effect of nitrogen rates applied in substrate on minituber potato (Solanum tuberosum L.) seed yield, propagated by tissue culture plantlets, sprout tuber and minituber of Monalisa cultivar, three experiments were conducted, simultaneously, in greenhouse, at Universidade Federal de Viçosa. In the experiments 1, 2, and 3, potato plants were propagated by tissue culture plantlets, sprout seed tuber and minituber, respectively, planted in 3 L pot containg substrate. In the experiments 1 and 2 were set two plants per pot and in the experiment 3 was planted one minituber per pot. In each experiment, five N rates: 0; 50; 100; 200 and 400 mg kg-1 of N, as NH4NO3, were evaluated in randomized complet block design and five repetitions. The SPAD index in the fourth leaf (LQ) increased with the increase N rates and decreased with the plant age. The N-NO ̄3 contents in LQ dry matter, associated with the maximum minitubers yield were 0.015; 1.370; and 2.090 dag kg-1, in the experiments 1, 2 and 3, respectively. In the experiment 1, the maximum minituber dry matter (MSTB), the maximum whole plant dry matter (MST) and maximum minituber yield (PT) were 25.74; 31.93 and 138,8 g pot-1, respectively, with 0 mg kg-1of N. In the experiment 2, which led to maximum PT (178 g pot-1) with 177 mg kg-1 of N, leaf (MSF), stem (MSC) and root (MSR) dry matter were 5.03; 1.40, and 0.44 g vase-1, respectively. In the experiment 3, which led to maximum PT (194,8 g pot-1) with 225 mg kg-1 of N, leaf (MSF), stem (MSC), maximum minituber (MSTB) and maximum whole plant (MST) dry matter were 6.18; 1.96; 37.15, and 46.10 g vase-1, respectively.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-10-09T11:45:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9861287 bytes, checksum: d1920707baa642d6539a70010fd3dadd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T11:45:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9861287 bytes, checksum: d1920707baa642d6539a70010fd3dadd (MD5) Previous issue date: 1997-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Três meios de cultivo foram testados com o objetivo de avaliar o mais indicado para o desenvolvimento e crescimento das variedades Baraka, Bintje e Contenda. Utilizaram-se o meio MS suplementado com sacarose 3% e vitaminas, o meio MS com sacarose 3%, vitaminas e ácido giberélico 1,4 umol/ L e o meio MS modificado. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com seis repetições e cinco plantas por parcela. Plãntulas no meio MS + GAs apresentaram a maior média de número de folhas definitivas e também maior média de comprimento de parte aérea para todas as variedades. Para determinar a concentração ideal de picloram à indução de calejamento, um experimento foi realizado, testando-se as seguintes concentrações: 0,0; 0,0165; 0,165; e 1,65 pmol/L por 32 dias. O melhor resultado foi obtido com 1,65 pmol/ L. Calos foram induzidos, usando-se folha e caule como explantes das variedades comerciais Baraka, Bintje, Contenda, Baronesa e Achat em meio MS suplementado tanto com picloram 1,65 “mol/L quanto com 2,4-D 11,5 umol/L. Após 70 e 90 dias de calejamento, os DNAs das 40 amostras de calos foram analisados num estudo comparativo entre as duas fontes de explantes das cinco variedades e de ambos os reguladores de crescimento. Para isso, 20 “primers” de sequência arbitrária foram testados. Para a variedade Baraka, caule como explante, picloram e 90 dias de calejamento foram os tratamentos que induziram a maior variação somaclonal. Para Bintje, os tratamentos foram folha, picloram e 70 dias. Dos 20 “primers” testados, 14 apresentaram polimorfismo para a variedade Contenda quando submetida ao tratamento que utilizou caule como explante, picloram e 70 dias de calejamento. Dentre os genótipos analisados, a variedade Baronesa apresentou o maior número de fragmentos polimórficos para todos os tratamentos. A variedade Achat mostrou-se mais suscetível a variação somaclonal quando submetida aos tratamentos que utilizaram 2,4-D, 90 dias de calejamento e tanto caule e folha como explante. O maior tempo de cultivo não teve grande influência na variação somaclonal da maioria das variedades, exceto “Baraka” e “Achat'. O fator genótipo foi o mais importante, pois cada variedade teve desempenho distinto do das outras, no que concerne à taxa de variação somaclonal. / No sumario consta o abstract, mas a pagina não esta na tese.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-04-27T08:33:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-27T08:33:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A aquisição de competência embriogênica por células somáticas é um processo intrigante e necessita da junção de dados genético-moleculares e citológicos para melhor compreensão dos mecanismos e mudanças celulares envolvidas. À vista disso, os objetivos desse trabalho foram isolar e caracterizar o padrão de expressão dos genes SERK e BBM por hibridização in situ durante o processo de embriogênese somática em Passiflora cincinnata, avaliar a responsividade morfogênica in vitro de P. setacea e P. cincinnata submetidas a condições de indução de embriogênese somática, bem como, acompanhar a mobilização de reservas e a expressão dos genes supracitados durante a embriogênese somática. Para tal, a partir de calos embriogênicos de P. cincinnata, com 20 dias em meio de indução (MI), extraiu-se o RNA total e obteve-se o cDNA, o qual serviu como molde para amplificação da sequência codante utilizando-se primers degenerados para SERK e BBM. A responsividade de embriões zigóticos maduros de P. setacea e P. cincinnata foi avaliada mediante o cultivo em meio de indução alternativo constituído por sais MS suplementado com 31,06 μM de Picloram + 2,22 μM de BA + 2,27 μM de TDZ (MIP) + 500 mg L -1 de Extrato de Malte (EM) + 13,77 μM de Espermidina (Spd). Após 30 dias as culturas foram transferidas ao meio de maturação (MM) composto de meio MS acrescido de 1,0% de carvão ativado e ausência de reguladores de crescimento. Amostras com 0, 10, 20 e 30 dias foram coletadas para microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura, testes histoquímicos e hibridização in situ, todas seguindo protocolos específicos. Para visualização da expressão dos genes SERK e BBM foi gerada uma sonda de RNA a partir de um clone sequenciado de P. cincinnata. Para P. setacea utilizou-se uma sonda heteróloga sense e antisense de P. cincinnata. O relacionamento filogenético das sequências isoladas de P. cincinnata comparadas às de outras espécies apontou que as funções das proteínas podem ser conservadas na espécie. Em SERK, o Pc contig1 agrupou-se com membros de SERK1 e SERK2, enquanto o Pc contig2 agrupou-se com membros de SERK3/BAK1. Por sua vez, o Pc contig1 de BBM, agrupou-se com membros de BBM1 e BBM2. A expressão do gene SERK foi constatada em embriões zigóticos e gradualmente diminuída até os 20 dias em MI. Aos 30 dias em MI, embriões somáticos globulares foram intensamente marcados, assim como em embriões com 5 e 40 dias em MM. Transcritos do BBM foram observados em embriões zigóticos, no entanto, a expressão foi cessada no decorrer do desenvolvimento dos embriões somáticos. A expressão foi retomada em embriões somáticos cotiledonares após 40 dias em MM, assemelhando-se ao observado no embrião zigótico. Observou-se que em P. setacea, durante o processo embriogênico, houve formação de protuberâncias que deram origem a zonas pró-embriogênicas, as quais se desenvolveram em embriões somáticos. Já em P. cincinnata houve proliferação das células do meristema fundamental e formação de meristemoides, caracterizando regiões organogênicas. Quando transferidos ao meio de maturação não houve regeneração de plantas a partir de embriões somáticos em P. setacea. Em P. cincinnata houve intumescimento das regiões calejadas e, em alguns casos, formação de primórdios foliares. Quanto à expressão gênica, em P. setacea foi constatada expressão de BBM e SERK em todas as fases analisadas, especialmente em protuberâncias e embriões somáticos formados. P. cincinnata, por sua vez, também apresentou transcritos dos genes BBM e SERK em todas as fases analisadas, sendo intensificado o sinal de hibridização na periferia dos explantes e regiões meristemáticas após 20 dias em MI. P. setacea apresentou corpos proteicos com decréscimo gradativo até os 30 dias em meio de indução. Houve presença de carboidratos e amido no explante e seu decréscimo após 10 dias, e verificou-se a síntese de novo de amido aos 30 dias de indução, quando há formação de embriões somáticos. Não foi verificada a presença de corpos lipídicos durante o processo embriogênico. Já em P. cincinnata, constatou-se corpos proteicos e amido de forma moderada em todas as etapas de desenvolvimento e a presença de carboidratos totais e corpos lipídicos foi averiguada nas fases iniciais de indução. Após 20 dias, houve mobilização dessas substâncias de reserva concomitantemente com a formação e desenvolvimento de meristemoides. Deste modo, sugere-se que a expressão desses genes está associada aos processos de aquisição de competência embriogênica e podem servir como marcadores moleculares desse processo. Os resultados do isolamento e expressão dos genes SERK e BBM em P. cincinnata são inéditos e contribuem para o melhor entendimento dos processos que envolvem a embriogênese somática na espécie. Nosso trabalho apresenta dados inéditos da indução de embriões somáticos em P. setacea e como as espécies estudadas apresentam respostas morfogênicas divergentes quando submetidas ao mesmo meio de indução. E ainda, relatamos à expressão dos genes BBM e SERK e a mobilização de compostos de reserva no decorrer dos eventos morfogênicos in vitro em P. setacea e P. cincinnata. / The acquisition of embryogenic competence in somatic cells is intriguing process and requires both molecular-genetic and cytological knowledge to better understand the mechanisms and cellular changes involved. Based on this, the aim of this study was to isolate and characterize the expression of SERK and BBM genes in somatic embryos of Passiflora cincinnata, as well as to evaluate the morphogenic in vitro response of Passiflora setacea and P. cincinnata somatic embryogenesis inducted and monitoring the reserve mobilization and expression of the these genes during embryogenesis. For this, RNA was extracted and cDNA was obtained from embryogenic calli of P. cincinnata after 20 days in induction medium (IM), which was used as template for the coding sequence amplification with degenerate primers of SERK and BBM. Mature zygotic embryos of P. setacea and P. cincinnata were inoculated on MS medium supplemented with 31.06 μM of picloram + 2.22 μM of benzyladenine + 2.27 μM of thidizuron + 500mg L -1 of malt extract + 13.77 μM of spermidine. After 30 days, the cultures were transferred to the maturation medium (MM), composed of MS medium supplemented with 1 % of activated charcoal without growth regulators. Samples with 0, 10, 20 and 30 days were collected for light microscopy, scanning electron microscopy, histochemical analyzes and in situ hybridization, following specific protocols. A RNA probe from P. cincinnata cDNA was generated to figure out the expression of SERK and BBM genes, whereas to P. setacea a heterologous sense and antisense probe of P. cincinnata was used. The phylogenetic relationship of P. cincinnata isolated sequences compared with other species suggests that the functions of the proteins are preserved. In SERK, the Pc contig1 grouped up with SERK1 and SERK2 members, while the Pc contig2 grouped with SERK3/BAK1 members. On the other hand, the BBM Pc contig1 was grouped with BBM1 and BBM2 members. The expression of SERK gene was found in zygotic embryos and gradually decreased until 20 days in the IM. After 30 days in the IM, globular somatic embryos were intensely marked with the hybridization signal, as well as embryos with 5 and 40 days in the MM. BBM transcripts were observed in zygotic embryos, but the expression was stopped during the somatic embryos development. The expression was resumed in somatic globular embryos after 40 days in the MM, similar to that observed in zygotic embryos. In the second chapter, in P. setacea embryogenesis process, it was observed the formation of lumps that originate pro-embryogenic zones, which developed into somatic embryos. In P. cincinnata a proliferation of the ground meristem cells and meristemoids formation occurred, emphasizing organogenic regions. When transferred to MM, there was no plant regeneration from somatic embryos of P. setacea. In P. cincinnata, swelling of callus regions and, in some cases, formation of leaf primordia was observed. Regarding the gene expression, in P. setacea there was BBM and SERK expression in all stages, especially in lumps and somatic embryos. Also P. cincinnata showed transcripts of BBM and SERK genes in all stages, with intensification of the hybridization signal at the explants edges and meristematic regions after 20 days in the IM. Protein bodies were found in P. setacea, decreasing gradually until 30 days in the IM. Carbohydrate and starch levels decreased after 10 days, but there was de novo synthesis of starch at 30 days of induction, coupled with the somatic embryos formation. No lipid bodies during the embryogenic process were verified. In P. cincinnata protein bodies and starch were moderately present in all development stages whereas carbohydrates and lipid bodies were present only at the early stages of induction. After 20 days, these reserve substances were mobilized, along with the meristemoids formation and development. Therefore, it is suggested that the expression of these genes is associated with embryogenic competence acquisition process and can be a molecular marker of this process. These results of isolation and expression of SERK and BBM genes in P. cincinnata are original and contribute to a better understanding of the processes involving somatic embryogenesis in this species. This work brings a new approach for somatic embryogenesis induction in P. setacea and highlights how these two species show different responses when submitted to the IM. In addition, the expression of the genes BBM and SERK as well as the mobilization of reserve compounds during in vitro morphogenic events in P. setacea and P. cincinnata were related.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 100582 bytes, checksum: cde5c201a478c09c14bf733b80e5a159 (MD5) Previous issue date: 2006-09-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The great value of bromeliads as ornamental plants creates demands for development of propagation techniques. These techniques allow commercial exploitation of bromeliad stocks diminishing the pressure for gathering, preserving threatened wild populations. O. grossiorum is a typical bromeliad from Atlantic forestry threatened of extinction. The objectives of this research were to select O. grossiorum clones with ornamental values easy to propagate in vitro, and establish in vitro propagation protocols for these clones. The project was developed in three steps: germination and in vitro selection of seedlings responsive to BAP (6-benzylaminopurine), selection of clones with ornamental values, and establishment of protocol for in vitro propagation of the selected clones. In the first step only 18.33% of plantlets germinated in vitro were found responsive to BAP. These plantlets were selected and replicated in vitro several times, each replicated plantlet constituting a clone. In the second step these clones were established ex vitro and surveyed for ornamental attributes. Five out of 11 clones were selected in this step. These clones presented distinct phenotypic traits and were considered of high ornamental quality. In the third step a protocol for in vitro propagation were developed for each selected clone. / O grande valor das bromélias como plantas ornamentais gera grande demanda para desenvolvimento de técnicas de propagação. Estas técnicas permitem a exploração comercial das bromélias e diminui a pressão pelo extrativismo, preservando as populações naturais desta espécie e também pode gerar renda e empregos, tendo, portanto, valor econômico e social. O. grossiorum é uma bromélia ameaçada de extinção típica de Mata Atlântica. Os objetivos deste trabalho foram selecionar clones de O. grossiorum com potencial ornamental e de fácil propagação in vitro, e estabelecer protocolo de propagação in vitro para estes clones. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: germinação e em seleção in vitro de plântulas responsivas a BAP (6-benzylaminopurine), seleção de clones com valores ornamentais, e estabelecimento de protocolo para propagação in vitro dos clones selecionados. Na primeira etapa foi observado que apenas 18.33% das plântulas germinadas in vitro eram responsivas a BAP. Estas plântulas foram selecionadas e reproduzidas em in vitro, sendo que cada plântula selecionada e reproduzida constitui um clone. Na segunda etapa estes clones foram estabelecidos ex vitro e selecionados em relação aos atributos ornamentais. Foram selecionados cinco entre 11 clones nesta etapa. Estes clones apresentaram características fenotípicas distintas, sendo considerados de alta qualidade ornamental. Na terceira etapa o protocolo para em propagação in vitro foi desenvolvido para cada clone selecionado.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:42:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV14DA008.pdf: 1515332 bytes, checksum: 0e69f0adeb0a1a547c9cf883320c34c0 (MD5) Previous issue date: 2014-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The development of a breeding program for the pear culture has great importance to the expansion of the culture and the creation/selection of new rootstocks with traits of interest is able to impulse its productivity. Thus, main objective of this study was to select new genotypes from rootstocks seedlings of Pyrus communis L. providing plants of low vigor, and to develop a micropropagation protocol for these genotypes, aiming at sustainability of the pear culture in southern Brazil. The experiments were conducted at the Agroveterinaries Sciences Center at University of Santa Catarina State (CAV / UDESC). Plants used for the experiments were Pyrus communis L. with potential as rootstock for pear culture. The experimental design was completely randomized and the variables evaluated were: plant height, trunk diameter, bud number, branches of the year number and height, lenticels number (paper I) bacterial contamination, fungal contamination, explant survival (paper II) shoots number and height, bud number, leaf number, rooting percentage, root number and height, shoot height, callus intensity, explant survival (paper III) IAA production, rooting percentage, root number and height, shoot height and callus intensity (paper IV). Genotypes 409, 548, 570 and 577 remained constant in the group of medium vigor and were selected for micropropagation, in order to assess its potential in orchard conditions. At the in vitro establishment PPM is an effective biocide for controlling microbial contamination and in low concentrations do not affect survival of the explant. The asepsis with alcohol 70% + sodium hypochlorite 2,5% + PPM 2 mL L-1 in media culture is effective for explants derived from mother plants placed in a growth chamber and the asepsis with PPM 5% and PPM 5 % + PPM 2 mL L-1 in media culture are effective in explants derived from field mother plants. The QL modified medium plus 3,5 mL L-1 BAP showed higher multiplication of explants during the stage of in vitro multiplication. The QL modified medium with IBA in the range between 1,0 and 1,5 mL-1 showed better rooting during the rooting stage. The longest survival of explants was observed in the acclimatization using transparent cups with lid, containing the mix commercial substrate + vermiculite + coconut fiber (2:2:1). The explants of Pyrus communis L. should be acclimated 60 days after in vitro rooting having roots up to 30 mm. It was concluded that it was possible to select genotypes with superior characteristics within the population of Pyrus communis L. rootstocks, and it was possible to develop a micropropagation protocol for selections / O desenvolvimento de um programa de melhoramento para a cultura da pereira é de grande importância para a expansão da cultura e a criação/seleção de novos portaenxertos com características de interesse é capaz de impulsionar sua produtividade. Diante disto o objetivo principal deste trabalho foi selecionar novos genótipos de portaenxertos originários de seedlings de Pyrus communis L. que confiram menor vigor às plantas, e desenvolver um protocolo de micropropagação para estes genótipos, visando à sustentabilidade da cultura da pereira no sul do Brasil. Os experimentos foram conduzidos no Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina (CAV/UDESC). Foram utilizadas para os experimentos plantas da espécie Pyrus communis L. com potencial de portaenxerto para a cultura da pereira. O delineamento experimental utilizados foi inteiramente casualizado, as variáveis avaliadas foram: altura de planta, diâmetro do caule, número de gemas, número e comprimento de ramos do ano, número de lenticelas (artigo I) contaminação bacteriana, contaminação fúngica, sobrevivência de explantes (artigo II) número e comprimento de brotos, número de gemas, número de folhas, percentagem de enraizamento, número e comprimento de raiz, comprimento de parte aérea, intensidade de calo, sobrevivência de explantes (artigo III) produção de AIA, percentagem de enraizamento, número e comprimento de raiz, comprimento de parte aérea e intensidade de calo (artigo IV). Os genótipos 409, 548, 570 e 577 se mantiveram constantes no grupo de vigor médio e foram selecionados para a micropropagação, a fim de avaliar seu potencial em condições de pomar. No estabelecimento in vitro o PPM é um biocida eficaz no controle de contaminações microbianas e em baixas concentrações não afeta a sobrevivência do explante. A assepsia com álcool 70% + hipoclorito de sódio 2,5% + PPM 2 mL L-1 no meio de cultura é eficaz para explantes oriundos de plantas matrizes acondicionadas em câmara de crescimento e as assepsias PPM 5% e PPM 5% + PPM 2 mL L-1 no meio de cultura são eficazes para explantes oriundos de plantas do campo. O meio QL modificado acrescido de 3,5 mL L-1 de BAP apresentou maior multiplicação dos explantes durante o estádio de multiplicação in vitro. O meio QL modificado acrescido de AIB na faixa entre 1,0 e 1,5 mg L-1 apresentou melhor enraizamento in vitro durante o estádio de enraizamento. Maior sobrevivência foi verificada na aclimatização em copos transparentes com tampa, contendo a mistura substrato comercial + vermiculita + fibra de coco (2:2:1). Os explantes de Pyrus communis L. devem ser aclimatizados 60 dias após o enraizamento in vitro, possuindo raízes com até 30 mm. Conclui-se que foi possível selecionar genótipos com características superiores dentro da população de portaenxerto de Pyrus communis L., bem como, foi possível desenvolver um protocolo de micropropagação para as seleções

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV09MA033.pdf: 454969 bytes, checksum: 67852c8e8b73af524f20dddd33667e7e (MD5) Previous issue date: 2009-05-08 / The pear cultivation in Brazil is the less prominent among the fruit produced and is considered the most imported fruit. The production of pears in Brazil is low because there are other fruit more adapted to the climate of country, with high quality and quickly economic returns for the producers. The in vitro propagtion is a way ro attend the producer s demando f cultivars with quality, because of its efficiency and good technical and economic return. There isn t suficiente production of pear seedings, because there is a lack of protocols for in vitro propagation. The objective of this paper was to establish a simple protocol for in vitro propagation of pear, cv. Packam s Triumph, to produce healthy and quality seedlings to increase national production of pears. Experiments were performed for each stage of in vitro propagation. For in vitro establishment were tested diferente explants and asepsis. The explants were buds from mother plants in the greenhouse room, meristems and buds from mother plants of the field. The asepsis tested were hypochlorite and calcium hypochlorite. The variables analyzed were oxidation, bacterial and fungal contamination. For the in vitro multiplication BAP was tested at concentrations 0.2, 0.8, 1.4 and 2.0 mg.L¯¹ in two types of culture médium (MS and MS⅟2). The variables analyzed were number of buds and length of shoots. For the in vitro rooting the auxins NAA and IBA were tested in concentrations 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 and 3.0 mg.L¯¹. the variables amalyzed were formation os roots and callus. The results for in vitro establishment determined that fungal and bacterial contamination showed no significant diferences for the aseptic types and the explants that had higher incidence in the two cases were the buds of field plants. For oxidation the explants with higher incidence were the buds of field plants, regardless of asepsis, and meristems treated with calcium hypochlorit. For in vitro multiplication was deermined that the best concentration of BAP for buds development was 1.3 mg.L¯¹ and to lenght of shoots the best culture médium was MS. For in vitro rooting the auxins NAA showed no significant diferences in relation to adventitious roots formation. The treatment that showed less formation of callus were ANA in doses 0.1, 0.5 and 1.0 mg.L¯¹. The auxin IBA was significant for the variables length and number of roots. The increase of IBA caused a decrease in length f roots, and reached the highest number of roots at dose 1.6 mg.L¯¹. The variables fresh and dry weight of root, and shoot length were not directly affected by the type and dose of IBA and NAA / O cultivo de pêra no Brasil não tem destaque entre as frutíferas mais produzidas, sendo considerada a fruta mais importada. A produção de pêra no Brasil é reduzida, pois existem outras frutíferas melhor adaptadas às condições climáticas do país, com alta qualidade e que dão retorno econômico ao produtor mais rapidamente. A propagação in vitro é uma maneira de atender a demanda dos fruticultores por cultivares de qualidade, que devido a sua eficiência possui um bom retorno técnico e econômico. Não há produção suficiente de mudas de cultivares-copa de pêra, pois há uma carência de protocolos de propagação in vitro. O objetivo do trabalho foi estabelecer um protocolo de propagação in vitro de pereira, cv. Packham s Triumph, visando à produção de mudas sadias e de qualidade para incrementar a produção nacional de peras. Foram realizados experimentos para cada estágio da propagação in vitro. Para o estabelecimento in vitro foram testados diferentes explantes e assepsias. Os explantes utilizados foram gemas oriundas de plantas matrizes acomodadas em casa de vegetação, meristemas e gemas oriundas de plantas matrizes do campo. As assepsias testadas foram hipoclorito de sódio e hipoclorito de cálcio. As variáveis analisadas foram oxidação, contaminação bacteriana e fúngica. Na multiplicação in vitro o BAP foi testado nas concentrações 0,2; 0,8; 1,4 e 2,0 mg.L-1 sob dois tipos de meio de cultura (MS e MS ½). As variáveis analisadas foram número de gemas e comprimento de brotos. No enraizamento in vitro foram testadas as auxinas ANA e AIB nas concentrações 0,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 3,0 mg.L-1. As variáveis analisadas foram formação de raízes e de calo, comprimento e número de raiz, massa fresca e seca de raiz e comprimento de parte aérea. Os resultados obtidos no estabelecimento in vitro determinaram que a contaminação fúngica e bacteriana não apresentaram diferenças significativas quanto ao tipo de assepsia e os explantes que tiveram maior incidência nos dois casos foram as gemas de plantas do campo. Os explantes que apresentaram maior oxidação foram as gemas de plantas do campo, independente da assepsia, e o meristema tratado com hipoclorito de cálcio. Na multiplicação in vitro foi determinado que a melhor concentração de BAP no desenvolvimento de gemas foi 1,3 mg.L-1 e para comprimento de broto o melhor meio de cultura foi o MS. No enraizamento in vitro, as auxinas ANA e AIB não apresentaram diferenças significativas em relação à formação de raízes adventícias. Os tratamentos em que houve menor formação de calo foram ANA nas doses 0,1; 0,5 e 1,0 mg.L-1. A auxina AIB foi significativa para as variáveis comprimento e número de raiz. O aumento da concentração do AIB causou uma diminuição no comprimento das raízes e atingiu um maior número de raízes na dose de 1,6 mg.L-1. Já as variáveis massa fresca e seca de raiz, e comprimento de parte aérea não foram diretamente afetadas pelo tipo e dose de AIB e ANA

Resumo: Estudos preliminares referentes ao tipo de explante, meio de cultura são necessários para se definir protocolos de estabelecimento, desenvolvimento, multiplicação e conservação in vitro, bem como garantir a fidelidade na resposta morfogênica. A determinação do número ideal de repetições e do tamanho ótimo de parcelas experimentais é uma das maneiras de se aumentar a precisão experimental e, conseqüentemente, maximizar as informações obtidas em um experimento. Este trabalho teve por objetivo a determinação do tamanho ótimo de parcelas em experimentos in vitro nas etapas de estabelecimento, desenvolvimento, multiplicação e conservação de Passiflora sp. Foram conduzidos sete experimentos, com diversos ensaios de uniformidade com as espécies Passiflora giberti N.E. Brown., P. edulis Sims f. edulis, e P. laurifolia L.. Foram simulados diversos tamanhos e formas de parcelas, em que cada frasco com um explante foi considerado como uma unidade básica (parcela), os quais foram combinados formando parcelas com até 10, 25 e 50 frasco com um explante por unidade básica, em função do tipo de experimento. Para a estimação do tamanho ótimo de parcelas empregou-se o método da máxima curvatura modificado. De acordo com os resultados obtidos para experimentos in vitro com a espécie P. giberti N. E. Brown., o tamanho ótimo de parcelas recomendado é o de 15 frasco com um explante para experimentos de estabelecimento, 10 frasco com um explante por parcela para experimentos com conservação e 13 frasco com um explante para experimentos com desenvolvimento. Para a espécie P. edulis Sims f. edulis, o tamanho ótimo de parcelas recomendado é o de 11 frasco com um explante para experimentos de estabelecimento e 26 frasco com um explante para experimentos de multiplicação. Para a espécie P. laurifolia L., o tamanho ótimo de parcela deve ser de 9 frasco com um explante para ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preliminary studies concerning to explant type and culture medium are necessary to define establishment, development multiplication and in vitro conservation protocols, as well to guarantee fidelity in morphogenic response. One of the ways to increase experimental precision is to determinate the ideal number of repetitions and the optimal size of plots and maximize informations obtained in a experiment. This work aimed to determinate optimal size of plots in in vitro experiments for establishment, development, multiplication e conservation of Passiflora sp. Seven experiments were made, with several uniformity essays with Passiflora giberti N.E. Brown., P. edulis Sims f. edulis, e P. laurifolia L. species. Various sizes and plot forms were simulated, where as each bottle with a explain was considered as the basic unit till 10, 25 e 50 bottles with a explant by basic unit. Modified maximum curvature method was employed to estimate the optimal size of plots. According to results in vitro experiments with P. giberti N. E. Brown. species, optimal size of plots recommended is 15 bottles with a explant in establishment experiments, 10 bottles with a explant by plot in conservation experiments and 13 bottles with a explant in development experiments. The optimal size of plots recommended to P. edulis Sims f. edulis species is 11 bottles with a explant in establishment experiments and 26 bottles with a explant in multiplication experiments. The optimal size of plots to P. laurifolia L. species is 9 bottles with a explant in establishment experiments and 34 bottles with a explant in multiplication experiments, considering available variables in all experiments. The results obtained can subsidize with Passiflora culture in vitro experiments under different conditions / Orientador: Evaristo Bianchini Sobrinho / Coorientador: Augusto Ramalho de Morais / Banca: Walter Veriano Valério Filho / Banca: Shizuo Seno / Banca: Leonardo Ferreira Dutra / Banca: Aparecida Gomes de Araújo / Doutor

Orientador: Kathia Fernandes Lopes Pivetta / Coorientador: Ricardo Tadeu de Faria / Banca: Roberto Jun Takane / Banca: Claudia Fabrino Machado Mattiuz / Banca: Marcelo Vieira Ferraz / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Resumo: Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris são orquídeas epífitas, nativas do Brasil. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de indivíduos, entretanto ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). Em razão disto, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de cultura Murashige e Skoog com paclobutrazol, no crescimento e desenvolvimento de plântulas de Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris (in vitro), visando aumentar a taxa de sobrevivência das plântulas ex vitro. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado. Foram quatro tratamentos (três concentrações de paclobutrazol: 0,5; 1,0 e 1,5 mg i.a. L-1 e controle) e 10 repetições com 12 plântulas. Após cultivo em meio sem suplementação, as plântulas foram inoculadas nos tratamentos, onde permaneceram por mais 90 dias. Após este período, cinco repetições foram separadas para as análises destrutivas e as outras cinco foram transplantadas para bandejas contendo fibra de coco (S. cernua) e mistura de fibra de coco e esfagno (B. flagellaris). Verificou-se que as diferentes concentrações de paclobutrazol promoveram alterações nas características morfológicas das plântulas das duas espécies. Para S. cernua foi verificada redução do número de folhas, área foliar, massa seca e comprimento da parte aérea; aumento no diâmetro e massa seca de raízes e redução na taxa de sobrevivência das plântulas. Para B. flagellaris houve incrementos no acúmulo de massa seca de todas as partes (exceto na maior concentração para parte aérea), no número de folhas, na área foliar (0,5 mgL-1), no diâmetro no comprimento de raízes e no número de raízes; redução no número de brotos e comprimento da parte aérea e maiores taxas de sobrevivência da plântulas / Abstract: Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris are orchids epiphytes, native of Brazil. The in vitro propagation is a technique that allows to produce large numbers of plants, however many losses occur during the period of acclimatization (ex vitro). For this reason, this work aimed to study the effect of supplementation of the Murashige and Skoog medium with paclobutrazol on growth and development of plants of Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris (in vitro) to increase the survival rate of seedlings ex vitro. The experimental design was completely randomized. There were four treatments (three concentrations of paclobutrazol: 0.5, 1.0 and 1.5 mg ai L-1 and control) and 10 repetitions with 12 plants. After cultivation in medium without supplementation, the seedlings were inoculated on treatments, where they remained for another 90 days. After this period, five replicates were separated for destructive analysis and the other five were transplanted into trays containing coir (S. cernua) and a mixture of coconut fiber and sphagnum moss (B. flagellaris). It was found that paclobutrazol induced changes in the morphological characteristics of both species. To S. cernua: reducing the number of leaves, leaf area, dry weight and shoot length and increase in diameter and dry mass of roots. Reduction in the rate of seedling survival. To B. flagellaris: increases in dry mass of all parties, except at the highest concentration (aerial part), the number of leaves, leaf area (0.5 mgL-1), diameter, length of roots and more roots. Reduction in the number of shoots and shoot length. Highest survival rates of seedlings / Doutor

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mestre em Genética e Bioquímica / O Anacardium humile St. Hill., conhecido como cajuzinho-do-cerrado ou cajuí, é uma espécie pertencente à família Anacardiaceae que ocorre naturalmente em Campo Sujo e no Cerrado do Brasil. Tem importância alimentar, industrial, medicinal e econômica e a castanha tem as mesmas características e usos do cajú comum, com ampla utilização para o consumo. Pelo fato das espécies do Cerrado mostrarem interesses antagônicos, biológico e socieconômico, torna-se necessário gerar informações biológicas, na tentativa de uma adequada exploração econômica, para evitar a utilização predatória ou, até mesmo, a extinção da espécie. O objetivo desse trabalho foi o de otimizar um protocolo para cultivo em escala comercial, por micropropagação de Anacardium humile, além de analisar os patógenos existentes no cultivo in vitro, para quantificar a melhor concentração de fungicida sistêmico a ser utilizado na cultura de cajuí. Foi analisada, ainda, a divergência genética existente entre populações do cerrado mineiro (Clube Caça e Pesca Itororó Uberlândia MG) e goiano (Parque Estadual da Serra de Caldas Caldas Novas - GO) por meio da técnica de AFLP (Amplified Fragment Lenght Polimorphism). Ocorreu baixo sucesso de micropropagação de cajuí apesar de se obter brotos, que não puderam ser aclimatados. A análise de microrganismos mostrou prevalência de Aspergillus niger no cultivo in vitro sendo que as concentrações utilizadas de benomyl no meio foram muito elevadas, podendo causar fitotoxicidade às plântulas. Quanto à análise da divergência genética verificou-se maior distância genética entre populações de regiões diferentes (58%) do que dentro da mesma região (35% Clube Caça e Pesca Itororó; 47% Parque Estadual da Serra de Caldas) apesar de as plantas apresentarem características fenotípicas distintas.