PEREIRA, Marília Williani Filgueira. Exigências de energia e proteína para mantença e ganho em ovinos morada nova de diferentes classes sexuais em confinamento. 2017. 69 f. Tese (Doutorado em Zootecnia)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Anderson Silva Pereira (anderson.pereiraaa@gmail.com) on 2017-02-24T17:18:22Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_mwfpereira.pdf: 1113713 bytes, checksum: 1fc3c0e0cc04a368399725763160508b (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-03-23T17:55:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_mwfpereira.pdf: 1113713 bytes, checksum: 1fc3c0e0cc04a368399725763160508b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T17:55:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_mwfpereira.pdf: 1113713 bytes, checksum: 1fc3c0e0cc04a368399725763160508b (MD5) Previous issue date: 2017 / This study estimated the energy and protein requirements of intact male, castrated male and female Morada Nova lambs. The animals were distributed in completely randomized design in a factorial treatment structure of 3 x 3 with three sexes (15 intact males, 16 castrated males and 16 females) and three levels of restriction (ad libitum, 30 and 60%) with an initial body weight (iBW) of 14.50 ± 0.89 kg. Four animals of each sex class were slaughtered at the beginning of the experimental trial as the reference group for initial body weight and empty body weight estimation (EBW). When the experimental test reached 120 days all the animals were slaughtered. The proportions of fat, protein, ash and water (% EBW) were not influenced (P > 0.05) by the different sexual classes. The net requirement of energy for maintenance (NEm) was equal (P = 0.1704) between sexes at 73.0 kcal/kg EBW0.75/day with an efficiency of utilization of energy for maintenance (km) of 58%. The net energy for gain (NEg) was different (P < 0.0001) between the sexes. For animals weighing 15 kg and that had an average daily gain of 200 g, the NEg was 0.297; 0.304 and 0.411 Mcal/kg EBW0.75/day for intact males, castrated males and females, respectively. The net energy requirement for gain in females was 26% higher than in intact males and castrated males. The energy utilization efficiency for weight gain (kg) was different (P < 0.0001) between the sexual classes: 32, 27 and 29% for intact males, castrated males and females, respectively. There was no difference (P = 0.7783) between sexes for the required net protein for maintenance (NPm) and that amount was 1.06 g/kg BW0.75/day. A value of 3.46 g/kg BW0.75/day was estimated for metabolizable protein maintenance requirements (MPm). The net protein requirement for weight gain (NPg) was influenced (P < 0.001) by the sexual classes and decreased according to the increase in BW. The efficiency of use of the protein for weight gain (kpg) was different (P < 0.0001) between the sexes, being 28, 18 and 15% for intact males, castrated males and females, respectively. Sex did not affect the maintenance energy or the protein net requirement for lambs to grow. The net requirements of energy gain increase and protein requirements decrease with the increase in body weight of lambs. / Este estudo estimou os requerimentos de energia e proteína em cordeiros Morada Nova de três classes sexuais. Foram utilizados 47 animais, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 3, três classes sexuais (15 machos inteiros, 16 machos castrados e 16 fêmeas) e três níveis de restrição alimentar (ad libitum, 30 e 60%), com PC inicial (PCi) 14,50 ± 0,89 kg. Quatro animais de cada classe sexual, foram abatidos no início do ensaio experimental como grupo referência para estimativa do peso de corpo vazio (PCVZ) e composição corporal iniciais. Quando o teste experimental atingiu 120 dias todos os animais foram abatidos. As proporções de gordura, proteína, cinzas e água (%PCVZ) não foram influenciadas (P > 0,05) pelas diferentes classes sexuais. As exigências líquida de energia para mantença (ELm) foi igual (P = 0,1704) entre as classes sexuais 73,0 kcal/kg PCVZ0,75/dia e a eficiência de utilização de energia para mantença (km) foi 58%. A energia líquida para ganho (ELg) foi diferente (P < 0,0001) entre as classes sexuais e aumentou quando os animais aumentaram o PC. Para animais pesando 15 kg e ganho médio diário de 200 g, a ELg foi 0,297; 0,304 e 0,411 Mcal/kg PCVZ0,75/dia para machos inteiros, machos castrados e fêmeas, respectivamente. A exigência de energia líquida para ganho em fêmeas foi 26% maior que nos machos inteiros e machos castrados. A eficiência de utilização da energia para ganho de peso (kg) foi diferente (P < 0,0001) entre as classes sexuais: 32, 27 e 29% para machos inteiros, machos castrados e fêmeas, respectivamente. Não houve diferença (P = 0,7783) entre as classes sexuais para o requerimento de proteína líquida para mantença (PLm), sendo 1,06 g/kg PC0,75/dia. Estimou-se o valor de 3,46 g/kg PC0,75/dia para o requerimento de proteína metabolizável para mantença (PMm). A exigência de proteína líquida para o ganho de peso (PLg) foi influenciada (P < 0,001) pelas classes sexuais e descresceu de acordo com o aumento do PC. A eficiência de utilização da proteína para ganho de peso (kpg) foi diferente (P < 0,0001) entre as classes sexuais, sendo 28, 18 e 15% para machos inteiros, machos castrados e fêmeas, respectivamente. As classes sexuais não alteram os requerimentos de energia e proteína para mantença de cordeiros em crescimento. Diferentes classes sexuais afetam as exigências de energia e proteína líquida para ganho. Os requerimentos líquidos de energia para ganho aumenta e o de proteína diminui com o aumento do peso corporal de cordeiros deslanados.

COSTA, Helen Paula Silva da. Caracterização estrutural e cinética e ação antimicrobiana de uma albumina 2s com atividade inibitória de tripsina purificada da torta de Jatropha curcas L. 2016. 144 f. Tese (Doutorado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2017-04-05T20:45:54Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_hpscosta.pdf: 5240795 bytes, checksum: b867535c4f21e417838f3fe11ec55fcc (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-04-05T21:25:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_hpscosta.pdf: 5240795 bytes, checksum: b867535c4f21e417838f3fe11ec55fcc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T21:25:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_hpscosta.pdf: 5240795 bytes, checksum: b867535c4f21e417838f3fe11ec55fcc (MD5) Previous issue date: 2016 / The number of diseases caused by antibiotic-resistant bacteria has increased, amongst them those occasioned by Staphylococcus aureus. In addition to bacterial infections, there are parasitic diseases, such as toxoplasmosis, caused by Toxoplasma gondii. Such scenarios support the search for new agents that are active against most pathogens. Recently a glycoprotein with trypsin inhibitory activity and action against human bacterial pathogens, named JcTI-I, was previously purified to homogeneity by our research group from Jatropha curcas cake. The goals of this present study were to proceed with the structural and kinetic characterization of JcTI-I and to assess its potential activity against human pathogenic bacteria, with emphasis on the mode of antibacterial action and activity against T. gondii. Mass spectrometry analysis showed that JcTI-I is a protein of 10,252 kDa composed of two polypeptide chains of 7,133 and 3,124 kDa, linked by disulfide bonds. Primary sequence data obtained by Edman degradation and mass spectrometry allowed to classify JcTI-I as a 2S albumin. In silico analysis permitted to identify the JcTI-I precursor-coding genes (Jcr4S00619.70) in the genome of J. curcas. The precursor (pro-albumin) contains a signal peptide of 39 amino acid residues at the N-terminus, eight conserved cysteine residues, multiple sites of glycosylation and one phosphorylation site. JcTI-I is mainly composed of α-helices (70%) stabilized by four disulfide bonds and disordered structures. In silico modelling and SAXS analysis suggest an extended structure with long tail and globular region for JcTI-I. Moreover, JcTI-I has high affinity for trypsin (Ki = 2 x 10-11 M), which is inhibited by a non-competitive mechanism, and maintained, at least partially, in the presence of dithiothreitol (0.1 M, 60 minutes). JcTI-I inhibited S. aureus and S. choleraesuis growth (MIC of 5 µg protein/mL), probably due to its physical interaction with the bacteria, which might have increased the cell surface permeability to this protein that, after internalization to intracellular environment, inactivated proteases and bound to DNA. It is possible that JcTI-I has caused bacterial DNA degradation due to its desoxirribonucleasica activity detected in vitro. Furthermore, JcTI-I was also toxic to T. gondii decreasing the numbers of infected Vero cells and intracellular tachyzoites. In addition, T. gondii treated with JcTI-I presented changes in their internal pelicular and cellular membranes and increased formation of cytoplasm vesicles. Importantly, JcTI-I did not show cytotoxicity to Vero cells, lysis of human red blood cells, and acute toxicity (lethality) to mice. The data demonstrate that JcTI-I has potential to be used as a new antimicrobial agent, adding value to J. curcas cake. / O número de doenças causadas por bactérias resistentes a antibióticos tem aumentado, dentre elas aquelas ocasionadas por Staphylococcus aureus. Além das infecções bacterianas, há aquelas oriundas da ação de protozoários, como a toxoplasmose, causada pelo Toxoplasma gondii. Tais fatos justificam a busca de novos agentes ativos contra patógenos causadores de infecções. Da torta de Jatropha curcas (Pinhão-manso), uma glicoproteína com atividade inibitória de tripsina e ação contra bactérias patogênicas ao homem, denominada JcTI-I, foi previamente isolada por nosso grupo de pesquisa. Os objetivos desse trabalho foram prosseguir com a caracterização estrutural e cinética do JcTI-I e avaliar sua atividade contra patógenos causadores de infecção no homem, com ênfase no modo de ação antibacteriana e atividade contra T. gondii. Espectrometria de massas revelou que JcTI-I é uma proteína de 10,252 kDa, formada por duas cadeias polipeptídicas de 7,133 e 3,124 kDa, unidas por ligações dissulfeto. Dados da sequência primária gerados por degradação de Edman e espectrometria de massas permitiram a classificação do JcTI-I como uma albumina 2S. Análises in silico possibilitaram a identificação de genes codificadores do precursor (Jcr4S00619.70) do JcTI-I no genoma de J. curcas. O precursor (pró-albumina) contém um peptídeo sinal de 39 resíduos de aminoácidos na extremidade N-terminal, oito cisteínas conservadas, vários sítios de glicosilação e um sítio de fosforilação. JcTI-I é composto principalmente por α-hélices (70%), estabilizadas por quatro ligações dissulfeto, e estruturas não ordenadas. Modelagem in silico e análise por SAXS sugerem uma estrutura estendida, com longa cauda e região globular, para o JcTI-I. Essa proteína possui alta afinidade pela tripsina (Ki = 2 x 10-11M), inibindo sua ação proteolítica por mecanismo do tipo não competitivo, o qual é mantida, parcialmente, mesmo na presença do ditiotreitol (0,1 M, 60 minutos). Além disso, JcTI-I inibiu o crescimento das bactérias S. aureus e Salmonella enterica (MIC de 5 µg proteína/mL), provavelmente em decorrência de sua ligação à célula bacteriana, causando aumento da permeabilidade da superfície celular. Isso deve ter possibilitado o acesso do JcTI-I para o meio intracelular e a consequente inativação das proteases e ligação ao DNA bacterianos. É possível que JcTI-I tenha acarretado degradação do DNA bacteriano, dada à sua atividade desoxirribonucleásica detectada in vitro. JcTI-I também teve ação deletéria sobre T. gondii, causando redução nos números de células Vero infectadas com o parasita e de taquizoítos intracelulares. Adicionalmente, JcTI-I promoveu alterações nas membranas pelicular interna e plasmática do protozoário, além da formação de vesículas no seu citoplasma. Digno de nota nesse contexto, é que o JcTI-I não causou citotoxicidade para célula Vero, lise de hemácias humanas e toxicidade aguda (letalidade) em camundongos. Os dados demonstram o potencial de uso do JcTI-I como um novo agente antimicrobiano, agregando valor à torta de J. curcas.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2011 / Inclui bibliografias / O câncer é uma neoplasia maligna originada por um conjunto de causas, onde o acúmulo de deficiências genéticas hereditárias ou adquiridas parece ser fundamental. Dentre os genes relacionados aos fatores genéticos predisponentes a carcinogênese existem dua / Breast cancer (BC) is the most common cancer in women and is responsible for the greatest number of female deaths from tumors. It is estimated that worldwide, more than one million women are diagnosed with BC every year (1). In Brazil, more than 11 thousa

The cholinesterase (ChE) play an important role in the organophosphates and carbamates detection substances that are of high interest for environmental control, because these compounds are present in most pesticides applied to crops. The development of ChE biosensors to detect these contaminants with greater speed, sensitivity and selectivity, has the ability to quantify from a suitable transducer, the reduction of enzyme activity caused by contaminants. This study aimed to purify and characterize AChE of Prochilodus brevis brain for use in electrochemical tests. Gradients of pH, ionic strength and temperature, showed high activities in pH 8,5, 0,08M at ionic strength, 28Cº of temperature optimum and 37ºC of thermal stability for cell-free extract. Was applied salting out method in fractions 0-70% followed by 0-40% of (NH4)2SO4 as a refinement to liquid chromatography. The purification protocol 1 showed specific activity of 1.41 U/mg in 0-70% and 0-40% was 1.94 U/mg. The purification protocol 2, the 0-70% fraction had specific activity of 0.31 U/mg and 0-40% with 1.77 U/mg. After Sephacryl S-200 chromatography, showed specific activity for protocols 1 and 2 of 0,128U/mg and 0.2869 U/mg, respectively. The next stage of the Protocol 2 with DEAE-Sepharose was eluted peak with specific activity of 0.01326 U/mg. In the purification protocol 3, 0-70% have specific activity 0.310 U / mg, followed by 1,774 U/mg in 0-40%. After Sephacryl S-100, was obtain two peaks with a specific activity of 0.194 U/mg (ChE1) and 0.0873 U/mg (ChE2). SDS-PAGE of ChE 1 showed somewhat visible band of approximately 67kDa. Inhibition assays with ChE 1 had higher specificity for BW 284c51. Electrochemical tests with cell-free extract, dialyzed, ChE1 and ChE2, showed thiocholine (TCh) oxidation with better limits of detection and quantification limits for ChE1 and ChE2. The molecular modeling experiments showed favorable results in complex formation ChE-NTCPM. The study showed the isolation of ChE with catalytic activity for both enzymes, AChE and BuChE, with favorable adsorption properties in NTCPM in the development of enzymatic biosensor for environmental monitoring. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As colinesterases (ChE) desempenham um papel importante na detecção de organofosforados e carbamatos que são substâncias de alto interesse para o controle ambiental, pois estes compostos estão presentes na maioria dos pesticidas aplicados em lavouras. O desenvolvimento de biossensores a base de ChE para a detecção destes contaminantes com maior rapidez, sensibilidade e seletividade, tem a capacidade de quantificar, a partir de um transdutor adequado, a diminuição da atividade enzimática causada pelos contaminantes. Este trabalho teve como objetivo de purificar e caracterizar AChE de cérebro de Prochilodus brevis para o emprego em testes eletroquímicos. Os gradientes de pH, força iônica e temperatura, mostraram maiores atividades em pH 8,5, força iônica de 0,08M, temperatura ótima 28°C e estabilidade térmica de 37°C para extrato livre de células. Foi aplicado o método de precipitação salina em frações de 0-70% seguido de 0-40% de (NH4)2SO4 como refinamento para cromatografia líquida. O protocolo de purificação 1 apresentou atividade específica de 1,41 U/mg em 0-70%, enquanto 0-40% apresentou 1,94 U/mg. O protocolo de purificação 2, a fração 0-70% teve atividade específica de 0,31 U/mg e 0-40% de 1,77 U/mg. Após a cromatografia de sephacryl S-200 apresentou atividade específica para os protocolos 1 e 2 de 0,128U/mg e 0,2869 U/mg, respectivamente. Na continuidade do protocolo 2 com DEAE-sepharose o pico eluído apresentou atividade específica de 0,01326 U/mg. No protocolo de purificação 3, 0-70% tem atividade específica 0,310 U/mg, seguido de 1,774 U/mg em 0-40%. Após Sephacryl S-100 foi obtido dois picos com atividade específica de 0,194 U/mg (ChE1) e 0,0873 U/mg (ChE2). Eletroforese SDS-PAGE de ChE1 apresentou banda pouco visível de aproximadamente 67KDa. Os ensaios de inibição com ChE1 apresentaram maior especificidade para BW 284c51. Os testes eletroquímicos com extrato livre de célula, dialisado, ChE1 e ChE2, mostraram oxidação de tiocolina (TCh) com melhores limites de detecção e quantificação para ChE1 e ChE2. Os experimentos de modelagem molecular apresentaram resultados favoráveis na formação do complexo ChE-NTCPM. O estudo mostrou o isolamento de ChE com atividade catalítica para as duas enzimas, AChE e BuChE, com propriedades de adsorção favoráveis em NTCPM no desenvolvimento de biossensor enzimático para monitoramento ambiental.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-02T14:25:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 314241 bytes, checksum: 482f255a265e7117d2b92fc2816fc6a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T14:25:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 314241 bytes, checksum: 482f255a265e7117d2b92fc2816fc6a0 (MD5) Previous issue date: 2004-02-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O feijão é um dos constituintes básicos da dieta do brasileiro, além de ser um produto agrícola de grande valor econômico-social. Neste sentido, para atender as exigências dos consumidores, os programas de melhoramento começam a voltar atenção para características de qualidade do grão. Este trabalho faz parte do programa de melhoramento de qualidade do feijoeiro desenvolvido pelo BIOAGRO/UFV em parceria com a Embrapa - Arroz e Feijão e visa o aumento do teor de proteínas nos grãos do feijoeiro por meio de retrocruzamentos assistidos por marcadores moleculares. Foram utilizadas as variedades Baliza, Laranja, Gaurama e PVA 109 como fontes doadoras de genes para alto teor de proteína e a linhagem CNFC 7827 como genitor recorrente. Para atingir este objetivo as seguintes etapas foram realizadas: (a) realização de cruzamentos entre genótipos de alto teor de proteína com uma linhagem elite; (b) análise do teor de proteína de cerca de 400 sementes segregantes (F 2 ) de cada cruzamento por método não destrutivo; (c) seleção das sementes com maior teor de proteína de cada cruzamento (intensidade de seleção de 10%); (d) realização de fingerprinting das plantas F 2 selecionadas com marcadores RAPD; (e) retrocruzamentos de todas as plantas F 2 selecionadas com o genitor recorrente; (f) confirmação do teor de proteína pelo método Kjeldahl nas sementes F 2:3 ; (g) seleção das plantas RC 1 F 1 com base nos resultados de distância genética determinada com marcadores moleculares e o teor de proteína das plantas F 2 selecionadas e confirmadas na geração F 2:3 . Todas as populações tiveram herdabilidades altas variando de 58 a 77 %, o que sugere que são adequadas para obter alta eficiência de seleção ou estudos de mapeamento para a característica teor de proteína. Os ganhos gerais variaram e - 0,95 a 4,26%, este resultado indica que a seleção em F 2 tem baixa eficiência quando utilizada isoladamente. Entretanto, a ampla variação do teor de proteína em progênies F 2:3 e as porcentagens de ganho observadas (13,66 a 25,84% considerando as cinco progênies de maiores teores) demonstram que o processo de transferência de genes para alto teor protéico por meio de retrocruzamentos é eficiente quando baseado na pré-seleção de sementes F 2 e posterior seleção das melhores famílias F 2:3 . A seleção em geração F 2 com auxílio de micro análise não destrutiva foi pouco eficiente para a população derivada do cruzamento Laranja x CNFC 7827. Fatores como o efeito de dominância e interações genótipo x ambiente diferenciadas causaram dificuldades na seleção dos genótipos superiores. Em vista deste resultado, modificações no método de seleção utilizado podem ser propostas visando aumentar sua eficiência. Os ganhos de seleção para teor de proteína com o auxílio de marcadores moleculares variaram entre 9,92 a 15,65%. As plantas F 2 das diferentes populações apresentaram distância genética em relação ao progenitor recorrente bastante variável. Foi possível obter ganhos de similaridade em relação à média de similaridade encontrada nas populações F 2 variando de 12 a 16%. Com a utilização indivíduos selecionados de alto teor de proteína mais próximos ao genitor recorrente o número de retrocruzamentos necessários para recuperar o genoma do mesmo deve ser menor. / The common bean is one of the most important component of the brazilian diet, in addition, is an agricultural product of great economic and social importance. In this sense, to attend the consumers exigencies, the breeding programs start to give attention for quality traits of the grain. This work is part of the quality bean breeding program being developed by BIOAGRO/UFV in partnership with Embrapa - Rice and Bean center and aims to increase the common bean protein content by means of backcrosses assisted by molecular markers. There were used the varieties Baliza, Laranja, Gaurama and PVA as gene donors for high protein content and the CNFC 7827 as recurrent genitor. To achieve this goal, specific steps were reached: (a) crossings high protein content genotypes with an elite cultivar (b) analysis of protein content of 400 F 2 seeds from each cross by using non-destructive method; (c) selection of seeds with high protein content from each cross (selection intensity of 10%); (d) fingerprinting the F 2 selected plants with RAPD markers; (e) backcrosses the selected F 2 plants with the recurrent genitor; (f) confirmation the protein content in the F 2:3 seeds by the Kjeldahl method; (g) selection and planting the RC1F1 based on genetic distances, obtained with molecular markers, and protein content of the F 2 plants selected and confirmed in the F2:3. All the populations had a high heritability varying from 58 to 77%, which suggested that they are adequate for selection or protein mapping loci. The general gains varied from - 0.95 to 4.26%, which indicates that the selection in F 2 has low efficiency when used isolated. However, the wide variation of protein content in F 2:3 and the gains observed (13,66 to 25,84% considering the five F 2:3 of high protein contents) demonstrate that the genes transfer process for high protein content by backcrosses is efficient when based on pre-selection of F 2 seeds and posterior selection of the best F 2:3 families . The selection gains for protein using molecular markers varied from 15.65 to 9.92%. The F 2 plants of the different populations had genetic distances regarding the recurrent genitor highly variable. It was possible to obtain similarity gains, regarding the similarity average found in the F 2 populations, varying from 12 to 16%. With the utilization of selected individuals of high protein content and genetically closer to the recurrent progenitor the number of backcrosses necessary to recover the genome of the recurrent should be smaller.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-05T19:36:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 613046 bytes, checksum: 69755ddb1c7cf5d4131bbf4a7ac18473 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-05T19:36:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 613046 bytes, checksum: 69755ddb1c7cf5d4131bbf4a7ac18473 (MD5) Previous issue date: 2001-03-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram utilizados 40 novilhos Nelore inteiros, com peso vivo médio inicial de 240 kg, sendo quatro novilhos de referência e quatro alimentados para mantença, o restante distribuído em oito tratamentos, com quatro diferentes níveis de concentrado nas dietas (20, 40, 60 e 80%) e dois níveis de proteína bruta (PB), (15 e 18%). As fases de recria e de engorda foram avaliadas até 360 e 450 kg de peso vivo, respectivamente. O volumoso utilizado foi feno de capim Tifton (Cynodon dactylon). Avaliaram-se os consumos dos nutrientes, os ganhos médios diários de peso vivo (GMD), de peso de corpo vazio (GMCPVZ) e de carcaça (GC) e a conversão alimentar (CA). Após o abate, foram determinados os rendimentos de carcaça, as porcentagens dos cortes básicos, o comprimento de carcaça, a área de olho de lombo, a espessura de gordura subcutânea, as composições física e química da carcaça. Foram selecionadas oito meia- carcaças, uma de cada tratamento com 15% de PB, para a realização de uma dissecação completa e determinação das composições física e química da carcaça, que foram seção HH. cada órgãos e De vísceras. As comparadas animal com abatido, a foram composição obtida da pesados todos os amostras de todas as partes do corpo do animal foram liofilizadas e determinados os teores de nitrogênio total, extrato etéreo, macrominerais e aminoácidos. Os conteúdos de proteína, gordura, energia, macrominerais e aminoácidos retidos no corpo foram estimados por meio de equações de regressão do logaritmo do conteúdo corporal de proteína, gordura, energia, macrominerais ou aminoácidos em função do logaritmo do PCVZ. Obtiveram-se as exigências líquidas de proteína, energia, macrominerais ou aminoácidos, para ganho de 1 kg de PCVZ, a partir de equação Y’ = b. 10 a . X b- , sendo “a” e “b” o intercepto e o coeficiente de regressão das equações de predição dos conteúdos corporais dos nutrientes. As exigências líquidas de energia para mantença (ELm) foram estimadas como o anti-log do intercepto da equação obtida pela regressão linear entre o logaritmo da produção de calor (PC) e o consumo de energia metabolizável. As eficiências de utilização da EM (EUEM) para mantença (k m ) e ganho de peso (k f ) foram estimadas a partir da relação entre os teores de energia líquida, para mantença ou ganho, respectivamente, em função da EM da dieta. Foram tirados dados parciais ou totais de vários trabalhos sobre exigências nutricionais de bovinos. Em todos os experimentos, foi usada a técnica do abate comparativo, abate de uma amostra de animais referência e determinação da composição do corpo vazio. A determinação dos teores de extrato etéreo, proteína e macrominerais foi realizada segundo métodos tradicionais. Para estudo das exigências, os animais foram agrupados em categorias raciais, como: Zebuínos, F1 (E x Z), Mestiços leiteiros e Holandeses. As determinações das exigências nutricionais e das EUEM foram realizadas de forma semelhante ao citado anteriormente. O consumo de MS foi influenciado (P<0,01) pelo nível de concentrado na fase de recria, com consumo máximo de 2,59% PV com 42,60% de concentrado e na fase de engorda, apresentou média de 1,80% PV. O aumento do teor de proteína bruta da dieta, de 15 para 18%, aumentou (P<0,01) o consumo de MS, na fase de recria, mas não influenciou o consumo na fase de engorda. Os níveis de concentrado das dietas não influenciaram (P>0,01) os consumos de MO, PB e NDT, nas fases de recria e de engorda. Os GMD, GMPCVZ, GC e CA não foram influenciados (P>0,01) pelos níveis de concentrado da dieta. O teor de PB da dieta influenciou positivamente (P< 0,01) o GMD nas duas fases. Na fase de recria, os níveis de concentrado da dieta não influenciaram (P> 0,01) os rendimentos xde carcaça, já na fase de engorda, o aumento da inclusão de concentrado na dieta aumentou linearmente (P< 0,01) o rendimento de carcaça em relação ao PV. Não foi verificado efeito dos níveis de concentrado e dos teores de PB da dieta (P> 0,01) sobre os cortes básicos estudados. Foram ajustadas equações para estimar a porcentagem de lipídios e de água na carcaça, a partir da porcentagem de lipídios na seção HH: % lipídios na carcaça = 1,5113 + 0,6832*X, r 2 = 0,752; % água na carcaça = 71,8989 - 0,6006*X, r 2 = 0,864; onde, X = % de lipídio na seção HH. Os teores de PB influenciaram positivamente (P<0,01) apenas os pesos absolutos e relativos dos rins, pulmões e fígado. Os pesos relativos do rúmen+retículo, estômagos e trato gastrintestinal apresentaram comportamento linear decrescente com o aumento dos níveis de concentrado, não ocorrendo nenhum efeito dos níveis de concentrado e de PB sobre a maioria dos órgãos e vísceras. As exigências de energia líquida para ganho de peso de zebuínos não- castrados podem ser obtidas pela equação: ELg = 0,0413 x PCVZ 0,75 x GDPCVZ 0,978 . A ELm foi de 83,70 kcal/PCVZ 0,75 , para animais Nelore não- castrados. Foi obtida a seguinte equação para estimativa da proteína retida (PR): PR = - 39,0169 + 200,638 GMD + 0,4166 ER. A eficiência de utilização da EM para mantença (km) foi calculada em 0,63. E as eficiências de utilização da EM para ganho (kf) foram estimadas em 0,30; 0,35; 0,38 e 0,43, respectivamente, para as concentrações de EM da dieta de 2,65; 2,84; 2,92 e 2,90 Mcal/kg de MS. Houve diminuição nas concentrações dos cinco macroelementos estudados no corpo vazio e no ganho de corpo vazio, com a elevação do peso vivo. As relações g Ca/100g de proteína retida e g P/100g de proteína retida foram iguais a 6,44 e 4,78. As exigências líquidas para ganho de aminoácidos diminuíram com o aumento do peso vivo do animal. A exigência total de aminoácidos metabolizáveis, expresso em % do total de aminoácidos essenciais, não variaram muito com o aumento do peso vivo e os valores médios foram 2,66; 15,11; 6,09; 8,64; 9,26; 18,48; 8,33; 12,01 e 19,41 para metionina, lisina, histidina, fenilalanina, treonina, leucina, isoleucina, valina e arginina, respectivamente. A relação ganho de PCVZ/ganho de peso vivo em jejum (GPVJ) dos animais zebuínos, F1, mestiços leiteiros e Holandeses foi 0,96; 1,00; 0,94 e 0,86, respectivamente. As equações obtidas para estimativa da PR, em função do GPVJ e da energia retida (ER) foram: PR = - 17,6968 + 192,31 GPVJ – 3,8441 xiER, para animais zebuínos e PR = 31,4045 + 107,039 GPVJ + 5,632 ER, para F1. As energias líquidas para ganho (ELg) podem ser obtidas pelas equações ELg = 0,0435 * PCVZ 0,75 * GDPCVZ 0,8241 , para animais zebuínos e ELg = 0,0377 * PCVZ 0,75 * GDPCVZ 1,0991 , para animais F1. A média dos valores de ELm para zebuínos, F1, mestiços leiteiros e Holandeses foram 71,30; 70,77; 79,65 e 88,97, respectivamente. As EUEM para mantença (km) e ganho (kf), variaram de 0,65 a 0,63 e de 0,25 a 0,37, respectivamente, para dietas com concentração de EM variando de 2,2 a 2,7 Mcal/kg de matéria seca. A exigência de P foi superior e as de Na e K foram inferiores às recomendações do NRC (1996). As exigências de Ca e Mg foram semelhantes às do NRC (1996). / Forty Nellore bulls, with 240 kg initial LW, were used. Four were used as reference bulls, four were fed for maintenance and the remaining were distributed to eight treatments, with four different concentrate levels in the diets (20; 40; 60 and 80%) and two crude protein (CP) levels (15 and 18%). The growing phase was evaluated up to 360 kg of LW, and the fattening phase up to 450 kg of LW. The Tyfton grass hay (Cynodon dactylon) was the forage used. The nutrients intakes, the average LW (LWG), empty body (EBWG) and carcass (CG) gains and the feed:gain conversion (FC) were determined. After the slaughter, the carcass dressing percentage, the basic cuts percentages, the carcass length, the loin eye area, the subcutaneous fat thickness, and the physical and chemical carcass compositions were evaluated. Eight half-carcasses were selected for the accomplishment of a complete dissection and the determination of the physical and chemical carcass compositions, which were compared with the composition of the HH section. From each slaughtered animal, all the organs and visceral and total were weighted. nitrogen, ether All animal body parts were freeze dried extract, macrominerals and amino acids concentrations were determined. The protein, fat, energy, macrominerals and xiiiamino acids contents retained in the body were estimated by regression equations of the logarithm of protein, fat, energy, macrominerals or amino acids body content, in function of the logarithm of empty body weight (EBW). The net protein, energy, macrominerals and amino acids requirements, for gains of 1 kg EBW, were determined by the equation Y = b. 10 a . X b-1 , being a and b intercept and regression coefficient, respectively, of the prediction equations of the nutrients contents in the body. Net energy requirement for maintenance (NEm) was estimated as the intercept anti-log of the equation obtained by linear regression among the logarithm of heat production and the metabolizable energy intake. The ME efficiencies of utilization (MEEU) for maintenance (km) and for weight gain (kf) were calculated from the relationship among the net energy concentration, for maintenance or gain, respectively, in function of the ME of the diet. Partial or total data, from several works, on nutritional requirements of bovine, were utilized. In all the experiments, the comparative slaughter technique was used, with the slaughter of a sample of the reference animals and the determination of the empty body composition. The determination of the ethereal extract, protein and macrominerals contents was accomplished according to traditional methods. To study the nutrients requirements, the animals were grouped in breed categories, as: Zebu, F1 (E x Z), Dairy crossbreds and Holstein. The nutrients requirements and the MEEU determinations were realized the same way as cited before. The dry matter intake was influenced (P>0.01) by the concentrate level, in the growing phase, with maximum consumption of 2.59% LW with 42.60% of concentrate, and, in the fattening phase, it presented a mean value of 1.80% LW. The increase in the diet CP level, from 15 to 18%, caused a significant (P<0,01) increase in the growing phase DMI, but it did not influence the consumption in the fattening phase. The diets concentrate levels did not influence (P>0,01) the OM, CP and TND intakes, in the growing and fattening phases. The LWG, EBWG, CG and FC were not influenced (P>0.01) by the concentrate levels of the diet. The diet CP level had a positive influence (P<0.01) on the LWG in both phases. In the growing phase, the concentrate levels of the diet did not influence (P>0.01) the carcass dressing percentage; in the fattening phase, the increase in the diet concentrate inclusion caused a linear increase (P<0.01) in the carcass dressing percentage in relation to the LW. It was not verified any effect of the concentrate xivlevel and the CP level (P>0.01) on the studied basic cuts. Equations were built to estimate the carcass lipids and water percentages, using the lipids percentage in the HH section: carcass % lipids = 1.5113 + 0.6832*X, r 2 = 0.752; carcass % water = 71.8989 – 0.6006*X, r 2 = 0.864; where, X = lipid % in the HH section. The CP level had a positive influence (P<0.01) only on the kidneys, lungs and liver absolute and relative weights. The rumen+reticulum, stomaches and GIT relative weights presented a decreasing linear behavior with the increase of the concentrate levels, but there was no effect of the concentrate and CP levels on the major of the organs and visceral. The net energy requirement for weight gain of zebu bulls can be obtained by the equation: NEg = 0.0413 x EBW 0.75 x gain of EBW 0.978 . The NEm for these animals was 83.70 kcal/EBW 0.75 . The following equation was obtained to estimate the retained protein (RP): RP = - 39.0169 + 200.638 gain of EBW + 0.4166 RE. The MEEU for maintenance (km) was 0.63 and the MEEU for gain (kf) were 0.30; 0.35; 0.38 and 0.43, respectively, for diet ME concentrations of 2.65; 2.84; 2.92 and 2.90 Mcal/kg of DM. There was a decrease in the concentrations of the five macrominerals studied in the empty body and in the empty body gain, with the elevation of the live weight. The relationships g Ca/100g of retained protein and g P/100g of retained protein were 6.44 and 4.78, respectively. The net amino acids requirements for gain decreased with the increase of the live weight of the animal. The total metabolizable amino acids requirements, expressed in percentage of the total essential amino acids, did not vary a lot as the live weight increased, and the mean values were 2.66; 15.11; 6.09; 8.64; 9.26; 18.48; 8.33; 12.01 and 19.41 for methionine, lysine, histidine, phenylalanine, threonine, leucine, isoleucine, valine and arginine, respectively. The zebu, F1, dairy crossbred and Holstein animals EBW gain/BW gain relationship were 0.96, 1.00, 0.94 and 0.86, respectively. The equations to estimate the RP, in function of BW gain (BWG) and retained energy (RE), were: RP = - 17.6968 + 192.31 BWG – 3.8441 RE, for zebu and RP = 31.4045 + 107.039 BWG + 5.632 RE, for F1 animals. The net energy for gain (NEg) can be obtained by the equations NEg = 0.0435 * EBW 0.75 * EBWG 0.8241 , for zebu animals, and NEg = 0.0377 * EBW 0.75 * EBWG 1.0991 , for F1 animals. The NEm mean values for zebu, F1, dairy crossbred and Holstein were 71.30; 70.77; 79.65 and 88.97, respectively. The MEEU for maintenance (km) and for gain (kf) varied from 0.65 to 0.63 and from 0.25 to 0.37, respectively, for diets with ME concentration varying from 2.2 to 2.7 Mcal/kg of dry matter. The P requirement was superior and xvNa and K were inferior to the NRC (1996) recommendations. The Ca and Mg requirements were similar to that of NRC (1996).

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-18T12:07:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 482560 bytes, checksum: d580975f1f62e46343a350e2b55d516b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T12:07:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 482560 bytes, checksum: d580975f1f62e46343a350e2b55d516b (MD5) Previous issue date: 2005-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Conduziu-se um experimento com o objetivo de determinar os coeficientes de digestibilidade ileal verdadeiro da proteína e dos aminoácidos digestíveis de um concentrado protéico, utilizando duas técnicas: dieta isenta de proteína (DIP) e dieta com caseína hidrolisada enzimaticamente (Casein Hydrolised Enzymatically - CHE), para determinação das perdas endógenas de proteína, de aminoácidos e de nitrogênio, Foram utilizados 12 suínos mestiços, machos, castrados, com o peso médio de 35 kg, submetidos previamente à cirurgia para implantação da cânula “T” simples. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com três tratamentos, quatro repetições e um animal por unidade experimental. Os tratamentos foram constituídos por: tratamento 1. dieta com CHE, tratamento 2; dieta isenta de proteína e tratamento; e 3. dieta com 23% do concentrado protéico teste. Comparando as duas técnicas a utilização da CHE proporcionou aumento dos valores estatísticos das perdas endógenas para proteína bruta de 4,57% e para os aminoácidos glutamina, serina e cistina (P<0,01) e para os aminoácidos arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, valina, alanina, ácido aspártico e tirosina (P<0,05); no entanto para os aminoácidos triptofano, glicina e prolina não foram observadas diferenças significativas (P>0,05). Os coeficientes de digestibilidade ileal verdadeiro dos aminoácidos metionina, treonina, triptofano e serina que foram determinados pelas perdas endógenas com dieta contendo CHE foram superiores estatisticamente àqueles em que se utilizaram as perdas endógenas com DIP. As quantidades das secreções protéicas e de aminoácidos obtidas pela técnica da CHE foram superiores às obtidas pela técnica da DIP. Os coeficientes de digestibilidade verdadeira da proteína foram inferiores, e os dos aminoácidos, superiores, quando determinados pelo método da CHE. / The objective of this study was to compare two endogenous losses determination techniques for protein, aminoacid and nitrogen, the diet without protein (DIP) and enzime-hydrolysed casein (CHE) techniques, to evaluate the true digestibility coefficients of proteins and digestible aminoacid of the protean nucleus tested. Twelve half-breed male swine were used, castrated at 35 kg of weight, previously submitted to a surgery for implantation of the simple “T” stem. The experimental delineation was entirely random with 3 treatments, 4 repetitions and one animal as experimental unit. The treatments were constituted of: treatment 1 containing diet with enzyme-hydrolysed casein (CHE), treatment 2, diet without protein (DIP) and treatment 3 diet containing 23% of the protean nucleus tested. The real digestibility coefficient values of the brute protein were higher when determined through the DIP technique. However there were significant statistical differences for the aminoacids glutamine, serine and cystine (P<0.01) and for arginine, hystidin, isoleucin, leucin, lysine, metyonine, phenylalanine, threonyne, valin, alanine, aspartic acid and tyrosine (P<0.05). For tryptofan, glycin, and proline there were no significant differences (P>0.05). The amounts of protein and amino acids secretions obtained by the CHE technique were superior to obtained by the DIP technique the coefficients of real protein digestibility were inferiors and the coefficients of real amino acid digestibility were superiors.

DUARTE, Labib Santos. Determinação das frações protéicas e de carboidratos e estimativa do valor energético e da digestão intestinal da proteína de forrageiras e resíduos gerados no nordeste brasileiro. 2008. 63 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Zootecnia, Fortaleza-CE, 2008 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-03T12:10:10Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_lsduarte.pdf: 485965 bytes, checksum: 5813dcc8472e7d16b75c5faf44e57456 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-03T12:10:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_lsduarte.pdf: 485965 bytes, checksum: 5813dcc8472e7d16b75c5faf44e57456 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T12:10:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_lsduarte.pdf: 485965 bytes, checksum: 5813dcc8472e7d16b75c5faf44e57456 (MD5) Previous issue date: 2008 / The objective of this research was to characterize the protein and carbohydrate fractions,estimate energy values and evaluate the intestinal digestibility protein of algaroba (Prosopis juliflora), canafístula (Pithecellobium multiflorum), flor-de-seda (Calotropis procera), jitirana (Ipomea sp.), juazeiro (Ziziphus joazeiro), mata-pasto (Senna obtusifolia) and sabiá (Mimosa caesalpiniaefolia Benth), palma gigante (Opuntia ficus indica) and xique-xique (Cereus gounellei) and the agroindustry byproducts from pineapple (Ananas comosus L.), barbados cherry (Malpighia emarginata), cashew (Anacardium occidentale), coconut (Cocos nucifera L.), melon (Cucumis melo), passion fruit (Passiflora eduli), grape (Vitis labrusca) and anatto seeds (Bixa orellana L.). To obtain the carbohydrates fractions, according with Cornell Net Carbohydrate and Protein System (CNCPS) system, were calculated the total carbohydrates, their fractions B2, C and the soluble components in neutral detergent. It was determinated the potentially degradable (B2) and undegradable (C)fractions of the neutral detergent fiber, corrected for ashes and protein. The non-protein nitrogenous compounds, soluble and insoluble nitrogen in borate-phosphate buffer, nitrogenous protein insoluble in neutral and acid detergent were analyzed for the determination of the nitrogen fractions. To estimate Total Digestible Nutrients (TDN) had been used the equations proposals by National Research Council - NRC (2001). The feeds were incubated in rumen during 16 hours to determine the rumen-undegradable protein (RUDP), then the residue was incubated with pepsin solution during 1 hour, and pancreatic solution during 24 hours at 38°C, whose residues were analyzed for total nitrogen. The Malpighia emarginata and Cucumis melo showed substantial nitrogen content in fraction C which would reduce the disponibility of nitrogen for the rumen microorganisms and its host. The evaluated forages showed higher proportions of nitrogen in fractions A and B2, providing nitrogen for the rumen microorganisms. The percentage of fraction C in Malpighia emarginata and Cucumis melo at the expense of the B2 fraction would entail greater effect of ruminal fill and decreased availability of energy, for its characteristic of indigestibility along the gastrointestinal tract, when being tested for feeding animals. In the evaluated forages had been observed values of A+B1 fraction from 35.26 to 73.37%, for B2 fraction, from 3.87% to 28.45% and for C fraction from 17.34 to 40.63%. The fractions, A, B1, B2, B3 and C of nitrogenous compounds had presented variation from 9.84 to 42.33%; 1.58 to 11.47%; 48.63 to 80.10%; 0.70 to 6.13% and 0.43 to 2.86%, respectively. The byproducts carbohydrate fractions analyzed varied from 19.35 to 58.52%; 9.95 to 61.44% and 15.35 to 70.06, for A+B1, B2 and C, respectively. In turn, the nitrogenous compounds varied from 5.01 to 33.02%; from 1.69 to 15.23%; from 2.26 to 75.60%; from 1.53 to 40.26% and from 0.08 to 43.84% for fractions, A, B1 B2, B3 and C, respectively. The forages TDN values varied from 48.30 to 65.42%, while of by-products it varied from 31.41 to 128.9%. The estimate of RUDP in the forages ranged from 13.37% to 83.6%, and the byproducts RUDP ranged from 39,14 to 89.06%. The intestinal digestion of RUDP ranged from 26.09 to 80.68%, %, while for byproducts varied of 22,26 76.82%. The Mimosa caesalpiniaefolia Benth was the forage that presented better ID and better RUDPd, and the Calotropis procera, presented lowest values for these variables. For byproducts, the Cucumis melo presented the biggest value for DI, while the Cocos nucifera L. presented the lowest values for DI and RUDPd / Objetivou-se com o presente estudo caracterizar as frações de carboidratos e proteína e estimar o valor energético e a digestibilidade intestinal da proteína não-degradada no rúmen de alimentos por intermédio da técnica de três estágios da algaroba (Prosopis juliflora), da canafístula (Pithecellobium multiflorum), da flor-de-seda (Calotropis procera), da jitirana (Ipomea sp.), do juazeiro (Zizyphus joazeiro), do mata-pasto (Senna obtusifolia), do sabiá (Mimosa caesalpiniaefolia), da palma gigante (Opuntia fícus indica) e do xique-xique (Cereus gounellei) e dos subprodutos do abacaxi (Ananas comosus), da acerola (Malpighia emarginata), do caju (Anacardium occidentale), do coco (Cocos nucifera), do melão (Cucumis melo), do maracujá (Passiflora eduli), da uva (Vitis labrusca) e do urucum (Bixa orellana). Para obtenção do fracionamento dos carboidratos, de acordo com o sistema CNCPS, foram calculados os carboidratos totais, as suas frações B2, C e os componentes solúveis em detergente neutro. Foram determinadas as frações potencialmente degradável (B2) e não-degradável (C) da fibra em detergente neutro, corrigida para cinzas e proteína. Para determinação das frações nitrogenadas, foram analisados os compostos nitrogenados não-protéicos, nitrogênio solúvel e insolúvel em tampão borato-fosfato e nitrogênio protéico insolúvel em detergente neutro e em detergente ácido. Para a estimação dos Nutrientes Digestíveis Totais (NDT) foram utilizadas as equações propostas pelo NRC (2001). Para a determinação da digestibilidade intestinal da proteína não-degradada no rúmen, os alimentos foram inicialmente incubados no rúmen de fêmea bovina fistulada, por 16 horas para determinação da Proteína não-degradada no rúmen (PNDR), sendo o resíduo submetido à digestão com solução de pepsina durante 1 hora, e solução de pancreatina a 38°C durante 24 horas, cujos resíduos foram analisados para nitrogênio total. Acerola e melão apresentaram substancial conteúdo nitrogenado na fração C o que reduziria a disponibilidade de N tanto para microrganismos do rúmen quanto para o hospedeiro. As forrageiras estudadas apresentaram maiores proporções do nitrogênio nas frações A e B2, consequentemente disponibilizando nitrogênio para bactérias fermentadoras de carboidratos fibrosos. O percentual de fração C na acerola e no melão em detrimento da fração B2 acarretaria maior efeito de repleção ruminal e diminuição da disponibilidade energética, por sua característica de indigestibilidade ao longo do trato gastrointestinal, quando submetidos a ensaios de alimentação para animais. Nas forrageiras nativas e nas adaptadas ao clima da região Nordeste foram observados valores de fração A + B1 de 35,26 a 73,37%, para fração B2, de 3,87% a 28,45% e para fração C de 17,34 e 40,63%. As frações A, B1, B2, B3 e C dos compostos nitrogenados apresentaram variação de 9,84 a 42,33 %; 1,58 a 11,47%; 48,63 a 80,10%; 0,70 a 6,13% e 0,43 a 2,86%, respectivamente. As frações de carboidratos dos subprodutos analisados variaram de 19,35 a 58,52%; 9,95 a 61,44% e 15,35 a 70,06 para A+B1, B2 e C, respectivamente; enquanto para os compostos nitrogenados variaram de 5,01 a 33,02%; 1,69 a 15,23%; 2,26 a 75,60%; 1,53 a 40,26% e 0,08 a 43,84% para frações A, B1 B2, B3 e C, respectivamente. O NDT estimado das forrageiras variou de 48,30 a 65,42%, enquanto o dos subprodutos variou de 31,41 a 128,90%. A estimativa da PNDR das forragens variou de 13,37 a 83,6%, e dos subprodutos variou de 39,14 a 89,06%. A digestibilidade intestinal da PNDR das forragens variou de 26,09 a 80,68%, enquanto para os subprodutos variou de 22,26 a 76,82%. O sabiá foi a forrageira que apresentou a maior DI e o maior teor de PNDRd, e a flor-de-seda os menores valores; enquanto para os subprodutos, o melão apresentou o maior valor para DI, entretanto o caju forneceu maior teor de PNDRd, enquanto o coco apresentou os mais baixos valores para DI e PNDRd

OLIVEIRA, Antônio Edson Rocha. Perfil de expressão e análise filogenética dos genes da proteína desacopladora mitocondrial durante o desenvolvimento e estresse em soja [Glycine max (L.) Merr.]. 2015. 185 f. Dissertação (Mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-09-01T19:11:22Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_aeroliveira.pdf: 4201041 bytes, checksum: ccb8c82104b3b19d3f225dd39473e820 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-09-02T17:44:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_aeroliveira.pdf: 4201041 bytes, checksum: ccb8c82104b3b19d3f225dd39473e820 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T17:44:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_aeroliveira.pdf: 4201041 bytes, checksum: ccb8c82104b3b19d3f225dd39473e820 (MD5) Previous issue date: 2015 / Several studies have evidenced that the main function of the mitochondrial uncoupling protein in plants (pUCP) is related to reactive oxygen species (ROS) regulation. In silico analysis suggests the existence of multigenic families to pUCPs codification, however further studies are yet needed to establish the pUCPs genetic expression profile, just like the gene amount in each species and their phylogenetic relations. The current work had as objective to characterize, analyze phylogeneticly and evaluate the expression profile of the pUCP multigenic family in different tissues during the soybean development [Glycine max (L.) MERR.] and in stress conditions. It has been performed an in silico analysis on the soybean genome and on other legumes available in the database WGS, revealing a codifier multigenic family for pUCP, UCP1 and 2 with 9 exons, UCP3 with 2 exons, and UCP4 and 5 with only 1 exon. Amongst the legumes analyzed, the soybean stood out with the greater number of genes, 10 genes in total, giving four GmUCP1 genes, one GmUCP2, one GmUCP3, two GmUCP4 and two GmUCP5, along with the presence of an alternative splicing on GmUCP1b1 gene. Specific primers have been designed for each GmUCP member in order to analize the expression profiles in different tissues (dry and doused seed, flowers, pods, cotyledons, unifoliate and trifoliate leaves, roots, hypocotyl and epicotyl) during the soybean development. For the assays in stress conditions have been used soybean leaves and roots with thirteen days after sowing (DAS) which have been subjected to osmotic stress caused by the application of polyethylene glycol (PEG) and biotic stress caused by salicylic acid (SA). The total RNA from each sample has been extracted in order to perform the RT-qPCR. The ct values have been obtained through the realplex program and analyzed through the GeNorm program. The genetic expression profile has shown that all genes were expressed in every tissue/organ analyzed during the soybean development, with the exception on some genes in dry seeds and epicotyl. The different expression profiles of each gene during the development of each tissue/organ suggest that occurs a spatial/temporal gene regulation among the GmUCP members. The expression profiles of the GmUCP genes in soybean during the stress conditions have varied, once 2 genes have shown steady expression in both tissues/ stress, 7 genes have shown a drop in the expression profile, while only 4 genes have shown an increase of the transcript levels. / Diversos estudos têm evidenciado que a principal função da proteína desacopladora mitocondrial de plantas (pUCP) está relacionada a regulação de espécies reativas de oxigênio (EROs). Análises in silico sugerem a existência de famílias multigênicas para a codificação de pUCPs, porém novos estudos ainda são necessários para estabelecer o perfil de expressão gênica das pUCPs, assim como a quantidade de genes em cada espécie e suas relações filogenéticas. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar, analisar filogeneticamente e avaliar o perfil de expressão da família multigênica da pUCP em diferentes tecidos durante o desenvolvimento da soja [Glycine max (L.) MERR.] e em condições de estresse. Foi realizada uma análise in silico no genoma da soja e de outras leguminosas disponíveis no banco de dados WGS, revelando uma família multigênica codificadora da pUCP, UCP1 e 2 com nove éxons, UCP 3 com 2 éxons, e UCP 4 e 5 com apenas um éxon. Dentre as leguminosas analisadas a soja se destacou com o maior número de genes, 10 genes no total, sendo quatro genes GmUCP1, uma GmUCP2, uma GmUCP3, dois GmUCP4 e dois GmUCP5, além da presença de um splicing alternativo no gene GmUCP1b1. Primers específicos foram desenhados para cada membro da GmUCP a fim de analisar os perfis de expressão em diferentes tecidos (semente seca e embebida, flores, vagens, cotilédones, folhas unifolioladas e trifolioladas, raízes, hipocótilos e epicótilos) durante o desenvolvimento da soja. Para os ensaios em condições de estresse foram utilizadas folhas e raízes de soja com treze dias após a semeadura (DAS) que foram submetidas a estresse osmótico promovido pela aplicação de polietileno glicol (PEG) e estresse biótico através de ácido salicílico (AS). O RNA total de cada amostra foi extraído para a realização de RT-qPCR. Os valores de ct foram obtidos pelo programa realplex e analisados pelo programa GeNorm. O perfil de expressão gênica mostrou que todos os genes GmUCP foram expressos em todos os tecidos/órgãos analisados durante o desenvolvimento da soja, com exceção de alguns genes em semente seca e epicótilo. Os diferentes perfis de expressão de cada gene durante o desenvolvimento de cada tecido/órgão sugerem que ocorra uma regulação gênica espacial/temporal entre os membros da GmUCP. Os perfis de expressão dos genes GmUCP em soja durante as condições de estresses foi diversificado, visto que 2 genes apresentaram expressão estável em ambos tecidos/estresse, 7 genes apresentaram queda do perfil de expressão, enquanto apenas 4 genes apresentaram aumento dos níveis de transcritos.

ARANTES, Mariana Reis. Expressão gênica da toxina da soja (SBTX) durante o desenvolvimento da soja [Glycine max (L.) Merril] e seu envolvimento na defesa vegetal. 2015. 120 f. Dissertação (Mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-09-01T19:49:36Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-09-02T20:52:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T20:52:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) Previous issue date: 2015 / Brazil is the second major global soybean producer, whose magnitude is due to its use multiples. However, losses in productivity of soybean grains in the field are still significant, especially those caused by pathogenic fungi. In view of this obstacle, it is important to search natural molecules able to inhibiting the progress of fungal diseases in an environmental friendly practice. Among the soybean molecules which could be used for this purpose, the soybean toxin (SBTX) stands out. SBTX is a protein composed of two subunits (17 and 27 kDa) isolated from seeds with in vitro activity against phytopathogenic fungi. The present study aimed to verify the SBTX tissue localization in soybean seed cotyledons, as well as to evaluate the gene expression profile of two SBTX subunits, both in different stages of plant development and in response to treatment with plant defense elicitors. Soybean seeds were grown in a greenhouse and plant tissues harvested at different days. In addition, soybean primary leaves were treated with salicylic acid (SA) or inoculated with the Cercospora kikuchiii (CK) spores and harvested at different times after the treatments. Based on the N-terminal sequences of the SBTX subunits, primers were designed and their gene expression evaluated by quantitative real-time PCR technique. SBTX tissue localization was performed by immunohistochemistry using anti-SBTX. Transcripts for both SBTX subunits were detected in all plant tissues, predominantly in cotyledons and unifoliate leaves in the early stages of their development, as well as in mature seeds. SBTX was found in the epidermis of the cotyledons. Transcripts were detected for both genes SBTX17 e SBTX27 in all tissues collected, but their expression levels were different. The highest transcript levels for both SBTX subunits were found in mature seeds, cotyledons and unifoliate leaves. In cotyledons, SBTX was found in the epidermis. Leaves treated with elicitors showed induction of the corresponding 17 and 27 kDa subunit transcripts, however this response was earlier in the CK treatment (from 6 h) compared to AS treatment (from 12 h). In almost all analyses, the highest transcript levels were found for the 27 kDa subunit. The ubiquitous and constitutive gene expression during plant development, the induction of gene expression by defense response elicitors and the localization on the surface of cotyledons support the role of SBTX in plant defense and its use to produce fungal-resistant transgenic soybean plants. / O Brasil é o segundo maior produtor mundial de soja, destacando-se por sua multiplicidade de uso. Entretanto, perdas na produtividade de seus grãos em campo são ainda consideráveis, particularmente oriundas das doenças causadas por fungos. Diante desse obstáculo, emerge a necessidade de busca de moléculas naturais capazes de inibir o progresso dessas doenças, sem causar impactos ambientais. Dentre as moléculas presentes na soja, com potencial de uso para essa finalidade, destaca-se a toxina da soja (SBTX), uma proteína isolada de sementes, composta por duas subunidades (17 e 27 kDa) e ativa contra fungos fitopatogênicos. Esse trabalho teve como objetivos verificar a localização tecidual da SBTX em cotilédones de sementes maduras, bem como avaliar seu perfil de expressão gênica ao longo do desenvolvimento da soja e, também, em resposta ao tratamento com elicitores de defesa vegetal. Sementes de soja foram cultivadas em casa de vegetação e, ao longo do desenvolvimento da planta, diferentes tecidos vegetais coletados. Em adição, folhas primárias da soja foram tratadas com ácido salicílico (AS) ou inoculadas com esporos do fungo Cercospora kikuchii (CK) e coletadas em diferentes tempos após os tratamentos. Iniciadores foram desenhados com base nas sequências NH2-terminal das subunidades de SBTX e a expressão gênica foi avaliada pela técnica de RT-PCR quantitativa. A localização de SBTX em sementes foi avaliada por imunohistoquímica, usando anti-SBTX. Transcritos dos genes SBTX17 e SBTX27 foram detectados em todos os tecidos vegetais coletados, porém seus níveis de expressão foram diferenciados. Níveis mais elevados de transcritos para ambas as subunidades da SBTX foram detectados em sementes maduras, cotilédones e folhas unifoliadas. Nos cotilédones, SBTX foi encontrada na epiderme. Indução da expressão de transcritos da SBTX ocorreu em ambos os tratamentos, porém essa resposta se manifestou mais rápida (a partir de 6 h) com CK ao invés de AS (a partir de 12 h). Praticamente, em todas as análises, transcritos do gene SBTX27 prevaleceram em relação àqueles do SBTX17. A presença constitutiva e ubíqua de transcritos dos genes da SBTX ao longo do desenvolvimento da planta, a indução da expressão desses genes por elicitores de resposta de defesa e a localização da toxina na superfície dos cotilédones validam o papel de defesa atribuído a SBTX, suscitando a possibilidade de uso dessa proteína na produção de soja resistente ao ataque de fungos de relevância agronômica.