Orientador: José Antônio Dell'Aqua Júnior / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Rubens Paes de Arruda / Banca: André Maciel Crespilho / Resumo: Os equinos e asininos pertencem à família Equidae e género Equus, por este motivo são considerados similares e tratados de forma equivalente em relação à fisiologia reprodutiva. A membrana plasmática do espermatozoide funciona como uma barreira física ao ambiente externo e a sua integridade estrutural está diretamente relacionada ao tipo e quantidade de lipídios que a compõem. Desta forma, este estudo teve como objetivos comparar perfil lipídico dos espermatozoides de jumentos e cavalos e comparar o perfil lipídico da membrana dos espermatozoides de jumentos antes e após os processos de criopreservação. No Experimento 1 comparamos o perfil lipídico da membrana espermática de jumentos e cavalos e foram identificados 101 íons lipídicos em cavalos e 105 em jumentos. Os asininos apresentaram maior abundância relativa em 18 íons. No Experimento 2 foram avaliadas as alterações do perfil lipídico da membrana espermática de jumentos durante o processo de criopreservação e observou-se perda de 14 íons lipídicos e 16 novos íons surgiram após os processos de criopreservação. De acordo com os resultados obtidos podemos concluir que a composição lipídica da membrana do espermatozoide de jumentos é diferente de cavalos e os processos de criopreservação levam a alterações na composição de fosfolipídeos da membrana plasmática de espermatozoides de jumentos / Abstract: The horses and donkeys belong to the Equidae family and genus Equus, for this reason are considered similar and treated equivalently with respect to reproductive physiology. The plasma membrane of the sperm works as a physical barrier to the external environment and its structural integrity is directly related to the type and quantity of lipids that comprise it. Thus, this study aimed to compare the lipid profile of sperm donkeys and horses and compare the lipid membrane of the donkey sperm before and after cryopreservation processes. In Experiment 1 compared the lipid profile of the donkeys and horses sperm membrane and 101 lipid ions were identified in horses and 105 donkeys in. The donkeys had higher relative abundance in 18 ions. In Experiment 2 were evaluated changes in the lipid profile of the donkeys sperm membrane during the cryopreservation process and there was loss of 14 lipid ions and 16 new lipid ions arose after the cryopreservation processes. According to the obtained results we can conclude that the lipid composition of donkey sperm membrane is different from horses and cryopreservation processes lead to changes in the phospholipid composition of the plasma membrane of sperm donkeys / Doutor

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Flávia Maria de Souza Carvalho / Banca: Marisa Narciso Fernandes / Banca: Luiz Roberto Furlan / Resumo: Quando as células de um organismo são expostas a um estressor, elas respondem sintetizando um grupo de proteínas denominadas proteínas de choque térmico (heat shock proteins - hsp), agrupadas em quatro famílias: hsp-90, hsp-70, hsp-60 e pequenas hsp's, sendo a família das hsp-70 a mais conservada e filogeneticamente ubíqua, e que tem sido considerada indicador molecular da resposta de estresse. O objetivo deste estudo foi caracterizar as respostas fisiológicas e moleculares de pacus (Piaractus mesopotamicus) submetidos à elevação exógena do cortisol, utilizando a expressão do gene da hsp-70 como ferramenta de determinação da resposta molecular. Um total de 104 peixes (67,5±11,7 g) recebeu implantes intraperitoniais de manteiga de cacau contendo 0, 50 e 100 μg cortisol /g de peso vivo, e foi amostrado 1, 3, 6 e 24 horas após o implante, para determinação das concentrações séricas de cortisol, sódio e potássio e plasmáticas de glicose e cloreto. Um grupo foi amostrado antes do implante (grupo basal). Para a expressão gênica foram analisados o grupo basal e o injetado com 50 μg cortisol/g. O cortisol circulante aumentou a partir de 1 hora após o implante dos péletes contendo cortisol e se manteve alto até 24 horas depois. A resposta da glicose circulante acompanhou as elevações do cortisol no sangue, confirmando sua ação gliconeogênica, porém houve ausência de respostas nos indicadores iônicos. A expressão do gene hsp70 do pacu mostrou leve aumento 3 e 6 horas após o implante, mas foi mais expressiva 24 horas depois, indicando a possibilidade do uso da expressão gênica da hsp70 como marcador de elevação dos níveis de cortisol e da resposta de estresse / Abstract: When the cells of an organism are exposed to a stressor, they respond by synthesizing a group of proteins called heat shock proteins (hsp), which are grouped into four families: Hsp-90, Hsp-70, Hsp-60 and small hsp's, where the family of Hsp-70 is the most conserved and phylogenetically ubiquitous, and has been considered an indicator of molecular stress response. The aim of this study was to characterize the molecular and physiological responses of pacu (Piaractus mesopotamicus) to elevation exogenous cortisol, using gene expression of hsp-70 as a tool for determining the molecular response. A total of 104 fish (67.5 ± 11.7 g) received intraperitoneal implants of cocoa butter containing 0, 50 and 100 mg cortisol / g of live weight and were sampled 1, 3, 6 and 24 hours after implantation for determination of serum cortisol, sodium and potassium and plasma glucose and chloride. One group was sampled before implantation (baseline group). For gene expression were analyzed the baseline group and the injected with 50 mg cortisol / g. The cortisol increased from 1 hour after implantation of pellets containing cortisol and remained high until 24 hours later. The response of circulating glucose followed elevations of cortisol in the blood, confirming gluconeogenic action, but there were no responses in ion indicators. The expression of the hsp70 gene showed slight increase 3 and 6 hours after implantation, but was more pronounced after 24 hours, indicating the possibility of using gene expression of hsp70 as a marker of increased levels of cortisol and stress response / Mestre

Orientador: José Antônio Dell'Aqua / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Lucilene Delazari dos Anjos / Resumo: A sexagem de espermatozoides, para a obtenção de doses de sêmen com alta percentagem de gametas portadores do cromossomo X ou Y, torna ainda mais relevante o papel da inseminação artificial na maximização do progresso genético entre gerações, na produtividade e retorno econômico em algumas atividades pecuárias, na reprodução assistida em mamíferos e no aconselhamento genético da espécie humana. Várias são as técnicas descritas na tentativa de separar os espermatozoides por sexo, porém todas ainda estão em processo de adequação e nenhuma oferece 100% de acuidade. Baseando-se na hipótese que durante o processo de espermatogênese existem proteínas que se expressam diferentemente na membrana de espermatozoides portadores do cromossomo X ou Y, a técnica por separação utilizando anticorpos sexo-específicos vem sendo bastante estudada. Dessa forma este trabalho objetivou em estudar as proteínas de membrana expressas nos espermatozoides sexados e não sexados / Abstract: The sexing of sperm, to obtain doses of semen with a high percentage of gametes carrying the X or Y chromosome, even more relevant the role of artificial insemination in maximizing the genetic progress between generations, productivity and economic returns in some farming activities; in assisted reproduction in mammals, and in genetic counseling of the human species. Several techniques are described in an attempt to separate the sperm by sex, but all are still in process and no fitness offers 100% accuracy. Based on the hypothesis that during the process of spermatogenesis there are proteins that are differently expressed in the sperm membrane carrying the X or Y chromosome the separation technique using sex-specific antibodies have been extensively studied. Thus this work aimed to study membrane proteins expressed in sexed sperm and not sexed / Mestre

Orientador: Manoel Victor Franco Lemos / Coorientador: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Lúcia Maria Carareto Alves / Banca: Fernando Hercos Valicente / Resumo: Bioinseticidas a base de Bacillus thuringiensis são utilizados há décadas no controle de Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae) em plantios de eucalipto no Brasil. No entanto, não há relatos de quais genes cry são eficientes para o controle desta praga. Neste sentido, 74 isolados de B. thuringiensis foram caracterizados por PCR para a detecção dos genes cry1, cry1Ab e cry1Ac e sua eficiência no controle de T. arnobia verificada por bioensaios. Os isolados Br9, Br69 Br74, Br81 e R26 apresentaram elevada mortalidade e sua CL50 foi determinada. Os genes cry1Ab e cry1Ac ocorreram isoladamente em 16% e 45% dos isolados, respectivamente, quando presentes em conjunto o controle das lagartas foi superior a 50%, e os valores de CL50 foram os mais elevados. Ambos os genes ocorreram em 11% dos isolados, os níveis de controle foram superiores a 80% e a CL50 era mais baixa, o que sugere que sua presença em conjunto confere maior toxicidade. É evidente que mais estudos em relação à detecção dos genes presentes em isolados de B. thuringiensis e sua contribuição no controle para T. arnobia são fundamentais para esclarecer quais genes conferem maior toxicidade e como eles atuam isoladamente ou em conjunto no controle dessas lagartas, visando a construção de plantas geneticamente modificadas, formulação de bioinseticidas ou desenvolvimento de programas de manejo de resistência destes insetos para a cultura do eucalipto no Brasil / Abstract: Biopesticides based on Bacillus thuringiensis have been used for decades to control Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae) in eucalyptus plantations in Brazil. However, there are no reports of which cry genes are efficient to control this insect pest. In this study, 74 strains of B. thuringiensis were characterized by PCR for detection of cry1, cry1Ab and cry1Ac genes and its efficiency in controlling T. arnobia was verified by bioassays. The strains Br9, Br69, Br74, Br81 and R26 showed the highest mortality rates and their LC50 was determined. The cry1Ab and cry1Ac genes occurred separately in 16% and 45% of the isolates, respectively, and when present together the larvae control was above 50%, and the LC50 values were the highest. Both genes occured in 11% of the isolates, the control levels exceeded 80% and the LC50 was lower, suggesting that their presence together confers higher toxicity. It became evident that further studies regarding the detection of the genes present in isolates of B. thuringiensis, and its contribution to control T. arnobia are essential to clarify which genes confer higher toxicity and how they act individually or together to control these caterpillars, aiming the construction of genetically modified plants, biopesticides formulation or development of more effective resistance management programs for these insects for the cultivation of eucalyptus in Brazil / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Coorientador: Alexander Batista Duharte / Banca: Fanny Guzman Quimbayo / Banca: Sandro Antonio Pereira / Banca: Luciana Simon Pereira Crott / Banca: Angela Maria Victoriano Campos Soares / Resumo: A esporotricose é uma infecção subaguda ou crônica que afeta seres humanos e outros mamíferos, causada pelo complexo de espécies Sporothrix schenckii. A doença tem uma distribuição mundial, mas é endêmica no Brasil, principalmente no estado do Rio de Janeiro, onde o gato tem se tornado o principal agente transmissor. O tratamento antifúngico convencional é demorado e está associado a efeitos adversos, apontando a necessidade de terapias mais eficazes e seguras, sendo a vacinação profilática ou terapêutica provavelmente a alternativa mais promissora. Neste estudo foi avaliada a imunogenicidade e a toxicidade de candidatos vacinais à base de proteínas da superfície celular (PSCs) de S. schenckii stricto sensu. As PSCs isoladas com o agente redutor Ditiotreitol foram caracterizadas por eletroforese, espectrometria de massas e pelo programa preditor de adesinas FungalRV. As PCSs foram formuladas com dois adjuvantes, hidróxido de alumínio (HA) ou Gel PetA, em duas concentrações ou usadas isoladamente. As formulações resultantes (PSC10, PSC100, HA+PSC10, HA+PSC100, PetA+PSC10 e PetA+PSC100) foram administradas em duas doses pela via subcutânea em camundongos Balb/C com intervalo de 2 semanas. O soro obtido de cada grupo sete dias após a segunda dose foi usado para analisar a imunogenicidade de cada formulação. O soro de todos os grupos vacinados, exceto os grupos PSC10 e HA+PSC10, reagiram com uma banda de 47 kDa, previamente identificada como a enzima glicolítica enolase e predita como uma adesina pela base dados FungalRV. Posteriormente foi demonstrada por citometria de fluxo a presença dessa proteína na parede celular de S. schenckii, sugerindo o papel imunogênico da mesma. A indução das imunoglobulinas IgG e IgG2a foi significativamente maior com HA+PSC100 e Pet+PSC100 em relação a PSC10, PSC100, HA+PSC10 e PetA+PSC10. A indução... / Abstract: Sporotrichosis is a subacute or chronic infection affecting humans and other mammals, caused by the Sporothrix schenckii species complex. The disease has a worldwide distribution, but is considered endemic in Brazil, mainly in the state of Rio de Janeiro, where the cat has become the main transmitting agent. The antifungal treatment is very long and often associated to adverse effects indicating the demand for preventive or more effective and safe therapeutic strategies. One of the more promissory approaches would probably be the prophylactic or therapeutic vaccination. This study evaluated the immunogenicity and toxicity of cell surface protein-based (CSP) vaccine candidates of S. schenckii stricto sensu. The CSPs isolated with dithiotreitol were characterized by electrophoresis, mass spectrometry and FungalRV adhesin predictor. The CSPs were formulated with two adjuvants, aluminum hydroxide (AH) or gel PetA, or used alone, in two concentrations. The obtained formulations (CSP10, CSP100, AH+CSP10, AH+CSP100, PetA+ CSP10 and PetA+ CSP100) were administered to Balb/C mice in two subcutaneous doses at 2 weeks interval. The serum obtained from each group 7 days after the second dose was used to analyze the immunogenicity of each formulation. All the serum obtained from vaccinated groups, except those from CSP10 and AH+CSP10 groups, reacted with a 47 kDa band, previously identified as the glycolytic enolase enzyme and predicted as an adhesin in the FungalRV program. Subsequently, we demonstrated the presence this protein in the cell wall of S. schenckii, suggesting its immunogenic role. The induction of IgG and IgG2a immunoglobulins was significantly higher with AH+CSP100 and PetA+CSP100 formulations with respect to CSP10, CSP100, AH+CSP10, and PetA+CSP10. The significant induction of IgG1 and IgG2a subtypes and IL-12, IFN-γ, IL4 and IL-17 by AH+CSP100, suggests a balance ... / Doutor

Orientador: Izabelle Auxiliadora Molina de Almeida Teixeira / Banca: Gilberto Vilmar Kozloski / Banca: Luciano Hauschild / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a mobilização de nutrientes em cabras com diferentes tipos e estágios de gestação. Foram utilizadas 44 cabras das raças Saanen (Sa) e Alpina (Al). Destas, oito (quatro Sa e quatro Al) foram abatidas no início do experimento para representar a composição corporal de cabras não gestantes para ser aplicada a técnica do abate comparativo. O restante das cabras de cada raça e tipo de gestação (simples e gemelar) foram sorteadas de acordo com a idade gestacional (80, 110 e 140 dias de gestação) em que seriam abatidas. O procedimento de abate envolveu a separação do corpo vazio, glândula mamária, útero com membranas e fluídos fetais e feto (s). Nas fêmeas sorteadas para abate aos 140 dias de gestação foi realizada a colheita de sangue para análise de metabólicos e hormônios a cada 15 dias. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado, em um arranjo fatorial 2 x 3 x 2, envolvendo os fatores: raças (2), tempo de gestação (3) e número de fetos (2). A taxa de retenção relativa diária de nutrientes (TRN) no corpo do animal ainda foi positiva aos 110 dias de gestação, entretanto, aos 140 dias (-0,18±0,25 gMS/kgPCVL/d), não diferiu (P<0,05) entre raças e nº. de fetos. A TRN nos fetos foi maior (P<0,05) aos 140 dias, enquanto as taxas de retenção (TR) de matéria seca (MS) e proteína não diferiram entre raças, número de fetos e tempo de gestação. A mobilização de nutrientes corporais ocorreu após os 110 dias de gestação e não foi influenciada pela raça ou nº. de fetos. O crescimento fetal em gestações gemelares foi 66% maior que em gestações simples. As cabras precisam de um aporte nutricional maior no terço final da gestação independentemente da raça e tipo de gestação / Abstract: The aim of this study was to evaluate the mobilization of nutrients in goats with different types and stages of pregnancy. It was used 44 of Saanen goats (Sa) and Alpine (Al). Of these, eight (four Sa and four Al) were slaughtered at the beginning of the experiment to represent the body composition of nonpregnant goats to be applied to comparative slaughter technique. The remaining of the goats of each breed and type of pregnancy (single and twin) were selected according to gestational age (80, 110 and 140 days gestation) that were slaughtered. The slaughter procedure involved the separation of the empty body, mammary gland, uterus with fluid and fetal membranes and fetus (s). In females randomly selected for slaughter at 140 days of pregnancy, the blood sample for analysis of metabolites and hormones every 15 days. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement 2 x 3 x 2, involving the following factors: breed (2), gestational age (3) and number of fetuses (2). The retention rate relative daily of nutrients (TRN) in the body of the animal was still positive at 110 days of gestation, however, at 140 days (-0.18 ± 0.25 gDM / kgPCVL / d) did not differ (P <0 05) between breeds and nº. fetuses. NRT in the fetuses was higher (P <0.05) at 140 days, while retention rates (TR) of dry matter (DM) and protein did not differ between breeds, number of fetuses and gestational age. The mobilization of body nutrients occurred after 110 days of gestation and was not influenced by breed or nº. fetuses. Fetal growth in twin pregnancies was 66% higher than in single pregnancies. Goats need a higher nutrient intake in the final third of pregnancy regardless of breed and type of pregnancy / Mestre

Orientador: Roberto de Oliveira Roça / Coorientador: Paulo Roberto Rodrigues Ramos / Banca: Noeme Souza Rocha / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Ana Maria Lopes / Banca: Marice Thereza Correa Domingues / Resumo: Cada vez mais vemos o crescimento da exigência do consumidor para alimentos cárneos, principalmente as que se referem a características como maciez, a suculência e o odor, que estão diretamente ligadas a constituição proteica do produto, juntamente com os lipídeos e os carboidratos. No atual panorama do consumo de produtos cárneos no Brasil, os produtos de origem avícola apresentam significativo aumento, e a elaboração de produtos derivados tem acompanhado este avanço. Neste sentido, identificar se existe misturas cárneas indevidas nos subprodutos é de vital importância. Para a avaliar a qualidade destes, a avaliação da origem e da qualidade das proteínas musculares é um fator de grande importância, assim como a avaliação das perdas proteicas ocorridas no processo de rigor mortis. As principais técnicas para quantificação das proteínas são as eletroforéticas e densitométricas. Para avaliação de suas perdas, pode ser utilizado ainda, a técnica de histologia dos tecidos musculares. Para realização deste trabalho, partiu-se de que as proteínas musculares de frangos e perus apresentam diferentes características estruturais devido à expressão gênica e suas estruturas primárias podem ser identificadas mesmo em misturas, por técnicas eletroforéticas e, através da densitometria, quantificadas. Foram colhidos fragmentos de músculo peitoral de aves de cada espécie abatidas em laboratórios, para além da avaliação da mistura de extratos proteicos, realizar a avaliação das perdas proteicas ocorridas durante a resolução do rigor mortis. Os fragmentos obtidos foram avaliados em técnicas histológicas e eletroforéticas, tendo sido coletados em tempos correntes de 0, 30, 60, 90, 120 e 150 minutos após o abate. Ainda foi realizada a extração com outra parte dos mesmos fragmentos por maceração e centrifugação, e posterior mistura de extratos na proporção 80, 60, 40 e 20%, para posterior submissão a... / Abstract: We see the growing consumer demand for meat foods, particularly those relating to features such as tenderness, juiciness and odor, which are directly related to the constitution of the protein product, together with the lipids and carbohydrates. In the current panorama of consumption of meat products in Brazil, the poultry origin show a significant increase, and the development of derivatives has followed this advance. In this sense, identify whether there is undue meats mixtures of by-products is vitally important. To assess the quality of the assessment of the origin and quality of muscle proteins is a major factor as well as the evaluation of protein losses during rigor mortis process. The main techniques for protein quantification are electrophoretic and densitometric. To evaluate the protein losses can still be used the histology of muscle tissues technique. For this work, he left that the muscle proteins of chickens and turkeys have different structural characteristics due to gene expression and their primary structures can be identified even in mixtures, by electrophoretic techniques, and through densitometry quantified. Pectoral muscle fragments poultry slaughtered were collected in the laboratory, in addition to the evaluation of protein extracts mixing, accomplish the evaluation of the loss occurred during the resolution of rigor mortis. The fragments obtained were evaluated for histological and electrophoretic technique, currents being collected at times 0, 30, 60, 90, 120 and 150 minutes after the slaughter. Protein extraction with another of the same fragments by maceration and centrifugation, and subsequent mixture of extracts in the proportion 80, 60, 40 and 20% yet been performed for later submission to IEF technique on Phast-Gel. The results showed that the protein loss in the resolution of rigor mortis were not significant, even with the total transformation of the tissue at post mortem. Furthermore, the protein mixtures... / Doutor

Orientador: Mauro Dal Secco de Oliveira / Banca: Jane Maria Bertocco Ezequiel / Banca: Paulo de Figueiredo Vieira / Banca: Alice Deléo Rodrigues / Banca: Selma de Fátima Grossi / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de dietas contendo diferentes fontes protéicas, sobre o consumo de nutrientes, produção e composição química do leite e parâmetros sanguíneos de vacas da raça Holandesa. O trabalho foi desenvolvido no setor de bovinocultura de leite da FCAV/UNESP, Campus de Jaboticabal. Foram avaliadas 05 vacas da raça Holandesa, pesando em média de 560 kg, alocadas conforme a ordem de parição, dias de lactação e nível de produção em quadrado latino 5 x 5. As vacas receberam rações que constituíram os seguintes tratamentos: T1 = silagem de milho (SM) + concentrado comercial 20,85% PB + mistura mineral (M); T2 = SM+ farelo de soja + milho (Mi) +M; T3= SM+ farelo de algodão + Mi + M; T4 = SM + farelo de amendoim + Mi + M e T5= SM + torta de sementes de seringueira + Mi + uréia + M. Avaliou-se o consumo de matéria seca (CMS), proteína (CPB), extrato etéreo (CEE), fibra em detergente neutro (CFDN), fibra em detergente ácido (CFDA) e matéria mineral (CMM) das diferentes dietas. Utilizou-se a SM como volumoso e concentrados contendo em média 21,85% de proteína bruta, e mistura mineral. Determinou-se a produção diária de leite e a produção corrigida a 3,5% de gordura. Foram obtidos os teores de gordura, proteína, lactose e calculados os teores de sólidos totais e de extrato seco desengordurado. Foram determinados os parâmetros sanguíneos além da eficiência de produção das vacas. O consumo de fibra em detergente ácido foi maior (P<0,01) para as vacas que receberam as dietas contendo a torta de sementes de seringueira. As médias (kg/vaca/dia) de consumo de CMS, CPB, CEE, CFDN, CFDA e CMM foram, respectivamente, de 18,06, 4,66, 2,02, 27,30, 12,53 e 2,37. Houve semelhança (P>0,05) nas médias de produção diária de leite, cujas médias (kg/dia/vaca) foram de 21,79; 22,87; 23,00; 21,43 e 21,43 nos tratamentos... / Abstract: The objective of this study was to evaluate the effect of diets with different protein sources on nutrient intake, production and chemical composition of milk and blood parameters of Holstein cows. This study was conducted in dairy cattle sector of FCAV / UNESP, Jaboticabal. Were evaluated 05 Holstein cows, weighing on average 560 kg, allocated according to calving order, days of lactation and level of production in Latin Square 5 x 5. The cows received rations were the following treatments: T1 = silage maize (SM) + commercial concentrated 20.85% CP + mineral mixture (M); T2 = SM + soybean meal + maize (Mi) + M; T3 = SM + cottonseed meal + Mi + M; T4 = SM + peanut meal + Mi + M and T5 = SM + rubber seeds cake + Mi + urea + M. Evaluated the dry matter intake (DMI), protein (CP), ether extract (EE), neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF) and mineral matter (CMM) of the different diets. We used the SM as roughage and concentrates containing an average of 21.85% crude protein and mineral mixture. It was determined daily milk production and adjusted to 3.5% fat. the fat content was obtained, protein, lactose and calculated the total solids and nonfat dry extract. Blood parameters were determined besides cows production efficiency. fiber consumption acid detergent was higher (P <0.01) for cows fed diets containing the rubber seeds cake. Mean (kg / cow / day) CMS consumption, CPB, EEC, NDF, CADF and CMM were respectively 18.06, 4.66, 2.02, 27.30, 12.53 and 2, 37. There were similar (P> 0.05) in mean daily milk production, whose average (kg / cow / day) were 21.79; 22.87; 23,00; 21.43 and 21.43 in T1, T2, T3, T4 and T5, respectively. The chemical composition of milk from cows subjected to the different treatments was similar, as well as the production efficiency (P> 0.05). In relation to the blood parameters, the levels of glucose, AST and GGT showed no statistical difference ... / Doutor

Orientador: Dalton José Carneiro / Banca: Carlo Rossi Del Carratore / Banca: Luiz Edivaldo Pezzato / Resumo: O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de determinar os 5 coeficientes de digestibilidade aparente da proteína e da energia dos principais 6 alimentos utilizados na formulação de dietas para alevinos de pintado. Para isso, foram 7 utilizados 600 alevinos com peso médio inicial de 9,80 ± 1,48g e comprimento total 8 médio de 13,00 ± 1,00 cm. Na coleta de fezes, foi utilizado o sistema de Guelph 9 modificado. As 12 dietas-teste foram constituídas por 69,50% de uma dieta de 10 referência, 0,50% de óxido de cromo (marcador inerte) e, 30% do ingrediente estudado. 11 Após receberem as dietas teste durante três dias, os peixes eram transferidos para os 12 aquários de coleta (incubadoras de fibra de vidro de 80 litros de capacidade), onde as 13 fezes foram coletadas em intervalos de meia hora. Com base nos coeficientes de 14 digestibilidade da fração protéica, os alimentos que apresentaram maior aproveitamento 15 para esse nutriente foram: farinha de peixe (84,14%), farelo de soja (67,10%), milho 16 (64,18%) e farinha de vísceras de aves (61,25%). Foram observados valores somente 17 razoáveis para a digestibilidade do conteúdo energético em metade dos ingredientes 18 estudados; para as farinhas de peixe, milho, soja integral tostada e os farelos de soja, de 19 trigo e de arroz, os coeficientes médios foram: 72,80%, 57,39%, 64,95%, 61,66%, 20 53,20% e 51,84%, respectivamente. A farinha de peixe foi o melhor ingrediente para o 21 pintado (45,38% PD e 2790,42 Kcal ED/Kg), seguido do farelo de soja (30,86% PD e 22 2708,45 Kcal ED/Kg), da soja integral tostada (18,34% PD e 3121,06 Kcal ED/Kg), do 23 milho (5,86% PD e 2691,53 Kcal ED/Kg), e do farelo de trigo (8,08% PD e 2265,13 Kcal ED/Kg) / Abstract: The present work was developed in order to determine the protein and energy 4 apparent digestibility coefficients of the principal's ingredients used in pintado juvenile 5 formulation. 600 juveniles with initial weight and total length means of 9.80 ± 1.48g 6 and 13.00 ± 1.00 cm respectively were used. The modified Guelph system was 7 appraised to collect feces. All the twelve test diets were constituted of 69.50% of the 8 reference diet, 0.50% of chromium oxide used as inert marker, and 30% of the 9 ingredient tested. After three days of feeding with the test diets, fish were transferred to 10 the collect aquariums, where feces were collected in intervals of 30 minutes. Using 11 digestibility of the protein, ingredients with best results in this nutrient were fish meal 12 (84.14%), soybean meal (67.10%), corn (64.18%) and chicken poultry by-product 13 (61.25%). Was only observed reasonable values for energy digestibility in half of the 14 ingredients tested; for fish meal, corn, soybean (whole, toasted) and soybean meal of 15 wheat and rice, the means coefficients values were: 72.80%, 57.39%, 64.95%, 61.66%, 16 53.20% e 51.84%, respectively. Fish meal was the best ingredient available for pintado 17 juveniles diet formulation (45.38%DP and 2790.42 Kcal DE/Kg), followed by soybean 18 meal (30.86%DP and 2708.45 Kcal DE/Kg), soybean (whole, toasted) (18.34%DP and 19 3121.06 Kcal DE/Kg), corn (5.86%DP and 2691.53 Kcal DE/Kg), and wheat meal 20 (8.08%DP and 2265.13 Kcal DE/Kg) / Mestre

Orientador: Wellerson Rodrigo Scarano / Resumo: The mono-n-butyl phthalate (MBP) is the active metabolite of di-n-butyl phthalate (DBP), a plasticizer commonly used for industrial products, including medical devices, flexible plastics and cosmetics, has been described as an endocrine disruptor with estrogenic and anti-androgenic function, depending on the dose and the exposure period, particularly by interfering with the development of the male reproductive system. It is believed that some of the effects of endocrine disruptors are mediated by the non-classical estrogen G protein-coupled receptor - GPER1 (GPR30). In view of the worldwide problems regarding to degradation of plastics and their dispersion in the environment, and earlier evidences showed that phthalates have effects on the development and maturation of the prostate increasing the incidence of inflammatory and dysplastic lesions in rodents, this study aimed to evaluate the effect of MBP on androgen dependent prostate cancer cells (LNCaP) by modulating the activity of GPER1 (through its antagonist, G15). The LNCaP cells, maintained in RPMI culture, were expanded and treated in an incubator with 5% CO2 humid atmosphere at 37 ° C. The MBP dose to be used was 10 uM, selected from the following MTT cytotoxicity test (3- [4.5-dimethylthiazol-2yl] -2,5-diphenyl tetrazolina bromide). Thus were established the following treatment protocols: control: RPMI + 0.03% DMSO; MBP: 10 uM of MBP diluted in DMSO (0.03%) + RPMI; G15: 8 uM of G15 diluted in DMSO (0.03%) + RPMI; M+G... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: O mono-n-butil-ftalato (MBP), metabólito ativo do di-n-butil-ftalato (DBP), plastificante usualmente utilizado em produtos industrializados, incluindo dispositivos médicos, plásticos flexíveis e cosméticos, tem sido descrito como um desregulador endócrino com função estrogênica e anti-androgênica dependendo da dose e do período de exposição, interferindo principalmente com o desenvolvimento do sistema genital masculino. Acredita-se que os efeitos de alguns desreguladores endócrinos sejam mediados pelo receptor estrogênico não clássico acoplado à proteína G - GPER1 (GPR30). Tendo em vista a problemática mundial com relação à degradação dos materiais plásticos e sua dispersão no meio ambiente e diante de evidências que mostraram que os ftalatos exercem efeitos sobre o desenvolvimento e maturação da próstata aumentando a incidência de lesões inflamatórias e displásicas em roedores, este estudo teve por objetivo avaliar a ação do MBP sobre células cancerígenas prostáticas dependentes de andrógeno (LNCaP), modulando a atividade do GPER1 (através de seu antagonista, G15). As células da linhagem LNCaP, mantidas em meio de cultura RPMI, foram expandidas e tratadas em estufa com 5% de CO2 e atmosfera úmida a 37ºC. A dose de MBP a ser utilizada foi de 10 µM, selecionada após o teste de citotoxicidade do MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2yl]-2,5-difenil brometo de tetrazolina). Dessa forma foram constituídos os seguintes protocolos de tratamento: Controle: RPMI + DMSO 0,03%; MBP: 10 µM de M... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre