Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-07Bitstream added on 2014-06-13T19:53:55Z : No. of bitstreams: 1 nunes_av_me_botib.pdf: 662812 bytes, checksum: e1faf5a1bccf83ade3dc24706edbc278 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / As proteínas desacopladoras pertencem à família de carreadores aniônicos mitocondriais. De maneira geral, as proteínas desacopladoras dissipam o gradiente eletroquímico de prótons gerados na respiração na forma de calor, sendo dependentes de ácidos graxos e sensíveis aos nucleotídeos purínicos. O presente estudo visou investigar o comportamento de plantas transgênicas de tabaco que expressam de forma constitutiva o gene AtUCP1, frente aos estresses osmótico e salino, bem como analisar a atividade das regiões promotoras dos genes AtUCP1 e AtUCP2 de Arabidopsis thaliana, em resposta aos estresses osmótico e de baixa temperatura, e ao ácido abscísico. Numa primeira abordagem foram utilizadas sementes selvagens e de duas linhagens transgênicas, germinadas em meio MS adicionados ou não de NaCl e Manitol. O teste de germinação revelou que as linhagens transgênicas apresentam uma maior tolerância aos referidos estresses. Quando o crescimento radicular foi analisado, uma maior inibição foi constatada no controle não transgênico em relação às duas linhagens transgênicas testadas. Adicionalmente, quando submetidas aos estresses, uma maior acumulação de ânion superóxido foi verificada nas folhas de plântulas não transgênicas em relação às plântulas das linhagens transgênicas. Quanto à quantificação de GUS nas plantas transformadas com os promotores dos genes AtUCP1 e AtUCP2, nenhuma alteração significativa foi observada em nenhum dos tratamentos testados / The uncoupling proteins belong to the mitochondrial anion carrier family. In general, the uncoupling proteins dissipate the proton electrochemical gradient generated in respiration as heat, being dependent on fatty acids and sensitive to purine nucleotides. In the present study, we investigated the behavior of transgenic tobacco plants that overexpress the AtUCP1 gene when subjected to osmotic and saline stress, as well as the activity of the promoters of the AtUCP1 and AtUCP2 genes of Arabidopsis thaliana, in response to osmotic and cold stress, and abscisic acid. In the first approach, seeds from wild type and two transgenic lines were germinated in MS medium containing (or not) NaCl and mannitol. The germination test showed that the transgenic lines have a higher stress tolerance. When root growth was analyzed, a greater inhibition was observed in non-transgenic control seedlings as compared to seedlings of the two transgenic lines tested. Additionally, when subjected to stress, a greater superoxide anion accumulation was detected in leaves of non-transgenic seedlings as compared to seedlings of transgenic lines. Quantification of GUS activity in the plants transformed with the tested promoters, revealed no treatmentspecific differences

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-07Bitstream added on 2014-06-13T19:25:31Z : No. of bitstreams: 1 alves_mc_me_jabo.pdf: 784728 bytes, checksum: a9d8c2237ee21059f774f2a73b627b7f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O controle biológico utilizando microrganismos vem sendo estudado como uma alternativa ao uso de agroquímicos. Estes pesticidas poluem o ambiente, além de serem tóxicos a diversas espécies vegetais e animais. Diante disso, a bactéria Bacillus thuringiensis é um importante entomopatógeno que vem sendo utilizado na agricultura pelo fato de secretar proteínas que são tóxicas a insetos pertencentes a diversas ordens. Dentre os diversos genes de B. thuringiensis que codificam proteínas tóxicas, as classes vip1, vip2 e cry3 destacam-se como alternativa para o controle de insetos-praga da ordem Coleoptera. O presente trabalho objetivou a identificação e caracterização molecular, por meio da técnica de PCR-RFLP, dos genes cry3, vip1, vip2 e vip1/vip2 em uma coleção de B. thuringiensis, quanto a possíveis polimorfismos existentes, procurando relacioná-los à toxicidade em larvas de Anthonomus grandis. Da análise de 1078 isolados de B. thuringiensis, foram encontrados 151 isolados positivos para os genes em estudo e 14 perfis polimórficos, indicando a presença de subclasses destes genes. Os resultados obtidos nos ensaios de toxicidade indicam que os polimorfismos gênicos podem apresentar interferência na toxicidade das proteínas, sendo que a toxina Cry3 apresentou uma maior efetividade na mortalidade em larvas de A. grandis. Os resultados também evidenciaram que a PCR-RFLP mostrou-se apropriada para a detecção da variabilidade genética em B. thuringiensis, permitindo a identificação de haplótipos / Biological control using microorganisms is being studied as an alternative to the use of agrochemicals. These pesticides pollute the environment, being toxic to many species of plants and animals. For these reasons, the bacterium Bacillus thuringiensis is an important entomopathogen that has been used in agriculture, once it produces proteins that are toxic to many target insect orders. Among several genes from B. thuringiensis that encode toxic proteins there are vip1, vip2 and cry3 classes that stand as an alternative for controlling insect pests belonging the Coleoptera order. The objective of this work was to identify and characterize molecularly, through PCR-RFLP, the genes cry3, vip1, vip2 and vip1/vip2 in a collection of B. thuringiensis, for possible polymorphisms exist, trying to relate them to the toxicity in Anthonomus grandis larvae. Analysis of 1078 isolates of B. thuringiensis, were found 151 positive isolates for the genes under study and 10 polymorphic profiles, which indicate the presence of subclasses of the genes. These results obtained in tests toxicity indicate that polymorphisms gene may have interference with the toxicity of the protein, and the toxin Cry3 showed a greater effectiveness in mortality in A. grandis larvae. These results also showed that the PCR-RFLP proved to be suitable for the detection of genetic variability in B. thuringiensis, allowing the identification of haplotypes

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-05Bitstream added on 2014-06-13T19:13:03Z : No. of bitstreams: 1 horta_ab_me_jabo.pdf: 129365 bytes, checksum: a43ecf940bba3f7b21533be60728e859 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Bioinseticidas a base de Bacillus thuringiensis são utilizados há décadas no controle de Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae) em plantios de eucalipto no Brasil. No entanto, não há relatos de quais genes cry são eficientes para o controle desta praga. Neste sentido, 74 isolados de B. thuringiensis foram caracterizados por PCR para a detecção dos genes cry1, cry1Ab e cry1Ac e sua eficiência no controle de T. arnobia verificada por bioensaios. Os isolados Br9, Br69 Br74, Br81 e R26 apresentaram elevada mortalidade e sua CL50 foi determinada. Os genes cry1Ab e cry1Ac ocorreram isoladamente em 16% e 45% dos isolados, respectivamente, quando presentes em conjunto o controle das lagartas foi superior a 50%, e os valores de CL50 foram os mais elevados. Ambos os genes ocorreram em 11% dos isolados, os níveis de controle foram superiores a 80% e a CL50 era mais baixa, o que sugere que sua presença em conjunto confere maior toxicidade. É evidente que mais estudos em relação à detecção dos genes presentes em isolados de B. thuringiensis e sua contribuição no controle para T. arnobia são fundamentais para esclarecer quais genes conferem maior toxicidade e como eles atuam isoladamente ou em conjunto no controle dessas lagartas, visando a construção de plantas geneticamente modificadas, formulação de bioinseticidas ou desenvolvimento de programas de manejo de resistência destes insetos para a cultura do eucalipto no Brasil / Biopesticides based on Bacillus thuringiensis have been used for decades to control Thyrinteina arnobia (Stoll, 1782) (Lepidoptera: Geometridae) in eucalyptus plantations in Brazil. However, there are no reports of which cry genes are efficient to control this insect pest. In this study, 74 strains of B. thuringiensis were characterized by PCR for detection of cry1, cry1Ab and cry1Ac genes and its efficiency in controlling T. arnobia was verified by bioassays. The strains Br9, Br69, Br74, Br81 and R26 showed the highest mortality rates and their LC50 was determined. The cry1Ab and cry1Ac genes occurred separately in 16% and 45% of the isolates, respectively, and when present together the larvae control was above 50%, and the LC50 values were the highest. Both genes occured in 11% of the isolates, the control levels exceeded 80% and the LC50 was lower, suggesting that their presence together confers higher toxicity. It became evident that further studies regarding the detection of the genes present in isolates of B. thuringiensis, and its contribution to control T. arnobia are essential to clarify which genes confer higher toxicity and how they act individually or together to control these caterpillars, aiming the construction of genetically modified plants, biopesticides formulation or development of more effective resistance management programs for these insects for the cultivation of eucalyptus in Brazil

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissFAHB.pdf: 1628733 bytes, checksum: fd3eaf59b3ea3ad27f519f1d97d21f33 (MD5) Previous issue date: 2007-11-01 / Financiadora de Estudos e Projetos / Lectins are (glico) proteins of non immune origin able to cause cellular agglutination or precipitation of glicoconjugates. Legume lectin refers to plant lectins that are found exclusively in species of the Leguminosae family. A notable characteristic of legume lectins is that all their proteins share tertiary structure consisting of a jelly-roll motif, which is basically composed by β sheet, but present great variability the quaternary association. This variability is considered responsible for conferring different degrees of stability to the legume lectins. This work presents the isolation and characterization of the camptosemin, a protein of legume lectins family, isolated from seeds of Camptosema ellipticum, a plant that belongs to the Brazilian open pasture. Camptosemin found to be a tetrameric protein, whose protomers exhibits approximately 26 kDa. It was able to agglutinate erythrocyte of all ABO sanguineous types and it was showed high affinity for N-acetylgalactosamin carbohydrate. Spectroscopic assays have demonstrated that camptosemin is an extremely resistant protein against the thermal and chemical unfolding. Through the analysis of the unfolding curves and the refolding assays, a model of two states for the unfolding of the protein was proposed. According to this model, at the equilibrium, only presents native tetramers and unfolded monomers. The obtained values of Tm and are in agreement with the ones described for other lectins. G O H Δ 2 / Lectinas são (glico)proteínas de origem não imune capazes de causar aglutinação celular e/ou precipitação de glicoconjugados. O termo lectina de legume refere-se às lectinas de plantas que são encontradas exclusivamente em exemplares da família Leguminosae. Uma característica notável das lectinas de legumes é que todas as proteínas compartilham estrutura terciária constituída pelo motivo jelly-roll , que é basicamente composto por folhas-β, mas apresentam grande variabilidade nas formas de associação quaternária. Acredita-se que esta variabilidade seja responsável por conferir diferentes graus de estabilidade a estas lectinas. Este trabalho descreve o isolamento e a caracterização da camptosemina, uma proteína da família das lectinas de leguminosas, isolada a partir de sementes de Camptosema ellipticum, uma planta pertencente ao cerrado brasileiro. Camptosemina mostrou-se como uma proteína tetramérica, cujos protômeros apresentam aproximadamente 26 kDa, capaz de hemoaglutinar todos os tipos sanguíneos do sistema ABO e com afinidade de ligação ao carboidrato N-acetilgalactosamina. Ensaios de estabilidade estrutural utilizando técnicas espectroscópicas demonstraram que camptosemina é uma proteína extremamente resistente a desnaturação térmica e química. Através da análise das curvas de desnaturação e dos ensaios de reenovelamento, foi proposto um modelo de dois estados para o processo de desnaturação da proteína, no qual, durante o equilíbrio, só existem tetrâmeros completamente enovelados e monômeros completamente desnaturados. Os valores de Tm e obtidos estão em conformidade com os de outras lectinas, encontrados na literatura. G O H Δ 2

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-24Bitstream added on 2015-05-14T16:58:40Z : No. of bitstreams: 1 000824288.pdf: 663043 bytes, checksum: 0b1ed58726a442bad335307ba7f4269d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / CAPES: 4718/11-9 / CNPq: 47.8769/2010-5 / FAPESP: 10/09516-1

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:49:23Z : No. of bitstreams: 1 000829428_20170301.pdf: 100482 bytes, checksum: 894af24aad4ca7d75f9898581c07f398 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-03T11:01:31Z: 000829428_20170301.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-03T11:02:40Z : No. of bitstreams: 1 000829428.pdf: 275587 bytes, checksum: 79098a3390015f4449a4b64413d932a8 (MD5) / Estudos que visam a interação das proteínas Cry de Bacillus thuringiensis, a fim de encontrar combinações adequadas para o desenvolvimento de plantas Bt são ferramentais fundamentais no controle de lepidópteros-praga. A lagarta H. armigera causa danos severos nas culturas agrícolas e sua introdução no Brasil levou a busca de formas de controle eficientes e nesse contexto B. thuringiensis pode ser um bom agente de controle. Diante do exposto o presente trabalho objetivou avaliar a toxicidade das proteínas Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac e Cry1Ca de B. thuringiensis à H. armigera, assim como interação dessas proteínas aos receptores do mesêntero do inseto. A toxicidade foi estimada com bioensaios de dose resposta com as proteínas testadas e a interação das proteínas com os receptores foram verificadas em análise de união entre a proteína ativada e marcada com a vesícula da borda em escova da membrana apical das células do intestino (brush border mambrane vesicle- BBMV) do mesêntero larval de H. armigera, e ensaios de competição heteróloga. Dentre as proteínas testadas, a Cry1Ac destacou-se como a mais efetiva, seguida das proteínas Cry1Ab e Cry1Aa. A proteína Cry1Ca não apresentou toxicidade. As proteínas Cry1Aa, Cry1Ab e Cry1Ac se ligaram aos receptores da membrana do intestino médio das lagartas de H. armigera de forma especifica. Os ensaios de competição heteróloga revelaram que as proteínas Cry1Aa, Cry1Ac e Cry1Ab competem entre si pelo mesmo receptor / Studies attempting interaction of Bacillus thuringiensis Cry proteins in order to find combinations for developing Bt plants are fundamental in controlling lepidopteran pests. H. armigera causes severe damage to agricultural crops and their introduction in Brazil has led the search for efficient control and B. thuringiensis may be a good control agent. The aim of this research was to evaluate the toxicity of Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac and Cry1Ca proteins from B. thuringiensis to H. armigera, as well as interaction of these proteins with the receptors present in insect midgut. Toxicity was estimated from the lethal concentration LC50 of the tested proteins and protein interactions with the receptors were found in a binding analysis between activated and biotinylated protein with the midgut brush border vesicle membrane (BBMV) of H. armigera, and heterologous competitive binding assays. Among the tested proteins, Cry1Ac protein was the most toxic, followed by the Cry1Ab and Cry1Aa proteins. The Cry1Ca protein showed no toxicity. The Cry1Aa, Cry1Ab and Cry1Ac proteins showed specific binding to the midgut membrane receptors of H. armigera caterpillars. Heterologous competitive binding assays revealed that Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac compete for a common receptor in the midgut larvae

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:54Z : No. of bitstreams: 1 000833070.pdf: 276509 bytes, checksum: 168d0b0f9090ec30681d2c2cccd8a266 (MD5) / Este experimento analisou os efeitos da administração do meloxicam nas respostas fisiológicas e no desempenho de bovinos na fase inicial do confinamento após serem transportados. Foram utilizados 84 bezerros Angus × Hereford, divididos por peso vivo (PV) no dia -10 do experimento e distribuídos em 21 baias de confinamento. Do d -10 ao d 0, todos os animais receberam uma dieta composta por feno de alfalfa a vontade e 2,4 kg/animal (base MS) de um concentrado a base de milho. No dia 0, todas as baias foram aleatoriamente atribuídas a receberem um dos seguintes tratamentos: 1) transporte por 1.440 km em um caminhão comercial e administração oral de meloxicam (1 mg/kg do PV) no carregamento (d 0), no descarregamento (d 1) e diariamente do d 2 ao d 7 no período inicial de confinamento (MEL; n = 7), 2) transporte e administração do tratamento nos mesmos dias do grupo MEL, porém com lactose monohidratada (1 mg/kg do PV) (TRANS; n = 7), 3) ausência de transporte e administração de lactose monohidratada (1 mg/kg do PV) nos mesmos dias dos tratamentos MEL e TRANS (CON; n = 7). Logo após o descarregamento (d 1), todos os animais dos tratamentos MEL e TRANS retornaram para suas respectivas baias para o período de 21 dias de confinamento, recebendo a mesma dieta oferecida do d -10 ao d 0. Nos dias 0 e 1, os tratamentos foram aplicados através de solução aquosa e administrados via oral, porém dos dias 2 ao 7, os tratamentos foram misturados no concentrado. Para o cálculo de ganho peso diário (GPD) foram utilizados as médias de ... / This experiment evaluated the effects of meloxicam administration on physiological and performance responses of transported cattle during feedlot receiving. Eighty-four Angus × Hereford steers were ranked by BW on d -10, and assigned to 21 dry lot pens. From d -10 to 0, pens were fed Alfalfa-grass hay ad libitum and 2.4 kg/steer daily (DM basis) of a corn-based concentrate. On d 0, pens were randomly assigned to: 1) transport for 1,440 km in a livestock trailer and oral administration of meloxicam (1 mg/kg of BW) at loading (d 0), unloading (d 1), and daily from d 2 to 7 of feedlot receiving (MEL; n = 7), 2) same transportation and treatment schedule of MEL, but oral administration of lactose monohydrate (1 mg/kg of BW) instead of meloxicam (TRANS; n = 7), or 3) no transport and oral administration of lactose monohydrate (1 mg/kg of BW) concurrently with treatment administration to MEL and TRANS (CON; n = 7). Upon arrival (d 1), MEL and TRANS steers returned to their pens for a 21-d feedlot receiving with the same diet offered from d -10 to 0. Treatments were administered to steers via oral drench on d 0 and 1, or mixed daily with the concentrate from d 2 to 7. Full BW was recorded prior to (d -2, -1, and 0) treatment application and at the end of experiment (d 20, 21, and 22) for ADG calculation. Daily DMI was recorded from d 1 to 21. Blood samples were collected on d 0, 1, 3, 5, 7, 10, 14, and 21. During the initial 7 d of feedlot receiving, hay and total DMI were reduced (P ≤ 0.03) in TRANS vs. CON and MEL, similar between CON and MEL (P ≥ 0.26), whereas concentrate DMI did not differ (P = 0.16) among ...

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:39Z : No. of bitstreams: 1 000840788.pdf: 567367 bytes, checksum: 4dc2694e6ca0afa028b23329fad1aa85 (MD5) / A rastreabilidade da cama de aviário na dieta de vacas leiteiras foi realizada pela análise dos isótopos estáveis de carbono (δ13C), nitrogênio (δ15N), oxigênio (δ18O) e deutério (δ2H) no leite e suas frações (gordura, soro do leite, e proteína). Os valores de δ13C e δ15N do leite e suas frações foram maiores nos animais alimentados com a dieta contendo cama de aviário em comparação aos da dieta vegetal, enquanto os valores de δ18O e δ2H foram semelhantes entre os tratamentos. As análises de componentes principais do leite e suas frações proteína e soro permitiram distinguir o grupo alimentado com cama de aviário dos grupos alimentados com a dieta vegetal, sendo os isótopos de δ13C e δ15N os mais representativos. No entanto, a rastreabilidade não foi possível na gordura extraída do leite. Os resultados demonstraram a possibilidade de rastrear a presença da cama de aviário na dieta de bovinos leiteiros pela análise isotópica do leite e suas frações proteína e soro, surgindo como nova ferramenta na fiscalização e controle de qualidade deste alimento / Traceability of poultry litter in dairy cow diet was performed by analysis of stable isotopes of carbon (δ13C), nitrogen (δ15N), oxygen (δ18O) and deuterium (δ2H) in milk and its fractions (fat, whey, and protein). The values of δ13C and δ15N were higher in milk and fractions of animals fed diet containing poultry litter than those fed with vegetable diet, while the values of δ18O and δ2H remained similar. The principal component analysis of milk and fractions (protein and water) differed among the group which diet contained poultry litter from those fed vegetable diet, where the stable isotopes of carbon and nitrogen were more representative. However, by stable isotopes in the fat was not possible to differentiate between treatments. The results demonstrate the capacity to track the presence of poultry litter in dairy cow diet by isotopic analysis of milk and its components (protein and whey), emerging as a new tool in the supervision and quality control of this food

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-31Bitstream added on 2014-08-13T18:00:22Z : No. of bitstreams: 1 000760138.pdf: 1342792 bytes, checksum: 04e3113cab00466cb2ff5442738feb1d (MD5) / Estudos prévios têm demonstrado que baixas concentrações de agentes antineoplásicos como ciclofosfamida e paclitaxel (PAC) modulam positivamente a resposta imune, estimulando linfócitos T e células dendríticas (DCs). Além disso, são capazes de aumentar a imunogenicidade de células de câncer colorretal humano HCT-116, e de induzir a transcrição de genes de proteínas de choque térmico (HSPs). No presente trabalho, tivemos como objetivo avaliar a expressão das HSPs 40, 70 e 90 e comparar o efeito da concentração efetiva mínima (CEM) com a concentração não-tóxica (CNT) de PAC sobre a imunogenicidade das células HCT-116. Células HCT-116 foram tratadas com a CEM ou com a CNT de PAC. Lisados tumorais foram analisados quanto à expressão das HSPs e utilizados para sensibilizar DCs derivadas de monócitos de sangue periférico de indivíduos normais. As DCs foram avaliadas quanto ao seu fenótipo e foram co-cultivadas com linfócitos T alogênicos para a avaliação da capacidade de estimulação desses linfócitos. O tratamento das células tumorais com ambas as concentrações da droga induziu o aumento da expressão de HSP40, enquanto a produção de HSP70 e HSP90 foram aumentadas apenas pela CEM e pela CNT, respectivamente. Observou-se ligeiro, mas não significante aumento da capacidade de indução da resposta alogênica. Houve também uma tendência ao aumento da expressão de CD40 nos grupos HCT, CEM e CNT. É possível que a expressão das HSPs contribua para o aumento de imunogenicidade induzido pelo PAC. A CEM é menos eficiente que a CNT em aumentar a imunogenicidade das células tumorais, mas não prejudica a capacidade das DCs de induzir a resposta alogênica nem seus marcadores fenotípicos de ativação / Colorectal cancer (CRC) is one of the main causes of death worldwide and its conventional treatment is based on surgery, cytotoxic chemotherapy and radiotherapy, or a combination of these therapeutic modalities. The main chemotherapeutic agents for fighting CRC are metrotexate, 5-aza-2-deoxycitidine, taxans and 5-fluorouracil. Usually, their administration is based on maximum tolerable doses, but it has been shown that low concentrations of most of these drugs upregulate the immune system, both enhancing the immune responsiveness and increasing the immunogenicity of tumor cells. These features are associated with translational changes of a couple of genes, among them, there is an increased expression of heat-shock proteins (HSPs). Although the expression of HSPs may represent an adaptive response of tumor cells to the drug-induced damages, there is evidence that some of these proteins are fundamental for antigen processing and presentation by antigen-presenting cells. Then, in the present review we aimed to show that increased expression of HSPs by drug-treated tumor cells may be favorable for the development of an effective immune response, and that this phenomenon should enhance the combinatory schedules of chemotherapy and immunotherapy

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-25Bitstream added on 2014-08-13T18:00:16Z : No. of bitstreams: 1 000763317.pdf: 14480979 bytes, checksum: 6cbb3669a32a4d5b105d1545ff5a4506 (MD5) / BIOprospecTA / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / As aranhas construtoras de teia aérea orbital tornaram-se eficientes produtoras de diferentes tipos de sedas. Essas sedas são caracterizadas pela notável diversidade em sua composição química, estrutura e função, que vai desde a construção da teia orbital até o casulo. A seda produzida pelas aranhas são filamentos proteicos, constituindo uma interessante relação de estrutura-função e propriedades mecânicas, sendo produzida por um conjunto de glândulas abdominais. As fibras produzidas pela glândula ampulada maior são um dos tipos mais importantes de fibras, sendo um material nanoestruturado predominantemente composto por duas proteínas estruturais, espidroína-1 e espidroína-2. Enquanto que as fibras produzidas pela glândula flageliforme são compostas somente por uma proteína, a proteína da seda flageliforme. Apesar do grande interesse pelas propriedades mecânicas da seda das aranhas, visando o seu uso em aplicações biomédicas e biotecnológicas devido as suas propriedades de resistência, elasticidade e biocompatibilidade, pouco se conhece sobre os detalhes das glândulas produtoras de seda e o processo de fiação que ocorre para a produção das fibras. A seda da teia de aranha tem sido extensivamente estudada através de dados oriundos da engenharia genética e da tecnologia do DNA recombinante. No entanto, informações químicas como as modificações pós-traducionais (PTMs) podem ser perdidas, o que pode inviabilizar a manutenção das propriedades mecânicas e fisico-químicas tão características da seda de aranha. Sendo assim, tanto as espidroínas naturais quanto as suas formas recombinantes foram até então, bioquimica e fisicamente, caracterizados como se apresentassem as mesmas (ou similares) propriedades físico-químicas, sem qualquer consideração sobre a existência de PTMs em suas sequências. Por tanto, no presente estudo adotamos a abordagem proteômica bottom-up com a utilização e... / The orb-web spiders became efficient producers of different types of silks. These silks are characterized by diversity in their chemical composition, structure and function, ranging from the construction of the orb-web to the cocoon. Spider web silk proteins (spidroins) have interesting relationships between their 3-D structures and mechanical properties of these protein fibers, which are secreted by specialized abdominal glands. The major ampullate silk fibers, produced by major ampullate gland, are one of the most important types of fibers spun produced by the orb-web spiders of genus Nephila, and are nanostructured composite materials predominantly composed of two structural proteins, designated spidroin-1 and -2. While the fibers produced by the flagelliform gland consist of only a single protein, the flagelliform silk protein. Despite the great interest in the spider silk mechanical properties, targeting its use in biomedical and biotechnological applications due to its properties of strength, elasticity and biocompatibility, the knowledge about the details of the silk-producing glands and the spinning process that occurs for fiber production are limited. The spider silk has been extensively studied using data from genetic engineering and recombinant DNA technology. However, chemical information such as post-translational modifications (PTMs) may be lost, making difficult to explain the mechanical and physico-chemical properties of the spider silks. Thus, both the natural protein and the recombinant spidroins have been biochemically and physically characterized as they would have the same (or similar) physico-chemical properties, without any consideration about the existence of PTMs in their sequences. Therefore, in this study we used a bottom-up proteomic approach combining 2-DE with in-gel protein digestion by different proteolytic enzymes, followed by mass spectrometry analysis (NanoLC-ESI-CID/ETD-MSn) to identify the protein... / BIOprospecTA: 2011/51684-1 / FAPESP: 10/19051-6