Orientador: Valdemiro C. Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de ALimentos / Made available in DSpace on 2018-09-11T20:51:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pacheco_MariaTeresaBertoldo_D.pdf: 5313631 bytes, checksum: ca943de42f07061a1b5d08a738dd9703 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O concentrado protéico utilizado neste trabalho foi obtido a partir de biomassa de levedura desamargada, Saccharomyces carlsbergensis, subproduto da indústria cervejeira, que teve suas células rompidas e tratadas quimicamente para redução do conteúdo de ácido ribonucléico (RNA) e melhoramento das propriedades funcionais e nutricionais. Suspensões com 40% de células (v/v), foram rompidas por atrito mecânico, utilizando-se moinho Dyno-mill com 70% da câmara preenchida com esferas de vidro de 0,6 a 1,0 mm, na velocidade de 2400 rpm, fluxo de alimentação 4,8 L/h e temperatura de 15°C. Uma parte das proteínas liberadas das células foi preciptada no ponto isoelétrico, e outra parte extraída com perclorato de sódio 0,5M (NaCI04) ou com trimetafosfato de sódio 3% (TMFS), obtendo-se concentrados protéicos com 66, 76 e 74% de proteína, respectivamente. A composição aminoacídica apresentou-se quase perfeita em relação ao padrão de referência da FAOIWHO (1985), destacando-se o conteúdo elevado de lisina. A extração com perclorato foi mais eficiente em reduzir o conteúdo de RNA (86%), embora resultando em perda da funcionalidade da proteína, com exceção da formação de espuma. O tratamento com TMFS fosforilou 35% dos resíduos serina e reduziu 76% do RNA. A fosforilação melhorou as propriedades funcionais da proteína, notadamente a capacidade de retenção de água, viscosidade, estabilidade da espuma e ligação dos íons cálcio. A fosforilação também causou um deslocamento do ponto isoelétrico (4,2~3,5), melhorou a funcionalidade na faixa de pH entre 4-6. Ensaios biológicos revelaram que a digestibilidade e NPU foram melhorados nos concentrados, quando comparados às células rompidas da biomassa. O valor nutritivo dos concentrados ficou entre 70-75% do valor da caseína. Não foi diagnosticado efeito tóxico provocado pela ingestão de proteína de levedura extraída com TMFS, com base na avaliação dos índices sé ricos em ratos, os quais permaneceram dentro da faixa de normalidade para ratos sadios / Abstract: Protein concentrates were obtained from debittered Saccharomyces carlsbergensis biomass, a byproduct from beer industry, which had their cells broken macanically and then treated chemically to reduce their nucleic acid (RNA) content and improve its functional and nutritional properties. Cells suspensions (40%v/v) were passed through a Dyno-mill at a feeding rate of 4,8 Uh, 2400 rpm, using glass beads of 0.6 - 1.0 mm to fill 70% of the chamber volume and the temperature of 15°C. After centrifugation to eliminate cell walls part of the supernatant was acidified to the isoeletric pH (4,2) to preciptate the nucleoprotein complex (CP), which was isolated by centrifugation and freeze-drying. Other parts were treated either with 0,5M NaCI04 or with 3% sodium trimetaphosphate (TMFS), acidified to isoeletric pH and freeze-dried, to obtain concentrates which were called CPP and CPF, respectively. Protein in the concentrates was 66, 76 and 74%, respectively for CP, CPP and CPF. Amino acid composition for the three concentrates was almost perfect showing a high concentration of lysine. Reduction of RNA in the concentrate was more efficient in the extraction with NaCI04 (86% reduction), however protein functionality, except foaming, was affected most in CPP. Treatment with trimetaphosphate (TMFS) phosphorylated 35% of the serine residues and reduced 76% of the RNA. Phosphorylation improved protein functional properties, notably water retention capacity, viscosity, foam stability and calcium ion binding. Phosphorylation also caused a shift of the isoeletric pH (4,2 - 3,5), improving functionality in the pH range 4 - 6. Biological assays revealed improved protein digestibility and NPU in the concentrates, when compared with the broken cells biomass. Nutritive value of the concentrates rated 70 - 75% of casein. No toxic effect of the CPF preparation was detected based on various rat serum determinations, which remained in the range of normality for healthy rats / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

GONÇALVES, Maria Helane Rocha Batista. Genótipos das cepas de H. pylori VacA e alelos, cagA e sítios de fosforilação EPIYA em uma comunidade urbana de Fortaleza utilizando método não endoscópico. 2010. 68 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-11T14:14:46Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_mhrbgonçalves.pdf: 841970 bytes, checksum: c3ccf6269ed1300097b844a6e63f0539 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-03-11T14:15:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_mhrbgonçalves.pdf: 841970 bytes, checksum: c3ccf6269ed1300097b844a6e63f0539 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-11T14:15:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_mhrbgonçalves.pdf: 841970 bytes, checksum: c3ccf6269ed1300097b844a6e63f0539 (MD5) Previous issue date: 2010 / The H. pylori infect currently half of the world’s population and is related to the development of gastric disorders. The Enterotest is a minimally invasive method that can be used for detection of H. pylori through endoscopic not. The objective of this study was to evaluate the sensitivity and specificity of Enterotest opposite the Respiratory Testing and studying the genetic profile of strains of H. pylori individuals resident in the Community College Park. The gastric juice was collected from Enteroteste, and held the culture and the extraction of DNA from H. pylori. The genotyping of strains was carried out by the PCR technique and phosphorylation sites EPIYA sequencing participated in the study 50 individuals, positive and negative 7 43 for infection H. pylori through Respiratory Test. Culture and PCR from Enteroteste showed sensitivity of 86% and 77%, respectively, with 100% specificity in both methods. 33 strains were positive, genotipadas as Cow being 39.4% Cow s1m1; 15.2% Cow s1m2; 18.2% Cow s2m2 27.2% with Cow s profile with absence of allele m. Were positive 66.6% Bran of strains being profiled 54.5% EPIYA-ABC, 41.0% EPIYA-ABCC and 4.5% EPIYA-AB. The Enterotest proved to be a reliable method with great sensitivity and specificity for identification of H. pylori through cultivation and PCR technique. Most strains expressed alelo Cow s1, with a predominance of subtype s1b and allele combination s1m1. More than half of the studied strains expressed gene Shit and most of these strains were 3 or 4, phosphorylation sites profiled EPIYA-ABC or EPIYA-ABCC. The genetic profile presented by these strains is described for South America and nonstandard Asia, most strains circulating in the community have important potential pathogenic. The Enterotest is a safe method, sensitive and specific detection of H. pylori. / O H. pylori infecta atualmente metade da população mundial e é relacionado com o desenvolvimento das afecções gástricas. O Enteroteste é um método minimamente invasivo que pode ser usado para detecção do H. pylori por meio não endoscópico. O objetivo deste estudo foi avaliar a sensibilidade e especificidade do Enteroteste frente ao Teste Respiratório e estudar o perfil genético das cepas de H. pylori em indivíduos residentes na comunidade Parque Universitário. O suco gástrico foi colhido a partir do Enteroteste, e realizada a cultura e a extração do DNA do H. pylori. A genotipagem das cepas foi realizada através da técnica de PCR e os sítios de fosforilação EPIYA de sequenciamento Participaram do estudo 50 indivíduos, 43 positivos e 7 negativos para a infecção pelo H. pylori através do Teste Respiratório. A cultura e o PCR a partir do Enteroteste apresentaram sensibilidade de 86% e 77%, respectivamente, com especificidade de 100% em ambos os métodos 33 cepas foram genotipadas como vacA positivas, sendo 39,4% vacA s1m1; 15,2% vacA s1m2; 18,2% vacA s2m2 27,2% com perfil vacA s com ausência do alelo m. Foram cagA positivas 66,6% das cepas sendo 54,5% com perfil EPIYA-ABC, 41,0% EPIYA-ABCC e 4,5% EPIYA-AB. O Enteroteste mostrou-se um método confiável com boa sensibilidade e especificidade para identificação do H. pylori através do cultivo e da técnica de PCR. A maioria das cepas expressou o alelo vacA s1, com predomínio do subtipo s1b e da combinação alélica s1m1. Mais da metade das cepas estudadas expressaram o gene cagA e a maioria dessas cepas tinham 3 ou 4 sítios de fosforilação, com perfil EPIYA-ABC ou EPIYA-ABCC. O perfil genético apresentado por essas cepas é o descrito para a América do Sul e diferente do padrão Asiático, a maioria das cepas circulantes na comunidade têm importante potencial patogênico. O Enteroteste é um método seguro, sensível e específico para detecção do H. pylori.

Orientador: Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T21:13:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kemper_EdsonLuis_D.pdf: 7263068 bytes, checksum: 204b22fb94f5718a7988a1202b13e9da (MD5) Previous issue date: 1999 / Doutorado

Orientadores: Alicia J. Kowaltowski, Anibal E. Vercesi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ruy_Fernando_M.pdf: 15784943 bytes, checksum: bc2c0bdafe8e7b37b8978e5f9f282096 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: o gradiente de prótons (AuH+) gerado através da membrana mitocondrial interna pela oxidação de substratos não é totalmente acoplado à síntese de ATP. Além de transportadores específicos que utilizam a energia do AuH+,a membrana mitocondrial interna possui sistemas dissipadores de energia, tais como a proteína desacopladora de plantas (PUMP) e a oxidase alternativa (AOX), que diminuem a eficiência da fosforilação oxidativa em mitocôndrias vegetais. Outro mecanismo potencialmente dissipativo recentemente descrito envolve um ciclo do íon K+,onde a captação do cátion é mediada por canais de K+ sensíveis a ATP (mitoKATP) e seu efluxo é balanceado através do trocador K+/H+...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The proton gradient (AuH+) across the mitochondrial inner membrane generated by substrate oxidation is not totally coupled to ATP synthesis. In addition to specific uniporters that use the energy contained in AuH+, the mitochondrial inner membrane presents energy-dissipating systems such as the plant uncoupling protein (PUMP) and the alternative oxidase (AOX), which decrease the efficiency of oxidative phosphorylation in plant mitochondria. Another potential dissipative mechanism recently described involves a K+ cycle,where ion import is mediated by ATP-sensitive K+ channels (mitoKATP) and its efllux is obtained through a K+/H+exchanger...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:03:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3688_1.pdf: 1907498 bytes, checksum: 101a9bcd7d206849add625965525a3c3 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os tripanossomatídeos são protozoários que causam manifestações clínicas de impacto mundial e possuem características bioquímicas peculiares que os diferem dos demais eucariotos. Sua expressão gênica é regulada em nível pós-transcricional, provavelmente no estágio de iniciação da síntese protéica. A tradução cap-dependente é iniciada através da ligação do fator de iniciação eIF4E, pertencente ao complexo eIF4F, ao cap presente na extremidade 5 dos mRNAs. Foram identificados múltiplos homólogos do fator EIF4E nestes parasitas, que provavelmente estão associados ao seu complexo ciclo de vida. Neste trabalho, nós buscamos entender como ocorre a expressão de quatro homólogos deste fator (EIF4E1-4) durante o ciclo de vida de Leishmania amazonensis. Para tal, foram realizadas curvas a fim de se obter as três principais formas evolutivas do parasita. Todos os homólogos estão presentes ao longo da curva e os EIF4E2-4 apresentam múltiplas isoformas, sugerindo modificações pós-traducionais por fosforilação. Destes, as isoformas dos EIF4E3 e 4 apresentaram expressão constrastante que não interferem com sua localização subcelular, citoplasmática. A ausência de soro fetal bovino no meio induziu uma desfosforilação prematura do EIF4E4 e uma hiperfosforilação do EIF4E3, associados à falta de crescimento celular. EIF4E3 desfosforilado e EIF4E4 fosforilado estão associados a uma maior atividade de tradução. A presença de um inibidor de transcrição influenciou no padrão de expressão dos dois homólogos, porém um inibidor de tradução afetou apenas o EIF4E3. Estes resultados indicam que os homólogos de eIF4E atuam de forma distinta na célula e que a fosforilação deve ter um papel significante na regulação destes fatores em Leishmania e na regulação da síntese de proteínas como um todo

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo775_1.pdf: 2674039 bytes, checksum: 2d48ce1a10b6a494268836174af90e47 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O Trypanosoma brucei é um protozoário unicelular causador da doença do sono em humanos, e cujo ciclo de vida se alterna entre dois hospedeiros, sendo a forma procílica encontrada em insetos vetores e a forma sanguínea em mamíferos suscetíveis. Nesse parasita a regulação da expressão gênica ocorre basicamente em nível pós-transcricional e a biossíntese de proteínas, principalmente na etapa denominada iniciação da tradução, é um ponto potencialmente crítico dessa regulação. Análises genômicas identificaram um número consideravelmente grande de proteínas quinases, o que levou a especulação de que a fosforilação de proteínas, dentre as modificações pós-traducionais, também seja um mecanismo chave para eventos dessa regulação. Em eucariotos, o complexo eIF4F (formado pelas subunidades eIF4A, eIF4E e eIF4G), auxiliado pela proteína de ligação ao poli-A (PABP), atua na iniciação da tradução e tem sua atividade regulada por modificações como fosforilação. Este trabalho buscou analisar a expressão de homólogos selecionados de eIF4E, eIF4G e PABP de T. brucei (TbEIF4E1, TbEIF4E3 e 4, TbEIF4G4 e 5) e investigar a ocorrência de modificações pós-traducionais que possam estar associadas ao controle da sua função. Primeiro, curvas de crescimento foram geradas e extratos protéicos produzidos a partir de células derivadas de pontos selecionados destas curvas. Foi possível observar que todas as proteínas selecionadas eram expressas ao longo das curvas em ambas as formas do ciclo de vida do parasita, porém com padrões de expressão distintos. Os TbEIF4E1 e 3 são as proteínas menos e mais expressas, respectivamente, em ambas as formas procíclica e sanguínea. Os TbEIF4E3 e 4 e o TbEIF4G4 foram representados por mais de uma isoforma, ao contrário dos demais fatores estudados, e observou-se que as três proteínas eram encontradas sob formas fosforiladas. Através da eletroforese bidimensional foi possível visualizar que TbPABP1, TbEIF4E3 e TbEIF4E4 possuem 2, 5 e 4 isoformas, respectivamente, enquanto o TbEIF4AI, não fosforilado, possui apenas uma. Adicionalmente, foi demonstrado que a fosforilação do TbEIF4G4 não impede sua a interação com o TbEIF4E3. Esses resultados indicam que a fosforilação é um mecanismo que parece possuir um papel predominante na regulação da função dos fatores estudados

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T19:01:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fagian_MarciaMarilia_M.pdf: 2846231 bytes, checksum: 62b0fe54049a5a247549286aa9e0c1d3 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Nossos resultados mostram que 'Sr POT.2+¿ intramitocondrial, similarmente ao 'ca POT.2+¿, inibe a fosforilação oxidativa em mitocondria de figado de rato. Ambos, 'Ca POT.2+¿ e 'Sr POT.2+¿ também inibem a atividade hidrolítica da ATPase em partículas submitocondriais. Metade da inibição máxima dessa atividade ATPásica foi encontrada numa concentração de 2,5mM de 'Ca POT.2+¿ ou 5,0 mM de 'Sr POT.2+¿ , quando a concentraçao de 'Mg POT.2+¿ no meio era 1,0 mM. A inibição da atividade ATPásica por ambos os cátions foi rapidamente decrescida com o aumento da concentração de 'Mg POT.2+¿ no meio de reaçao. Dados cinéticos, na presença de dlferentes concentraçoes de 'Ca POT.2+¿ ou 'Sr POT.2+¿ e a determinação nessas condições da concentração de MgATP, o substrato da ATPase, indicam fortemente que estes cátions inibem a hidrólise de ATP competindo com 'Mg POT.2+¿ para a formação do complexo MgATP. Com base na concordância entre estes resultados obtidos em partículas submitocondriais e os resultados de titulações da fosforilação oxidativa com carbo xiatractilato ou oligomicina,em mitocondrias carregadas com 'Sr POT.2+¿, concluímos que Ca POT.2+¿ ou 'Sr POT.2+¿ intramitocondrial inibem a fosforilação oxidativa em mitocondrias intactas pelo decréscimo da disponibilidade de nucleotídeos de adenina tanto para o translocador ADP/ATP quanto para a ATPsintetase. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Intramitochondrial 'Sr POT.2+¿, similarly to 'ca POT.2+¿, inhibits oxidative hosphorylation in intact rat liver mitochondria. Both Ca2+ and Sr2+ also inhibits the hydrolytic activity of ATPase in submitochondrial particles. Half-maximal inhibition of ATPase activitywas attained at a concentration of 2,5mM 'Ca POT.2+¿ or 5,0 mM 'Sr POT.2+¿,when the concentration of 'Mg POT.2+¿in the medium was l,0 mM. The inhibition of ATPase activity by both cations was rapidly decreased by increasing the 'Mg POT.2+¿concentrations in the reaction medium. In addition, kinetical data and the determination of the concentrations of MgATP, the substrate of the ATPase, in the presence of different concentration of 'Ca POT.2+¿ or 'Sr POT.2+¿ strongly indicate that these cations inhibit ATP hydrolysis by competing with Mg for the formation of MgATP. On the basis of a good agreement between these results with submitochondrial particles and the results of titrations of oxidative phosphorylationwith carboxyatractylosideor oligomycinin mitochondria loaded with 'Sr POT.2+¿ it can be concluded that intramitochondrial Ca or Sr inhibits oxidativephosphorylation inintact mitochondria by decreasing the availability of adenine nucleotides to both the ADP/ATP carrier and the ATP synthase. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Oreintadores: Aldo Focesi Junior, Quivo S. Tahin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T12:48:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_MariaLaiseChaves_M.pdf: 2241507 bytes, checksum: ef3655236a6ba02ad774b2e24d7e293e (MD5) Previous issue date: 1974 / Resumo: Estudos comparativos de imunodifusão e imunoeletroforese foram realizados com fosforilases (E.C.2.4.l.l.) b de músculo esquelético de coelho (animal), de batata (vegetal), a e b de levedura de cervejeiro e a de levedura de padeiro.Usando-se soro de coelho anti-fosforilase de batata, não foi possível dectetar reação de precipitação antígeno-anticorpo com fosforilase de levedura ou de músculo esquelético de coelho. Usando-se soro de coelho anti-fosforilase b de levedura de cervejeiro, também não ,foi possível detectar reação de precipitação antígeno-anticorpo com fosforilases de batata ou de músculo esquelético. Esses achados apoiam a hipótese de que fosforilases de origens distintas ou de tecidos distintos não devem apresentar estrutura antigênica idêntica. Foi demonstrado que há identidade imunológica entre fosforilase a e b de levedura de cervejeiro, confirmando observações de outros autores sobre identidade imunológica entre, a forma ativa e a inativada fosforilase de músculo esquelético, bem como as de levedura de padeiro. Esse fato sugere que o resíduo seril-fosfato, importante para os mecanismos de ativação-inativação e o de associação-dissociação da enzima, não influa diretamente na estrutura antigênica das fosforilases, bem como, que a polimerização da enzima, causando alterações na estrutura quaternária da proteina, não cause significativas alterações na estrutura antigênica das enzimas. Foi também demonstrado que, embora os sistemas de fosforilases de levedura de cervejeiro e a de padeiro (ambas leveduras são raças de Saccharomyces cerevisae), apresentem significativas diferenças físico-químicas de peso molecular, quanto ao mecanismo regulatório, cinéticas, etc., as fosforilases devem possuir identidade imunológica entre si / Abstract: Not informed. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-05. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:50Z : No. of bitstreams: 1 000859360.pdf: 1034814 bytes, checksum: c0a4def8be0c2f45d09cbd7c089d88da (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-28T13:37:51Z: 000859360.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-28T13:38:52Z : No. of bitstreams: 1 000859360.pdf: 1034815 bytes, checksum: 0e2a44e2cca5e564a6825b47d8322e41 (MD5) / O fipronil é um inseticida amplamente utilizado para controlar pragas nas plantações e em animais. Existem relatos de intoxicação devido à exposição de fipronil em mamíferos e o fígado é um alvo potencial. No presente estudo, foram avaliados os efeitos dos metabólitos do fipronil, fipronil dessulfinil e fipronil sulfona sobre a bioenergética, produção de espécies reativas de oxigênio e efluxo de cálcio em mitocôndrias isoladas de fígado de rato. O fipronil dessulfinil (5 a 25 μM) inibiu o estado 3 da respiração em mitocôndrias energizadas com glutamato mais malato, substratos do complexo I da cadeia respiratória, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial, resultando em inibição da síntese de adenosina trifosfato. O metabólito dessulfinil também causou desacoplamento nas mitocôndrias energizadas com succinato e estimulou o efluxo de cálcio. O metabólito sulfona também atuou como inibidor e desacoplador mitocondrial e estimulou o efluxo de cálcio, porém em menores concentrações (0,5 a 5 μM). Os efeitos dos metabólitos do fipronil na bioenergética mitocondrial e homeostase do cálcio podem estar relacionados com os efeitos tóxicos do inseticida no fígado / Fipronil is an insecticide extensively used to control pests in crops and animals. There are relates of poisoning due to exposure of fipronil in mammals and the liver is a potential target. In this study, we evaluated the effects of metabolites of fipronil, fipronildesulfinyl and fipronilsulfone on the bioenergetics, reactive oxygen species production and calcium efflux from mitochondria isolated from rat liver. Desulfinyl (5 to 25 μM) inhibited state-3 respiration in mitochondria energized with glutamate plus malate, substrates of complex I of the respiratory chain, and decreased the mitochondrial membrane potential resulting in inhibition of. Synthesis. Desulfinyl also caused uncoupling in succinate-energized mitochondria and calcium efflux. The metabolitesulfone also acted as mitochondrial inhibitors and uncouplers and caused calcium efflux, but inlower concentrations (0.5 to 5 μM). These effects of metabolites of fipronil on mitochondrial bioenergetics and calcium homeostasis may be related to toxic effects of the insecticide in the liver

Orientador: Fábio Erminio Mingatto / Banca: Daniel Nicodemo / Banca: Sérgio Diniz Garcia / Resumo: O fipronil é um inseticida amplamente utilizado para controlar pragas nas plantações e em animais. Existem relatos de intoxicação devido à exposição de fipronil em mamíferos e o fígado é um alvo potencial. No presente estudo, foram avaliados os efeitos dos metabólitos do fipronil, fipronil dessulfinil e fipronil sulfona sobre a bioenergética, produção de espécies reativas de oxigênio e efluxo de cálcio em mitocôndrias isoladas de fígado de rato. O fipronil dessulfinil (5 a 25 μM) inibiu o estado 3 da respiração em mitocôndrias energizadas com glutamato mais malato, substratos do complexo I da cadeia respiratória, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial, resultando em inibição da síntese de adenosina trifosfato. O metabólito dessulfinil também causou desacoplamento nas mitocôndrias energizadas com succinato e estimulou o efluxo de cálcio. O metabólito sulfona também atuou como inibidor e desacoplador mitocondrial e estimulou o efluxo de cálcio, porém em menores concentrações (0,5 a 5 μM). Os efeitos dos metabólitos do fipronil na bioenergética mitocondrial e homeostase do cálcio podem estar relacionados com os efeitos tóxicos do inseticida no fígado / Abstract: Fipronil is an insecticide extensively used to control pests in crops and animals. There are relates of poisoning due to exposure of fipronil in mammals and the liver is a potential target. In this study, we evaluated the effects of metabolites of fipronil, fipronildesulfinyl and fipronilsulfone on the bioenergetics, reactive oxygen species production and calcium efflux from mitochondria isolated from rat liver. Desulfinyl (5 to 25 μM) inhibited state-3 respiration in mitochondria energized with glutamate plus malate, substrates of complex I of the respiratory chain, and decreased the mitochondrial membrane potential resulting in inhibition of. Synthesis. Desulfinyl also caused uncoupling in succinate-energized mitochondria and calcium efflux. The metabolitesulfone also acted as mitochondrial inhibitors and uncouplers and caused calcium efflux, but inlower concentrations (0.5 to 5 μM). These effects of metabolites of fipronil on mitochondrial bioenergetics and calcium homeostasis may be related to toxic effects of the insecticide in the liver / Mestre