A procura de um método que permita um melhor resultado na anastomose de um nervo completamente seccionado é antiga. Há muitos anos a técnica, dita convencional, para aproximação dos cotos afastados do nervo lesado, é realizada com pontos de fios microcirúrgicos. Mais recentemente, a utilização da cola de fibrina tem permitido a adesão de tecidos, como pele, fáscia e outras estruturas anatômicas. O uso da cola de fibrina, na aproximação das extremidades nervosas, tem sido propagada pela indústria como um fato incontestável. No entanto, somente com a realização de estudos comparativos clínicos e laboratoriais tornou-se possível comparar a eficácia da cola de fibrina como agente de reconstituição em lesões de nervos periféricos. Com o objetivo de comprovar essa afirmação foi realizado um trabalho através de uma mensuração nas bainhas de mielina de cotos regenerados de nervos entre diferentes tipos de anastomose nervosas em nervo isquiático de ratos da raça Wistar. Com esse mesmo escopo, foi mensurado o número de axônios em regeneração após o uso dessa cola. Foi utilizada uma amostra de 35 ratos divididos em 03 grupos (A, B e C). No grupo A, 25 ratos foram submetidos à cirurgia com o uso da cola de fibrina para a anastomose nervosa. No grupo B, 05 ratos foram submetidos ao mesmo procedimento; entretanto, ao reparo nervoso acrescentou-se a utilização de dois pontos opostos de mononylon 9-0, usando-se cola de fibrina no seu interior. No terceiro grupo (C), 05 ratos foram submetidos a neurorrafia com 6 a 8 pontos de mononylon 9-0 sem auxílio da cola de fibrina (anastomose nervosa convencional). Os animais foram submetidos a um novo procedimento após 90 dias, quando o nervo isquiático tratado foi retirado e encaminhado para o estudo. Após esse procedimento, os animais foram sacrificados. Cabe esclarecer que os espécimens foram submetidas a uma preparação histológica, sendo avaliados. Para tanto, foi realizada uma mensuração da espessura média da bainha de mielina das fibras regeneradas. Também foi realizada uma medição do número de axônios regenerados em um milímetro quadrado. Com base nesses achados, foram comparados os resultados. / The search for a method that allows better results for the anastomosis of a completely sectioned nerve has been pursuitted from a long time. From many years the conventional technique using microsurgical sutures has been used to bring near the separated stumps of the injured nerve. Actually, the fibrin glue use is allowing tissue adhesion of the skin, fascia and other anatomical structures. The fibrin glue use for the nervous edges approach, have been propagated by the industries as an incontestable fact. Trying to verify this affirmation an evaluation through the myelin sheath was made along regenerated nerve edges between different techniques of anastomosis of an injured sciatic nerve from Wistar. Was also measured the axon regeneration after this glue application. A 35 rats sample was separated in 03 groups (A, B and C). In group A 25 rats were submitted to nervous anastomosis surgery using fibrin glue. In group B, 05 rats were submitted to the same procedure; however, during nervous repair, two opposite stitches of mononylon 9-0 were added with inward fibrin glue. In group C 05 rats were submitted to neuroraphy with 6-8 stitches of mononylon 9-0 without fibrin glue use (conventional nervous anastomosis). The animals were submitted to a new procedure, 90 days after the initial surgery, to remove and lead to additional study the healed portion of the sciatic nerve. After this procedure the animals were sacrificed. These specimens were submitted to histological preparation and evaluated. The myelin sheath thickness average of the regenerated fibers was measured. The number of regenerated axons by (milimetro quadrado) was also measured. Using these measures a comparison between the results were made.

Várias evidências sugerem que a histamina cerebral está envolvida no processo de consolidação de memórias, mas a real participação do sistema histaminérgico neste processo permanece controversa. Aqui nós mostramos que, quando infundida na região CA1 do hipocampo dorsal de ratos imediatamente pós-treino em esquiva inibitória (EI), mas não depois, a histamina produz um efeito pró-mnésico dose-dependente, sem alterar a atividade locomotora, exploratória, o estado de ansiedade ou a expressão da resposta aversiva. O efeito facilitatório da histamina intra-CA1 foi mimetizado pelo inibidor da histamina N-metil-transferase, SKF-91844, e pelo agonista H2, dimaprit, mas foi totalmente bloqueado pelo antagonista H2, ranitidina, mas não pelo antagonista H1 pirilamina, antagonista H3, tioperamida, ou pelo antagonista do sítio das poliaminas do NMDAr, ifenprodil. Nenhum destes antagonistas, ranitidina, pirilamina, tioperamida ou ifenprodil, afetaram a consolidação da memória para EI. Nossos resultados indicam que, quando infundida bilateralmente intra-CA1 dorsal, a histamina aumenta a consolidação de memória para EI através de um mecanismo que envolve a ativação de receptores H2; contudo, a histamina endógena presente na região CA1 do hipocampo dorsal parece não participar da consolidação da memória para EI, pelo menos no intervalo de tempo pós-treino que foi analisado.

A acidemia glutárica do tipo I (AG I) é um erro inato do metabolismo causado pela deficiência da glutaril-CoA desidrogenase (GCDH), uma enzima responsável pelo catabolismo da lisina, hidroxilisina e triptofano. A deficiência da atividade da GCDH leva ao acúmulo nos fluidos corporais e no cérebro predominantemente de ácido glutárico (AG) e em menor grau do ácido 3- hidroxiglutárico e do ácido glutacônico. Clinicamente, os pacientes apresentam macrocefalia ao nascimento e uma hipomielinização ou desmielinização progressiva do córtex cerebral. Crises de descompensação metabólica ocorrem usualmente entre 6 e 24 meses de vida, resultando numa destruição irreversível de regiões cerebrais suscetíveis, em particular o estriado, e subseqüentemente alterações severas dos movimentos, como distonia e discinesia. Apesar dos sintomas neurológicos severos e alterações neuropatológicas cerebrais importantes (atrofia cerebral), os mecanismos que levam ao dano cerebral na AG I são pouco conhecidos. No presente estudo, investigamos o efeito in vitro do AG sobre vários parâmetros do sistema glutamatérgico, tais como a união de glutamato a membranas plasmáticas sinápticas na presença e ausência de sódio, a captação de glutamato por fatias cerebrais e a liberação de glutamato induzida por potássio por preparações sinaptossomais de córtex cerebral e estriado ou cérebro médio de ratos ao longo do desenvolvimento. Primeiro, observamos que o AG diminui a união de glutamato Na+-independente a membranas sinápticas de córtex cerebral e cérebro médio de ratos de 7 e 15 dias de vida, evidenciando uma possível competição entre o glutamato e o AG por sítios de receptores glutamatérgicos. Visto que uma diminuição da união de glutamato Na+- independente pode representar uma interação do AG com receptores glutamatérgicos, investigamos se AG interage com receptores glutamatérgicos pela adição de antagonistas de receptores NMDA e não-NMDA. Verificamos que, em córtex cerebral de ratos de 15 dias de vida, o AG e o CNQX (antagonista de receptores não-NMDA) diminuem a união de glutamato em 20 e 40 %, respectivamente, e que a co-incubação desses compostos não provoca um efeito aditivo, sugerindo que a união do AG e do CNQX ao receptor não-NMDA ocorre provavelmente através do mesmo sítio. Resultados semelhantes foram encontrados em cérebro médio de ratos de 15 dias de vida. Por outro lado, o AG não alterou a união de glutamato na presença de sódio tanto em córtex cerebral como em cérebro médio e/ou estriado, sugerindo que o AG não compete pelos transportadores de glutamato. Também observamos que o AG diminui a captação de glutamato por fatias de córtex cerebral de ratos de 7 dias de vida, o que pode provavelmente resultar num excesso de glutamato na fenda sináptica levando à excitotoxicidade, o que pode ser relacionado com o dano cerebral característico dos pacientes com AG I. A inibição da captação de glutamato por fatias não foi prevenida pela pré-incubação com creatina e N-acetilcisteína, sugerindo que essa ação do AG provavelmente não se deva a um efeito indireto reduzindo o metabolismo energético ou aumentando a produção de radicais livres. Finalmente, verificamos que o AG não alterou a liberação de glutamato estimulada por potássio por sinaptossomas. Assim, concluímos que o AG pode alterar o sistema glutamatérgico durante o desenvolvimento cerebral, resultando em possíveis ações deletérias sobre o SNC que podem explicar ao menos em parte a neuropatogenia da AG I.

Orientador: Ethel Lourenzi Barbosa Novelli / Banca: Regina Coeli de Miranda Burneiko / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Tese não possui um resumo geral, possue um resumo para cada capítulo / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo determinar os efeitos da administração de saponina em ratos alimentados com dietas de diferentes proporções de lipídios, colesterol e sacarose sobre parâmetros morfométricos e nutricionais. Para tanto, 36 ratos, Wistar, 240g, foram divididos em 6 grupos com 6 ratos cada. O grupo P foi considerado controle recebendo dieta padrão. O grupo L recebeu dieta padrão acrescida de óleo de soja, colesterol e ácido cólico. O grupo S recebeu dieta padrão enriquecida com sacarose e óleo de soja. O grupo FP recebeu dieta padrão e saponina (4g/L) na água de beber. Animais do grupo FL receberam a mesma dieta do grupo L e saponina (4g/L) na água. O grupo FS recebeu a mesma dieta do grupo S e saponina (4g/L) na água. O experimento teve duração de 35 dias. Os resultados demonstraram que as dietas não elevaram o peso corporal, porém induziram alterações nos parâmetros nutricionais como eficiência alimentar e ingestão de líquidos. A administração de saponina induziu elevação no ganho de peso por aumentar a eficiência alimentar. / Abstract: Not available. / Mestre

Orientador: Prof. Dr. Antônio Carlos Ligocki Campos / Co-orientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo F.Matias / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 13/07/2015 / Inclui referências f. 54-59 / Área de concentração : Clinica cirurgia / Resumo: Introdução: Tendo em vista o número de cirurgias plásticas no Brasil e a busca por melhores resultados estético-funcionais fazem-se necessárias pesquisas para encontrar meios para melhorar a cicatrização e as cicatrizes. Objetivo: Avaliar os efeitos de três sessões de radiofrequência na cicatrização da pele de ratos no 7º e 14º dia de cicatrização. Método: Quarenta e oito ratos machos foram divididos em 4 grupos (GC7, GR7, GC14 e GR14) conforme ao grupo que pertenciam (GC: grupo controle; GR: grupo radiofrequência) e o dia do sacrifício (7: 7º dia P.O; 14: 14º dia P.O). Sob anestesia com ketamina 80 mg/kg e xilazina 8 mg/kg foi realizado a tricotomia e antissepsia com PVPI. Logo em seguida, foi feita a marcação da ferida excisional com tamanho de 2cm x 2cm (4cm²) e utilizado a lâmina 20 nas bordas laterais do quadrado. Foi feita a dissecação do segmento da pele. Também utilizou-se um punch metálico de 6mm com lâmina cortante na sua borda inferior para a realização de duas feridas excisionais de 0,6cm de diâmetro. Após 24h, foi realizada a aplicação da radiofrequência com o equipamento Spectra® na região dorsal, diretamente sobre as feridas por 7 minutos com temperatura de 38ºC. Esse procedimento foi realizado por três vezes, em dias alternados. No grupo controle foi realizado o procedimento com o aparelho desligado. As feridas foram fotografadas em diferentes tempos pós-operatórios: dia da cirurgia, 1ºdia P.O, no 7º dia P.O e no 14º dia P.O. As áreas cruentas foram calculadas utilizando programa específico de computador. No sacrifício (7º P.O ou 14º P.O), as feridas foram ressecadas e fixadas, para posterior análise histológica com HE. Os resultados foram analisados estatisticamente. Resultados: Foi encontrada área maior na ferida quadrado, no 3º dia pós cirurgia do grupo radiofrequência (GR7 3,3cm² ± 0,7cm² X GC7 2,4cm² ± 0,4cm², p=0,009). A diferença no dia da cirurgia para o dia da eutanásia do GR14 e GC14 foi uma ferida maior no dia da eutanásia no GR14 quando comparado ao GC14 (GR14 1,9cm² ± 0,5cm² X GC14 1,0cm² ± 0,3cm², p=0,001). No 7º e 14º dia de pós-operatório as feridas dos grupos controle e experimento de todos os animais exibiram aspectos diferentes entre si. Houve fechamento de 90% das feridas no GC14. No GR14, 60% dos ratos com feridas de punch foram reepitelizadas, enquanto 40% permaneceram ulceradas. No GC7, 70% das feridas de punch permaneceram ulcerados e 30% foram reepitelizadas. Já no GR7, 8% dos ratos, com feridas de punch foram reepitelizadas e 92% dos ratos permaneceram ulcerados. Conclusão: Pode-se afirmar que a radiofrequência tem influência sobre o processo inflamatório mostrando que, nos ratos que foram aplicados a radiofrequência, o quadrado permaneceu ulcerado. A radiofrequência reduz a contração cicatricial em feridas excisionais. Palavras-chave: Ondas de Rádio. Cicatrização. Fibroblastos / Abstract: Introduction: Considering the number of plastic surgeries in Brazil and the search for better aesthetic-functional results, researches are necessary to find ways to improve the healing process and scars Objective: The objective of this study was to evaluate the effects of 3 sessions of the radiofrequency device in the cicatrization process of rat skins at 7 º and 14 º days of healing. Methods: Forty-eight male rats were divided into 4 groups (GC7, GR7, GR14 and GC14), according to the group (CG: control group; GR: RF group) and the day of sacrifice (7: 7th post-operative day; 14: 14th post-operative day). Under anesthesia with ketamine 80mg/kg and xylazine 8mg/kg, the trichotomy and antisepsis with PVP-I was done on each animal before marking the 2cm x 2cm (4cm²) excisional wound, to finally initiate surgery with No.20 blades on the sides of the marked square, dissecting the skin segment. A 6mm metal punch with a cutting blade at its lower edge was used as well. After 24h, the radio-frequency with Spectra® equipment was applied on the dorsal region for 7 minutes with a temperature of 38 °C. This procedure was performed three times on alternate days. The control group went through the process with Spectra® turned off. The wounds were photographed at different post-operative stages: Surgery day, 1º day PO, 7º day PO and 14º day PO the raw areas were calculated using specific computer program. We reevaluated histologically with HE. Results were statistically analyzed by non-parametric Mann-Whitney test, p<0, 05. Results: Larger area in the wound square was found, on the 3rd day after surgery in radiofrequency group (GR7 3,3cm² ± 0,7cm² x GC7 2,4cm² ± 0,4cm², p=0,009).The difference between surgery day to euthanasia of the GC14 and GR14 is a smaller wound on euthanasia day in C14 compared to R14, (GR14 1,9cm² ± 0,5cm² x GC14 1,0cm² ± 0,3cm², p=0,001).On 7th and 14th postoperative days, wounds of control and experimental groups of all animals exhibit different aspects. There was 90% closure of wounds in the GC14. 60% of the rats in the GR14 had epidermal regeneration while 40% remaining ulcerated. In GC7, 70% of punch wounds remained ulcerated and 30% was healed. The GR7 had 8% rats with punch wounds healed and 92% remained ulcerated. Conclusion: It can be said that the radio has influence on the inflammatory process, showing negative effects applying RF; the Q-square remained ulcerated. This, study have found harmful results about the application of radiofrequency in the initial PO. However, it is necessary to conduct more studies to elucidate the action mechanism of RF in skin wounds healing. Keywords: Radio Waves. Cicatrization. Fibroblasts

Submitted by FRANCIELLE TOPOLSKI null (frantopolski@gmail.com) on 2017-01-06T18:09:14Z No. of bitstreams: 1 Tese Francielle - Final.pdf: 1461734 bytes, checksum: f1d14c00b0ae648327dcf4e59c6b9345 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-01-11T12:12:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 topolski_f_dr_araca.pdf: 1461734 bytes, checksum: f1d14c00b0ae648327dcf4e59c6b9345 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-11T12:12:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 topolski_f_dr_araca.pdf: 1461734 bytes, checksum: f1d14c00b0ae648327dcf4e59c6b9345 (MD5) Previous issue date: 2016-12-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve por objetivo avaliar a correlação entre dor e reações teciduais indesejadas da movimentação dentária induzida (MDI). Verificou-se a correlação entre hialinização no ligamento periodontal (LP) de ratos submetidos à MDI por força contínua (FC) e força contínua interrompida (FCI) e dor, avaliada por meio da presença de mediadores químicos associados à nocicepção – ciclooxigenase-2 (COX-2) e interleucina-1 beta (IL-1β) – no LP e pelo comportamento dos animais. Foram utilizados 42 ratos machos (Wistar, Rattus norvegicus), com aproximadamente 90 dias e 300g de massa corporal, divididos em 7 grupos de 6 animais: 1 grupo controle e 6 grupos submetidos à MDI por FC e FCI por 1, 3 e 5 dias. Após 7 dias de ambientação, os animais foram submetidos à indução de anquilose do incisivo superior direito e após 14 dias à instalação de dispositivo para MDI. A força aplicada foi de 50cN. Os grupos submetidos à FCI tiveram o dispositivo desativado e reativado durante os períodos experimentais. Foram realizados vídeos para obtenção dos dados comportamentais ao final dos períodos experimentais. A análise histomorfométrica foi utilizada para avaliação da hialinização. A presença de COX-2 e IL-1β foi avaliada por meio de análise imunoistoquímica. Os seguintes comportamentos foram avaliados: Andando, Escalando, Postura Imóvel, Descansando/Dormindo e Directed Face Grooming. Houve correlação positiva moderada entre hialinização e presença de COX-2 (rs = 0,404, p<0,05) e IL-1β (rs = 0,429, p<0,05). Também houve correlação negativa moderada entre hialinização e comportamentos exploratórios (Andando, r = -0,586, p<0,01; Escalando, r = -0,573, p<0,01) e correlação positiva moderada entre hialinização e o comportamento Descansando/Dormindo (r = 0,467, p<0,01). Os resultados sugerem que existe correlação entre dor e reações teciduais indesejadas da MDI.

Submitted by Nathália Januario de Araujo null (naty_janu_@hotmail.com) on 2017-04-05T01:40:31Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Nathália - Versão Final.pdf: 2100909 bytes, checksum: 1b16b920f5f27ae261ec98355194ea1c (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-12T17:14:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 araujo_nj_me_araca.pdf: 2100909 bytes, checksum: 1b16b920f5f27ae261ec98355194ea1c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-12T17:14:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 araujo_nj_me_araca.pdf: 2100909 bytes, checksum: 1b16b920f5f27ae261ec98355194ea1c (MD5) Previous issue date: 2017-03-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a progressão da periodontite experimental (PE) e a resposta tecidual periodontal frente à raspagem e alisamento radicular (RAR) durante tratamento com dose oncológica de zoledronato. Foram utilizados 100 ratos (6 meses de idade) distribuídos aleatoriamente em 4 grupos experimentais: SAL (n=30), ZOL (n=30), SAL-RAR (n=20) e ZOL-RAR (n=20). O plano de tratamento medicamentoso teve duração de 8 semanas. Os ratos receberam injeções intraperitoneais de 0,45 ml de solução de cloreto de sódio 0,9% (Grupos SAL e SAL-RAR) ou 0,45 ml da mesma solução acrescida de 100 µg/Kg de zoledronato (ZOL e ZOL-RAR) com um intervalo de três dias entre as aplicações. Decorridas duas semanas de tratamento medicamentoso, foi instalada uma ligadura de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos grupos SAL e ZOL essa ligadura permaneceu até o final do experimento. Nos grupos SAL-RAR e ZOL-RAR após outras duas semanas a ligadura foi removida, e foi efetuada a RAR. A eutanásia foi efetuada nos grupos SAL e ZOL aos 14, 21 e 42 dias pós instalação da ligadura e nos grupos SAL-RAR e ZOL-RAR aos 7 e 28 dias pós tratamento local com RAR. Foi executado o processamento histológico das hemi-mandíbulas e os cortes histológicos foram submetidos à coloração pela hematoxilina-eosina (HE). Na região de furca do primeiro molar inferior foram efetuadas: análise histopatológica dos tecidos peridontais e análise histométrica da porcentagem de osso na região de furca (POF) e da porcentagem de osso necrótico na região de furca (PON). Os resultados foram submetidos a análise estatística. O grupo ZOL apresentou uma resposta inflamatória local mais exacerbada, maior POF e maior PON aos 14d, 21d e 42 pós instalação da ligadura em relação ao grupo SAL. Em ZOL-RAR a resposta inflamatória se mostrou mais exacerbada, não houve alteração da POF, e a PON se mostrou maior ao longo do tempo e em relação ao grupo que não recebeu tratamento periodontal. Conclui-se que o tratamento com dose oncológica de zoledronato reduz a perda óssea alveolar induzida pela PE, todavia, aumenta a quantidade de tecido ósseo alveolar necrótico, exacerba e prolonga a resposta inflamatória local, tanto nos sítios sem tratamento periodontal quanto nos sítios submetidos à RAR, ou seja, a doença periodontal e o tratamento mecânico periodontal convencional são importantes fatores de risco local para a ONM-M. / The present study aims to assess the progression of experimental periodontitis (EP) and the periodontal tissue response to scaling and root planing (SRP) during treatment with oncological dose of zoledronate. A total of 100 rats were used (6 months old) randomically distributed into 4 experimental groups: SAL (n=30), ZOL (n=30), SALSRP (n=20) e ZOL-SRP (n=20). Drug treatment plan lasted for 8 weeks. Intraperitoneal injections of 0,45 ml of sodium chloride solution 0,9% (Groups SAL and SAL-SRP) or 0,45 ml of the same solution adding 100 µg/Kg of zoledronate (ZOL and ZOL-SRP) were given to the rats within intervals of three days between injections. A cotton ligature was installed around the first left lower molar after two weeks of medicative treatment. At SAL and ZOL groups such ligature endured until the end of the experiment. At the groups SAL-SRP and ZOL-SRP ligature was removed two more weeks later and SRP was executed. Euthanasia was done at the groups SAL and ZOL after 14, 21 and 42 days from the ligature installation and at the groups SAL-SRP and ZOL-SRP after 7 and 28 days after local treatment with SRP. Hemimandibula was histological processing and executed and histological sections went under Hematoxylin and eosin staining (HE). At the furcal region of the first lower molar were executed: histopathological analysis of periodontal tissues and histometric analysis of bone percentage at the furcal region (BPF) and necrotic bone percentage at the furcal region (NPF). Results went under statistical analysis. ZOL group presented increased local inflammatory response, higther BPF and higher NPF at days 14, 21 and 42 after ligature installation in relation to SAL group. At ZOL-SRP, inflammatory response was increased, there was no BFP alteration, and NPF was higher throughout time in comparison to the group that had not received periodontal treatment. It can be concluded that treatment with oncological dose of zoledronate decreases alveolar bone loss induced by EP, on the other hand, it increases the amount of alveolar necrotic bone tissue, increases and extends local inflammatory response, either at sites with no periodontal treatment or the ones that went under SRP, in other words, periodontal disease and conventional mechanical periodontal treatment are important local risk factor for medication-related osteonecrosis of the jaw (MRONJ).

Made available in DSpace on 2015-08-28T02:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000474252-Texto+Completo-0.pdf: 3311481 bytes, checksum: b67f5f48a8325dd3ae5469933fff90ba (MD5) Previous issue date: 2015 / Peptide YY (PYY) belongs to the neuropeptide Y (NPY) family, which also includes the neuropeptide Y (NPY) and pancreatic polipeptide (PP). These substances are biologically active, constituted of 36 aminoacids, and act via G protein coupled receptors. There are four functional subtypes of NPY family receptors in humans, namely Y1, Y2, Y4, and Y5. PYY is secreted by the intestinal L cells, being present in the blood stream in two active forms capable of crossing the blood brain barrier, PYY (1-36) and its cleavage product, PYY (3-36). PYY is a selective agonist for the Y2 receptor (Y2R) and has been identified as a modulator of appetite, promoting satiety sensation in mammals. Y2R are abundant in the brain hippocampus, where these receptors inhibit excitatory synaptic transmission and glutamatergic release when activated by potassium in hippocampal slices. Besides, knockout mice for Y2R present deficits in spatial and non-spatial memory tasks, showing a role of Y2R in learning and memory. The aim of this Master’s dissertation was searching for a better understanding of the interaction of PYY (3-36) and its Y2 receptor in CNS cells. For this purpose the activity of this peptide was investigated on Ca2+ influx in hippocampal cell cultures of Wistar neonate rats. We evaluated the influence of the presence of Ca2+ in the extracellular fluid, as well as the involvement of plasma membrane voltage-dependent Ca2+ and Na+ channels, and the influence of intracellular mechanisms related to the endoplasmic reticulum (ER), such as the SERCA pump, the inositol triphosphate (IP3) receptors and the ryanodine receptors (RyRs) in the responses induced by PYY (3-36) on the modulation of the [Ca2+]i, by using blockers specific for these channels. It was observed that the increase of the cytosolic [Ca2+] evoked by PYY (3-36) in hippocampal cells is independent of Ca2+ from the extracellular environment. Using a voltage-dependent Na+ channels blocker it was possible demonstrate that PYY (3-36) action is independent on Na+, suggesting that its activity on hippocampal cells does not induce or does not depend on cellular depolarization. In the experiments using RyRs or SERCA pump blockers it was observed an elevation of Ca2+ influx, that probably occurred due to the activation of SOCC, but with the concomitant presence of the a voltage-dependent Na+ channels blocker, this effect was abolished, suggesting a probable inhibition of SOCC channels in these conditions. In the experiments in the presence of an IP3Rs inhibitor, there was a decrease in cytosolic [Ca2+] evoked by PYY (3-36). The results from our experiments indicate that the action of PYY (3-36) on Ca2+ mobilization is mediated by intracellular receptors of the ER, suggesting that the observed elevation of [Ca2+]i is modulated especially by the activation of the intracellular Ca2+ signalling cascade through IP3 receptors. / O peptídeo YY (PYY) pertence à família do neuropeptídio Y que é composta também pelo neuropeptídio Y (NPY) e pelo polipeptídio pancreático (PP). São peptídeos biologicamente ativos, compostos por 36 aminoácidos e atuam via receptores acoplados a proteína G. Existem quatro subtipos de receptores para a família do NPY que são funcionais em humanos, denominados como: Y1, Y2, Y4 e Y5. O PYY é secretado no intestino pelas células L e circula no organismo em duas formas ativas que atravessam a barreira hematoencefálica, que são o PYY (1-36) e sua forma clivada PYY (3-36). O PYY (3-36) é um agonista seletivo do receptor Y2 e tem sido evidenciado por seu papel como um modulador do apetite, promovendo a sensação de saciedade em mamíferos. O hipocampo é uma região rica em receptores Y2 e já se demonstrou que a ativação destes receptores no hipocampo pode inibir a transmissão sináptica excitatória e a liberação de glutamato estimulada por potássio em fatias hipocampais. Em camundongos knockout para o receptor Y2 observou-se déficits na memória espacial e na memória não espacial nestes animais evidenciando também seu envolvimento na regulação da função cognitiva associada com o aprendizado e memória. O desenvolvimento desta dissertação teve por objetivo buscar uma melhor compreensão da interação do PYY (3-36) e seu receptor Y2 em células do sistema nervoso central. Para isso investigou-se a atividade deste peptídeo no influxo de cálcio (Ca2+) em células cultivadas do hipocampo de ratos Wistar neonatos. Avaliou-se a influência do Ca2+ presente no meio extracelular, bem como o envolvimento dos canais de Ca2+ e Na+ voltagem dependentes presentes na membrana plasmática, e a influência de mecanismos intracelulares presentes no retículo endoplasmático (RE), como a bomba do retículo sarco/endoplasmático Ca2+- ATPase (SERCA), os receptores de inositol trifofato (IP3Rs) e os receptores de rianodina (RyRs) nas respostas induzidas pelo PYY (3-36) sobre a modulação da concentração de Ca2+ intracelular ([Ca2+]i), através da utilização de bloqueadores específicos para estes canais. Foi observado que o aumento da concentração de Ca2+ ([Ca2+]) citosólico evocado pelo PYY (3-36) em células do hipocampo é independente do Ca2+ do meio extracelular. E através da utilização de bloqueadores dos canais de Na+ voltagem dependentes conseguiu-se demonstrar que a ação do PYY (3-36) é independente do influxo de Na+, sugerindo que a sua atividade sobre as células hipocampais não induz ou independe da despolarização celular. Nos experimentos utilizando bloqueadores dos RyRs ou da bomba SERCA observou-se uma elevação do influxo de Ca2+, o que provavelmente ocorreu devido a ativação dos canais de cálcio operados por estoque (SOCC, do inglês store-operated calcium channels), porém na presença concomitante de bloqueadores de canais de Na+ voltagem dependentes, este efeito foi bloqueado, sugerindo uma provável inibição dos canais SOCC nessas condições. Finalmente, na presença de inibidores dos IP3Rs, ocorreu uma diminuição da [Ca2+] citosólico evocada pelo PYY (3-36) nas células. Os resultados evidenciam que a ação do PYY (3-36) sobre a mobilização do Ca2+ é através de receptores intracelulares do RE, sugerindo que a elevação da [Ca2+]i observada, é modulada principalmente pela ativação da cascata de sinalização do Ca2+ intracelular pelos receptores de IP3.

Orientador: Sandra Cordellini / Banca: Agnaldo Bruno Chies / Banca: Denise Rangel da Silva Sartori / Resumo: A obesidade, assim como o estresse, constituem-se em fatores de risco para a mortalidade e morbidade cardiovasculares. Embora haja relatos sobre alterações de reatividade vascular em indivíduos obesos e expostos ao estresse, isoladamente, torna-se imprescindível, para a avaliação de risco cardiovascular, o conhecimento da resposta vascular adaptativa ao estresse em condição de obesidade estabelecida. Assim, o objetivo foi avaliar os efeitos da obesidade induzida por dieta sobre a resposta vascular adaptativa ao estresse agudo de imobilização em ratos adultos. Para tanto, foram utilizados ratos machos Wistar, separados em 4 grupos: controle e estresse que receberam dieta padrão; e obeso e obeso/estresse que receberam dieta hipercalórica durante 15 semanas. A obesidade foi determinada pelo índice de adiposidade: [(gorduras epididimal+retroperitoneal+visceral)/peso corpóreo final]x100. O peso corpóreo foi avaliado semanalmente. O consumo das dietas foi calculado diariamente para a determinação da ingestão alimentar, ingestão calórica e eficiência alimentar. A pressão arterial sistólica foi aferida durante o protocolo de obesidade. Foi realizado também o teste de tolerância à insulina e à glicose. Após o período de 15 semanas os animais do grupo estresse e obeso/estresse foram submetidos ao estresse agudo de imobilização por 2 horas. Imediatamente após o término da sessão de estresse, os animais foram decapitados e a aorta torácica, as gorduras epididimal, retroperitoneal e visceral foram retiradas. Curvas à noradrenalina, na presença ou ausência de prazosin ou L-NAME, curvas ao KCl e curvas ao cálcio foram obtidas em anéis de aorta torácica, com (+E) e sem endotélio (-E). Avaliou-se a reatividade vascular: resposta máxima (RM) e concentração eficaz de 50% (EC50). O índice de adiposidade, a ingestão calórica, a eficiência alimentar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Obesity, as well as stress, constitute a risk factors for cardiovascular morbidity and mortality. Although there are reports on vascular reactivity alterations in obese subjects and those exposed to stress, isolated, it becomes essential for the cardiovascular risk assessment, the knowledge of the circulatory adaptation to acute stress and its mechanisms in subjects with established obesity. Thus, the objective was to evaluate the effects of diet-induced obesity on vascular adaptive response to acute immobilization stress in adult rats. In this way, male Wistar rats were separated into 4 groups: control and stressed that received standard diet, and obese and obese/stress that received high calorie diet during 15 weeks. Obesity was determined by the adiposity index: [(epididymal fat + retroperitoneal fat + visceral fat) / final body weight] x100. Body weight was measured weekly. The consumption of diets was calculated daily to determine food intake, energy intake and feed efficiency. Systolic blood pressure was measured during the protocol of obesity. The glicemic profile was investigated by the glucose tolerance test and the insulin resistence test. After 15 weeks the animals in group stress and obese/stress were subjected to acute immobilization stress for 2 hours. The animals were decapitated and the thoracic aorta, epididymal fat, retroperitoneal fat and visceral fat were removed. Curves to noradrenaline, in the absence or presence of prazosin or L-NAME, KCl and calcium were obtained in rings of thoracic aorta with (+E) and without endothelium (-E). We evaluated the vascular reactivity: maximum response (MR) and effective concentration 50% (EC50). The index of adiposity, calorie intake, feed efficiency and weight of epididymal fat, retroperitoneal and visceral fat were higher in rats consuming the high calorie diet. Obesity did not determine changes in blood pressure and glucose... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Osmar Aparecido Cuoghi / Banca: Marcos Rogério de Mendonça / Banca: Celso Koogi Sonoda / Banca: Rodrigo Castellazzi Sella / Banca: Aguinaldo Coelho de Farias / Resumo: O movimento dentário envolve tanto remodelação óssea quanto dos demais tecidos periodontais resultando numa resposta biológica exigindo uma participação ativa nos níveis celulares. A terapia com laser em baixa intensidade (TLBI) inclui ação bioestimulatória e anti-inflamatória. Supõe-se que esta terapia promova efeitos significantes durante a movimentação dentária. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da TLBI na quantidade de movimentação dentária induzida em ratos, sob diferentes tipos de forças, descrevendo histomorfologicamente os eventos teciduais relevantes. Foram utilizados 108 ratos da linhagem Wistar divididos em dois grupos de acordo com a aplicação ou não da TLBI. Ambos os grupos foram subdivididos segundo o tipo de força utilizada: contínua (FC), contínua-interrompida (FCI) e intermitente (FI). Os subgrupos foram avaliados em três períodos de cinco, sete e nove dias. Foram instalados molas de NiTi (Sentalloy) com liberação de 50cN de magnitude de força sendo mantidas, desativadas ou removidas para estabelecer os tipos de força. Os dados quantitativos foram comparados pela análise de variância (ANOVA) e teste t-Student com nível de significância de 5%. A análise histomorfológica demonstrou que os tecidos periodontais responderam diferentemente considerando o tipo de força utilizado e que a TLBI promoveu respostas biológicas mais intensas, acelerando a taxa de deslocamento dentário. Conclui-se que a TLBI promoveu um aumento na quantidade de movimentação em todos os subgrupos e que a FC associada com o laser apresentou as maiores taxas de movimentação; a FCI associada com o laser proporcionou uma resposta biológica mais tolerável caracterizado por um melhor reparo tecidual e a FI, segundo os parâmetros quantitativos e qualitativos avaliados, caracterizou-se como a menos efetiva, independente da aplicação da TLBI. / Abstract: Orthodontic tooth movement has been defined as the result of a biological response to an externally applied force dependent on remodeling in periodontal ligament and alveolar bone requiring active participation of the cellular levels. Whereas low-level laser therapy (LLLT) includes anti-inflammatory and biostimulatory effect, it is assumed that this therapy promotes significant effects during tooth movement. Thus, the aim of this study was to measure the amount of tooth movement in an experimental rat model and to describe the relevant microscopic aspects resulting from induced tooth movement, with different types of orthodontic forces, associated with LLLT. 108 Wistar rats were divided into two groups according to the application of LLLT. Both groups were subdivided according to the type of force used: continuous (CF), continuous-interrupted (CIF) and intermittent (IF). All subgroups were evaluated in three periods of five, seven and nine days. Each group was then divided into three subgroups to evaluate changes in time intervals of five, seven and nine days. Opened springs NiTi (Sentalloy) were installed, releasing 50cN magnitude of force, being maintained disabled or removed to establish the types of force, CF, CIF e IF. Data were compared by analysis of variance (ANOVA) and t-Student test with a significance level of 5%. The histomorphological analysis showed that both bone and periodontal tissues responded differently considering the type of force used and the LLLT promoted a more tolerable biological response enhancing the rate of tooth movement. It is concluded that LLLT promoted an increase in the amount of movement in all subgroups and the CF associated with LLLT promoted the highest rates of movement; CIF associated with LLLT provided the most tolerable biological response and IF, according to the quantitative and qualitative parameters, was the less effective force, regardless of the LLLT. / Doutor