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Analise da mutação S707P no gene ATM em pacientes portadoras de cancer de mamaQueiroz, Rafael Souza 23 August 2005 (has links)
Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:08:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: No Brasil, o câncer de mama é o maior causador de mortes entre as mulheres. O histórico familiar constitui o fator de risco mais importante na determinação do câncer de mama familiar. Estima-se que cerca de 5 a 10% dos tumores de mama sejam hereditários. Vários genes são relacionados como responsáveis pelo câncer de mama familiar, dentre estes deve-se citar o gene ATM, que codifica uma proteína do tipo quinase de ponto de checagem que harmoniza o reconhecimento de alterações no DNA oriundas de radiação ionizante. Vários estudos demonstram a associação entre a mutação S707P do gene ATM e câncer de mama. O objetivo deste estudo é verificar a presença da mutação S707P no gene ATM em uma amostra de pacientes portadores de Câncer de mama e relacioná-la com a apresentação clínica da doença e o grau histológico. Para isso, esse estudo utilizou a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase seguida por digestão enzimática. Foram analisados
221 indivíduos para a mutação S707P, sendo 50 indivíduos com câncer e com histórico,
49 indivíduos com câncer sem histórico e 122 indivíduos do grupo controle. Somente dois indivíduos apresentaram a mutação S707P, sendo ambos em heterozigose do grupo controle (0,01). Esse é o primeiro estudo no Brasil que procura associação de mutações no gene ATM, em especial a mutação S707P com o câncer de mama hereditário e esporádico. Nenhuma associação foi encontrada entre a mutação S707P do gene ATM e o câncer de mama, tanto em mulheres com histórico familiar quanto em portadoras de câncer de mama esporádico / Abstract: Introduction In Brazil, breast cancer is the most responsible for death in women. Familiar history is the most important risk factor to establish familiar breast cancer because about 5 to 10 % of breast tumors have a genetic etiology. Many genes are involved in familial breast cancer responsible, like ATM. The ATM gene encodes a checkpoint kinase protein which recognizes DNA damage by ionizing radiation. Epidemiological evidence suggests that ATM heterozygotes, representing 0.5-1% of the general population, have a 5 to 8-fold increased risk of developing breast cancer. However, direct molecular analysis of ATM in selected breast cancer patients outside AT families has led to conflicting results. The aim of this study was to verify in a sample of 99 breast cancer carriers, the S707P missense alteration in ATM gene comparing with a control group of 122 individuals. Methods Polimerase chain reaction was performed followed by RFLP to identify S707P mutation. Results We found two heterozygotes for S707P mutation in control group only. No homozygotes were detected. The comparation with histologic degree was not possible. The allelic frequency in control group were 0,01% and genotype frequency of 0,016 or 1,6 %. This is the first study in Brazilian patients with breast cancer and ATM mutations. Ours results show that breast cancer is not associated with S707P mutation of ATM gene in this population. Conclusion Any link between S707P and breast cancer was observed, even in familial and non familial history breast cancer carriers. Our study is limited by its small number of mutations, therefore, new studies with more mutations are necessary / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Co-infecção entre citomegalovirus (HCMV) e herpes virus tipo 6 (HHV6) em receptores de transplante renalManfrinato, Juliana Andrea 29 August 2005 (has links)
Orientador: Marilda Mazzali / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T18:49:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivo: Analisar a influência da ocorrência de co-infecção pelo HCMV e HHV6 em receptores de transplante renal. Metodologia: Análise retrospectiva de 25 receptores de transplante renal. Os critérios de inclusão foram pacientes com PCR para HCMV negativa por ocasião do transplante e que tornaram-se positivas na evolução (média 44 ± 30 dias pós tx). Foram selecionadas 3 amostras de DNA destes indivíduos (imediatamente pós tx, primeira amostra positiva e uma terceira amostra, em média 30 dias após a amostra positiva), onde foi realizada pesquisa de partículas virais de HHV6, através de ¿Nested¿- PCR. Resultados: Por ocasião do transplante (primeira amostra), HHV6 estava presente em 9/30 pacientes (30%), sendo que 11 pacientes apresentaram positivação do HHV6 PCR, persistente ou não. Considerando que alguns autores sugerem que HHV6 ou HHV7 podem agravar o quadro clínico do HCMV, a apresentação clínica da infecção foi avaliada nestes indivíduos. Presença de viremia por HCMV sem sintomatologia clínica ocorreu em 9 indivíduos, leucopenia isolada em 8 e infecção ativa com antigenemia positiva e necessidade de tratamento com Ganciclovir IV em 8. Não houve diferença na incidência de HCMV assintomático ou manifesto apenas através de leucopenia entre os grupos HHV6 positivo e negativo. Entretanto, HCMV com sintomatologia sistêmica, antigenemia positiva e necessidade de tratamento ocorreu apenas nos pacientes que também apresentavam HHV6 positivo (8/20). Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes nos níveis séricos de creatinina por ocasião da detecção de viremia pelo HCMV. Entretanto, ao final de 1 ano de acompanhamento houve uma tendência à pior função renal no grupo com HHV6+/HCMV+ que naquele HHV6-/HCMV+ , diferença esta que se confirmou após 60 meses de acompanhamento (2.5 ± 0.4 vs. 1.3 ± 0.1 mg/d, HHV6+ vs HHV6 -, p<0.05). Quando os grupos foram divididos de acordo com a necessidade de tratamento para HCMV, não observamos diferença estatística nos níveis séricos de creatinina destes indivíduos. Conclusão: Apesar do pequeno número de pacientes avaliados, a ocorrência de co-infecção HHV6 e HCMV esteve associada a uma maior sintomatologia clínica e necessidade de tratamento com Ganciclovir IV. A pior função renal observada no grupo HCMV/HHV6 ao final de 5 anos de acompanhamento pode ser atribuída à maior severidade da infecção viral mas também á redução temporária de imunossupressores pela leucopenia, permitindo a ocorrência de rejeições subclínicas / Abstract: Aim: To analyze the influence of HCMV - HHV6 co-infection in renal transplant recipients. Material and Methods: Retrospective analysis of 25 renal transplant recipients. Inclusion criteria were negative HCMV -PCR at transplantation, that become positive during follow up (mean time, 44 ± 30 days after renal trasnplant). Three samples of DNA from each patient were selected (first post transplant sample, first positive HCMV positive sample and a third one, about 30 days after the positive sample). Viral HHV6 DNA was evaluated by Nested PCR analysis. Results: At transplant (first sample) HHV6 DNA was present in 9/30 patients (30%). During follow up, 11 patients presented at least one positive sample for HHV6 PCR, persistent or not. Based on the fact that some reports suggests that both HHV6 and HHV7 can agravate clinical presentation of HCMV infection, medical records from these patients were analyzed. HCMV viremia withouf symptons occurred in 9 patients, isolated leukopenia in 8 and simptomatic disease with positive antigenemia and need of antiviral treatmentin another 8 patients. There was no difference in the frequence of assymptomatic HCMV or isolated leukopenia between HHV6 positive and negative groups.. However, systemic HCMV with positive antigenemia and IV gancyclovir therapy was observed only in the HHV6 positive group (8/20). No differences in renal function were observed during viremia presentation. However, after 1 year follow up there was a trend to a worse renal function in the HHV6+/HCMV+ group. This worse renal function was confirmed after 60 months follow up, with significant higher creatinine levels in the HHV6 positive group (2.5 ± 0.4 vs. 1.3 ± 0.1 mg/d, HHV6+ vs HHV6 -, p<0.05When patients were analyzed according to clinical presentation of HCMV/HHV6 viremia, no difference was observed in serum creatinine between non treated and treated patients. In conclusion, despite the low number of patients in this series, co infection HHV6/ HCMV was associated with more clinical symptons, and higher need for anti viral treatment The worse renal function observed in the HCMV/HHV6 group after 5 years of follow up can be secondary to the more severe HCMV infection, as well as to the temporary adjustment of immunossuppressive treatement, that can be associated to subclinical acute rejection episodes / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Avaliação clinica e microbiologica da remoção temporaria do arco no restabelicemnto da saude bucal em pacientes com aparelho fixo ortodontico e com gengivite cronica / Clinical and microbiological evaluation of the impact of temporary arch removal in the periodontal condition of patients with fixed orthondic appliancesSallum, Emerson Jose 27 July 2006 (has links)
Orientador: Darcy Flavio Nouer / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-07T04:22:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2006 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar, em pacientes portadores de aparelhos ortodônticos fixos e gengivite crônica, o impacto da remoção do arco ortodôntico no restabelecimento da saúde bucal. Foram incluídos 16 pacientes com aparelho ortodôntico em tratamento na Clinica de Pós-Graduação de Ortodontia da FOP-UNICAMP. Todos os indivíduos selecionados foram avaliados inicialmente e 15 dias após a remoção do arco para os seguintes parâmetros clínicos e microbiológicos: índice de placa dental - (IP); índice de sangramento à sondagem - (ISS); profundidade de sondagem -(PS); medição dos compostos sulfurados voláteis (CSV's) através do uso do monitor portátil de sulfetos (HALlMETER@) e teste microbiológico - (PCR) para detectar a presença de patógenos periodontais. (Actinobacillus actinomycetemcomitans, Tannerella forsythus, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia e Prevotella nigrescens). Após os exames iniciais, os arcos de todos os pacientes foram removidos e os mesmos foram orientados a manter seus hábitos de higienização oral por um período de 15 dias. Após este período, os parâmetros clínicos e microoiológicos foram novamente avaliados. Observou-se uma redução significante no sangramento à sondagem, índice de placa, profundidade de sondagem e níveis de CSV's. A avaliação microbiológica revelou redução significante nos níveis de Tannerella forsyfhus (Tf). Quanto aos demais patógenos avaliados, não foram observadas diferenças significantes. Dentro dos limites desta pesquisa, pode-se concluir que a remoção do arco e a manutenção do regime rotineiro de higienização do paciente promovem melhora significativa na condição clínica gengival, entretanto, com excessão da Tf, não altera significativamente a presença dos patógenos avaliados / Abstract: The goal of the present study was to evaluate the impact on the periodontal health of the removal of the orthodontic arch in patients under orthodontic treatment and showing, generalized gingivitis. Sixteen orthodontic patients of the Gradwate Clinic of Orthodontics of, the School of Dentistry at Piracicaba (FOP-UNICAMP) were included' in the study. Ali patients were examined at baseline and after 1i5 days for the following clinical and microbiological parameters: Plaque index (IP); bleeding on probing (ISS); probing pocket depth -(PS); levei of volatile sulfur compounds (CSV's) using the portable sulfur monitor (HALlMETER@) and microbiological test - (PCR) to detect the presence of periodontal pathogens (Actinobacillus actinomycetemcomitans, . Tannerella forsythus, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermédia e Prevotella nigrescens). After the initial exam, the orthodontic archs of ali the patients were removed and they were instructed to mantain their routine oral hygiene habits for a period of 15 days. After this period, all the clinical and microbiological parameters were again obtained. A significant reduction was observed in the bleeding on probing, plaque index, probing pocket depth and levels of volatile sulfur compounds. The microbiological analysis revealed a significant reduction on the levels of Tannerella forsythus (Tf). However, no statistically significant differences were observed on the levels of the remaining valuated pathogens. Within the limits of the present study, it can be concluded that the removal of the orthodontic arch and the maintenance of the routine oral hygienic habits may improve gingival health. However, with the exception of Tf, they do not significantly alter the presence of the remaining periodontal pathogens evaluated. / Doutorado / Ortodontia / Doutor em Radiologia Odontológica
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Caracterização de Staphylococcus aureus enterotoxigenicos utilizando as tecnicas de RAPD e SDS-PAGEBonetti, Fabiana Bertoni 21 July 2018 (has links)
Orientador: Jose Luiz Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T02:30:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1996 / Resumo: Um total de 26 linhagens enterotoxigênicas de Staphylococcus aureus foram caracterizadas utilizando-se os perfis de fragmentos de DNA gerados pela técnica de RAPD por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e os perfis eletroforéticos de proteínas totais obtidos por eletroforese em gel de poliacrilamida contendo SDS (SDS-P AGE). Dezessete linhagens foram isoladas de leite cru de diferentes fazendas do estado de São Paulo, e cinco foram provenientes de presunto adquirido em padarias da cidade de Campinas (SP). As quatro linhagens restantes foram as linhagens 772 (EEA), S6 (EEB), 1230 (EEC) e 1151 (EED) fornecidas pelo Food Research lnstitute - FRI, Madison, USA. Cinco primers compostos de 10 pares de bases foram utilizados para gerar os perfis de fragmentos de DNA, que variaram de 0.5 a 4.0 kb. As 26 linhagens fora;m agrupadas em 2 sub-grupos a um nível de 40% de similaridade, revelando uma variabilidade muito grande entre elas. O perfil eletroforético de proteínas totais permitiu discriminação visual das linhagens, que foram agrupadas em 2 sub-grupos a um nível de similaridade de 90 a 100%. Os resultados deste trabalho revelaram não haver correlação entre as características obtidas pelas duas técnicas (RAPD e SDS-P AGE) e a produção de toxinas. / Abstract: A total of 26 enterotoxigenic strains of Staphylococcus aureus were characterized by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) profiles using polymerase chain reaction (PCR), and by whole-cell protein patterns using sodiurn dodecyl sulfate-polyacrilamide gel electrophoresis (SDS¬P AGE). Seventeen strains were isolated from raw milk, obtained from several farms in the same geographic location in the state of São Paulo, and five strains were isolated from ham bought in different bakeries from Campinas (SP) city. The other four strains were 772 (SEA), S6 (SEB), 1230 (SEC) and 1151 (SED) provided by Food Research Institute- FRI, Madison, USA. Five primers, each one of 10 bp were used to generate the RAPD profiles. The molecular size of the fragments ranged of 0.5 to 4.0 kb. The 26 strains were clustered into two sub-groups at the 400/0 similarity level, this showing a great variability among them. Protein patterns allowed visual discrimination of strains, which were clustered into two sub-groups at the 90 to 100% similarity level. In this study, the results revealed that there is no correlation between the characteristics obtained in these two techniques (RAPD and SDS-P AGE) and the toxin production. / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Otimização da nested-PCR em turbo unico na detecção do RNA-HCVVerlengia, Rozangela 30 December 1999 (has links)
Orientador: Mario Hiroyuki Hirata / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-26T02:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1999 / Resumo: No presente estudo foi otimizado uma metodologia de nested-PCR em tubo único para a detecção do RNA-HCV. As condições da nested-PCR em tubo único foram estabelecidas utilizando um controle recombinante, produzido pela amplificação da região 5'-UTR do genoma do HCV, clonado no vetor pBluescript KS-, do qual removeu-se 72 nucleotídeos da região interna do fragmento clonado através da digestão com a enzima PpuM I. A amplificação de um único fragmento ao término da reação da nested-PCR em tubo único foi alcançado quando foram utilizadas as seguintes concentrações: 2 mM de 'MgCI IND. 2+', 5 nM e 200 nM de primers externos e internos respectivamente, e temperaturas de hibridação de 72°C e 46°C para a primeira e segunda etapas da reação. Foram utilizados 20 ciclos para a primeira etapa e 35 ciclos para a segunda etapa da reação. Ensaios de sensibilidade usando diferentes números de cópias do controle recombinante (pB-HCV-2), detectaram um mínimo de 900 cópias, que comparado com a nested-PCR convencional mostrou sensibilidade 10 vezes inferior. A diferença na sensibilidade observada entre as duas metodologias não interferiu na detecção do RNA-HCV quando amostras biológicas foram testadas. Nossos dados indicam que a nested-PCR em tubo único desenvolvida pode ser empregada para a detecção do RNA-HCV mostrando potencialidade para o uso na clínica, como um método alternativo par.a a detecção do RNA-HCV / Abstract: In the present study a methodology was optimized to a nested-PCR in single tube for the detection of RNA-HCV. The sequences of primers were chosen allowing different optimum annealing temperature between the first and second PCR reaction in single tube. PCR conditions were established using an control produced by amplification of 5' NCR from genome that is highly conserved deleting 72 nucleotides with the enzyme PpuM I and cloned into pBluescript KS vector. The amplification of a single fragment at the end of a single tube reaction in the nested-PCR was reached when concentrations of 2 mM of 'MgCI. Ind 2', 5 nM and 200 nM of external and internal prímers, were used respectively. The temperature of annealing used was 72°C and 46°C for the first and second stage of the nested PCR reaction, with 20 and 35 cycle of al!lplification respectively. Sensibility tests, using different numbers of copies of the control (pB-HCV-2) were able to detect about 900 copies using our method. The conventional nested-PCR showed sensibility 10 times higher, detecting 90 copies. The difference in the sensibility observed between the two methodologies didn't interfere in the detection of RNA HCV when biological samples were tested. Our data indicated that the nested PCR in single tube developed can be used for the detection of RNA-HCV as an alternative method for the detection of RNA-HCV in clinical samples / Doutorado / Doutor em Biologia e Patologia Buco-Dental
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Analise de polimorfismo do gene da amelogenina XTrevilatto, Paula Cristina 20 July 1999 (has links)
Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-28T15:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1999 / Resumo: O estudo visou buscar polimorfismos do gene da amelogenina X (AMGX). Para tanto, analisou 79 indivíduos do sexo feminino (158 cromossomos), de etnias diferentes, quanto à presença de variações de sítios de restrição (RFLP) em cinco segmentos intragênicos amplificados por PCR. Uma deleção de aproximadamente 700 pb foi evidenciada em uma paciente, provavelmente em região intrônica, pois não foi observada qualquer alteração fenotípica no esmalte dental. Foram detectadas duas formas variantes com relação ao padrão de restrição da enzima Rsa I no
segundo intron do gene. O trabalho também reportou a extração e amplificação de DNA genômico de alta massa molecular a partir de células epiteliais em processo de descamação da mucosa bucal. O método de obtenção de DNA a partir dessas células é não-invasivo, rápido, fácil e barato, sendo especialmente indicado na coleta de DNA de crianças e pessoas relutantes em doar sangue. Além disso, não apresenta riscos de infecção e dispensa a supervisão médica, podendo ser utilizado com sucesso em amostragens populacionais de larga escala e em estudos epidemiológicos / Abstract: The study aimed to search for polymorphisms of the amelogenin X (AMGX) gene. It analyzed 79 female individuaIs (158 chromosomes), from different races, as for the variations of restriction sites (RFLP) of five fragments of the AMGX amplified by PCR. A deletion of about 700 bp was observed in one of the patients, probably in an intronic region. No phenotypic alterations were noted in the dental enamel of this individual. Two variant forms were visualized with two different pattems of restriction of the enzyme Rsa I in the second intron of the gene. The number of women studied is small to precisely determine the frequency of the alleles in the population. The work also reported the extraction and amplification of genomic DNA of high molecular mass from epithelial cells of the bucal mucosa. The method using DNA obtained from these cells is easy, rapid, cheap and non-invasive, being especially indicated for DNA collection of children and people reluctant to donate blood. In addition, it does not present risks of infection and require no medical supervision. It can be successfully employed in large scale populational samplings and in epidemiological studies / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental
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Citomegalovirus em transplantados hepaticos : diagnostico e monitorização por meio do estudo comparativo entre antigenemia e "Nested-PCR"Fioravanti, Jose Benedito 08 October 2001 (has links)
Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T00:49:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2001 / Resumo: o Citomegalovirus Humano (HCMV) é um dos mais importantes patógenos que acometem pacientes submetidos a transplante hepático, estando associado à alta morbidade e mortalidade. Atualmente faz-se necessário o emprego de técnicas laboratoriais que sejam rápidas, sensíveis e específicas,no diagnóstico do HCMV, a fim de ser instituído um tratamento antiviral o mais precoce possível. Neste estudo, foram feitas comparações entre duas técnicas laboratoriais distintas: a "Nested-PCR" e a antigenemia, avaliando a eficácia das mesmas na monitorização de infecção ativa e doença por HCMV, neste grupo de pacientes. Dessa maneira, foram pesquisados pacientes submetidos a transplante hepático no Hospital de Clínicas da FCM/UNICAMP, desde antes do transplante até seis meses após o ato cirúrgico, tanto em ambiente hospitalar, quanto ambulatorial. Posteriormente, foi feita uma análise das duas metodologias diagnósticas utilizadas, comparando-as quanto à sua eficácia. Foram avaliados 27 pacientes, de setembro de 1998 a janeiro de 2.001, acompanhando o doador no pré-transplante, e o receptor até, no mínimo, 180 dias após a cirurgia. Realizaram-se 12 coletas de sangue de cada paciente receptor, sendo essas coletas: semanais durante o primeiro mês; quinzenais, nos segundo e terceiro mês, e mensais posteriores até o sexto mês. Conforme dados anteriores na literatura confirmados por este trabalho, a cirrose
hepática provocada pelo vírus C foi o principal fator etiológico (55,55%) do transplante hepático, sendo que a cirrose alcoólica aparece como segundo maior (29,63%). Foi observado no pré transplante que, dos 27 pacientes, 92% dos transplantados já haviam tido contato anterior com o HCMV (Sorologia IgG positiva), 15% dos receptores apresentaram "Nested-PCR" positiva e 5% Antigenemia positiva. Segundo os critérios de infecção ativa, 25/27 (92%) dos pacientes apresentaram infecção ativa, sendo que em 12/27 (44%) destes, foram acompanhadas manifestações clínicas compatíveis com HCMV doença, sendo a febre (72%), e a mialgia (43%) as mais
comuns, tendo também alterações das enzimas hepáticas (57%) e leucopenia (11%). o trabalho demonstra que a "Nested-PCR" se positiva, em média, com 47 dias pós-transplante, precedendo em 20 dias as manifestações clínicas, enquanto que a Antigenemia, se positiva, em média, após 85 dias do transplante. Dos pacientes estudados, cinco evoluiu a óbito, e destes, três com manifestações clínicas de doença pelo HCMV. Em conformidade com estudos anteriores, a doença pelo HCMV, nos pacientes transplantados hepáticos estudados ocorreu nos três primeiros meses pós-transplante. Deste modo, releva-se a importância clínica da detecção precoce do HCMV em pacientes transplantados hepáticos, e que as técnicas da "Nested-PCR" e da Antigenemia, empregadas neste trabalho, se mostraram adequadas para a monitorização destes pacientes em relação à infecção pelo HCMV / Abstract: The human cytomegalovirus (HCMV) is one of the most important pathogens that undertakes hepatic transplantation patients, with a high mortality and morbidity, being its early diagnosis by means laboratorial tests such as PCR and Antigenemia, a primary issue. In our study we assisted 27 patients ftom September 1988 to January 2001, performing serological techniques (ELISA), PCR and Antigenemia in the pretransplantation patients and two Iast tests in the follow up at least, 150 days in the post-transplantation. It was observed that among the 27 patients, 92% had a already had a previous contact with HCMV (IgG positive in the pre-transplantation). Also 15% presented a positive PCR, and only 5% presented a positive Antigenemia before transplantation. According to previous data, and confirmed by this research, the hepatic cirroshis caused by the virus C was the main cause (59%) for hepatic transplantation, from which 40% appears as an isotaded form, including that the alcoholic cirrhosis appearing as the second highest incidence (33%), 14% as an isolated form. Our research shows that PCR test becomes positive it takes around 47 days after transplant, as the Antigenemiatest takes nearly 85 days. In accordance with active infection standards, 92% (25/27) of the patients presented an active infection course, by of which 44% (12/27) were followed by clinical manifestations consistent with the HCMV disease. The most common clinical symptoms were fever (72%) and myalgia (43%), followed by hepatic enzymes alterations (57%) and leukopenia (11%). Among the analysed patients, 05 decreased and wich, 03 of them (60%) had clinical manifestation of the HCMV disease. In conformity with previous data, the HCMV disease in hepatic transplantation patients occurred in the first 3 months after transplantation. Thus we have demonstrated the clinical importance of the early detection of HCMV in hepatic transplantation patients and that HCMV infection is a frequent problem in hepatic transplant patients in Brazil, with significant clinical complications / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Rastreamento bioquimico e molecular de portadores assintomaticos de neoplasia endocrina multipla tipo 2AVieira, Alexandre Eduardo Franzin 09 November 2001 (has links)
Orientadores: Margaret de Castro, Maricilda Palandi de Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T02:58:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2001 / Resumo: A Neoplasia Endócrina Múltipla (NEM) tipo 2A é caracterizada pela presença de Carcinoma Medular de Tireóide (CMT), feocromocitoma e hiperparatireoidismo. Esta síndrome pode ser diagnosticada em portadores assintomáticos pertencentes a famílias de indivíduos acometidos pela síndrome utilizando-se testes periódicos de estimulação da secreção de calcitonina pela gastrina. Entretanto, a analise do DNA genomico permite a identificação destes indivíduos, possibilitando diagnostico mais precoce e tratamento preventivo. O objetivo deste trabalho foi analisar dois diferentes testes de rastreamento de CMT, com a finalidade de diagnosticar portadores assintomáticos de famílias com indivíduos com NEM 2 A: um teste bioquímico utilizando o omeprazol e a analise molecular do gene do protooncogene com NEM 2A foram submetidos ao teste de secreção de calcitonina induzida pelo omeprazol. Calcitonita e gastrina foram determinadas por imunoensaios. DNA genomico foi extraído de sangue total dos 15 indivíduos que concordaram com o estudo. Os exons 10 e 11 foram amplificados por PCR e os produtos analisados por seqüenciamento direto. O teste de estimulo da secreção de calcotonina pelo omeprazol não identificou nenhum portador assintomático. Entre os membros da família 1 encontramos três indivíduos afetados pela mutação germinativa TGC ->TAC (C634Y). Dois irmãos apresentavam CMT, sendo que na irmã associavam-se feocromocitoma e hiperparatireoidismo; o filho desta ultima, de nove anos de idade, apresentava status previamente desconhecido. O estudo da família 2 demonstrou a mutação TGC ->CGC (C634R) somente no caso-indice. Esta paciente apresentava alem do CMT, feocromocitoma, hiperparatireoidismo e líquen amiloidotico cutâneo. Seus pais e seus quatro irmãos, todos assintomáticos, não apresentaram esta mutação, sugerindo que a mutação C634R ocorreu de novo nesta paciente. Em conclusão, a especificidade do teste do omeprazol foi limitado e a eficácia deste teste permanece a ser estabelecida. As duas mutações mais freqüentemente encontradas no protooncogene RET na NEM 2A, estão presentes em famílias brasileiras. A analise molecular deverá ser o procedimento de escolha para o rastreamento de famílias com NEM 2A, desde que é preciso e dispensa testes bioquímicos repetitivos / Abstract: Patients with MEN type 2A are at risk for early medullary thyroid carcinoma (MTC), which might be diagnosed by periodical gastrin-induced calcitonin tests. However, direct DNA analysis permits the identification of asymptomatic mutant carriers in a family, providing an early and definitive diagnosis. We performed different screening tests for MTC, a recently reported biochemical screening test using omeprazole and DNA analysis. Fifteen members of two non-consanguineous Brazilian famílies with MEN 2A were submitted to the omeprazole-induced calcitonin stimulation test. Serum calcitonin and gastrin were determined by immunoassays. RET proto-oncogene analysis was carried out by direct DNA sequencing of PCR-amplified products for exons 10 and 11. Family 1 showed a TGC~ TAC (C634Y) germline mutation in three individuais. Two brothers with symptomatic MTC, one of them also associated with pheocromocytoma and hyperparathyroidism whose son was a nine-year-old boy of previously unknown status. Famíly 2 showed a TGC~CGC (C634R) mutation only in the index case, who presented cutaneous lichen amyloidosis in addition to MTC, pheocromocytoma and hyperparathyroidism. Neither her parents nor her four brothers showed this genetic mutation. The two most frequent RET protooncogene mutations in MEN 2A are present in Brazilian families. In addition, the specificity of basal and omeprazole-stimulated calcitonin is rather limited and the efficacy of the omeprazole test still remains to be systematically examined. Therefore, RET proto-oncogene analysis must be the first choice for a screening procedure to identify mutant gene carriers in MEN 2A family members and to permit early prophylactic treatment / Mestrado / Patologia Clinica / Mestre em Ciências Médicas
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Avaliação da influencia que o cemento dental pode exercer sobre a modulação genica durante o processo de regeneração periodontal : estudo em humanos / Effect of dental cementum on genes modulate during periodontal regeneration. Study in humansLima, Liana Linhares 14 February 2007 (has links)
Orientadores: Francisco Humberto Nociti Junior, Sergio de Toledo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T05:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2007 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi caracterizar o perfil de expressão gênica do tecido de granulação formado em defeitos infraósseos tratados pelo princípio da RTG, na presença ou não de cemento dental. Para isto, foram selecionados 30 pacientes portadores de periodontite crônica e com pelo menos um dente apresentando defeito do tipo vertical sem envolvimento endodôntico e indicado para extração. Os pacientes foram divididos em dois grupos experimentais de acordo com seu histórico de terapia periodontal prévia ou não: Controle: remoção do tecido de granulação e uma cuidadosa raspagem e alisamento radicular, utilizando curetas e brocas, objetivando a completa remoção dos depósitos duros e moles e do cemento radicular e Teste: a remoção do tecido de granulação, destacamento de cálculos grosseiros e descontaminação radicular com micro escovas e soro fisiológico objetivando a preservação do cemento radicular. Em ambos os grupos, os defeitos foram tratados com o princípio da Regeneração Tecidual Guiada (Goretex®), os retalhos foram posicionados coronariamente e suturados. Após 21 dias, o tecido formado sob a membrana foi coletado e armazenado para extração do RNA total e análise por meio do PCR quantitativo (PCRq), o dente foi extraído e avaliado histológicamente. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste t de Student com nível de significância de 0,05 e foram agrupados de acordo com a função de cada gene: genes relacionados ao processo de formação óssea/cementária - fosfatase alcalina, osteopontina, ¿receptor activator of NF-kß ligand¿ (RANKL) e osteoprotegerina não apresentaram diferença estatística entre os grupos controle e teste. Porém quando avaliados os níveis de mRNA de osteocalcina (OCN) (3,84±1,01 e 1,83±0,57; p=0,001), colágeno I (3,98±1,07 e 2,85±0,99; p=0,024), colágeno III (2,59±0,99 e 1,39±0,76; p=0,008), fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF-1) (1,78±0,45 e 2,53±0,40; p=0,001) fator de crescimento de fibroblasto (bFGF) (7,07±1,20 e 9,77±2,35;p=0,005) e sialoproteína óssea (BSP) (16,43±3,93 e 23,34±3,19; p=0,001) foi encontrada uma diferença estatística entre os grupos. Genes relacionados à inflamação: interleucina 1ß(IL-1ß) e interleucina 6 (IL-6) observou-se que não houve diferença estatística entre os grupos, porém para IL-4 (14,89±4,14 e 24,01±7,00; p=0,002) houve uma maior expressão deste gene no grupo teste. Quanto aos genes relacionados à degradação da matriz: para a MMP-2 houve uma diferença estatística no nível de mRNA entre os grupos (1,72±0,18 e 1,27±0,27; p=0,001), enquanto que para a MMP-9 não foi encontrada nenhuma diferença estatística. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que o cemento dental pode modular o processo de regeneração periodontal regulando a expressão dos genes PDGF-1, bFGF, BSP , IL-4 ,OCN , Col I e Col III / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the influence of the dental cementum on gene expression during periodontal regeneration. Thirty patients were selected presenting chronic periodontal disease and with at least one tooth presenting vertical bone defect without endodontic involvement and referred to extraction. The patients were divided into two groups according to history or not of periodontal therapy: Control: Scaling and root planning was made by means of hand androtators instruments in order to remove soft and hard deposits as well as all root cementum; Test: Removal of only soft microbial deposits and cleaning of the root surface with micro brush was performed with the aim to preserve maximum root cementum. Both groups were treated with guided tissue regeneration (GTR), with non reasonable membranes (Goretex®) covering the buccal and lingual aspects of the defect and the flaps were coronally positioned and sutured. After 21 days, the tissue formed under the membrane was collected and stored for polymerase chain reaction (PCR) analysis; the tooth was extracted and submitted to histological evaluation. Data analysis did not show any statistical difference between the two experimental groups and the following genes expression: alkaline phosphatase, osteopontin (OPN), "receptor activator of NF-kß ligand¿ (RANKL), osteoprotegerin (OPG), interleukin 1 (IL-1ß), interleukin 6 (IL-6) and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9). On the other hand, the presence of dental cementum significantly affected the following genes: osteocalcin (OCN) (3.84±1.01 and 1.83±0.57; p=0.001), type I collagen (3.98±1.07 and 2.85±0.99; p=0.024), type III collagen (0.55±0.15 and 0.45±0.13;p=0.008), platelet - derived growth factor (PDGF) (1.78±0.45 and 2.53±0.40;p=0.001), matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) (1.72±0.18 e 1.27±0.27; p=0.001) and interleukin 4 (IL-4) (14.89±4.14 e 24.01±7.00; p=0.002). Therefore, within the limits of this study, it can be concluded that dental cementum can modulate periodontal regeneration / Mestrado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica
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Infecção ativa por citomegalovirus em idosos com criterios de fragilidade / Active citomegalovirus infection in elderly with frailty's criteriaCaldeira, Marcelo Henrique Reis 15 August 2018 (has links)
Orientadores: Sandra Cecilia Botelho Costa, Maria Elena Guariento / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T05:01:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 / Resumo: Há crescente interesse no entendimento da evolução e da eventual prevenção da Fragilidade, bem como do processo fisiopatológico das doenças desencadeante desta síndrome de importante repercussão funcional. Pesquisas têm demonstrado que a infecção crônica latente por CMVH na população geronte apresenta alta prevalência em idosos frágeis sendo um importante desencadeante de limitações, mas poucos artigos são encontrados ao buscar associação entre esta síndrome e infecção ativa por CMVH. Objetivos: Detectar e comparar a incidência de infecção ativa por CMVH em idosos que apresentem critérios de Fragilidade, utilizando Real-Time -PCR para CMVH, e verificar a correlação entre estes critérios de Fragilidade e a positividade para CMVH. Metodologia: trata-se de um estudo transversal com 55 idosos, acompanhados no Ambulatório de Geriatria e em outros ambulatórios do Hospital de Clínicas da Unicamp, sendo utilizados 04 dos 05 critérios de Fragilidade proposto por Fried e colaboradores (2001); avaliou-se a presença de infecção ativa por CMVH através do Real-Time PCR e posteriormente fez-se à análise dos prontuários desses pacientes. Resultados: o número de pacientes por cada critério de Fragilidade e as médias de medicamentos em uso foram concordantes com a literatura. Relacionando critérios para Fragilidade com o número de medicamentos em uso e número de enfermidades por pacientes, observou-se associação positiva entre esses fatores. Quanto ao número de medicamentos em uso, houve prevalência do sexo feminino; as quatro principais categorias de enfermidades classificadas pelo CID-10, apresentadas pelos pacientes incluídos no estudo foram: doenças do aparelho circulatório (76,47%), doenças endócrinas (47,05%), doenças do sistema osteomuscular e do tecido conjuntivo (45,09%) e doenças metabólicas (33,33%). A reação de amplificação em tempo real das 55 amostras para detecção do CMVH foi negativa em todas amostras, caracterizando a ausência de atividade do CMVH nesta população estudada. Conclusão: mesmo havendo importante associação entre citomegalovirose latente e Síndrome da Fragilidade, neste estudo não foi possível verificar a presença de infecção ativa do CMVH e sua relação com os critérios de Fragilidade estudados; achamos necessária a realização de novos estudos para elucidação da provável associação entre infecção ativa por CMVH e critérios de Fragilidade / Abstract: There is growing interest in understanding the evolution and possible prevention of Frailty, as well as the pathophysiological process of diseases that trigger this syndrome with important functional consequences. Research has shown that chronic latent HCMV in the elderly population is highly prevalent in the frail elderly and is an important trigger of limitations, but few articles are found to seek an association between this syndrome and active infection by HCMV. Objectives: To determine and compare the incidence of HCMV active infection in the elderly presenting Frailty's criteria, using Real-Time PCR for HCMV, and verify the correlation between these criteria of Frailty and positivity HCMV. Methodology: This is a cross-sectional study with 55 individuals, followed at the Department of Geriatrics and other outpatient clinics of the Hospital de Clinicas da Unicamp, being used 04 of the 05 Frailty's criteria proposed by Fried and colleagues (2001), we evaluated the presence of active infection through Real-Time PCR and subsequently became the analysis of records of these patients. Results: The number of patients for each criterion of Frailty and the averages of medications were consistent with the literature. Frailty's criteria relating to the number of medications and number of illness for patients, we observed a positive association between these factors. The number of medications in use were females prevalence, and the four main categories of diseases classified by ICD-10, presented by the patients included in the study were: cardiovascular diseases (76.47%), endocrine disorders (47, 05%), diseases of the musculoskeletal system and connective tissue (45.09%) and metabolic diseases (33.33%). The amplification reaction in real time from 55 samples for detection of HCMV was negative in all samples, characterizing the absence of HCMV activity in this population. Conclusion: Even with significant association between latent cytomegalovirus infection and Frailty syndrome, in this study was not possible to verify the presence of HCMV active infection and its relation to the criteria of Frailty studied, we find necessary to carry out further studies to elucidate the possible association between active infection by HCMV and Frailty criteria / Mestrado / Gerontologia / Mestre em Gerontologia
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