Resumo: A resposta do metabolismo ósseo está diretamente relacionada a fatores hormonais e ao estímulo mecânico que o osso está exposto. A energia ultrassônica na cicatrização do reparo ósseo têm se mostrado de fundamental importância para o estímulo e melhora na qualidade do tecido neoformado durante o processo de cicatrização óssea. O objetivo deste estudo foi analisar a ação do ultrassom de baixa intensidade no reparo ósseo de tíbias osteotomizadas de ratos submetidos à suspensão pela cauda, por meio das análises histológica e histomorfométrica. Dezoito Rattus novergicus albinus, Wistar adultos foram divididos em três grupos, (G1, G2 e G3), dispostos da seguinte maneira: G1 (n=6), que permaneceram livres por um período de 15 dias; G2 (n=5), suspenso pela cauda por um período de 15 dias e G3 (n=7), suspensos pela cauda por um período de 36 dias. Todos os animais foram submetidos à cirurgia para confecção do defeito ósseo experimental na região medial da diáfise, em ambas as tíbias. A tíbia direita foi tratada com ultrassom pulsado (frequência de 1,5 MHz, ciclo 1:4, 30mW/cm2), por 12 sessões de 20 minutos, e o membro contralateral foi o controle. As amostras das tíbias foram submetidas à análise histológica, às cegas, com microscopia de luz comum e a análise histomorfométrica, pelo software específico Image-pro 6.1. As médias percentuais de neoformação óssea foram submetidas à análise de variância em parcela subdividida e teste de comparação múltipla "Student-Newman- Keuls" (SNK), com nível de significância de 5%. Os valores das médias e desvios padrão, da porcentagem de osso neoformado para os grupos, demonstraram uma menor quantidade no reparo ósseo do G1t(13,62  4,88) - G1c (8,68  4,16) quando comparado aos grupos G2t (27,17  11,36) - G2c (10,10  7,90) e G3t (23,19  5,61) - G3c (15,74  7,08). No entanto... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The response of bone metabolism is directly related to hormonal factors and mechanical stimulation to the bone is exposed. The ultrasonic energy on the healing of bone repair have been shown to be of fundamental importance to promoting and improving the quality of newly formed tissue during the bone healing process. The objective of this study was to analyze the action of low-intensity ultrasound on bone healing of tibial osteotomy in rats subjected to tail suspension, by means of histological and histomorphometric analysis. Eighteen Rattus novergicus Albinus, Wistar rats were divided into three groups (G1, G2 and G3), arranged as follows: G1 (n = 6), who remained free for a period of 15 days, G2 (n = 5), suspended by the tail for a period of 15 days and G3 (n = 7), suspended by the tail for a period of 36 days. All animals underwent surgery to make the experimental bone defect on the medial aspect of the diaphysis in both tibias. The right tibia was treated with pulsed ultrasound (frequency of 1,5 MHz, duty cycle 1:4, 30mW/cm2), for 12 sessions of 20 minutes, and the contralateral limb was the control. Samples of tibia were subjected to histological analysis, blindly, with common light microscopy and histomorphometric analysis by specific software Image-Pro 6.1. The average percentage of new bone formation were subjected to analysis of variance in a split plot test and multiple comparison Student-Newman-Keuls (SNK), with a significance level of 5%. The mean values and standard deviations of the percentage of newly formed bone for the groups showed a smaller amount in the healing of G1T (13,62  4,88) - G1C (8,68  4,16) in comparison with the G2T (27,17  11,36) - G2C (10,10  7,90) and G3t (23,19  5,61) - G3C (15,74  7,08). However, the mean values and standard deviations... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Marinho / Coorientador: Mário Jefferson Quirino Louzada / Banca: Cristina Maria Rodrigues Monteiro / Banca: Nivaldo Antonio Parizotto / Mestre

Orientador: Elcio Marcantonio Junior / Co-orientador: Luís Antonio Violin D. Pereira / Banca: Ulf M. E. Wikesjo / Banca: Eliane dos Santos Porto Barboza / Banca: Jamil Awad Shibli / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Resumo: O objetivo do estudo foi comparar o uso de rhBMP-2/ACS com o do enxerto ósseo autógeno para aumento ósseo em espessura na região anterior de maxila. 24 pacientes foram selecionados e divididos de forma randomizada em 2 grupos: Grupo 1 - rhBMP-2/ACS ou Grupo 2 - enxerto ósseo autógeno intraoral particulado. Uma malha de titânio foi utilizada para manutenção do arcabouço dos enxertos. O ganho ósseo clínico, a análise histológica/histomorfométrica (biópsia aos 6 meses), tomografias (pré-operatória, 3 e 6 meses) e PCR em tempo real (raspagem de osso neoformado obtida aos 6 meses) foram os métodos de avaliação. Clinicamente, o pós-operatório foi estável. O aumento ósseo médio em espessura clínica foi 3,2±0,9 vs. 3,7±2,1mm (p=0,31) para o Grupo 1 e Grupo 2, respectivamente. O Grupo 1 apresentou aumento ósseo tomográfico significante aos 2mm da crista óssea quando comparado ao Grupo 2 (1,5±0,7 vs. 0,5±0,9mm; p=0,01). Na análise histológica, o Grupo 1 apresentou uma medula óssea significativamente rica em células e vasos sanguíneos (p=0,002) quando comparado ao Grupo 2, entretanto, nenhuma diferença estatística foi encontrada para os outros parâmetros. PCR em tempo real resultou em maior expressão gênica de BMP2 e Runx2 (p=0,001 e p=0,0021, respectivamente) no Grupo 1 e RANKL:OPG, BSP e OPN no Grupo 2 (p=0,01, p=0,005 e p=0,0009, respectivamente). Um total de 62 implantes foram instalados aos 6 meses. Em conclusão, o Grupo 1 apresentou um aumento ósseo clínico e tomográfico comparável ao Grupo 2, apresentando um resultado histológico e de expressão gênica superior, sugerindo ser uma alternativa viável ao enxerto ósseo autógeno. / Abstract: The objective of this study was to compare bone augmentation in the anterior maxilla following implantation of rhBMP2/ACS vs. autogenous bone graft. In this study, 24 patients were selected and equally randomized into 2 groups: Group 1 - rhBMP2/ACS or Group 2 - intraoral particulated autogenous bone graft. A titanium mesh was used for space provision in both Groups. Average clinical bone gain, histological/histomorphometrical (core biopsy obtained at 6 month), CBCT (preoperative, 3 and 6 months follow-up) and real time PCR (new bone scraped at 6 months) were used as evaluation methods. Clinical healing was generally uneventful. Mean clinical ridge width increased 3.2±0.9 vs. 3.7±2.1 mm (p=0.31) for Group 1 and Group 2, respectively. Group 1 yielded statistically significant CBCT bone gain only at subcrestal level compared with Group 2 (1.5±0.7 vs. 0.5±0.9mm; p=0.01). In the histological analysis, specimens from group 1 showed bone marrow significant richer in cells and capillaries (p=0.002) than Group 2, however no difference was found in other parameters. Real time PCR showed higher expression of genes BMP2 and Runx2 in Group 1 (p=0,001 e p=0,0021, respectively) and RANKL:OPG, BSP and OPN in Group 2 (p=0,01, p=0,005 and p=0,0009, respectively). A total of 62 implants were installed after 6 months. In conclusion, Group 1 supported clinically and tomographically relevant alveolar ridge augmentation of comparable magnitude to Group 2, presenting more favorable histological and gene expression results, suggesting an alternative for autogenous bone graft. / Doutor

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000431500-0.pdf: 1563957 bytes, checksum: 69f1b1753af9d037782b9078a3ce2f8f (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Tissue engineering, using pluripotent cells, biocompatible matrixes and growth factors, may play a major role in bone regeneration. Through living tissue biopsy, it is possible to obtain mesenchymal stem cells that, when expanded and cultivated in vitro, can generate several types of tissues. Thus, it is possible to present an alternative to bone grafts, since the amount of material collected is smaller when compared to conventional bone grafts. The present research aimed to find a better biocompatible matrix, evaluating, in vitro, the cytotoxicity of TEOSYAL® hyaluronic acid directly onto pre-osteoblastic lineage mouse cells denominated OFCOL II, in a quantitative and qualitative way. The following experimental groups have been formed: A) Cells + Hyaluronic Acid (HA) + Platelet Rich Plasma with thrombin (PRP) + Hydroxyapatite (HP); B) Cells + HA + PRP + HP; C) Cells + HA + HP; D) Cells + HP; E) Cells + HA; F) Cells + PRP with thrombin; G) Cells + PRP and H) Pure DMEM with 15% of Fetal Bovine Serum (FBS), used as a positive control. The OFCOL II cells were seeded 24 hours before the experiments and incubated at 37ºC with 5% CO2. After reaching the semi-confluence, the cells were exposed to the experimental groups for an additional period of 48 hours under the same temperature and humidity conditions. The cellular viability was evaluated through MTT test and compared to the positive control group H. The numerical values, obtained in absorbance, were subjected to statistical analysis of variance (ANOVA), complemented by TUKEY test, with significance level p < 0. 05 for comparison between all groups. As for comparisons between the control and each experimental group, the T test was used. In the cell morphology evaluation, it was used optical microscopy at magnification 100x. The results proved a decrease in cell viability in groups B (67% viability) and C (68% viability), differing from group D (99% viability). When comparing each experimental group to the positive control group, a statistical difference (p < 0. 05) was obtained for groups B, C and E. Therefore, through these results, it was observed a decrease in cellular viability in the groups with the presence of TEOSYAL® hyaluronic acid. The addition of PRP to hyaluronic acid improved cell viability since it was possible to obtain a survival rate of 79% (group A), although this stimulus was insufficient to enhance it. Regarding image analysis, morphological changes were found in experimental groups and control group. It is possible to conclude that the presence of TEOSYAL® hyaluronic acid exerted a decrease effect on the cell lineage OFCOL II viability. / A engenharia tecidual, dispondo de células, matrizes biocompatíveis e fatores de crescimento, pode exercer um grande papel na regeneração óssea. Através de biopsias de tecido vivo, pode-se obter células-tronco mesenquimais que, quando expandidas e cultivadas in vitro, são capazes de originar tecidos de diversos fenótipos. Desta maneira, é possível estabelecer uma alternativa aos enxertos ósseos, uma vez que a quantidade de material coletado é menor quando comparada aos enxertos ósseos convencionais. Essa pesquisa visou contribuir para a melhor escolha de uma matriz biocompatível, avaliando in vitro, de forma direta, a citotoxicidade do ácido hialurônico TEOSYAL® sobre as células da linhagem pré-osteoblástica de camundongos denominadas OFCOL II de forma quantitativa e qualitativa. Foram criados os seguintes grupos experimentais: A) células + Ácido hialurônico (AH) + Plasma rico em Plaquetas com Trombina (PRP) + Hidroxiapatita (HP); B) células + AH + PRP + HP; C) células + AH + HP; D) células + HP; E) células + AH; F) células + PRP com trombina; G) células + PRP e H) células + DMEM puro com 15% de soro bovino fetal, utilizado como controle. As células OFCOL II foram semeadas 24 horas antes dos experimentos e incubadas em estufa a 370C com 5% de CO2. Após atingirem a semi-confluência, as células foram expostas aos diferentes estímulos conforme o grupo experimental por um período adicional de 48 horas nas mesmas condições de temperatura e umidade.A viabilidade celular foi avaliada através do teste MTT e comparada ao grupo controle H. Os valores numéricos, obtidos através de absorbância, foram submetidos à análise estatística ANOVA, complementados por TUKEY, com nível de significância p < 0,05 para comparação entre todos os grupos. Já para as comparações entre cada grupo experimental e o controle foi utilizado o Teste T. Na avaliação da morfologia celular, foi utilizada a microscopia óptica em aumento de 100x e 200x. Os resultados encontrados comprovaram uma diminuição na viabilidade celular nos grupos B (67% de viabilidade) e C (68% de viabilidade), diferindo do grupo D (99% de viabilidade). Ao comparar cada grupo experimental ao grupo controle, foi obtida uma diferença estatística (p < 0,05) para os grupos B, C e E. Portanto, foi observado, através destes resultados, uma diminuição da viabilidade celular nos grupos com a presença do ácido hialurônico TEOSYAL®. A adição do PRP ao ácido hialurônico aumentou a 8 viabilidade celular, já que foi obtida uma viabilidade de 79% (grupo A), porém, insuficiente para potencializá-la. Nas imagens, foram encontradas diferenças morfológicas entre os grupos experimentais e o grupo controle. Pode-se concluir que a presença do ácido hialurônico TEOSYAL® causou diminuição na viabilidade da linhagem celular OFCOL II.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000426456-0.pdf: 5274187 bytes, checksum: 47ae4d3d3d6dffefaf869b1ee5c8c234 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Several techniques and materials have been suggested for the preservation of the alveolar ridge (ARP) following tooth extraction and prior to implant placement. This study, which is composed by two manuscripts, aimed to evaluate, through a randomized clinical trial, the radiographical bone changes following ARP with two different biomaterials and, through a systematic review of the literature, the evidences of the effect of this procedure following tooth extraction and whether it allows implant placement (with or without further augmentation). In the first paper, alveolar ridge preservation was performed in 27 patients randomized in 2 groups. Synthetic bone substitute (SBS) or a bovine-derived xenograft (BDX), both with a collagen barrier membrane (Bio-Gide®), have been used in the test and control groups, respectively. Standardised periapical x-rays were taken at regular time intervals from baseline (BL) to 8 months (8M). The levels of the alveolar bone crest at the mesial (Mbh), distal (Dbh) and central aspects (Cbh) of the socket were measured at all time points and compared to intrasurgical measurements. All the obtained radiographs were subtracted from the follow-up images.The gain, loss and unchanged areas in terms of grey values were tested for significant difference between the two groups. In the second chapter, both electronic and hand search looked for references that met specific inclusion and exclusion criteria. Two reviewers performed calibrated and independent screening, whereas a third reviewer was consulted for any disagreement. Randomized clinical trials, controlled clinical trials and prospective studies with a minimum of five patients and an unassisted socket healing as a control were included. The experimental clinical study showed that, between BL-8M, the Mbh and Dbh showed mean differences of 0. 9 ± 1. 2 mm and 0. 7 ± 1. 8mm, and 0. 4 ± 1. 3 mm and 0. 7 ± 1. 3mm, in the test and control groups, respectively (P>0. 05). Both treatments presented similar gain in grey values between the time intervals. The SBS presented less loss in grey values between BL-4M and BL-8M (P<0. 05). Radiographic assessment underestimated the intrasurgical measurements (mesial and distal) of an average 0. 3mm (95% CI, 0. 02-0. 6). Many different techniques, materials and methodologies were presented in the fourteen publications reviewed, making direct comparisons difficult. The radiographic findings of the randomized clinical trial showed that both types of bone grafts were efficient in preserving the dimensions of the alveolar ridge following tooth extraction, nevertheless any of them presented superiority in terms of radiographic alveolar bone changes from baseline to 8 months.The findings of the systematic review of the literature corroborated some of the preliminary findings of the clinical study and showed that, despite the heterogeneity of the studies, there is evidence that ridge preservation procedures are effective in limiting post extraction ridge dimensional loss and are accompanied by a different degree of bone regeneration, with varying amounts of residual particles of the “grafting materials”. However, the exposure of membranes with GTR procedures may compromise the results. There is no evidence to support the superiority of one technique over the other as well as the importance of ridge preservation in improving the ability of placing implants, implant survival/ success rate, aesthetics, treatment economy, timing or patient satisfaction. / Várias técnicas e materiais têm sido sugeridos para a preservação do rebordo alveolar (PRA) após a extração dentária e antes da colocação do implante. Este estudo, o qual é composto por dois manuscritos, buscou avaliar, através de um ensaio clínico randomizado, as alterações ósseas radiográficas após a PRA com dois diferentes biomateriais e, através de uma revisão sistemática da literatura, as evidências do efeito deste procedimento após a extração dentária e se ele permite a colocação do implante (com ou sem enxerto adicional). No primeiro capítulo, a preservação do rebordo alveolar foi realizada em 27 pacientes divididos em 2 grupos. Um substituto ósseo sintético (SOS) ou um xenoenxerto derivado de bovinos (XDB), ambos com uma membrana de colágeno como barreira (Bio-Gide®), foram utilizados nos grupos teste e controle, respectivamente. Radiografias periapicais padronizadas foram tiradas em intervalos regulares de tempo, do tempo inicial (TI) aos 8 meses (8M). Os níveis da crista óssea alveolar nos aspectos mesial (Mav), distal (Dav) e central (Cav) do alvéolo foram medidas em todos os intervalos de tempo e comparados às medições intra-cirúrgicas. Todas as radiografias obtidas foram subtraídas das imagens de acompanhamento. As áreas de ganho, de perda ou inalteradas em termos de níveis de cinza foram testadas para diferença significativa entre os dois grupos. No segundo capítulo, ambas pesquisas eletrônica e manual procuraram por referências que atenderam a critérios específicos de inclusão e exclusão. Dois revisores realizaram uma triagem calibrada e independente, enquanto que um terceiro revisor foi consultado em caso de discordâncias. Ensaios clínicos randomizados, ensaios clínicos controlados e estudos prospectivos com um mínimo de cinco pacientes e a cicatrização natural do alvéolo como controle foram incluídos.O estudo clínico experimental revelou que, entre TI-8M, a Mav e Dav mostraram diferenças médias de 0,9 ± 1,2 mm e 0,7 ± 1,8mm, e 0,4 ± 1,3 mm e 0,7 ± 1,3mm, nos grupos teste e controle, respectivamente (P>0. 05). Ambos os tratamentos mostraram ganhos similares em níveis de cinza entre os intervalos de tempo. O SOS mostrou menos perda nos níveis de cinza entre TI-4M e TI-8M (P<0. 05). A avaliação radiográfica subestimou as medições intra-cirúrgicas (mesial e distal) em 0,3mm na média (95% IC, 0,02-0,6). Muitas técnicas, materiais e metodologias diferentes foram apresentadas nas quatorze publicações revisadas, tornando as comparações diretas difíceis. Os achados radiográficos do ensaio clínico randomizado mostraram que ambos os tipos de enxerto ósseo foram eficientes na preservação das dimensões do rebordo alveolar após a extração dentária, porém nenhum deles mostrou superioridade em termos de alterações radiográficas do osso alveolar do tempo inicial aos 8 meses. Os resultados da revisão sistemática da literatura corroboraram alguns dos achados 13 preliminares do estudo clínico e mostraram que, apesar da heterogeneidade dos estudos, há evidência que os procedimentos de preservação do rebordo são eficazes na limitação da perda dimensional do rebordo pós-extração e são acompanhados por um grau diferente de regeneração óssea, com variadas quantidades de partículas residuais dos “materiais de enxerto”. Entretanto, a exposição de membranas nos procedimentos de regeneração óssea guiada pode comprometer os resultados. Não há evidência para sustentar a superioridade de uma técnica sobre a outra assim como a importância da preservação do rebordo em melhorar a possibilidade de colocar implantes, as taxas de sucesso/ sobrevivência dos implantes, estética, economia do tratamento, tempo de tratamento e satisfação do paciente.

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-04-17T13:09:48Z No. of bitstreams: 1 447185.pdf: 1490319 bytes, checksum: 062b3580e76c16931c597b9792a749c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-17T13:09:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 447185.pdf: 1490319 bytes, checksum: 062b3580e76c16931c597b9792a749c2 (MD5) / O biomaterial constituído por 60% de hidroxiapatita (HA) e 40% de beta fosfato tricálcico (β-TCP) (Bone Ceramic®, Straumann S. A. – Zurich, Suíça) é um enxerto ósseo sintético, biocompatível, cuja composição bifásica fornece capacidade de suportar a neoformação óssea e manter a estabilidade mecânica do tecido. No presente estudo foi avaliado o reparo em defeitos ósseos críticos, confeccionados em calvária de ratos, preenchidos com esse biomaterial, antes e após a terapia com radiação ionizante. A amostra foi constituída por 33 ratos Wistar distribuídos em dois grupos experimentais, que receberam 12 Gy de radiação em dose única, e um grupo-controle. No primeiro grupo experimental (n=12) a confecção e o preenchimento do defeito na calvária foram realizados duas semanas após a radioterapia (grupo pós-radioterapia). No segundo grupo (n=12) a confecção e o preenchimento do defeito ósseo ocorreram duas semanas antes da radioterapia (grupo pré-radioterapia). Os animais do grupo-controle (n=9) foram submetidos aos mesmos procedimentos cirúrgicos, no entanto, não receberam terapia com radiação ionizante. Os animais foram mortos 12 semanas após os procedimentos cirúrgicos. Em todos os grupos foi observado íntimo contato entre o tecido ósseo neoformado e os grânulos do biomaterial, bem como ausência de necrose. Na análise histomorfométrica não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas entre os três grupos quanto ao percentual de tecido ósseo neoformado nos defeitos. Também não houve diferenças significativas entre os grupos quanto ao número de osteoblastos, osteoclastos e células inflamatórias. O percentual de imunodetecção do VEGF (fator de crescimento endotelial vascular) (p<0,001) e a densidade mineral na região dos defeitos (p=0,020) foram superiores no grupo-controle. Pode-se concluir que o biomaterial constituído por HA e β-TCP promove osteocondução no tecido irradiado de forma semelhante a que ocorre no tecido não irradiado. Além disso, não há diferenças quanto ao momento do emprego da radiação ionizante, ou seja, se antes ou após a aplicação do biomaterial. / The biomaterial made up of 60% hydroxyapatite (HA) and 40% beta tricalcium phosphate (β-TCP) (Bone Ceramic®, Straumann S.A. – Zurich, Switzerland) is a synthetic bone graft, biocompatible, whose biphasic composition enables it to bear the bone newly formation and maintain the tissue mechanical stability. The present study has evaluated the repair in critical bone defects, made on rats calvaria, filled with that biomaterial before and after therapy with ionizing radiation. The sample was formed by 33 Wistar rats distributed into two experimental groups that received 12 Gy radiation (single dose), and a control group. In the first experimental group (N=12) the fabrication and filling of the calvaria defect were performed two weeks after radiotherapy (pos-radiotherapy group). In the second group (n=12) the fabrication and filling of the calvaria defect were performed two weeks before radiotherapy (pre-radiotherapy group). The animals in the control group (n=9) were submitted to the same surgical procedures but did not receive any ionizing radiation therapy. The animals were killed 12 weeks after surgical procedures. In all groups a close contact between the biomaterial granules and the newly formed bone tissue was observed, as well as absence of necrosis. No statistically relevant differences were detected in the histomorphological analysis of the three groups with regards to the percentage of newly formed bone tissue in the defects. There were also no differences among the groups with regards to the number of osteoblasts, osteoclasts and inflammatory cells. The VEGF (Vascular Endotelial Growth Factor) (p<0.001) immunodetection percentage, and the mineral density in the defect site (p=0.020) were higher in the control group. Thus, it can be concluded that the biomaterial made up of HA and β-TCP promotes osteoconduction in the irradiated tissue similarly to what occurs in the non-irradiated tissue. Moreover, there is no difference regarding the moment the ionizing radiation is employed, that is, whether before or after applying the biomaterial.

O avanço da ciência regenerativa está se comprometendo com a busca de novas opções terapêuticas no combate as diversas doenças e disfunções orgânicas. Nessas avançadas linhas de pesquisas, as células-tronco são um símbolo dessa evolução. A variedade da aplicação deste novo e experimental método de tratamento está sendo utilizado, pela bioengenharia, para reparar tecidos e órgãos lesados. Defeitos ósseos extensos ocorrem após diversos tipos de injúrias ao esqueleto facial, como traumas faciais, ressecções por lesões agressivas e malformações congênitas. Essas sequelas são tratadas, preferencialmente, através da reconstrução utilizando enxertos ósseos de origem autógena. Entretanto, às desvantagens proporcionadas pela obtenção do tecido ósseo autógeno, lançaram um dos maiores desafios, da bioengenharia que é a busca pelo aprimoramento dos substitutos ósseos. Nesse caminho do aprimoramento dos biomateriais a adição de células-tronco mesenquimais representam a possibilidade da criação de um sinergismo, entre as células e o arcabouço, para otimizar a osteogênese. Nessa linha, esse estudo propõe-se a avaliar o reparo ósseo em estudo experimental, em modelo animal, através do tratamento de defeito ósseos criados em fêmures de ratos. A amostra dessa pesquisa foi composta de 96 ratos albinos da espécie Rattus novergicus albinus, linhagem SHR (Spontaneously Hypertensive Rats), isogênicos. Os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos de acordo com o tipo de tratamento (Grupo I: α – TCP + ADSCs; Grupo II: α – TCP + ADSCs/ENDO; Grupo III: α – TCP; Grupo IV). A cultura de células tronco tiveram como tecido de origem o tecido adiposo da região abdominal e as células endoteliais formam coletadas da medula óssea. A peças foram avaliadas em 03 períodos de tempo diferentes (07, 14 e 21 dias). A histomorfometria avaliou a área de neoformação óssea dos defeitos bem como a imunohistoquímica com marcação para a proteína VEGF avaliou a eficácia da adição das células endoteliais. Os resultados demonstraram, através dos testes estatísticos que houve uma diferença estatisticamente significante, no reparo ósseo, favorecendo os tratamentos dos defeitos que utilizaram a terapia celular e a vascularização foi também otimizada no grupo que foi tratado com a adição das células endoteliais. Dessa forma conclui-se que nesse modelo de estudo a utilização das ADSCS foram capazes de otimizar o reparo ósseo. / The regenerative medicine has been searching for a new therapeutic options to manage diseases and also organic dysfunctions. The advanced research fields, has enrolled the stem cells to achieve the upgrade in the new treatment objectives. The bioengineering is application of this new and experimental, treatment method to repair damaged tissues and organs using the stem cells, includes the possibility to acelerating and improving the bone repair process. The autogenous bone graft has been considered the gold standart graft material to reconstruction the bone defects, fundamentally because of the osteogenic potential. However, the harvest disadvantages autogenous bone tissue leads to the search for bone substitutes improvement. In this field a promising alternative has been proposed by tissue engineering. The totipotent cells, also called mesenchymal stem cells, which has the cellular plasticity ability, is associated with biomaterials, creating a synergy, between these cells and the scaffold, to optimize the osteogenesis. The tissue engineering application to tissue repair has been extensively researched with the aim of proposing more reliable and more efficient clinical methods. Although the effects of the use of adult stem cells are well known in bone marrow transplants, in some areas, such as bone repair, there is still lack of scientific data. This research was conducted, in animal model, to assessment bone repair in created femural bone defects treated with mesenchymal stem cells. 96 animals (Rattus novergicus albinus - Spontaneously Hypertensive Rats) were randomly divided into four groups (Group I: α - TCP + ADSCs, Group II: α - TCP + ADSCs/Endo, and Group III: α - TCP; (07, 14 and 21 days). The histological sections were stained in H&E and the histomorphometry was used to evaluated the new bone formation area in the defects and also the immunohistochemical expression of VEGF was analysed. Our results suggest that the combination of ADSCs and the scaffold was able to enhance the bone repair in this study model.

O alcoolismo é considerado uma doença crônica, trazendo prejuízos para saúde do indivíduo. O tecido ósseo também sofre sérios danos com o consumo crônico do álcool, pois induz defeitos na mineralização e redução da espessura do osso medular e cortical. Devido à grande procura por tratamentos reconstrutivos para lesões e perdas ósseas, os enxertos xenógenos vêm sendo uma boa opção para o tratamento regenerativo. Em vista da procura de pacientes que fazem consumo crônico do álcool e apresentam perdas ósseas, necessitando de enxertos xenógenos, este trabalho teve como objetivo comparar, por meio de análise histomorfológica e histomorfométrica, a ação de dois biomateriais, o Bio-Oss® e o OrthoGen®, no processo de reparo de defeitos ósseos em tíbia de ratos submetidos ou não ao alcoolismo experimental. Foram utilizados 80 ratos machos (Rattus norvegicus) da linhagem Wistar, com 60 dias de idade, separados aleatoriamente em quatro grupos experimentais contendo 20 animais cada: Grupo Água Bio-Oss® (GAB), Grupo Etanol Bio-Oss® (GEB), Grupo Água OrthoGen® (GAO) e Grupo Etanol OrthoGen® (GEO). Os animais dos grupos GEB e GEO foram submetidos à adaptação gradativa ao álcool e depois permaneceram a 25% por 90 dias. Após esse período, todos os animais foram submetidos à cirurgia experimental. Foi realizada uma cavidade cirúrgica de aproximadamente 3 mm de diâmetro na epífise proximal da tíbia e nos animais dos grupos experimentais GAB e GEB se fez o preenchimento com o biomaterial Bio-Oss®. Os animais dos grupos experimentais GAO e GEO receberam o preenchimento da cavidade com o biomaterial OrthoGen®. Decorridos os períodos de 10, 20, 40 e 60 dias pós-cirúrgico, cinco animais de cada grupo, por período, foram eutanasiados. Os resultados histomorfológicos demostraram que os animais dos grupos GAB e GEB apresentaram células sanguíneas e tecido conjuntivo nos períodos de 10 e 20 dias, e nos períodos de 40 e 60 dias ocorreu a formação de novo osso, sendo que o grupo GEB apresentou um maior retardo na formação quando comparado ao GAB. Nos grupos GAO e GEO o início da formação de tecido ósseo ocorreu nos períodos de 40 e 60 dias, com um retardo na formação quando comparado ao biomaterial Bio-Oss®. Na análise histomorfométrica, comparando os grupos que receberam a dieta líquida não alcóolica com biomaterias diferentes (GAB e GAO) ocorreu diferença significante em formação óssea em todos os períodos sendo que o grupo Água Bio-Oss® apresentou uma maior formação óssea. Nos grupos que receberam a dieta alcóolica, com biomateriais diferentes (GEB e GEO), ocorreu diferença em formação óssea nos períodos de 20, 40 e 60 dias, onde o biomaterial Bio-Oss® apresentou maiores médias. Comparando os grupos que receberam o mesmo biomaterial, mas com dieta líquida diferente (GABXGEB e GAOXGEO), evidenciou-se diferença significante em formação óssea em todos os períodos (exceto GAOXGEO; 10 dias), sendo que os grupos que receberam dieta líquida apenas com água apresentaram melhores resultados. Conclui-se que o biomaterial Bio-Oss® mostrou-se superior na neoformação óssea quando comparado ao Ortoghen®, e que a dieta alcoólica interferiu de forma negativa no processo de reparação. / Alcoholism is considered a chronic disease, which brings harm to an individuals health. Bones also suffer serious damage resulting from the chronic consumption of alcohol, since it induces defects in the mineralization and reduction of the thickness of the cortical and the cancellous bone. Xenografts have been a good option for regenerative treatments in response to the high search for reconstructive treatments for bone losses and lesions. Given the demand of patients who make chronic use of alcohol and present bone loss, needing xenografts, the aim of this study was to compare, by means of a histomorphological and histomorphometric analysis, the action of the biomaterials Bio-Oss® and OrthoGen® in the repair process of bone defects in the tibia of rats submitted or not to experimental alcoholism. Eighty male Wistar rats (Rattus norvegicus) aged 60 days were randomly separated into four experimental groups with 20 animals each: Bio-Oss® Water Group (GAB), Bio-Oss® Ethanol Group (GEB), OrthoGen® Water Group (GAO) and OrthoGen® Ethanol Group (GEO). The animals in the GEB and GEO were submitted to gradual adaptation to alcohol and later kept at 25% for 90 days. After this period, all animals were submitted to experimental surgery. A surgical cavity with approximately 3 mm of diameter was made in the proximal tibial epiphysis and in animals from the experimental groups GAB and GEB it was filled with the Bio-Oss® biomaterial. Animals from the experimental groups GAO and GEO had their cavity filled with the OrthoGen® biomaterial. After 10, 20, 40 and 60 days post-surgery, five animals in each group, per period, were euthanized. The histomorphological results showed that the animals from the GAB and GEB groups presented blood cells and connective tissue in the 10 and 20 days periods, and in the periods of 40 and 60 days there was formation of new bone, with the GEB group presenting greater delay in formation when compared to the GAB. In the GAO and GEO groups, bone formation started in the periods of 40 and 60 days, with a delay in formation when compared to the Bio-Oss® biomaterial. In the histomorphometric analysis, comparing the groups that received nonalcoholic liquid diet with different biomaterials (GAB and GAO), there was a significant difference in bone formation in all periods, with the Bio-Oss® Water Group presenting greater bone formation. In the groups that received an alcoholic diet, with different biomaterials (GEB and GEO), there was a difference in bone formation in the periods of 20, 40 and 60 days, in which the Bio-Oss® biomaterial presented greater means. Comparing the groups that received the same biomaterial, but with a different liquid diet (GABXGEB and GAOXGEO), there was a significant difference in bone formation in all periods (except for GAOXGEO; 10 days), in which the groups that received a liquid diet with only water presented better results. In conclusion, the Bio-Oss® biomaterial presented better performance in bone neoformation when compared to the Ortoghen®, and the alcoholic diet affected negatively the repair process.

Os implantes dentários de titânio comercialmente puro (Ticp) grau 4 e os de titânio-alumínio-vanádio (Ti6Al4V) grau 5, possuem boas propriedades mecânicas. No entanto, algumas situações clínicas com restrição de espessura óssea impedem a utilização dos implantes com 3.75mm de diâmetro tradicionalmente fabricados em titânio 4 e que apresentam resistência mecânica testada em profusão. Como a liga de grau 5 possui superior resistência à tração e à fadiga, este estudo objetiva analisar a resposta óssea do titânio grau 4 e grau 5 em implantes curtos e estreitos através da análise do contato osso-implante (BIC) e da área de neoformação óssea. Para este fim, o presente estudo utilizou 15 coelhos da raça New Zealand, que receberam um total de trinta implantes divididos em suas tíbias direita e esquerda. Os implantes de grau 4 e de grau 5, com dimensões de 3.5x8mm e 2.9x7mm, respectivamente, foram fornecidos pela empresa NEODENT® (Curitiba-Brasil). Neste estudo, dois grupos foram formados, um com implantes de titânio grau 4 e outro com implantes de titânio grau 5, ambos contendo quinze implantes curtos e estreitos. Cortes histológicos foram realizados após duas semanas de osseointegração. Mensurações no analisador de imagens ImageJ foram feitas para verificar o BIC e a área de osso neoformado. Para a análise dos dados estatísticos, utilizou-se o teste t de Student para amostras independentes com nível de significância de p<0.05. Os resultados mostraram que não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos nos dois tipos de análises. A média dos valores de BIC do titânio grau 4 obteve o valor médio mais alto de 56,53%, variando de 95,74% a 9,4%. O grupo de titânio grau 5 apresentou média de 50,63%, variando entre 84,3% e 13,12%. Com base em imagens com fluorescência, realizou-se análise da área óssea. O grupo de titânio grau 5 apresentou valor de 46,3% (variando entre 79% a 14,21%) em fluorescência, número ligeiramente maior do que o verificado no grupo de titânio grau 4 (44,73%, com variância entre 78,93% e 18,36%). Com isso, concluiu-se que implantes de titânio de grau 4 e de grau 5 obtiveram respostas biológicas equivalentes, quando avaliados o BIC e a área óssea neoformada. / Commercially pure titanium implants (Ticp) of degree IV and of titanium-aluminum-vanadium degree V have good mechanical properties. However some clinical situations with limited bone thickness preclude the use of traditionally implants with 3.75mm diameter made from titanium IV and present strength tested in profusion. In addition, degree V alloy shows higher resistance to traction and fatigue, this study aims to analyze the bone response to degree IV and degree V titanium in short and narrow implants with the same surface treatment through the analysis of the bone-to-implant contact (BIC) and the area of the new bone formation. For such purpose, this study used15 New Zealand white rabbits which had a total of thirty implants inserted in their right and left tibiae. Both degree IV and degree V implants, measuring 3.5x8mm and 2.9x7mm, respectively, were provided by dental implant manufacturer NEODENT® (Curitiba-Brazil). The implants were allocated into two distinct groups. Fifteen short and narrow implants of degree IV were utilized in a group, whereas fifteen short and narrow implants of degree V were employed in the other group. Histological sections samples were carried out after a two-week period of osseointegration. Subsequently, measurements were calculated using ImageJ software in order to verify the BIC and the area of the newly grown bone. Analysis of statistical data of independent samples with significance level p<0.05 was carried out via Student\'s t-test. Results showed no statistically substantial difference between both groups regarding both measurement activities. The media values BIC for the degree IV titanium group reached the highest average value of 56,53%, varying from 95,74% to 9,4%. The degree V titanium group averaged 50,63%, oscillating between 84,3% and 13,12%. The bone areas were analyzed based on images with fluorescence. The degree V titanium group reached the percentage of 46,3% (varying from 79% to 14,21%) in fluorescence whereas the degree IV titanium group had a percentage of 44,73% (varying between 78,93% and 18,36%). Therefore, both degree IV and degree V implants had equivalent biological responses based on the analysis of BIC and newly grown bone areas.

Devido à sua peculiar estrutura mineralizada, o tecido ósseo ainda representa um dos desafios para os estudos em bioengenharia regenerativa. Nesse sentido, estratégias realizadas envolvendo o sistema de liberação de drogas através de polímeros bioreabsorvíveis apontam resultados promissores. Esse projeto teve como objetivo empregar PLGA [poli (ácido lático-co-glicólico)] carregado com sinvastatina (SIN) em defeitos ósseos críticos criados em osso parietal de ratos. Foi realizado um defeito de 5.0 mm de diâmetro no osso parietal esquerdo, sendo que no grupo controle (C) foi deixado apenas o coágulo sanguíneo. O grupo experimental foi subdividido como segue: no subgrupo (M), uma membrana de PLGA foi colocada recobrindo o defeito ósseo, de modo que as bordas ultrapassaram a borda do defeito. No outro subgrupo (MSI), microesferas de PLGA 50/50 contendo sinvastatina a 2,5% foram depositadas no interior do defeito, sendo posteriormente recobertas pela membrana de PLGA; no grupo (MSS) foram colocadas microesferas de PLGA sem sinvastatina para avaliar o efeito osteocondutor das microesferas. Os animais foram sacrificados em dois períodos 30 e 60 dias após a cirurgia e as calotas removidas e processadas para análise morfológica em microscopia de luz, microscopia eletrônica de transmissão e varredura, imuno-histoquímica para análise da expressão de OPN (osteopontina), BSP (sialoproteína óssea) e OSAD (osteoaderina) e análise imunocitoquímica da distribuição ultra estrutural da proteína OPN. Os resultados observados mostraram que a formação do novo osso iniciou-se pelas margens do defeito e também pela área central em grupos tratados. A análise da regeneração nos defeitos tratados com SIN mostrou uma disposição ordenada das fibrilas colágenas e uma matriz com aspecto de tecido ósseo em fase mais madura. O estudo mostra que a regeneração do tecido pode ser acelerada e que a matriz neorformada é depositada de forma mais organizada pela liberação gradual da SIN. / Due to its unique mineralized structure, bone regeneration is still a challenge. Numerous strategies had been proposed during the past years, drug delivery system using polymeric scaffolds is a promising strategy. The aim of this study was to employ PLGA [poly (lactide-co-glycolic acid)] loaded with simvastatin(SIN) in bone defects created in rat calvaria. Bone defects with 5.0 mm diameter was created in the left side of the calvarias. In Control group (C) their defects were filled only with blood clot. The experimental group was subdivided. In subgroup (M), a PLGA membrane was covered the defect. In the other subgroup (MSI), PLGA microspheres loaded with 2.5% simvastatin filled the defect over the blood clot inside the defect and subsequently covered with PLGA membrane, another group was criated to evaluet the osteoconductor potencial of microesphers without the (SIN), the MSS group. The animals were sacrificed in 30, 60 after surgery, and the calvarias were removed and processed for light and transmission and scanning electron microscopy analyzes, Osteopontin (OPN), Osteoadherin (OSAD), Bone sialoprotein (BSP) imunnolabeling and immunocytochemical analyzes of the ultrastructural distribution of osteopontin in the neoformed bone. The in vivo experiment revealed that the microspheres containing simvastatin significantly enhanced the disposition of collagen fibrils in immature bone and bone formation in the rabbit calvaria critical size defect.

O metabolismo ósseo é influenciado por fatores endócrinos, genéticos, de crescimento, sistema RANK/RANKL/OPG, além de uma variedade de moléculas regulatórias, como as citocinas. Citocinas têm sido implicadas na patogênese de doenças ósseas, no entanto, ainda pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos na interação entre o sistema ósseo e imunológico no processo de reparo ósseo. O objetivo deste estudo foi caracterizar o papel de TNF-&#x3B1; e IL-10 no reparo ósseo alveolar em condições homeostáticas (controle [C]) e infecciosas (alveolite experimental [A]) pós exodontia em camundongos C57Bl/6 (WT), TNFp55KO e IL-10KO. Após a cirurgia nos grupos infectados foi induzida a alveolite por meio de isquemia do alvéolo e uma suspensão de secreção purulenta. As maxilas foram coletadas em 0h, 7, 14 e 21 dias após a extração do incisivo superior para análises histológica, histomorfométrica e molecular (RealTimePCR). Na análise histomorfométrica foram quantificados os parâmetros coágulo, células inflamatórias, fibras, fibroblastos, vasos sanguíneos, matriz óssea, osteoblastos, osteoclastos, e outros espaço do líquido intersticial e medula óssea. Na análise molecular (RealTimePCR) foram quantificados a expressão de fatores de crescimento, marcadores ósseos e de matriz extracelular, citocinas e quimiocinas envolvidos no processo. Os dados obtidos foram submetidos ao teste OneWay ANOVA seguido do teste de comparação múltipla de Tukey. Os resultados demonstraram que nos camundongos WT-C houve a formação inicial de coágulo (0 hora) com início da expressão de BMP2, BMP4, BMP7, TGFb1 and VEGFa que tiveram aumento gradativo com pico em 7 dias. A expressão de TNF-&#x3B1; e IL10 também tiveram seus picos aos 7 dias em paralelo com contagem de leucócitos, associado com a expressão de CCL2, CCL5 e CXCL1. Nos períodos seguintes houve uma diminuição inflamatória e o aumento de marcadores osteoblásticos/osteogênicos. A indução da alveolite experimental em WT-A resultou no aumento marcante na expressão de TNF-&#x3B1;, acompanhada por uma maior expressão de CXCL1 e CCL5, contagem aumentada de leucócitos e diminuição na expressão de IL-10 que só atingiu seu pico aos 14 dias, além de proeminente infiltrado leucocitário e tecido de granulação, bem como evidências histológicas de atraso no reparo ósseo. O impacto negativo da alveolite foi atenuado nos camundongos TNFp55KO, caracterizado por um reparo adequado, diminuição no número de leucócitos e osteoclastos em relação aos WTA. Por outro lado, um atraso no reparo foi observado nos animais IL10KO, evidenciado por uma menor densidade de osteoblastos e de matriz óssea do que o respectivo controle. Em conclusão, os resultados mostraram que ambas citocinas interferem no reparo ósseo alveolar por meio de mecanismos que envolvem o controle da migração de células inflamatórias e modulação de quimiocinas e a expressão de marcadores osteogênicos, uma vez que a ausência de IL-10 está associada a uma maior atividade inflamatória e reabsorção óssea concomitante com menor formação ósseo, já a deficiência de TNF-&#x3B1; afeta o recrutamento de leucócitos e a cinética de reparo óssea alveolar em condições homeostáticas e infecciosas. / Bone metabolism is influenced by endocrine, genetic and growth factors, RANK/RANKL/OPG system, besides a variety of regulatory molecules, such as cytokines. Cytokines have been implicated in pathogenesis of bone diseases, however, little is known about the mechanisms involved in the interaction between skeletal and immune system in the bone repair process. The objective of this study was characterized the role of TNF-&#x3B1; and IL-10 in alveolar bone repair under homeostatic (control [C]) and infectious (experimental alveolitis [A]) conditions in C57Bl/6 (WT), TNFp55KO and IL-10KO mice. After surgery, in infectious groups was induced by ischemia alveolitis the well and a suspension of pus. The maxillas were collected at 0h, 7, 14 and 21 days after extraction of the maxillary incisor for histologic, histomorphometric and molecular (RealTimePCR). In histomorphometric analysis parameters were measured clot, inflammatory cells, fibers, fibroblasts, blood vessels, bone matrix, osteoblast, osteoclast, and other space - the interstitial fluid and bone mar row. Molecular analysis (RealTimePCR) were quantified the expression of growth factors, bone markers and extracellular matrix, cytokines and chemokines involved in the process. The data were submitted to the OneWay ANOVA test followed by Tukey\'s multiple comparison test. The results showed that in WT-C initial clot formation (0 hours) with early expression of BMP2, BMP4, BMP7, and TGFb1 VEGFa who had gradual increase peaking in 7 days. The expression of TNF-&#x3B1; and IL10 also peaked at 7 days in parallel with leukocyte count, associated with CCL2, CCL5 and CXCL1. In late periods there were decrease of inflammation and markers osteoblastic / osteogenic increased. Induction of experimental alveolitis in WT resulted in a marked increase in expression of TNF-&#x3B1; accompanied by increased expression of CXCL1 and CCL5, increased leukocyte count and decreased of IL10 expression that peaked at 14d, besides prominent leukocyte infiltration and granulation tissue, as well as histological evidence of delayed bone repair. Negative impact of alveolitis was attenuated in TNFp55KO mice, characterized by appropriate repair rate, decreased of the number of leukocytes and osteoclasts that WT-A. On the other hand, a lessened repair was observed in IL10KO animals, evidenced by lower density of the density of osteoblasts and bone matrix than respective control. In conclusion, the results show that both cytokines interferes in alveolar bone repair through mechanisms that involve the control of inflammatory cell migration and modulation of chemokines and osteogenic markers expression, since that the absence of IL-10 is associated with higher inflammatory activity and bone resorption concomitant with lower bone formation, while the deficiency of TNF-&#x3B1;a affect the recruitment of leukocytes and the kinetics of alveolar bone healing both in homeostatic and infectious conditions.