Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-26T12:58:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSE TURCHIELO GRUNDEMANN.pdf: 787037 bytes, checksum: b8d2b3a0aafb3ac92a7ca1c97f74ec16 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-26T12:59:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSE TURCHIELO GRUNDEMANN.pdf: 787037 bytes, checksum: b8d2b3a0aafb3ac92a7ca1c97f74ec16 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T12:59:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSE TURCHIELO GRUNDEMANN.pdf: 787037 bytes, checksum: b8d2b3a0aafb3ac92a7ca1c97f74ec16 (MD5) Previous issue date: 2016-08-18 / Objetivou-se comparar o desempenho reprodutivo de novilhas, vacas solteiras e vacas com cria ao pé submetidas à ressincronização utilizando o protocolo hormonal de inseminação artificial com detecção de estro e em tempo fixo (IAETF). Foram utilizadas 382 fêmeas bovinas das raças Angus e Brangus, sendo 136 novilhas, 103 vacas solteiras e 143 vacas amamentando (entre 40 e 70 dias pós-parto). No dia 0, todos os animais receberam um dispositivo intravaginal contendo 1,2 g de progesterona (para sincronização de vacas adultas) ou reutilizado (para sincronização de novilhas e na ressincronização de novilhas e vacas adultas) e uma injeção intramuscular (IM) contendo 2 mg de benzoato de estradiol (BE). Na tarde do dia 6, os animais receberam injeção contendo (IM) 300 UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) e 0,15 mg de D-cloprostenol e os bezerros tabuleta nasal por 4 dias (até o dia 10). Na tarde do dia 7, os dispositivos vaginais foram removidos e o estro foi monitorado às 24 e 36 horas após a retirada dos dispositivos. Os animais em estro foram inseminados 12 horas mais tarde e o restante recebeu uma injeção (IM) contendo 0,01 mg de Acetato de Buserelina às 48 horas após a retirada dos dispositivos e foram inseminados em tempo fixo (IATF) 12 a 16 horas após a injeção (dia 10). Na sincronização, o percentual de estro diferiu (P < 0,05) entre as três categorias (63,1%, 52.9% e 24,4% para vacas solteiras, novilhas e vacas amamentando, respectivamente). Já na ressincronização, apenas as vacas amamentando demonstraram menor (P < 0,05) percentual de cio (25,0%) quando comparadas às novilhas (82,0%) e vacas solteiras (72,7%). Na primeira IA, as novilhas apresentaram maior (P < 0,05) percentual de prenhez (71,3%) que as vacas amamentando (58,0%), mas 6 ambas as categorias não diferiram (P > 0,05) em relação às vacas solteiras (67,9%). Já na ressincronização, o percentual de prenhez das três categorias não diferiu (P > 0,05) entre si (51,2%; 51,5% e 60,0% para novilhas, vacas solteiras e vacas amamentando, respectivamente). Os percentuais de prenhez cumulativos das duas IAETFs (86,0%; 84,4% e 83,2% para novilhas, vacas solteiras e amamentando, respectivamente) e do final da estação reprodutiva após repasse com touros (94,1%; 91,2% e 87,4% para novilhas, vacas solteiras e amamentando, respectivamente) não diferiram (P > 0,05) entre as três categorias. Conclui-se que novilhas, vacas solteiras e vacas amamentando apresentam desempenho reprodutivo semelhante quando submetidas à ressincronização com IAETF, bem como após o repasse com touros. / The aim of this study was to compare the reproductive performance of heifers, nonlactating and lactating beef cows submitted to fixed time and estrus detection artificial insemination hormonal protocol (FTEAI). A total of 382 bovine females divided in 136 heifers, 103 nonlactating and 143 lactating cows (between 40 and 70 days postpartum) were used. On day 0 all animals received an intravaginal device containing 1.2g of progesterone (used on adult cows) or reutilized (used on heifers synchronization and on heifers and adult cows resynchronization) and an injection (IM) containing 2 mg of estradiol benzoate (EB). In the afternoon of day 6, animals received an injection (IM) containing 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) and 0.15 mg of D-cloprostenol and calves a no se tablet for 4 days (until day 10). In the afternoon of day 7, intravaginal devices were removed and estrus was monitored at 24 and 36 h after device removal. Animals detected in estrus were artidicial insemination (AI) 12 h later and the remaining received an injection (IM) containing 0.01mg of Busereline Acetate at 48 h after device removal and were submitted to timed artificial insemination (TAI) 12 to 16 h after the injection (Day 10). In the synchronization, estrus rate differ (P < 0.05) among the three categories (63.1%, 52.9% and 24.4% to nonlactating cows, heifers, and lactating cows, respectively). Where as in resynchronization, only lactating cows showed lower (P < 0.05) estrus rate (25.0%) when compared for heifers (82.0%) and nonlactating cows (72.7%). In the synchronization heifers showed higher (P < 0.05) pregnancy rate (71.3%) than lactating cows (58.0%), but both categories did not differ (P > 0.05) in relation to nonlactating cows (67.9%). In resynchronization, pregnancy rate of three 8 categories did not differ betwem (P > 0.05) each other (51.2%, 51.5% and 60.0% for heifers, nonlactating cows and lactating cows, respectively). The cumulative pregnancy rates from two FTEAI (86.0%, 84.4% and 83.2% for heifers, nonlactating and lactating cows, respectively) and from final reproductive season after breeding with bulls (94.1%, 91.2% and 87.4% to heifers, nonlactating and lactating cows, respectively) did not differ (P > 0.05) among the categories. In conclusion, heifers, nonlactating and lactating cows show similar reproductive performance at the end of breeding season when submitted to resynchronization using FTEAI, as well as after a short-term breeding with bulls.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-05T15:27:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PolimorfismosRegiaoPromotora.pdf: 1207589 bytes, checksum: 89710385da588ac529aef5a628bb1770 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-10T13:29:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PolimorfismosRegiaoPromotora.pdf: 1207589 bytes, checksum: 89710385da588ac529aef5a628bb1770 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T13:29:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_PolimorfismosRegiaoPromotora.pdf: 1207589 bytes, checksum: 89710385da588ac529aef5a628bb1770 (MD5) Previous issue date: 2015-06-18 / A produção de bubalinos no Estado do Pará é uma atividade de alta representatividade para a economia regional e produção de carne, leite e derivados. Portanto, é necessário desenvolver novas tecnologias que aumente o desfrute da produção e reprodução de bubalinos na região Amazônica. Sendo assim, os objetivos desta tese de pesquisa foram caracterizar a região promotora do gene do receptor da melatonina 1 A (MTRN1A) e identificar polimorfismos nos éxons I e II do referido gene e associá-los a características reprodutivas de relevância econômica em búfalas na região Amazônica. Foram coletados amostras de pelos de 400 búfalas e foram usados 60 animais para caracterização da região promotora, 140 para detectar o polimorfismo (SNPs) no éxon II e 77 para detectar o polimorfismo no éxon I. Foi realizada a extração de DNA pelo método fenólico. Em seguida selecionaram-se os diferentes iniciadores para realizar as reações em cadeia da polimerase (PCR). A região promotora do MTRN1A foi sequenciada em um total de 1621 pares de base pelo método de Sanger, o polimorfismo no éxon II foi detectado através da técnica de PCR-RFLP (Polimorfismo de restrição de comprimento de fragmentos) com a enzima HpaI e o polimorfismo no éxon I foi detectado através do sequenciamento de DNA pelo método Sanger. Foram avaliadas as frequências alélicas e genotípicas de todos os SNPs, os coeficientes de endocruzamento (Fis) e as probabilidades de Hardy-Weinberg. Os SNPs da região promotora e do éxon I foram associados com características reprodutivas das búfalas pelo ANOVA, ou teste t de Student e/ou teste qui-quadrado. O nível de significância foi de 0,05. Foram detectados 26 SNPs na região promotora nas posições -1511 (C→T), -1465 (G→T), -1422 (A→G), -1411 (G→A), - 1395 (G→T), -1298 (A→G), -1295(G→A), -1242 (A→C), -1150 (C→T), -1147 (G→C), - 1136(A→G), -911 (G→A), -909 (A→G), -724 (C→G), -656 (A→C), -649 (T→C), -644 (G→A), -511 (A→C), -481 (G→A), -425 (C→T), -395 (G→A), -383 (G→T), -254 (C→T), - 206 (T→C), -133 (T→G) e -94 (C→T) e um bloco de deleção (ACAA) na posição -1483. Do total de SNPs detectados, 75% dos alelos selvagens tiveral frequências maiores que 0,5. Para a característica Intervalo entre Parto (IEP), somente cinco SNPs (-1298, -1136, -911, -724 e - 656) foram significativamente associados (P<0,05) e outros três SNPs (-1395, -724 e -94) foram associados significativamente (P<0,05) com a característica Idade ao Primeiro Parto (IPP) e nenhum para a característica concentração de partos (P>0,05). Um total de 11 SNPs foi fortemente associado a fatores de ligação para a regulação gênica. O SNP no éxon II por PCR-RFLP (HpaI) na posição 306 de (T→C), sendo o alelo T mais frequente nos animais de Terra Firme (0,529) e o C em animais de Várzea, as duas populações apresentaram coeficientes de endocruzamento Fis (0,040 e 0,091, respectivamente) e fortes desvios de Hardy-Weinberg (P>0,05). A mutação ocorre no 106° codon e é do tipo sinonímio sem alteração da estrutura de alças do RNA mensageiro. O SNP no éxon I foi detectado na posição 62 (T→C) e do tipo não sinonímio, trocando de Leucina para Prolina. O alelo mutante C foi o mais frequente (0,623), coeficiente de endocruzamento Fis=0,397 e desvios de Hardy- Weinberg (P<0,05). Nenhum dos genótipos foram associados ao interval entre partos e a idade do primeiro parto (P>0,05). Portanto, os SNPs são fortes candidatos para seleção, mas seria interessante avaliá-los em outros rebanhos na região Amazônica e/ou em outras regiões do Brasil e/ou em outros países para efetivá-los como excelentes marcadores moleculares para características reprodutivas de bubalinas. / The buffaloes production in the Pará state have is a high representative activity to the regional economy and production of meat, milk and dairy products. Therefore, it is necessary to develop new technologies that increase the enjoyment of the production and reproduction of buffaloes in the Amazon region. Thus, the objectives of this research thesis was to characterize the promoter region of the melatonin receptor gene 1 (MTRN1A) and identify polymorphisms in exons I and II of that gene and link them to reproductive traits that have economic importance in buffaloes in the region Amazon. Were collected 400 buffaloes samples and 60 animals were used to characterize the promoter region, 140 to detect the polymorphism (SNPs) in exon II and 77 to detect the polymorphism in exon I. DNA extraction was peformed by phenol method. Then were selected different primers to make Polymerase Chain Reaction (PCR). The promoter region was sequenced MTRN1A a total of 1621 base pairs by the Sanger method, polymorphism in exon II was detected by PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) with HpaI enzyme and the polymorphism exon I was found by sequencing DNA by Sanger method. Allele and genotype frequencies of all SNPs were evaluated, the inbreeding coefficient (Fis) and the likelihood of Hardy-Weinberg equilibrium. SNPs in the promoter region and exon I have been associated with reproductive traits of buffaloes by ANOVA or Student's t test and / or chisquare test. The significance level was 0,05. 26 SNPs were detected in the promoter region at positions -1511 (C → T), -1465 (G → T), -1422 (A → G), -1411 (G → A), -1395 (G → T), - 1298 (A → G) -1295 (G → A) -1242 (C → A) -1150 (C → T), -1 147 (G → C) -1136 (A → G) -911 ( G → A), -909 (A → G) -724 (C → G) -656 (A → C) -649 (C → T), -644 (G → A), -511 (A → C) -481 (G → A), -425 (C → T) -395 (G → A), -383 (G → T), -254 (C → T) -206 (T → C) , -133 (T → G) and -94 (C → T) and a deletion unit (ACAA) at position -1483. Of the total detected SNPs, 75% of the wild alleles tiveral frequencies greater than 0,5. For the characteristic interval between calving (IEP), only five SNPs (-1298, -1136, -911, -724 and - 656) were significantly associated (P <0.05) and three SNPs (-1395, -724 and -94) were significantly associated (P <0.05) with the characteristic age at first calving (IPP) and none for the characteristic concentration of deliveries (P> 0.05). A total of 11 SNPs was strongly associated with binding factors in gene regulation. The SNP in exon II by PCR-RFLP (HpaI) at position 306 (T → C), the most frequent allele T in Upland animals (0,529) and C in lowland animals, the two populations showed coefficients Fis inbreeding (0,040 and 0,091, respectively) and strong deviations from Hardy-Weinberg equilibrium (P> 0.05). The mutation occurs at codon 106 and is the sinonímio type without changing the messenger RNA handles structure. The SNP in exon I was detected at position 62 (T → C) and of the non sinonímio, exchanging of Leucine to Proline. The mutant allele was the most frequent C (0,623) inbreeding coefficient Fis = 0.397 and Hardy-Weinberg deviations (P <0.05). None of the genotypes were associated with calving interval and age at first birth (P> 0.05). Therefore, SNPs are strong candidates for selection, but it would be interesting to evaluate them in other herds in the Amazon region and / or in other regions of Brazil and / or other countries to effect them as excellent molecular markers for reproductive traits of buffalo.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T11:45:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-17T12:51:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T12:51:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo principal do presente estudo foi estabelecer um protocolo eficiente de criopreservação seminal em Sapajus apella para a manutenção da viabilidade espermática. Para isso, foi comparado o desempenho dos diluidores TES-TRIS, ACIN e ACP-118® para escolher do melhor diluidor durante a dissolução do coágulo seminal e resfriamento, para posteriormente ser estabelecido a melhor concentração de glicerol (3; 5 e 7%) a ser adicionado no diluidor, bem como avaliar a suplementação do antioxidante catalase (10 µg e 50 µg) no meio de congelação seminal, no intuito de melhorar os parâmetros espermáticos. Foram utilizados seis machos adultos de S. apella oriundos do Centro Nacional de Primatas. As coletas do sêmen foram realizadas por eletroejaculação com probe retal, após a contenção química dos animais com Cloridrato de Ketamina e Cloridrato de Xilazina. Na primeira fase do projeto, o sêmen obtido foi diluído em TES-TRIS, ACIN e ACP®-118, mantido em banho-maria a 37 °C. Após dissolução do coágulo, o sêmen foi resfriado em geladeira a 4°C por 90 minutos, e avaliadas após 28h quanto a motilidade, o vigor, e o percentual de integridade de membrana antes e após o resfriamento. ACP®-118 foi o melhor diluidor para preservar a motilidade dos espermatozoides e integridade de membrana plasmática após 28 horas de incubação. A partir desse resultado, foi realizada a criopreservação avaliando diferentes concentrações de glicerol (3, 5 e 7%). Os espermatozoides criopreservados a 3% de glicerol apresentaram melhores resultados. Na segunda fase do projeto, foi realizada a criopreservação do sêmen de S. apella em diluidor ACP®-118 suplementado ou não com antioxidante catalase (10µg/mL e 50µg/mL). Todos os tratamentos foram eficazes na manutenção de parâmetros espermáticos, sendo possível a recuperação da motilidade pós-descongelamento. O tratamento catalase 50 foi o melhor de manutenção do vigor durante após resfriamento, e na integridade de membrana plasmática após a descongelação espermática. Em conclusão, ACP-118® pode ser usado de forma eficiente como diluidor para a criopreservação de sêmen S. apella adicionado de 3% de glicerol, além de que a adição do antioxidante catalase mostrou efeito benéfico durante esse processo. / The main objective of the present study was to establish an efficient semen cryopreservation protocol in Sapajus apella for maintaining sperm viability. For this, we compared the performance of TES-TRIS, CWS and ACP-118® extenders during the seminal coagulum dissolution and cooling. Then, in order to improve the sperm parameters, we also determined the glycerol concentration (3; 5 and 7%) as well as to evaluate the effect of catalase antioxidant (10 µg and 50 µg). Therefore, six adult males of S. apella from the National Primate Center were used. Semen was collected by electro-ejaculation with rectal probe after chemical restraint of animals with ketamine and xylazine hydrochloride. In the first phase of the project, the semen obtained was diluted in TES- TRIS, CWS and ACP®-118 extenders, kept in a water bath at 37 °C. After coagulum dissolution, the semen was cooled in the refrigerator at 4 °C for 90 minutes and evaluated after 28h for motility, vigor and plasma membrane integrity percentage before and after the cooling. ACP®-118 was the best extender to preserve the motility sperm and plasma membrane integrity after 28 hours of incubation. Based on these results, cryopreservation was performed by evaluation of different concentrations of glycerol (3, 5, and 7%). The cryopreserved sperm to 3% glycerol had better results. In the second project phase was performed S. apella semen cryopreservation in ACP®-118 extender supplemented or not with catalase antioxidant (10 µg/mL and 50 µg /mL). All treatments were effective in maintaining sperm parameters and was possible to recovery the post-thaw motility. The catalase 50 treatment was the best for maintenance of the vigor after cooling and plasma membrane integrity in post-thaw sperm. So, we concluded that ACP-118® extender can be efficiently used for S. apella semen cryopreservation added 3% glycerol, moreover, the addition of the catalase antioxidant showed beneficial effect during this process.

Orientador: Eunice Oba / Coorientador: Álan Maia Borges / Banca: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Luiz Sérgio de Almeida Camargo / Banca: Moysés dos Santos Miranda / Resumo: Esta pesquisa pretendeu estabelecer estratégias para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bubalinos. Neste contexto, avaliou a eficiência de protocolos de sincronização de doadoras de oócitos bubalinas visando aumentar a disponibilidade e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) e o efeito da fonte de obtenção dos oócitos sobre a quantidade e qualidade dos mesmos. Além disso, analisou-se o efeito do fotoperíodo sobre a quantidade e qualidade do oócitos disponíveis, além da competência destes expressos pelas taxas de PIVE. Por fim, avaliou-se o efeito da adição do óleo essencial de Lippia origanoides (OELO) nas concentrações de 2,5; 5,0 e 10μg/mL, no meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de maturação oocitária, qualidade embrionária e PIVE em bovinos e bubalinos. Ovários e oócitos de animais não protocolados, protocolados por aspiração prévia dos folículos e protocolados com uso de hormônios esteróides e gonadotróficos, foram avaliados ultrassonograficamente e de acordo com a qualidade dos oócitos recolhidos por OPU. Demonstrou-se não haver variação na população folicular, no número e na qualidade dos oócitos recuperados por sessão, exceto uma redução dos folículos e oócitos Grau A foi notada quando o ciclo estral foi sincronizado por aspiração prévia dos folículos(p<0,05). Em relação a fonte de obtenção, para todos parâmetros avaliados, foi notada superioridade quando oócitos são recuperados de ovários de frigorífico(p<0,05). A qualidade dos oócitos recolhidos por OPU e a PIVE bubalinos foi influenciada pelo fotoperíodo na região estudada, elevando-se durante os meses de baixa luminosidade(p<0,05), fato não observado em bovinos. Por fim, a partir de avaliações da cromatina com DAPI, encontrou-se uma elevação da taxa de maturação nuclear em bovinos quando utilizou-se concentrações de... / Abstract: This study aimed to develop strategies to increase the efficiency of buffalo in vitro embryo production (IVEP). In this context, we evaluated the efficiency of synchronization protocols on buffalo oocyte donor aimed at increasing the availability and quality of oocytes obtained by ovum pick-up (OPU) and the effect of the source of obtaining oocytes on the quantity and quality. In addition, we analyzed the effect of photoperiod on the quantity and quality of oocytes available on ovary, beyond the competence of those expressed by the blastocyst rate. Finally, we evaluate the effect of essential oil of Lippia origanoides (EOLO) added at concentrations of 2.5, 5.0 and 10μg/ml, on in vitro maturation (IVM) media over oocyte maturation rate, embryo quality and IVEP on cattle and buffalo. Ovaries and oocytes of animals without protocol, protocol by prior aspiration of follicles and protocol with use of steroids and gonadotropic hormones were evaluated by ultrasonography and according to the of oocyte quality. It was demonstrated not vary the follicular population, number and quality of oocytes retrieved per session between the protocols but a reduction of follicles and Grade A oocytes was noted when the follicles were aspirated previously OPU. Regarding the oocyte source (live animals and abattoir ovaries), all evaluated parameters showed superiority when oocytes were derived from abattoir ovaries. The quality of oocytes collected by OPU and IVEP buffaloes was influenced by photoperiod in the region studied, increased when daylight decreases, which was not observed in cattle. Finally, from evaluations of chromatin stained with DAPI, it was found that bovine nuclear maturation rate increased when used concentrations of 2,5μg/ml EOLO. The quality of oocytes, expressed by cell number, increased when used concentrations of 2.5 and 5μg/ml of EOLO in buffaloes. Although it has not changed the blastocyst rate of PIVE in both species, the EOLO has ... / Doutor

Este trabalho teve por objetivo descrever os perfis hormonais do ciclo ovariano de cinco exemplares adultos de C. penicillata, mantidas no Parque Municipal Quinzinho de Barros em Sorocaba, SP. As amostras de fezes foram colhidas diariamente, sempre pela manhã, durante três meses e mantidas congeladas até o processamento laboratorial. Após a extração com solventes orgânicos, as mensurações foram efetuadas com o uso da técnica de radioimunoensaio (RIE). Para as mensurações dos metabólitos hormonais foram utilizados conjuntos comerciais validados para o uso em matriz fecal de C.penicilatta. Os resultados mostraram que duas fêmeas estavam ciclando e três estavam gestantes. Para as fêmeas que apresentaram ciclicidade ovariana o ciclo teve duração média de 23.5 ±9, 9 dias, sendo que as durações das fases lúteas e foliculares foram de 13,25 dias ± 9,46 dias e de 10,25 ±7,2 dias, respectivamente. Entre as outras três fêmeas, duas tiveram suas gestações confirmadas, parindo filhotes e uma teve suspeita de ter sofrido abortamento .Para as que tiveram suas gestações confirmadas, a média das concentrações dos metabólitos fecais de progesterona foi de 4527,19 ± 3667,8 ng/g para o terço medio enquanto a média do terço final foi de 2974±2471,9 ng/g. As médias obtidas para as concentrações de metabólitos de estrógenos nos terços medio e final foram respectivamente de 1401,41± 1034,4 ng/g e 1546,67± 1227,2 ng/g. Para a fêmea que teve suspeita de abortamento foram confeccionados gráficos dos valôres obtidos das concentrações de ambos os metabólitos hormonais para o período anterior e posterior a data presumida do evento e comparadas as suas médias . A média da concentração dos metabólitos fecais de progesterona antes do suposto abortamento foi de 1466,22± 784,36 ng/g e para o período posterior ao suposto evento foi de 813 ± 614,66 ng/g Para as médias das concentrações de metabólitos fecais de estrógenos, os resultados obtidos foram de 745,65± 747,39 ng/g antes e 212,42 ±331,84 ng/g depois do suposto evento. As analises das concentrações de metabóltios fecais dos hormonios esteroides, mostrou-se uma ferramenta efficiente e adequada para estudos sobre a ciclicidade ovariana e gestação do C. penicillata. / This study had as objective to describe the hormonal profiles of the ovarian cycle of five adult females of C.penicillata, from the Parque Municipal Quinzinho de Barros in Sorocaba, SP. The fecal samples were collected on a daily basis, always in the morning, during three months and then frozen until their processing. After extraction with organic solvents, the measurements were conducted with radioimmunoassay (RIA) .For the measurements of the hormonal metabolites comercial kits were used and validated for C.penicillata. The results showed two females with ovarian cyclicity and three females that were pregnant. For the females that presented ovarian cyclicity the duration of the ovarian cycle had an average of 23.5 ± 9.9 days , where the duration of the luteal and follicular phases were of 13.25 ±9.46 days and 10.25±7.2 days, respectively. Of the other three females, two had their pregnancys confirmed by the birth of their young and one was suspected to have suffered abortion. For the females that had their pregnancys confirmed , the mean of the fecal progesterone metabolites concentration was of 4527.19 ± 3667.8 ng/g for the second trimester, as where for the third trimester it was of 2974 ±2471.9 ng/g. The means for the estrogen fecal metabolites concentrations for the second and third trimester were of 1401.41 ± 1034.4 ng/g and 1546.67 ± 1227.2 ng/g. For the female that was suspected to have had an abortion graphs were used with values obtained from both fecal metabolites concentrations from before and after the presumed date of the event and the means were compared. The mean of progesterone fecal metabolites concentrations before the abortion was of 1466.22 ± 784.36 ng/g and for the period after the abortion it was of 813 ± 614.66 ng/g. For the estrogen fecal metabolites concentration mean, the results obtained were of 745.65 ± 747.39 ng/g for the before period and 212.42 ±331.84 for the after period. The analysis of the fecal metabolites steroids hormone concentration, showed to be an efficient tool for the studies of the ovarian cycle and gestation period in the C.penicillata.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:05:58Z : No. of bitstreams: 1 pinheiro_tg_dr_rcla_parcial.pdf: 88748 bytes, checksum: 91cfdd86fa146f6a4d0f6fb9c08b9feb (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:01:01Z: pinheiro_tg_dr_rcla_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:22Z : No. of bitstreams: 1 000713035_20160306.pdf: 78291 bytes, checksum: fec34fc9a16ffd96992e19f4bde0fba2 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-07T11:06:16Z: 000713035_20160306.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T11:07:07Z : No. of bitstreams: 1 000713035.pdf: 1097521 bytes, checksum: 53a1914b1b9f91f15512a5389e0621f1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Pouco se sabe sobre a dinâmica reprodutiva dos diplópodos em seu habitat natural. Em áreas inundáveis como o Pantanal matogrossense, estes organismos desenvolvem estratégias de sobrevivência para suportar as alterações cíclicas do regime hídrico. Diante disso, este estudo visou descrever a estrutura ovariana e o ciclo ovogenético de três espécies de diplópodos da ordem Polydesmida: Poratia salvator e Myrmecodesmus hastatus, encontradas em áreas inundáveis e não inundáveis do Pantanal matogrossense, e Telonychopus klossae, que ocorre no município de Cuiabá, Mato Grosso. Além disso, visou fazer um estudo comparativo da morfologia ovariana dessas espécies, a fim de contribuir para discussões sobre a evolução morfológica deste sistema no grupo. Os indivíduos foram coletados trimestralmente, de dezembro de 2009 a janeiro de 2012, por meio de busca ativa. Parte das fêmeas amostradas foi dissecada, fixada, emblocada e processada para estudos histológicos e histoquímicos e outra foi destinada ao estudo ultramorfológico. Poratia salvator e M. hastatus (Pyrgodesmidae) apresentaram ovário como um órgão tubular único. Telonychopus klossae (Chelodesmidae) possui ovário pareado com presença de ovissacos. O ovário não pareado parece ser uma apomorfia, aparentemente, associada ao tamanho diminuto destas espécies e suas curtas histórias de vida; a condição pareada seria simplesiomórfica e mais comum para as famílias de Polydesmida. Os ovócitos apresentam três estágios de desenvolvimento, diferenciados por caracteres como tamanho, aspecto do ovoplasma e deposição do cório. Com relação aos componentes das células germinativas, a deposição de lípidos foi primeiramente observada, seguida pela deposição de proteínas, carboidratos e cálcio. Estes elementos são derivados tanto de... / Little is known about the reproductive dynamics of the diplopods in their natural habitat. In wetlands, these organisms develop survival strategies to withstand the cyclical changes of the water regime. Thus, this study aims to describe the ovarian structure and the oogenetic cycle of three diplopods species in the order Polydesmida: Poratia salvator and Myrmecodesmus hastatus, found in flooded and non-flooded areas of the Pantanal of Mato Grosso, and Telonychopus klossae, that occurs in the Cuiabá city, Mato Grosso. Moreover, it aims to make a comparative study of the ovarian morphology of these species for to contribute with discussions about the morphological evolution of this system in the group. The animals were collected quarterly from December 2009 to January 2012 through active search. Part of the sampled females was processed for histological and histochemical investigation and other part was intended for ultrastructural study. Poratia salvator and M. hastatus (Pyrgodesmidae) had an unpaired ovary that formed a tubular organ containing oocytes. Telonychopus klossae (Chelodesmidae) had a paired ovary with ovisacs. The unpaired ovary appeared to be apomorphic and was associated with the small size of these species and their short life cycle; the paired condition was symplesiomorphic, commonest to Polydesmida families. The oocytes in these species have three stages of development, which were differentiated by size, aspect of ooplasma and deposition of the chorion. With respect to the components of germ cells, the lipid deposition was noted first, followed by the deposition of proteins, carbohydrates and calcium. These elements are derived either from endogenous sources as exogenous. In all Pantanal seasons occurred females of P. salvator e M. hastatus with oocytes in stage III... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-27Bitstream added on 2014-06-13T21:08:05Z : No. of bitstreams: 1 villaverde_aisb_me_botfmvz.pdf: 995611 bytes, checksum: 95781868451ff6d5037fde5a7435a721 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência das técnicas de inseminação artificial intra-vaginal (IAIV) e intra-uterina (IAIU) com sêmen congelado/descongelado em gatos domésticos através da taxa de prenhez. O ejaculado de dois gatos adultos foi colhido com vagina artificial e o sêmen avaliado para motilidade (CASA), morfologia espermática e integridade de membrana plasmática. Após diluição em meio TRIS/OEP (4% de glicerol), as amostras foram envasadas em palhetas francesas de 0,25 mL (25 x 106 de espermatozóides móveis) as quais, após 20 minutos à 5ºC, permaneceram por 15 minutos em vapor de nitrogênio líquido, sendo posteriormente mergulhadas. Para cada IA, quatro palhetas do mesmo gato foram descongeladas por 12 segundos à 46ºC e centrifugadas a 250xg por 8 minutos. O pellet ressuspendido em 100 æL do meio foi analisado como descrito anteriormente. Nas gatas, o estro e a ovulação foram induzidos com 100 UI de eCG e, após 84 horas, 100 UI de hCG. Após 30 horas da indução da ovulação, as gatas foram inseminadas pelo método intra-uterino ou intra-vaginal, com o sêmen obtido do gato A ou B (n=8 gatas para cada método de IA). Para a análise estatística os testes de Tukey e de Wilcoxon foram utilizados para as variáveis de qualidade espermática, enquanto o teste de Fisher foi usado para comparar os métodos de IA, estabelecendo diferença significativa quando p<0,05. Embora tenha sido observada uma queda acentuada de motilidade, integridade de acrossomo e integridade de membrana plasmática nas amostras seminais descongeladas de ambos os gatos, um índice de prenhez de 75% foi alcançado quando utilizado o método de IA intra-uterino, contra 0% com o método intra-vaginal. / The aim of this study was to compare the efficiency of the intravaginal and the intrauterine artificial insemination methods using domestic cat frozen/thawed semen by determining the pregnancy rate. The sperm was collected from two tom cats using an artificial vagina and the samples were assessed for motility (CASA), sperm morphology and plasma membrane integrity. After dilution with TRIS/OEP (4% of glycerol), the sperm samples were loaded into 0.25 mL straws (25 x 106 of sperm cells presenting motility) which, after 20 minutes under 5ºC, were placed in liquid nitrogen vapour for 15 minutes, being afterwards immersed. For each AI, four straws from the same male were thawed during 12 seconds at 46ºC and centrifuged at 250xg for 8 minutes. The pellet was ressuspended in 100 æL of the extender and analyzed as described above. In the queens, estrus and ovulation were induced using 100 UI of eCG and, after 84 hours, 100 UI of hCG. After 30 hours from the ovulation induction, the females were inseminated by the intrauterine or by the intravaginal methods, using the semen obtained by male A or B (n=8 females for each AI method). For statistical analysis the Tukey test and the Wilcoxon test were used for the sperm quality results, while the Fisher test was used to compare the two AI methods, with p<0.05 taken as significant. Although a pronounced decrease in motility, acrosome integrity and plasma membrane integrity were observed for the sperm samples from both cats, a pregnancy rate of 75% was achieved when using the intrauterine AI method, against 0% with the intravaginal AI method.

Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-10. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:54:56Z : No. of bitstreams: 1 000864315.pdf: 1933866 bytes, checksum: 3d5e86a181b0ce722fb5dfee9bb0700e (MD5) / Brazilian livestock consists of animals raised and finished in tropical pastures, most of them established in medium and low fertility soils. The tropical forages, however, are limited in some nutrients, especially in minerals, which can compromise the results of cattle production. Among the minerals, phosphorus (P) occupies an important position due to its role in animals' metabolism and to its cost, which represents most of the mineral supplements costs, so rendering this input the most expensive for the definition of the production costs of cattle raised in grasslands. Often, the farmers do not follow the ideal techniques for the animal's' mineral supplementation and, besides that, practical observations suggest that not always the animal productivity is related to the mineral supplementation techniques or with the P contents of the supplements. Following the hypothesis that the recommended levels of P can be reduced without damaging the animal productivity, the aim of this trial was to check on the effects of reducing the phosphorus supplementation concentrations (from 4% to 1.8%) in a beef cow herd raised on Urochloa decumbens pastures on the productive and reproductive parameters, as well as on the supplementation costs. The study was conducted on the cerrado biome, from 2011 to 2013. Variables analyzed included pregnancy rate, calving interval, weight of calves at weaning and cost of supplementation. No changes were found for the productive and reproductive performance of the herd. However, there was a significant reduction in the supplementation costs when the herd was supplemented with a mineral mixture containing 1.8% phosphorus

Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:55:02Z : No. of bitstreams: 1 000858340.pdf: 1640939 bytes, checksum: fc02bd8ed0c9991ee8bbed594e41a5a7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Esta pesquisa pretendeu estabelecer estratégias para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bubalinos. Neste contexto, avaliou a eficiência de protocolos de sincronização de doadoras de oócitos bubalinas visando aumentar a disponibilidade e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) e o efeito da fonte de obtenção dos oócitos sobre a quantidade e qualidade dos mesmos. Além disso, analisou-se o efeito do fotoperíodo sobre a quantidade e qualidade do oócitos disponíveis, além da competência destes expressos pelas taxas de PIVE. Por fim, avaliou-se o efeito da adição do óleo essencial de Lippia origanoides (OELO) nas concentrações de 2,5; 5,0 e 10μg/mL, no meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de maturação oocitária, qualidade embrionária e PIVE em bovinos e bubalinos. Ovários e oócitos de animais não protocolados, protocolados por aspiração prévia dos folículos e protocolados com uso de hormônios esteróides e gonadotróficos, foram avaliados ultrassonograficamente e de acordo com a qualidade dos oócitos recolhidos por OPU. Demonstrou-se não haver variação na população folicular, no número e na qualidade dos oócitos recuperados por sessão, exceto uma redução dos folículos e oócitos Grau A foi notada quando o ciclo estral foi sincronizado por aspiração prévia dos folículos(p<0,05). Em relação a fonte de obtenção, para todos parâmetros avaliados, foi notada superioridade quando oócitos são recuperados de ovários de frigorífico(p<0,05). A qualidade dos oócitos recolhidos por OPU e a PIVE bubalinos foi influenciada pelo fotoperíodo na região estudada, elevando-se durante os meses de baixa luminosidade(p<0,05), fato não observado em bovinos. Por fim, a partir de avaliações da cromatina com DAPI, encontrou-se uma elevação da taxa de maturação nuclear em bovinos quando utilizou-se concentrações de... / This study aimed to develop strategies to increase the efficiency of buffalo in vitro embryo production (IVEP). In this context, we evaluated the efficiency of synchronization protocols on buffalo oocyte donor aimed at increasing the availability and quality of oocytes obtained by ovum pick-up (OPU) and the effect of the source of obtaining oocytes on the quantity and quality. In addition, we analyzed the effect of photoperiod on the quantity and quality of oocytes available on ovary, beyond the competence of those expressed by the blastocyst rate. Finally, we evaluate the effect of essential oil of Lippia origanoides (EOLO) added at concentrations of 2.5, 5.0 and 10μg/ml, on in vitro maturation (IVM) media over oocyte maturation rate, embryo quality and IVEP on cattle and buffalo. Ovaries and oocytes of animals without protocol, protocol by prior aspiration of follicles and protocol with use of steroids and gonadotropic hormones were evaluated by ultrasonography and according to the of oocyte quality. It was demonstrated not vary the follicular population, number and quality of oocytes retrieved per session between the protocols but a reduction of follicles and Grade A oocytes was noted when the follicles were aspirated previously OPU. Regarding the oocyte source (live animals and abattoir ovaries), all evaluated parameters showed superiority when oocytes were derived from abattoir ovaries. The quality of oocytes collected by OPU and IVEP buffaloes was influenced by photoperiod in the region studied, increased when daylight decreases, which was not observed in cattle. Finally, from evaluations of chromatin stained with DAPI, it was found that bovine nuclear maturation rate increased when used concentrations of 2,5μg/ml EOLO. The quality of oocytes, expressed by cell number, increased when used concentrations of 2.5 and 5μg/ml of EOLO in buffaloes. Although it has not changed the blastocyst rate of PIVE in both species, the EOLO has ...

A produção in vitro (PIV) de embriões bovinos é uma das biotécnicas de reprodução que mais evoluíram nas últimas duas décadas. No Brasil, a associação com a técnica de aspiração folicular guiada por ultra-som determinou uma significativa disseminação do uso comercial da PIV. A produção em larga escala de embriões PIV associada à dificuldade em criopreservá-los, determinou que um número significativo desses embriões passasse a ser descartado nas atividades de campo, gerando prejuízos aos produtores e técnicos envolvidos no processo. Os experimentos realizados no âmbito desta tese tiveram como objetivo identificar e propor soluções para um aproveitamento mais eficiente dos ovócitos e embriões PIV. Em virtude da qualidade dos embriões poder ser influenciada pelo sistema de produção in vitro, foi realizado um experimento (Capítulo 1) para determinar a capacidade dos embriões derivados de dois sistemas de PIV em resistir à vitrificação. Entretanto, nas condições testadas, não foram verificadas influências significativas do efeito do sistema de PIV. No segundo experimento (Capítulo 2), buscou-se identificar a influência da solução crioprotetora sobre a taxa de sobrevivência embrionária in vitro e in vivo. Os resultados obtidos revelaram um efeito significativo da solução de vitrificação sobre a sobrevivência in vitro, por outro lado as taxas de prenhez foram semelhantes. Estes resultados também comprovaram a viabilidade do método de transferência direta desenvolvido neste experimento. Finalmente, em um terceiro grupo de experimentos (Capítulo 3), foi determinada a viabilidade da vitrificação de ovócitos imaturos usando duas estratégias de resfriamento. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos. Entretanto, a obtenção de produtos nascidos de embriões vitrificados, derivados de ovócitos imaturos vitrificados, confirma a viabilidade de criopreservação desses ovócitos como alternativa para programação das atividades de PIV. / The in vitro production (IVP) of bovine embryos has achieved an important development during the last two decades. In Brazil the large scale use of the follicular aspiration guided by ultrasonography has determined a significant improvement in the in vitro embryo production as a commercial tool. The difficulties to cryopreserve bovine oocytes and IVP embryos are at the moment the greatest barrier impairing the efficient application of this reproductive biotechnology which results in the disposal of large numbers of bovine IVP embryos. Considering these factors, this Thesis aimed to highlight new approaches to reduce embryo disposal and improve the pregnancies rates after the cryopreservation of bovine immature oocytes and IVP blastocysts. The first experiment (Chapter 1) was designed to observe the cryotolorance of embryos produced by two different IVP systems. The tested in-vitro systems did not show differences in the cryotolerance by in vitro production system. A second experiment (Chapter 2), was carried out to determine in vitro and in vivo embryo survival rates of IVP blastocysts cryopreserved using different vitrifications solutions. The results showed a significant vitrification solution effect on in vitro survival, however, when in vivo, the pregnancy rates were not different. This experiment also verified the feasibility of the direct transfer method for vitrified embryos. Finally, in a third experiment (Chapter 3) the viability of the vitrification of immature oocytes was determined using two cooling strategies. Differences among the treatments were not observed. However, calves born from the transfer of vitrified embryos, derived from vitrified immature oocytes, highlighted that the increase in cryopreservation efficiency of immature oocytes may be an important alternative to improve the IVP commercial application.