Objetivos: Avaliar o perfil de suscetibilidade, a prevalência da produção de AmpC, β-lactamase de espectro estendido (ESBL) e Metalo-β-lactamase (M-βla) em Pseudomonas aeruginosa obtidas de dois hospitais universitários distintos (ISCMPA e HCPA) em Porto Alegre. Em adição, tipagem molecular por PFGE foi realizada entre os isolados produtores de M-βla para avaliar a relação clonal. Métodos: Foi determinada a suscetibilidade de 238 isolados de P. aeruginosa para 8 agentes antimicrobianos, através do teste de disco-difusão, usando agar Müller-Hinton (MH) de acordo com “National Committee for Clinical Laboratory Standards” (NCCLS) . Todos isolados foram avaliados para produção de AmpC com o disco de imipenem (indutor) próximo ao disco de cefepima/ceftazdima (substrato). Um achatamento no halo de cefepime/ceftazidima pela indução da enzima pelo imipenem, indicava resultado positivo para AmpC. Todos isolados forma avaliados para a presença de ESBL através do teste de aproximação de disco com ceftazidima, cefepima, cefotaxima, ceftriaxona e ticarcilina-clavulanato como inibidor de β-lactamase. A produção de M-βla foi determinada através do teste de aproximação de discos de CAZ a discos impregnados com ácido2-mercatopropiônico (2-MPA). As taxas de resistência foram comparadas através do Teste Exato de Fisher. Valor de P<0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Análise de macrorestrição com a enzima speI foi realizada em isolados produtores de M-βla. Resultados: As taxas de resistência para todos os agentes foram superiores entre os isolados obtidos na ISCMPA em relação aos do HCPA. A ceftazidima mostrou ser o antibiótico mais efetivo contra os isolados de ambos Hospitais (ISCMPA e HCPA) com taxa de resistência de 25,7% (ISCMPA) e 6,1% (HCPA). A expressão de AmpC foi observada em 190 isolados (83,7% HCPA e 77,1% ISCMPA). Não foi possível detectar a presença de ESBL entre todos as P. aeruginosa avaliadas em ambos hospitais. Foi observada a presença de M-βla em 28 isolados (20,0%) da ISCMPA. Mas não foi detectada M-βla em nenhuma P. aeruginosa do HCPA. A análise de macrorestrição mostrou que 14 de 16 P. aeruginosa Mβla positivas pertenciam a um clone (denominado clone A), e seus subclones. Apenas dois outros clones (B e C) foram identificados em um isolado cada. / Objectives: To evaluate susceptibility profile, the prevalence of extendedspectrum β-lactamases (ESBL) production, AmpC and Metallo-β-lactamases (M-βla) in Pseudomonas aeruginosa obtained from two distinct hospitals (ISCMPA and HCPA) in Porto Alegre, Brazil. In addiction, molecular typing by PFGE was perfomed among isolates producing M-βla in order to evaluate probably clonal relatedness. Methods: The susceptibility of 238 P. aeruginosa to 8 antimicrobial agents was determined by the disk diffusion method, using Müller-Hinton agar (MH) in accordance with “National Committee for Clinical Laboratory Standards” guidelines. All isolates were evaluated for AmpC production with the imipenem disk (strong inducer) near of the cefepime/ceftazidime disk (substrate). A blunting of the cefepime/ceftazidime zone by imipenem-induced enzyme, indicated positive result for AmpC. All isolates were evaluated for ESBL production by disk approximation test with ceftazdime, cefepime, cefotaxime, ceftriaxone plus ticarcillin-clavulanate as inhibitor. M-βla production was determined by disk approximation test with disks containing CAZ and 2-mercatopropionic acid (2-MPA). The results were compared by the Fisher’s Exact Test. Macrorestriction analysis by SpeI, followed by PFGE, was perfomed in isolates M-βla positive. The resistance rates were compared by The Fisher’s Exact Test. P values < 0.05 were considered to be statistically significant. Results: The resistance rates to all antimicrobial agents were higher among isolates obtained from ISCMPA than those obtained from HCPA. The ceftazidime was the more active antibiotic against the isolates in both hospitals with resistance rates of 25,7% (ISCMPA) and 6,1% (HCPA). The derepression of AmpC was observed in 190 isolates (83,7% HCPA and 77,1% ISCMPA). It was not possible to detect the presence of ESBL among all P. aeruginosa evaluated in both hospitals. Positive results for M-βla production were observed in 28 isolates (20,0%) from ISCMPA. But none M-βla production was identified in P. aeruginosa from HCPA. The macrorestriction analysis by PFGE, showed that 14 of 16 M-βla positive P. aeruginosa beloneed to one clone (named clone A) and its subclones.Only two others clones (B and C) were identified in one isolate each.

Cancer represents one of the leading causes of death worldwide and efforts to discover more effective anticancer therapies have led to the synthesis of a wide diversity of molecular species. Another major challenge is the anti-infective treatment, because despite the large arsenal of active substances available, many show inefficiency due to the rapid emergence of resistant bacterial strains. As a result, arises the necessity of finding new active substances, more effective and targeted properties in both treatments of neoplasms as microbial resistance. Notably, the Triazenes compounds (TZCs) have been asserting itself as a promising class of metallodrugs with relevant antimicrobial and antiproliferative activity. Moreover, the association of pharmacophoric radical TZC with metal ions, such as gold, leads to a significant increase in biological activity. Because of this wide pharmacological versatility, this study aimed the evaluating in vitro of the biological activity of a compound TZC complexed with ion gold (I). The antibacterial activity was carried out by the conventional method of broth microdilution, through the technique of the minimum inhibitory concentration (MIC), against bacterial strains reference standard American Type Culture Collection (ATCC), clinical isolates with multidrug resistance (MDR) and clinical isolates biofilm producers. Cytotoxicity was evaluated by colorimetric assay based on the reduction of bromide of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) (MTT) against the standard cell line K562 (Chronic Myeloid Leukemia). The results obtained demonstrate that the compound in study present a narrow spectrum of action, being active only against microorganisms classified as Gram positive, moreover, proved to be active against all isolates producing biofilm when compared to non-producing strains of biofilm. Also showed remarkable cytotoxic activity, with IC50 4.96 μM. Thus, these results demonstrate an alternative to the design of a new class of antibacterial and antitumor metallodrugs with activity. / O câncer representa uma das principais causas de óbito no mundo e esforços para descobrir terapias antineoplásicas mais eficazes têm conduzido à síntese de inúmeras moléculas. Outro grande desafio é o tratamento anti-infeccioso, pois apesar do grande arsenal de substâncias ativas disponíveis, muitas mostram-se ineficazes devido ao rápido aparecimento de estirpes bacterianas resistentes. Em razão disso, surge a necessidade da descoberta de novas substâncias ativas, com propriedades mais eficazes e direcionadas, tanto nos tratamentos de neoplasias como de resistência microbiana. Notoriamente, os compostos Triazenos (TZCs) vêm afirmando-se como uma classe promissora de metalofármacos com relevante atividade antimicrobiana e antiproliferativa. Além disso, a associação do radical farmacofórico TZC com íons metálicos, como o ouro, leva a um aumento significativo na atividade biológica. Em virtude dessa ampla versatilidade farmacológica, este estudo teve como objetivo a avaliação in vitro da atividade biológica de um composto TZC complexados com íon ouro (I). A atividade antibacteriana foi realizada pelo método convencional da microdiluição em caldo, através da técnica da concentração inibitória mínima (CIM), frente às cepas bacterianas padrão de referência American Type Culture Collection (ATCC), isolados clínicos com resistência a múltiplas drogas (RMD) e isolados clínicos produtores de biofilme. A citotoxicidade foi analisada através do ensaio colorimétrico baseado na redução do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazólio) (MTT), frente às células da linhagem padrão K562 (Leucemia Mieloide Crônica). Os resultados obtidos demonstram que o composto em estudo apresentou estreito espectro de ação, sendo ativo somente frente aos microrganismos classificados como Gram positivos, além disso, mostrou-se ativo frente a todos os isolados produtores de biofilme, quando comparado às cepas não produtoras de biofilme. Também demonstrou notável atividade citotóxica, tendo a IC50 4.96 μM. Sendo assim, esses resultados demonstram uma alternativa para a concepção de uma nova classe de metalofármacos com atividade antibacteriana e antitumoral.

As bactérias contendo este elemento de mobilidade genética podem contribuir para a disseminação de determinantes de resistência, bem como servir de reservatório em potencial para estes genes. / Pseudomonas genus, widely distributed in the environment, is often found associated to determinants of beta-lactams resistance and presence of integrons. The present study was conducted to investigate the resistance profile of Pseudomonas spp strains isolated from untreated hospital effluents, likewise beta-lactamase genes and integrons. Untreated hospital effluents were collected from four hospitals in Porto Alegre, RS. Non-fermenter bacteria were isolated; the identification was confirmed by 16S rRNA PCR. Susceptibility testing was determined by the disk-diffusion method using 11 different betalactams antimicrobials. The beta-lactamase genes blaIMP, blaVIM, blaSPM-1, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-51-like and blaGES-like genes and the integrons genes intI1, intI2 and intI3 were determined by PCR using specific primers. One hundred and twenty-eight isolates were recovered; the most common species was P. pseudoalcaligenes. The resistance level found was considered high, 62 (50%) isolates were multi-resistants. No isolate carrying the beta-lactamase genes tested was found among the strains. Of 68 isolates considered positives for integrons, 52 were identified as carrying the class 1 integron gene, intI1. No isolate carrying class 1 or class 2 integrons was found among the strains. Untreated hospital effluents could be a source of environmental contamination due to discharge of antimicrobial resistant bacteria, in the case of the present study, also integron positives. Bacteria carrying this genetic mobile element can contribute for the dissemination of resistance determinants and also act like a potential reservoir for many types of resistance genes.

Made available in DSpace on 2015-04-01T14:16:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1728060 bytes, checksum: 29c473da9426832816bbcb073e84e4f1 (MD5) Previous issue date: 2014-10-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bacterial resistance to drugs can happen due to different mechanisms. Among these, efflux bombs highlights and these structures are integrant part of membran cell. The increasing incidence of resistant bacteria has undermined the therapeutic value of available antibacterials, creating the necessity, increasingly, the search for alternatives that can reverse or decrease the resistance, as the search for inhibitors of resistance mechanisms. In order to resolve this problem, products from plants (extracts, essencial oils and phytoconstituents) rise as rich research source on drug resistance modulators , that is, drugs that increase antibiotics activity or even revert bacterial resistance. In this work, we investigated how modifiers of antibiotic activity act in Staphylococcus aureus strains that are efflux bombs carriers. The essencial oils used were extracted from Rosmarinus officinalis L., Illicium verum Hook., Cananga odorata, Eucalytus globulus, Pelargonium graveolens , Citrus paradisi, Cymbopogon flexuosus, Melaleuca alternifolia, Mentha Spicata, Origanum vulgare, Cymbopogon Martini, and their major constituents used were 1,8-cineol, Anetol, Trans-Caryophyllene, Citronelol, Limoneno, Citral, Terpenen-4-ol, L-carvone, Carvacrol and Geraniol. Our results show that the natural products evaluated, in general, present significant antibacterial activity, and probably they operate as modifiers of antibiotic activity, strains through reduction of CIM of tested antibiotics (tetracycline, erythromycin and norfloxacin) from 2 to16 fold. The results show that natural products from plants are in fact potential antibiotics adjuvants. / A resistência bacteriana a drogas pode ser ocasionada por diferentes mecanismos. Dentre esses, podemos destacar as chamadas bombas de efluxo as quais são partes integrantes da membrana plasmática. A crescente incidência de bactérias resistentes tem minado o valor terapêutico dos antibacterianos existentes, criando a necessidade, cada vez maior, da busca por alternativas capazes de reverter ou diminuir a resistência. Na tentativa de encontrar uma solução para esse problema, os produtos de origem vegetal (extratos, óleos essenciais e fitoconstituintes) surgem como uma rica fonte de pesquisa na busca de potenciais moduladores da resistência à droga , ou seja, drogas que aumentam a atividade de certos antibióticos ou mesmo revertem a resistência bacteriana. Neste trabalho, avaliamos o efeito modificador da atividade antibiótica em linhagens de Staphylococcus aureus - portadoras das bombas de efluxo - o óleo essencial de Rosmarinus officinalis L., Illicium verum Hook., Cananga odorata, Eucalytus globulus, Pelargonium graveolens , Citrus paradisi, Cymbopogon flexuosus, Melaleuca alternifólia, Mentha Spicata, Origanum vulgare, Cymbopogon Martini e seus constituintes majoritários, 1,8 cineol, Anetol, Trans-Caryophyllene, Citronelol, Limoneno, Citral, Terpinen-4-ol, L-carvone, Carvacrol e Geraniol. Como resultado, observou-se que os produtos naturais avaliados, de maneira geral, apresentaram significativa atividade antibacteriana e podem atuar como modificadores da atividade antibiótica ao reduzirem a CIM dos antibióticos testados (tetraciclina, eritromicina e norfloxacina) de 2 a 16 vezes. Os resultados indicam que produtos naturais de origem vegetal são, de fato, potenciais adjuvantes de antibióticos.

Submitted by Viviane Lima da Cunha (viviane@biblioteca.ufpb.br) on 2015-05-26T15:04:31Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1017420 bytes, checksum: bb1f5f1df7d6abdcf38a42cb7bbe0d9d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-26T15:04:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1017420 bytes, checksum: bb1f5f1df7d6abdcf38a42cb7bbe0d9d (MD5) Previous issue date: 2015-04-01 / Phenolic compounds are a major class of plant secondary metabolites synthesized for plant and adaptation to environmental stress defense. Are divided into three groups: phenolic acids, flavonoids and tannins. Have been proposed as having a variety of biological effects on human health and microorganisms such as S. aureus. Cases of infections caused by strains of S. aureus multi drug resistant (MDR) has increased over the years. Among the strategies to combat resistance of S. aureus to antibiotics, is the discovery of so-called modifiers resistance (Resistance-Modifying Agents - RMA). In this study, we evaluated the potential modulator and synergistic effect of flavonoids, tannins and phenolic acid on antibiotic activity norfloxanina (NOR), tetracycline (TET) and erythromycin (ERI) in strains of S. aureus. Six flavonoids have been tested - O-glycoside and C-glycoside - and their aglycone derivatives, two tannins (gallotannin and ellagitannin), phenolic acids (hydroxydiphenic acid and cinnamic acid derivatives). The compounds tested showed no antimicrobial activity at 128 μg/mL (MIC between 256 and 512 μg/mL). In the modulation test, the O-glycosylated flavonoids showed no reducing effect of the MIC of antibiotics tested, however, its aglycone derivatives reduced the MIC in the NOR sixteen fold (8 to 128 μg/mL), in contrast, the Cglycosylated flavonoids, quercetin and myricetin, reduced the MIC in the NOR up to four fold (32 to 128 μg/mL) and their aglycone derivatives showed no reducing effect MIC of the tested antibiotics; the hexahydroxydiphenic acid (gallic acid) showed no reducing effect of MIC of the tested antibiotics; among the cinnamic acid derivatives tested, only 3-methoxycinnamic acid, 3,4-dimethoxycinnamic acid and 3,4,5-trimethoxycinnamic acid reduced the MIC in the NOR (64 to 128 μg/mL), while the 3-methoxycinnamic acid presented reducing effect of tetracycline MIC (64 to 32 μg/mL); the ellagitannin (ellagic acid) showed no reducing effect of MIC of antibiotics tested, already the gallotannin (tannic acid - TA) reduced thirty-two fold the MIC NOR (128 to 4 μg/mL), the test checkerboard TA had effect synergistic when applied in combination with NOR (FICI = 0.15) TA MIC decreased from 512 to 64 μg/mL (eight fold) while the MIC of NOR decreased from 128 to 4 μg/mL (thirty-two fold). The results demonstrate that the phenolic compounds have a potential application as an adjunct to antibiotics, particularly when in combination with NOR. / Os compostos fenólicos constituem uma das principais classes de metabólitos secundários de plantas, sintetizados para a defesa vegetal e adaptação ao estresse ambiental. Estão subdivididos em três grupos: ácidos fenólicos, flavonoides e taninos. Têm sido propostos como tendo uma variedade de efeitos biológicos na saúde humana e sobre microrganismos como S. aureus. Casos de infecções provocadas por cepas de S. aureus multi droga resistentes (MDR) têm aumentando ao longo dos anos. Dentre as estratégias de combate à resistência de S. aureus a antibióticos, está a descoberta dos chamados agentes modificadores da resistência (RMA- resistance-modifying agents). Neste estudo, avaliamos o potencial modulador e efeito sinérgico de flavonoides, taninos e ácido fenólicos sobre a atividade antibiótica de norfloxanina (NOR), tetraciclina (TET) e eritromicina (ERI) em linhagens de S. aureus. Foram testados seis flavonoides - O-glicosídeo e C-glicosídeo - e seus derivados aglicona, dois taninos (galotanino e elagitanino), ácidos fenólicos (ácido hidroxidifênico e derivados do ácido cinâmico). Os compostos testados não apresentaram atividade antimicrobiana a 128 μg/mL (CIM entre 256 e 512 μg/mL). No teste de modulação, os flavonoides O-glicosilados não apresentaram efeito redutor da CIM dos antibióticos testados, no entanto, seus derivados aglicona reduziram a CIM da NOR em até dezesseis vezes (128 para 8 μg/mL), em contra partida, os flavonoides C-glicosilados, miricetrin e quercetrin, reduziram a CIM da NOR em até quatro vezes (128 para 32 μg/mL) e os seus derivados aglicona não apresentaram efeito redutor da CIM dos antibióticos testados; o ácido hexahidroxidifênico (ácido gálico) não apresentou efeito redutor da CIM dos antibióticos testados; dentre os derivados do ácido cinâmico ensaiados, apenas o ácido 3-metoxicinâmico, ácido 3,4-dimetoxicinâmico e ácido 3,4,5-trimetoxicinâmico reduziram a CIM da NOR (128 para 64 μg/mL), enquanto o ácido 3- metoxicinâmico, apresentou efeito redutor da CIM da tetraciclina (64 para 32 μg/mL); o elagitanino (ácido elágico) não apresentou efeito redutor da CIM dos antibióticos testados, já o galotanino (ácido tânico – AT) reduziu trinta e duas vezes a CIM da NOR (128 para 4 μg/mL), no teste checkerboard o AT apresentou efeito sinérgico quando aplicado em combinação com NOR (ICIF = 0,15) CIM do AT diminuiu de 512 para 64 μg/mL (oito vezes), enquanto a CIM da NOR diminuiu de 128 para 4 μg/mL (trinta e duas vezes). Os resultados obtidos demonstram que compostos fenólicos, possuem um potencial de aplicação como adjuvante de antibióticos, particularmente quando em uso combinado com NOR.

As bactérias contendo este elemento de mobilidade genética podem contribuir para a disseminação de determinantes de resistência, bem como servir de reservatório em potencial para estes genes. / Pseudomonas genus, widely distributed in the environment, is often found associated to determinants of beta-lactams resistance and presence of integrons. The present study was conducted to investigate the resistance profile of Pseudomonas spp strains isolated from untreated hospital effluents, likewise beta-lactamase genes and integrons. Untreated hospital effluents were collected from four hospitals in Porto Alegre, RS. Non-fermenter bacteria were isolated; the identification was confirmed by 16S rRNA PCR. Susceptibility testing was determined by the disk-diffusion method using 11 different betalactams antimicrobials. The beta-lactamase genes blaIMP, blaVIM, blaSPM-1, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-51-like and blaGES-like genes and the integrons genes intI1, intI2 and intI3 were determined by PCR using specific primers. One hundred and twenty-eight isolates were recovered; the most common species was P. pseudoalcaligenes. The resistance level found was considered high, 62 (50%) isolates were multi-resistants. No isolate carrying the beta-lactamase genes tested was found among the strains. Of 68 isolates considered positives for integrons, 52 were identified as carrying the class 1 integron gene, intI1. No isolate carrying class 1 or class 2 integrons was found among the strains. Untreated hospital effluents could be a source of environmental contamination due to discharge of antimicrobial resistant bacteria, in the case of the present study, also integron positives. Bacteria carrying this genetic mobile element can contribute for the dissemination of resistance determinants and also act like a potential reservoir for many types of resistance genes.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-09T15:37:18Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivanildes S. Bastos.pdf: 2532622 bytes, checksum: 0f7c68cf43e38743fefae806eb364a6f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-09T15:41:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivanildes S. Bastos.pdf: 2532622 bytes, checksum: 0f7c68cf43e38743fefae806eb364a6f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-09T15:48:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivanildes S. Bastos.pdf: 2532622 bytes, checksum: 0f7c68cf43e38743fefae806eb364a6f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T15:48:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivanildes S. Bastos.pdf: 2532622 bytes, checksum: 0f7c68cf43e38743fefae806eb364a6f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The great increase of resistance of bacteria, fungi and parasites to conventional antimicrobial available has become a problem of global health generating a negative impact on the treatment of these infections and with this generates an urgent necessity for new therapeutic approaches. Within this context, the studies with plants represent priority in Amazonia, for the variety and richness of its flora.This way the purpose of this work was to evaluate different extracts and tranches in different solvents, from twenty-five species of amazonian plants against thirty seven bacterial strains, a strain of Candida albicans and one strain of Plasmodium falciparum (FCR3). Of the twenty-five species of plants, fifteen presented activities, being that eleven showed activity against Candida albicans and four against Plasmodium falciparum. In bacterial screening was obtained results more promising for the extracts of Caryocar villosum against Gram-positive bacteria Bacillus liquiniformes, Bacillus subtilis. Streptococcus pyogenis and Gram-negative Yersinia enterocolitica, Salmonella arizonae, Salmonella choleraesuis, Salmonella typhi and Shigella flexneri. Other samples that demonstrate excellent activities were the extracts and fractions and isolated composed of Aniba panurensis front the Gram-positive bacteria Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus, Staphylococcus simulans and Streptococcus agalactiae. And the fractions in DCM branches of A. rail and Octoea leucoxylon front Staphylococcus aureus and Staphylococcus simulans and fraçao ethyl acetate branches of Aniba parviflora front Streptococcus simulans. In the screening of antifungal activity, the best results were for the ethanolic extract of Inga edulis seeds and husks and the hydroalcoholic extract of seeds of Garcinia madruno and ethanolic extract of the stems of Ocotea leucoxylon. In the screening against Plasmodium falciparum the best results were demonstrated in extracts of Theobroma grandiflorum, Euterpe precatoria, Garcinia madruno and Platonia insignis. And the data reported here are of the utmost importance, taking into account the importance of medical micro-organisms, because they provide evidence that the extracts, fractions and isolated may be considered future antimicrobial agents or help in lockable bactericide of Bacillus liquiniformes, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureaus, MRSA, Streptococcus simulans, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenic, Yersinia enterocolitica, Salmonella arizonae, Salmonella choleraesuis, Salmonella thypi e Shigella flexneri e contra Candida albicans e Plasmodium falciparum. / O grande aumento da resistência de bactérias, fungos e parasitas aos antimicrobianos convencionais disponíveis vêm se tornando um problema de saúde global gerando um impacto negativo sobre o tratamento destas infecções e com isto gera uma necessidade urgente de novas abordagens terapêuticas. Dentro desse contexto, os estudos com plantas representam prioridade na Amazônia, pela variedade e riqueza de sua flora. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar diversos extratos e frações em diferentes solventes, provenientes de vinte e cinco espécies de plantas amazônicas contra treze cepas de bactérias gram-positivas e vinte quatro Gram-negativas, uma cepa de Candida albicans e uma cepa de Plasmodium falciparum (FCR3). Das vinte cinco espécies de plantas, quinze apresentaram atividades, sendo que onze apresentam atividades frente as bactérias Gram-positivas, nove contra as Gram-negativas, nove apresentaram atividades contra Candida albicans e quatro contra Plasmodium falciparum. Na triagem bacteriana obteve-se resultados mais promissoras para os extratos de Caryocar villosum contra as bactérias Gram-positivas Bacillus liquiniformes, Bacillus subtilis, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenis e Gram-negativas Yersinia enterocolítica, Salmonella arizonae, Salmonella choleraesuis, Salmonella typhi e Shigella flexneri. Outras amostras que demostram excelente atividades foram os extratos e frações e isolado composto de Aniba panurensis frente as bactérias Gram-positivas Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA), Staphylococcus simulans e Streptococcus agalactiae. E as frações em diclorometano dos galhos de Aniba ferrea e Ocotea leucoxylon frente Staphylococcus aureus e Staphylococcus simulans e a fração em acetato de etíla dos galhos de Aniba parviflora frente Staphylococcus simulans. Na triagem da atividade antifúngica, os melhores resultados obtidos, foram para o extrato etanólico das sementes e cascas de Ingá edulis e o extrato hidroalcoólico das sementes de Garcinia madruno e extrato etanólico dos galhos de Ocotea leucoxylon. Na triagem contra Plasmodium falciparum os melhores resultados obtidos foram demostrados nos extratos de Theobroma grandiflorum, Euterpe precatória, Garcinia madruno e Platonia insignis. Os dados aqui relatados são de suma importância, levando em conta a importância médica dos micro-organismos, pois fornecem evidências de que os extratos, frações e isolado possam ser considerados futuros agentes antimicrobianos ou ajudem na ação bactericida de Bacillus liquiniformes, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus resistente a metilicina (MRSA), Streptococcus simulans, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenis, Yersinia enterocolítica, Salmonella arizonae, Salmonella choleraesuis, Salmonella typhi e Shigella flexneri e contra Candida albicans e Plasmodium falciparum.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-05-19T12:13:48Z No. of bitstreams: 1 soraiachafianabackdemoura.pdf: 1039537 bytes, checksum: 6e4756a8c6e322b6ede60724913c6861 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-19T14:42:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 soraiachafianabackdemoura.pdf: 1039537 bytes, checksum: 6e4756a8c6e322b6ede60724913c6861 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-19T14:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 soraiachafianabackdemoura.pdf: 1039537 bytes, checksum: 6e4756a8c6e322b6ede60724913c6861 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Os dejetos animais podem ser utilizados em biodigestores no processo de biodigestão anaeróbia, produzindo biofertilizante e gerando biogás e energia. Pelo fato do processo biológico produzir biogás e biofertilizante é importante identificar a população bacteriana, bem como seu perfil de resistência aos antimicrobianos. O objetivo deste trabalho foi avaliar microbiologicamente a biodigestão anaeróbia, e a resistência a antimicrobianos de bactérias, em biodigestores de escala piloto, alimentados com dejetos de suínos e com dejetos de bovinos, bem como comparar os métodos de identificação bioquímico e molecular. Inicialmente a morfologia dos isolados bacterianos foi confirmada pela coloração de Gram, em seguida as amostras foram identificadas fenotipicamente pelo método semi-automatizado BBL Crystal Identification System® e posteriormente genotipicamente pelo sequenciamento das amostras de rDNA 16S. O perfil de susceptibilidade a antimicrobianos foi determinado pelo método de disco-difusão. Os grupos microbianos encontrados foram os Bacilos Gram Negativos da família Enterobacteriaceae e os cocos Gram positivos, com a prevalência de Escherichia coli e Enterococcus faecium, respectivamente. Quanto a susceptibilidade aos antimicrobianos, para os isolados do gênero Staphylococcus a penicilina foi a droga que apresentou o maior índice de resistência (78,9%), seguida da oxacilina (57,9%), sendo a maioria dos isolados (94,7%) sensíveis à combinação de ampicilinasulbactam e ao levofloxacino (78,9%). Para os isolados do gênero Enterococcus os maiores índices de resistência foram detectados para a rifamicina (48%) e eritromicina (32%), com elevada sensibilidade ao levofloxacino (88%) e à vancomicina (80%). As linhagens de E.coli avaliadas apresentaram uma alta sensibilidade à amicacina (85,7%) e a maior resistência se deu para o antimicrobiano ampicilina (42,8%). A utilização do biofertilizante gerado pela biodigestão de dejetos suínos e bovinos deve ser criteriosa, devido à persistência de espécies potencialmente patogênicas no efluente final, algumas das quais apresentam resistência a antimicrobianos relevantes para o tratamento em humanos e em animais. / Animal waste can be used in the anaerobic biodigestion process producing biofertilizer and generating biogas and energy. Due to the production of biogas and biofertilizer in the biodigestor, it is important to identify its bacterial population as well as the antimicrobial susceptibility profile. The aim of this study was to evaluate the diversity of enterobacteria and of Gram-positive cocci isolated from pilot scale anaerobic biodigestors fed with porcine and bovine fecal matter and to compare biochemical and molecular methods of identification. Initially, the morphology of the bacterial isolates was confirmed by Gram staining, then the samples were identified phenotypically by the semi-automated BBL Crystal Identification System® biochemical kit, and finally genotypically by sequencing rDNA 16S.The antimicrobial susceptibility profile was determined by the disc diffusion method. The microbial groups found were the Gram negative bacilli belonging to the family Enterobacteriaceae and the Gram- positive cocci, with the prevalence of Escherichia coli and Enterococus faecium, respectively. For the Staphylococcus species, the highest resistance rate was detected for penicillin (78,9%) and oxacillin (57,9%), with the great majority (94,7%) susceptible to ampicillin/sulbactam and levofloxacin (78,9%). For the isolates belonging to the genus Enterococcus, the highest resistance ratios were detected for rifamicin (48%) and erythromycin (32%), and with high susceptibility to levofloxacin (88%) and vancomycin (80%). The Escherichia coli strains exhibited high susceptibility to amikacin (85,7%), showing the highest resistance ratio to the antimicrobial ampicillin (42,8%). The use of biofertilizers produced from the biodigestion of swine and bovine fecal matters must be judicious due to the persistence of potentially pathogenic species in the final effluent, some of which show resistance to relevant antimicrobial in the treatment of human and animal infections.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-10-02T14:48:12Z No. of bitstreams: 1 marianasilvalopesneves.pdf: 523366 bytes, checksum: 2c33e978d12652cf1b17217fe3509198 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-10-09T19:44:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marianasilvalopesneves.pdf: 523366 bytes, checksum: 2c33e978d12652cf1b17217fe3509198 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T19:44:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marianasilvalopesneves.pdf: 523366 bytes, checksum: 2c33e978d12652cf1b17217fe3509198 (MD5) Previous issue date: 2013-04-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A prata é conhecida por sua atividade antibacteriana e tem se mostrado eficiente como alternativa no contexto da resistência bacteriana a drogas, sobretudo na forma de nanopartículas (AgNPs). Nossos objetivos foram a avaliação da susceptibilidade de bactérias representativas contra AgNPs e pesquisa de efeito sinérgico ou antagônico quando associadas a quitosana (QIT) e antimicrobianos de uso terapêutico humano. Foram utilizadas oito linhagens bacterianas de referência, representativas de: Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, S. epidermides e Enterococcus faecalis. O perfil de susceptibilidade foi determinado através do método de microdiluição em caldo, de acordo com as recomendações do CLSI. A concentração inibitória mínima (CIM90) das AgNPs para as amostras testadas foi de 64μg/mL, enquanto que para a combinação AgNPs-QIT foi de 16μg/mL. Considerando-se atividade antimicrobiana somente da QIT, a CIM90 foi de 16 μg/mL. Entre os antimicrobianos testados (meropenem, amicacina, gentamicina, levofloxacina, rifampicina, sulfametoxazol-trimetropim, tetraciclina, e oxacilina e vancomicina, estes apenas para Gram positivos), apesar de a CIM para cada linhagem bacteriana estar de acordo com os valores determinados pelo CLSI observou-se diminuição significativa para todas as drogas testadas quando combinadas com AgNPs-QIT. De modo geral, para todas as espécies bacterianas avaliadas, a associação de AgNPs com QIT ou drogas antimicrobianas apresentaram grande potencial inibitório que pode estar relacionado a estabilidade das AgNPs associadas ao polímero ou a interação positiva das nanopartículas com os antimicrobianos. O ensaio de Checkerboard foi realizado para estabelecer os efeitos sinérgicos ou antagônicos em cada combinação. A possibilidade da interação das AgNPs e da QIT com antimicrobianos já existentes é altamente relevante e reforça as recomendações da literatura acerca da reformulação de uso de antimicrobianos tradicionais, além da pesquisa de novas drogas e estratégias para sobrepujar o crescente fenômeno da resistência bacteriana aos antimicrobianos. / Silver is known for its antibacterial activity and has been shown to be effective as a potential alternative in the context of bacterial resistance to drugs, particularly in the form of nanoparticles (AgNPs). Our objectives were to evaluate the susceptibility of bacteria against AgNPs and representative survey of synergistic or antagonistic when combined with chitosan (QIT) and antimicrobials for human therapeutic use. A total of eight reference strains were evaluated of Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, S. epidermidis and Enterococcus faecalis. The susceptibility patterns were determined by broth microdilution method, according to the CLSI guidelines. The minimum inhibitory concentration (MIC90) of AgNPS to the samples tested was 64μg/mL, while for the combination AgNPs-QIT was 16μg/mL. Considering only antimicrobial activity of QIT, the MIC90 was 16 mg / mL. Among the antimicrobials (meropenem, amikacin, gentamicin, levofloxacin, rifampicin, sulfamethoxazole- trimethoprim, tetracycline, and vancomycin and oxacillin, these only to Gram positive), while the MIC for each bacterial strain is in accordance to the reference CLSI, significant decrease was observed for all tested drugs when combined with AgNPs-QIT. In general, association of AgNPs with QIT or with antimicrobial drugs showed higher inhibitory potential, which may be related to the stability of the polymer associated AgNPs or positive interaction of nanoparticles with antibiotics. The Checkerboard assay was then performed to establish antagonistic or synergistic effects in each combination. The possibility of interaction of AgNPs and QIT with existing antimicrobials is highly relevant and reinforces the recommendations of the literature on the reformulation of traditional antimicrobial use, as well as research into new drugs and strategies to overcome the growing phenomenon of bacterial resistance to antimicrobials.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Sugar is one of the most widely used products in the treatment of wounds in veterinary medicine. Its main advantage is the hygroscopic effect on tissues and the bacterial death by plasmolysis, making it a bactericidal agent due to the physical effect observed, without leading to bacterial resistance as it might occur with antibiotic therapy. The objective of this experiment was to compare cicatricial evolution in cutaneous wounds with the topical use of sugar both granulated and in the form of a gel. For such, 16 canine wounds were treated, where eight received treatment with granulated sugar (group A) and eight with sugar gel (group G). Evaluations such as mensurations of the wounded areas, bacteriological cultures and observation of the aspect of the lesions were done weekly from the moment of the first examination until the formation of enough granulation tissue to suspend the use of the products. When comparing the decline in the area between groups no statistical difference was observed at any time. However, when the areas were analyzed in each group's interval, it was possible to notice a statistically significant decline between days 1-14 and 7-14 in the group treated with sugar. In the group treated with the gel, beside those intervals, a significant decline was also noticed between days 1-7. In terms of the frequency of negative bacteriological culture, there was no statistical difference between groups, not even in the different moments of each group. The time taken for the granulation tissue to be fully formed varied from 7 to 14 days in both groups. As to applicability, the gel showed better adhesion to the wounds and filling of the product subcutaneously more effectively than the granulated sugar. The conclusion reached is that both the sugar and the gel were effective in healing the animals' wounds in this experiment, the gel having demonstrated precocity in cicatricial retraction in the first seven days. / O açúcar é um dos produtos mais utilizados para tratamento de feridas em medicina veterinária. Sua principal vantagem é o efeito higroscópico nos tecidos e morte das bactérias por plasmólise, tornando-o um bactericida pelo efeito físico realizado, sem levar à resistência bacteriana, como poderia ocorrer na terapia antibiótica. O objetivo desse experimento foi comparar a evolução cicatricial de feridas cutâneas com o uso tópico de açúcar na forma granulada e na forma de gel. Para tal, foram tratadas 16 feridas de cães, onde oito receberam tratamento com açúcar granulado (grupo A) e oito com gel de açúcar (grupo G). Avaliações como mensurações das áreas das feridas, culturas bacteriológicas e observação quanto ao aspecto das lesões foram realizadas semanalmente desde o momento do atendimento até a formação de tecido de granulação suficiente para suspender o uso dos produtos. Na comparação da diminuição da área entre os grupos não se observou diferença estatística em nenhum momento. Entretanto, quando as áreas foram analisadas nos intervalos de cada grupo, pôde-se perceber diminuição estatisticamente significativa entre os dias 1 e 14 e 7 e 14 no grupo tratado com açúcar. No grupo tratado com gel, além desses intervalos, também se percebeu diminuição significativa entre os dias 1 e 7. Com relação a frequência de cultura bacteriológica negativa, não houve diferença estatística entre os grupos, nem nos diferentes momentos de cada grupo. O tempo para completa formação de tecido de granulação variou entre sete e 14 dias em ambos os grupos. Quanto à aplicabilidade, o gel demonstrou melhor adesão nas feridas e preenchimento do produto no subcutâneo de forma mais efetiva que o açúcar granulado. Conclui-se que tanto o gel quanto o açúcar foram efetivos na cicatrização das feridas dos animais desse experimento, sendo que o gel demonstrou precocidade na retração cicatricial nos primeiros sete dias.