A oviposição é um estágio vulnerável do ciclo de vida de carrapatos. Rhipicephalus microplus, como todos Ixodidae e Argasidae, possui uma glândula especializada, o órgão de Gené, que produz uma cera que é depositada na superfície do ovo durante a oviposição. Além de restringir a perda excessiva de água, a cera atua como uma barreira contra o ataque de organismos invasores. Em R.microplus, como em outros carrapatos, há poucos estudos demonstrando atividade antimicrobiana em ovos. Ainda mais, não há na literatura relato de atividade antibiofilme em ovos de carrapatos e nem mesmo em qualquer outro artrópode. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a hipótese da existência de mecanismos de defesa em ovos de R. microplus contra biofilmes bacterianos. O extrato água/metanol da cera dos ovos apresentou atividade contra o biofilme de Pseudomonas aeruginosa sem afetar a sua viabilidade. Esse extrato também demonstrou efeito antibiótico contra Staphylococcus epidermidis. Nós identificamos a molécula com ambas atividades (antibiofilme e antibiótica) como N-(3-sulfooxy-25-cholest-5-en-26-oyl)-L-isoleucina (boophiline). Na busca por possíveis mecanismos responsáveis pelo efeito antibiofilme de boophiline contra P. aeruginosa, 14 genes foram analisados por qRT-PCR. Boophiline inibe a expressão de fliC (flagelo) e cdrA (componente estrutural da matriz), cujos produtos são necessários para a formação do biofilme de P. aeruginosa. Monosfosfato de guanosina dimérico cíclico (c-di-GMP) é um importante segundo mensageiro característico de bactérias Gram-negativas. Altos níveis intracelulares de c-di-GMP promovem o estilo de vida séssil enquanto baixos níveis induzem o comportamento móvel. De acordo com essa afirmação, nós encontramos que boophiline aumenta a motilidade swarming de P. aeruginosa. Desta forma, nos questionamos se o mecanismo de ação de boophiline estaria envolvido com c-di-GMP já que o sistema quorum sensing não foi afetado pela molécula. Interessantemente, quando os níveis de c-di-GMP foram aumentados pela superexpressão de uma diguanilato ciclase, boophiline não inibiu efetivamente a formação de biofilme. Uma explicação para esse resultado é que boophiline interfere em uma via específica regulada por c-di-GMP, o que explicaria não termos obtido um decréscimo no nível total deste segundo mensageiro. Contrariamente, boophiline foi bactericida contra S. epidermidis. Mudanças morfológicas significativas foram observadas em células tratadas com a molécula, as quais foram severamente danificadas. Boophiline levou a formação anormal de septo, rompimento da membrana bacteriana e extravasamento do material intracelular. Adicionalmente avaliamos o potencial antibiofilme e anti-protozoário de filtrados de cultura obtidos de bactérias isoladas de tecidos de R. microplus. Quatorze filtrados de cultura bacteriano apresentaram notável atividade contra o biofilme de P. aeruginosa e S. epidermidis e foram citotóxicos contra Tritrichomonas foetus. Nosso trabalho é pioneiro em demonstrar a existência de proteção contra biofilmes em ovos de carrapatos bem como de bactérias associadas a carrapatos como produtoras de moléculas bioativas. Além disso, nós demonstramos que boophiline é uma nova molécula antibiofilme, sendo a primeira vez relatado na literatura que um composto age inibindo cdrA. Os dados obtidos em nosso estudo poderiam estimular novas abordagens em áreas como fisiologia e controle de artrópodes, genética e fisiologia de microrganismos e controle de biofilmes. / The oviposition is a vulnerable stage of the tick life cycle. Rhipicephalus microplus, as all Ixodidae and Argasidae, has a specialized gland, the Gene’s organ, which produce a wax that is smeared on egg surface during oviposition. In addition to restricting excessive water loss, wax acts as a barrier to attack by invading organisms. In R. microplus, as in other ticks, there are few studies showing antimicrobial activity in eggs. Moreover, there is no report of antibiofilm activity in tick eggs nor in any other arthropod. The objective of our study was to evaluate the hypothesis of the existence of defense mechanisms against bacterial biofilms in R. microplus eggs. The eggs wax water/methanol extract showed activity against Pseudomonas aeruginosa biofilm without affecting its viability. This extract also presented an antibiotic effect against Staphylococcus epidermidis. We have identified the molecule anti-biofilm and antibiotic as N-(3-sulfooxy-25-cholest-5-en-26-oyl)-L-isoleucine (boophiline). In the search for possible mechanisms responsible by antibiofilm effect of boophiline against P. aeruginosa, 14 genes were evaluated by qRT-PCR. We showed that boophiline inhibits the expression of fliC (flagellum) and cdrA (matrix structural component), whose products are necessary for biofilm formation in P. aeruginosa. Bis-(3’–5’)-cyclic dimeric guanosine monophosphate (c-di-GMP) is an important second messenger, characteristic of Gram-negative bacteria. High intracellular levels of c-di-GMP promote a sessile mode of growth, while low levels promote motile behavior. In line with this, we found that boophiline increases swarming motility, which raised the question whether it acts by altering c-di-GMP levels. Interestingly, when c-di-GMP levels were increased by overexpression of a diguanilate cyclase, boophiline no longer inhibited biofilm formation. One explanation for these results is that boophiline interferes with a specific c-di-GMP-regulated pathway, which would explain we have not obtained a decrease in the total level of this second messenger. Conversely, boophiline had a bactericidal effect against S. epidermidis. Significant morphological changes were observed in the boophiline-treated cells, which appeared to be severely damaged. Boophiline was found to cause abnormal septum formation, bacterial membrane disruption, and extravasation of intracellular material. Additionally, our work also aimed to evaluate the potential antibiofilm and anti-protozoa of culture filtrates obtained from bacteria isolated of R. microplus tissues. Fourteen bacterial culture filtrates showed remarkable activity against of P. aeruginosa and S. epidermidis biofilms, and were cytotoxic against Tritrichomonas foetus. Our work is pioneer in demonstrating the existence of protection mechanisms in tick eggs against biofilms, and ticks-associated bacteria as producers of bioactive molecules. Furthermore, we demonstrated that boophiline is a new antibiofilm molecule, and is the first reported in the literature that a molecule inhibits cdrA. The data obtained in our study could stimulate new approaches in areas such as the physiology and control of arthropods, the genetics and physiology of microorganisms, and biofilm control.

A oviposição é um estágio vulnerável do ciclo de vida de carrapatos. Rhipicephalus microplus, como todos Ixodidae e Argasidae, possui uma glândula especializada, o órgão de Gené, que produz uma cera que é depositada na superfície do ovo durante a oviposição. Além de restringir a perda excessiva de água, a cera atua como uma barreira contra o ataque de organismos invasores. Em R.microplus, como em outros carrapatos, há poucos estudos demonstrando atividade antimicrobiana em ovos. Ainda mais, não há na literatura relato de atividade antibiofilme em ovos de carrapatos e nem mesmo em qualquer outro artrópode. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a hipótese da existência de mecanismos de defesa em ovos de R. microplus contra biofilmes bacterianos. O extrato água/metanol da cera dos ovos apresentou atividade contra o biofilme de Pseudomonas aeruginosa sem afetar a sua viabilidade. Esse extrato também demonstrou efeito antibiótico contra Staphylococcus epidermidis. Nós identificamos a molécula com ambas atividades (antibiofilme e antibiótica) como N-(3-sulfooxy-25-cholest-5-en-26-oyl)-L-isoleucina (boophiline). Na busca por possíveis mecanismos responsáveis pelo efeito antibiofilme de boophiline contra P. aeruginosa, 14 genes foram analisados por qRT-PCR. Boophiline inibe a expressão de fliC (flagelo) e cdrA (componente estrutural da matriz), cujos produtos são necessários para a formação do biofilme de P. aeruginosa. Monosfosfato de guanosina dimérico cíclico (c-di-GMP) é um importante segundo mensageiro característico de bactérias Gram-negativas. Altos níveis intracelulares de c-di-GMP promovem o estilo de vida séssil enquanto baixos níveis induzem o comportamento móvel. De acordo com essa afirmação, nós encontramos que boophiline aumenta a motilidade swarming de P. aeruginosa. Desta forma, nos questionamos se o mecanismo de ação de boophiline estaria envolvido com c-di-GMP já que o sistema quorum sensing não foi afetado pela molécula. Interessantemente, quando os níveis de c-di-GMP foram aumentados pela superexpressão de uma diguanilato ciclase, boophiline não inibiu efetivamente a formação de biofilme. Uma explicação para esse resultado é que boophiline interfere em uma via específica regulada por c-di-GMP, o que explicaria não termos obtido um decréscimo no nível total deste segundo mensageiro. Contrariamente, boophiline foi bactericida contra S. epidermidis. Mudanças morfológicas significativas foram observadas em células tratadas com a molécula, as quais foram severamente danificadas. Boophiline levou a formação anormal de septo, rompimento da membrana bacteriana e extravasamento do material intracelular. Adicionalmente avaliamos o potencial antibiofilme e anti-protozoário de filtrados de cultura obtidos de bactérias isoladas de tecidos de R. microplus. Quatorze filtrados de cultura bacteriano apresentaram notável atividade contra o biofilme de P. aeruginosa e S. epidermidis e foram citotóxicos contra Tritrichomonas foetus. Nosso trabalho é pioneiro em demonstrar a existência de proteção contra biofilmes em ovos de carrapatos bem como de bactérias associadas a carrapatos como produtoras de moléculas bioativas. Além disso, nós demonstramos que boophiline é uma nova molécula antibiofilme, sendo a primeira vez relatado na literatura que um composto age inibindo cdrA. Os dados obtidos em nosso estudo poderiam estimular novas abordagens em áreas como fisiologia e controle de artrópodes, genética e fisiologia de microrganismos e controle de biofilmes. / The oviposition is a vulnerable stage of the tick life cycle. Rhipicephalus microplus, as all Ixodidae and Argasidae, has a specialized gland, the Gene’s organ, which produce a wax that is smeared on egg surface during oviposition. In addition to restricting excessive water loss, wax acts as a barrier to attack by invading organisms. In R. microplus, as in other ticks, there are few studies showing antimicrobial activity in eggs. Moreover, there is no report of antibiofilm activity in tick eggs nor in any other arthropod. The objective of our study was to evaluate the hypothesis of the existence of defense mechanisms against bacterial biofilms in R. microplus eggs. The eggs wax water/methanol extract showed activity against Pseudomonas aeruginosa biofilm without affecting its viability. This extract also presented an antibiotic effect against Staphylococcus epidermidis. We have identified the molecule anti-biofilm and antibiotic as N-(3-sulfooxy-25-cholest-5-en-26-oyl)-L-isoleucine (boophiline). In the search for possible mechanisms responsible by antibiofilm effect of boophiline against P. aeruginosa, 14 genes were evaluated by qRT-PCR. We showed that boophiline inhibits the expression of fliC (flagellum) and cdrA (matrix structural component), whose products are necessary for biofilm formation in P. aeruginosa. Bis-(3’–5’)-cyclic dimeric guanosine monophosphate (c-di-GMP) is an important second messenger, characteristic of Gram-negative bacteria. High intracellular levels of c-di-GMP promote a sessile mode of growth, while low levels promote motile behavior. In line with this, we found that boophiline increases swarming motility, which raised the question whether it acts by altering c-di-GMP levels. Interestingly, when c-di-GMP levels were increased by overexpression of a diguanilate cyclase, boophiline no longer inhibited biofilm formation. One explanation for these results is that boophiline interferes with a specific c-di-GMP-regulated pathway, which would explain we have not obtained a decrease in the total level of this second messenger. Conversely, boophiline had a bactericidal effect against S. epidermidis. Significant morphological changes were observed in the boophiline-treated cells, which appeared to be severely damaged. Boophiline was found to cause abnormal septum formation, bacterial membrane disruption, and extravasation of intracellular material. Additionally, our work also aimed to evaluate the potential antibiofilm and anti-protozoa of culture filtrates obtained from bacteria isolated of R. microplus tissues. Fourteen bacterial culture filtrates showed remarkable activity against of P. aeruginosa and S. epidermidis biofilms, and were cytotoxic against Tritrichomonas foetus. Our work is pioneer in demonstrating the existence of protection mechanisms in tick eggs against biofilms, and ticks-associated bacteria as producers of bioactive molecules. Furthermore, we demonstrated that boophiline is a new antibiofilm molecule, and is the first reported in the literature that a molecule inhibits cdrA. The data obtained in our study could stimulate new approaches in areas such as the physiology and control of arthropods, the genetics and physiology of microorganisms, and biofilm control.

The botanical acaricides are natural products derived from plant secondary metabolism. This metabolism produces a large variety of compounds with acaricidal action that can be exploited through the use of essential oils or as a template for synthesis of synthetic acaricides. The need for safer methods, less harmful to humans and the environment, has stimulated the search for new pesticides from plant products. Thus, the aim of this study was to i) select medicinal and aromatic plants with biological activity on the tick Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense ii) test the sublethal effects of essential oil of Chrysopogon zizanioides (Poaceae) value of high acidity and acid value low on the stages of egg, larva and adult of A. cajennense and R. microplus iii) test the lethal effects of essential oils of C. zizanioides high acid value and amount of low acidity on larvae of A. cajennense and R. microplus iv) test the sublethal effects of essential oils from Pogostemon cablin (Lamiaceae), Croton sonderianus (Euphorbiaceae), Pelargonium graveolens (Geraniaceae) and Zingiber officinale (Zingiberaceae), on the stages of egg, larva and adult of R. microplus v) test the lethal effects of essential oils of P. cablin; C. sonderianus; P. graveolens on larvae of R. microplus iv) From the oil more toxic for the tick R. microplus, producing a formulation and testing the lethal and sublethal effects of this emulsion in ticks R. microplus. Essential oils were purchased through the company Raros, only the Z. officinale obtained by hydrodistillation of dry biomass in a Clevenger type apparatus at the Federal University of Sergipe. These oils were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The study was conducted at the Federal University of Sergipe, Saint Kitts-SE, Brazil. The essential oils were emulsified with Triton X-100 as surfactant agent, in the bioassay with adults and diluted in acetone to bioassay with larvae mortality. In bioassay with adult females were immersed in a final solution (oil with Triton X-100) for 2 minutes, oviposition calculated after 14 days. For the bioassay the larvae a solution (oil in acetone) was applied on filter paper envelopes closed with clips type |bulldog| in which these larvae were maintained for 48 hours. The formulation in both bioassays was diluted with water The paper was divided into three items. In the first article was made a literature review on the use of essential oils of medicinal and aromatic plants in controlling R.microplus, in the second it was demonstrated that the essential oils of C. zizanioides acid value and high value low acidity showed activity ticks on species A. cajannense and R. microplus and third article was observed that the essential oil P. cablin (Lamiaceae) and formulation made from this oil exhibit activity ticks on the tick R. microplus. / Os carrapaticidas botânicos são produtos naturais derivados do metabolismo secundário das plantas. Esse metabolismo produz uma grande diversidade de compostos com ação acaricida que podem ser explorados através do uso de óleos essenciais ou como modelo para síntese de carrapaticidas sintéticos. A necessidade de métodos mais seguros, menos agressivos ao homem e ao meio ambiente, tem estimulado a busca de novos pesticidas a partir de produtos vegetais. Assim, objetivou-se com este trabalho i) selecionar plantas medicinais e aromáticas com atividade biológica sobre os carrapatos Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense; ii) testar os efeitos subletais do óleo essencial de Chrysopogon zizanioides (Poaceae) acidez alta e acidez baixa sobre os estádios de ovo, larva e adulto de A. cajennense e R. microplus; iii) testar os efeitos letais dos óleos essenciais de C. Zizanioides acidez alta e acidez baixa sobre larvas de A. cajennense e R. microplus; iv)testar os efeitos subletais dos óleos essenciais de Pogostemon cablin (Lamiaceae), Croton sonderianus (Euphorbiaceae), Pelargonium graveolens (Geraniaceae) e Zingiber officinale (Zingiberaceae), sobre os estádios de ovo, larva e adulto de R. microplus; v) testar os efeitos letais dos óleos essenciais de P. cablin; C. sonderianus; P. graveolens sobre larvas de R. microplus; iv) A partir do óleo mais tóxico para o carrapato R. microplus, produzir uma formulação e testar os efeitos subletais e letais dessa emulsão nos carrapatos R. microplus. Os óleos essenciais foram adquiridos através da empresa Raros, sendo apenas o Z. officinale obtido por hidrodestilação da biomassa seca em um aparelho do tipo Clevenger na Universidade Federal de Sergipe. Estes óleos foram analisados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS). O estudo foi realizado na Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão-SE, Brasil. Os óleos essenciais foram emulsionados com Triton X-100, como agente surfactante, no bioensaio com os adultos e diluídos em acetona para o bioensaio de mortalidade com as larvas. No bioensaio com os adultos as fêmeas foram imersas em uma solução final (óleo com Triton X-100) por 2 minutos, calculado a oviposição depois de 14 dias. Para o bioensaio com as larvas uma solução (óleo com acetona) foi aplicada em envelopes de papel filtro fechados com clipes tipo buldogue , no qual estas larvas permaneceram por 48 horas. A formulação nos dois bioensaios foi diluída em água A dissertação foi dividida em dois artigos. No primeiro artigo foi demonstrado que os óleos essenciais de C. zizanioides acidez alta e acidez baixa apresentaram atividade carrapaticida sobre as espécies A. cajannense e R. microplus e no segundo artigo foi observado que O óleo essencial de P. cablin (Lamiaceae) e a formulação feita através deste óleo apresentam atividade carrapaticida sobre o carrapato R. microplus.

O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasita que causa prejuízos econômicos à pecuária brasileira. Neste trabalho foi avaliada a potencialidade de extratos de Palicourea marcgravii e Derris negrensis e de extratos e óleo essencial de Piper aducum para o controle de R. microplus. Extratos de folhas de P. aduncum e P. marcgravii e caules de D. negrensis foram preparados com os solventes hexano, acetato de etila e etanol. Avaliou-se a atividade dos extratos sobre carrapatos adultos nas concentrações de 5, 25, 50, 75 e 100mg/ml, a fim de verificar a mortalidade e reprodução dos ácaros, observando-se que entre os extratos das três espécies avaliadas, o que apresentou maior potencial acaricida foi o extrato acetato de etila de P. marcgravii, o qual ocasionou taxas de mortalidade de fêmeas ingurgitadas entre 24 e 78%, estimando CL50 = 30,08 mg/ml; inibiu 100% da oviposição, estimando CI50 = 5,79 mg/ml. Avaliou-se, também, o efeito dos extratos das três plantas nas concentrações de 1,5, 10, 15 e 20mg/ml sobre larvas de R. microplus, verificando-se que o extrato acetato de etila de P. marcgravii foi o mais eficiente induzindo taxas de mortalidade que variaram de 30,32 a 95,11%, estimando CL50 = 2,46 mg/ml. A ação do óleo essencial de P. aduncum foi avaliada também em larvas, induzindo a mortalidade total das mesmas em todas as concentrações avaliadas. O óleo essencial foi analisado por Cromatografia Gasosa (CG) e Cromatografia Gasosa acoplada a Espectro de Massas (CG/EM) apresentando o dilapiol como composto majoritário(94,84%). Os extratos de D. negrensis não estimaram CL50 para fêmeas ingurgitadas e larvas de R. microplus. Estes resultados indicam a potencialidade acaricida dos extratos de P. marcgravii e do óleo essencial de P. aduncum, podendo ser uma alternativa de controle contra essa espécie de carrapato. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-05T18:18:15Z No. of bitstreams: 1 Tese Wilson Castro Silva.pdf: 702565 bytes, checksum: 8418efdb56c5683626111a8bb8e61cd6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-05T18:18:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Wilson Castro Silva.pdf: 702565 bytes, checksum: 8418efdb56c5683626111a8bb8e61cd6 (MD5) / The tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is an ectoparasite that cause economic losses to brazilian livestock. In this work, it was evaluated the toxicity of Palicourea marcgravii and Derris negrensis extracts and Piper aduncum extracts and essential oil for R. microplus. Extract of leaves of P. aduncum and P. marcgravii and stems of D. negrensis were prepared with hexane, ethyl acetate and ethanol solvents. The extracts activity was evaluated on adult ticks at concentrations of 5, 25, 50, 75 and 100 mg/ml, in order to verify mortality and reproduction of the acarids, being observed that among the extracts of three species evaluated, one that showed higher acaricidal potential was the ethyl acetate extract of P. marcgravii, which caused mortality rates of engorged female between 24 and 78%, estimating CL50 = 30,08 mg/ml; it have inhibited 100% of the oviposition, estimating CI50 = 5,79 mg/ml. It was evaluated too the extracts effect of the three plants at concentrations of 1, 5, 10, 15 and 20 mg/ml on R. microplus larvae, verifying that the P. marcgravii ethyl extract was more efficient inducing mortality rates that ranged from 30,32 to 95,11%, estimating CL50 = 2,46 mg/ml. The action of P. aduncum essential oil was evaluated on larvae too, inducing the total mortality of the same ones in all concentrations evaluated. The essential oil was analyzed by Gas Chromatography (GC) and Gas Chromatography coupled Mass Spectrum (GC/MS) showing dilapiol as the major compound (94,84%). The D. negrensis extracts didn t estimate CL50 for engorged female and larvae of R. microplus. These results indicate the acaricidal potential of the P. marcgravii extracts and P. aduncum essential oil, and could be an alternative of control against that tick species.

O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é um ectoparasita que causa prejuízos econômicos à pecuária brasileira. Neste trabalho foi avaliada a potencialidade de extratos de Palicourea marcgravii e Derris negrensis e de extratos e óleo essencial de Piper aducum para o controle de R. microplus. Extratos de folhas de P. aduncum e P. marcgravii e caules de D. negrensis foram preparados com os solventes hexano, acetato de etila e etanol. Avaliou-se a atividade dos extratos sobre carrapatos adultos nas concentrações de 5, 25, 50, 75 e 100mg/ml, a fim de verificar a mortalidade e reprodução dos ácaros, observando-se que entre os extratos das três espécies avaliadas, o que apresentou maior potencial acaricida foi o extrato acetato de etila de P. marcgravii, o qual ocasionou taxas de mortalidade de fêmeas ingurgitadas entre 24 e 78%, estimando CL50 = 30,08 mg/ml; inibiu 100% da oviposição, estimando CI50 = 5,79 mg/ml. Avaliou-se, também, o efeito dos extratos das três plantas nas concentrações de 1,5, 10, 15 e 20mg/ml sobre larvas de R. microplus, verificando-se que o extrato acetato de etila de P. marcgravii foi o mais eficiente induzindo taxas de mortalidade que variaram de 30,32 a 95,11%, estimando CL50 = 2,46 mg/ml. A ação do óleo essencial de P. aduncum foi avaliada também em larvas, induzindo a mortalidade total das mesmas em todas as concentrações avaliadas. O óleo essencial foi analisado por Cromatografia Gasosa (CG) e Cromatografia Gasosa acoplada a Espectro de Massas (CG/EM) apresentando o dilapiol como composto majoritário(94,84%). Os extratos de D. negrensis não estimaram CL50 para fêmeas ingurgitadas e larvas de R. microplus. Estes resultados indicam a potencialidade acaricida dos extratos de P. marcgravii e do óleo essencial de P. aduncum, podendo ser uma alternativa de controle contra essa espécie de carrapato. / The tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is an ectoparasite that cause economic losses to brazilian livestock. In this work, it was evaluated the toxicity of Palicourea marcgravii and Derris negrensis extracts and Piper aduncum extracts and essential oil for R. microplus. Extract of leaves of P. aduncum and P. marcgravii and stems of D. negrensis were prepared with hexane, ethyl acetate and ethanol solvents. The extracts activity was evaluated on adult ticks at concentrations of 5, 25, 50, 75 and 100 mg/ml, in order to verify mortality and reproduction of the acarids, being observed that among the extracts of three species evaluated, one that showed higher acaricidal potential was the ethyl acetate extract of P. marcgravii, which caused mortality rates of engorged female between 24 and 78%, estimating CL50 = 30,08 mg/ml; it have inhibited 100% of the oviposition, estimating CI50 = 5,79 mg/ml. It was evaluated too the extracts effect of the three plants at concentrations of 1, 5, 10, 15 and 20 mg/ml on R. microplus larvae, verifying that the P. marcgravii ethyl extract was more efficient inducing mortality rates that ranged from 30,32 to 95,11%, estimating CL50 = 2,46 mg/ml. The action of P. aduncum essential oil was evaluated on larvae too, inducing the total mortality of the same ones in all concentrations evaluated. The essential oil was analyzed by Gas Chromatography (GC) and Gas Chromatography coupled Mass Spectrum (GC/MS) showing dilapiol as the major compound (94,84%). The D. negrensis extracts didn t estimate CL50 for engorged female and larvae of R. microplus. These results indicate the acaricidal potential of the P. marcgravii extracts and P. aduncum essential oil, and could be an alternative of control against that tick species.