In der vorliegenden Arbeit wurden vier Studien vorgestellt, die sich mit der Notwendigkeit und Art medikamentöser Einlagen im Rahmen von Wurzelkanalbehandlungen beschäftigen. In Studie 1 wurde in vitro untersucht, in wieweit Kalziumhydroxid in der Lage ist, bakterielle Endotoxine zu neutralisieren. Hierzu wurde die TNFalpha-Ausschüttung menschlicher Monozyten als Indikator für die biologische Aktivität von Escherichia coli LPS bestimmt. Aus der Studie konnte geschlossen werden, E. coli LPS durch Kalziumhydroxid neutralisiert werden kann. In Studie 2 wurde die Keimreduktion durch Kalziumhydroxid und Chlorhexidin (CHX) in einem In-situ-Modell untersucht. Die Wurzeln extrahierter menschlicher Zähne wurden in intraoral zu tragende herausnehmbare Apparaturen einpolymerisiert und von zwei Freiwilligen jeweils für eine Woche getragen. So konnte eine Besiedlung der Wurzelkanäle durch orale Mikroorganismen stattfinden. Vor und nach Applikation von Kalziumhydroxid und CHX in verschiedenen Darreichungsformen wurde die Keimzahl im Wurzelkanal bestimmt. Kalziumhydroxid-Paste und 5%iges CHX-Gel führten zu einer signifikant besseren Keimreduktion als in Guttaperchaspitzen integriertes Kalziumhydroxid oder CHX. In Studie 3 wurde die Re-Infektion des Wurzelkanals nach Füllung in vitro untersucht. Hierbei wurden adhäsive (Clearfil, CoreRestore) und nichtadhäsive provisorische Füllungsmatierialien (Ketac-Fil, IRM) als Deckfüllungen appliziert und die bakterielle Passage über einen Zeitraum von einem Jahr bestimmt. Nach diesem Zeitraum war in allen Gruppen eine ähnliche Anzahl undichter Proben zu finden. Es wurde die Schlußfolgerung gezogen, dass wurzelkanalgefüllte Zähne möglichst innerhalb der ersten drei Monate nach Obturation eine definitive Versorgung erhalten sollten. In Studie 4 wurde die Re-Infektion gefüllter Wurzelkanäle nach vorheriger medikamentöser Einlage mit Kalziumhydroxid, CHX oder Ledermix in vitro untersucht. Ab dem achten Monat zeigten die mit Kalziumhydroxid behandelten Zähne bis zum Ende des Experimentes nach 12 Monaten signifikant weniger undichte Proben als die Zähne aller anderen Gruppen. Kalziumhydroxid ist unter dem in dieser Studie beleuchteten Aspekt als günstigste Zwischeneinlage zu sehen. Unter Berücksichtigung aller vorgestellten Studien darf die Empfehlung ausgesprochen werden, im Falle der Behandlung eines infizierten Wurzelkanals eine mindestens einwöchige medikamentöse Einlage mit Kalziumhydroxid vorzunehmen, da hierdurch bakterielle Endotoxine neutralisiert werden, die Zahl der Mikroorganismen im Wurzelkanal signifikant reduziert und ein prolongierter Schutz vor Re-Infektion des nachfolgend obturierten Wurzelkanals erreicht wird. Nach Wurzelkanalfüllung sollte möglichst schnell eine dichte, adhäsiv befestigte provisorische oder definitive Deckfüllung appliziert werden, um Schutz vor einer Re-Infektion des Wurzelkanalsystems zu gewährleisten. / This work presents four studies dealing with endodontic treatment and microorganisms or microbial cell wall components, respectively. The first study examined the effect of calcium hydroxide on Escherichia coli LPS. TNF-alpha production in human monocytes was used as indicator for the biological activity of LPS. Results showed that calcium hydroxide is able to eliminate the ability of E. coli LPS to stimulate TNF-alpha production in peripheral blood monocytes. The second study determined the antibacterial effectiveness of either chlorhexidine or calcium hydroxide integrated in gutta-percha points or chlorhexidine or calcium hydroxide delivered as gel or paste. Roots from extracted human teeth were carried with open accesses for one week in the oral cavities of two volunteers. The number of CFU's was determined before and after medication of the contaminated root canals. The chlorhexidine-gel and the calcium hydroxide paste resulted in significantly more samples without microbial colonization as compared to gutta-percha point groups. The third study examined whether obturated roots combined with several adhesive and temporary filling materials can be bypassed by bacteria. After one year of observation, there was no significant difference in number of leaking samples among the groups. It could be concluded that root-filled teeth should receive definitive restoration within three months after obturation. The aim of the fourth study was to examine whether intracanal medication prior to root canal obturation has an inhibitory effect on corono-apical penetration of bacteria. After one year of observation, the group pre-treated with calcium hydroxide paste showed significantly less leaking samples as compared to the groups pretreated with chlorhexidine, Ledermix or no medication. Reconsidering the results of all four studies it may be recommended to perform multi-visit treatment in case of an infected root canal. A one week intermediate dressing with calcium hydroxide will not only neutralize bacterial LPS, but also reduce bacteria significantly and provide prolonged protection against bacterial penetration after root canal filling. After obturation of the root canal system, it is recommended to quickly provide the tooth with a tight adhesively inserted temporary filling or a definitve restoration to achieve additional protection against bacterial ingress.

Neste trabalho, foi realizado um estudo crítico dos modelos metodológicos in vivo e in vitro sobre a avaliação microbiológica da clorexidina empregada como agente irrigante e medicação intracanal na terapia endodôntica. Para tanto, foi realizada uma busca sistemática nas bases de dados: Medline, Lilacs e BBO nos últimos dez anos sobre o assunto em questão. Foram selecionados os trabalhos que avaliaram a clorexidina de uma maneira não combinada com outras substâncias ou fármacos, abordando sua utilização tanto como irrigante endodôntico, e como medicação intracanal. Para uma melhor análise, os trabalhos foram agrupados de acordo com a forma de uso e metodologia com seus dados tabulados, respectivamente: Clorexidina como irrigante in vitro, Clorexidina como irrigante in vivo, Clorexidina como medicação intracanal in vitro e Clorexidina como medicação intracanal in vivo. Na análise, pode-se observar a efetividade antimicrobiana da clorexidina como irrigante nos ensaios laboratoriais e clínicos, sendo nas formas de gel e líquida com variação na concentração de 0.2 a 2%. Quanto o uso da clorexidina como medicação intracanal, pode ser constatada sua atividade antimicrobiana em ambos ambientes experimentais, embora com poucos trabalhos in vivo, seu desempenho foi observado apresentando largo espectro de ação quando utilizada a 2% em gel por um período de sete dias. / In this essay, it was realized a critical study of the methodological models, in vivo and in vitro, about the microbiological assessment of the chlorhexidine employed as root canal irrigants and dressing in the Endodontics. A systematic search was carried out on the databases: Medline, Lilacs and BBO from the last ten years concerning the respective subject. There were selected the papers which evaluated the chlorhexedine as an individual group, without joined to another substances or drugs, broaching its application as root canal irrigants as much as dressing. For improved analyzed, the investigations were divided according its way of use and methodology, with its data tabulated in the respective way: Chlorhexidine as irrigant in vitro, Chlorhexidine as irrigant in vivo, Chlorhexidine as intracanal dressing in vitro and Chlorhexidine as intracanal dressing in vivo. At the analysis, it can be observed the antimicrobial effectiveness of the chlorhexidine as irrigant in the clinical and laboratories tests, being the gel and liquid form with concentration changed from 0.2 to 2%. About the chlorhexidine as root canal dressing, it can be evidenced its antimicrobial activity in both experimental methods, although a few trials in vivo, its performance was observed showing a large spectral action when used in 2% gel for a period of seven days.

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Orientador: Francisco Jose de Souza Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T18:40:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_ClaudioManiglia_D.pdf: 2708039 bytes, checksum: d64f980c6dab5075c81d4c63643a7fe9 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Este estudo teve como objetivo analisar o material obturador guta-percha (polímero trans 1,4- poliisopreno), através de: i) composição química e comportamento térmico de cinco marcas de cones de guta-percha nacionais; ii) degradação da guta-percha após uso de diferentes técnicas de obturação que utilizam o calor para sua plastificação e após diferentes períodos de tratamento. No estudo químico foram feitas a separação e a quantificação dos componentes orgânicos e inorgânicos pela dissolução em clorofórmio, associada às análises por Difração de raios-X, Microanálise Elementar e Microanálise de Raios-X por Espectrometria de Energia Dispersiva. Os comportamentos térmicos foram estudados por meio de Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) e Análise Termogravimétrica (TGA), os quais forneceram os efeitos do aquecimento sobre a guta-percha, bem como a ocorrência de picos endotérmicos, os quais correspondem às transformações cristalinas da polímero guta-percha, o que é traduzido em transições de fases (fase ß para a e fase a para amorfa). A degradação da guta-percha foi analisada através de Cromatografia de Permeação em Gel (GPC) e Espectroscopia em Infra-Vermelho (FT-IR), utilizando-se materiais obturadores colhidos de canais obturados após diferentes períodos (entre 2 e 30 anos) de tempo, e após uso de diferentes técnicas termoplastificadas de obturação do sistema de canais radiculares. Com base nos protocolos experimentais estudados, pode-se concluir que: i) foram quantificados os componentes químicos (guta-percha, ceras, resinas, óxido de zinco e sulfato de bário) de todas as marcas estudadas, sendo que foram notadas oscilações entre as porcentagens dos componentes de acordo com as marcas estudadas; ii) a maioria dos produtos analisados demonstrou comportamento típico de gutapercha em fase ß, apresentando dois picos endotérmicos, com exceção dos cones Dentsply 0.04 e 0.06, que demonstraram comportamento térmico de polímero tipo cis; iii) as técnicas da termocompactação (10 segundos) e a compressão vertical causaram degradações na guta-percha, gerando perda de massa molar; iv) aquecimentos excessivos do polímero guta-percha causam sua degradação, gerando a formação de produtos voláteis e perda de massa molar; v) A gutapercha (trans 1,4-poliisopreno) degrada-se lentamente no interior do canal radicular, sendo notada após 15 anos, porém este processo pode ser influenciado por fatores externos como a infecção endodôntica / Abstract: The main purpose of this study was to analyze the filling material gutta-percha on the following standards: i) chemical composition and thermal behaviour of five brands of Brazilian cones; ii) trans 1,4 polyisoprene polymer degradation after the use of different heating obturation techniques and after different periods of treatment. In the chemical analyzes separation and quantification of organic compounds were made through chloroform dissolution associated with XR diffraction analyzes, elemental microanalyses and X-ray microanalyses by Spectrometry of dispersive energy. Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Thermogravimetry Analysis (TGA) were used to study the thermal behavior of gutta-percha cones, determining the temperature at which endothermic peaks occur, causing a transformation from the ß- to the a-form, and from the a- to amorphous phase. Polymer degradation was analyzed through chromatography of gel permeation (GPC) and infrared spectroscopy (FT-IR) using filling materials collected from root canals obturated after different periods of time (between 2 and 30 years) and after the use of different thermoplastic obturation techniques of root canal systems. Based on the studied experimental protocols, it can be concluded that: i) the quantification of chemical compounds (gutta-percha, wax, resin, zinc oxide and barium sulphate) showed variations in the percentages of compounds according to the studied brands; ii) most of the analyzed products showed characteristic behavior of phase ß in gutta-percha with two endothermic peaks, except for Dentsply cones 0.04 and 0.06 which demonstrated thermo behavior of polymer cis type; iii) thermomechanical compaction and vertical compression techniques promoted gutta-percha degradation causing loss of molar mass; iv) excessive polymer heating causes its degradation, forming volatile products and loss of molar mass, damaging its dimensional stability properties; v) trans 1,4 polyisoprene degrades itself slowly in the root canal which can be clearly seen after a period of 15 years and it can be influenced by external factors such as endodontic infection / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Ziel: In der vorliegenden In-vitro-Studie sollte der Einfluss unterschiedlicher endodontischer Schall (S)- und Ultraschallansätze (US) auf Dentinabtrag und Instrumentenversagen untersucht und quantifiziert werden, der bei der Anwendung im standardisierten bovinen Wurzelkanal (WK) entsteht. Zusätzlich sollte eine neue Methode zur tribologischen Untersuchung des erfolgten Dentinabtrags mithilfe von 3D-Digitalisierung etabliert werden. Methodik: In 90 bovine Inzisivi wurden CNC-gesteuert, standardisierte WKs mit drei verschiedenen Kanalkrümmungsradien (r = 3 mm, n = 30; r = 6 mm, n = 30; und gerader WK, n = 30) gefräst. Die WK wurden mithilfe des 3D Digitalisierers ATOS SO 4M (Gom, Braunschweig, Deutschland) photogrammetrisch eingescannt (Scan Nr. 1). Daraufhin erfolgte die Aktivierung der Ansätze „IRRI S“ (VDW), „EDDY' (VDW) und „PEEK“ (ILK, UKD) für 3 x 20 s im WK bei Anwendung eines standardisierten Spülprotokolls mit NaOCl 3 %, EDTA 20 %. Scan Nr. 2 erfolgte anschließend analog zu Scan Nr. 1. Mit Hilfe der Software Atos v.6.3.0-6 wurden beide Scans transformiert, polygonisiert und über die Funktion „Flächenvergleich“ ausgewertet. Jeder WK wurde in 4 Regionen unterteilt (1: Kanaleingang; 2: gerader Kanalteil; 3: Kanalinnenkurvatur; 4: Kanalaußenkurvatur/Apex) und pro Region wurde der größte Dentinabtrag in µm ermittelt. Zusätzlich wurde jeder Messwert anhand eines selbst entwickelten Dentinal Damage Index (DDI) eingeordnet. Die Versagensanalyse der Ansätze erfolgte rasterelektronenmikroskopisch. Ergebnis: Die optische 3D-Digitalisierung zeigte, dass der US-Ansatz „IRRI S“ im 3 mm-WK in allen Regionen zu sichtbarem Dentinabtrag führte: Region 1- MW 48,56 ± 13, 91 µm; Region 2- MW 36,06 ± 8,35 µm; Region 3- MW 41,05 ± 15,89 µm; Region 4- MW 71,88 ± 54,96 µm. Im 6 mm-WK erfolgte sichtbarer Dentinabtrag in Region 1 durch „IRRI S“ (MW 41,08 ± 11,94 µm) und S-Ansatz „EDDY“ (MW 41,10 ± 10,37 µm), in Region 3 und 4 durch „IRRI S“ (MW 33,34 ± 6,61 µm, MW 40,50 ± 13,56 µm). Interessanterweise wird der gerade WK in Region 1 und 4 von „IRRI S“ (MW 43,59 ± 15,32 µm, MW 43,39 ± 15,48 µm) geschädigt. Der US-Ansatz „PEEK“ schädigte das Dentin nicht. Die rasterelektronenmikroskopische Auswertung von „IRRI S“ ergab nach Anwendung in allen WKs minimale Oberflächenalterationen und leichte Begradigungen der Instrumentenspitze. „EDDY“ zeigte deutliche Oberflächenaufwerfungen und Abnutzungen an der Instrumentenspitze in allen WK. US-Ansatz „PEEK“ zeigte nur in den 3 mm-WK leichte Auffaserungserscheinungen. Schlussfolgerung: Der Schallansatz „EDDY“ und der Ultraschallansatz „PEEK“ sind für die klinische Anwendung in gekrümmten Wurzelkanälen geeignet, da sie nicht zu unerwünschten Dentinschädigungen der Kanalwand führen.:Abkürzungsverzeichnis III 1 Einleitung 1 2 Stand der Forschung 3 2.1 Dentin-Eigenschaften 3 2.2 Rinderdentin 4 2.3 Dentinabtrag 5 2.3.1 Erwünschter Dentinabtrag 5 2.3.2 Unerwünschter Dentinabtrag 5 2.3.3 Bisherige Messmethoden für den Dentinabtrag 8 2.4 Wurzelkanalkrümmungen 11 2.5 Ultraschall- bzw. schallaktivierte Spülung (US-AS) 13 2.5.1 Anwendung 13 2.5.2 Ultraschallansatz „IRRI S“ 15 2.5.3 Schallansatz „EDDY“ 16 2.5.4 Der „PEEK“- Ansatz 17 2.6 Photogrammetrische Methoden für die 3D-Koordinatenmesstechnik 18 3 Ziel der Studie 21 4 Material und Methoden 23 4.1 Übersichtsdarstellung des Versuchsplans 23 4.2 Materialliste 26 4.2.1 Chemikalien und Reagenzien 26 4.2.2 Geräte, Instrumente und Verbrauchsmaterialien 26 4.2.3 Software 28 4.3 Entwicklung des Kanalmodells 28 4.4 Modellherstellung 33 4.5 Vorversuche 36 4.6 Etablierung des Scan-Protokolls für bovine Wurzelkanalmodelle 39 4.6.1 Titantiumdioxid-Applikation 40 4.6.2 3D optischer Scan der Wurzelkanalmodelle 41 4.7 Haupt-Versuch: Applikation der Schall-/ US-Ansätze im bovinen Wurzelkanalmodell 42 4.7.1 Versuchsaufbau 42 4.7.2 Ausrichtung der Schall- und Ultraschallansätze 43 4.7.3 Anwendung der Schall- und Ultraschallansätze 45 4.7.4 Spülkonzept 47 4.8 Messdatenerhebung 47 4.8.1 Vermessung der Schall- und Ultraschallansätze 47 4.8.2 3D optischer Scan nach erfolgter Applikation der Schall- und Ultraschallansätze 48 4.8.3 Transformation und Polygonisierung der 3D-Scans 48 4.8.4 Flächenvergleich und Auswertung 50 4.8.5 Dentinal-Damage-Index nach Tetzner und Weber 56 4.9 REM-Aufnahmen 57 4.10 Statistische Auswertung 58 5 Ergebnisse 59 5.1 Dentinabtrag im Regionen-Vergleich 60 5.1.1 Ultraschallansatz „IRRI S“ 60 5.1.2 Schallansatz „EDDY“ 69 5.1.3 Ultraschallansatz „PEEK“ 78 5.2 Dentinabtrag-Vergleich zwischen den verschiedenen Kanalkrümmungen bei gleichem Ansatztyp 84 5.2.1 Ultraschallansatz „IRRI S“ 84 5.2.2 Schallansatz „EDDY“ 86 5.2.3 Ultraschallansatz „PEEK“ 88 5.3 Dentinabtrag-Vergleich zwischen den verschiedenen Ansatztypen bei gleicher Kanalkrümmung 90 5.3.1 Wurzelkanalmodell mit 3 mm Kanalkrümmungsradius 90 5.3.2 Wurzelkanalmodell mit 6 mm Kanalkrümmungsradius 92 5.3.3 Wurzelkanalmodell ohne Kanalkrümmung 94 5.4 Massenänderung 96 5.5 Längenänderung der Ansätze 96 5.6 Rasterelektronenmikroskopische Auswertung 97 6 Diskussion 103 6.1 Material und Methoden 103 6.1.1 Wurzelkanalmodell 103 6.1.2 Messmethoden 106 6.2 Ergebnisse 109 6.2.1 Dentinabtrag 109 6.2.2 REM-Aufnahmen 113 6.3 Klinische Konsequenzen 115 7 Schlussfolgerungen 119 8 Zusammenfassung 121 9 Summary 122 Abbildungsverzeichnis 123 Tabellenverzeichnis 137 Literaturverzeichnis 139 Lebenslauf 157 Danksagung 159

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Introduction: The prevalence of diabetes mellitus (DM) is rapidly increasing among the aging United States population. This poses a challenge to dental providers since DM and multiple oral conditions have been identified as comorbidities. Hypertension (HTN) is associated with more poorly controlled DM and has been identified as contributing to RCT tooth loss in prior studies. Links have also been established between DM and the survival rate of root canal treated teeth, however, previous research has focused on institutional settings despite the majority of RCT being performed in private dental practices. This study will use data from private dental practices to evaluate the survival rate of RCT teeth in patients with DM and HTN. Materials and Methods: This retrospective study evaluated the survival rate of endodontic treated teeth among patients with DM and HTN using National Dental PBRN Practice data. Electronic dental records from 42 private dental practices in the United States over a period of 15 years with a minimum 2-year follow-up comprising 11,532 root canal treated teeth were analyzed. Kaplan-Meier survival curves were used to demonstrate the effects of HTN and DM on RCT tooth survival and Cox proportional hazards survival analysis was used to evaluate the DM and HTN effects after accounting for age, gender, insurance, year of treatment, tooth type, and crown and filling placement as covariates. Results: Patients with HTN only had significantly lower risk of failure than patients with both HTN and DM (p=0.003). Patients with neither HTN nor DM had significantly lower risk of failure than patients with both HTN and DM (p=0.020). Patients with DM only did not have significantly different risk of failure than patients with both HTN and DM (p=0.223). Patients with DM only did not have significantly different risk of failure than patients with HTN only (p=0.361). Patients with neither HTN nor DM did not have significantly different risk of failure than patients with HTN only (p=0.121) or patients with DM only (p=0.800). Conclusions: Patients with both DM and HTN have an increased chance of root canal treated tooth failure while patients with only DM or only HTN do not. Evaluation of severity of DM may be more important in determining RCT failure and studies utilizing laboratory values should be considered for future research.

O objetivo deste estudo in vivo foi avaliar o reparo periapical e a expressão de mediadores inflamatórios após tratamento endodôntico em sessão única, dentes de cães com lesão periapical, utilizando protocolos de Irrigação por Pressão Apical Negativa, Irrigação Ultrassônica Passiva e Irrigação Convencional por Pressão Positiva. Um total de 80 canais radiculares de pré-molares de cães, com lesões periapicais experimentalmente induzidas, foram submetidos ao tratamento endodôntico em sessão única ou mantidas sem tratamento. Os dentes foram aleatoriamente divididos em 4 grupos: Grupo 1 - Irrigação por Pressão Apical Negativa (n=20 canais radiculares); Grupo 2 - Irrigação Ultrassônica Passiva (n=20 canais radiculares), Grupo 3 - Irrigação por Pressão Positiva (n=20 canais radiculares) e Grupo IV - Lesão periapical sem tratamento (n = 20 canais radiculares). Foi realizado os protocolos de irrigação com NaOCL 5,25% e instrumentação, utilizando limas Protaper rotatória F3-F4, em seguida os canais foram obturados com cimento AH Plus&reg;. Após 180 dias, os animais foram eutanasiados, as peças removidas e submetidas ao processamento histotécnico para análise imunohistoquímica para osteopontina, fator de necrose tumoral-&alpha; e interleucina 1-&alpha;. A análise radiográfica do reparo das lesões periapicais foi realizada por meio do Índice Periapical, obtido antes e 180 dias após o tratamento endodôntico. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística por meio do teste de Exato de Fisher ou Kruskal-Wallis seguido pelo pós-teste de Dunn. O nível de significância adotado foi de 5%. Aos 180 dias após o tratamento endodôntico, o exame radiográfico mostrou a persistência de áreas radiolúcidas periapicais e descontinuidade da lâmina dura em 35% dos espécimes do Grupo pressão apical negativa, 40% dos espécimes do Grupo ultrassônica passiva e 40% dos espécimes do Grupo pressão positiva. Porém, quando comparado às radiografias previamente ao tratamento, em todos os grupos, pôde-se observar uma redução no tamanho das lesões periapicais. Não houve diferença entre os grupos, independente do protocolo de irrigação utilizado (p > 0,05). O tratamento endodôntico realizado em sessão única, resultou na menor síntese do fator de necrose tumoral-&alpha; e de osteopontina na região periapical, comparativamente à lesão periapical sem tratamento (p < 0,05), independente do protocolo de irrigação utilizado (p > 0,05). A produção de interleucina-1&alpha; não foi modulada pelo tratamento endodôntico (p > 0,05). Com base nas metodologias empregadas e nos resultados obtidos no presente estudo in vivo, pôde-se concluir que houve reparo da lesão periapical em cerca de 60% dos casos após tratamento endodôntico realizado em sessão única e menor síntese do fator de necrose tumoral-&alpha; e de osteopontina na região periapical, comparativamente à lesão periapical sem tratamento, independente do protocolo de irrigação utilizado (pressão apical negativa, ultrassônica passiva e por pressão positiva) / The aim of this in vivo study was to evaluate the periapical repair and the expression of inflammatory mediators after endodontic treatment in dogs with periapical lesions using Negative Apical Pressure Irrigation, Passive Ultrasonic Irrigation and Conventional Positive Pressure Irrigation protocols. A total of 80 root canals of premolars of dogs with periapical lesions experimentally induced, were submitted to endodontic treatment in a single session, or maintained without treatment. The teeth were randomly divided into 4 groups: Group 1 - Irrigation by Pressure, Apical Negative (n=20 root canals); Group 2 - Irrigation, Ultrasonic, Passive (n=20 root canals), Group 3 - Irrigation by Positive Pressure (n=20 root canals), and Group IV - Lesion periapical without treatment (n = 20 root canals). Was done the protocols of irrigation with NaOCL 5.25% and instrumentation, using files Protaper rotatory F3- F4, then the channels were obturados with cement AH Plus&reg;. After 180 days, the animals were euthanized, the pieces removed and submitted to histotechnical processing for immunohistochemical analysis for osteopontin, tumor necrosis factor-&alpha; and interleukin 1-&alpha;. Radiographic analysis of the repair of the periapical lesions was performed using the Periapical Index, obtained before and 180 days after the endodontic treatment. The results were submitted to statistical analysis using Fisher\'s exact test or Kruskal-Wallis test followed by Dunn\'s post-test. The level of significance was 5%. At 180 days after the endodontic treatment, the radiographic examination showed the persistence of periapical radiolucent areas and discontinuity of the lamina dura in 35% of the negative apical pressure group, 40% of the passive Ultrasonic Group specimens and 40% of the positive pressure Group specimens. However, when compared to radiographs prior to treatment, in all groups, a reduction in the size of periapical lesions was observed. There was no difference between the groups, regardless of the irrigation protocol used (p> 0.05). Endodontic treatment performed in a single session resulted in the lower synthesis of tumor necrosis factor-&alpha; and osteopontin in the periapical region, compared to untreated periapical lesion (p 0.05). The production of interleukin-1&alpha; was not modulated by endodontic treatment (p> 0.05). Based on the methodologies used and the results obtained in the present in vivo study, it was concluded that the periapical lesion was repaired in about 60% of cases after endodontic treatment performed in a single session and lower synthesis of tumor necrosis factor-&alpha; and osteopontin in the periapical region, compared to the untreated periapical lesion, regardless of the irrigation protocol used (negative apical pressure, passive ultrasonic and positive pressure)

Procedimentos clínicos complementares realizados após o preparo químico-cirúrgico de canais radiculares visam potencializar a limpeza e desinfecção após a fase de preparo. O objetivo deste trabalho foi avaliar, por métodos moleculares baseados em rDNA e rRNA, a eficácia antimicrobiana de procedimentos complementares de primeira e de segunda sessão, realizados após o PQC em dentes com periodontite apical. Baseado em estudo piloto prévio, amostras microbiológicas dos canais radiculares de 20 dentes unirradiculares com periodontite apical foram coletadas na primeira sessão clínica: após a cirurgia de acesso (S1), após o PQC realizado com Sistema Reciproc e NaOCl 2,5% (S2), após a utilização do instrumento XP-endo Finisher (S3a), e após a ativação ultrassônica (S3b). Na segunda sessão clínica as amostras foram coletadas após medicação intracanal entre sessões por 14 dias (S4), e após o repreparo dos canais na segunda sessão de tratamento (S5). As amostras foram submetidas à extração de DNA e RNA. O RNA foi submetido à reação de transcrição reversa (RT-PCR) para confecção da fita dupla de DNA complementar (cDNA). DNA e cDNA foram submetidos a reações de qPCR, com iniciadores universais para a região 16S rRNA do domínio Bacteria. A atividade metabólica das bactérias foi verificada através da relação entre os níveis de rRNA e rDNA das amostras baseados nos dados dos ensaios de qPCR. Os dados foram analisados pelo teste de Wilcoxon para amostras pareadas (p < 0,05). Todas amostras S1 foram positivas para bactérias (mediana: 1,79 x 105 cópias de rDNA). Doze canais (60%) permaneceram infectados em S2, com uma redução significativa de rDNA (mediana: 7,58 x 103; P = 0,0001). Em S3a e S3b, o número de canais infectados reduziu para 11 (55%) e 10 (50%), respectivamente, e aumentou para 14 (70%) em S4; porém não houve diferenças significativas entre os níveis de rDNA bacteriano quando essas amostras foram comparadas às amostras S2 ou comparadas entre si (P > 0,05). A prevalência de canais infectados voltou a cair em S5 para 6 (30%) e o número cópias de rDNA bacteriano detectado reduziu de maneira significativa quando comparado às amostras S4 (p = 0,0061). Nas amostras positivas para os 2 métodos, os níveis de rRNA foram significativamente maiores do que os níveis de rDNA nas amostras S1 (p = 0,0007) e S4 (p = 0,0499), indicando um alto metabolismo bacteriano. A relação dos níveis de rRNA e de rDNA revelou uma redução do metabolismo de bactérias totais em S2, S3a e S3b e um aumento significativo do metabolismo bacteriano em S4 (p = 0,0173) quando comparado a S3b. Concluiu-se que: o PQC promoveu redução dos níveis e da atividade metabólica de bactérias nos canais radiculares; o uso do instrumento XP-endo Finisher e ativação ultrassônica não contribuiu para uma desinfecção adicional na primeira sessão; após o uso de Ca(OH)2 como medicação intracanal, houve um aumento no metabolismo de bactérias persistentes; o repreparo dos canais radiculares após medicação intracanal, na segunda sessão, promoveu maior desinfecção do que os procedimentos realizados na primeira sessão do tratamento de dentes com periodontite apical. / Supplementary procedures performed after the chemical-surgical preparation of root canals aim to enhance cleaning and disinfection in endodontic treatment. The objective of this clinical study was to evaluate using molecular microbiological techniques based on rDNA and rRNA, the antimicrobial efficacy of supplementary disinfection procedures performed in multiple sessions after the chemical-surgical preparation in teeth with apical periodontitis. Based on a previous pilot study, microbiological samples of the root canals of 20 unirradicular teeth with apical periodontitis were taken after the access surgery (S1), after the chemical-surgical preparation using Reciproc and 2,5% NaOCl (S2) after the XP-endo Finisher (S3a), after ultrasonic activation (S3b), after intracanal medication for 14 days (S4), and after re-preparation of the root canals in the second treatment appointment (S5). The samples were submitted to DNA and RNA extraction. The RNA was subjected to the reverse transcription reaction (RT-PCR) to make the complementary DNA double strand (cDNA). The effect of endodontic procedures on bacterial reduction was determined by rDNA-based qPCR using universal primers for the 16S rRNA region of the Bacteria domain. The metabolic activity of the bacteria was assessed by the rRNA/rDNA ratio based on qPCR assay data. Data were analyzed by the Wilcoxon signed-rank test (P < 0.05). All S1 samples were positive for bacteria (median 1.79 x 105 rDNA copies). Twelve root canals (60%) remained infected in S2, with a significant reduction of rDNA (median: 7.58 x 103; P = 0.0001). In S3a and S3b, the number of infected teeth decreased to 11 (55%) and 10 (50%), respectively, and increased to 14 (70%) in S4; however there were no significant differences between bacterial rDNA levels when these samples were compared to the S2 samples or compared to each other (P> 0.05). The prevalence of infected canals dropped back to 6 (30%) in S5 and the number of bacterial rDNA detected significantly reduced when compared to S4 samples (p = 0.0061). In samples with positive reactions for both methods, rRNA levels were significantly higher than the rDNA levels in S1 (p = 0.0007) and S4 (p = 0.0499), indicating a high metabolic activity of bacteria. The results of the rRNA/rDNA ratio revealed a reduction in the metabolism of total bacteria in S2, S3a and S3b and a significant increase in metabolic activity of bacteria in S4 (p = 0.0173) when compared to S3b. It was concluded that: PQC promoted reduction of the levels and metabolic activity of bacteria in the root canals; the use of XP-endo Finisher plus ultrasonic activation did not contribute to an additional disinfection in the first session; after the use of Ca(OH)2 as intracanal medication, there was an increase in the metabolismo of persistente bacteria; the repreparation of the root canals in the second session after the use of intracanal medication, promoted greater disinfection than the procedures performed in the first session of the treatment of teeth with apical periodontitis.

Considerando-se a localização intra-óssea das lesões periapicais, o diagnostico clinico e dificultado e a avaliação radiográfica não fornece informações suficientes para o diagnostico de um periodonto apical sadio pós-tratamento. Dessa maneira, o objetivo deste estudo foi comparar os achados radiográficos e por tomografia computadorizada de feixe cônico com a avaliação microscópica após tratamento de canais radiculares em dentes de cães e avaliar a participação das metaloproteinases da matriz (MMPs) na lesão periapical e nos tecidos em processo de reparação, assim como em cistos e granulomas periapicais obtidos de humanos. A seguir, os mecanismos envolvidos na cementogênese apical foram investigados utilizando células do ligamento periodontal de humanos. Foram induzidas lesões periapicais em dentes de cães e o tratamento endodôntico foi realizado em sessão única ou apos utilização de um curativo de demora a base de hidróxido de cálcio [Ca(OH)2]. Avaliações radiográficas e tomográficas foram realizadas previamente, após a indução das lesões periapicais e 180 dias apos o tratamento endodôntico. Os tecidos periapicais foram avaliados por meio de microscopia de luz, imunofluorescência, imunoistoquímica e RT-PCR em tempo real. In vitro, células do ligamento periodontal foram utilizadas para avaliar os efeitos da estimulação com Ca(OH)2 nos processos de migração, proliferação, diferenciação celular e mineralização. As vias de sinalização envolvidas na diferenciação cementoblastica foram investigadas por meio de inibidores bioquímicos da via das proteínas quinases ativadoras de mitose (MAPK), bloqueadores de canais de cálcio e silenciadores de RNA para proteínas quinases reguladas por sinal extracelular (ERK-1 / ERK-2). De acordo com os resultados obtidos, a tomografia computadorizada permitiu a detecção de lesões periapicais com maior sensibilidade e acuracia que a radiografia periapical convencional, utilizando-se a avaliação microscópica como padrão-ouro. Histologicamente, as lesões periapicais experimentalmente induzidas apresentaram bactérias distribuídas pelo sistema de canais radiculares e lacunas de reabsorção do cemento e estavam associadas a desorganização das fibras colágenas e alta expressão de MMPs. A presença das MMPs em processos inflamatórios periapicais de humanos (cistos e granulomas) foi confirmada. Nos dentes com lesão periapical submetidos ao tratamento endodôntico em sessão única o desfecho do tratamento endodôntico foi caracterizado pela manutenção ou progressão da lesão periapical e alta expressão de MMPs. Por outro lado, nos dentes submetidos ao tratamento endodôntico utilizando o Ca(OH)2 como curativo de demora, maior numero de espécimes apresentaram regressão da lesão periapical e houve modulação da expressão de MMPs pelo tratamento. Neste grupo foi evidenciada neoformação de cemento no forame apical. Células do ligamento periodontal estimuladas com Ca(OH)2 expressaram proteínas especificas de cementoblastos (CEMP-1, CAP) e foram capazes de sintetizar nódulos de mineralização, mediados via ERK MAPK. A ação do Ca(OH)2 ocorreu via canais de cálcio, uma vez que o bloqueio destes canais inibiu a fosforização de ERK-1 e ERK-2 e, portanto, a expressão de CEMP-1 e CAP. CEMP-1 estimulou a migração, proliferação e mineralização mediada por células, exercendo um papel central na cementogenese, uma vez que o bloqueio de CEMP-1 inibiu a migração celular e mineralização. Juntos, estes resultados permitem concluir que a tomografia computadorizada e superior a radiografia periapical convencional para detecção de lesões periapicais refratarias ao tratamento de canais radiculares. Ainda, o tratamento endodôntico realizado utilizando o hidróxido de cálcio como curativo de demora propiciou um reparo apical e periapical mais favorável do que o tratamento endodôntico em sessão única, possivelmente devido a capacidade do Ca(OH)2 induzir a diferenciação de células do ligamento em células com um fenótipo cementoblastico e posterior mineralização. / Clinical diagnosis of apical periodontitis is difficult due to the intraosseous nature of the disease and radiographic evaluation does not provide sufficient information to determine a healthy apical periodontium following root canal therapy. Therefore, the aim of this study was to compare the radiographic and cone beam computed tomographic findings with microscopic evaluation following root canal treatment in dogs teeth. Then, the presence of matrix metalloproteinases (MMPs) in apical periodontitis and during the healing phase following treatment was evaluated and compared to the expression of MMPs in periapical cysts and granulomas obtained from human. Finally, the mechanisms involved in apical cementogenesis were investigated using human periodontal ligament cells. Apical periodontitis was induced in dogs teeth and then root canal treatment was performed in a single visit or using calcium hydroxide [Ca(OH)2] as the root canal dressing. Tomographic and radiographic evaluations were performed prior to and following induction of apical periodontitis, and 180 days following root canal therapy. Periapical tissues were evaluated by conventional light microscopy, immunofluorescence, immunohistochemistry, and real time RT-PCR. In vitro, periodontal ligament cells were used to evaluate the effects of Ca(OH)2 treatment on cell migration, proliferation, differentiation, and mineralization. The signaling pathways triggered by treatment with Ca(OH)2 were investigated using mitogen activated protein kinase (MAPK) biochemical inhibitors, calcium channel blockers, and extracellular regulated protein kinase (ERK-1 / ERK-2) silencing RNAs. Based on the results obtained, apical periodontitis was detected with higher sensitivity and accuracy by means of cone beam computed tomography compared to conventional periapical radiographs, using microscopic evaluation as the gold standard. Histological evaluation revealed that teeth with apical periodontitis presented microorganisms throughout the root canal system and in areas with resorption of cementum. Apical periodontitis was characterized by collagen fiber disorganization and high expression of MMPs. The presence and activity of MMPs was confirmed in periapical inflammatory diseases (cysts and granulomas) obtained from humans. Root canal treatment outcome was characterized by maintenance or progression of apical periodontitis and high expression of MMPs in teeth submitted to root canal treatment in a single visit, whereas root canal treatment outcome in teeth submitted to root canal treatment using Ca(OH)2 as the root canal dressing, higher number of teeth presented reduced apical periodontitis and lower expression of MMPs. In this group, cementum neogenesis was evident in the apical foramina. Periodontal ligament cells stimulated with Ca(OH)2 expressed cementoblastic specific proteins (CEMP-1, CAP) and were able to synthesize mineralized nodules via ERK MAPK. The effects of Ca(OH)2 occurred via calcium channels, since their blockade prevented ERK-1 and ERK-2 phosphorylation and therefore expression of CEMP-1 and CAP. CEMP-1 stimulated cell migration, proliferation, and mineralization and it was central to cementogenesis because blockade of activity of CEMP-1 prevented cell migration and mineralization. Taken together, these findings demonstrate that cone beam computed tomography is superior to conventional periapical radiography for detection of refractory apical periodontitis. Furthermore, the root canal treatment using Ca(OH)2 as the root canal dressing permitted a more favorable outcome than the root canal treatment performed in a single visit, probably due to the ability of Ca(OH)2 induce cementoblastic differentiation of periodontal ligament cells and mineralization.

Endodontic retreatments are time-consuming and difficult to perform. Removing the root canal filling material of the original treatment with maximum efficiency and safety is a complex task that requires a good technique, patience and perseverance. This filling material is often contaminated and prevents access to areas of the canal harboring bacteria and remnants of necrotic tissue, especially in the isthmus region and in dentinal tubules. The aim of this study was to use micro-computed tomography to evaluate two protocols for the removal of root canal filling material from curved root canals of the mesial roots of mandibular molars using a reciprocating instrument followed by two different rotary instruments manufactured with different nickel-titanium alloys. The reduction in the volume of the filling material inside the root canals was evaluated. Assessments were also made of the influence of the glide path extension on root canal obturation, the extrusion of filling material after the use of the reciprocating instrument, the volume of filling material after retreatment and its presence in isthmus areas. In addition, the use of a solvent and the agitation of a 2% sodium hypochlorite solution using either passive ultrasonic irrigation (PUI) or a plastic instrument in reciprocating motion were evaluated. A total of 40 mesial roots of mandibular molars with a mean curvature of 25 degrees were selected. The teeth were radiographed digitally in the buccolingual and mesiodistal directions, with a digital Xray system (Schick CDR; Schick Technologies, Long Island, NY), using an exposure time of 0.16 s. This was done in order to select the teeth and then compose two groups with similar characteristics to ensure their anatomic homogeneity. Group homogeneity in terms of anatomy, root canal length, curvature angle, and Vertucci classification type II and IV were confirmed and showed that the study groups were well balanced. Two groups were defined according to the retreatment protocol adopted, namely RHPui (Reciproc + Hyflex + PUI) and RMEasy (Reciproc + Mtwo + EasyClean). The teeth were instrumented with the Reciproc R25 instrument and filled using the single-cone technique and AHPlus cement. Prior to the use of this instrument, canal patency was achieved by creating a glide path with PathFile instruments, throughout the entire extension of the canal in Group RHPui, and up to 1 mm short of the total canal length in Group RMEasy. In both groups, the original filling material was removed with the Reciproc R25 instrument. Xylene was used as a solvent in Group RHPui up to the middle third, but not in the apical area, in the later steps of instrumentation with Reciproc R25. In Group RHPui, the Hyflex 40.04 instrument, made with a CM nickeltitanium alloy, was used. After that, xylene solvent was applied for one minute in the pulp chamber, followed by passive ultrasonic irrigation (PUI) with 2% sodium hypochlorite using an irrisonic instrument, applied up to 2 mm short of the working length. In Group RMEasy, the Mtwo 40.04 instrument, made with a conventional nickeltitanium alloy, was used. Xylene solvent was also used in the pulp chamber for one minute, followed by application of a 2% sodium hypochlorite solution agitated mechanically with an EasyClean plastic instrument in reciprocating motion up to the full working length. The two groups were re-obturated using the warm vertical condensation technique, with a gutta-percha cone corresponding to the final instrument, and with AHPus cement. Micro-CT scans were performed after each procedure to evaluate the volume of the remaining material, the extrusion after the use of the reciprocating instruments, the final volume of the obturation at the end of the retreatment and the filling material volume in the isthmus area, both after the original obturation and after re-obturation. The results showed that the initial filling was significantly closer to the apical foramen in Group RHPui than in Group RMEasy, after the initial treatment. After performing the retreatment protocols, the complete removal of filling material from inside the root canals was not achieved in either study group, with no statistically significant difference (P > 0.05) between groups regarding this variable. In the intra-group evaluation, a statistically significant difference (P < 0.05) was found between the procedural steps regarding the reduction in filling material volume, both in the total canal length and at its different levels, except for the middle third after HyFlex, the cervical third after Mtwo, and the middle third after EasyClean. The volume of the final filling material was significantly higher (P < 0.05) than the volume of the original filling material in both study groups. The volume of filling material in the isthmus region was significantly higher after re-obturation in both groups (P < 0.05), and this increase was greater in the RMEasy Group. There was no statistically significant difference (P > 0.05) between groups regarding the total amount of time expended in the removal of filling material (P > 0.05), namely 209.40 s for the RHPui Group and 227.40 s for the RMEasy Group. There was also no statistically significant difference (P > 0.05) between groups regarding the volume of extruded filling material, namely 0.0258 mm3 (0 0.954) in the RHPui Group and 0.0037 mm3 (0 0.565) in the RMEasy Group. The Shapiro-Wilks, Mann-Whitney, Wilcoxon, Friedman and Dunn tests were used in the data analysis. / Os retratamentos endodônticos demandam tempo e são difíceis de serem executados. Remover o material de obturação do tratamento original com a máxima eficiência e segurança é uma tarefa complexa que necessita de técnica, paciência e perseverança. Esse material de obturação muitas vezes está contaminado, e impede o acesso às áreas do canal onde permaneceram restos de tecido necrótico e microrganismos, especialmente na região do istmo e nos túbulos dentinários. O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio da microtomografia computadorizada, dois protocolos de desobturação de canais radiculares curvos de raízes mesiais de molares inferiores utilizando um instrumento reciprocante seguido de dois diferentes instrumentos rotatórios fabricados com diferentes ligas metálicas de níquel-titânio. Além da redução dos volumes de material obturador no interior dos canais, foram avaliados a influência do comprimento da patência do canal radicular (glide path) na obturação, extrusão de material obturador após o uso do instrumento reciprocante Reciproc R25, o volume do material de obturação após o retratamento e a presença deste em áreas de istmo. Também foi avaliado o uso de um solvente seguido da agitação do hipoclorito de sódio a 2% com ultrassom (PUI) e com um instrumento plástico acionado em movimento reciprocante. Foram selecionadas 40 raízes mesiais de molares inferiores com curvatura média de 25 graus que foram divididos em dois grupos de forma homogênea quanto ao comprimento, à curvatura e à anatomia (classes II e IV de acordo com a classificação de Vertucci) dos canais radiculares. Os dentes foram instrumentados com o instrumento Reciproc R25 e obturados com a técnica do cone único e com cimento AHPlus. Previamente ao uso do instrumento Reciproc R25, obteve-se a patência inicial do canal, ou seja, criou-se um glide path, com os instrumentos PathFile em toda a extensão do canal no Grupo RHPui e 1 mm aquém do comprimento total do canal no Grupo RMEasy. Os dois grupos foram definidos de acordo com o protocolo de retratamento adotado, a saber, RHPui (Reciproc + Hyflex + PUI) e RMEasy (Reciproc + Mtwo + EasyClean). Nos dois grupos, a remoção do material obturador original foi realizada com o instrumento Reciproc R25, sendo que no grupo RHPui foi utilizado o solvente xilol até a proximidade do terço médio, não sendo utilizado solvente no terço apical. No Grupo RHPui, utilizouse, então, o instrumento Hyflex 40.04 feito com liga de niquel-titânio CM (control memory ou de memória controlada) e, por último, utilizou-se o solvente xilol por um minuto na câmara pulpar, seguido de irrigação ultrassônica passiva (PUI) com solução de hipoclorito de sódio a 2% utilizando o instrumento Irrisonic, até o limite de 2 mm aquém do comprimento de trabalho. No Grupo RMEasy, foi utilizado o instrumento Mtwo 40.04 fabricado com liga de níquel-titânio convencional e, a seguir, também se utilizou o solvente xilol por um minuto na câmara pulpar seguido de uma agitação mecânica do hipoclorito de sódio a 2% com o instrumento plástico EasyClean em movimento reciprocante até o limite do comprimento total de trabalho. Os dois grupos foram re-obturados com a técnica de condensação vertical aquecida com cone de guta-percha correspondente ao instrumento final e com cimento AHPus. Foram realizadas microtomografias após cada procedimento para avaliar o volume de material remanescente, a extrusão após o uso dos instrumentos reciprocantes, o volume final da obturação ao final do retratamento e o volume na área de istmo, tanto após a obturação original quanto após a re-obturação. Os resultados obtidos mostraram que, no tratamento inicial, a patência do canal (ou glidepath) realizado com instrumentos Pathfile previamente ao uso dos instrumentos Reciproc R25 possibilitou que a obturação dos canais atingisse um limite significativamente (P < 0,05) mais próximo ao forame apical no grupo RHPui, onde o glidepath foi realizado em toda a extensão do canal. Em relação aos diferentes protocolos de retratamento, não houve remoção completa do material obturador do interior dos canais nos dois grupos estudados em todos os níveis avaliados, sem diferença estatisticamente significativa (P > 0,05) entre os grupos com relação a essa variável. Na avaliação intragrupo, houve uma diferença estatisticamente significativa (P < 0,05) entre os passos do procedimento em relação à redução do volume de material obturador, tanto na extensão total do canal, quanto nos seus diferentes níveis, com exceção do terço médio após o Hyflex, no terço cervical após o Mtwo e no terço médio após o EasyClean. O volume do material obturador final foi significativamente maior (P < 0,05) do que o volume do material obturador original, nos dois grupos estudados. O volume de material obturador na região do istmo foi significativamente maior (P < 0,05) após a re-obturação nos dois grupos, sendo significativamente maior (P < 0,05) no grupo RMEasy do que no grupo RHPui. Não houve diferença estatística (P > 0,05) entre os grupos com relação ao tempo total despendido na remoção do material obturador (P > 0,05), sendo 209,40 s para o Grupo RHPui e 227,40 s para o Grupo RMEasy. Não houve diferença estatística (P > 0,05) entre os grupos com relação ao volume da extrusão de material obturador, sendo 0,0258 mm3 (0 0,954) no Grupo RHPui e 0,0037 mm3 (0 0,565) no Grupo RMEasy. Os testes de Shapiro-Wilks, Mann- Whitney, Wilcoxon, Friedman e Dunn foram utilizados na análise dos dados.