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Efeitos da ingestão de proteína degradável no rúmen sobre aspectos reprodutivos de tourosCastro, Eric de Laurentiz Caiado [UNESP] 15 March 2006 (has links) (PDF)
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castro_elc_dr_jabo.pdf: 458441 bytes, checksum: ea8d6d3919ec4a9e692914323b80803d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Três grupos de 8 touros, sendo cada grupo formado por 4 animais da raça Simental (Bos taurus taurus) e 4 da raça Nelore (Bos taurus indicus), perfazendo um total de 24 touros com idade aproximada de 30 meses foram submetidos a dietas isoenergéticas com diferentes níveis de proteína degradável no rúmen e água ad libitum. As rações foram constituídas basicamente de feno de Tifton 85, farelo de soja, milho e uréia (Nitrogênio Não Protéico) e formuladas individualmente para cada touro de acordo com a análise bromatológica dos ingredientes, peso e ingestão dos animais. Na dieta do grupo controle (C) foram seguidas as normas do NRC (1996) para nutrição de touros em reprodução. Na dieta do grupo gradual (G) foram acrescidas 30% e, após quatro semanas, 75% de proteína degradável em relação à dieta controle, através do aumento na quantidade fornecida de uréia (NNP). Na dieta do grupo Choque o nível de proteína degradável foi 110% superior à ração do grupo controle durante todo o período experimental. Os touros permaneceram em baias individuais e após o período de adaptação de 21 dias foram submetidos semanalmente a colheitas de sêmen. O sêmen dos animais foram obtidos por eletroejaculação e avaliados quanto aos exames físicos do sêmen (turbilhonamento, motilidade, vigor e concentração) e morfologia espermática durante o período experimental de 15 semanas. Foram realizadas colheitas semanais de sangue 2 horas após a alimentação dos animais com a finalidade de mensurar os níveis plasmáticos de amônia e uréia durante seu pico de produção. Os ejaculados dos touros dos grupos tratados (Cq e G) apresentaram menor turbilhonamento, motilidade, vigor e concentração em relação ao grupo controle (C) a partir da décima terceira semana de experimento (P<0,01). / Three experimental groups, each containing eight bulls, were given isoenergetic diets with different levels of ruminal-degradable protein and ad libitum water. Each group was constituted by four Fleckvieh (Bos taurus taurus) and four Nellore (Bos taurus indicus) bulls, in a total of 24 animals with mean age of 30 months. Diets were composed basically of Tifton 85 hay, soy bran, corn and urea (non-proteic nitrogen; NPN) and formulated for each animal individually, according to ingredients' bromatologic analysis, animal's weight and uptake capacity. For the Control-group (C-group) diet, NRC (1996) nutrition recommendations for bulls on reproduction were followed. In the Gradual-group (G-group) diet, 30% more ruminal-degradable protein (compared to the C-group) was added, and after four weeks, the level increased to 75% through the addition of urea (NPN). For the Choque-group (Cq-group), degradable protein level was 110% higher than in Cgroup during all experimental period. Bulls were maintained in individual boxes and after an adaptation period of 21 days, semen samples were collected. Semen was obtained through electroejaculation and analysed for physical (whirl movement, motility, vigour and concentration) and morphological characteristics during the period of 15 weeks. Blood sampling was performed weekly two hours after feeding in order to measure ammonia and ureal levels during its peak production. Treatment groups (Cq-group and G-group) presented lower whirl movement, motility, vigor and concentration than the C-group after the 13th week (P<0,01). Spermatic morphology showed increased levels of greater spermatic defects for taurines (P<0,05) during all experimental period, but no significant differences were observed among treatments for these characteristics. Significant differences in plasmatic urea (P<0,01) occurred.
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Perfil lipídico do sêmen de touros Nelore (Bos taurus indicus) de alta e baixa resistência espermática à criopreservação / Lipid profile the bull’s semen Nelore (Bos taurus indicus) high and low sperm cryopreservation resistanceZorzetto, Mariana Furtado [UNESP] 01 July 2016 (has links)
Submitted by MARIANA FURTADO ZORZETTO (mary-zorze@hotmail.com) on 2017-05-30T20:52:06Z
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Previous issue date: 2016-07-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A composição dos lipídeos da membrana espermática e do plasma seminal estão entre os fatores que podem influenciar a capacidade fecundante do sêmen. Desta maneira, este estudo objetivou analisar as diferenças do perfil lipídico do ejaculado de bovinos da raça Nelore, resistentes e sensíveis à criopreservação. Foram utilizados 15 touros da raça Nelore para colheitas de sêmen utilizando eletroejaculador. Os ejaculados foram diluídos com meio convencional na concentração de 25x106 espermatozoides/palheta. Os animais foram divididos em dois grupos conforme a resistência pós-criopreservação, grupo A (Bad freezer, touros sensíveis à criopreservação) e grupo B (Good freezer, touros resistentes à criopreservação). O sêmen fresco foi analisado quanto morfologia realizada por microscopia de interferência diferencial (DIC), cinética espermática e integridade da membrana. Na pós-descongelação as amostras foram avaliadas quanto a cinética espermática, integridade das membranas plasmáticas e acrossomal, caspase ativa, peroxidação lipídica. A análise do perfil de lipídios foi realizada por espectrometria de massa MALDI-MS. Foi possível observar diferença no perfil lipídico dos espermatozoides e do plasma seminal entre os grupos, com maior abundância relativa dos íons m/z 704,59; m/z 804,59 e m/z 943,77 no grupo A nos espermatozoides. No plasma seminal houve maior abundância relativa de 34 íons lipídicos nos touros do grupo B. Assim sendo, conclui-se que existe diferença no perfil de lipídios dos espermatozoides e no plasma seminal de touros sensíveis ou resistentes à criopreservação. / Lipid compositions of the sperm membrane are among the factors that can influence the semen fertilizing capacity. Likewise, the lipid composition of seminal plasma can interfere in sperm quality. In this sense, this study aimed to analyze differences between lipid profile of the ejaculate and sperm parameters from bulls (Nelore breed) wich are resistant and susceptible to cryopreservation. In the study 15 Nelore bulls were used for semen collection by electroejaculation. The samples were diluted with yolk egg-based extender (Botu-Bov®). The animals were divided into two groups according to semen quality after cryopreservation: group A (Bad freezer, bulls sensitive to cryopreservation) and group B (Good freezer, bulls resistant to cryopreservation). Fresh semen was analyzed for sperm morphology by differential interference contrast microscopy (DIC), kinetic parameters by CASA and by plasma membrane integrity by epifluorescence microscopy. In post-freezing the samples were evaluated for kinetic parameters by CASA, sperm viability by flow cytometry (plasma and acrosomal membrane integrity, lipid peroxidation and active caspase) and plasma mebrane integrity by epifluorescence microscopy. Analysis of lipid profile were carried out by mass spectrometry MALDIMS of the sperm membrane lipids (Experiment 1) and from seminal plasma (Experiment 2). In Experiment 1 was observed difference in sperm lipid profile between the groups. The group A showed highest relative abundance of ions m/z 704.59; m/z 804.59 e m/z 943.77 on spermatozoa. In seminal plasma, here was a greater relative abundance of 34 lipid ions in bulls than group B. Therefore, in conclusion there are differences in the sperm lipid profile and seminal plasma lipid profile between sensitive or resistant bulls to semen cryopreservation.
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Parâmetros reprodutivos de machos da raça Nelore de baixa e alta eficiência alimentar suplementados com ácidos graxos protegidos em pastagem / Reproductive parameters of Nelore males of low and high feed efficiency supplements with protected fatty acids in pastureRossi, Guilherme Fazan [UNESP] 26 May 2017 (has links)
Submitted by GUILHERME FAZAN ROSSI null (guilhermemedvet@yahoo.com.br) on 2017-06-22T21:16:10Z
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Previous issue date: 2017-05-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As dietas enriquecidas com fontes de ácidos graxos poliinsaturados (AGPs) para touros jovens no período da puberdade a maturidade sexual podem exercer efeito positivo no desempenho reprodutivo. Além disso, selecionar animais jovens de melhor eficiência alimentar (baixo consumo alimentar residual - CAR) é muito importante para os programas de melhoramento genético. Dentro desse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar os parametros reprodutivos de machos jovens da raça Nelore de baixa e alta eficiência alimentar suplementados com ácidos graxos (AGs) protegidos em regime de pastagem. Foram utilizados 48 machos jovens com média de 14,3±0,13 meses de idade e peso de 389,5±5,43 kg. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado em arranjo fatorial 2 x 2 (CAR x suplementação) sendo, 24 animais baixo ou negativo CAR com ou sem suplementação com AGs e 24 alto ou positivo CAR com ou sem suplementação com AGs. As dietas experimentais foram isoproteicas. O período de suplementação foi de dezembro à outubro. Os animais foram mantidos em pastagem de capim-marandu, em lotação contínua e taxa de lotação fixa. As mensurações de características de crescimento, de consumo alimentar, concentrações plasmáticas de metabólitos e hormônios, avaliação andrológica e ultrassonografia testicular foram realizadas a cada 28 dias, dos 14 aos 24 meses de idade. A criopreservação espermática foi realizada na última colheita, momento em que os animais apresentavam 24 meses de idade. Após descongelação foram realizados avaliações computadorizadas da cinética espermática (CASA), teste de termorresistência rápido (TTR), integridade da membrana plasmática e acrossomal e produção in vitro de embriões (PIVE). Os dados foram analisados pelo procedimento PROC MIXED do SAS. Os touros de baixo CAR apresentaram peso corporal inicial maior (398,0±5,4) do que os de alto CAR (380,9±5,4) e mantiveram a diferença durante todo o experimento (P<0,05). Os animais que receberam suplementação com AGs protegido apresentaram maiores concentrações plasmática de colesterol, lipoproteína de alta densidade (HDL) e testosterona (161,5±3,2 ng/dL, 67,2±1,6 ng/dL e 12,2±0,6 ng/mL, respectivamente) em relação aos tratamentos sem AGs (124,5±3,2 ng/dL, 57,9±1,6 ng/dL e 10,5±0,6 ng/mL, respectivamente) (P<0,05). Não foram observadas diferenças entre os tratamentos para consumo alimentar, ecotextura testicular, análise do sêmen fresco e PIVE (P>0,05). No entanto, para a avaliação do sêmen pós-descongelação, as velocidade espermáticas (VAP - de trajeto, VSL - em linha reta e VCL - curvilinear; µm/s) analisadas pelo CASA foram maiores para os touros suplementados com AGs protegido (82,6±1,6, 68,6±1,2 e 132,0±3,2 para VAP, VSL e VCL, respectivamente) em relação aos que receberem suplementação sem AGs (76,2±1,6, 64,2±1,2 e 122,3±3,2; VAP, VSL e VCL, respectivamente) (P<0,05). Apesar dessas diferenças de velocidade espermática, coleterol e testosterona sanguínea são necessários avaliações em conjunto com outros testes reprodutivos para determinar a real influência dos AGs na qualidade espermática. / Diets enriched with sources of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) for young bulls from puberty to sexual maturity may have a positive effect on reproductive performance. In addition, selecting young animals with better feed intake (low residual feed intake - RFI) is very important for breeding programs. Thus, the aim of this study was to evaluate the reproductive parameters of young Nelore bulls of low and high feed intake supplemented with PUFA in the pasture. The total of 48 young males were used with a 14.3±0.13 months of age and a weight of 389.5±5.43 kg. The experimental design were completely randomized in a factorial 2 x 2 (RFI x supplementation) being 24 animals high RFI with or without supplementation with PUFA and 24 animals low RFI with or without supplementation with PUFA. The diets were isoproteic. The supplementation period was from December to October and the animals were kept in Brachiaria brizantha cv. Marandu pasture in continuous stocking during the experimental period. The measurements of growth characteristics, feed intake, plasma concentrations of metabolites and hormones, andrological evaluation and testicular ultrasonography were performed every 28 days, from 14 to 24 months of age. Sperm cryopreservation was performed it the last collections, at which time the animals were 24 months old. After thawing, computer aided semen analysis (CASA), rapid thermoresistance sperm tests (TTR), integrity of the plasma membrane and acrosomal and in vitro embryo production (IVEP) were performed. The data were analyzed by the SAS procedure PROC MIXED. The low CAR bulls have had higher initial body weight (398.0±5.4) than high CAR (380.9±5.4) and maintained the difference throughout the experiment (P<0.05). The animals that received supplementation with PUFA had higher plasma concentrations of cholesterol, high density lipoprotein (HDL) and testosterone (161.5±3.2 ng/dL, 67.2±1.6 ng/dL e 12.2±0.6 ng/mL, respectively) in relation to treatments without PUFA (124.5±3.2 ng/dL, 57.9±1.6 ng/dL e 10.5±0.6 ng/mL, respectively) (P<0.05). No differences were observed between treatments for feed intake, testicular ecotexture, analysis of fresh semen and IVEP (P>0.05). However, sperm evaluation after thawing, the spermatic velocities (VAP - average path velocity, VSL - straight linear velocity and VCL - curvilinear velocity; μ / s) analyzed y CASA were hi her for bulls supplemented with PUFA (82.6±1.6, 68.6±1.2 e 132.0±3.2 para VAP, VSL e VCL, respectively) in relation for bulls without PUFA (76.2±1.6, 64.2±1.2 e 122.3±3.2; VAP, VSL e VCL, respectively) (P<0,05). Despite these differences in sperm velocity, coleterol and testosterone evaluations are needed in conjunction with other reproductive tests to determine the actual influence of PUFA on sperm quality. / FAPESP: 2013/13696-3
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Caracterização bidimensional de proteínas do plasma seminal como subsídio para incremento da eficácia da inseminação artificial com sêmen congelado em ovinos / Two-dimensional characterization of ovine seminal plasma proteins as subsidy to increase the effectiveness of the artificial insemination with frozen semenMoura, Priscilla Pereira 09 March 2009 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-20T14:18:28Z
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Previous issue date: 2009-03-09 / O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar o perfil protéico do plasma seminal ovino por meio de eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida (2D-PAGE) e verificar se alguma dessas proteínas está relacionada com a congelabilidade do sêmen, podendo ser utilizadas como marcadores para essa característica. Foram utilizados os ejaculados de cinco reprodutores, nos quais foram realizadas avaliações espermáticas e dos quais os plasmas seminais obtidos por centrifugação foram submetidos 2D-PAGE em gel a 12% de poliacrilamida. Foram identificados 92 spots, considerando todos os animais analisados. Destes, 41 (44,57%) foram identificados em todos os animais e 51 (55,43%) expressaram-se diferencialmente entre eles. Dentre as proteínas que se expressaram diferentemente, as proteínas 03 (7,9 kDa), 23 (13,6 kDa) e 31 (21,4 kDa) se destacaram, por apresentarem maior expressão e relações com as características espermáticas dos animais. A proteína 31 foi encontrada somente no animal 05 e apresentou alta expressão no mesmo. Esse animal apresentou os menores valores de integridade de membrana e espermatozóides vivos íntegros; e alto valor de espermatozóides mortos reagidos no sêmen descongelado. Já as proteínas 03 e 23 foram encontradas somente no animal 21 e se destacaram devido à alta expressão nesse animal, que apresentou a maior média de integridade de membrana no sêmen descongelado. A avaliação dos dados obtidos evidenciou variações significativas nos resultados das análises do sêmen dos animais e uma variabilidade no perfil protéico no plasma seminal dos carneiros, sugerindo as proteínas 03, 23 e 31 como possíveis marcadores da capacidade criopreservadora do sêmen. A proteína 31 como possível indicador da menor congelabilidade e as proteínas 03 e 23 como marcadores da maior congelabilidade do sêmen. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to identify and characterize the protein profile of ram seminal plasma using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and to verify if any of these proteins was associated with semen freezability, which could be used as markers for predicting semen freezability. Semen from five rams were used. The sperm analysis was held and the seminal plasma obtained by centrifugation was submitted to 2DPAGE using 12% acrylamide gel. Ninety two spots were identified considering the analyzed animals. Forty one (44.57%) were found in all animals and 51 (55.43%) were differentially expressed among them. From that proteins differently expressed, the proteins 03 (7.9 kDa), 23 (13.6 kDa) and 31 (21.4 kDa) stood out because they showed higher expression and because of relations with the sperm characteristics of the animals. The protein 31 was found just in animal 05 and showed high expression in it. This animal had the worst values for live spermatozoa with intact acrosome and plasmatic membrane integrity; and high value for dead spermatozoa with reacted acrosome in thawed semen. Proteins 03 and 23 were found just in animal 21 and showed high expression in this animal, which presented the best values for plasmatic membrane integrity in thawed semen. The results showed a significant variation among sperm analysis of the animals and variability in the protein profile of the seminal plasma of the rams, suggesting that proteins 03, 23 and 31 are possible markers of semen freezability. Protein 31 predicting low semen freezability, and proteins 03 and 23 predicting high semen freezability.
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Avaliação da presença de Papilomavírus bovino em sêmen de touros (Bos taurus)SILVA, Maria Angélica Ramos da 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os papilomavírus (PV) são vírus de DNA dupla fita que infectam o epitélio escamoso da
pele e mucosa. O papilomavírus bovino (BPV) apresenta 10 diferentes tipos (BPV-1 a 10) e
causam doenças em rebanhos de corte ou leiteiro, gerando grandes prejuízos econômicos aos
criadores. A presença de BPV já foi detectada em tecidos reprodutivos e fluídos corporais, tais
como sangue periférico, plasma sanguíneo, oócitos, ovário, útero, células do cúmulus, fluídos
uterinos, sêmen e espermatozóide, placenta e líquido amniótico. O objetivo deste trabalho foi
avaliar a presença do BPV, através da técnica PCR, em sêmen de touros (Bos taurus) fresco e
comercializado no Estado de Pernambuco. Para isso, foram utilizados primers de detecção geral
para PV e específicos para os tipos de BPV-1 a 6 em amostras de sêmen fresco e sêmen
comercial de touros da raça Gir Leiteiro. Foi detectada a presença de DNA de BPV em 100% das
amostras de sêmen analisadas. O tipo viral mais freqüente foi o BPV-2 em 100% das amostras
analisadas, seguido por BPV-3 em 48% das amostras e BPV- 4 presente em 6,9% das amostras
avaliadas. Houve detecção simultânea de mais um tipo de BPV em 51% das amostars de sêmen
analisadas. Estes resultados demonstram a importância do estudo e de um melhor detalhamento
da relação entre BPV e sêmen. Dada a grande utilização, a inseminação artificial com sêmen
contaminado com BPV pode ter importância similar à via sexual para a dispersão viral entre o
rebanho
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Características de condensação da cromatina e morfometria espermática de touros da raça Gir /Oliveira, Patricia Ramos Heggendorn. January 2019 (has links)
Orientador: Marion Burkhardt De Koivisto / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade espermática, compactação/integridade e deficiência de protamina da cromatina de espermatozoides, somado às características reprodutivas de acordo com a idade. Procurou-se avaliar a interferência da idade nas variáveis analisadas e a evolução das mesmas ao longo de quatro coletas mensais. Foram selecionados 43 touros de elite Bos taurus indicus da raça Gir com idades iniciais entre 18 e 42 meses e divididos em três grupos: jovens (18,5-24,7 meses de idade, n=15), jovens adultos (25,2-28,6 meses de idade, n=16) e adultos (29,1-42,0 meses de idade, n=12). Nessa primeira avaliação as características reprodutivas foram incluídas (Fertilidade, Classificação Andrológica por Pontos e Índice de Classificação de Touros). Em seguida 38 dos 43 touros foram divididos em 3 grupos (mesmas faixas etárias): jovens (n=12), jovens adultos (n=13) e adultos (n=13). Após descongelamento, as amostras foram submetidas às técnicas de coloração do azul de toluidina, para avaliar concomitantemente condensação/integridade da cromatina e morfometria da cabeça espermática, e coloração pela cromomicina A3 (CMA3), para investigar deficiência de protamina espermática. Animais do grupo jovem apresentaram espermatozoides com maior heterogeneidade da compactação da cromatina (CV) (2,52±0,31%) que animais do grupo jovem adulto (1,75±0,10 %). Além disso, o grupo jovem apresentou alteração de cromatina em todas as coletas (Dif > 2 e/ou CV > 5%). O grupo jovem adulto ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate sperm quality, condensation/integrity and protamine deficiency of sperm's chromatin packaging, as well as the behavior of reproductive characteristics according to age. For that, two approaches were done: 1st) evaluate how age would interfere in the analyzed variables, 2nd) evaluate how the variables would evolve along four monthly collections. On the 1st approach, 43 elite Gir bulls (Bos taurus indicus) with initial ages between 18 and 42 months were divided into three groups: young (18.5-24.7 months, n=15), young adult (25.2-28.6 months, n=16) and adult (29.1-42.0 months, n=12). Results of reproductive characteristics evaluation (Fertility, Andrological Classification by Points and Bull Classification Index) were included in this first approach. For the 2nd approach, 38 of the 43 bulls were divided into three groups (using the same criteria described before): young (n=12), young adult (n=13) and adult (n=13). After thawing, semen samples were evaluated trough the toluidine blue method, for chromatin condensation/integrity and sperm head morphometry assessment and chromomicin A3 (CMA3) to analyze protamine deficiency. Animals from the young group presented spermatozoa with higher heterogeneity of chromatin compaction (CV) (2.52±0.31 %) than animals from the young adult group (1.75±0.10 %). Young bulls also presented chromatin alteration in all the four collections ((Dif > 2 and/or CV > 5%). The young adult group showed higher fertility i... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Dosagem dos níveis de anti-oxidantes enzimáticos e resistência celular ao estresse oxidativo, do sêmen de perdizes (Rhynchotus rufescens) criadas em cativeiro e suplementadas com selênio / Enzymatic antioxidant activity and resistance against the oxidative stress in semen of captive partridges (Rhynchotus rufescens) supplemented with seleniumGóes, Paola Almeida de Araújo 28 April 2008 (has links)
Considerando a importância comercial da perdiz (Rhynchotus rufescens), implantou-se algumas biotecnologias reprodutivas. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: controle (sem selênio orgânico) e tratamento (com 0,2 a 0,8mg de selênio em 1000kgs de ração ), provenientes da FCAV-UNESP/Jaboticabal (2007-2008). Coletou-se semên por excitação manual que foram aliquotados em pools com 150µL. Após a avaliação do volume, motilidade, vigor, números de espermatozóides, concentração e morfologia espermática, diluiu-se 20µl de sêmen em 300µl de solução fisiológica para testar a Integridade das membranas acrossomal e plasmática e avaliação da atividade mitocondrial. Uma outra alíquota de 20µl foi utilizada para testar a resistência dos espermatozóides ao estresse oxidativo, induzido (vitamina C + sulfato ferroso), por meio da dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). A amostra restante foi congelada diretamente em nitrogênio líquido para a realização do teste da integridade do DNA espermático e para medir a atividade das enzimas antioxidantes Catalase e Glutationa Peroxidase. Contou-se 200 células, para avaliação da integridade acrossomal e de membrana, atividade mitocondrial e ensaio cometa e classificou-as: 1) Acrossomo Íntegro: cor lilás e Não-Íntegro: róseo; 2)Células Vivas (não coradas) e Mortas (coradas), 3) Classes de I a IV, sendo Classe I (todas as mitocôndrias íntegras) com a peça intermediária totalmente corada e Classe IV (todas as mitocôndrias comprometidas) com a peça intermediária totalmente descorada e 4) Cometa I a IV, sendo Cometa I (DNA íntegro): células com halo ao seu redor e núcleo corado, porém sem cauda de cometa evidente e Cometa IV (DNA altamente fragmentado): célula com núcleo completamente descorado e apenas a cauda do cometa, respevtivamente. Os dados foram analisados pelo SAS, System for Windows. Nenhuma diferença foi encontrada para volume, motilidade, vigor, número de espermatozóides, concentração, integridade acrossomal, integridade da membrana plasmática, Classes I e III da atividade mitocondrial, Cometa I,II e IV, TBARS e atividade da Glutationa. Foram encontradas diferenças nas Classes II (Se=33,39±2,93 e Controle=44,39±2,59, p=0.0125 e IV (Se=3,44±0,09 e Controle=1,50±0,38, p=0.0401) e Cometa III (Se=16,00 ± 0,82 e Controle=34,75 ± 1,44, p=<.0001), respectivamente. A diferença encontrada no DAB II pode ser devido aos danos causados na arquitetura da peça intermediária pela deficiência de selênio, o que compromete a mobilidade e a capacidade de fecundação do espermatozóide. Para o DAB IV, não era esperado esse resultado, que pode ser devido aos pequenos valores encontrados para essa variável (Se=3,44% e Controle=1,50%) em relação ao total das classes e que poderia não ser significante se levássemos em consideração as classes juntas. Em relação a porcentagem mais baixa de espermatozóides do grupo suplementado com selênio para a classe III do Ensaio Cometa, pode sugerir um efeito de proteção desta substância, possivelmente devido a um índice mais elevado da Glutationa Peroxidase. / Considering the commercial value of the partridges (Rhynchotus rufescens), the employment of reproductive biotechnologies has been attempted. Thirty animals were randomly assigned into two groups: control group (no selenium) and treatment group (supplemented with 0,2 a 0,8mg selenium/ 1000kgs ration). Animals were allocated at the FCAV - UNESP/Jaboticabal (2007-2008). Semen collections were performed by digital manipulation and divided in pools of at least 150µL. After the immediate evaluation of volume, motility, vigour, concentration and morphology, an aliquot of 20µL was diluted in 300µL of physiologic solution in order to test acrosome and membrane integrities and mitochondrial activity. Another aliquot of 20 µL was used to test the resistance of sperm against the induced oxidative stress (Vitamin C + ferrous sulphate), followed by the measurement of TBARS. The remaining semen sample was frozen directly in liquid nitrogen in orther to perform the comet assay and to measure the activity of the antioxidant enzymes catalase and glutathione peroxidase. Cells were evaluated respectively for acrosome and membrane integrities, mitochondrial activity and comet assay as follows: 1) Intact acrosome: lilac acrosome; Non-intact acrosome: pink acrosome; 2) Live cells: non stained; Dead: stained; 3) Classes I to IV, being Class I (full mitochondrial potential): midpiece totally stained and class IV (no mitochondrial potential): midpiece not stained; 4) Classes I to IV, being Class I (intact DNA): nucleus with intense fluorescence with no comet tail; Class IV (highly fragmented DNA): no nucleus, only a comet tail. Data was statistically anlysed using the SAS System for Windows. No differences were found on volume, motility, vigour, number of spermatozoa, concentration, acrosomal and membrane integrity, Classes I and III of mitochondrial activity, Comets I, II and IV, TBARS and Glutathione activity. Differences were found on as DAB Classes II (Se=33.39±2.93 and control=44.39±2.59, p=0.0125) and IV (Se=3.44±0.09 and control=1.50±0.38, p=0.0401) and comet class III (Se=16.00 ± 0.82 and control=34.75 ± 1.44, p=<.0001), respectively. The difference found on DAB II may be due to the damages caused by the selenium deficiency to the architecture of the midpiece, which compromises sperm mobility and fertilization capacity. On the other hand, the unexpected difference found on DAB IV may be due to the small values found for this variable in all animals (Se=3.44% and control=1.50%), which would be not significant taking into account all classes. The decreased percentage of sperm showing DNA fragmentation Class II found on the selenium supplemented group may suggest a protective effect of this substance on sperm DNA, possibly due to a higher GPx content.
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Dosagem dos níveis de anti-oxidantes enzimáticos e resistência celular ao estresse oxidativo, do sêmen de perdizes (Rhynchotus rufescens) criadas em cativeiro e suplementadas com selênio / Enzymatic antioxidant activity and resistance against the oxidative stress in semen of captive partridges (Rhynchotus rufescens) supplemented with seleniumPaola Almeida de Araújo Góes 28 April 2008 (has links)
Considerando a importância comercial da perdiz (Rhynchotus rufescens), implantou-se algumas biotecnologias reprodutivas. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: controle (sem selênio orgânico) e tratamento (com 0,2 a 0,8mg de selênio em 1000kgs de ração ), provenientes da FCAV-UNESP/Jaboticabal (2007-2008). Coletou-se semên por excitação manual que foram aliquotados em pools com 150µL. Após a avaliação do volume, motilidade, vigor, números de espermatozóides, concentração e morfologia espermática, diluiu-se 20µl de sêmen em 300µl de solução fisiológica para testar a Integridade das membranas acrossomal e plasmática e avaliação da atividade mitocondrial. Uma outra alíquota de 20µl foi utilizada para testar a resistência dos espermatozóides ao estresse oxidativo, induzido (vitamina C + sulfato ferroso), por meio da dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). A amostra restante foi congelada diretamente em nitrogênio líquido para a realização do teste da integridade do DNA espermático e para medir a atividade das enzimas antioxidantes Catalase e Glutationa Peroxidase. Contou-se 200 células, para avaliação da integridade acrossomal e de membrana, atividade mitocondrial e ensaio cometa e classificou-as: 1) Acrossomo Íntegro: cor lilás e Não-Íntegro: róseo; 2)Células Vivas (não coradas) e Mortas (coradas), 3) Classes de I a IV, sendo Classe I (todas as mitocôndrias íntegras) com a peça intermediária totalmente corada e Classe IV (todas as mitocôndrias comprometidas) com a peça intermediária totalmente descorada e 4) Cometa I a IV, sendo Cometa I (DNA íntegro): células com halo ao seu redor e núcleo corado, porém sem cauda de cometa evidente e Cometa IV (DNA altamente fragmentado): célula com núcleo completamente descorado e apenas a cauda do cometa, respevtivamente. Os dados foram analisados pelo SAS, System for Windows. Nenhuma diferença foi encontrada para volume, motilidade, vigor, número de espermatozóides, concentração, integridade acrossomal, integridade da membrana plasmática, Classes I e III da atividade mitocondrial, Cometa I,II e IV, TBARS e atividade da Glutationa. Foram encontradas diferenças nas Classes II (Se=33,39±2,93 e Controle=44,39±2,59, p=0.0125 e IV (Se=3,44±0,09 e Controle=1,50±0,38, p=0.0401) e Cometa III (Se=16,00 ± 0,82 e Controle=34,75 ± 1,44, p=<.0001), respectivamente. A diferença encontrada no DAB II pode ser devido aos danos causados na arquitetura da peça intermediária pela deficiência de selênio, o que compromete a mobilidade e a capacidade de fecundação do espermatozóide. Para o DAB IV, não era esperado esse resultado, que pode ser devido aos pequenos valores encontrados para essa variável (Se=3,44% e Controle=1,50%) em relação ao total das classes e que poderia não ser significante se levássemos em consideração as classes juntas. Em relação a porcentagem mais baixa de espermatozóides do grupo suplementado com selênio para a classe III do Ensaio Cometa, pode sugerir um efeito de proteção desta substância, possivelmente devido a um índice mais elevado da Glutationa Peroxidase. / Considering the commercial value of the partridges (Rhynchotus rufescens), the employment of reproductive biotechnologies has been attempted. Thirty animals were randomly assigned into two groups: control group (no selenium) and treatment group (supplemented with 0,2 a 0,8mg selenium/ 1000kgs ration). Animals were allocated at the FCAV - UNESP/Jaboticabal (2007-2008). Semen collections were performed by digital manipulation and divided in pools of at least 150µL. After the immediate evaluation of volume, motility, vigour, concentration and morphology, an aliquot of 20µL was diluted in 300µL of physiologic solution in order to test acrosome and membrane integrities and mitochondrial activity. Another aliquot of 20 µL was used to test the resistance of sperm against the induced oxidative stress (Vitamin C + ferrous sulphate), followed by the measurement of TBARS. The remaining semen sample was frozen directly in liquid nitrogen in orther to perform the comet assay and to measure the activity of the antioxidant enzymes catalase and glutathione peroxidase. Cells were evaluated respectively for acrosome and membrane integrities, mitochondrial activity and comet assay as follows: 1) Intact acrosome: lilac acrosome; Non-intact acrosome: pink acrosome; 2) Live cells: non stained; Dead: stained; 3) Classes I to IV, being Class I (full mitochondrial potential): midpiece totally stained and class IV (no mitochondrial potential): midpiece not stained; 4) Classes I to IV, being Class I (intact DNA): nucleus with intense fluorescence with no comet tail; Class IV (highly fragmented DNA): no nucleus, only a comet tail. Data was statistically anlysed using the SAS System for Windows. No differences were found on volume, motility, vigour, number of spermatozoa, concentration, acrosomal and membrane integrity, Classes I and III of mitochondrial activity, Comets I, II and IV, TBARS and Glutathione activity. Differences were found on as DAB Classes II (Se=33.39±2.93 and control=44.39±2.59, p=0.0125) and IV (Se=3.44±0.09 and control=1.50±0.38, p=0.0401) and comet class III (Se=16.00 ± 0.82 and control=34.75 ± 1.44, p=<.0001), respectively. The difference found on DAB II may be due to the damages caused by the selenium deficiency to the architecture of the midpiece, which compromises sperm mobility and fertilization capacity. On the other hand, the unexpected difference found on DAB IV may be due to the small values found for this variable in all animals (Se=3.44% and control=1.50%), which would be not significant taking into account all classes. The decreased percentage of sperm showing DNA fragmentation Class II found on the selenium supplemented group may suggest a protective effect of this substance on sperm DNA, possibly due to a higher GPx content.
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Arginina na dieta de reprodutores de Rhamdia quelen /Damasceno, Danielle Zanerato. January 2018 (has links)
Orientador: Elizabeth Romagosa / Coorientador: Fábio Bittencourt / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Banca: Giovani Sampaio Gonçalves / Banca: Eduardo Antonio Sanches / Banca: Taís da Silva Lopes / Resumo: Informações sobre a nutrição de reprodutores são fundamentais para que haja uma boa performance reprodutiva, e maior qualidade na produção de gametas e prole, entretanto esse tipo de estudo ainda não é realiado em grande quantidade. Com base nisso este trabalho teve como objetivo investigar o efeito da arginina na nutrição de reprodutores de Rhamdia quelen. Para isso 800 juvenis da espécie foram alimentados durante cinco meses com dietas que continham diferentes níveis de arginina (1,37; 1,67; 1,97; 2,27 e 2,57%). Após este período reprodutores de cada tratamento foram selecionados e induzidos hormonalmente (2.5 mg.kg-1 Extrato Hipofisário de Carpa para machos e 5.5 mg.kg-1 para fêmea), após 240 horas-grau foi realizada a coleta de sêmen e ovócitos. No sêmen foi avaliado: volume, pH, concentração, motilidade e velocidade espermática, normalidade, e foi aferido o diâmetro do ovócitos. As gônadas, fígado e gordura visceral de ambos os sexos foram removidas e pesadas para cálculo dos índices somáticos, e foi realizada a fertilização, incubação e após a abertura da boca as larvas foram transferidas para caixas de plástico onde foi realizada a larvicultura durante 10 dias. Foi realizada quantificação de: vitelogenina no plasma sanguíneo de fêmeas e de óxido nítrico nas gônadas de machos e fêmeas. Verificamos que a suplementação com 2,27% de arginina influenciou a produção seminal, tanto em volume quanto em concentração, ao mesmo tempo que promoveu a produção de ovócitos com maior ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Information about broodstock nutrition are essential for a good reproductive performance, and higher quality in gamete and offspring production, however this type of study is still not performed in large quantity. With the objective of assessing the effect of arginine on the reproduction of Rhamdia quelen females, 800 fish were fed for five months with diets containing 1.37, 1.67, 1.97, 2.27 and 2.57% arginine for seven months. After this period the fish of each treatment were selected and received hormonal induction (2.5 mg.kg-1 carp pituitary extract for males and 5.5 mg.kg-1 for females), after 240 termal units accumulated the semen and oocytes were collected. The semen were collected and analysed: volum, pH, concentration, velocity, motility and normality, and the diameter of oocytes. The gonad, liver, visceral fat of both sexes were collected to somatic analysis. The fertilization, incubation and after the larvae open the mouth were transfered to plastic box were the larviculture was carried for 10 days. Were analysed the production of vitellogenin in bood plasm of female and nitric oxide on gonad of males and females. We observed that the addition of 2.27% arginine influenced the seminal production, both in volum and concentration, at the same time that it promoted the oocyte production ith bigger diameter, that consequently generated more resistant larvae. The addition of 2.27% arginine to the diet of R. quelen females favored reproductive parameters, which suggests th... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Termografia e ultrassonografia Doppler do plexo pampiniforme e termografia do escroto de touros : correlação com a qualidade do sêmen /Portugal, Elói dos Santos. January 2014 (has links)
Orientador: Luiz Carlos Marques / Banca: Lindsay Unno Gimenez / Banca: Cezinande Meira / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Lúcia Helena Rodrigues / Resumo: O Brasil possui o maior rebanho bovino comercial do mundo e chegou a 212,8 milhões de cabeças em 2011. Foram comercializadas 12,3 milhões de doses de sêmen bovino em 2012. O efetivo de fêmeas bovinas em idade reprodutiva é 61,4 milhões e a utilização de duas doses de sêmen por vaca estima-se que 10% do rebanho nacional está sendo inseminado. A fertilidade é uma importante característica nos sistemas produtivos e o macho de grande importância. Utilizando a termografia infravermelha (TIV) e ultrassonografia Doppler a termorregulação e o fluxo sanguíneo foram avaliados em touros. Dois grupos de seis touros foram avaliados por um ano e os dados obtidos da termografia - temperatura global do plexo (TGP), temperatura global do escroto (TGE), temperatura do plexo esquerdo (TPE), temperatura do plexo direito (TPD), temperatura do escroto esquerdo (TEE), temperatura do escroto direito (TED) e da ultrassonografia Doppler - velocidade sistólica máxima (VSM), velocidade diastólica final (VDF), índice de pulsatilidade (IP), índice de resistência (IR) e a temperatura ambiental (TA) foram correlacionados com os espermogramas. Foram observadas correlações positivas e negativas entre as variáveis da TIV e US Doppler com as variáveis dos espermogramas e conclui-se que a TIV permite a observação de alterações precoces da temperatura do plexo e escroto; a US Doppler demonstrou correlações entre a VDF, IR e IP com qualidade do sêmen; de acordo com este estudo touros com qualidade de sêmen superior apresentaram menor impedância vascular das artérias testiculares / Abstract: Brazil has the largest commercial cattle herd in the world and reached 212,8 million head in 2011. 12,3 million doses of bovine semen were sold in 2012. Effective from cows of reproductive age is 61,4 million and the use of two doses of semen per cow is estimated that 10 % of the national herd is being inseminated. Fertility is an important feature in production systems and the bull has great importance. Using infrared thermography (IRT) and Doppler ultrasonography thermoregulation and blood flow were evaluated in bulls. Two groups of six bulls were evaluated for a year and the data of thermography - global temperature plexus (GTP), global temperature of the scrotum (GTE), temperature of the left plexus (TLP), temperature of the right plexus (TRP), temperature the left scrotum (TLE), temperature of the right scrotum (TRE) and Doppler ultrasonography - peak systolic velocity (PSV ), end diastolic velocity (EDV), pulsatility index (PI), resistance index (RI) and room temperature (RT) were correlated with semen analyzes. Positive and negative correlations were found between the variables of IRT and US Doppler variables of semen analyzes and concludes that IRT allows observation of early changes of the plexus and scrotal temperature; Doppler US demonstrated correlations between EDV, RI and IP with semen quality; according to this study bulls with superior quality of semen showed lower vascular impedance of the testicular arteries / Doutor
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