A incidência da nefropatia por contraste tem aumentado simultaneamente ao aumento da utilização do uso de métodos radiológicos com fins diagnósticos e de intervenção terapêutica. Infelizmente, parcela significante dos profissionais da área da saúde desconhece a sua existência e mesmo aqueles que a identificam, algumas vezes, desconhecem os fatores de risco associados ao seu desenvolvimento. A incidência da nefropatia por contraste na população geral é baixa, porém se levarmos em conta os pacientes com fatores de risco como diabetes e doença renal prévia, esta incidência aumenta exponencialmente. Várias estratégias tem sido utilizadas na tentativa de minimizar os efeitos da nefropatia por contraste sobre os indivíduos expostos ao seu uso. Entre elas, citamos o uso de drogas vasodilatadoras, de bloqueadores dos canais de cálcio, de antioxidantes, de solução fisiológica a 0,9% e a 0,45%, de solução de bicarbonato de sódio a 1,3%, do uso de contraste de baixa osmolalidade e mesmo de contrates iso-osmolares. As estratégias que tem sido descritas como mais eficazes são a hidratação com solução fisiológica (0,9% ou 0,45%), uso de contraste de baixa osmolalidade ou isoosmolar e a infusão de bicarbonato de sódio. A N-acetilcisteína, que é uma substância antioxidante, apresentou efeito positivo nos primeiros trabalhos publicados, mas trabalhos posteriores e meta-análises mostraram inconsistência neste efeito de prevenção. O objetivo deste trabalho é revisar a literatura pertinente sobre prevenção de nefropatia do contraste e estudar, de forma inicial, a eficácia da hidratação a base de bicarbonato de sódio a 1,3% comparada à hidratação a base de cloreto de sódio a 0.9% na prevenção da nefrotoxicidade do contraste em pacientes de alto risco para o seu desenvolvimento. Para tanto, foram randomizados um total de 27 pacientes, sendo 48% do grupo bicarbonato. Todos os pacientes eram portadores de diabetes mellitus e/ou doença renal crônica prévia e diagnosticados com algum tipo de câncer. Nenhum dos 27 pacientes desenvolveu nefropatia do contraste, caracterizada como aumento de 0,5 mg/dL na creatinina basal e/ou aumento de 25% no valor da creatinina. A revisão de literatura sugere fortemente que o uso de bicarbonato de sódio é eficaz na prevenção de nefropatia por contraste. Em relação ao estudo randomizado e controlado que foi efetuado, o pequeno número de indivíduos incluídos não permite a obtenção de conclusões definitivas. No entanto, nos pacientes estudados, o bicarbonato de sódio foi tão eficaz quanto à hidratação a base de solução fisiológica na prevenção da nefropatia por contraste. / The incidence of contrast nephropathy has increased simultaneously to the augment of the use of diagnostic and interventional imaging procedures. Unfortunately, a large number of physicians do not know its existence and even when so do, sometimes do not do not know the risk factors associated to its development. The incidence of contrast nephropathy in the general population is low, but, if we consider only the patients with risk factors such as diabetes and chronic kidney disease, this incidence increases largely. Several strategies have been used in order to prevent contrast nephropathy. Among them, we include the use of vasodilators, calcium channel blockers, antioxidants, saline (0.9 or 0.45%), bicarbonate, low or iso osmolar iodinate contrast. The strategies that have proved better efficacy are saline hydration (0.9 or 0.45%), use of low or iso osmolar contrast and bicarbonate. N-acetylcysteine (an antioxidant agent), despite of the positive results obtained in the first trials, did not demonstrate the same efficacy subsequently. The aim of the current study was to review the pertinent literature and to assess the efficacy of sodium bicarbonate compared to saline in order to prevent contrast nephropathy. There were randomized 27 patients, 48% allocated in the bicarbonate group. All the patients were diabetic and/or had chronic kidney disease, and were diagnosed with some kind of cancer. No one of 27 patients developed contrast nephropathy (increase of 0.5 mg/dL in the baseline creatinine and/or a relative increase of 25% in baseline creatinine). The literature review strongly suggested that sodium bicarbonate use is valuable in then prevention of contrast nephropathy. In reference to the randomized study the small number of included patients did not allow that conclusive conclusions were obtained. However, in the group studied sodium bicarbonate demonstrated the same efficacy than saline in the prevention of contrast nephropathy.

Este estudo in vitro avaliou a influência do tempo de aplicação do bicarbonato de sódio a 10% na qualidade da união de um sistema adesivo universal unido ao esmalte bovino clareado por meio de testes de resistência de união (microtração imediata e após 6 meses) e grau de conversão na interface adesiva (espectroscopia micro-Raman). Cento e dez blocos de esmalte bovino (4x4 mm) foram planificados e distribuídos aleatoriamente em 5 grupos: C: controle, sem clareamento; B: clareamento com peróxido de hidrogênio 35% (HP); BS3: clareamento com HP seguido de tratamento com a solução de bicarbonato de sódio 10% (BS) por 3 min; BS5: clareamento com HP seguido de tratamento com BS por 5 min; BS10: clareamento com HP seguido de tratamento com BS por 10 min. O HP foi aplicado duas vezes (20 minutos cada, com exceção do grupo C) e em seguida as restaurações adesivas foram realizadas. Após 24 horas, 20 espécimes de cada grupo foram seccionados em palitos (1x1 mm) e submetidos ao teste de resistência de união (imediato e após 6 meses) em máquina de ensaios universal com velocidade de 0,5 mm/min (n=10). Os dados foram analisados por ANOVA a dois critérios (p <0,05). As médias das análises imediata e após 6 meses foram: C: 26,77 / 25,32; B: 26,42 / 26,42; BS3: 23,95 / 22,98; BS5: 23,65 / 26,64; BS10: 23,42 / 29,30. Nenhum dos fatores testados apresentou significância: tratamento (p=0,349) e tempo (p=0,234), não havendo interação entre estes (p=0,198). Falhas adesivas foram predominantes nos dois períodos de avaliação. Para a análise do grau de conversão, após 24 horas da restauração, 2 espécimes de cada grupo foram seccionados em fatias de 1mm, sendo apenas 3 fatias selecionadas. Os seguintes parâmetros foram utilizados: excitação dos espécimes com laser de argônio operando a 538 nm, espectro obtido a uma resolução ~4cm-1, sob uma região de espectro entre 1580-1660cm-1, verificando a altura dos picos 1608cm-1 e 1637cm-1. Os dados foram analisados por ANOVA a um critério (p <0,05) e as médias do grau de conversão foram: C: 71,10%; B: 72,11%; BS3: 73,98%; BS5: 69,25%; BS10: 70,56%. O fator de estudo tratamento não apresentou significância estatística (p=0,808). A adesão no esmalte clareado parece não ter sido afetada negativamente quando restaurações adesivas foram feitas imediatamente após o clareamento, independente da aplicação ou não da substância antioxidante. Mais estudos que avaliem a adesão em esmalte clareado, principalmente no que diz respeito ao grau de conversão e aos diferentes tipos de sistemas adesivos universais se fazem necessários para fins comparativos e para que possamos indicar seguramente as restaurações imediatas (quando necessárias) na prática clínica. / The present in vitro study evaluated the influence of the application time of 10% sodium bicarbonate in the adhesion quality of a universal adhesive system bonded to bleached enamel through microtensile bond strength testing (immediate and after 6 months) and the degree conversion (micro-Raman spectroscopy). One hundred and ten bovine enamel blocks (4x4mm) were flattened and randomly allocated into 5 groups: C: control, without bleaching; B: bleached with 35% hydrogen peroxide (HP); BS3: bleached and treated with 10% sodium bicarbonate solution (BS) for 3 min; BS5: bleached and treated with BS for 5 min; BS10: bleached and treated with BS for 10 min. HP was applied twice (20 minutes each, except in group C) and the adhesive restorations were performed. After 24 hours, 20 specimens from each group were sectioned into sticks (1x1 mm) and submitted to microtensile bond strength testing (immediately and after 6 months) in a universal testing machine with a crosshead speed of 0.5 mm/min (n = 10). Data was analyzed by two-way ANOVA (p <0.05). The means of the immediate and 6 months analysis were: C 26.77 / 25.32; B: 26.42 / 26.42; BS3: 23.95 / 22.98; BS5: 23.65 / 26.64; BS10: 23.42 / 29.30. None of the tested factors showed significance: treatment (p = 0.349) and time (p = 0.234), with no interaction between them (p = 0.198). Adhesive failures were predominant in both evaluation periods. For the degree of conversion analysis, 2 specimens of each group were sectioned into 1 mm slices after 24 hours of the restorative procedure, and 3 slices were selected. The following parameters were used: excitation of specimens with argon laser operating at 538 nm, spectrum obtained at a resolution of ~4cm-1, under a spectrum region between 1580-1660cm-1, evaluating the height of the peaks at 1608cm-1 and 1637cm-1. Data was analyzed by one-way ANOVA (p <0.05). The means of degree of conversion were: C: 71.10%; B: 72.11%; BS3: 73.98%; BS5: 69.25%; BS10: 70.56%. The study factor \"treatment\" was not statistically significant (p = 0.808). The results of bonding to bleached enamel was not negatively affected when adhesive restorations were made immediately after bleaching, regardless of the application of the antioxidant substance. Further studies to evaluate the adhesion on bleached enamel, mainly with regard to the degree of conversion and different types of universal adhesive systems are needed for comparative purposes. Only after this, the immediate restoration (if necessary) in clinical practice can be safely and indicated.

As formas SO2, HSO3- e SO32- em meio aquoso, são espécies de enxofre (IV) que coexistem; suas concentrações no equilíbrio químico dependem do pH do meio. O estudo das oxidações do S(IV) encontrado na atmosfera, resultante de fontes naturais e antropogênicas, é de fundamental importância, pois os produtos formados têm caráter ácido. Como consequência, ocorre a precipitação ácida, com seus efeitos deletérios ao ecossistema. O presente trabalho procura adicionar novas informações às já acumuladas em estudos anteriores. O estudo praticamente se restringe às condições de laboratório, levando em conta as condições ambientais. Em uma projeção futura, a metodologia poderá ser estendida e adaptada para as determinações do S(IV) na natureza. O método analítico proposto para determinar S(IV) na atmosfera, em fase aquosa, é baseado na reação catalítica onde o S(IV) induz a oxidação do Co(II) a Co(III), em tampão HN3/N3- e na presença do Mn++. O principal composto de coordenação, hexaazidocobaltato (III), é consideravelmente estável e apresenta um máximo de absorção em 365nm, com absortividade molar próxima de 3.104 mol-1cm-1L. Com o uso de uma cubeta de quartzo de 1cm de caminho ótico, a faixa de concentração de uso deste método, é de 280 ppb a 3000 ppb (expressa em HSO3-). A equação que descreve a concentração do S(IV) tem um erro menor que 5%. Para a elaboração do método foram feitos ensaios preliminares, a fim de otimizar as condições experimentais. Os principais parâmetros estabelecidos foram: ordem de adição dos reagentes, tempo de espera para a adição dos outros reagentes, concentração das espécies envolvidas e a solução de referência mais adequada para a leitura espectrofotométrica. As medições foram geralmente feitas a 20°C e 60% de umidade relativa do ar. Também foram realizados estudos em temperatura acima e abaixo de 20°C. A análise das diferentes condições das reações estudadas foi feita pela avaliação da evolução da reação no tempo decorrido. Os compostos de S (IV) são instáveis e por isto foi necessário selecionar uma substância que fosse capaz de coletá-lo no meio ambiente, estabilizá-lo até o momento da reação e que não interferisse na formação do complexo em questão. Com estas finalidades foram estudadas as soluções de MEA, TRIS, NH3 e formaldeído. A reação proposta é catalisada pelo Mn(II), por isto foram feitos estudos visando encontrar o compromisso da concentração deste cátion com o desenvolvimento da reação. O cobalto (II) e o azoteto (N3-) estão em excesso com relação ao S(IV), pela estequiometria da reação. Foi feito um estudo relacionando à concentração de Co(II), N3- e de Mn(II) . Cobalto e manganês são elementos químicos de transição, assim como molibdênio e níquel. Portanto, os dois últimos metais, têm potencialidade de atuar como catalisador ou mesmo formar complexos que absorvam, em substituição ao cobalto. No caso do molibdênio, este, em uma reação competitiva, retira peróxidos da solução que podem oxidar o sulfito. Cobre e ferro interferem no método. Porém, como formam complexos com bandas de absorção máxima, distintas entre si e diferentes de 365nm, foi verificada a possibilidade de determinação das concentrações de S(IV), Cu(II) e Fe(III), em água de chuva, pelo princípio da aditividade. Uma vez que o oxigênio toma parte na reação, foi feito um estudo da possibilidade de utilização do etanol como solvente. Neste solvente, a solubilidade do oxigênio é aproximadamente 20 vezes maior do que na água. O sulfato é um produto da reação e a adição de sulfato de sódio foi estudada, pois o equilíbrio químico é deslocado no sentido de inibir a reação. Finalmente, como a luz pode interferir na reação foi verificada a sua influência no comportamento da mesma. / The proposed analytical method for determining S(IV) in the atmosphere, in aqueous medium, is based upon the catalytic reaction where S(IV) promotes the oxidation of Co(II) to Co(III) in a HN3/N3- - buffer and Mn(II) ions are the catalyst. The main coordination compound is hexaazidecobaltate (III) ([Co(N3)6]3-). This species is relatively stable, it shows an absorption maximum at 365 nm and &#949; near to 3 x 104 mol-1cm-1L. The concentration range of use for this method is from 280 to 3000 ppb (expressed in HSO3-). Preliminary assays were done for optimizing the experimental conditions. The main parameters established were: order of the added reagents, elapsed time until the addition of the other reagent, concentration of the involved species and the best reference solution for spectrophotometric reading. The measurements were carried out at 20°C and 60% relative humidity. Measurements were also done above and below 20°C. S (IV) compounds are unstable, so it was necessary to select a substance which was able to collect them in the environment, stabilize them until the determination and was not an interferent in the complex formed. For this purpose, solutions for MEA, TRIS, NH4OH and formaldehyde were studied. Copper and iron interfere but they form complexes with different absorption maxima. It was possible to determine the concentrations of S(IV), Cu(II) and Fe(III) in rain water Oxygen takes part in the reaction and the use of ethanol, which dissolves 20 times more oxygen than water, was studied. Finally, as sulphate is a reaction product, sodium sulphate addition was studied too, since the equilibrium is shifted towards reaction inhibition.

Introdução: As diretrizes atuais recomendam restrições no sódio dietético para o tratamento de insuficiência cardíaca agudamente descompensada (ICAD), contudo sem embasamento em evidências científicas sólidas. Estudos recentes sugerem que a dieta normossódica é comparável à dieta hipossódica no tocante à resolução da congestão dos pacientes com ICAD. Levanta-se a hipótese de que o emprego de dieta não restrita em sódio pode adicionalmente preservar os níveis de natremia no tratamento dos pacientes com ICAD. Objetivo: Avaliar o efeito de dois níveis de ingestão dietética de sódio em pacientes hospitalizados para o tratamento de ICAD. Casuística e Métodos: Investigamos prospectivamente 44 pacientes internados com ICAD, randomizados em 2 grupos: grupo DH (dieta hipossódica): com dieta restrita em sódio, com 3 g de cloreto de sódio por dia (n = 22; 59,5±11,9 anos, 50% masculinos, FEVE = 30,0±13,6%); e grupo DN (dieta normossódica): com dieta sem restrição de sódio, com 7 g de cloreto de sódio por dia (n = 22; 56,4±10,3 anos; 68,2% masculinos; FEVE = 27,8±11,7%), ambos submetidos à restrição hídrica de 1.000 ml/dia. No tempo basal e no 7° dia de intervenção ou final, caso a pesquisa fosse interrompida antes dos sete dias de intervenção, avaliamos o NT-proBNP sérico, aplicamos uma escala analógica visual de dispneia e outra de bem-estar geral. Diariamente coletamos dados de peso corpóreo, sódio e potássio séricos, creatinina e ureia séricas (função renal), balanço hídrico (BH), dose diária e acumulada de diuréticos e demais medicações para o tratamento de ICAD, pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM), e frequência cardíaca (FC). Resultados: Os grupos DH e DN apresentaram, respectivamente: graus semelhantes de diminuição percentual de peso corpóreo (3,9±3,0% vs 3,0±3,4%, p = 0,39), semelhantes doses médias diárias de furosemida (76,9±32,3 mg vs 67,1±20,7 mg, p = 0,5), redução comparável dos níveis de NTproBNP (15,2±40,4% vs 22,8±55,5%, p = 0,6), semelhantes BH acumulados (-3614,8±2809,2 ml vs -2801,5±1962,5 ml, p = 0,3) e melhora dos níveis de escalas visuais de dispneia (3,4±2,1 e 3,0±1,9, p = 0,6) e bem-estar geral (2,7±2,1 e 2,6±2,9, p = 0,9). No 7° dia de intervenção o grupo DH apresentou menores níveis de sódio sérico (135,4±3,5 mmol/L) em comparação ao grupo DN (137,5±1,9 mmol/L; p = 0,05). Houve 4 casos de hiponatremia no 7° dia de intervenção, todos pertencentes ao grupo DH(25%). O grupo DN exibiu valores mais preservados de PAM durante a internação (79,4±2,4 mmHg) quando comparados ao grupo DH (75,5±3,0 mmHg), p = 0,03 e de FC, 73,2±1,6 bpm vs 75,5±2,1 bpm, respectivamente, p = 0,02. A função renal e o potássio sérico não apresentaram diferença significativa entre os grupos. Conclusão: Em pacientes com ICAD, o emprego de dieta normossódica, associou-se à melhor preservação dos níveis de sódio sérico e dos valores de pressão arterial quando comparada à dieta hipossódica. Adicionalmente, o emprego da dieta hipossódica não se associou a benefícios adicionais no tocante à redução da congestão, melhora dos sintomas e na redução da ativação neurohumoral. Esses resultados sugerem que a dieta hipossódica não deva ser usada como rotina no tratamento dos pacientes com ICAD. / Background: The current guidelines endorse the use of low dietary sodium intake for the treatment of acute decompensated heart failure (ADHF). However, this recommendation is not based on robust scientific evidence. New researches suggest that normal sodium diet is comparable to a low sodium diet regarding the congestion resolution in patients of ADHF. We hypothesize that a normal sodium diet is associated with more preserved levels of serum sodium during the hospitalization. Purpose: This study aimed at assessing the effect of two levels of dietary sodium intake in hospitalized patients with ADHF. Methods: We investigated prospectively 44 patients hospitalized for ADHF, randomized to 2 groups: LS (low sodium diet), receiving 3 g/day of dietary sodium chloride (n = 22, 59.5±11.9 y.o., 50% male, LVEF = 30.0±13.6%); and NS (normal sodium diet), receiving 7 g/day of dietary sodium chloride (n = 22, 56.4±10.3 y.o., 68% male; LVEF = 27.8±11.7%). Both groups were submitted to a limit of fluid intake of 1000 ml/day. The primary endpoint was the serum sodium level at day 7. The NT-proBNP levels, a visual analogy scale about dyspnea and wellbeing were measured at baseline and at day 7 or ending, if the search was interrupted before the seven days of intervention. Daily monitoring included: body weight, accumulated fluid balance, daily and cumulative diuretic dose and other medications for treating ICAD, systolic, diastolic and mean blood pressure (BP), heart rate (HR), and serum levels of sodium, potassium, ureic nitrogen and creatinine (renal function). Results: LS and NS groups presented, respectively, similar amount of accumulated fluid balance (-3614.8±2809.2 ml vs - 2801.5±1962.5 ml, p = 0.3), percent body weight reduction(3.9±3.0% vs 3.0±3.4%, p = 0.39) , cumulative furosemide dose (76.9±32.3 mg vs 67.1±20.7 mg, p = 0.5), percent reduction of NT-proBNP levels (15.2±40.4% vs 22.8±55.5%, p = 0.6), improvement in visual analogic scale of dyspnea (3.4±2.1 e 3.0±1.9, p = 0.6) and well-being (2.7±2.1 vs 2.6±2.9, p = 0.9). Additionally, at day 7, the LS group presented lower levels of serum sodium (135.4±3.5 mmol/L) in comparison to the NS (137.5±1.9 mmol/L; p = 0.05). During hospitalization, 4 cases of hyponatremia were observed in seventh day of intervention, all in the LS diet group (25%). The NS group exhibited more preserved values of mean BP (79.4±2.4 mmHg), as compared to the LS group (75.5±3.0 mmHg), p = 0.03, and HR, 73.2±1.6 bpm vs 75.5±2.1 bpm, respectively, p = 0.02. The renal function and serum potassium tests presented no significant difference between groups. Conclusions: In patients with ADHF, the use of low dietary sodium intake is not associated to additional benefits when compared to a normal sodium diet in regard to reduction of congestive manifestations, symptoms resolution and decrease of the neurohumoral activation. In addition, the normal sodium diet was associated to preservation of serum sodium and blood pressure levels. These results suggest that a low sodium diet should not be routinely used for ADHF treatment.

Os programas de melhoramento de figueira (Ficus carica L.) por métodos convencionais tais como cruzamentos dirigidos, para a obtenção de novos cultivares, são inviáveis em muitos países, como no Brasil, principalmente pela pequena variabilidade genética encontrada, e pela dificuldade de obtenção de plantas originadas pela fusão de gametas, uma vez que a vespa Blastophaga psenes, responsável pela polinização natural, não existe no país. Desse modo, o melhoramento genético, com o uso de mutagênicos, se torna uma linha de pesquisa importante para a melhoria da cultura, sendo necessário reunir informações sobre essa espécie, principalmente, em relação à sua variabilidade genética, para que projetos de propagação e manejo adequados sejam realizados. Diante do exposto, o objetivo do presente trabalho foi verificar a existência de variabilidade epigenética devido à metilação do DNA em seleções irradiadas de figueiras, entre si e quando comparadas ao principal cultivar comercial, Roxo-de-Valinhos, utilizando as técnicas de MSAP e ELISA, e posterior sequenciamento do DNA, tratado com bissulfito de sódio, para detecção do posicionamento das regiões polimórficas, analisado por ferramentas de bioinformática. Amostras do DNA genômico foram duplamente digeridas com a enzima HpaII (sensível à metilação) ou com o seu isoesquizomero MspI (não sensível à metilação), juntamente com a enzima EcoRI. Foram testadas 14 combinações de primers e obteve-se 87.9%, 10.1% e 2.0%, respectivamente, de regiões não metiladas CCGG, regiões metiladas CmCGG e regiões hemimetiladas hmCCGG, de um total de 553 produtos de amplificação, demostrando que a técnica MSAP é eficiente para detecção de sítios diferencialmente metilados no material genômico estudado, evidenciando sua divergência epigenética. Com o sequenciamento do DNA isolado desses sítios diferencialmente metilados, foi possível verificar diferentes padrões de metilação nos mesmos pelo sequenciamento dos DNAs tratados com bissulfito de sódio, em regiões codificadoras de genes regulatórios do desenvolvimento e amadurecimento dos frutos, além de terem sido encontrados no DNA mitocondrial dos tratamentos, o qual regula o fornecimento de energia em forma de ATP para as plantas, estando intimamente relacionado com o desenvolvimento das mesmas, justificando os diferentes fenótipos encontrados, tanto nos frutos, quanto no crescimento das plantas que sofreram estresse devido à exposição à radiação gama. Pela técnica de imunoquímica (ELISA), utilizando anticorpos anti 5-mC, foram observadas diferenças significativas pelo teste de Tukey, a 95 % de confiabilidade, no conteúdo global de metilação dos DNAs dos tratamentos, indicando que este fator abiótico foi responsável pelas alterações no epigenoma das plantas. Como o material utilizado como controle se encontrou também metilado, uma possível desmetilação dos materiais genômicos pode ser a responsável pela variação fenotípica entre os tratamentos. Diante disso, o estudo futuro da expressão gênica entre os tratamentos torna-se uma estratégia de extrema importância para o entendimento dos complexos sistemas regulatórios, levando à identificação de genes de interesse agronômico para a cultura da figueira, possibilitando a sua manipulação subsequente e propagação de cultivares melhorados para fins comerciais. / The fig tree (Ficus carica L.) breeding programs by conventional methods such as directed crosses, in order to obtain new cultivars, are unworkable in many countries, as in Brazil, mainly by small genetic variability found, and by the difficulty for obtaining plants originated from the fusion of gametes, since the wasp Blastophaga psenes, responsible for natural pollination, doesn`t exist in the country. In this way, the genetic breeding, with the use of mutagenic, becomes an important research line for the improvement of culture, being necessary to gather information about this species, mainly in relation to its genetic variability, for perform propagation projects and appropriate management. Given the above, The objective of this study was to verify the existence of epigenetic variability due to DNA methylation in irradiated fig selections, with each other and when compared to the main commercial cultivar, Roxo-de-Valinhos, using MSAP and ELISA techniques, and subsequent DNA sequencing, treated with sodium bisulfite, for detection of the position of the polymorphic regions, analyzed by bioinformatics tools. Samples of genomic DNA were double-digested with the HpaII enzyme (sensitive to methylation) with its isoschizomer MspI (insensitive to methylation), together with the EcoRI enzyme. Fourteen primer combinations were tested and it was obtained 87.9%, 10.1% e 2.0%, respectively, unmethylated CCGG, methylated CmCGG and hemimethylated regions hmCCGG, from a total of 553 amplification products, displaying, the MSAP technique, efficient for detection of differentially methylated sites in the genomic material studied, demonstrating their epigenetic divergence. With the sequencing of DNA isolated of these differentially methylated sites, it was possible to verify different patterns of methylation in them by sequencing the DNA treated with sodium bisulfite, in coding regions of regulatory genes of the development and fruits ripening, besides they have been found in the mitochondrial DNA of treatments, which regulates the supply of energy in ATP form for the plants, being closely related to their development, justifying the different phenotypes found in both fruits and plant growth that suffered stress due to exposure to gamma radiation. By the technique of immunochemistry (ELISA), using 5-mC antibodies, significant differences were observed by Tukey test, at 95% of trustworthiness, in the global content methylation of the treatments DNA, indicating that this abiotic factor was responsible for the changes in the epigenome of the plants. Since the material used as control was found also methylated, a supposed demethylation of the genomic material may be responsible for phenotypic variation among treatments. Considering this, future study of gene expression between treatments becomes an extreme important strategy for understanding the complex regulatory systems, leading to the identification of genes with agronomic interest for the fig culture, allowing its subsequent manipulation and propagation of improved cultivars for commercial purposes.

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Este trabalho utilizou ratos Wistar em diferentes períodos do neuro-desenvolvimento a fim de investigar possíveis efeitos protetores do selênio (selenito de sódio) em um modelo in vivo de exposição ao metilmercúrio (MeHg). Os sujeitos (grupos de idades P1 e P21) receberam por amamentação ou via oral: veículo, Selênio (5ppm), MeHg (10ppm) ou Selênio (5ppm) mais MeHg (10ppm) durante 20 e 10 dias respectivamente (n = 8 por grupo). Após o tratamento, os ratos foram submetidos aos testes de campo aberto e labirinto aquático a fim de analisar déficits motores e de memória/aprendizagem, respectivamente. Para fins de análise histológica, foi realizada perfusão e imunohistoquimica para Neu-N. Com o objetivo de aferir possíveis efeitos deletérios sobre populações neuronais, foi feita contagem estereológica dos neurônios do hipocampo (camada polimórfica do giro denteado). Como resultado, foi observada redução significativa na atividade locomotora de neonatos (P1) mediante exposição ao MeHg. Além disso, nos grupos expostos ao MeHg (isoladamente ou associado ao selênio) verificou-se déficits de aprendizagem e memória. Já os animais P21 expostos ao MeHg apresentaram aumento na atividade locomotora, efeito abolido pela administração concomitante de selênio. Quando submetidos ao labirinto aquático, observou-se redução do tempo de latência apenas no grupo controle e naqueles animais expostos ao selênio. Como resultado das contagens estereológicas, observou-se diminuição do número de neurônios no hipocampo somente nos animais P21 expostos ao mercúrio. Os resultados obtidos sob estas condições experimentais mostraram que a exposição ao MeHg resultou em efeitos comportamentais diversos dependentes da idade dos sujeitos. A administração de selênio só foi capaz de interferir positivamente nos déficits locomotores observados em animais mais velhos. Além disso, foi observado que a administração de selênio não interferiu nos distúrbios comportamentais de memória/aprendizagem, tampouco na morte neuronal induzida por MeHg. Possíveis mecanismos associados a este padrão de proteção parcial por selênio, especialmente em estágios mais avançados de desenvolvimento neural ainda necessitam ser elucidados. / Exposure to mercury compounds results in oxidative damages, seriously affecting the central nervous system both in humans and in experimental models. We used Wistar rats at different stages of neuro-development in order to investigate potential protective effects of selenium (sodium selenite) in an in vivo model of exposure to methylmercury (MeHg). Subjects (age groups P1 and P21) were given lactational and orally, respectively: vehicle, Selenium (5ppm), MeHg (10 ppm) or selenium (5 ppm) plus MeHg (10 ppm) for 20 and 10 days respectively (n = 8 per group). After treatment, the rats were submitted to the following behavioral tests: open field and Morris water maze to examine motor deficits and memory/learning, respectively. After intracardiac perfusion we performed immunohistochemistry for Neu-N. In order to evaluate possible deleterious effects in neuronal populations, we counted neurons in the hippocampus (polymorphic layer). As a result, we found significant reduction in locomotor activity of neonates (P1) when exposed to MeHg. Besides, groups exposed to MeHg (alone or in association with selenium) showed learning/memory deficits. P21 animals treated with MeHg showed increase in locomotor activity, effect abolished by concomitant administration of selenium. When submitted to water maze, only subjects in the control and selenium groups showed reduction of the time latency. As assessed by stereological counting, we noticed reduction in the number of hippocampal neurons only in P21 animals exposed to MeHg. Combined, our results showed that MeHg exposure produces age-dependent behavioral effects. Also, despite other findings in the literature, under our experimental conditions administration of selenium was only able to interfere with motor deficits in older animals, besides not being able to interfere with memory/learning deficits nor the MeHg-induced neuronal death. Possible mechanisms associated with these partial protective properties of selenium in the later stages of neural development have yet to be elucidated.

Orientador: Luiz Fernando de Oliveira e Silva Carvalho / Banca: Maria Cristina Thomaz / Banca: Geraldo Camilo Alberton / Resumo: As infecções urinárias (IU) em porcas estão entre as principais causas de falhas reprodutivas que influem na produtividade do rebanho, proporcionando grandes prejuízos econômicos. No presente trabalho foram testados dois acidificantes urinários - o ácido cítrico e o cloreto de amônio e cloreto de sódio, de modo a comparar a atividade destes produtos, no controle de cistites em matrizes suínas. Utilizaram-se 53 porcas adultas, gestantes ou não, de linhagens comerciais, portadoras ou não de cistite, sendo identificados os animais sadios ou afetados com base nos resultados de urinálises e cultivos bacterianos. O primeiro ensaio foi constituído de duas fases - fase 1 - realizada com 25 fêmeas em início de gestação (20 com cistite e 5 sadias), alimentadas com ração de gestação e fase 2 - realizada com 20 animais em final de gestação (16 com cistite e 4 sadias), alimentadas com ração de lactação. O pH, a densidade e a contagem bacteriana nas amostras de urina foram as variáveis estudadas. No segundo ensaio foram utilizadas 8 porcas, todas com cistite e não gestantes. A quatro delas administrou-se ração com cloreto de amônio e outras quatro receberam ração não suplementada com o produto. Avaliou-se o consumo de água, a produção de urina, os pH da urina e do sangue. Os resultados demonstraram que o ácido cítrico determinou diminuição do número de unidades formadoras de colônias, porém não interferiu no pH e densidade urinária dos animais. O cloreto de amônio reduziu o pH urinário demonstrando ação acidificante mesmo colhendo a urina 24 horas após o arraçoamento, porém não interferiu nas densidade e contagem bacteriana. Com relação o cloreto de sódio (1,5% ou 52,5 g/Kg de ração) não se observou qualquer efeito sobre os parâmetros estudados (pH urinário, densidade e contagem bacteriana). / Abstract: The urinary infections(IU) in sows are among the main causes of reproductive imperfections that influence in the productivity of the flock, providing great economic damages. In the present work two acidifiers were tested out - acid citric and the chloride of ammonium and sodium chloride, in order to compare the activity of these products, in orther to control the cystitis in swine. 53 adult, pregnants and non pregnant sows were used , of tradeable ancestries, bearing, donþt bearing cystitis being identified the healthy or affected animals on the basis of the bacterial results of urinalysis culture. The first assay was carried out into two phases - phase 1 - carried through with 25 females in theirs early gestation (20 with cystitis and 5 healthy ones), fed gestation diet and phase 2 - carried through with 20 animals in gestation end (16 with cystitis and 4 healthy ones), fed with lactation ration. pH, the density and the number of CFUs in the urinary samples were the studied. As the assay 8 sows had been held envolving, all cystitis and not pregnant. Four out of 8 sows were fed with chrolide ammonium based rations. The remnants 4 were fed with no supplemented feed. The consumption of water, urinary output, urinary pH and the blood were also evaluated. The results showed that the citric acid determined a decrease in the CFU. However, it didnþt interfere at both pH and urinary density in the animals. The ammonium chloride reduced the urinary pH showing acidifying action even while collecting the urine after a period of 24 hours after the feeding time. Both density and CFU were not changed. Regarding the sodium chloride (1.5% or 52.5g/kg) nothing was found out within the complying parameters (pH urinary, dendity and CFU). / Mestre

Orientador: Otto Mack Junqueira / Coorientador: Luciano Hauschild / Banca: Antonio Carlos Laurentiz / Banca: Eurípedes Laurindo Lopes / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Lizandra Amoroso / Resumo: O primeiro experimento foi conduzido nas instalações de um abatedouro comercial situado no município de Xanxerê/SC, com o objetivo de avaliar as principais injúrias que ocorrem na pele e nas carcaças suínas oriundas do manejo na área de espera do abatedouro. Foram utilizados 1000 suínos, machos e fêmeas, com aproximadamente 150 dias de idade, criados e manejados de acordo com as normas do abatedouro comercial, observados desde o momento do desembarque na área de descanso do abatedouro até o momento da entrada na área de insensibilização. Foram avaliados os danos à superfície corporal, compreendendo contusões, marcas de mordidas e feridas, juntamente com hematomas roxos ou esverdeados na carcaça. Observou-se a ocorrência de danos na pele dos animais, causados por marcas de mordidas ocorridas por brigas de animais de lotes diferentes misturados em uma mesma baia, principalmente no dorso e nos membros dianteiros dos suínos. Foram observadas contusões decorrentes da condução dos animais, com predominância no dorso e nos membros, não sendo encontradas feridas nem hematomas nos animais avaliados. Conclui-se que as maiores injúrias à carcaça durante o manejo na área de espera do abatedouro são compreendidas por marcas de mordidas na pele oriundas de brigas e contusões oriundas do manejo de condução dos animais. O segundo estudo foi conduzido nas instalações de uma granja comercial em Santa Catarina, com o objetivo de avaliar o efeito da inclusão de glicose, bicarbonato de sódio e vitamina E via dieta hídrica durante o jejum pré-abate sobre o rendimento de carcaça, peso relativo de órgãos, conteúdo estomacal e parâmetros de qualidade de carne em suínos. Foram utilizados 500 animais, distribuídos no último dia pré-abate durante o período de dieta hídrica em delineamento experimental inteiramente casualizado, com dez tratamentos e dez repetições, com cinco suínos em cada unidade experimental. Os ... / Abstract: The first experiment was conducted in a commercial slaughterhouse in Xanxerê city, Santa Catarina, intending to evaluate frequently problems that occur in swine skin and carcass during slaughterhouse resting area handling. Were used 1000 male pigs, 150 day-old, raised and handled according to the rules of the commercial slaughterhouses, and reared welfare norms. Were evaluated skin injury, comprehending marks of biting and wounds, and also green or purple hematomas in the carcass. Were observed injuries in the pigs skin, caused by biting, fighting between animals of different locates in a same place, mainly in the back and front limbs of the animals. Also, occurred punch marks in the back and limbs, resulting from the animal conduction handling, not been observed wounds and hematomas on animals evaluated. It is concluded that the highest incidence of carcass injuries in the handling of slaughterhouse resting area are composed by biting marks resulted from fighting and punch marks in the skin arisen from animal conduction. The second trial was conducted in a commercial swine farm and was aimed the evaluation of the addition of glucose, sodium bicarbonate and vitamin E in water during swine pre-slaughter fasting on the carcass yield, relative organs weight, stomach content and pork quality parameters. Were used 500 animals, distributed in the last day during fasting pre-slaughter, in a completely randomized design, with ten treatments and five replicates of five pigs each experimental unit. The treatments were the addition of 0,45% of sodium bicarbonate; 0,45% of sodium bicarbonate + 200mg/L of vitamin E; 0,55% of sodium bicarbonate; 0,55% of sodium bicarbonate + 200mg/L of vitamin E; 50g/L of glucose; 50g/L of glucose + 200mg/L of vitamin E; 75g/L of glucose; 75g/L of glucose+ 200mg of vitamin E; 200mg/L of vitamin E and a treatment with water only. The addition of glucose, bicarbonate and vitamin E does not influence the carcass ... / Doutor

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito antibacteriano do laser diodo com diferentes comprimentos de onda em blocos de dentina infectados com Enterococcus faecalis, por meio de análise microbiológica com espectrofotometria e alterações ultraestruturais por meio de microscópio eletrônico de varredura. Treze dentes unirradiculares foram seccionados de forma a obter 100 blocos de dentina intrarradicular. Inicialmente, os blocos foram imersos por 5 minutos em EDTA 17% e em seguida lavados por 5 minutos com água destilada, e então autoclavados por 30 minutos a 120&deg;C. As amostras de dentina foram inoculadas com 1mL de suspensão de E. faecalis em 5mL de BHI (Brain Heart Infusion) e incubadas a 37&deg;C por cinco dias. Após a contaminação, os espécimes foram distribuídos em dez grupos (n=10) de acordo com tratamento de superfície: GI - 5 mL NaOCl 2,5%, GII - 5 mL NaOCl 2,5% + diodo 808nm, GIII - 5 mL NaOCl 2,5% + diodo 970nm, GIV - diodo 808nm, GV - diodo 970nm, GVI - CHX 2%, GVII - CHX 2% + diodo 808nm, GVIII - CHX 2% + diodo 970nm, GIX - controle positivo e GX controle negativo. O crescimento bacteriano foi analisado pela turbidez e densidade óptica do meio de cultura por espectrofotometria (nm). Em seguida, os espécimes foram preparados para análise das alterações ultraestruturais da superfície dentinária em MEV. Os dados foram submetidos ao teste ANOVA um fator e evidenciaram que o GI (77,5 ± 12,1), GII (72,5 ± 12,2), GIII (68,7 ± 8,7), GV (68,3 ± 8,7), GVI (62,0 ± 5,5) e GVII (67,5 ± 3,3) foram semelhantes entre si e diferente estatisticamente dos grupos GIV (58,8 ± 25,0), GVIII (59,2 ± 4,0) e grupos controles (p<0,05). A análise em MEV evidenciou uma matriz orgânica amorfa e derretimento da dentina intertubular quando submetidos à irradiação do laser diodo 970nm, e erosão da dentina intertubular quando irradiada com laser 808nm, sendo que ao associar NaOCl 2,5% ao laser com diferentes comprimentos de onda, observou-se maior erosão intertubular. Conclui-se que todos os protocolos terapêuticos foram capazes de reduzir o contingente bacteriano dos blocos de dentina e ao associar o laser diodo e soluções não houve melhora significativa na redução do contingente bacteriano. / The objective of this study was to evaluate the disinfection degree of dentin blocks contaminated by Enterococcus faecalis caused by different diode laser wavelengths through microbiological analysis with spectrophotometry and ultrastructural alterations by scanning electron microscope. Thirteen uniradicular teeth were sectioned into 100 dentin Intraradicular blocks. Initially, the blocks were immersed for 5 minutes in 17% EDTA and then washed for 5 minutes with distilled water, and then esterilized for 30 minutes at 120&deg;C. The dentin samples were inoculated with 1mL of E. faecalis suspension in 5mL BHI (Brain Heart Infusion) and incubated at 37&deg;C for five days. After contamination, the specimens were distributed into ten groups (n = 10) according to surface treatment: GI - 5 mL NaOCl 2.5%, GII - 5 mL NaOCl 2.5% + diode 808nm, GIII - 5 mL NaOCl 2.5% + diode 970nm, GIV - diode 808nm, GV - diode 970nm, GVI - CHX 2%, GVII - CHX 2% + diode 808nm, GVIII - CHX 2% + diode 970nm, GIX - positive control and GX - Negative control. Bacterial growth was analyzed by turbidity and optical density of the culture medium by spectrophotometry (nm). Afterwards, the specimens were processed for analysis of the ultrastructural changes of the dentin surface in SEM. The data was subject to the One-way ANOVA test and showed that GI (77,5 ± 12,1), GII (72,5 ± 12,2), GIII (68,7 ± 8,7), GV (68,3 ± 8,7) and GVII (67,5 ± 3,3) were statistically similar and statistically different from GIV (58,8 ± 25,0), GVIII (59,2 ± 4,0) and control groups (p <0.05). SEM analysis showed a modified organic matrix layer with an amorphous, intertubular dentin melting when dentin samples were irradiated with 970nm diode laser, erosion of the intertubular dentin in blocks submitted to 808nm diode laser, and a increased erosion of the intertubular dentin when associating NaOCl 2,5% to the laser with different wavelengths. All the therapeutic protocols were able to reduce the bacterial contingent in dentin blocks with the association of laser diode and solutions did not significantly improve the reduction of the bacterial contingent.

Avaliou-se a citotoxicidade do hipoclorito de sódio a 1%, do digluconato de clorexidina a 2% e do Endoquil e seus efeitos na liberação de citocinas e de óxido nítrico em culturas de macrófagos peritoniais murinos. As substâncias sofreram diluições de 1.000 e 10.000 vezes: Grupo Controle, meio de cultura meio McCoy`s 5A® modificado e apirogênico; Grupo Hipoclorito de sódio a 1% (diluições A 0,001 e B 0,0001); Grupo Digluconato de Clorexidina a 2% (diluições A 0,002 e B 0,0002); Grupo Endoquil a 10% (diluições A 0,01 e B 0,001). Foram utilizados 70 camundongos da linhagem C57Bl/6j fêmeas. Após anestesia e sacrifício realizou-se a coleta do exudato celular por meio da injeção e aspiração de meio McCoy`s 5A® modificado na cavidade abdominal dos animais. O ensaio da atividade citotóxica foi realizado pelo Método do MTT nos períodos: curto prazo (4 e 12 horas); médio prazo (24, 48 e 72 horas) e longo prazo (5 e 7 dias). A absorbância dos poços foi lida em Leitora de Elisa a 550 nm. Os valores obtidos foram comparados com os valores do padrão, calculando-se assim a viabilidade e o número de células presentes de cada grupo avaliado em função do tempo. A quantificação in vitro das citocinas IL-1, IL-1, IL-6 e TNF- foi realizada por meio de imunoensaio do tipo Elisa, utilizando-se kit Quantikine® M murine. A análise da síntese de óxido nítrico foi conduzida segundo a metodologia de Griess, na qual o óxido nítrico é convertido a nitrito, sendo este último detectado colorimetricamente. Cada grupo experimental foi analisado em dois tempos de observação (24 e 48h), com estímulo de LPS ou não, em duplicatas. Os dados foram submetidos ao teste estatístico de análise de variância e, quando necessário, complementados pelo teste de Tukey. Após 12 horas, o grupo tratado com clorexidina na diluição A apresentou diminuição significativa da viabilidade celular em relação aos grupos tratados com hipoclorito de sódio e Endoquil; este declínio estendeu-se para 24, 48 e 72 horas quando provocou morte celular. Em 5 e 7 dias, ocorreu redução da viabilidade em todos os grupos, com diferença significante para o grupo da clorexidina. Em relação às citocinas e óxido nítrico: o hipoclorito de sódio e a clorexidina induziram a produção e exacerbaram o efeito do LPS sobre as IL-1 e IL-1 , respectivamente, enquanto que o Endoquil diminuiu estes efeitos; a clorexidina inibiu o efeito estimulatório do LPS, diminuindo a síntese de IL- 6; juntamente com o Endoquil, a clorexidina diminuiu a síntese de TNF- , enquanto que o hipoclorito aumentou esta produção em 24 horas; mesmo estimulados com LPS, o hipoclorito e a clorexidina comprometeram a síntese de óxido nítrico, em 24horas e, após 48 horas, apenas a clorexidina manteve a inibição. / The cytotoxicity of 1% sodium hypochlorite, of 2% chlorhexidine digluconate and of Endoquil and its effects on cytokine release and nitric oxide were evaluated in culture of murine peritoneal macrophages. Substances were diluted 1,000 and 10,000 times: Control Group with culture medium using McCoy 5A`s® modified and apirogenic, Group Sodium Hypochlorite 1% (dilutions A - 0.001 and B - 0.0001); Group Chlorhexidine Digluconate 2% (dilutions A - 0.002 and B - 0.0002); Group Endoquil 10% (dilutions A - 0.01 and B - 0.001).70 female mice of strain C57BL/6J were used. After anesthesia and sacrifice, middle McCoy`s® 5A modified was injected in the abdominal cavity of animals and then the cellular exudate was aspirated. The cytotoxicity assay was performed by MTT method in the periods: short term (4 and 12 hours), medium term (24, 48 and 72 hours) and long term (5 to 7 days). The absorbance of the wells was read on ELISA reader at 550 nm. The values were compared with standard values, observing the viability and cell number in each group as a function of time. The in vitro quantification of cytokines IL-1, IL-1, IL-6 and TNF- was performed using an ELISA-type immunoassay, using the kit Quantikine® M Murine. Analysis of nitric oxide synthesis was conducted according to the Griess assay, in which nitric oxide is converted to nitrite, the latter being detected colorimetrically. Each experimental group was analyzed at two time points (24 and 48h) with stimulation of LPS or not, in duplicates. The data were submitted to statistical analysis of variance and, where necessary, complemented by Tukey test. After 12 hours, the group treated with chlorhexidine with dilution A significantly decreased cell viability when compared to the groups treated with sodium hypochlorite and Endoquil. This decline has extended to 24, 48 and 72 hours, when cell death occurred. After 5 and 7 days occured the reduction of viability in all groups, with significant differences for the chlorhexidine group. In relation to cytokines and nitric oxide: sodium hypochlorite and chlorhexidine induced the production and exacerbated the effect of LPS on IL-1 and IL-1 , respectively, while Endoquil decreased these effects;chlorhexidine inhibited the stimulatory effect of LPS, reducing the synthesis of IL- 6; just as Endoquil chlorhexidine decreased the synthesis of TNF-, but hypochlorite increased production in 24 hours; even stimulated with LPS, sodium hypochlorite and chlorhexidine undertook the synthesis of nitric oxide in 24 hours and, after 48 hours only chlorhexidine kept inhibition.