Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica Montezani.pdf: 530978 bytes, checksum: 955ce3dcbb336a24e3e19baa2a6f2baf (MD5) Previous issue date: 2012-09-24 / By the fact that chicken meat is a highly perishable product, consisting of elements easy and rapid degradation, require strict control during the slaughter process, storage and exposure to the consumer, this paper proposed an evaluation study of the hygienic and sanitary conditions of 55 outlets selling chicken in the city of Tupã-SP. We analyzed 70 samples of carcasses and cuts of frozen and chilled chicken sold in supermarkets and butcher shops, where, at the time of collection through a checklist of questions were raised regarding the identification of the establishment, evaluation and storage of the label product, beyond other data such as product type, date, time, and temperature of the freezer brand at the time of collection shortly after a microbial Analyze from techniques recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply for the presence of Staphylococcus aureus and Salmonella in spp in samples. The genus S. aureus was isolated in three samples studied (4.2%), with estimates of counts of 7.28 x103, 1.88x104 and 1.6x103 UFC/g. Just a sample was positive for Salmonella spp (1.4%). Despite the low percentage of samples contaminated chicken meat sold in the city offers consumer health risks because of incorrect conservation temperatures in the upper storage allowed by law. / Pelo fato da carne de frango ser um produto altamente perecível, ser constituída por elementos de fácil e rápida deterioração, necessitando, portanto de rigoroso controle durante o processo de abate, armazenamento e exposição ao consumidor, o trabalho propôs um estudo de avaliação das condições higiênico-sanitárias dos 55 estabelecimentos que comercializam carne de frango no município de Tupã-SP. Foram analisadas 70 amostras de carcaças e cortes de frango congelados e resfriados comercializados em supermercados e açougues, onde, no momento da coleta por meio de uma lista de verificação foram abordadas questões referentes à identificação do estabelecimento, avaliação da rotulagem e armazenamento do produto, além de dados como tipo de produto, data, horário, marca e temperatura do freezer no momento da coleta seguido de uma análise microbiológica a partir de técnicas recomendadas pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento para avaliar a presença de Staphylococcus aureus e Salmonella spp nas amostras. O gênero. S. aureus foi isolado em três amostras pesquisadas (4,2%), com estimativas de contagens de 7,28x103, 1,88x104 e 1,6x103 UFC/g. Apenas uma amostra foi positiva para Salmonella spp (1,4%). Apesar do baixo percentual de amostras contaminadas, a carne de frango comercializada no município oferece riscos à saúde dos consumidores em razão da conservação inadequada em temperaturas de armazenamento superiores às permitidas pela legislação.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica Montezani.pdf: 530978 bytes, checksum: 955ce3dcbb336a24e3e19baa2a6f2baf (MD5) Previous issue date: 2012-09-24 / By the fact that chicken meat is a highly perishable product, consisting of elements easy and rapid degradation, require strict control during the slaughter process, storage and exposure to the consumer, this paper proposed an evaluation study of the hygienic and sanitary conditions of 55 outlets selling chicken in the city of Tupã-SP. We analyzed 70 samples of carcasses and cuts of frozen and chilled chicken sold in supermarkets and butcher shops, where, at the time of collection through a checklist of questions were raised regarding the identification of the establishment, evaluation and storage of the label product, beyond other data such as product type, date, time, and temperature of the freezer brand at the time of collection shortly after a microbial Analyze from techniques recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply for the presence of Staphylococcus aureus and Salmonella in spp in samples. The genus S. aureus was isolated in three samples studied (4.2%), with estimates of counts of 7.28 x103, 1.88x104 and 1.6x103 UFC/g. Just a sample was positive for Salmonella spp (1.4%). Despite the low percentage of samples contaminated chicken meat sold in the city offers consumer health risks because of incorrect conservation temperatures in the upper storage allowed by law. / Pelo fato da carne de frango ser um produto altamente perecível, ser constituída por elementos de fácil e rápida deterioração, necessitando, portanto de rigoroso controle durante o processo de abate, armazenamento e exposição ao consumidor, o trabalho propôs um estudo de avaliação das condições higiênico-sanitárias dos 55 estabelecimentos que comercializam carne de frango no município de Tupã-SP. Foram analisadas 70 amostras de carcaças e cortes de frango congelados e resfriados comercializados em supermercados e açougues, onde, no momento da coleta por meio de uma lista de verificação foram abordadas questões referentes à identificação do estabelecimento, avaliação da rotulagem e armazenamento do produto, além de dados como tipo de produto, data, horário, marca e temperatura do freezer no momento da coleta seguido de uma análise microbiológica a partir de técnicas recomendadas pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento para avaliar a presença de Staphylococcus aureus e Salmonella spp nas amostras. O gênero. S. aureus foi isolado em três amostras pesquisadas (4,2%), com estimativas de contagens de 7,28x103, 1,88x104 e 1,6x103 UFC/g. Apenas uma amostra foi positiva para Salmonella spp (1,4%). Apesar do baixo percentual de amostras contaminadas, a carne de frango comercializada no município oferece riscos à saúde dos consumidores em razão da conservação inadequada em temperaturas de armazenamento superiores às permitidas pela legislação.

Orientador: Angelo Berchieri Junior / Resumo: Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium causam infecções em seres humanos e animais que são frequentemente associadas à extensa colonização intestinal e excreção fecal. A presença de estrutura flagelar no patógeno está relacionada à indução de inflamação intestinal e atenuação de infecção sistêmica no hospedeiro. Por outro lado, a infecção por estirpes aflageladas resulta em pouca inflamação e consequente infecção sistêmica grave. No presente estudo, foi avaliada a hipótese de que a síntese de maior quantidade de flagelina em estirpes de Salmonella geneticamente modificadas poderia levar a infecção sistêmica menos intensa em aves. Para investigar as conseqüências da superprodução de flagelina, foram construídas estirpes de Salmonella Enteritidis e Typhimurium contendo deleções nos genes clpP e fliD (que levam à superexpressão de flagelina) e patogenicidade e imunogenicidade foram comparadas com as respectivas estirpes selvagens em aves infectadas. Os resultados indicaram que o aumento da síntese de flagelina por SE ΔclpPΔfliD e STM ΔclpPΔfliD culmina em déficit da taxa de multiplicação bacteriana. Porém, tais alterações não interferiram na capacidade de colonização cecal e excreção fecal das estirpes mutantes. O mesmo foi observado em fígado e baço, mas após 14 dpi as estirpes mutantes tendem a serem eliminadas destes órgãos. Mesmo com síntese mais elevada de flagelina, as estirpes mutantes recrutaram quantidades semelhantes de linfócitos e macrófagos em tonsila cecal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium cause infections in humans and animals that are often associated with extensive intestinal colonization and faecal shedding. The presence of flagellar structure in the pathogen is related to the induction of intestinal inflammation and attenuation of systemic infection in the host. On the other hand, the absence of flagellin results in severe systemic infection as a result of mild inflammatory intestinal responses provoked by aflagellated strains. The hypothesis that higher flagellin production by Salmonella strains could induce immunogenic response during infection in chickens was evaluated in the present study. To investigate the consequences of flagellin overproduction, strains of Salmonella Enteritidis and Typhimurium containing clpP and fliD deletions (which lead to flagellin overexpression) were constructed, and pathogenicity and immunogenicity were compared with their respective wild-type strains in infected chickens. The results suggested that the increase in flagellin synthesis by SE ΔclpPΔfliD and STM ΔclpPΔfliD culminates in a deficit in the bacterial multiplication rate. However, that changes did not interfere with the capacity for caecal colonization and faecal excretion of mutant strains. The same was observed in the liver and spleen, but after 14 dpi, mutant strains tend to be eliminated from these organs. Even with higher flagellin synthesis, the mutant strains recruited similar amounts of lymphocytes and macro... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-19T13:28:28Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbara de Paiva Mota - 2015.pdf: 1412467 bytes, checksum: c1f8cb7854cf5c173d09ca5c3ccd64f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-19T13:29:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbara de Paiva Mota - 2015.pdf: 1412467 bytes, checksum: c1f8cb7854cf5c173d09ca5c3ccd64f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T13:29:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bárbara de Paiva Mota - 2015.pdf: 1412467 bytes, checksum: c1f8cb7854cf5c173d09ca5c3ccd64f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-07-15 / This study aimed to evaluate the effects of different doses of in natura garlic on the control of Salmonella Infantis and their consequence on performance, fecal excretion of Salmonella and blood parameters in experimentally inoculated broiler chickens. In this experiment we used 256 one-day-old male chicks, distributed in a completely randomized design with eight treatments, four replications with four replicates of eight birds each. The birds were orally inoculated at one-day-old with 0.5 ml of buffered saline, containing approximately 5.0 x 103 CFU / ml of Salmonella Infantis. Treatment 1 (T1) was the control group (Placebo); T2 - received garlic at a dose of 1.5%; T3 - received garlic at a dose of 3.0%; T4 - received garlic at a dose of 4.5%; T5 – was orally inoculated (Positive Control SI); T6 – was orally inoculated and treated with 1.5%; T7 – was orally inoculated and treated with 3.0%; T8 – was orally inoculated and treated with 4.5%. The performance was measured at seven, 21 and 35 days. At the days eight, 15 and 29 four birds for treatment were submitted to six hour fasting, and then they were weighed, euthanized, necropsied, and the organs were collected for weight determination and detection of Salmonella. Cloacal swabs were collected at three, 13, and 28 days and blood samples were collected at 14 and 36 days of age, after fasting for eight hours to evaluate blood parameters. At seven and 21 days, weight gain and final weight were lower in birds fed 4.5% of garlic, and there was no significant difference in the period of 1-35 days. The weight of the intestine and liver at 29 days was higher in birds inoculated and treated with 3.0% of garlic. Spleen weight was higher in birds inoculated at 29 days. Garlic did not inhibit Salmonella invasion in the spleen at the doses used. We found garlic did not reduce the intestinal E. coli population, but it reduced Salmonella. We observed garlic influenced cholesterol levels. In conclusion, fresh garlic in natura at the doses used does not alter the performance, as well as it does not inhibit the migration of Salmonella to the spleen; however, it influences serum cholesterol levels and reduces Salmonella fecal excretion of. / O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes doses do alho in natura no controle de Salmonella Infantis e suas consequências sobre o desempenho, excreção de Salmonella e parâmetros sanguíneos em frangos de corte experimentalmente inoculados. Foram utilizados 256 pintos machos de um dia de idade, distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso com oito tratamentos, quatro repetições e oito aves por unidade experimental. As aves foram inoculadas via oral ao primeiro dia de idade com 0,5 mL de solução salina tamponada, contendo aproximadamente 5,0 x 103 UFC/mL de Salmonella Infantis. O tratamento 1 (T1) consistiu o grupo controle (Placebo); T2- recebeu o alho na dose de 1,5% na ração; T3- recebeu o alho na dose de 3,0% ; T4 – recebeu o alho na dose de 4,5%; T5- grupo inoculado via oral (Controle positivo Salmonella Infantis.); T6- inoculado via oral tratado com 1,5%; T7 – inoculado via oral tratado com 3,0%; T8 – inoculado via oral tratado com 4,5%. O desempenho foi avaliado aos sete, 21 e 35 dias. Aos oito, 15 e 29 dias quatro aves por tratamento foram submetidas a um jejum de seis horas, pesadas, eutanasiadas, necropsiadas e órgãos foram coletados para determinação do peso e para pesquisa de Salmonella. Foram coletados suabes de cloaca aos três, 13 e 28 dias de idade e amostras de sangue aos 14 e 36 dias de idade, após jejum de oito horas, para a avaliação dos parâmetros sanguíneos. Aos sete e 21 dias o ganho de peso e peso final foram menores nas aves que receberam 4,5% de alho, e não houve diferença significativa no período de 1-35 dias. O peso do intestino e do fígado aos 29 dias foi maior nas aves inoculadas e tratadas com 3,0% de alho. O peso do baço foi maior nas aves inoculadas aos 29 dias. Observou-se que o alho nas doses utilizadas não inibiu a invasão de Salmonella no baço e também não reduziu a população intestinal de E. coli, mas reduziu a de Salmonella. Observou-se que o alho influenciou os níveis de colesterol. Conclui-se que o alho in natura nas doses utilizadas não altera o desempenho, assim como não inibi a migração de Salmonella para o baço, mas influencia nos níveis séricos de colesterol e reduz a excreção fecal de Salmonella.

Chapter: 1 Introduction Genus Salmonella is a Gram-negative rod shaped facultative anaerobic bacteria that can survive inside the host macrophages and cause persistent infection. Salmonella Typhimurium, Salmonella Typhi and Salmonella Enteritidis are the serovars, which belong to the Salmonella enterica species. S. Typhi causes typhoid fever in humans. S. Typhimurium is one of the important causes for food poisoning in humans. It causes typhoid like fever in mice and serves as a good model system to study Salmonella pathogenesis. Salmonella infection occurs via the orofecal route following which it invades the intestinal mucosa through several ways, namely by antigen sampling M cells, CD18+ macrophages present in the intestinal lumen or via a forced entry in the non phagocytic enterocytes. Upon entry Salmonella resides in an intracellular phagosomal compartment called the Salmonella containing vacuole (SCV). The SCV only transiently acquires endocytic markers like TfnR, EEA1, Rab4, Rab5, Rab11 and Rab7. It eventually uncouples from the endocytic pathway to avoid lysosomal fusion and ultimately reaches the golgi apparatus achieving a perinuclear position. The mechanisms by which phagocytes kill the virulent Salmonella are not completely understood, however the role of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate (NADPH) phagocytic oxidase system has been strongly implicated. The generation of reactive oxygen species (ROS) occurs via a membrane-bound flavocytochrome b558, consisting of two phagocytic oxidase components (gp91phox and p22phox) and four cytosolic components, p40phox, p47phox, p67phox, and a GTP-binding Rac protein. Further, professional phagocytes like macrophages generate nitric oxide (NO) that acts as a potent agent to limit the growth of many intracellular pathogens including Salmonella. Chapter:2 Resistance to host Nitrosative stress in Salmonella by quenching L-arginine. Arginine is a common substrate for both inducible nitric oxide synthase (iNOS) and arginase. The competition between iNOS and arginase for arginine contributes to the outcome of several parasitic and bacterial infections. Salmonella infection in macrophage cell line RAW264.7 induces iNOS. Because the availability of L-arginine is a major determinant for nitric oxide (NO) synthesis, we hypothesize that in the Salmonella infected macrophages NO production may be regulated by arginase. Here we report for the first time that Salmonella up-regulates arginase II but not arginase I isoform in RAW264.7 macrophages. Blocking arginase increases the substrate L-arginine availability to iNOS for production of more nitric oxide and perhaps peroxynitrite molecules in the infected cells allowing better killing of virulent Salmonella in a NO dependent manner. RAW264.7 macrophages treated with iNOS inhibitor aminoguanidine reverts the attenuation in arginase blocked condition. Further, the NO block created by Salmonella was removed by increasing concentration of L-arginine. In the whole-mice system arginase I, although constitutive, is much more abundant than the inducible arginase II isoform. Inhibition of arginase activity in mice during the course of Salmonella infection reduces the bacterial burden and delays the disease outcome in a NO dependent manner. Chapter:3 Hrg (hydrogen peroxide resistant gene), a LysR type transcriptional regulator confers resistance to oxidative stress in Salmonella LysR type transcriptional regulators are one of the key players that help bacteria adapt to different environments. We have christened STM0952, a putative LysR type transcriptional regulator in Salmonella enterica serovar Typhimurium as the hydrogen peroxide resistance gene (hrg). By generating a knock out of the hrg gene, we demonstrate that the hrg mutant serovar Typhimurium is sensitive to oxidative products of the respiratory burst, specifically to hydrogen peroxide. The hrg mutant is profoundly attenuated in the murine model of infection and shows decreased intracellular proliferation in macrophages. It was also found to induce increased amount of reactive oxygen species and co-localization with gp91phox in the macrophage cell line, when compared to the wild type. An overproducing strain of this gene showed a survival advantage over the wild type Salmonella under hydrogen peroxide induced stress condition. Microarray analysis suggested the presence of a Hrg regulon, which is required for resistance to the toxic oxidative products of the reticulo-endothelial system. Chapter:4 Importance of the host oxidative stress in antigen presentation and its modulation by Salmonella: Role of TLR Synthetic CpG containing oligodeoxynucleotide TLR-9 agonist (CpG ODN) activates innate immunity and can stimulate antigen presentation against numerous intracellular pathogens. We report that Salmonella Typhimurium growth can be inhibited by the CpG ODN treatment in the murine dendritic cells. This inhibitory effect was shown to be mediated by an increased reactive oxygen species (ROS) production. We further show that the CpG ODN treatment of the dendritic cells during Salmonella infection leads to a ROS dependent increased antigen presentation. In addition, TLR-9 signaling inhibitor was able to inhibit the CpG ODN mediated increased antigen presentation, ROS production and pathogen killing. These data indicate that CpG ODN can improve the ability of the murine dendritic cells to contain the growth of the virulent Salmonella through ROS dependent killing and could as well be used as an effective adjuvant in vaccines against Salmonella infection.

Although traditional microbiological methods are accepted standard for Salmonella detection, they are labor intensive and time consuming. Therefore, for food industry and public health, finding sensitive and rapid methods is required. As a rapid and reliable tool, Real-Time PCR is one of the most common methods in molecular detection and research area. The aim of the current study is to develop rapid, sensitive and quantitative Salmonella detection method using Real-Time PCR technique based on inexpensive, easy to produce, convenient and standardized plasmid based positive control for the first time. To achieve this, two plasmids were constructed as reference molecules by cloning two most commonly used Salmonella specific target regions &lsquo / invA and ttrRSBC&rsquo / into them. Standard curves were constructed for the plasmids and reproducibility, PCR efficiency, amplification efficiency values were calculated. To illustrate the applicability of the developed method, enriched (as used commonly for Salmonella detection with Real-Time PCR) 105 to 100 CFU/ml level (estimated by standard plate counts before enrichment) S. Typhimurium ATCC 14028 cultures were tried to detect and quantify, also compared with traditional culture method. In addition, detection limits of the developed technique were determined by serial dilution of DNA extracted from 105 CFU/ml level. The results revealed much faster detection ability of the developed plasmid based Salmonella detection method (in comparison to traditional culture method, ISO 6579:2004) allowing quantitative evaluation with perfect reproducibility, sensitivity (except for lower concentrations for invA target), detection limit, PCR efficiency, amplification efficiency for both invA and ttrRSBC targets. The detection and quantification ability of the method developed by using S. Typhimurium ATCC 14028 cultures were tested also with 15 Salmonella species using milk as a representative food. The results also revealed much faster (in comparison to traditional culture method, ISO 6579:2004) quantitative detection ability of the developed method. Thus, the developed method has great potential to be used in food industry for rapid and quantitative Salmonella detection.

Salmonella é uma das principais causas de Doenças Transmitidas por Alimentos em todo o mundo, sendo que no Estado do Rio Grande do Sul (RS) esse microrganismo tem sido apontado como um dos principais agentes de toxinfecções alimentares nos últimos anos. Neste trabalho foram caracterizados isolados de Salmonella envolvidas em salmoneloses ocorridas no RS, no período de 2007 a 2013. Entre os 163 isolados investigados, 138 (84,7%) foram sorotipificados com S. Enteritidis, enquanto os outros isolados foram S. Schwarzengrund (n = 9 – 5,5 %), S. Typhimurium (n = 6 – 3,7%), S. Infantis (n = 1 – 0,6 %), S. Agona (n = 1 – 0,6 %), S. Derby (n = 1 – 0,6 %), S. London (n = 1 – 0,6 %), S. Give (n = 1 – 0,6 %), S. Panama (n = 1 – 0,6 %) e S. enterica (n = 4 – 2,5 %). Os principais alimentos envolvidos nos surtos foram maionese caseira (17,39%), seguido dos produtos de confeitaria (15,94 %) e carnes (12,32 %). A resistência da S. Enteritidis a 12 agentes antimicrobianos também foi investigada. As maiores porcentagens de resistência foram encontradas em relação à nitrofurantoína (94,2 %) e ao ácido nalidíxico (89,1 %). A resistência para duas drogas foi verificada em 80,43 % dos isolados. Sendo que a multirresistência para três ou cinco antimicrobianos foi verificada em quatro e dois isolados, respectivamente. Quando os isolados foram submetidos à PCR-Ribotipificação, apenas um perfil de bandas foi identificado. Os resultados de PCR-Ribotipificação sugerem que uma mesma cepa de S. Enteritidis foi isolada a partir de alimentos envolvidos em salmoneloses ocorridas em diferentes municípios do Estado do RS no período de 2007 a 2013. Uma vez que o mesmo perfil de bandas foi identificado em S. Enteritidis causadoras de salmoneloses, durante 1999 a 2006, os resultados indicam que a mesma cepa de S. Enteritidis tem causado surtos alimentares no RS, durante o período de 1999 a 2013. / Salmonella is a major cause of Foodborne Diseases worldwide, and in the State of Rio Grande do Sul (RS) this microorganism has been identified as the main agent of foodborne diseases in last years. In this work, Salmonella isolates responsible for salmonellosis occurred in the State of RS, in the period 2007 to 2013 were characterized. Among the 163 isolates investigated, 138 (84.7 %) were serotyped as S. Enteritidis, whereas the other isolates were S. Schwarzengrund (n = 9 – 5.5 %), S. Typhimurium (n = 6 – 3.7 %), S. Infantis (n = 1 – 0.6 %), S. Agona (n = 1 – 0.6 %), S. Derby (n = 1 – 0.6%), S. London (n = 1 – 0.6 %), S. Give (n = 1 – 0.6 %), S. Panama (n = 1 – 0.6 %) and S. enterica (n = 4 – 2.5 %). The main food vehicles identified were homemade mayonnaise (17.39 %), followed by pastry products (15.94 %) and beef (12.32 %). The S. Enteritidis resistance to 12 antimicrobial agents was investigated. The highest percentages of resistance were found to nitrofurantoin (94.2 %) and nalidixic acid (89.1 %). The resistance to two different drugs was observed in 80.43 % of the isolates. Multidrug-resistance for three to five antimicrobials was observed in four and two isolates, respectively. When the isolates were analysed by PCR-Ribotyping, only one banding profile was identified. The results of PCR-Ribotyping suggest that the same strain of S. Enteritidis was isolated from foods involved in salmonelloses occurred in different municipalities of the State of RS in the period 2007-2013. Since the same banding pattern was found in strains involved in salmonellosis outbreaks of 1999 to 2006, results indicated that the same strain of S. Enteritidis has caused salmonellosis outbreaks in RS, during the period of 1999 to 2013.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6020.pdf: 1682477 bytes, checksum: 5dd37051fd1570e2897bd8af550c27c3 (MD5) Previous issue date: 2014-05-29 / Financiadora de Estudos e Projetos / Salmonellosis is an illness caused by bacteria of the genus Salmonella, a leading infectious disease worldwide. Due to the importance of this infection forward to eating habits, the search for a new compound that can contribute to current therapy against intestinal inflammation caused by Salmonellosis is of great value. The goal of this research was evaluate of this treatment effect with extract of Harpagophytum procumbens ( Hp ) in murine intestinal salmonellosis . In this research were realized counting of total cells and differential cell ( leukocytes, neutrophils and mononuclear cells) , dosages of cytokines (TNF- α , IL-12 , IL-10 and IL-4 ) and histopathological analysis of the liver and small intestine, at third and seventh day after the infection on animals treated with Hp and with animals didn t treated with. The animals were divided in: infected ( SE ) , infected and treated with Hp ( SE + HP ) and control group( C ). Balb / c mice ( female) were infected ( v.o ) with S. Enteritidis ATCC 13076 ( 1x108 UFC - 100 mL / animal) . The SE + HP group was treated with 150 mg / animal daily with Hp . The pathology of the liver and small intestine was prepared and stained with HE. Our results showed that there was an increase of leukocytes, specifically mononuclear cells analyzed in different compartments ( blood and CSF ), increased neutrophils in the blood in animals infected with SE on day 7 after infection. However, treatment with Hp was able to down modulate the recruitment of mononuclear cells on day 7 into the peritoneal cavity and negatively modulates the number of neutrophils in the same period. The levels of TNF-α showed a decrease on day 7 after treatment with Hp, suggesting a biological effect - down regulation - the inflammatory process in these animals . Furthermore, we also observed that animals treated with Hp infected with SE had a reduction in the number of neutrophils and mononuclear cells in the blood and decrease of IL -12. The production of IL-4 showed an increase in the + SE group HP suggesting that animals infected with S. Enteretidis and treated with H. procumbens appears to favor a microenvironment that directs the immune response profile of Th2 to Th1, whereas IL- 12 showed a decrease. IL- 10 has important regulatory effects on immunological and inflammatory responses mediated predominantly by macrophages. Our results show an increase of IL-10 in animals infected with SE, and this increase seems to be related to the severity of salmonellosis. Treatment with Hp stimulated inhibitory activity of IL - 10, favoring slight inhibition of the inflammatory process, on day 7 after infection. In the histopathological analysis of the liver observed that there was no difference between the groups, suggesting a local infection, since the blood culture was negative, carrying no systemic infection. In the small intestine was observed after 72 h in the SE group discrete wrinkle this epithelium, suggesting the invasion of S. Enteritidis, which was also observed hypertrophy of the wall of the villi and mild inflammatory infiltrate. In animals that received treatment with Hp hypertrophy was reduced with preservation of the villi of the intestinal architecture 7 days after infection. Thus, we suggest a possible role of Hp in modulating immune factors involved in the recruitment of inflammatory cells in the intestine of animals infected with SE, favoring discrete modulation of the inflammatory process in this model. / A Salmonelose é uma doença causada pela bactéria entérica do gênero Salmonella, uma das principais doenças infecciosas em todo o mundo. Devido à importância dessa infecção frente aos hábitos alimentares, a busca de um novo composto que possa contribuir com a terapia atual contra a inflamação intestinal causada pela Salmonelose é de grande valia. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do tratamento com o extrato etanólico da Harpagophytum procumbens (Hp) na salmonelose intestinal murina. Neste estudo foram realizadas contagens das células totais e diferenciais (leucócitos, neutrófilos e células mononucleares), dosagem de citocinas (TNF-α, IL-12, IL-10 e IL-4) e analise histopatológica do fígado e intestino delgado ( 3º e 7º dia após a infecção) em animais tratados ou não com Hp. Os animais foram divididos em grupos: somente infectado (SE), infectado e tratado com Hp (SE+HP) e controle (C). Camundongos Balb/c (fêmeas) foram infectados (v.o.) com S. Enteritidis ATCC 13076 (1x108 UFC 100 μL/animal). O grupo SE+HP foi tratado com 150 μg/animal com Hp diariamente. O anatomopatológico do fígado e intestino delgado foi preparado e corado com HE. Nossos achados mostraram que, houve aumento de leucócitos, especificamente células mononucleares nos diferentes compartimentos analisados (sangue e LPC), aumento de neutrófilos no sangue nos animais infectados com SE no 7º dia após infecção. Entretanto, o tratamento com Hp foi capaz de modular negativamente o recrutamento de células mononucleares no 7º dia para a cavidade peritoneal e modulou negativamente o numero de neutrófilos no sangue no mesmo período. Os níveis de TNF-α apresentaram diminuição no 7º dia após tratamento com Hp, sugerindo um efeito biológico - down regulation - do processo inflamatório nesses animais. Além disso, observamos também que, animais tratados com Hp e infectados com SE tiveram redução no número de neutrófilos e células mononucleares no sangue e diminuição de IL-12. A produção de IL-4 apresentou aumento no grupo SE+HP sugerindo que animais infectados por S. Enteretidis e tratados com H. procumbens parece favorecer um microambiente que direcione o perfil da resposta imune de Th1 para Th2, visto que a IL-12 apresentou diminuição. A IL-10 tem efeitos regulatórios importantes sobre as respostas imunológicas e inflamatórias, sendo predominantemente mediada por macrófagos. Nossos resultados mostram aumento de IL-10 nos animais infectados com SE, e esse aumento parece estar relacionado com a gravidade da salmonelose. O tratamento com Hp estimulou atividade inibitória de IL-10, favorecendo discreta inibição do processo inflamatório, no 7º dia após a infecção. Nas analises histopatológicas do fígado observamos que, não houve diferença entre os grupos, sugerindo uma infecção local, visto que a hemocultura foi negativa, portando não houve infecção sistêmica. No intestino delgado observou após 72 h no grupo SE discreto enrugamento deste epitélio, o que sugere a invasão da S. Enteritidis, sendo observado também hipertrofia da parede das vilosidades e discreto infiltrado inflamatório. Nos animais que receberam tratamento com Hp houve uma redução da hipertrofia das vilosidades com preservação da arquitetura intestinal 7 dias após a infecção. Assim, sugerimos um possível papel da Hp em modular fatores imunológicos envolvidos no recrutamento de células inflamatórias no intestino de animais infectados com SE, favorecendo discreta modulação do processo inflamatório neste modelo.

A Salmonella é um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos. Dentre os sorotipos, a Salmonella Heidelberg (SH) vem se destacando nas monitorias dos plantéis avícolas devido ao fato de possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e possuir cepas multirresistentes aos antibacterianos. Aditivos Eubióticos, como probióticos e prebióticos vem sendo avaliados, não para substituir totalmente os antimicrobianos, mas para ser uma ferramenta estratégica para diminuir seu uso. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de dois probióticos e um prebiótico contra um desafio horizontal de Salmonella Heidelberg em frangos de corte, através da contagem de UFC/g de conteúdo cecal e sob os parâmetros zootécnicos. Foram utilizadas 224 aves, distribuídas em 16 boxes de 2m2 cada. As aves foram agrupadas em 4 tratamentos com 4 repetições de 14 aves por boxe, um total de 56 aves por grupo em um delineamento em blocos casualizado (DBC). Foi testado um prebiótico constituído por Mananoligossacarídeos (MOS) associado a um fermentado de Bacillus subtilis (Pre1) fornecido no 2º e 14º dias de idade, por gavagem oral, e mais dois probióticos, um constituído por 11 cepas de Lactobacillus (Pro1) fornecido no 1º, 17º e 18º dias, na água de bebida, e outro constituído de esporos de Bacillus subtilis (Pro2) fornecido na ração durante todo período experimental. A inoculação de SH foi aos 2 dias de idade usando (1,0x106 UFC/ave) por gavagem oral em 4 aves denominadas contaminadas por boxe, as demais 10 aves foram denominadas não contaminadas para avaliar a contaminação horizontal. Semanalmente as aves foram pesadas e calculado seu consumo de ração em cada grupo. Aos 28 dias de idade, 40 aves não contaminadas por grupo foram sacrificadas e avaliado a contagem de UFC/g do conteúdo cecal. Os resultados obtidos nas contagens de UFC/g de conteúdo cecal em cada tratamento Pre1, Pro1 e Pro2 não apresentaram diferenças significativas (P>0.05) em relação ao grupo controle. O resultado zootécnico apresentou apenas diferenças significativas (P<0.05) na conversão alimentar, com resultados favoráveis ao uso dos probióticos e prebiótico nos períodos finais de desenvolvimento das aves 14 a 21 e 21 a 28 dias de idade. / Salmonella is one of the leading foodborne pathogens. Among the serotypes, Salmonella Heidelberg (SH) has been standing out in the creation of chickens because of the fact of having a large number of reservoirs, presenting nonspecific serotypes and multidrug-resistant strains to antibacterial. Eubiótics additives such as probiotics and prebiotic are being evaluated not to fully replace antibiotics, but to be a strategic tool to reduce their use. This study aimed to evaluate the effect of two probiotics and prebiotic against a horizontal challenge Salmonella Heidelberg in broilers through count CFU/g of cecal contents and under the zootechnical parameters. 224 chickens were used, distributed in 16 boxes of 2m2 every. The chickens were grouped into 4 treatments with 4 replications of 14 chickens every boxe, a total of 56 chickens per group on a design in casualized blocks (DBC). It has been tested a prebiotic consisting mananoligossacarids (MOS) associated with a fermentation of Bacillus subtilis (Pre1) provided on the 2 and 14 days of age by oral gavage, and two probiotics, one composed of 11 Lactobacillus strains (Pro1) provided at 1, 17 and 18 days, in drinking water, and another composed of Bacillus subtilis spores (Pro2) supplied the feed all through the experimental period. Inoculation with SH was at 2 days of age using (1,0x106 UFC/chicken) by oral gavage for 4 chicks denominated contaminated by boxe, the other 10 chicks were denominated non contaminated to evaluate the horizontal contamination. The chickens were weighed a weekly basis, and feed consumption calculated from each group. At 28 days of age, 40 poultry non contaminated per group were sacrificed and we evaluated the counts CFU/g of cecal content. The results obtained for the count of CFU/g of cecal content in every Pre1 treatment, Pro1 and Pro2 no significant differences (P>0.05) compared to the control group. The zootechnical results presented only significant differences (P<0.05) feed conversion, with results favorable to the use of probiotics and prebiotics in late periods of growth of the poultry 14 to 21 and from 21 to 28 days.

A Salmonella é um dos mais importantes patógenos veiculados por alimentos. Dentre os sorotipos, a Salmonella Heidelberg (SH) vem se destacando nas monitorias dos plantéis avícolas devido ao fato de possuir um grande número de reservatórios, apresentar sorotipos inespecíficos quanto aos hospedeiros e possuir cepas multirresistentes aos antibacterianos. Aditivos Eubióticos, como probióticos e prebióticos vem sendo avaliados, não para substituir totalmente os antimicrobianos, mas para ser uma ferramenta estratégica para diminuir seu uso. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de dois probióticos e um prebiótico contra um desafio horizontal de Salmonella Heidelberg em frangos de corte, através da contagem de UFC/g de conteúdo cecal e sob os parâmetros zootécnicos. Foram utilizadas 224 aves, distribuídas em 16 boxes de 2m2 cada. As aves foram agrupadas em 4 tratamentos com 4 repetições de 14 aves por boxe, um total de 56 aves por grupo em um delineamento em blocos casualizado (DBC). Foi testado um prebiótico constituído por Mananoligossacarídeos (MOS) associado a um fermentado de Bacillus subtilis (Pre1) fornecido no 2º e 14º dias de idade, por gavagem oral, e mais dois probióticos, um constituído por 11 cepas de Lactobacillus (Pro1) fornecido no 1º, 17º e 18º dias, na água de bebida, e outro constituído de esporos de Bacillus subtilis (Pro2) fornecido na ração durante todo período experimental. A inoculação de SH foi aos 2 dias de idade usando (1,0x106 UFC/ave) por gavagem oral em 4 aves denominadas contaminadas por boxe, as demais 10 aves foram denominadas não contaminadas para avaliar a contaminação horizontal. Semanalmente as aves foram pesadas e calculado seu consumo de ração em cada grupo. Aos 28 dias de idade, 40 aves não contaminadas por grupo foram sacrificadas e avaliado a contagem de UFC/g do conteúdo cecal. Os resultados obtidos nas contagens de UFC/g de conteúdo cecal em cada tratamento Pre1, Pro1 e Pro2 não apresentaram diferenças significativas (P>0.05) em relação ao grupo controle. O resultado zootécnico apresentou apenas diferenças significativas (P<0.05) na conversão alimentar, com resultados favoráveis ao uso dos probióticos e prebiótico nos períodos finais de desenvolvimento das aves 14 a 21 e 21 a 28 dias de idade. / Salmonella is one of the leading foodborne pathogens. Among the serotypes, Salmonella Heidelberg (SH) has been standing out in the creation of chickens because of the fact of having a large number of reservoirs, presenting nonspecific serotypes and multidrug-resistant strains to antibacterial. Eubiótics additives such as probiotics and prebiotic are being evaluated not to fully replace antibiotics, but to be a strategic tool to reduce their use. This study aimed to evaluate the effect of two probiotics and prebiotic against a horizontal challenge Salmonella Heidelberg in broilers through count CFU/g of cecal contents and under the zootechnical parameters. 224 chickens were used, distributed in 16 boxes of 2m2 every. The chickens were grouped into 4 treatments with 4 replications of 14 chickens every boxe, a total of 56 chickens per group on a design in casualized blocks (DBC). It has been tested a prebiotic consisting mananoligossacarids (MOS) associated with a fermentation of Bacillus subtilis (Pre1) provided on the 2 and 14 days of age by oral gavage, and two probiotics, one composed of 11 Lactobacillus strains (Pro1) provided at 1, 17 and 18 days, in drinking water, and another composed of Bacillus subtilis spores (Pro2) supplied the feed all through the experimental period. Inoculation with SH was at 2 days of age using (1,0x106 UFC/chicken) by oral gavage for 4 chicks denominated contaminated by boxe, the other 10 chicks were denominated non contaminated to evaluate the horizontal contamination. The chickens were weighed a weekly basis, and feed consumption calculated from each group. At 28 days of age, 40 poultry non contaminated per group were sacrificed and we evaluated the counts CFU/g of cecal content. The results obtained for the count of CFU/g of cecal content in every Pre1 treatment, Pro1 and Pro2 no significant differences (P>0.05) compared to the control group. The zootechnical results presented only significant differences (P<0.05) feed conversion, with results favorable to the use of probiotics and prebiotics in late periods of growth of the poultry 14 to 21 and from 21 to 28 days.