As sementes, caule e raízes de várias espécies do gênero Entada, tais como Entada africana, Entada abyssinica e Entada phaseoloides são usadas na medicina tradicional para o tratamento de diversas doenças, como doenças do fígado, doença do sono, e hemorróidas. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) é uma planta nativa e comum em matas costeiras do oeste do México, América Central, Colômbia e Brasil. A raiz de E. polystachya é utilizada no tratamento de doenças venéreas e como diurético. No entanto, a composição química de E. polystachya é pouco conhecida e o potencial tóxico desta espécie não foram ainda investigados. Portanto, devido à utilização popular de espécies Entada e o interesse na obtenção de novas moléculas com potencial farmacológico, especialmente atividade antiproliferativa, se faz importante avaliar os efeitos tóxicos destas plantas. No presente estudo, foram avaliadas as propriedades citotóxicas, genotóxicas e mutagênicas do extrato bruto de sementes de E. polystachya (EBSEP) em dois modelos biológicos: em células de fibroblastos de pulmão de hamster chinês (células V79) e na bactéria Salmonela typhimurium. Em células V79 tratadas com concentrações crescentes de EBSEP, a atividade citotóxica, foi determinada usando ensaio de MTT, ocorre na concentração de 10 g/mL após 2 h de exposição. Consistentemente, o tratamento das células V79 por 2 h com EBSEP aumentaram os níveis de peroxidação lipídica e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), caracterizando um estado de estresse oxidatívo Nas concentrações maiores de 10 g/mL, o EBSEP induziu a formação de quebras de DNA em células V79, como evidenciado pelo ensaio cometa alcalino. O EBSEP induziu a danos oxidativos ao DNA, determinados pelo ensaio cometa modificado empregando as endonucleases formamidopirimidina DNA-glicosilase (Fpg) e endonuclease III (endoIII). O tratamento também induziu aumento no número de células binucleadas e na frequência de micronúcleos no teste micronúcleo em células V79, salientando o potencial citotóxico e mutagênico do extrato. O EBSEP pode induzir alteração no quadro de leitura em S. typhimurium. Assim, moléculas presentem no extrato podem apresentar um comportamento similar a um agente intercalante. Por fim, a análise por EMAR (Espectrometria de Massa de Alta Resolução) mostrou a presença de glicose, aminoácidos e os compostos: 6-hidroxi-2,6-dimetil-2, 7 - ácido octadienoico (C10H15O3) e 3-deoxysapanchalcona (C16H31O2) foram propostos ser uma saponina e uma chalcona, respectivamente. Portanto, devido ao reconhecido potencial tóxico de saponinas e chalconas, estas moléculas podem estar modulando os efeitos tóxicos do extrato. Em resumo, os efeitos celulares do EBSEP parecem ser muito complexos e ligados a habilidade de moléculas presentes no extrato, como a saponina e a chalcona, de induzir distúrbios na homeostase redox celular e na capacidade de intercalar no DNA, que conduzem a dano e a quebras do DNA e morte celular. / The seeds, stalk and roots of several related Entada species, namely Entada africana, Entada abyssinica and Entada phaseoloides are used in traditional medicine for the treatment of diverse diseases, such as liver diseases, sleeping sickness, and hemorrhoids. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) is a native and common plant in coastal thickets from western Mexico through Central America to Colombia and Brazil. The root is used in venereal diseases treatment and as diuretic. However, chemical composition of E. polystachya is poorly understood and the potential toxic this specie have not been previously investigated. Then, due to popular use of Entada species and the interest in obtaining new molecules with pharmacological potential, especially antiproliferative activity, it is important to evaluate the toxic effects of these plants. In the present study, we evaluated the putative cytotoxic, genotoxic, and mutagenic properties of E. polystachya crude extract seed (EPCSE) in two biological models: in V79 Chinese lung fibroblast cells and Salmonella typhimurium. In V79 cells treated with increasing concentrations of EPCSE, the cytotoxic activity, as determined using MTT assay, occurs in doses up to 10 g/mL after 2 h of exposure. Accordingly, the treatment of V79 cells for 2 h with EPCSE increased lipid peroxidation and superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, characterizing an oxidative stress status At the doses up to 10 g/mL, EPCSE generates DNA strand breaks in V79 cells, as observed using the alkaline comet assay. EPCSE induced pronounced oxidative DNA damage, determined using modified comet assay with the enzymes formamidopyrimidine DNA-glycosylase (Fpg) and endonuclease III (Endo III). The treatment also induced an increase in the number of binucleated and micronucleus frequency cells in the micronucleus test in V79 cells, showing cytotoxic potential and mutagenic risk this extract. EPCSE is able to induce frameshift mutations in S. typhimurium. Thus, molecules in EPCSE presents a behavior of an intercalanting agent. Finally, the analysis by HRMS (High Resolution Mass Spectrometry) showed the presence of glucose, amino acids and the compounds: 6-hydroxy-2,6-dimethyl-2,7- octadienoic acid (C10H15O3) and 3-deoxysappanchalcone (C16H31O2), which were proposed to be a saponin and chalcone, respectively. Therefore, due the toxic potencial of saponins and chalcones, these molecules may be modulating the toxic effects of the extract. In summary, the cellular effects of EPCSE appear to be complex and linked to its ability of molecules in extract, such as saponin and chalcone, to impose disturbs in redox cellular homeostasis and in the ability to intercalate into DNA, which lead to DNA damage and breakage, cellular injury and cell death.

As sementes, caule e raízes de várias espécies do gênero Entada, tais como Entada africana, Entada abyssinica e Entada phaseoloides são usadas na medicina tradicional para o tratamento de diversas doenças, como doenças do fígado, doença do sono, e hemorróidas. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) é uma planta nativa e comum em matas costeiras do oeste do México, América Central, Colômbia e Brasil. A raiz de E. polystachya é utilizada no tratamento de doenças venéreas e como diurético. No entanto, a composição química de E. polystachya é pouco conhecida e o potencial tóxico desta espécie não foram ainda investigados. Portanto, devido à utilização popular de espécies Entada e o interesse na obtenção de novas moléculas com potencial farmacológico, especialmente atividade antiproliferativa, se faz importante avaliar os efeitos tóxicos destas plantas. No presente estudo, foram avaliadas as propriedades citotóxicas, genotóxicas e mutagênicas do extrato bruto de sementes de E. polystachya (EBSEP) em dois modelos biológicos: em células de fibroblastos de pulmão de hamster chinês (células V79) e na bactéria Salmonela typhimurium. Em células V79 tratadas com concentrações crescentes de EBSEP, a atividade citotóxica, foi determinada usando ensaio de MTT, ocorre na concentração de 10 g/mL após 2 h de exposição. Consistentemente, o tratamento das células V79 por 2 h com EBSEP aumentaram os níveis de peroxidação lipídica e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), caracterizando um estado de estresse oxidatívo Nas concentrações maiores de 10 g/mL, o EBSEP induziu a formação de quebras de DNA em células V79, como evidenciado pelo ensaio cometa alcalino. O EBSEP induziu a danos oxidativos ao DNA, determinados pelo ensaio cometa modificado empregando as endonucleases formamidopirimidina DNA-glicosilase (Fpg) e endonuclease III (endoIII). O tratamento também induziu aumento no número de células binucleadas e na frequência de micronúcleos no teste micronúcleo em células V79, salientando o potencial citotóxico e mutagênico do extrato. O EBSEP pode induzir alteração no quadro de leitura em S. typhimurium. Assim, moléculas presentem no extrato podem apresentar um comportamento similar a um agente intercalante. Por fim, a análise por EMAR (Espectrometria de Massa de Alta Resolução) mostrou a presença de glicose, aminoácidos e os compostos: 6-hidroxi-2,6-dimetil-2, 7 - ácido octadienoico (C10H15O3) e 3-deoxysapanchalcona (C16H31O2) foram propostos ser uma saponina e uma chalcona, respectivamente. Portanto, devido ao reconhecido potencial tóxico de saponinas e chalconas, estas moléculas podem estar modulando os efeitos tóxicos do extrato. Em resumo, os efeitos celulares do EBSEP parecem ser muito complexos e ligados a habilidade de moléculas presentes no extrato, como a saponina e a chalcona, de induzir distúrbios na homeostase redox celular e na capacidade de intercalar no DNA, que conduzem a dano e a quebras do DNA e morte celular. / The seeds, stalk and roots of several related Entada species, namely Entada africana, Entada abyssinica and Entada phaseoloides are used in traditional medicine for the treatment of diverse diseases, such as liver diseases, sleeping sickness, and hemorrhoids. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) is a native and common plant in coastal thickets from western Mexico through Central America to Colombia and Brazil. The root is used in venereal diseases treatment and as diuretic. However, chemical composition of E. polystachya is poorly understood and the potential toxic this specie have not been previously investigated. Then, due to popular use of Entada species and the interest in obtaining new molecules with pharmacological potential, especially antiproliferative activity, it is important to evaluate the toxic effects of these plants. In the present study, we evaluated the putative cytotoxic, genotoxic, and mutagenic properties of E. polystachya crude extract seed (EPCSE) in two biological models: in V79 Chinese lung fibroblast cells and Salmonella typhimurium. In V79 cells treated with increasing concentrations of EPCSE, the cytotoxic activity, as determined using MTT assay, occurs in doses up to 10 g/mL after 2 h of exposure. Accordingly, the treatment of V79 cells for 2 h with EPCSE increased lipid peroxidation and superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, characterizing an oxidative stress status At the doses up to 10 g/mL, EPCSE generates DNA strand breaks in V79 cells, as observed using the alkaline comet assay. EPCSE induced pronounced oxidative DNA damage, determined using modified comet assay with the enzymes formamidopyrimidine DNA-glycosylase (Fpg) and endonuclease III (Endo III). The treatment also induced an increase in the number of binucleated and micronucleus frequency cells in the micronucleus test in V79 cells, showing cytotoxic potential and mutagenic risk this extract. EPCSE is able to induce frameshift mutations in S. typhimurium. Thus, molecules in EPCSE presents a behavior of an intercalanting agent. Finally, the analysis by HRMS (High Resolution Mass Spectrometry) showed the presence of glucose, amino acids and the compounds: 6-hydroxy-2,6-dimethyl-2,7- octadienoic acid (C10H15O3) and 3-deoxysappanchalcone (C16H31O2), which were proposed to be a saponin and chalcone, respectively. Therefore, due the toxic potencial of saponins and chalcones, these molecules may be modulating the toxic effects of the extract. In summary, the cellular effects of EPCSE appear to be complex and linked to its ability of molecules in extract, such as saponin and chalcone, to impose disturbs in redox cellular homeostasis and in the ability to intercalate into DNA, which lead to DNA damage and breakage, cellular injury and cell death.

As sementes, caule e raízes de várias espécies do gênero Entada, tais como Entada africana, Entada abyssinica e Entada phaseoloides são usadas na medicina tradicional para o tratamento de diversas doenças, como doenças do fígado, doença do sono, e hemorróidas. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) é uma planta nativa e comum em matas costeiras do oeste do México, América Central, Colômbia e Brasil. A raiz de E. polystachya é utilizada no tratamento de doenças venéreas e como diurético. No entanto, a composição química de E. polystachya é pouco conhecida e o potencial tóxico desta espécie não foram ainda investigados. Portanto, devido à utilização popular de espécies Entada e o interesse na obtenção de novas moléculas com potencial farmacológico, especialmente atividade antiproliferativa, se faz importante avaliar os efeitos tóxicos destas plantas. No presente estudo, foram avaliadas as propriedades citotóxicas, genotóxicas e mutagênicas do extrato bruto de sementes de E. polystachya (EBSEP) em dois modelos biológicos: em células de fibroblastos de pulmão de hamster chinês (células V79) e na bactéria Salmonela typhimurium. Em células V79 tratadas com concentrações crescentes de EBSEP, a atividade citotóxica, foi determinada usando ensaio de MTT, ocorre na concentração de 10 g/mL após 2 h de exposição. Consistentemente, o tratamento das células V79 por 2 h com EBSEP aumentaram os níveis de peroxidação lipídica e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), caracterizando um estado de estresse oxidatívo Nas concentrações maiores de 10 g/mL, o EBSEP induziu a formação de quebras de DNA em células V79, como evidenciado pelo ensaio cometa alcalino. O EBSEP induziu a danos oxidativos ao DNA, determinados pelo ensaio cometa modificado empregando as endonucleases formamidopirimidina DNA-glicosilase (Fpg) e endonuclease III (endoIII). O tratamento também induziu aumento no número de células binucleadas e na frequência de micronúcleos no teste micronúcleo em células V79, salientando o potencial citotóxico e mutagênico do extrato. O EBSEP pode induzir alteração no quadro de leitura em S. typhimurium. Assim, moléculas presentem no extrato podem apresentar um comportamento similar a um agente intercalante. Por fim, a análise por EMAR (Espectrometria de Massa de Alta Resolução) mostrou a presença de glicose, aminoácidos e os compostos: 6-hidroxi-2,6-dimetil-2, 7 - ácido octadienoico (C10H15O3) e 3-deoxysapanchalcona (C16H31O2) foram propostos ser uma saponina e uma chalcona, respectivamente. Portanto, devido ao reconhecido potencial tóxico de saponinas e chalconas, estas moléculas podem estar modulando os efeitos tóxicos do extrato. Em resumo, os efeitos celulares do EBSEP parecem ser muito complexos e ligados a habilidade de moléculas presentes no extrato, como a saponina e a chalcona, de induzir distúrbios na homeostase redox celular e na capacidade de intercalar no DNA, que conduzem a dano e a quebras do DNA e morte celular. / The seeds, stalk and roots of several related Entada species, namely Entada africana, Entada abyssinica and Entada phaseoloides are used in traditional medicine for the treatment of diverse diseases, such as liver diseases, sleeping sickness, and hemorrhoids. Entada polystachya (L.) DC. (Leguminosae) is a native and common plant in coastal thickets from western Mexico through Central America to Colombia and Brazil. The root is used in venereal diseases treatment and as diuretic. However, chemical composition of E. polystachya is poorly understood and the potential toxic this specie have not been previously investigated. Then, due to popular use of Entada species and the interest in obtaining new molecules with pharmacological potential, especially antiproliferative activity, it is important to evaluate the toxic effects of these plants. In the present study, we evaluated the putative cytotoxic, genotoxic, and mutagenic properties of E. polystachya crude extract seed (EPCSE) in two biological models: in V79 Chinese lung fibroblast cells and Salmonella typhimurium. In V79 cells treated with increasing concentrations of EPCSE, the cytotoxic activity, as determined using MTT assay, occurs in doses up to 10 g/mL after 2 h of exposure. Accordingly, the treatment of V79 cells for 2 h with EPCSE increased lipid peroxidation and superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, characterizing an oxidative stress status At the doses up to 10 g/mL, EPCSE generates DNA strand breaks in V79 cells, as observed using the alkaline comet assay. EPCSE induced pronounced oxidative DNA damage, determined using modified comet assay with the enzymes formamidopyrimidine DNA-glycosylase (Fpg) and endonuclease III (Endo III). The treatment also induced an increase in the number of binucleated and micronucleus frequency cells in the micronucleus test in V79 cells, showing cytotoxic potential and mutagenic risk this extract. EPCSE is able to induce frameshift mutations in S. typhimurium. Thus, molecules in EPCSE presents a behavior of an intercalanting agent. Finally, the analysis by HRMS (High Resolution Mass Spectrometry) showed the presence of glucose, amino acids and the compounds: 6-hydroxy-2,6-dimethyl-2,7- octadienoic acid (C10H15O3) and 3-deoxysappanchalcone (C16H31O2), which were proposed to be a saponin and chalcone, respectively. Therefore, due the toxic potencial of saponins and chalcones, these molecules may be modulating the toxic effects of the extract. In summary, the cellular effects of EPCSE appear to be complex and linked to its ability of molecules in extract, such as saponin and chalcone, to impose disturbs in redox cellular homeostasis and in the ability to intercalate into DNA, which lead to DNA damage and breakage, cellular injury and cell death.

Fotossensibilização refere-se ao aumento da resposta à radiação ultravioleta da luz solar, causada por um agente fotodinâmico na pele. A sensibilidade à fotossensibilização de 80 cordeiros mestiços desmamados e manejados em lotação rotativa, durante 120 dias, foi avaliada em pastagem de Brachiaria brizantha cv. Marandu. Os cordeiros foram suplementados a 1% do seu peso corporal com os tratamentos, a saber: A - suplemento basal com 12% PB; B - suplemento com 18% de PB; C - suplemento com 18% de PB + propionato de Zn e D - suplemento com 18% de PB + cloreto de colina protegida. Ao término do experimento os animais foram abatidos. Os objetivos foram: avaliar o efeito da adaptação dos animais suplementados às condições de manejo em Brachiaria brizantha e a toxidez da planta aos cordeiros; caracterizar as causas da fotossensibilização; viabilizar o possível controle da verminose associada ao manejo de cordeiros em lotação rotativa e à suplementação mineral e proteica, com ou sem adição de aditivos; relacionar os teores de saponina e a presença de esporos de Pithomyces chartarum em amostras da forragem à ocorrência de casos de fotossensibilização hepatógena. O delineamento experimental foi em blocos completos e casualizados, com quatro tratamentos e quatro repetições, num total de 5 animais por tratamento. Realizou-se a análise da variância para as variáveis e as médias foram comparadas pelo teste t-Student ao nível de significância de 5%. Foram observadas baixas contagens de esporos de Pithomyces chartarum (0 - 15.000 esporos) na parte senescente da planta. A concentração de saponina protodioscina variou de 0,52 a 0,65%. Do 8º ao 58º dia ocorreram 20% de mortalidade dos animais. A avaliação histopatológica, do fígado dos animais que vieram a óbito, foi compatível com as lesões causadas pela saponina. Os padrões histológicos das lesões hepáticas encontradas nos animais, ao final do experimento, não diferiram entre os tratamentos, bem como para as análises bioquímicas: colesterol, triglicerídeos, bilirrubinas, proteína total, albumina, creatinina, ureia, AST, GGT. Ocorreram diferenças nas concentrações séricas de bilirrubinas, proteínas, albumina, AST, GGT, ureia, creatinina, colesterol, triglicerídeos, entre cordeiros sobreviventes e os que morreram. O método rotativo foi efetivo no controle da verminose, ficando a contagem de ovos por grama de fezes (OPG) abaixo de 500 ao final do experimento, não ocorrendo diferença entre os suplementos proteicos e entre os aditivos utilizados. Não houve efeito no desempenho dos cordeiros, que chegaram ao final do experimento, pela inclusão de suplementos proteicos e de aditivos. / Photosensitization refers to increase in response to ultraviolet radiation from sunlight, caused by a photodynamic agent into the skin. The sensitivity of the photosensitization at 80 crossbred lambs weaned was evaluated on Brachiaria brizantha cv. Marandu managed in rotational grazing for 120 days. Lambs were supplemented to 1% of their body weight with different treatments: A - basal supplement with 12% CP; B - supplement with 18% CP; C - supplement with18% CP + zinc proprionate and D - supplement with18 % of CP + protected choline chloride. At the end of the experiment the animals were slaughtered. The objectives were to evaluate the effect of adaptation of animals supplemented to handling Brachiaria brizantha and toxicity of the plant to lambs weaned; to characterize the causes of photosensitivity, the possible control of parasitism associated with the management of sheep grazing on rotational grazing, mineral supplementation and protein with or without the addition of additives; to relate the levels of saponin and the presence of spores Pithomyces chartarum in samples of forage and the occurrence of hepatic photosensitization. The experimental design was a complete randomized block design and assigned to four treatments and four replications for a total of five animals per treatment. The analysis of variance was performed and the means test t-Student a significance level of 5% for the effect of each treatment was used. Low count of Pithomyces chartarum spores (spores 0-15,000) in the senescent part of the plant was observed. The concentration of saponin protodioscine ranged from 0.52 to 0.65 %. Occurred between the 8º and 58º day mortality of 20 % of the animals. Histopathology of the liver of animals that died during the experiment was consistent with lesions determined by saponin. The histological patterns of liver lesions found in animals at the end of the experiment did not differ between treatments, as well as, for biochemical analysis: cholesterol, triglycerides, bilirubin, total protein, albumin, creatinine, urea, AST and GGT. There were differences in serum bilirubin, protein, albumin, AST, GGT, urea, creatinine, cholesterol and triglycerides between survivors and that died. The rotational grazing system was effective in the control of nematode parasites getting below 500 EPG at the end of the experiment, there was no difference between the protein concentrations, nor for the additives used. The additives zinc oxide and choline chloride did not improve the performance of sheep.

Submitted by Leticia Schettini (leticia@ufrrj.br) on 2017-04-27T12:32:10Z No. of bitstreams: 1 2003 - Patricia Miranda da Costa.pdf: 2556665 bytes, checksum: 84eaee321ba021876a1fd855d0767602 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-27T12:32:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003 - Patricia Miranda da Costa.pdf: 2556665 bytes, checksum: 84eaee321ba021876a1fd855d0767602 (MD5) Previous issue date: 2003-11-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Solvent partition and chromatographic fractionation of metanolic extract from the leaves and wood of L. arianeae lead to the isolation of triterpenes, one carboidrate, saponin and flavonoid. 3b,6b,19a -trihydroxiursa-12-en- 28-oic acid, 3b,6b,24-trihydroxiursa-12-en- 28-oic acid, 3,5,7-trihydroxi-4?-metoxi,6-flavone-( sulfonate), 3b-hydroxiolean-12-en-28- ?ico acid, 3b-O-b-D-galactopiranosyl-(6?-1 para hydroxi benzoil)-ursa-12-en-28-oic acid, 1-metyl glycopiranosyl and mixture of two flavonoids. The 3,5,7-trihydroxi-4?-metoxi,6- flavone-(sulfonate) and 3b-O-b-D-galactopiranosyl-(6?-1 para hydroxi benzoil)-ursa-12-en- 28-oic acid are being descricted for the first time in the literature. The IR, 1H NMR, 13C NMR and MS spectra analysis was used for structural determination. / O fracionamento dos extratos das folhas e madeira de L. arianeae atrav?s de processo de parti??o com solventes e t?cnicas cromatogr?ficas conduziu ao isolamento dos ?cidos 3b,6b, 19a -triidroxiursan-12-eno-28-?ico, 3b,6b,24,19a-tetraidroxiursan-12-eno-28-?ico, 3b-hidroxiolean-12-eno-28-?ico, da 3,5,7-triidroxi, 4?-metoxi, 6-sulfonato, flavona, da 3b- O-b-D-galactopiranosil-(6?-p-hidroxi-benzo?la)-ursan-12-eno-28-?ico, da 1-metil glicose, e da mistura de flavon?ides. As estruturas das subst?ncias foram deduzidas atrav?s da an?lise dos espectros de IV, RMN de 1H e 13C, incluindo experimentos 2D e espectro de massas das subst?ncias naturais e dos derivados. Este ? o primeiro registro destes constituintes no g?nero Licania. A flavona e saponina est?o sendo descritos pela primeira vez na literatura. As folhas e as cascas da esp?cie E. longipes foram submetidas a extra??o com solventes org?nicos e os extratos foram fracionados atrav?s de parti??o e t?cnicas cromatogr?ficas. As fra??es reunidas foram submetidas a t?cnicas cromatogr?ficas e cristaliza??o. Esses processamentos conduziram ao isolamento dos ?cidos 1a,2b,3a,19a -tetraidroxiursan-12- eno-28-?ico, da saponina 3b-O-b-D-glicopiranosil-sitosterol e dos triterpenos fridelinol e 3b,24-diidroxifridelano. As estruturas das subst?ncias foram deduzidas atrav?s das t?cnicas citadas acima. Este ? o primeiro registro desta saponina no g?nero Eschweilera. O triterpeno 3b,24-diidroxifridelano foi descrito pela primeira vez na literatura (COSTA, P.M. & Carvalho, M. G., Annais da Academia Brasileira de Ci?ncias, 2003).

Fotossensibilização refere-se ao aumento da resposta à radiação ultravioleta da luz solar, causada por um agente fotodinâmico na pele. A sensibilidade à fotossensibilização de 80 cordeiros mestiços desmamados e manejados em lotação rotativa, durante 120 dias, foi avaliada em pastagem de Brachiaria brizantha cv. Marandu. Os cordeiros foram suplementados a 1% do seu peso corporal com os tratamentos, a saber: A - suplemento basal com 12% PB; B - suplemento com 18% de PB; C - suplemento com 18% de PB + propionato de Zn e D - suplemento com 18% de PB + cloreto de colina protegida. Ao término do experimento os animais foram abatidos. Os objetivos foram: avaliar o efeito da adaptação dos animais suplementados às condições de manejo em Brachiaria brizantha e a toxidez da planta aos cordeiros; caracterizar as causas da fotossensibilização; viabilizar o possível controle da verminose associada ao manejo de cordeiros em lotação rotativa e à suplementação mineral e proteica, com ou sem adição de aditivos; relacionar os teores de saponina e a presença de esporos de Pithomyces chartarum em amostras da forragem à ocorrência de casos de fotossensibilização hepatógena. O delineamento experimental foi em blocos completos e casualizados, com quatro tratamentos e quatro repetições, num total de 5 animais por tratamento. Realizou-se a análise da variância para as variáveis e as médias foram comparadas pelo teste t-Student ao nível de significância de 5%. Foram observadas baixas contagens de esporos de Pithomyces chartarum (0 - 15.000 esporos) na parte senescente da planta. A concentração de saponina protodioscina variou de 0,52 a 0,65%. Do 8º ao 58º dia ocorreram 20% de mortalidade dos animais. A avaliação histopatológica, do fígado dos animais que vieram a óbito, foi compatível com as lesões causadas pela saponina. Os padrões histológicos das lesões hepáticas encontradas nos animais, ao final do experimento, não diferiram entre os tratamentos, bem como para as análises bioquímicas: colesterol, triglicerídeos, bilirrubinas, proteína total, albumina, creatinina, ureia, AST, GGT. Ocorreram diferenças nas concentrações séricas de bilirrubinas, proteínas, albumina, AST, GGT, ureia, creatinina, colesterol, triglicerídeos, entre cordeiros sobreviventes e os que morreram. O método rotativo foi efetivo no controle da verminose, ficando a contagem de ovos por grama de fezes (OPG) abaixo de 500 ao final do experimento, não ocorrendo diferença entre os suplementos proteicos e entre os aditivos utilizados. Não houve efeito no desempenho dos cordeiros, que chegaram ao final do experimento, pela inclusão de suplementos proteicos e de aditivos. / Photosensitization refers to increase in response to ultraviolet radiation from sunlight, caused by a photodynamic agent into the skin. The sensitivity of the photosensitization at 80 crossbred lambs weaned was evaluated on Brachiaria brizantha cv. Marandu managed in rotational grazing for 120 days. Lambs were supplemented to 1% of their body weight with different treatments: A - basal supplement with 12% CP; B - supplement with 18% CP; C - supplement with18% CP + zinc proprionate and D - supplement with18 % of CP + protected choline chloride. At the end of the experiment the animals were slaughtered. The objectives were to evaluate the effect of adaptation of animals supplemented to handling Brachiaria brizantha and toxicity of the plant to lambs weaned; to characterize the causes of photosensitivity, the possible control of parasitism associated with the management of sheep grazing on rotational grazing, mineral supplementation and protein with or without the addition of additives; to relate the levels of saponin and the presence of spores Pithomyces chartarum in samples of forage and the occurrence of hepatic photosensitization. The experimental design was a complete randomized block design and assigned to four treatments and four replications for a total of five animals per treatment. The analysis of variance was performed and the means test t-Student a significance level of 5% for the effect of each treatment was used. Low count of Pithomyces chartarum spores (spores 0-15,000) in the senescent part of the plant was observed. The concentration of saponin protodioscine ranged from 0.52 to 0.65 %. Occurred between the 8º and 58º day mortality of 20 % of the animals. Histopathology of the liver of animals that died during the experiment was consistent with lesions determined by saponin. The histological patterns of liver lesions found in animals at the end of the experiment did not differ between treatments, as well as, for biochemical analysis: cholesterol, triglycerides, bilirubin, total protein, albumin, creatinine, urea, AST and GGT. There were differences in serum bilirubin, protein, albumin, AST, GGT, urea, creatinine, cholesterol and triglycerides between survivors and that died. The rotational grazing system was effective in the control of nematode parasites getting below 500 EPG at the end of the experiment, there was no difference between the protein concentrations, nor for the additives used. The additives zinc oxide and choline chloride did not improve the performance of sheep.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-02-23T13:12:51Z No. of bitstreams: 1 Rafael Otaviano do Rego.pdf: 5990645 bytes, checksum: 1f444589a74016f428debc0d941c2609 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-23T13:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rafael Otaviano do Rego.pdf: 5990645 bytes, checksum: 1f444589a74016f428debc0d941c2609 (MD5) Previous issue date: 2017-02-14 / The peri-partum period is a critical time for small ruminants because nutritional requirements are very high and feed intake is often limited. Nutritional diseases, such as pregnancy toxemia, can develop. Farmers try to limit these problems. β-glucan and saponin-based plant extracts have been shown to have favourable effects on animal production: immune-modulation for the former and reduced methane production and modification of rumen fermentation patterns for the latter. However, little is known about their effects on metabolism. Therefore, the general objective was to better understand the effects of 1) β-glucan injections and 2) dietary saponin, on metabolism and rumen fermentation in small ruminants during the transition period. The influence of β1,3-glucan (i.m. injections, 1ml/animal/week for 60 days) on the metabolic profile of 14 Santa Inês ewes in the last weeks of gestation was studied. Two groups of ewes were formed in late gestation: a glucan group (G, n=7) and a control group (C, n=7). Nutritional requirements during the experiment were covered. Blood samples were collected throughout the study. Blood samples were analysed for metabolites, ions and enzymes. All ewes were clinically healthy. Glucose, L-lactate, non-esterified fatty acids and β-hydroxybutyrate peaked at parturition (p<0.05). Aspartate aminotransferase (AST) was higher in C vs. G (p<0.05) and there was a similar trend for fructosamine and albumin (p<0.10). Urea tended to be higher in G vs. C (p<0.10). In conclusion, the changes with time were consistent with a change in physiological status (gestation/lactation). β1,3-glucan appeared to protect muscle and liver because AST levels were lower than in controls and it did not negatively affect metabolism. The influence of a dietary saponin-based additive (25g saponin/animal/day) on the metabolic and rumen fermentation profile of Saanen and Alpine dairy goats during two different metabolic situations: metabolic neutrality (mid-lactation) and metabolic imbalance (pregnancy/lactation) was studied in two experiments. Experiment 1, used mid-lactating goats (Saponin group (S), n=10; Control group (C), n=10). The 6 week experiment was divided into: 1 week of C diet, 4 weeks either S or C and 1 week C. Experiment 2, used peri-parturient goats (Saponin group (S), n=12; Control group (C), n=12). The 7 week experiment was divided into: 1 week C diet, 4 weeks either S or C (stopping at parturition) and 2 weeks C. Nutritional requirements during the experiments were covered. Blood samples and rumen fluid were collected throughout both experiments. Blood samples were analysed for metabolites, ions and enzymes. All the goats were clinically healthy. There was no effect of saponin in experiment 1 on animal husbandry measures, plasma metabolites and ruminal fermentation (p>0.05). The ruminal acetate to propionate ratio tended to be affected by treatment (S < C; p=0.057). There was no effect of saponin in experiment 2 on blood metabolites (p>0.05), except for plasma urea (S > C; p=0.054). Total protozoa numbers tended to be affected by treatment (S > C; p<0.10). Most of the animal husbandry, plasma and ruminal variables showed a time effect around parturition (p<0.05). In conclusion, dietary saponin during mid-lactation or the peri-partum period had little effect on metabolism and ruminal fermentation. The trends observed in blood urea, total protozoa count and acetate/propionate ratio could be potentially beneficial. Lastly, the potential for saponin to influence ruminal fermentation may depend on the level, the period of administration and the type of diet. β-glucan and saponin did not have a negative effect on metabolism and it would be interesting to conduct further work in animals suffering from pregnancy toxemia. Studies could also be conducted on the possible immune actions of β-glucan and saponin. / O período do periparto é um momento crítico para os pequenos ruminantes devido às necessidades nutricionais serem muito elevadas e também devido à ingestão de alimentos que muitas vezes é limitada. As doenças nutricionais, como por exemplo, a toxemia da prenhez, pode desenvolver-se, no qual os criadores tentam evitar esses problemas de diversas maneiras. O medicamento β-glucana e o extrato de planta a base de saponina demonstraram ter efeitos favoráveis na produção animal: imuno-modulação para o primeiro e uma redução da produção de metano e modificação dos padrões de fermentação ruminal para esta última. No entanto, pouco se sabe sobre os seus efeitos sobre o metabolismo. Portanto, o objetivo geral foi entender melhor os efeitos de 1) injeções da β-glucana e 2) aditivo saponina, no metabolismo e fermentação ruminal em pequenos ruminantes durante o período de transição. Estudou-se a influência do β1,3-glucana (injeções i.m. 1 ml/animal/semana por 60 dias) no perfil metabólico de 14 ovelhas Santa Inês nas últimas semanas de gestação. Dois grupos de ovelhas foram formados no final da gestação: um grupo glucana (G, n=7) e um grupo controle (C, n=7). Requisitos nutricionais durante o experimento foram cobertos segundo o período metabólico estudado e amostras de sangue foram coletadas ao longo do estudo. As amostras de sangue foram analisadas quanto a metabolitos, ions e enzimas. Todas as ovelhas estavam clinicamente saudáveis. A glicose, o L-lactato, os ácidos graxos não esterificados e o β-hidroxibutirato atingiram o pico no parto (p<0,05). A aspartato aminotransferase (AST) foi maior em C vs. G (p<0,05) e houve tendência semelhante para a fructosamina e a albumina (p<0,10). A ureia apresentou uma tendência a ser maior em G vs. C (p<0,10). Em conclusão, as mudanças com o tempo foram consistentes com uma mudança no estado fisiológico (gestação/lactação). A β1,3-glucana pareceu proteger o músculo e o fígado porque os níveis de AST eram mais baixos no grupo controle e não afetou negativamente o metabolismo. A influência de um aditivo à base de saponina na dieta (25g de saponina/animal/dia) sobre o perfil metabólico e de fermentação ruminal de cabras leiteiras Saanen e Alpina durante duas situações metabólicas diferentes: equilibrio metabólico (meio da lactação) e desequilíbrio metabólico (gestação/lactação) foram estudados em dois experimentos. No experimento 1, utilizaram-se cabras de no meio de lactação (grupo saponina (S), n=10; grupo de controle (C), n=10). O experimento de seis semanas foi dividido em: uma semana de dieta C, quatro semanas S ou C e uma semana C. Experimento 2, utilizou cabras peri-parturientes (grupo Saponina (S), n=12; grupo Controle (C), n=12). O experimento de 7 semanas foi dividido em: uma semana de dieta C, quatro semanas de S ou C (até o momento do parto) e duas semanas de C. Os requisitos nutricionais durante os experimentos foram cobertos. Amostras de sangue e fluido ruminal foram coletados ao longo de ambos os experimentos. As amostras de sangue foram analisadas quanto aos metabolitos, íons e enzimas. Todas as cabras estavam clinicamente saudáveis. Não houve efeito da saponina no experimento 1 em medidas de produção animal, metabolitos plasmáticos e fermentação ruminal (p>0,05). Em relação acetato-propionato ruminal houve uma tendência a ser afetada pelo tratamento (S<C; p=0,057). Não houve efeito da saponina no experimento 2 nos metabólitos do sangue (p>0,05), com exceção da uréia plasmática (S>C; p=0,054). O número total de protozoários tendeu a ser afetado pelo tratamento (S>C, p<0,10). A maior parte das variáveis de produção animal, plasma e ruminal apresentou efeito de tempo no momento do parto (p<0,05). Em conclusão, a saponina na dieta durante o período médio de lactação ou no período periparto teve pouco efeito sobre o metabolismo e fermentação ruminal. As tendências observadas na ureia no sangue, na contagem total de protozoários e na relação acetato / propionato poderiam ser potencialmente benéficas. Por fim, o potencial para a saponina influenciar a fermentação ruminal pode depender do nível, do período de administração e do tipo de dieta. A β-glucana e saponina não têm um efeito negativo sobre o metabolismo e seria interessante realizar um trabalho posterior em animais que sofrem da toxemia da prenhez. Estudos também poderiam ser realizados sobre as possíveis ações imunológicas da β-glucana e da saponina.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-10-17T16:40:01Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago de Jesus do Carmo - 2014.pdf: 1906807 bytes, checksum: e5d7d3a5e67cae3ea55b63178617ba2e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-10-17T17:12:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago de Jesus do Carmo - 2014.pdf: 1906807 bytes, checksum: e5d7d3a5e67cae3ea55b63178617ba2e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-17T17:12:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago de Jesus do Carmo - 2014.pdf: 1906807 bytes, checksum: e5d7d3a5e67cae3ea55b63178617ba2e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-04-30 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The pastures in the Brazilian Midwest are mostly formed by grasses of the genus Brachiaria. It is difficult to improve these pastures due to the large quantity of saponins found in these grasslands, causing poisoning in animals leading to a low level of production or even death. Antioxidants optimize animal production and decrease the effects of saponins on the animal, but also, improves meat appearance and increases its shelf life. To evaluate the effects of supplementation with different antioxidants on performance, oxidative stress, as well as quantitative and qualitative aspects of the carcass in feedlot cattle, an experiment was conducted with 40 Nelore cattle fed Brachiaria hay and subjected to five treatments (control and groups with antioxidants: zinc, selenium, vitamin E and selenium + vitamin E). There were eight animals per group, each animal considered a replication. Tissue composition as well as carcass proximate composition, color, tenderness, pH and fatty acid profile were evaluated. In the present experimental conditions, supplementation of cattle fed Brachiaria brizantha hay and supplemented with antioxidants, did not lead to difference for carcass traits and meat quality. However, supplementation with vitamin E reduced Omega 3 levels in this study. / As pastagens na região Centro-Oeste são em sua grande maioria formadas por gramíneas do gênero braquiária. O sistema de produção a pasto tem grandes dificuldades de melhorias, o qual apresenta um problema a ser enfrentado, que é a quantidade elevada de saponinas presentes na pastagem, as quais causam intoxicações nos animais levando-os a um baixo nível de produção ou até a sua morte. Os antioxidantes otimizam a produção animal e diminuem os efeitos das saponinas no animal, como também melhora o aspecto da carne e aumenta sua vida útil. Para avaliar os efeitos da suplementação com diferentes antioxidantes sobre o desempenho, estresse oxidativo e aspectos quantitativos e qualitativos de carcaça e da carne de bovinos confinados, foi realizado um experimento com 40 bovinos Nelore, alimentados com feno de braquiária e submetidos a cinco tratamentos (grupos controle e grupos suplementados com antioxidantes: zinco, selênio, vitamina E e selênio + vitamina E), sendo oito animais por grupo, cada animal uma repetição. Para tanto, avaliou-se na carcaça a composição tecidual e na carne a composição centesimal, cor, maciez, pH e perfil de ácidos graxos. Nas condições do presente experimento a suplementação de bovinos alimentados com feno de Brachiaria brizantha e suplementados com os antioxidantes acima citados não promoveu diferença para as características da carcaça e da carne. Porém, observa-se que a suplementação com vitamina E reduziu os valores de Omega 3.

O fungo Moniliophthora perniciosa, fitopatógeno responsável pela doença vassoura-de-bruxa no cacaueiro, é responsável por reduzir a produtividade de frutos de cacau nas Américas. Visto que os métodos atuais de controle desta doença não são eficientes, faz-se necessário a busca por compostos para seu controle químico. Os produtos naturais têm contribuído na síntese de novos pesticidas e a família Solanaceae é reconhecida como uma fonte promissora de compostos antifúngicos. Neste contexto, este trabalho teve por objetivo explorar o potencial biológico e químico de metabólitos secundários produzidos por plantas da família Solanaceae com atividade antifúngica à M. perniciosa. Para tanto, extratos aquosos de folhas de dez plantas foram avaliados quanto sua atividade inibitória a M. perniciosa e, observou-se maior atividade antifúngica pelos extratos de Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Destas, as plantas S. seaforthianum e B. uniflora mostram-se como promissoras e foram selecionadas para isolamento de seus compostos ativos. A partir do extrato aquoso de S. seaforthianum obteve-se duas frações constituídas por saponinas furostanas, a mistura (25R)-karatavioside C / (25R)-purpureagitoside, com CI50 de 40,9 &mu;g mL-1, e a mistura (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, com CI50 de 22,3 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial. E, a partir do extrato aquoso de B. uniflora obteve-se três compostos da classe das saponinas espirostanas, o composto karatavioside A e os compostos parcialmente identificados BuM8i4, com aglicona identificada como (25R)-yucagenina, e BuM8i6, com aglicona identificada como (25R)-diosgenina, todos com CI50.< 15,63 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial de M. perniciosa. Todos os compostos caracterizados neste trabalho estão sendo relatados pela primeira vez a partir das plantas estudas e também para atividade antifúngica. / The fungal phytopathogen Moniliophthora perniciosa is the causal agent of Witches\' Broom disease and the main responsible by limiting cacao production in Americas. The current disease control methods are not efficient and new antifungal compounds are necessary to the chemical management. Natural products has contributed to the development of natural product-based pesticides and the Solanaceae plants are known as a promising source of antifungal compounds. In this context, this work aimed to explore the biological and chemical potential of secondary metabolites produced by Solanaceae plants with antifungal activity against M. perniciosa. For this, antifungal activity of water extracts from leaves of ten plants was evaluated against M. perniciosa and the best results were observed by using extracts from Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Among these plants, S. seaforthianum and B. uniflora were selected for active compounds isolation due to their promising characteristics. From water extract of S. seaforthianum two furostan saponin fractions were obtained, the mixture (25R)-karatavioside C / (25R)- purpureagitoside, with IC50 of 40,9 &mu;g mL-1, and the mixture (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, with IC50 of 22,3 &mu;g mL-1 to the mycelial growth. From water extract of B. uniflora three spirostan saponin compounds were obtained, the compound karatavioside A and the compounds partially identified BuM8i4, with aglycone identified as (25R)-yucagenina, and BuM8i6, with aglycone identified as (25R)- diosgenina, all these compounds showed IC50< 15,63 &mu;g mL-1 to the mycelial growth of M. perniciosa. All compounds characterized in this study were obtained for the first time from these plants and also described about their antifungal activity.

O fungo Moniliophthora perniciosa, fitopatógeno responsável pela doença vassoura-de-bruxa no cacaueiro, é responsável por reduzir a produtividade de frutos de cacau nas Américas. Visto que os métodos atuais de controle desta doença não são eficientes, faz-se necessário a busca por compostos para seu controle químico. Os produtos naturais têm contribuído na síntese de novos pesticidas e a família Solanaceae é reconhecida como uma fonte promissora de compostos antifúngicos. Neste contexto, este trabalho teve por objetivo explorar o potencial biológico e químico de metabólitos secundários produzidos por plantas da família Solanaceae com atividade antifúngica à M. perniciosa. Para tanto, extratos aquosos de folhas de dez plantas foram avaliados quanto sua atividade inibitória a M. perniciosa e, observou-se maior atividade antifúngica pelos extratos de Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Destas, as plantas S. seaforthianum e B. uniflora mostram-se como promissoras e foram selecionadas para isolamento de seus compostos ativos. A partir do extrato aquoso de S. seaforthianum obteve-se duas frações constituídas por saponinas furostanas, a mistura (25R)-karatavioside C / (25R)-purpureagitoside, com CI50 de 40,9 &mu;g mL-1, e a mistura (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, com CI50 de 22,3 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial. E, a partir do extrato aquoso de B. uniflora obteve-se três compostos da classe das saponinas espirostanas, o composto karatavioside A e os compostos parcialmente identificados BuM8i4, com aglicona identificada como (25R)-yucagenina, e BuM8i6, com aglicona identificada como (25R)-diosgenina, todos com CI50.< 15,63 &mu;g mL-1 ao crescimento micelial de M. perniciosa. Todos os compostos caracterizados neste trabalho estão sendo relatados pela primeira vez a partir das plantas estudas e também para atividade antifúngica. / The fungal phytopathogen Moniliophthora perniciosa is the causal agent of Witches\' Broom disease and the main responsible by limiting cacao production in Americas. The current disease control methods are not efficient and new antifungal compounds are necessary to the chemical management. Natural products has contributed to the development of natural product-based pesticides and the Solanaceae plants are known as a promising source of antifungal compounds. In this context, this work aimed to explore the biological and chemical potential of secondary metabolites produced by Solanaceae plants with antifungal activity against M. perniciosa. For this, antifungal activity of water extracts from leaves of ten plants was evaluated against M. perniciosa and the best results were observed by using extracts from Cestrum nocturnum, Solanum seaforthianum e Brunfelsia uniflora. Among these plants, S. seaforthianum and B. uniflora were selected for active compounds isolation due to their promising characteristics. From water extract of S. seaforthianum two furostan saponin fractions were obtained, the mixture (25R)-karatavioside C / (25R)- purpureagitoside, with IC50 of 40,9 &mu;g mL-1, and the mixture (25R)-timosaponin H1/ (25R)-uttroside B, with IC50 of 22,3 &mu;g mL-1 to the mycelial growth. From water extract of B. uniflora three spirostan saponin compounds were obtained, the compound karatavioside A and the compounds partially identified BuM8i4, with aglycone identified as (25R)-yucagenina, and BuM8i6, with aglycone identified as (25R)- diosgenina, all these compounds showed IC50< 15,63 &mu;g mL-1 to the mycelial growth of M. perniciosa. All compounds characterized in this study were obtained for the first time from these plants and also described about their antifungal activity.