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Avaliação in vitro da citotoxicidade e genotoxicidade de diferentes cimentos endodônticos em fibroblastos V79 /

Silva, Gleyce Oliveira. January 2011 (has links)
Orientador: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Banca: Bruno das Neves Cavalcanti / Banca: Márcia Carneiro Valera / Resumo: Cimentos endodônticos podem liberar componentes tóxicos que interagem com os tecidos periapicais. A proposta deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de quatro cimentos endodônticos (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus e cimento experimental à base de óleo-resina da Copaifera multijuga) utilizando ensaios biológicos. Os cimentos foram mixados e incubados em estufa de umidade relativa a 37°C com 5% CO2 por 24 h. A exposição do meio de cultura aos cimentos ocorreu após 12 h do endurecimento dos cimentos. Células V79 foram expostas às diluições dos extratos por 24 h e a sobrevivência celular foi mensurada fotometricamente. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de MTT em espectrofotômetro e a genotoxicidade, indicada pela formação de micronúcleos, foi determinada após 24h do período de exposição. Os resultados da taxa de sobrevivência celular e a quantidade de danos ao DNA foram estatisticamente analisados pelo teste de Kruskal-Wallis (p<0,05). A citotoxicidade em relação ao grupo controle decresceu na seguinte ordem EndoREZ > Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. A formação de micronúcleos (MN) para indicar a genotoxicidade foi induzida somente pelos extratos do EndoREZ, sendo mais genotóxico que o EMS (controle positivo) / Abstract: Endodontic sealers could release toxic components that may interact with periapical tissues. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of four endodontic sealers (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus and experimental root canal sealer- based on Copaifera multijuga oil-resin) using routine cell biology techniques. The sealers were mixed and incubated in a humidified incubator at 37°C with 5% CO2 in air for 24 h. The exposure of the culture medium to the sealers occurred after 12 h of cure. V79 cells were exposed to dilutions of this extracts for 24 h and cell survival was measured photometrically. The cell viability was measured by MTT test in a spectrophotometer and the genotoxicity as indicated by the formation of micronuclei was determined after a 24 h exposure period The results of the cell survival rates and the amount of DNA damage was statistically analyzed for Kruskal-Wallis (p<0.05) test. The ranking of cell survival from the most to the least toxic material was: EndoREZ> Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. The formation of micronuclei (MN) to indicate genotoxicity was induced only by extracts of EndoREZ, being more genotoxic than EMS (positive control) / Mestre
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Avaliação da resistência da união de cimentos obturadores resinosos à dentina radicular, por meio do teste push-out acoplado ao microtomógrafo / Evaluation of bond strength of resin-based sealers to radicular dentin by push-out test coupled to a microtomography

Manoel Brito Júnior 05 December 2014 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar a resistência de união à dentina da obturação de canais radiculares com cimentos à base de resina epóxica e de metacrilato, por meio do dispositivo material testing stage (MTS) acoplado ao microtomógrafo (&mu;CT), bem como avaliar qualitativamente a ruptura da massa obturadora por meio de imagens de &mu;CT. Além disso, foram utilizados o método de elementos finitos 3D e microscopia confocal de varredura a laser (MCVL) para verificar, respectivamente, a distribuição de tensões e presença de gaps na interface de união. Raízes de caninos superiores com 17 mm de comprimento foram submetidas ao preparo biomecânico com instrumentos rotatórios de níquel titânio, sob irrigação constante com NaOCl 1% e irrigação final com EDTA 17%. Os canais foram obturados pela técnica da condensação lateral com cones de guta percha e os cimentos: AH Plus, Epiphany SE ou RealSeal XT. As raízes foram armazenadas (100% de umidade, 37°C) por três vezes o tempo de endurecimento do cimento utilizado. Após este período, as raízes foram seccionadas para obtenção de dois slices (2 mm) de cada terço radicular. Um slices de cada terço foi submetido ao teste de push-out através de dispositivo mecânico MTS acoplado ao &mu;CT SkyScan 1174 (50kV, 80mA). Após o escaneamento inicial do slices, com resolução isotrópica de 13 &mu;m, filtro de 0.5 mm de Al e 360º de rotação, o teste mecânico foi iniciado até que ocorresse o deslocamento do material. Novo escaneamento foi realizado com os mesmos parâmetros iniciais, que determinou regiões de ruptura da massa obturadora em secções axiais. Os tipos de falhas foram avaliados por MCVL e classificadas em: adesivas, coesivas e mistas. Modelos 3D de elementos finitos foram gerados para os terços cervical, médio e apical, a partir de imagens de &mu;CT. No segundo slices de cada terço radicular, foi aferido o percentual de gaps do material obturador às paredes do canal radicular, por meio de MCVL e do programa OLS 4000. Os dados foram analisados por testes estatísticos paramétricos e não paramétricos (p<0,05). O cimento AH Plus [1,89 (1,01/2,39) MPa] apresentou maior resistência de união à dentina (p<0,001) quando comparado aos cimentos Epiphany SE [0,36 (0,29/0,44) MPa] e RealSeal XT [0,43 (0,32/0,54) MPa]. Para os cimentos AH Plus e RealSeal XT, os terços cervical e médio apresentaram maior resistência de união à dentina que o terço apical (p<0,001). As rupturas ocorreram nas margens da massa obturadora para o cimento AH Plus, enquanto os cimentos Epiphany SE e RealSeal XT tiveram este tipo de ruptura, bem como na própria massa obturadora. No cimento AH Plus, a interface de união mostrou maior concentração de tensões, que foram distribuídas principalmente na massa obturadora para os cimentos Epiphany SE e RealSeal XT. Houve predominância de falhas adesivas e mistas em todos os cimentos. Em relação ao percentual de gaps, o cimento AH Plus apresentou as menores médias (11,14% ± 4,03), com diferença estatisticamente significante (p<0,05) dos cimentos Epiphany SE (55,39% ± 13,46) e RealSeal XT (62,50% ± 6,72). O cimento à base de resina epóxica (AH Plus) apresentou a maior resistência de união à dentina e teve comportamento diferente em relação aos outros cimentos, quanto à ruptura da massa obturadora e distribuição de tensão interfacial. Além disso, o cimento AH Plus apresentou o menor percentual de gaps entre o material obturador e as paredes do canal radicular / The aim of this study was to evaluate the bond strength of epoxy resin- and methacrylate-based sealers to root dentin, using the material testing stage (MTS) coupled to a micro-computed tomography (&mu;CT) device and to qualitatively assess the root-filling mass rupture by &mu;CT images. Additional analyses were conducted using the 3D element finite method and confocal laser scanning microscopy (CLSM) to verify, respectively, the stress distribution and percentage of gaps on dentin filling material interfaces. Maxillary canine roots measuring 17 mm were subjected to biomechanical preparation with nickel-titanium rotary instruments under constant irrigation with 1% NaOCl and final irrigation with 17% EDTA. Canals were filled by the lateral condensation technique with gutta-percha cones and the following sealers: AH Plus, Epiphany SE or RealSeal XT. The roots were stored (100% humidity, 37 °C) for a period three times longer than the setting time required for each sealer and then sectioned transversally to obtain two 2-mm-thick slices from each root third. One slice of each third was subjected to the push-out test using the MTS coupled to the SkyScan 1174 &mu;CT (50 kV, 80 mA) with 13 &mu;m isotropic resolution, 0.5 mm Al filter and 360° rotation. After the initial scanning of the slice, the mechanical test was performed until material dislodgement occurred. A new scanning was performed using the same initial parameters. The axial sections obtained were used for qualitative evaluation of the root-filling mass rupture. Failure modes were assessed by CLSM and classified as adhesive, cohesive or mixed. 3D &mu;CT based finite element models were generated from cervical, middle and apical root thirds to simulate the push-out test. The second slice of each root third was used to assess the percentage of gaps between the filling material and the root canal walls, using CLSM with the aid of the OLS 4000 software. The data were analyzed by parametric and non-parametric tests (p<0.05). AH Plus presented higher bond strength [1.89 (1.01/2.39) MPa] to dentin (p<0.001) than Epiphany SE [0.36 (0.29/0.44) MPa] and RealSeal XT [0.43 (0.32/0.54) MPa]. For AH Plus and RealSeal XT sealers, the cervical and middle thirds showed higher bond strength to dentin than the apical third (p <0.001). The ruptures occurred in the margins of the root filling mass for AH Plus, while Epiphany SE and RealSeal XT had this type of rupture as well as in the root filling mass itself. AH Plus showed stress concentration on bond interface, while in Epiphany SE and RealSeal XT the stress was mainly distributed on the root-filling mass. Adhesive and mixed failures were the predominant fracture modes in all sealers. Regarding the percentage of gaps between the filling material and the root canal walls, AH Plus presented the lowest means (11.14%±4.03), differing significantly (p<0.05) from Epiphany SE (55.39%±13.46) and RealSeal XT (62.50%±6.72) sealers. The epoxy resin-based sealer (AH Plus) presented the highest bond strength to dentin, which had different behavior from other sealers regarding root-filling mass rupture and interfacial stress distribution. Moreover, AH Plus resulted in the lowest percentage of gaps between the material and the root canal walls
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Avaliação in vitro da citotoxicidade e genotoxicidade de diferentes cimentos endodônticos em fibroblastos V79

Silva, Gleyce Oliveira [UNESP] 15 June 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-15Bitstream added on 2014-06-13T20:31:49Z : No. of bitstreams: 1 silva_go_me_sjc.pdf: 1111622 bytes, checksum: e539d76b4d826d8bae2e60a44de64ea5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cimentos endodônticos podem liberar componentes tóxicos que interagem com os tecidos periapicais. A proposta deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de quatro cimentos endodônticos (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus e cimento experimental à base de óleo-resina da Copaifera multijuga) utilizando ensaios biológicos. Os cimentos foram mixados e incubados em estufa de umidade relativa a 37°C com 5% CO2 por 24 h. A exposição do meio de cultura aos cimentos ocorreu após 12 h do endurecimento dos cimentos. Células V79 foram expostas às diluições dos extratos por 24 h e a sobrevivência celular foi mensurada fotometricamente. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de MTT em espectrofotômetro e a genotoxicidade, indicada pela formação de micronúcleos, foi determinada após 24h do período de exposição. Os resultados da taxa de sobrevivência celular e a quantidade de danos ao DNA foram estatisticamente analisados pelo teste de Kruskal-Wallis (p<0,05). A citotoxicidade em relação ao grupo controle decresceu na seguinte ordem EndoREZ > Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. A formação de micronúcleos (MN) para indicar a genotoxicidade foi induzida somente pelos extratos do EndoREZ, sendo mais genotóxico que o EMS (controle positivo) / Endodontic sealers could release toxic components that may interact with periapical tissues. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of four endodontic sealers (EndoREZ, RoekoSeal, AHPlus and experimental root canal sealer- based on Copaifera multijuga oil-resin) using routine cell biology techniques. The sealers were mixed and incubated in a humidified incubator at 37°C with 5% CO2 in air for 24 h. The exposure of the culture medium to the sealers occurred after 12 h of cure. V79 cells were exposed to dilutions of this extracts for 24 h and cell survival was measured photometrically. The cell viability was measured by MTT test in a spectrophotometer and the genotoxicity as indicated by the formation of micronuclei was determined after a 24 h exposure period The results of the cell survival rates and the amount of DNA damage was statistically analyzed for Kruskal-Wallis (p<0.05) test. The ranking of cell survival from the most to the least toxic material was: EndoREZ> Copaíba ≥ AH Plus > RoekoSeal. The formation of micronuclei (MN) to indicate genotoxicity was induced only by extracts of EndoREZ, being more genotoxic than EMS (positive control)
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Análise da qualidade do selamento apical de canais radiculares irradiados com os lasers de Nd:YAG, diodo ou ER:YAG e obturados com os cimentos resinosos AH Plus™, EndoREZ®, Epiphany® ou Epiphany SE® / Quality analysis of the apical seal of root canals irradiated with Nd: YAG, diode or Er: YAG lasers and filled with AH Plus, EndoREZ®, Epiphany® or Epiphany SE® resin based sealers

Cacio de Moura Netto 11 March 2009 (has links)
O objetivo deste estudo foi analisar a influência da irradiação com lasers de alta intensidade antes da obturação de canais radiculares com cimentos endodônticos resinosos no selamento apical. Raízes permanentes humanas (n=168) foram endodonticamente tratadas e, então, divididas aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n=42), de acordo com o tratamento dentinário subsequente. Os grupos foram: GØ (controle) sem tratamento adicional; GN irradiado com o laser de Nd:YAG (1,5 W, 100 mJ, 15 Hz); GD irradiado com o laser de diodo (2,5 W em modo contínuo); GE irradiado com o laser de Er:YAG (1 W, 100 mJ, 10 Hz). Dois espécimes de cada grupo foram preparados para avaliação em microscopia eletrônica de varredura (MEV) convencional para observação morfológica da superfície dentinária apical. Os espécimes remanescentes de cada grupo foram aleatoriamente divididos em quatro subgrupos (n=10), de acordo com o cimento obturador utilizado (AH Plus, EndoREZ®, Epiphany® ou Epiphany SE®). Para a análise de infiltração, os espécimes foram imersos em solução amoniacal de nitrato de prata a 50 % (pH=9,5) por 24 horas. Os valores de infiltração apical, em mm, foram comparados pela ANOVA, seguido pelo teste de Tukey (p<0,05). Cinco secções de cada subgrupo foram aleatoriamente selecionadas e analisadas em MEV em modo ambiental para avaliar a adaptação e penetração do material obturador nas paredes dentinárias. As imagens em MEV ambiental foram classificadas em escores por três avaliadores calibrados. A concordância interexaminadores foi confirmada pelo teste Kappa e os escores foram comparados pelo teste de Kruskal-Wallis (p<0.05). No grupo controle, o cimento EndoREZ® apresentou infiltração de nitrato de prata significantemente menor que todos os outros cimentos (p<0,05), com exceção do Epiphany®. A irradiação com os lasers de Nd:YAG e de diodo diminuiu a infiltração média dos subgrupos obturados com o cimento AH Plus (p<0,05). A irradiação com o laser de Nd:YAG levou a um aumento do nível de infiltração nos subgrupos obturados com EndoREZ® e Epiphany SE®. A adaptação, bem como a penetração dos cimentos, não foram prejudicadas pela prévia irradiação com laser dos canais radiculares, independentemente do laser utilizado. / The aim of this study was to analyze the influence of intracanal high intensity laser irradiation prior to root canal filling with resin based endodontic sealers on the apical sealing. Human dental roots (n=168) were endodontically treated and then randomly divided into four experimental groups (n=42), according to the further dentin surface treatment. The groups were: control (GØ) received no further treatment; GN irradiated with Nd:YAG laser (1.5 W, 100 mJ, 15 Hz); GD irradiated with diode laser (2.5 W in continuous way) and GE irradiated with Er:YAG laser (1 W, 100 mJ, 10 Hz). Two specimens of each group were prepared for conventional scanning electron microscopy (SEM) for morphological observation of the apical dentin surface. The remaining specimens of each group were randomly divided into four subgroups (n=10), according to the sealer used for dental root filling as follows: AH Plus, EndoREZ®, Epiphany® or Epiphany SE®. For leakage analysis, the specimens were immersed into 50 % silver nitrate ammoniacal solution (pH = 9.5) for 24 hours. The values of apical leakage, in mm, were compared by ANOVA followed by Tukeys test (p<0,05). Five sections of each subgroup were randomly selected and analyzed using environmental SEM in order to evaluate the adaptation and penetration of the filling material into the dentin walls. The environmental SEM images were scored by three calibrated examiners. The inter-examiners agreement was confirmed by Kappa test and the scores were compared by Kruskal-Wallis test (p<0.05). At the control group, the EndoREZ® sealer led to significantly smaller silver nitrate leakage in comparison to the others sealers (p<0,05), except by Epiphany®. The irradiation with Nd:YAG and diode lasers reduced the mean leakage of the subgroups filled with AH Plus sealer (p<0,05). Nd:YAG laser irradiation led to a leakage level increase of the subgroups filled with EndoREZ® and Epiphany SE®. The adaptation as well as sealer penetration were not impaired by the root canal prior laser irradiation, independently of the laser used.
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Avaliação in vitro da capacidade seladora e da qualidade da obturação de quatro cimentos endodônticos utilizando a técnica do cone único / In vitro evaluation of sealing-ability and obturation quality of four endodontic sealers using the single cone obturation technique

Pablo Andres Amoroso Silva 10 May 2013 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar o selamento apical em 7 e 30 dias de, obturações de canais radiculares com a técnica de cone único utilizando 4 cimentos endodônticos, AH Plus, MTA Fillapex, cimento Portland, e cimento experimental Sealepox, por meio do sistema de infiltração de fluidos FLODEC, e a qualidade de obturação, em microscopia confocal a laser, analisando o perímetro de penetração dos cimentos nos túbulos dentinários, e a porcentagem de fendas na interface cimento/dentina, e por meio de estereomicroscopia, a porcentagem de cimento, guta-percha e espaços vazios a 2,4 e 6mm do ápice radicular, dos cimentos. Sessenta e oito dentes unirradiculados, com canais únicos tiveram seus canais instrumentados e, então, obturados com os cimentos, previamente corados com Rodamina B. As amostras foram conservadas em meio úmido a 37º de temperatura. Após 7 dias, os dentes foram adaptados para os testes de infiltração de fluidos, fazendo-se as leituras durante 12 minutos constantes, para todos os espécimes. Trinta dias depois, as leituras foram realizadas novamente com os mesmos parâmetros anteriores. Todos os espécimes foram cortados em secções de 2mm de espessura nos níveis de 2,4 e 6mm do ápice radicular. Mediante estereomicroscopia, foram calculadas as porcentagens de cimento, guta-percha e espaços vazios, e em microscopia confocal, as porcentagens de fendas e o perímetro de penetração dos cimentos no interior dos túbulos dentinários, em todas as secções. Os resultados obtidos mostraram que, todos os cimentos permitiram a infiltração de fluidos em 7 dias, sendo que, o MTA Fillapex exibiu, significativamente, menor infiltração que os cimentos AH Plus e Portland. Em 30 dias não houve diferenças estatísticas entre os cimentos. Nas avaliações em microscopia confocal, observou-se a presença de fendas na interface dentina/cimento em todas as secções avaliadas. À estereomicroscopia observaram-se espaços vazios em todas as secções, bem como, variações nas porcentagens de cimento e guta-percha. / The aim of this study was to evaluate sealing-ability at 7 and 30 days of root canal obturations using a single cone obturation technique of 4 endodontic sealers, AH Plus, Mta Fillapex, Portland Cement and a experimental sealer Sealepox, using a fluid filtration recording device (FLODEC), to evaluate the obturation quality using confocal laser microscopy analyzing interfacial adaptation of sealer/dentin interface, perimeter of sealer penetration into dentinal tubules, and using stereomicroscopy, the percentage of sealer, guta-percha and voids at 2, 4 and 6mm from de apex. Sixtyeight single rooted teeth with one canal were instrumented and then, obturated, with the sealers, in which, Rodamine B was previously added. Samples were stored in 100% humidity and at 37º temperature. After 7 days, all the specimens were submitted to microleakage tests for a 12-minute period. Mta Fillapex showed the lowest leakage percentage when compared with AH Plus and Portland cement. 30 days after the first test, microleakage evaluations were repeated, and the results showed no statistical differences. Then, all samples were cut horizontally of 2mm of thickness at 2,4,6mm from the apex. Using estereomicrocopy, percentage of sealer, guta-percha and voids were measured, and using confocal laser microscopy percentages of interfacial adaptation and perimeter of sealer penetration into dentinal tubules were calculated. According to the results it was concluded that all sealers permitted fluid filtration at 7 and 30 days, being that, at 7 days, MTA Fillapex exhibited significantly, less fluid filtration than AH Plus and Portland Cement. At 30 days, no statistically differences were found. On confocal evaluations, it was observed the presence of gaps at the sealer/dentin interface in all evaluated sections. Stereomicroscopy assessments showed voids in all sections and as well variations on sealer and guta-percha percentages.
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Síntese e avaliação do pentaeritritol tetrassalicilato como um novo derivado de salicilato para cimentos endodônticos a base de cálcio / Synthesis and evaluation of pentaerythritol tetrassalicilato as a new derivative of salicylate to sealers based on calcium

SILVA, Manuela Gonçalves de Souza e 19 December 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_manuela_goncalves_souza_silva.pdf: 695185 bytes, checksum: ac5e243b1622d4637c83c8336c8cd119 (MD5) Previous issue date: 2012-12-19 / The aim of this study was synthesize a new salicylate derivative and evaluated it in composition to experimental calcium-based root canal sealers. Two salicylate derivatives were synthesize by the transesterification of a methyl salycilate with two different alcohols (1,3-butylenoglicol and pentaerythritol) in molar ratio 1:3 and 1:6, respectively. The products, butileneglyvol disalicylate (BD) and pentaerythritol tetrasalicylate (PT), were characterized by FTIR and RMN. Calcium-based experimental sealers were formulated with different concentrations of BD and PT (40/0, 35/5, 30/10 and 20/20). The experimental sealers were evaluated for setting time, solubility (24 hours, 7, 14 and 30 days), diametral tensile strength and Young s Modulus. Data were analyzed by One-way ANOVA, Two-way ANOVA and Tukey s test. The addition of PT reduced the materials setting times. After 24 hours the sealer 40/0 and 35/5 had higher solubility, after 14 and 28 days the sealer 20/20 showed the lowest solubility. After 7 days de sealer 20/20 stabilized its solubility. The sealer 40/0 presented the highest values and the 20/20 present de lowest values of diametral tensile strength and Young s modulus. The addition of PT to calcium-based endodontic sealers provides benefits to the properties tested / O objetivo deste estudo foi sintetizar um novo composto derivado de salicilato empregando-o no desenvolvimento de cimentos endodônticos experimentais a base de cálcio. Dois derivados de salicilato foram sintetizados através da reação de trans esterificação do salicilato de metila com diferentes alcoóis (1,3-butilenoglicol e pentaeritritol) na proporção molar de 1:3 e 1:6, respectivamente. Os produtos, butilenoglicol dissalicilato (BD) e pentaeritritol tetrassalicilato (PT) foram caracterizados por FTIR e RMN. Cimentos experimentais a base de cálcio foram formulados com diferentes concentrações de BD e PT (40/0, 35/5, 30/10 e 20/20). Os cimentos foram avaliados quanto ao tempo de presa, à solubilidade (24 horas, 7,14 e 28 dias), resistência à tração diametral e ao módulo de elasticidade. Os dados foram analisados através de ANOVA uma via, ANOVA duas vias e Teste de Tukey. A adição de PT reduziu o tempo de presa dos materiais testados. Após 24 horas os cimentos 40/0 e 35/5 apresentavam maior solubilidade que os demais; após 14 e 28 dias o cimento 20/20 foi o que apresentou menor solubilidade e após 7 dias o grupo PB 20/20 estabilizou a sua solubilidade, enquanto os demais continuaram progressivamente a liberação de seus componentes. O cimento 40/0 apresentou os maiores valores e o cimento 20/20 apresentou os menores valores de resistência à tração diametral e módulo de elasticidade. A adição de PT a cimentos à base de cálcio possibilita benefícios às propriedades testadas
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Influência do hidróxido de cálcio na resistência de união de cimentos endodônticos resinosos à dentina radicular / Influence of calcium hydroxide in the bond strength of root canal sealers to dentin: push-out testing

Carvalho, Ceci Nunes 01 July 2010 (has links)
Avaliou-se a influência do uso do hidróxido de cálcio como medicação intracanal na resistência de união de obturações endodônticas à dentina radicular quando realizadas com o cimento AH Plus ou Epiphany. Raízes palatinas de primeiros molares superiores humanos foram preparadas com sistema rotatório EndoSequence, e divididas em 4 grupos: G1 fatias preenchidas com AH Plus; G2 - fatias preenchidas com Epiphany; G3 - dentes que receberam medicação intracanal com hidróxido de cálcio por 14 dias e posterior preenchimento das fatias com AH Plus; G4 - dentes que receberam medicação intracanal com hidróxido de cálcio por 14 dias e posterior preenchimento das fatias com Epiphany. Para o teste de pushout as raízes foram fixadas, cortadas e delas obtidas secções seriadas das regiões cervical, média e apical. Após a manobra de preenchimento das fatias, essas permaneceram armazenados por 7 dias em câmara a vácuo a 37º C sob condições de umidade ambiental. Decorrido esse período, os dentes foram preparados para o ensaio mecânico. Os corpos-de-prova foram adaptados a um suporte fixado à base da máquina de ensaios mecânicos universal, onde aplicou-se uma carga à velocidade de 0,5 mm/min no sentido ápico-cervical até o completo deslocamento do material obturador. Após a realização dos ensaios, foi feita análise do padrão de fraturas dos corpos de prova utilizando a microscopia eletrônica de varredura. A análise de variância revelou diferença estatisticamente significante entre os grupos (p<0,05). O teste de Tukey identificou que a resistência de união obtida pelos grupos Epiphany e Epiphany + hidróxido de cálcio foi estatisticamente menor do que a dos grupos AH Plus e AH Plus + hidróxido de cálcio; e, a comparação entre grupos mostrou que o grupo AH Plus + hidróxido de cálcio mostrou-se estatisticamente superior ao grupo AH Plus, portanto o hidróxido de cálcio influencia positivamente apenas na adesão do cimento AH Plus. / We evaluated the influence of calcium hydroxide as an intracanal dressing in the bond strength of root canal filling to the root dentin when performed with AH Plus sealer or Epiphany. Palatal roots of maxillary first molars were prepared with rotary system EndoSequence and divided into 4 groups: G1 - slices filled with AH-Plus G2 - slices filled with Epiphany, G3 - teeth that received root canal dressing with calcium hydroxide for 14 days and then filling out the slices with AH-Plus; G4 - teeth that received root canal dressing with calcium hydroxide for 14 days and then filling out the slices with Epiphany. To test push-out the roots were fixed, cut them and obtained serial sections of cervical, middle and apical. After the maneuvers fills the slices, they remain stored for 7 days in a vacuum chamber at 37°C under conditions of environmental humidity. After this period the teeth were prepared for mechanical testing. The samples were adapted to a bracket attached to the base of the testing machine universal where we apply a load at a speed of 0.5 mm/min towards apicocervical to the complete displacement of the filling material. After the testing, analysis was made of the pattern of fractures of the specimens using scanning electron microscopy. Analysis of variance revealed a statistically significant difference between groups (p < 0,05). The Tukey test indicated that the bond strength obtained by the groups Epiphany and Epiphany + Calcium hydroxide was lower than that of groups AH Plus and AH-Plus + Calcium hydroxide; and, the comparison between groups showed that group AH-Plus + Calcium hydroxide was statistically higher than the AH-Plus group, so the Calcium hydroxide has a positive effect only in the adhesion of AH-Plus sealer.
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"Efeito da terapia com laser em baixa intensidade (LILT) na produção de proteínas por macrófagos estimulados por cimentos endodônticos" / Effect of low level laser therapy (LILT) on the protein secretion by endodontic sealers stimulated macrophages

Sousa, Lorena Ribeiro de 08 March 2006 (has links)
A terapia endodôntica visa o selamento biológico do complexo sistema apical, contribuindo para isso, as substâncias usadas no tratamento e a resposta imune do paciente. A LILT tem mostrado atividade antiinflamatória, favorecendo o processo reparacional. Sendo assim, este trabalho objetivou analisar o efeito da LILT na atividade secretória de macrófagos, previamente ativados por IFN-? e LPS de E.coli, e estimulados por substâncias liberadas de três tipos de cimentos endodônticos, um a base de óxido de zinco e eugenol, outro a base de hidróxido de cálcio e um terceiro resinoso. A citotoxicidade dessas substâncias foi avaliada usando a técnica de análise do MTT. Macrófagos ativados foram estimulados por essas substâncias ou não (controle) e então, irradiados ou não (controle) e a secreção de proteínas próinflamatórias (interleucina-1 b, fator de necrose tumoral-a e metaloproteinase da matriz-1) foram analisadas pelo teste ELISA. As irradiações foram realizadas com um laser GaAlAs (780 nm, 70 mW, ponta da fibra de 4 mm2, 1.67 seg, 3 J/cm2). Foram usadas duas aplicações de irradiação com intervalo de 6 h. Os dados obtidos foram tratados por Análise de Variância, quando de distribuição normal, ou teste de Friedman, quando de distribuição não normal, com nível de significância de 5 % (p = 0,05). A viabilidade dos controles e células tratados pelos cimentos endodônticos foi similar. Produção de IL-1 b e TNF-a foram observadas. Houve alta produção de MMP-1. Entretanto, sem diferenças estatísticas entre os grupos experimentais. Os grupos irradiados apresentaram resultados similares aos não irradiados. Substâncias liberadas pelos cimentos endodônticos testados não se mostraram citotóxicas nas condições deste experimento. Essas substâncias, bem como a LILT, no parâmetro utilizado, não causam alteração na atividade de secreção de MMP-1, IL-1 b e TNF-a por macrófagos ativados. / The endodontic therapy seeks the dental root canal biological sealing, depending on substances used in this process and patient’s defense immune factors. LILT has shown an anti-inflammatory activity, improving the periapical repair process. This in vitro study aimed to analyze the effect of LILT at the secretory activity of macrophages previously activated by interferon-gamma and lypopolisaccharide from E.coli, and stimulated by substances leached from three endodontic sealers (zinc oxide-eugenol based, resinous and calcium hydroxide-based). Cytotoxicity of these substances was assessed by the MTT test. Activated macrophages were stimulated by the substances or not (control) and then, irradiated or not (control) and the secretion of pro-inflammatory proteins (interleukin-1 b, tumor necrosis factor-a and matrix metalloproteinase-1) was analyzed by ELISA test. The LILT was performed using a GaAlAs laser (780 nm, 70 mW, focal spot of 4.0 mm2, 1.67 sec, 3 J/cm2). Two irradiations with 6 h-intervals were done. The data was compared by either ANOVA test or Friedman’s test. The cell viabilities of controls and cells treated by the sealers were similar. Production of IL -1 b and TNF-a were observed. There was a high production of MMP-1. However, statistical differences were not observed amongst the groups. The irradiated groups presented results similar to those of non irradiated groups. Substances leached from the endodontic sealers are non cytotoxic at these experiments conditions . These substances, as well as the LILT, at the parameter used, were not able to change the secretion of MMP-1, IL-1 b e TNF-a by activated macrophages.
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Avaliação do perfil de citocinas no tecido subcutâneo de camundongos na presença de cimento endodôntico / Evaluation of Cytokine Profile in Subcutaneous Tissue of Mice in the Presence of Endodontic Cement

Leonardo Biscaro Pereira 16 September 2013 (has links)
Avaliou-se a capacidade dos cimentos endodônticos: Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus® de alterarem o perfil das citocinas nas respostas Th1, Th2 e Th17, após a implantação destes em subcutâneo de camundongos. A quantificação das citocinas IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 e IL-17 foi realizada in vivo, no tecido reacional circundante aos implantes, os quais foram confeccionados a partir de sondas nasogástricas estéreis e apirogênicas de cloreto de polivinila preenchidas com os cimentos, tendo um grupo controle com sondas vazias. Utilizou-se camundongos isogênicos da linhagem C57BL/6 machos de 6/8 semanas de vida sendo que cada um recebeu 2 implantes na região dorsal (lado direito e esquerdo). Após os períodos experimentais de 7, 21 e 63 dias, com os camundongos anestesiados, os implantes foram removidos juntamente com o tecido circundante, e os animais sacrificados em seguida por deslocamento cervical. As amostras de cada grupo foram divididas sendo: duas, contendo implante/tecido, processadas histotecnicamente e as demais com apenas tecido (sem implante) foram homogeneizadas e centrifugadas com solução formada por tampão RIPA e inibidor de protease. O sobrenadante, fruto deste processo, foi coletado e a dosagem das citocinas realizada através do kit CBA mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (BD Cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) em análise por citometria de fluxo. Os parâmetros avaliados foram a concentração da citocina em função do cimento testado em cada período experimental. Submeteu-se os resultados à análise estatística por meio do teste t com a correção de Welch\'s. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à IL-2 houve diferenças estatísticas significantes entre os grupos Activ-GP® e AH-Plus® (p=0,0391). No período de 21 dias foram detectadas diferenças entre o grupo controle e AH-Plus® (p=0,0402) e entre o grupo Sealapex® e AH-Plus® (p=0,0244). O AH-Plus® induziou um maior aumento na IL-6, aos 7 dias em relação ao Activ-GP® (p=0,0286) e aos 21 dias entre o grupo controle (p=0.0402) e Activ-GP® (p=0.0244). Os níveis de TNF-&alpha; foram estatisticamente superiores após 7 dias quando comparou-se o grupo AH-Plus® com os demais. Observou-se que no grupo controle aos 7 e 21 dias ocorreram diferenças estatísticas em relação ao Sealapex® e AH-Plus® respectivamente quando avaliadas as concentrações de IFN-&gamma;. Houve também diferenças estatísticas entre o grupo controle e Sealapex® (p=0,0158) no período de 7 dias para a citocina IL-4. Os valores de IL-10 foram estatisticamente superiores para o grupo controle em relação ao Activ-GP® no período de 21 dias (p=0,0471). Com relação a IL-17 no período de 21 dias, observou-se os maiores valores para o grupo controle, seguido pelo Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus®. Foram detectadas diferenças entre os grupos controle e AH-Plus® (p=0,0121), controle e Activ-GP® (p=0,0262) e entre Sealapex® e Activ GP® (p=0,0314). Baseado nesses resultados podê-se concluir que: os cimentos endodônticos são capazes de modular as respostas Th1, Th2 e Th17 através da inibição ou estimulação da liberação das citocinas testadas. O cimento AH-Plus® promoveu as maiores diferenças no perfil de resposta Th1. / It was evaluated the capacity of the following endodontic sealers: Sealapex, Activ-GP and AH-Plus to modify the cytokine profile in Th1, Th2 and Th17 responses, after their implantation in the subcutaneous tissue of mice. Quantification of IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 and IL-17 was performed in vivo, in the reactional tissue surrounding the implants, which were made from sterile nasogastric probes and apyrogenic of polyvinyl chloride filled with sealer, and a control group of empty probes. It was used isogenic mice of C57BL/6 lineage, 6/8 weeks old males, each of which received two implants in the dorsal region (left and right). After the experimental time of 7, 21 and 63 days, the mice were anesthetized and the implants were removed along with the surrounding tissue, the animals were then sacrificed by cervical dislocation. Samples from each group were divided as follows: two containing implant / tissue processed histologically and with only the remaining tissue (without implant) were mixed and centrifuged with a solution formed by RIPA buffer and protease inhibitors. The supernatant result of this process was collected and cytokine dosage accomplished by mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine CBA Kit Kit (BD cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) for flow cytometry analysis. The evaluated parameters were the cytokine concentration in function of sealer tested in each trial. The results were submitted to statistical analysis using the t test with Welch\'s correction. For all tests the significance level was 5%. With respect to IL-2 there were significant statistical differences between groups-Activ GP and AH-Plus (p=0.0391). In the period of 21 days differences were found between the control group and AH-Plus (p=0.0402) and between the group Sealapex and AH-Plus (p=0.0244). The AH-Plus induced a greater increase in IL-6, at 7 days compared to Activ-GP (p=0.0286) and at 21 days between the control group (p=0.0402) and Activ-GP (p=0.0244). The levels of TNF-&alpha; were significantly higher after 7 days when the AH-Plus group was compared with others. It was observed that in the control group at 7 and 21 days there were statistical differences in relation to Sealapex and AH-Plus respectively when evaluated concentrations of IFN-&gamma;. There were also significant differences between the control group and Sealapex (p=0.0158) within 7 days for the cytokine IL-4. The amounts of IL-10 were statistically higher in the control group compared to the Activ GP in a period of 21 days (p=0.0471). With respect to IL-17 in a period of 21 days, it was observed the highest values for the control group, followed by Sealapex, Activ-GP and AH-Plus. Differences were found between the control groups and AH-Plus (p=0.0121), control and Activ-GP (p=0.0262) and between Sealapex and Activ-GP (p=0.0314). Based on the presented results theendodontic sealers are able to promote changes in the response cytokine profile Th1, Th2 and Th17; Sealer AH-Plus produced the greatest changes, in the Th1 response profile.
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Avaliação do perfil de citocinas no tecido subcutâneo de camundongos na presença de cimento endodôntico / Evaluation of Cytokine Profile in Subcutaneous Tissue of Mice in the Presence of Endodontic Cement

Pereira, Leonardo Biscaro 16 September 2013 (has links)
Avaliou-se a capacidade dos cimentos endodônticos: Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus® de alterarem o perfil das citocinas nas respostas Th1, Th2 e Th17, após a implantação destes em subcutâneo de camundongos. A quantificação das citocinas IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 e IL-17 foi realizada in vivo, no tecido reacional circundante aos implantes, os quais foram confeccionados a partir de sondas nasogástricas estéreis e apirogênicas de cloreto de polivinila preenchidas com os cimentos, tendo um grupo controle com sondas vazias. Utilizou-se camundongos isogênicos da linhagem C57BL/6 machos de 6/8 semanas de vida sendo que cada um recebeu 2 implantes na região dorsal (lado direito e esquerdo). Após os períodos experimentais de 7, 21 e 63 dias, com os camundongos anestesiados, os implantes foram removidos juntamente com o tecido circundante, e os animais sacrificados em seguida por deslocamento cervical. As amostras de cada grupo foram divididas sendo: duas, contendo implante/tecido, processadas histotecnicamente e as demais com apenas tecido (sem implante) foram homogeneizadas e centrifugadas com solução formada por tampão RIPA e inibidor de protease. O sobrenadante, fruto deste processo, foi coletado e a dosagem das citocinas realizada através do kit CBA mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (BD Cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) em análise por citometria de fluxo. Os parâmetros avaliados foram a concentração da citocina em função do cimento testado em cada período experimental. Submeteu-se os resultados à análise estatística por meio do teste t com a correção de Welch\'s. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à IL-2 houve diferenças estatísticas significantes entre os grupos Activ-GP® e AH-Plus® (p=0,0391). No período de 21 dias foram detectadas diferenças entre o grupo controle e AH-Plus® (p=0,0402) e entre o grupo Sealapex® e AH-Plus® (p=0,0244). O AH-Plus® induziou um maior aumento na IL-6, aos 7 dias em relação ao Activ-GP® (p=0,0286) e aos 21 dias entre o grupo controle (p=0.0402) e Activ-GP® (p=0.0244). Os níveis de TNF-&alpha; foram estatisticamente superiores após 7 dias quando comparou-se o grupo AH-Plus® com os demais. Observou-se que no grupo controle aos 7 e 21 dias ocorreram diferenças estatísticas em relação ao Sealapex® e AH-Plus® respectivamente quando avaliadas as concentrações de IFN-&gamma;. Houve também diferenças estatísticas entre o grupo controle e Sealapex® (p=0,0158) no período de 7 dias para a citocina IL-4. Os valores de IL-10 foram estatisticamente superiores para o grupo controle em relação ao Activ-GP® no período de 21 dias (p=0,0471). Com relação a IL-17 no período de 21 dias, observou-se os maiores valores para o grupo controle, seguido pelo Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus®. Foram detectadas diferenças entre os grupos controle e AH-Plus® (p=0,0121), controle e Activ-GP® (p=0,0262) e entre Sealapex® e Activ GP® (p=0,0314). Baseado nesses resultados podê-se concluir que: os cimentos endodônticos são capazes de modular as respostas Th1, Th2 e Th17 através da inibição ou estimulação da liberação das citocinas testadas. O cimento AH-Plus® promoveu as maiores diferenças no perfil de resposta Th1. / It was evaluated the capacity of the following endodontic sealers: Sealapex, Activ-GP and AH-Plus to modify the cytokine profile in Th1, Th2 and Th17 responses, after their implantation in the subcutaneous tissue of mice. Quantification of IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 and IL-17 was performed in vivo, in the reactional tissue surrounding the implants, which were made from sterile nasogastric probes and apyrogenic of polyvinyl chloride filled with sealer, and a control group of empty probes. It was used isogenic mice of C57BL/6 lineage, 6/8 weeks old males, each of which received two implants in the dorsal region (left and right). After the experimental time of 7, 21 and 63 days, the mice were anesthetized and the implants were removed along with the surrounding tissue, the animals were then sacrificed by cervical dislocation. Samples from each group were divided as follows: two containing implant / tissue processed histologically and with only the remaining tissue (without implant) were mixed and centrifuged with a solution formed by RIPA buffer and protease inhibitors. The supernatant result of this process was collected and cytokine dosage accomplished by mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine CBA Kit Kit (BD cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) for flow cytometry analysis. The evaluated parameters were the cytokine concentration in function of sealer tested in each trial. The results were submitted to statistical analysis using the t test with Welch\'s correction. For all tests the significance level was 5%. With respect to IL-2 there were significant statistical differences between groups-Activ GP and AH-Plus (p=0.0391). In the period of 21 days differences were found between the control group and AH-Plus (p=0.0402) and between the group Sealapex and AH-Plus (p=0.0244). The AH-Plus induced a greater increase in IL-6, at 7 days compared to Activ-GP (p=0.0286) and at 21 days between the control group (p=0.0402) and Activ-GP (p=0.0244). The levels of TNF-&alpha; were significantly higher after 7 days when the AH-Plus group was compared with others. It was observed that in the control group at 7 and 21 days there were statistical differences in relation to Sealapex and AH-Plus respectively when evaluated concentrations of IFN-&gamma;. There were also significant differences between the control group and Sealapex (p=0.0158) within 7 days for the cytokine IL-4. The amounts of IL-10 were statistically higher in the control group compared to the Activ GP in a period of 21 days (p=0.0471). With respect to IL-17 in a period of 21 days, it was observed the highest values for the control group, followed by Sealapex, Activ-GP and AH-Plus. Differences were found between the control groups and AH-Plus (p=0.0121), control and Activ-GP (p=0.0262) and between Sealapex and Activ-GP (p=0.0314). Based on the presented results theendodontic sealers are able to promote changes in the response cytokine profile Th1, Th2 and Th17; Sealer AH-Plus produced the greatest changes, in the Th1 response profile.

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