Tese (doutorado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2010. / Submitted by Patrícia Nunes da Silva (patricia@bce.unb.br) on 2011-05-11T18:29:12Z No. of bitstreams: 1 2010_GreiceMariaRodriguesSLucena1.pdf: 2439046 bytes, checksum: 200569b58ff047ceba578d9e01a33fd4 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2011-05-11T18:30:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_GreiceMariaRodriguesSLucena1.pdf: 2439046 bytes, checksum: 200569b58ff047ceba578d9e01a33fd4 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-11T18:30:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_GreiceMariaRodriguesSLucena1.pdf: 2439046 bytes, checksum: 200569b58ff047ceba578d9e01a33fd4 (MD5) / A exposição fetal ao etanol (EtOH) e metilmercúrio (MeHg) ocorre em uma frequência elevada em todo o mundo. Até, então, não há uma terapia eficaz para tratar as consequências comportamentais produzidas por ambos os neurotoxicantes. Visto que plantas da medicina tradicional têm sido usadas pelo homem para aliviar uma variedade de doenças, estas também podem ser investigadas como alternativa para aquele problema de saúde. Portanto, o objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos do extrato etanólico (EE) obtido dos bulbos da Cipura paludosa na locomoção e nos comportamentos de ansiedade, depressão e memória de curta e longa duração, em ratos adultos expostos ao EtOH e/ou MeHg, durante o desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC). Adicionalmente, foram medidos em tecidos cortical, hipocampal, cerebelar e de fígado, enzimas antioxidantes como a catalase (CAT) e a glutationa peroxidase dependente de selênio (Se-GPx) e os níveis de peroxidação lipídica, pelos métodos de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e pelo alaranjado de xilenol. Ratas grávidas Wistar receberam água de torneira ou 6,5 g/kg de EtOH (22,5% p/v) durante a gravidez e amamentação. No 15o dia de gravidez, os animais de cada grupo foram subdivididos em dois outros para receberem 8 mg/kg de MeHg ou continuarem recebendo água de torneira. Todos os experimentos foram realizados com as proles adultas. Cada grupo recebeu EE da C. paludosa (1, 10 ou 100 mg/kg, v.o.) ou salina, administrados cronicamente durante 14 dias. O tratamento com todas as doses do EE melhorou a memória social de curta duração, bem como, na dose de 100 mg/kg, facilitou a retenção da memória de curta e longa duração, em ratos submetidos ao teste da esquiva inibitória. O EE demonstrou efeitos do tipo antidepressivos e ansiolíticos, sem alterar a atividade locomotora. Além disso, o EE reduziu o comportamento de ansiedade nos grupos de EtOH e MeHg, bem como o comportamento tipo depressivo induzido pelo MeHg e EtOH+MeHg. O EE também mostrou uma melhora na memória social nos animais expostos prenatalmente ao MeHg e/ou EtOH+MeHg além de facilitar a retenção da memória de curta e longa duração nos grupos de EtOH, MeHg ou EtOH+MeHg. Além disso, a exposição aos neurotoxicantes diminuiu os níveis de CAT no tecido cortical dos animais do grupo do MeHg e esse efeito foi revertido pelo tratamento crônico com todas as doses do EE da C. paludosa. Os níveis de CAT também foram diminuídos no tecido de fígado dos animais do grupo do MeHg, sendo este efeito revertido pelo EE. Uma diminuição significativa dos níveis de Se-GPx foi observada nos tecidos cortical e cerebelar do grupo do EtOH e no tecido cerebelar do grupo do MeHg, sendo esse efeito revertido pelo EE da C. paludosa. Os resultados apresentados mostraram um aumento nos níveis de TBARS no grupo EtOH no tecido hipocampal e no tecido cerebelar nos grupos EtOH, MeHg e EtOH+MeHg. Resultado semelhante foi observado no ensaio de alaranjado de xilenol, exceto no grupo EtOH+MeHg que não apresentou diferença significante. Além disso, a exposição ao neurotoxicantes diminuiu os níveis de CAT no tecido cortical dos animais do grupo do MeHg e esse efeito foi revertido pelo tratamento crônico com todas as doses do EE da C. paludosa. Em conjunto, estes resultados sugerem que a intoxição de EtOH e/ou MeHg durante o desenvolvimento do SNC pode ser um risco para a homeostase celular e consequentemente à funções neurocognitivas. Os dados também indicaram que o EE apresenta componentes com propriedades ansiolíticas, antidepressivas, mnemônicas e antioxidantes, cujos mecanismos pelos quais ele produz esses efeitos precisam ser mais bem investigados e devem ser considerados para pesquisas futuras. Assim, os dados deste trabalho confirmam a utilização popular da C. paludosa e mostra a potencialidade terapêutica desta planta como um possível fitoterápico. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Fetal exposure to ethanol (EtOH) and methylmercury (MeHg) occurs at a high frequency worldwide. So far, there is no effective therapy to treat the behavioral consequences produced by both neurotoxicants. Since traditional medicine has been used by humans to alleviate a variety of diseases, it can be investigated as an alternative for this health issue. The aim of this study is to investigate the effects of ethanolic extract (EE) obtained from bulbs of C. paludosa on locomotion and on anxiety, depression-like behaviors and short- and long-term memory of rats exposed to EtOH and/or MeHg during central nervous system (CNS) development. Additionally, the antioxidant enzymes antioxidantes catalase (CAT) and selenium-glutathione peroxidase (Se-GPx) and lipid peroxidaction levels, by assayed as thiobarbituric acid reactive substances –TBARS) and xylenol orange complex methods, were measured in cortical, hippocampal, cerebellar, and kidney tisues. Pregnant Wistar female rats received tap water or 6.5 g/kg of EtOH (22.5% w/v) during pregnancy and breast-feeding. On the 15th day of pregnancy, half of each group received tap water or 8 mg/kg of MeHg. Adult offspring were used in the experiment. Each group received EE of C. paludosa (1, 10 or 100 mg/Kg, p.o.) or saline administered chronically for fourteen days. The EE demonstrated anxiolytic- and antidepressive-like effects without changing the locomotor activity. Moreover, EE reduced the anxious behavior in EtOH or MeHg groups, and the depressive behavior in MeHg or EtOH+MeHg groups. The EE also improved the short-term social memory in MeHg or EtOH+MeHg groups and facilitated the retention of short- and long-term memory in EtOH, MeHg or EtOH+MeHg groups. Moreover, the CAT levels were dimuished in MeHg group in the cortical tissue and this effect was reversed by chronical treatment with all doses of the EE of C. paludosa. The CAT levels were also diminuished in the liver tissue in MeHg group and this effect was reversed by EE. A decreased in the Se-GPX levels were observed in EtOH group (cortical), EtOH, MeHg and EtOH+MeHg (cerebellar) tissues. However, in cortical and cerebellar tissues was observed an increase in EtOH+MeHg group. Our results showed increased lipid peroxidation (TBARS) in EtOH group in the hipocampal tissue and in the EtOH, MeHg and EtOH+MeHg groups in the cerebellar tissue compared to control. A same result was observed in the xylenol orange assay, except to EtOH+MeHg group that did not have significant difference compared to control. Taken together, the results suggest that EtOH and/or MeHg exposure during CNS development may be a risk for cellular homeostasis and consequently for neurocognitive functions. Our results also demonstrated that EE of C. paludosa improved the same behavioral consequences produced by EtOH and/or MeHg contamination. They also indicated that EE components have anxiolytic, antidepressant and mnemonic-like properties, whose mechanisms by which such effects are produced need to undergo investigation and should be considered for future researches. Thus, data from this study confirm the popular use of C. paludosa and shows the therapeutic potential of this plant as a possible herbal medicine.

Este trabalho apresenta a compilação de 5 experimentos carreados ao longo de 2004-2007. Na parte 1 apresenta sucintamente o marco teórico dos quatro trabalhos. Inicialmente são discutidos aspectos gerais da sepse. Após, são descritos alguns mecanismos conhecidos do envolvimento do sistema nervoso central com a sepse, como a permeabilidade diminuída da barreira sanguínea cerebral, alteração de alguns neurotransmissores, apoptose neuronal, ativação de algumas cascatas imunológicas, enfim, o processo inflamatório no sistema nervoso central. Os danos cognitivos ocasionados pela encefalopatia séptica também foram relatados, e por fim o estresse oxidativo e as defesas antioxidantes como um mecanismo que possa estar mediando os danos cognitivos observados em pacientes sobreviventes as sepse. Os experimentos (Parte II) comportamentais realizados 10 dias após a indução da sepse em ratos ocupam os Capítulos 1 e 2. No capítulo 1 é apresentado um corpo de resultados que permite observar os déficits cognitivos nos testes de Habituação ao Campo Aberto, Esquiva Inibitória e Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos em ratos sobreviventes a sepse após 10 dias da indução pelo modelo animal de CLP. Estes dados demonstram uma incapacidade cognitiva no aprendizado e na memória dos animais sépticos. O Capítulo 2 apresenta os resultados dos testes comportamentais de Reconhecimento de Objeto, Labirinto de Cruz Elevada e Teste de Natação Forçada, onde foi possível demonstrar que os ratos sépticos apresentaram uma incapacidade na memória e comportamento compatível com “depressão”, mas não com ansiedade. O Capítulo 3 estende os achados comportamentais observados no Capítulo 1, realizando os testes comportamentais de Habituação ao Campo Aberto, Esquiva Inibitória e Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos após 30 dias da indução de sepse em ratos pelo procedimento CLP. Os dados obtidos confirmam que a incapacidade de aprendizado e memória demonstrados no Capítulo 1 persiste após 30 dias da cirurgia de CLP. A mensuração do estresse oxidativo no hipocampo, cerebelo, estriado e córtex de ratos submetidos à sepse foram descrito no Capítulo 4. Neste experimento foi observado que nas horas iniciais após a indução de sepse em ratos, houve danos oxidativos, avaliados pelo TBARS e carbonil em diversas regiões do cérebro. Entretanto, a exceção do estriado, foi demonstrado um aumento na atividade de SOD sem um proporcional aumento na atividade de CAT, com aumento conseqüente na relação de SOD e CAT, também nos períodos iniciais após a indução de sepse nos ratos (6 horas). O Capítulo 6 aborda os resultados do experimento realizado com administração de antioxidantes NAC e DFX antes do Teste de Esquiva Inibitória, Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos após 10 e 30 dias da indução da sepse e Habituação ao Campo Aberto após 10 dias da cirurgia de CLP, onde foi demonstrando que, DFX e NAC associado, porém não isoladamente, revertem os danos cognitivos observados em ratos submetidos aos testes acima. A discussão geral (parte III) busca integrar esses achados descritos nos capítulos anteriores dentro de uma nova perspectiva para esclarecer os mecanismos neurobiológicos do dano cognitivo em sobreviventes a sepse. Além disso, abre discussões acerca de possíveis novas possibilidades de pesquisas. / This work presents the compilation of 5 experiments enters throughout 2004-2007. The part I presents lightly the theoretical landmark of the four works. Initially general aspects of sepsis are argued. After, some known mechanisms of the involvement of the central nervous system with sepsis are described, as the diminished permeability of the brain blood barrier, alteration of some neurotransmitters, neuronal apoptosis, activation of some inflammatory cascades, at last, the inflammatory process in the central nervous system. The cognitive damage caused by the septic encephalopathy had been also discussed, and finally it stress oxidative and the antioxidants defenses as a mechanism that can be causing the cognitive deficit in sepsis survivors patients. The main experiments (part II) carried through 10 days after the induction of sepsis in rats occupy chapters 1 and 2. In chapter 1 a body of results is presented that allows observing the cognitive incapacities to the tests of Habituation to the Open Field, Inhibitory Avoidance and Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance in rats surviving sepsis after 10 days of the induction for the animal model of CLP. These data demonstrate a cognitive incapacity in the memory and the learning of the septic animals. chapter 2 presents the results of the complementary behavioural tests: Object Recognition, Elevated Plus-maze and Forced Swimming Test, where it was possible to demonstrate that the septic rats had presented incapacity in the memory and symptoms of depression, but not of anxiety. chapter 3 extends the observed findings in chapter 1, carrying through the tests of Habituation to the Open Field, Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance after 30 days of the induction of sepsis in rats for procedure CLP. The gotten data confirm that the incapacity of demonstrated learning and memory in chapter 1 after persists 30 days of the surgery of CLP. The measure of it stress oxidative in hippocampus, cerebellum, striatum and cortex of rats submitted to sepsis was described in chapter 4. In this experiment it was observed that in the initial hours after the induction of sepsis in rats, had oxidative damages, evaluated for the TBARS and carbonyl in diverse regions of the brain. However, the exception of the striatum, was demonstrated an increase in the activity of SOD without a proportional increase in the activity of CAT, with consequent increase in the relation of SOD and CAT, also in the initials periods after induction of sepsis in the rats (6 hours). chapter 5 approaches the results of the experiment carried through with antioxidants substance administration NAC and DFX before the Test of Inhibitory Avoidance and Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance after 10 and 30 days of the induction of sepsis and Habituation to the Open Field after 10 days of the surgery of CLP, where it was demonstrating that, DFX and NAC associated, but not separately, above revert the observed cognitive damages in rats submitted to the tests. The general quarrel (part III) searches to integrate these described findings in the previous chapters inside of a new perspective to clarify the neurobiological mechanisms underlying brain damage in sepsis survivors. Moreover, it opens possible quarrels concerning new possibilities of research.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-05-24T15:40:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_WILMA HELENA DE OLIVEIRA.pdf: 10365468 bytes, checksum: 189ecefef53901d70f2d98169902c17c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-24T15:40:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_WILMA HELENA DE OLIVEIRA.pdf: 10365468 bytes, checksum: 189ecefef53901d70f2d98169902c17c (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES / A hiperglicemia está relacionada com o desenvolvimento gradual de injúria e inflamação no encéfalo e é caracterizada por prejuízo das funções cognitivas, mudanças eletrofisiológicas e alterações estruturais principalmente no hipocampo. Essas alterações no SNC causadas pela hiperglicemia são consideradas como um quadro de encefalopatia diabética. A metformina é um fármaco aprovado para consumo humano para desordens metabólicas. Seu mecanismo de ação é através da ativação de AMPK, que regula negativamente os mediadores inflamatórios in vitro e in vivo em diferentes modelos animais, através da inibição do NF-κB. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da metformina sobre o processo de neurodegeneração induzido pela diabetes em camundongos machos C57BL/6. Foram usados camundongos machos C57BL/6, com 12-14 semanas de idade e peso entre 25- 30 g distribuídos em cinco grupos experimentais: controle, estreptozotocina (STZ), STZ tratado com metformina na dose 100 mg/Kg (STZ+M100), STZ tratado com metformina na dose de 200 mg/Kg (STZ+M200) e apenas tratados com metformina na dose de 200 mg/Kg (M200). A diabetes foi induzida com STZ via intraperitoneal por dois dias consecutivos e a metformina foi administrada por gavagem durante 21 dias após a confirmação da diabetes. O peso e glicemia foram acompanhados semanalmente. No 21º dia foi realizado o T-maze e no 22º dia os animais foram eutanasiados, os cérebros dissecados para realização das análises de imunohistoquímica e western blot. Os animais controle e do grupo M200 não tiveram variação dos níveis normais de glicose e do peso corporal. Os animais do grupo STZ, STZ+M100 e STZ+M200 apresentaram perda de peso e elevada glicemia. Na análise da memória espacial o grupo STZ apresentou deficiência de memória e quando tratados com 200 mg/Kg de metformina apresentaram melhora significativa. Na avaliação da perda neuronal, os animais do grupo STZ apresentaram diminuição da marcação do FOX-1, do fator de crescimento neuronal e aumento da expressão da proteína apoptótica Bax, tais alterações foram revertidas pela ação da metformina na dose 200 mg/Kg (STZ+M200). Foi observada ativação dos astrócitos e micróglia no grupo STZ e houve redução de maneira dosedependente, sendo a dose 200 mg/Kg mais efetiva. Nos animais controle e STZ não houve aumento da expressão de eNOS, enquanto que os grupos tratados com metformina apresentaram aumento da expressão dessa enzima. A expressão de VEGF foi aumentada no grupo STZ e reduzida significativamente no grupo STZ+M200. Os animais diabéticos também apresentam aumento da expressão de IL-1β, Iκβα e NF-κB. O tratamento dos animais diabéticos com 200 mg/Kg de metformina reduziu a inflamação pela redução significativa a expressão de IL-1β e p-Iκβα, entretanto não houve redução significativa de NF-κB. Em conclusão, o tratamento com metformina promoveu neuroproteção, reduziu a neuroinflamação e melhorou a formação da memória espacial em camundongos diabéticos. / Hyperglicaemia is associated with gradually developing injury and inflammation in brain and characterized by impairment cognitive, structural and electrophysiological changes, mainly in hippocampus. Changes caused by hyperglicaemia are called diabetic encephalopathy. Metformin is a molecule used to treatment metabolic disorders. Its mechanism action is through phosphorilation of AMPK, that downregulates mediators of inflammation in vitro and in vivo in several animals models, by inhibiting NF-κB. Thus, probably metformin actives AMPK and decreases inflammatory effects induced by NF-κB in glial cells on diabetic encephalopathy, avoiding loss neuronal and limiting neuroinflammation. The aim of this study was to evaluate effects of metformin on neurodegeneration process induced by diabetes in male C57BL / 6 mice. Fifty male C57BL / 6 mice, 12-14 weeks-old and 25-30g weight were distributed into five experimental groups: control, streptozotocin (STZ), STZ treated with metformin at dose 100 mg / kg (STZ + M100), STZ treated with metformin at dose of 200 mg / kg (STZ + M200) and only metformin at dose of 200 mg / kg (M200). Diabetes was induced with streptozotocin given intraperitoneally for two consecutive days and metformin was administered by gavage for 21 days after confirmation of diabetes. Weight and blood glucose levels were monitored weekly. At day 21 the animals were availed by T-maze and at 22 days the animals were euthanized, the brains dissected to perform the analysis of immunohistochemistry and western blot. The control animals and M200 had no change of glucose levels and body weight. The STZ group, STZ + M100 and M200 + STZ showed weight loss and high blood glucose. The STZ group showed impairment of memory and when treated with 200 mg / kg metformin showed significant improvement. The neuronal loss evaluation of the STZ group showed a decrease of FOX-1 labeling, a reduction of NGF, as well as an increased expression of the apoptotic protein Bax, such changes were reversed by the action of metformin in the dose 200 mg / kg (STZ + M200). The activation of astrocytes and microglial cells in STZ group was reduced in a dose-dependent manner and the dose 200 mg / kg more effective. The control and STZ groups showed no alteration in eNOS expression, while groups treated with metformin showed elevated expression of this enzyme. Expression of VEGF was increased in STZ group and significantly reduced in STZ + M200 group. Also diabetic animals showed increased IL-1β, Iκβα and NF-kB expressions. Conversely, diabetic mice treated with 200 mg / kg metformin reduced inflammation availed by IL-1β and p-Iκβα, however there was a significant reduction in NF-κB. In conclusion, treatment with metformin promoted neuroprotection, reduced the neuroinflammation and improved spatial memory in diabetic mice.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T22:03:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-07T20:41:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-07T20:41:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciano Souza de Lima.pdf: 1641817 bytes, checksum: f53ff00d348037c5fbe3cafb7a300b82 (MD5) Previous issue date: 2017-05-25 / INTRODUÇÃO: Embriões de Gallus gallus (domesticus) são preferidos para avaliação de efeitos teratogênicos de produtos químicos ou naturais, pois nos primeiros estágios de desenvolvimento apresentam-se muito suscetíveis à ação de agentes tóxicos, podendo-se alterar o desenvolvimento embrionário normal. OBJETIVO: Avaliar o efeito do composto Riparina III sobre a morfogênese do sistema nervoso central em embrião de Gallus gallus. MATERIAL E MÉTODOS: Os ovos com um dia de fertilizados foram incubados em uma chocadeira a uma temperatura de 37,5°C e 60 ± 5% de humidade relativa durante 24 horas. Nos ovos do grupo controle foram injetados 0,1 ml de salina tamponada (PBS, pH 7,0) e nos do grupo experimental foram injetados com Riparina III nas concentrações de 25, 50 e 100 μg/mL. Os ovos foram fechados com fitas adesivas e a incubação continuou durante mais 24 horas. Posteriormente, os ovos foram, então, reabertos e os embriões dissecados, com retirada das membranas embrionárias e processados histologicamente para análise morfológica e morfométrica. RESULTADOS: Identificamos embriões de ave com desenvolvimentos nos estágios de nove a doze de acordo com a classificação de Hamburger e Hamilton (1951). Comparado com o grupo controle, a largura do tubo neural dos embriões foi modificada com todas as concentrações de Riparina III. O comprimento dos pares de somitos mais largos resultou das concentrações de Riparina III de 50 e 100 μg/mL. CONCLUSÃO: Embriões de Gallus gallus expostos a Riparina III nas concentrações de 50 e 100 μg/mL apresentaram aumento no comprimento dos somitos quando comparados com o grupo controle. Em relação à largura do tubo neural, o uso de Riparina III variou a estrutura independente das concentrações estudadas (25, 50 e 100μg/mL). / INTRODUCTION: Embryos of Gallus gallus (domesticus) are preferred for evaluation of the teratogenic effects of chemical or natural products, since in the early stages of development they are very susceptible to the action of toxic agents, being able to alter the normal embryonic development. AIM: To evaluate the effect of Riparin III on the central nervous system morphogenesis in the Gallus gallus embryo. MATERIAL and METHODS: One day fertilized eggs were incubated in a brooder at 37.5°C and 60 ± 5% relative humidity for 24 hours. In the eggs of the control group, 0.1 ml of buffered saline (PBS, pH 7.0) were injected and in the experimental group were injected with Riparin III at concentrations of 25, 50 and 100 μg / mL. The eggs were closed with adhesive tapes and the incubation continued for another 24 hours. Subsequently, the eggs were then reopened and the embryos dissected, with removal of the embryonic membranes and processed histologically for morphological and morphometric analysis. RESULTS: We identified bird embryos with development in stages from nine to twelve according to the classification of Hamburger and Hamilton (1951). Compared with the control group, the width of the neural tube of the embryos was modified with all concentrations of Riparin III. The length of the broader somite pairs resulted from the concentrations of Riparin III of 50 and 100 μg/mL. CONCLUSION: Embryos of Gallus gallus exposed to Riparin III at concentrations of 50 and 100 μg/mL presented increase in the somites length when compared to the control group. Regarding the width of the neural tube, the use of Riparin III varied the independent structure of the studied concentrations (25, 50 and 100 μg/mL).

Orientadores: Francesco Langone, Alain Woda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:12:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Parada_CarlosAmilcar_D.pdf: 5201698 bytes, checksum: 176d2d315595494f25c5898a0fa0bd68 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O objetivo do trabalho foi caracterizar o wind-up das fibras C nos neurônios convergentes do subnúcleo oral (Sp50) do núcleo espinhal do trigêmeo, bem como elucidar os mecanismos de controle envolvidos neste fenômeno relacionado com as hiperalgesias orofaciais. Para isso foram utilizados métodos eletrofisiológicos com a finalidade de registrar a atividade unicelular de neurônios nociceptivos convergentes do Sp50 após estimulações elétricas aplicadas nos campos receptivos destes neurônios. Os estímulos elétricos aplicados foram em forma de ondas retangulares, com intensidade três vezes o limiar das fibras C, 2 ms de duração e freqüência igual a 0,66 Hz. A participação dos receptores de NMDA na atividade dos neurônios nociceptivos do Sp50 foi analisada sob diferentes aspectos: i) após administração sistêmica do antagonista não competitivo de receptores de NMDA, MK-801 (0,15 mg/kg). ii) após injeção intranuclear no Sp50 de MK-801 (0,5µg). iii) após injeções intranucleares no subnúcleo caudal (Sp5C) de duas classes de antagonista de receptores de NMDA: MK-801 e CGS19755, um antagonista competitivo (0,5 µg e 20µg, respectivamente). Os resultados demostraram que: i) Os neurônios nociceptivos convergentes do Sp50, exibem o fenômeno do wind-up com características muito semelhantes aos neurônios nociceptivos do como dorsal da medula espinhal. i) A administração sistêmica de MK-80 1, inibe o wind-up e a pós descarga sem alterar significativamente (p<0,05) a resposta basal dos neurônios nociceptivos do Sp50. iii) Apenas a injeção intranuclear no Sp5C inibe o wind-up registrado nos neurônios do Sp50. 92 Com base na análise dos resultados obtidos, pode-se concluir que: i) ii) iii) Provavelmente o fenômeno do wind-up exibido pelos neurônios convergentes do Sp50 originado na camada gelatinosa do Sp5C. O Sp50, participa efetivamente das transmissões das respostas nociceptivas do complexo sensorial do trigêmeo, contudo possui propriedades modulatórias modestas. Os neurônios nociceptivos do Sp50, provavelmente por estarem sujeitos a uma convergência maior que os neurônios do Sp5C ou os do como dorsal da medula espinhal, parecem ser mais fortemente susceptíveis à ação de antagonistas de receptores de NMDA quando comparado aos demais neurônios nociceptivos. Isto confere uma característica fisiológica e farmacológica importante da dor orofacial / Abstract: The aim of this study was to characterize the C-fiber wind-up of the convergent neurons in subnucleus oralis of the trigeminal sensory complex, as well as to elucidate the control mechanisms involved in the phenomenon related to the orofacial hiperalgesias. Unitary extracelular recordings were performed on WDR oralis nociceptive neurons after electrical stimulation applied to their receptive field. Electrical rectangular wave stimuli were applied (0.66 Hz) at the 3 times the threshold for C-fiber activation. The involvement of the NMDA receptors in the responses of the oralis nociceptive neurons was evaluated under different aspects: i) C-fiber wind-up, ii) postdischarge, iii) baseline response, iv) the role of the NMDA receptors in subnucleus caudalis, v) the role of the NMDA receptors in subnucleus oralis, vi) the effect of the noncompetitive NMDA receptor, 111<-801 (dizocilpina), injection into subnucleus caudalis. The results suggested that: i) The convergent oralis nociceptive neurons exhibits a wind-up phenomenon analogous to that described in the neurons of the dorsal hom ofthe spinal cord, despite being devoid ofNMDA receptors. ii) The systemic administration of 111<-801, a noncompetitive NMDA receptor, strongly inhibits the wind-up and the afterdischarge without affecting significant1y the baseline response of the oralis nociceptive neurons. iii) The microinjection of CGS19755, a competitive NMDA antagonist, wihtin the subnucleus caudalis, inhibits the wind-up without affecting the baseline response of the oralis nociceptive neurons. However, the microinjection of MK-801, at the same site, evoked a significant decrease of the baseline response of the neurons studied. iv) The microinjection of NMDA receptor antagonist within subnuc1eus oralis, apparent1y did not modify the oralis nociceptive responses. Based on the results obtained, it is conc1uded that: i) The wind-up observed on convergents neurons of the subnuc1eus oralis iginates caudalis. at the substantia gelatinosa of the subnucelus ii) Although the subnuc1eus oralis plays a role on the transmission of the nociceptive responses of the trigeminal sensory complex and on C fiber wind-up, it possibly do not modulate orofacial pain. iii) The oralis nociceptive neurons appear to be analogous to the neurons found in laminae V of subnuc1eus caudalis. However, they se em to be much more related to the NMDA receptors than the others nociceptive neurons of the trigeminal sensory complex or of the dorsal hom of the spinal cord / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Fausto Berzin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T20:55:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MecianoFilho_Jose_M.pdf: 1025729 bytes, checksum: c4c04e6f98fe27819f5ee434162c0453 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: O presente trabalho tem por objetivo estudar as formas de disposição das estrias medulares no assoalho do IV ventrículo. Foram utilizados 100 troncos encefálicos humanos, os quais tiveram seu assoalho examinado macroscopicamente a olho nú e com auxílio de lupa 5X. A fim de estudarmos a localização topográfica das estrias medulares, adotamos a divisão anatômica do assoalho do IV ventrículo, segundo GRAY & GOSS (1962), que o divide em superior, média e inferior. A parte superior é limitada lateralmente pelos pedúnculos cerebelares superiores e inferiormente por uma linha imaginária ao nível das extremidades craniais das fóveas superiores ...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The present work has the objective of studying the kind of disposition of the meduliary striae into the floor of the fourth ventricle. It was used 100 human rhombaid fossa which had its the floor of the fourth ventricle examined macroscopically by naked eye and with a lens 5X. In order to study the topographic localization of the striae medullares, we accepted the anatomic division the floor af the ventricle by GRAY& GOSS (1962), that divide it into upper, intermediate and lower ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

Os receptores canabinóides do tipo CB1 estão presentes em grandes quantidades no sistema nervoso central, especialmente no hipocampo, estrutura encefálica essencial para a formação de memórias e local onde o fenômeno eletrofisiológico da potenciação de longa duração (LTP) tem sido mais extensamente estudado. Neste trabalho, estudamos os efeitos da administração intrahipocampal de AM152, um antagonista seletivo para os receptores canabinóides CB1, ou da Anandamida, um agonista canabinóide endógeno, (a) sobre as etapas de aquisição, consolidação e evocação da memória, e (b) sobre a indução da LTP. Nossos resultados mostram que o antagonista CB1 prejudicou a consolidação, porém facilitou a evocação da memória; foi, também, capaz de inibir a indução da LTP. Já o endocanabinóide anandamida facilitou a consolidação da memória. As evidências sustentam um claro envolvimento do sistema CB1 endógeno na modulação dos processos plásticos subjacentes ao processamento do aprendizado e da memória. / CB1 cannabinoid receptors are abundantly present in the brain, with large concentration in the hippocampus, an essential structure for the memory processes and extensively studied in LTP experiments. Here, we have studied the effect of the dorsal hippocampus infusion of the selective CB1 receptor antagonist AM251, or the endogenous cannabinoid anandamide, (a) upon the memory acquisition, consolidation and retrieval of the step-down inhibitory avoidance task in rats, and (b) upon LTP induction. Our results show that AM251 has caused a memory consolidation deficit, but a retrieval facilitation; it has also blocked the LTP induction. The endocannabinoid anandamide, otherwise, has caused a facilitation of the consolidation. Our evidence support a clear role for the CB1 endogenous cannabinoid system in the modulation of plastic events underlying the learning and memory processes.

No description available.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T01:53:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291194.pdf: 1204786 bytes, checksum: 0f61388597d87edd25510de440f762d3 (MD5) / Os flavonoides são compostos polifenólicos largamente encontrados no reino vegetal, apresentando uma série de propriedades farmacológicas. No sistema nervoso central (SNC) alguns exercem efeitos sedativos e ansiolíticos. O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos da administração central do flavonoide baicaleína (BC) no comportameno de camundongos, bem como traçar um estudo da relação estrutura-atividade entre vários flavonoides estruturalmente relacionados. Camundongos Swiss adultos fêmeas foram tratados por via intracerebroventricular (i.c.v.) com BC (20-0,002 pmol) e 5 min após, submetidos a diferentes testes comportamentais: sono induzido por éter etílico (SE), labirinto em cruz elevado (LCE), placa perfurada (PP), convulsões induzidas por pentilenotetrazol (CPTZ), e teste de suspensão pela cauda (TST); para identificar possíveis atividades sedativa, tipo-ansiolítica, anticonvulsivante ou tipoantidepressiva, respectivamente. O tratamento com BC potencializou o sono etéreo e promoveu efeito tipo-ansiolítico, mas não anticonvulsivante ou do tipo antidepressivo, nas concentrações de 0,02 e 0,2 pmol, independente de qualquer interferência metabólica sistêmica. Os pré-tratamentos com flumazenil (FMZ), antagonista benzodiazepínico, e dl-pclorofenilalanina etiléster (PCPA), depletor de serotonina, não modificaram significativamente os efeitos sedativos (FMZ) ou tipo-ansiolítico (FMZ e PCPA) da BC, embora tenham atenuado alguns parâmetros comportamentais observados no LCE. Concentrações subefetivas de BC mostraram efeito sinérgico ao diazepam (DZP) no teste do LCE. Seu efeito tipoansilíotico parece dependente de sua atividade nos receptores gabaérgicos do tipo GABAA e modulados pelo sítio do pentilenotetrazol (PTZ) e do neuroesteroide dehidroepiandrosterona sulfato (DHEAS), os quais antagonizaram seu efeito do tipo-ansiolítico. Face aos nossos resultados, sugerimos que a BC é capaz de promover um efeito tipo-ansiolítico e sedativo quando administrada centralmente, sendo o primeiro efeito parcialmente dependente do sistema GABAérgico, mas não do sistema serotonérgico, embora a serotonina possa estar envolvida no seu efeito motor. Além disso, no estudo de estrutura-atividade mostramos o potencial terapêutico para os flavonoides estruturalmente relacionados à BC. Os flavonoides 7,8-dihidroxiflavona (7,8-DH); 6-hidroxiflavona (6-H); 6-metoxiflavona (6-M); 5,7-dihidroxiflavona (5,7-DH); 6,7-dihidroxiflavona (6,7-DH); 7-hidroxiflavona (7-H); apigenina (4#,5,7-trihidroxiflavona) (AP); quercetina (3,3#,4#,5,7-pentahidroxiflavona) (QC); luteolina (3#,4#,5,7-tetrahidroxiflavona) (LT), promoveram efeitos tipo-ansiolíticos. A galangina (3,5,7-trihidroxiflavona) (GL), no entanto, não promoveu esse efeito, mostrando haver uma correlação entre efeito tipo-ansiolítico e a ligação ao sítio benzodiazepínico, embora esse fato não possa explicar completamente o efeito encontrado para todos os flavonoides testados. Os resultados corroboram outros trabalhos acerca dos efeitos centrais produzidos pela flavona BC e flavonoides a ela relacionados, mostrando seu potencial farmacológico para o tratamento de distúrbios de ansiedade. / Flavonoids are poliphenolic compounds widely found in vegetables that present several pharmacological properties. In the central nervous system some of them exert sedative and anxiolytic-like effects. In the present work we have studied the effects of the central administration of the flavonoid baicalein (BC) in the behavior of mice. We also studied the structureactivity relationship of other flavonoids structurally related to BC. Adult mice were treated by intracerebroventricular route (i.c.v.) and, after 5 min, submitted to several validated experimental models such as the ether-induced sleeping (SE), elevated plus-maze (LCE), hole board (PP), pentylenetetrazolinduced convulsions (CPTZ) and the tail suspension tests (TST) to evaluate the putative sedative, anxiolytic, anticonvulsant and antidepressant-like effects. BC potentiated the ether induced-sleep and showed an anxiolytic-like effect in the LCE (0.02 and 0.2 pmol), regardless of a systemic metabolic route, without affecting the pentylenetetrazolinduced convulsions or the tail suspension test immobilization. Pretreatment with flumazenil (FMZ), a benzodiazepine antagonist, or (dl-p-chlorophenilalanine ethyl ester) PCPA, which depletes serotonin, did not clearly modify the anxiolyticlike (FMZ or PCPA) or sedative effect (FMZ) of BC, although both had attenuated some behavioral parameters observed in the elevated plus-maze. Subeffective doses of BC were able to show a synergic effect with diazepam (DZP) on the LCE. Its anxiolytic-like effect seems to be dependent of the GABAergic receptors and modulated by pentylenetetrazole#s and neurosteroid dehydroepiandrosterone sulfate#s (DHEAS) sites since they antagonize the BC#s anxiolytic-like effect. Altogether these findings pointed that BC is able to promote anxiolytic-like and sedative effects when given by i.c.v. route that are, at least in part, dependent on GABAergic but not of the 5-HT system, although 5-HT seems to be involved on BC´s motor effects. Moreover, the structure-activity relationship showed the therapeutic potential of related flavonoids: 7,8- dihydroxyflavone; 6-hydroxyflavone; 6-metoxyflavone; 5,7- dihydroxyflavone; 6,7-dihydroxyflavone; 7-hydroxyflavone; apigenin (4#,5,7-trihydroxyflavone); quercetin (3,3#,4#,5,7- pentahydroxyflavone); luteolin 3#,4#,5,7-tetrahydroxyflavone), with anxiolytic-like effect, and only galangin (3,5,7-trihydroxyflavone) has no effect in this test. These resultsindicate a relationship between the anxiolytic-like effect and the affinity to the benzodiazepine receptor, although other systems could be underlying the observed effects for all flavonoids here tested. Our results are in accordance with others about the central effects of BC and some of its related flavonoids and we have shown the therapeutic potential to several flavonoids for treating anxiety disorders.

O sistema renina - angiotensina tem um papel importante e bem descrito na modulação do sistema cardiovascular. Sua participação em processos cognitivos tem sido assunto de diversos trabalhos. É de particular interesse a modulação da memória pela ação de seus metabólitos funcionais, angiotensina II (AII) e IV (AIV), no sistema nervoso central. Apesar dos diversos trabalhos abordando o assunto, o papel da AII no processamento da memória continua controverso. Para tentar aprofundar essa questão utilizamos o paradigma da esquiva inibitória de uma única sessão em conjunto com a infusão intra-hipocampal de AII, AIV, e antagonistas AT1 ou AT2. Ratos foram implantados com cânulas na região CA1 do hipocampo dorsal, alguns dias depois da cirurgia foram treinados em uma tarefa de esquiva inibitória e, em tempos diferentes após o treino, foram infundidos com veículo ou uma das drogas descritas acima. Os animais foram testados 3 ou 24 h após o treino; no primeiro caso para avaliar memória de curta duração (STM) e para avaliar memória de longa duração (LTM) no segundo. Verificou-se um efeito amnésico para a AII na consolidação da LTM e STM quando infundida imediatamente ou 30 min pós-treino, e na evocação da LTM quando infundida 15 min antes do teste. O efeito amnésico da AII parece ser modulado exclusivamente por sua ação em receptores AT2, não tendo participação nem receptores AT1, nem sua conversão endógena em AIV. A AII endógena não parece ter qualquer participação na formação da memória de esquiva inibitória.