Em artrópodes o sistema imune inato contribui para a adaptação de animais como os escorpiões à diferentes ambientes. Esse sistema é composto por mecanismos capazes de agir contra injúrias e a ação de microrganismos e entre esses mecanismos estão os peptídeos antimicrobianos (PAMs). O objetivo deste trabalho foi identificar PAMs presentes na hemolinfa de Tityus serrulatus. Para isso sua hemolinfa foi extraída e separados os hemócitos e plasma, em seguida fracionamos em 3 concentrações de acetonitrila em TFA 0,05% (05, 40 e 80%). Estas frações foram submetidas a uma cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) e os picos foram avaliados quanto a sua ação antimicrobiana e hemolítica. Foram identificadas 16 frações que apresentam atividade antimicrobiana. Uma das frações com atividade antimicrobiana, presente nos hemócitos apresentou similaridade com defensina descrita em carrapatos da espécie Ixodes scapularis. Essa fração possui aproximadamente 3486 Da, não apresenta atividade hemolítica e foi denominada como Serrulina. / In arthropods, its innate immune system contributes to the adaptation of animals like scorpions to different environments. This system consists of mechanisms that act avoiding injuries and against the action of microorganisms, among these mechanisms are antimicrobial peptides (AMPs). The aim of this study was to identify AMPs, present in the hemolymph of Tityus serrulatus. The hemolymph was extracted and then we separated hemocyte and plasma. The samples were fractionated in different concentrations of acetonitrile in TFA 0.05% (05, 40 and 80%). These fractions were subjected to high-performance liquid chromatography (HPLC) and the peaks obtained were evaluated for its antimicrobial and hemolytic action. We found sixteen fractions with antimicrobial activity. One of the fractions with antimicrobial activity, present in hemocytes, is similar with a defensin described in ticks, Ixodes scapularis. This fraction has about 3486 Da, has no hemolytic activity and was named as Serrulina.

A malária está entre as doenças mais prevalentes no mundo, acometendo aproximadamente 500 milhões de indivíduos por ano. Sabe-se que a resposta pró-inflamatória proporciona o controle da parasitemia, mas também desencadeia as manifestações clínicas que estão diretamente relacionadas aos casos fatais da doença. A utilização de modelos experimentais contribui para o conhecimento dos mecanismos intrínsecos relacionados à imunidade do hospedeiro. As análises em camundongos infectados com 106 eritrócitos parasitados pelo Plasmodium chabaudi AS mostram que, na fase aguda da malária, ocorre intensa proliferação com parasitemia detectável no dia 4 pós-infecção (p.i.), sendo o pico atingido no dia 7 p.i. e o declínio até o dia 10 p.i .. Acompanhando a cinética do parasita, observa-se o aumento no número de esplenócitos totais. A ativação do sistema imune caracterizasse pelo perfil de resposta Th1, com expansão da população de linfócitos T CD4+ convencionais e linfócitos T CD4+ Foxp3+ reguladores (Treg) e produção predominante de IFN-g. Nesse estudo, avaliamos em camundongos infectados com P. chabaudi AS: 1) O perfil de expressão das moléculas com papel fundamental na resposta imune nas células T CD4+ convencionais e Treg; 2) Os efeitos decorrentes da inibição in vitro das moléculas ICOS e OX40 presentes em ambas as populações celulares na resposta proliferativa a eritrócitos parasitados; 3) A atividade supressora das células Treg, sobre as células T CD4+ convencionais. Os resultados mostram que a partir do dia 4 p.i. ocorreu aumento na porcentagem de células T CD4+ convencionais e Treg, que expressavam as moléculas estimuladoras GITR, OX40 e ICOS. Observamos também que houve correlação entre a maior expressão da molécula CD25 com o aumento das outras moléculas ativadoras presentes nas células T CD4+ convencionais, o mesmo não sendo tão acentuado nas células Treg . Ao inibirmos a ação das moléculas ICOS e OX40, observamos que a inibição de ICOS interferiu de forma mais intensa na proliferação da população de células Treg , enquanto a inibição da molécula OX40 reduziu drasticamente a proliferação das células T CD4+ convencionais e Treg . Os ensaios de supressão indicaram que as células Treg ICOS+ são mais eficientes para controlar a proliferação das células T CD4+ convencionais. Além disso, observamos que, no baço dos camundongos infectados pelo P. chabaudi, ocorreu aumento na porcentagem de células T CD4+ convencionais que expressavam PD-1 e PD-L 1. No entanto, nas células Treg, detectamos diminuição na expressão de PD-1 e aumento de PD-L 1, fornecendo indícios sobre o mecanismo que pode estar envolvido no controle do número de células na fase aguda da infecção. Observamos ainda que, durante a expansão das células T CD4+, não houve modificações na porcentagem de células expressando a molécula CTLA-4 ou no nível de expressão desta molécula nos diferentes dias de infecção. Considerando os dados em conjunto, podemos concluir que a modulação da resposta imune à malária causada pelo P. chabaudi requer a ação de várias moléculas ativadoras e reguladoras, que muitas vezes são expressas de forma concomitante. A expressão orquestrada de cada uma dessas moléculas permite o desenvolvimento das várias etapas da resposta imune na malária. / Malaria is among the most prevalent diseases in the world, affecting approximately 500 million people per year. It is known that the pro-inflammatory response provides the control of parasitemia, but also triggers the clinical manifestations that are directly related to the fatal cases of the disease. The analyzes in mice infected with 106 erythrocytes parasitized with Plasmodium chabaudi AS show that, in the acute phase of malaria, there is an intense proliferation with detectable parasitemia on day 4 post-infection (p .i.), being the peak attained at day 7 p.i. and the decline until day 10 p.i .. Following the kinetics of the parasite, there is an increase in the total number of splenocytes. The activation of the immune system is characterized by a Th1 profile, with expansion of the populations of conventional CD4+ T cells and CD4+ Foxp3+ regulatory (Treg) T cells and predominant production of IFN-g. In this study, we evaluated in mice infected with P. chabaudi AS: 1} The expression profile of molecules with key roles in the immune responses of conventional CD4+ T cells and Treg cells; 2} The effects of in vitro inhibition of ICOS and OX40 molecules in the proliferative responses both cell populations that were stimulated with parasitized erythrocytes; 3} The suppressive activity of Treg cells on the conventional CD4+ T cells. The results showed that, from day 4 p.i. on, there was an increase in the percentages of conventional CD4+ T cells and Treg cells that expressed stimulatory GITR, OX40 and ICOS molecules. We also observed a correlation between the higher expression of CD25 with the increase of 0ther activation molecules that were present in conventional CD4+ T cells, a phenomenon less pronounced in Treg cells. By inhibiting the activity of ICOS and OX40 molecules, we observed that ICOS inhibition interfered more intensely in the proliferation of the Treg cell population, while the inhibition of OX40 dramatically reduced the proliferation of conventional CD4+ T cells and Treg cells. The suppression assays indicated that ICOS+ Treg cells were more effective to control the proliferation of conventional CD4+ T cells. Furthermore, we observed that, in the spleen of P. chabaudi-infected mice, there was an increase in the percentage of conventional CD4+ T cells expressing PD-1 and PD-L 1. However, in Treg cells, we detected a reduction in the expression of PD-1 and increase of PD-L 1, providing evidence about the mechanism that may be involved in the control of cell numbers in the acute phase of infection. We also observed that, during the expansion of CD4+ T cells, there was no change in the percentage of cells expressing CTLA-4 or the levei of expression of this molecule on the various days of infection. Considering the data together, we concluded that the modulation of the immune response to malaria caused by P. chabaudi requires the action of several activating and regulatory molecules, which are often expressed concomitantly. The orchestrated expression of each of these molecules allows the development of the various stages of the immune response to malaria.

Os linfócitos, principais células do sistema imune, podem ser encontrados em órgãos e tecidos de dois grandes sistemas do corpo: o sistema linfático, composto por uma extensa rede de vasos linfáticos e linfonodos; e o sistema linfoide, mais abrangente e que, além de englobar o sistema linfático, abrange todas as células, tecidos e órgãos do corpo que contêm agregados linfocitários, tais como o timo, baço e linfonodos. Embora esteja amplamente descrito para animais domésticos e alguns animais silvestres, estudos sobre o sistema imune em cetáceos são escassos. A influência negativa de contaminantes no sistema imune em mamíferos aquáticos está em constante discussão. Assim, um conhecimento mais profundo da anatomia deste sistema é essencial para a interpretação clínica e de achados de necropsia, para uma melhor compreensão dos achados patológicos. Portanto, o objetivo deste estudo foi caracterizar morfológica e ultraestruturalmente os órgãos do sistema linfoides de odontocetos de ocorrência no litoral brasileiro. As amostras utilizadas foram procedentes de animais encalhados nas regiões norte e nordeste do Brasil. Os órgãos analisados foram baço, timo e linfonodo, bem como os tecidos linfoides associados à mucosa. Primeiramente as amostras foram localizadas topograficamente e avaliadas macroscopicamente. Posteriormente, as amostras foram fixadas e analisadas por microscopias de luz, eletrônica de varredura e transmissão, imunohistoquímica e histomorfometria. Através das análises realizadas foi possível observar que os órgãos e tecidos linfoides em cetáceos são semelhantes ao observado em mamíferos domésticos, com algumas particularidades. Não existem diferenças morfológicas com relação ao timo entre as espécies estudadas, com exceção da não existência de tecido adiposo substituindo o órgão em animais mais jovens, e a presença de Corpúsculos de Hassal mais evidentes em tamanho neste grupo. Novos grupos de linfonodos foram descritos de acordo com a sua localização, entretanto todos possuiram arquitetura semelhante ao descrito na literatura para mamíferos terrestres. Os linfonodos estavam dispostos de forma solitária ou em grupos e apresentavam formato variado, recobertos por uma cápsula, e o parênquima do órgão dividiu-se em região cortical e medular. Os centros germinativos apresentaram-se mais evidentes e desenvolvidos em animais filhotes e jovens. Os baços e baços acessórios eram morfologicamente semelhantes, caracterizados por numerosos nódulos linfáticos delimitados pela bainha linfoide periarterial e uma rede celular difusa que circundava os nódulos linfáticos, sem diferenciação entre as camadas cortical e medular. Centros germinativos se tornaram mais discretos e reduzidos em número com o aumento da idade. Os baços acessórios estavam firmemente aderidos ao baço e/ou à grande curvatura da primeira cavidade do estômago, sendo mais prevalentes em animais com maior escore corporal e de mergulhos mais profundos, sugerindo uma função de reservatório sanguíneo complementar. Os tecidos linfoides associados à mucosa em cetáceos foram semelhantes aos observados em mamíferos terrestres, com adaptações inerentes ao meio aquático, como a presença de tonsilas orofaríngea e anal, assegurando uma resposta imunológica mais eficiente diante de desafios antigênicos constantes presentes em seu habitat. Sugere-se que este segmento do sistema linfoide é essencial para a proteção do animal diante dos contaminantes presentes em seu habitat. Com base nos achados do presente estudo, será possível uma melhor compreensão do funcionamento e estrutura do sistema imunológico das espécies estudadas, colaborando na elucidação das causas de encalhe destes animais, que poderão funcionar como potenciais indicadores ambientais / Lymphocytes, key cells of the immune system, can be found in organs and tissues of two major systems of the body: the lymphatic system, composed of an extensive network of lymph vessels and lymph nodes; and the lymphoid system, more comprehensive that, in addition to comprise the lymphatic system, includes all cells, tissues and organs containing lymphoid aggregates, such as the thymus and spleen. Although these systems are widely described in domestic animals and some wildlife species, studies about marine mammals are scarce. The negative influence of contaminants in the immune system of aquatic mammals is in constant discussion. The knowledge on the anatomy of these systems is essential for clinical interpretation and necropsy, providing a better understanding of the pathological findings. Therefore, the aim of this study was to characterize the morphology and ultrastructure of lymphoid system of odontocetes occurring in the Brazilian coast. Samples from animals stranded in the northern and northeastern regions of Brazil were collected and organs spleen, thymus and lymph node and mucosa-associated lymphoid tissue were analyzed. First, all samples were evaluated macroscopically and topographically located. Subsequently, they were fixed and analyzed by light microscopy, scanning electron and transmission, immunohistochemistry and histomorphometry. Through these analyzes it was observed that the organs and lymphoid tissues in cetaceans are similar to that observed in domestic mammals, with some peculiarities inherent to their habitat. There were no morphological differences from the thymus in the species studied, except for the absence of adipose tissue replacing the organ in younger animals, and the presence of Hassall corpuscles more prominent in this group. New groups of lymph nodes were described, possessing architecture similar to that described in the literature for terrestrial mammals. Lymph nodes were arranged solitarily or in groups and had varied format, covered by a capsule and the parenchyma of the organ was divided into cortical and medullary region. Their germinal centers had become more evident and developed in puppies and young animals. Spleens and accessory spleens were morphologically similar, characterized by numerous lymph nodules delimited by periarterial lymphoid sheath and a diffuse cellular network in its surrounding area, without differentiation between cortical and medullary layers. Germinal centers became more discrete and reduced in number with increasing age. Accessory spleens were firmly adhered to the spleen and / or the greater curvature of the first stomach and were more prevalent in animals with higher body score and dives deeper, suggesting a role of complement blood reservoir. The mucosa-associated lymphoid tissues in cetaceans were similar to those observed in terrestrial mammals, with inherent aquatic adaptations, such as the presence of oropharyngeal and anal tonsils, ensuring a more efficient immune response in the face of constant antigenic challenges present in their habitat. It is suggested that this segment of the lymphoid system is essential for the protection of the animal before the contaminants in their habitat. Based on these findings, this study will enable a better understanding of the structure and functioning of the immune system of the species studied, collaborating in the elucidation of causes of stranding of these animals, whicih may act as potential environmental indicators

O presente trabalho visa, através de métodos genético-epidemiológicos, identificarem genes associados à resposta ao antígeno da Leishmania. Utilizando amostras através do teste de Montenegro dos municípios de Monte Negro (RO) e Assis Brasil (AC). Na primeira abordagem foram feitos testes com TaqMan&#210 e a segunda com GWAS, e análises de associação foram feitas utilizando-se o pacote SPSS e o Plink. Não foram encontradas associações com cinco SNPs (MYD88, IL12, IL10, IFNGR1 e NRAMP1). A análise de dados de varredura genômica com filtros, indicou uma região no cromossomo 10 com 3 SNPs próximos que fazem parte de uma região regulatória que com o posterior auxilio do real time não se confirmaram, apesar do ensaio RS11251056 apresentar valores limítrofes, se tornando uma possível indicação para trabalhos futuros e por fim a último teste foi a meta-análise, através do método de Woolf, apresentou resultados indicativos de associação para ensaios encontrados no cromossomo 2 com ZNF638 relacionados a diferenciação celular e também no cromossomo 10 que contem lincRNAs e o gene NGR3, com dois ensaios apresentando valores significativos de p, onde podemos inferir que estas duas regiões podem participar ativamente na diferenciação da resposta ao antígeno da Leishmania. / The present study aims, through genetic-epidemiological methods, to identify genes associated with response to Leishmania antigen. Using samples Montenegro skin test through the municipalities of Monte Negro (RO) and Assis Brazil (AC). In the first approach were tested with TaqMan&#210 and the second GWAS, and association analyzes were performed using SPSS and Plink. No associations were found with five SNPs (MyD88, IL12, IL10, IFNGR1, and NRAMP1). The analysis of genome scan data with filters, indicated a region on chromosome 10 with three nearby SNPs that are part of a regulatory region that later with the help of real time is not confirmed, although the test rs11251056 have borderline values, becoming an possible direction for future work and finally the last test was the meta-analysis by the method of Woolf, presented results indicating the association found in tests for chromosome 2 with ZNF638 related to cell differentiation and also on chromosome 10 that contains lincRNAs and gene NGR3, two runs with a significant p value, where we can infer that these two regions can actively participate in the differentiation of the response to Leishmania antigen.

MOREIRA, Renato Teixeira. Avaliação do efeito dos polissacarídeos sulfatados extraídos da microalga Dunaliella tertiolecta como imunoestimulante em juvenis de camarão Litopenaeus vannamei. 2010. 71f. Dissertação (Mestrado em Engenharia de Pesca) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by Maria Naires Souza (marianaires@ufc.br) on 2011-12-12T16:40:57Z No. of bitstreams: 1 2010-dis-rtmoreira.pdf: 882170 bytes, checksum: 148e737d98e5bb20515e03da4269c01d (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Nascimento(vieiraaline@yahoo.com.br) on 2011-12-19T14:48:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010-dis-rtmoreira.pdf: 882170 bytes, checksum: 148e737d98e5bb20515e03da4269c01d (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-19T14:48:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010-dis-rtmoreira.pdf: 882170 bytes, checksum: 148e737d98e5bb20515e03da4269c01d (MD5) Previous issue date: 2010-08-04 / Aquaculture is one of the activities that most expands around the world and microalgae such as shrimps cultures have a great contribution into this progress. The aim of this study was the culture of the marine microlgae Dunaliella tertiolecta and extract its sulfated polysaccharides from the biomass and from the culture medium as well as to evaluate the effects of polysaccharides administration directly into the cultivation water of Litopenaeus vannamei shrimp’s post-larvae and juveniles. During microalgae cultivation some growth parameters and culture development were evaluated, and the sulphated polysaccharides were extracted from biomass and the culture medium. These polysaccharides were directly administrated into the water, in the concentration of 0.5; 1.0 and 2.0 mg L-1 to pl’s of L. vannamei, wich were submitted to a saline stress often applied to verify the quality of pl’s in the most of shrimps farms. The juveniles were exposed to the same concentration of the polysaccharides in a five days period in laboratory conditions. Then, we collected the animals haemolymph to analyze some hematoimmunological parameters, like total haemocyte count (THC), phenoloxidase enzime activity (PO), haemolymph aglutination capacity and total protein concentration. The results showed an excelent development of the microalgae D. tertiolecta, reaching a maximum yield of 6.67 g L-1 in dry biomass and in 10 L of culture medium, from wich were obtained 2.3 g of gross sulphated polysaccharides. The pl’s presented high resistance to the saline stress, when submitted to a 0.5 mg L-1 concentration of PS, and at the end of the test only 12.5% of individuals died, while in the juveniles the lower accumulated mortality was 6.7% when the higher dosage of PS was administrated. The analysis of the immunoparameters did not show any variation except the haemocyte total count and haemolymph protein concentration, wich were significantly reduced within the increase of polysaccharides dosage in the water. Future histological studies can be an alternative to reveal the possible haemocytes migration to the animals gills exposed to higher polysaccharides concentration in the water / A aquicultura tem se tornado uma das atividades que mais se expande mundialmente, tendo o cultivo de microalgas e a carcinicultura grande contribuição para este avanço. O presente trabalho teve por objetivo cultivar a microalga marinha Dunaliella tertiolecta e extrair seus polissacarídeos sulfatados do meio de cultivo e biomassa, bem como avaliar os efeitos da administração destes polissacarídeos diretamente na água de cultivo de pós-larvas (pl’s) e juvenis do camarão marinho Litopenaeus vannamei. Ao longo dos cultivos da microalga foram avaliados alguns parâmetros de crescimento e desenvolvimento da cultura, da qual foram obtidos o meio de cultivo e a biomassa para a extração dos polissacarídeos sulfatados. Estes polissacarídeos foram administrados diretamente na água, nas concentrações de 0,5; 1 e 2 mg/L, para as pl’s de L. vannamei, as quais foram submetidas ao teste de estresse salino freqüentemente aplicado nas fazendas de camarões para verificar a qualidade das pl’s. Os juvenis de camarão também foram expostos às mesmas concentrações de polissacarídeos por um período de 5 dias, em condições de laboratório. Em seguida, foram coletadas amostras da hemolinfa dos animais para a análise de alguns parâmetros hematoimunológicos, como a contagem total de hemócitos (CTH), atividade da enzima fenoloxidase (PO), capacidade de aglutinação da hemolinfa e concentração total de proteínas. Os resultados mostraram um excelente desenvolvimento da microalga D. tertiolecta, alcançando um rendimento máximo de 6,67 g.L-1 em biomassa seca, e em 10 L de meio de cultivo, dos quais foram obtidos 2,3 g de polissacarídeos sulfatados brutos. As pl’s apresentaram maior resistência ao teste de estresse salino, quando submetidas à concentração de 0,5 mg/L de PS, onde ao final do teste apenas 12,5% do indivíduos morreram, enquanto a menor mortalidade acumulada nos juvenis (6,7%) foi observada após a administração da maior dose. A análise dos imunoparâmetros não apresentou muitas variações com exceção da contagem total de hemócitos e da concentração de proteínas na hemolinfa, os quais foram significativamente reduzidos com o aumento da dose de polissacarídeos na água. Estudos futuros, principalmente histológicos, serão uma alternativa para esclarecer a possível migração de hemócitos para as brânquias dos animais expostos as maiores concentrações de polissacarídeos na água

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mirleide Araujo Cao.pdf: 870646 bytes, checksum: 38058144332685f382d8fc1e54996244 (MD5) Previous issue date: 2013-07-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The autohemotherapy (AH), used for more than 30 years is an old procedure that in recent years, are among the studies that involve human and veterinary medicine. The AH stimulating the proposal of increasing macrophages in order to combat bacteria, viruses and cancer cells. For stimulation of the reticuloendothelial system, bone marrow produces more monocytes that will colonize the tissues and given the name macrophage. For this reason, the Tnf-alpha was quantumly tested to evaluate the defense system in rats that could be used or not, as an alternative to contribute to immunogenicity and protection levels in pets. Among the important cintocinas is the tumoral necrosis factor-alpha (TNF-α), which is secreted by macrophages, T cells, B cells and fibroblasts, and can act on almost all nucleated cells. It is also a mediator of many inflammatory and immune functions, which regulates the growth of many cell types. For the evaluation were used 16 healthy rats, Wistar, with the same weights and ages. The animals were divided into two groups with eight animals each, being the G1 the control group (physiological saline) and G2 the AH group. All animals had their blood collected for laboratory analysis before any procedure. Blood was collected for laboratory analysis to determine the levels of TNF-α and CBC. For quantitation of TNF-α was used ELISA kit (-linked immunosorbent assay) b100784 Rat TNF-α and the color intensity was measured at 450 nm. When evaluating this work the values of Tumor Necrosis Factor (TNF-α) present, as well as WBC of rats submitted to two AH procedures. The results show that there is increased TNF-α after application of HA and the number of lymphocytes and monocytes in the moment M2 also increases with a reduction in the production of cell M3. Based on the data obtained in this work, there were changes in the levels of TNF-α, the increase is evident 8 hours 7 days after the procedure AH. In the WBC is increased number of cells, such as lymphocytes and monocytes 8 hours 7 days after application of HA / A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH / A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH. Palavras-chave: Animais; Citocina; Sistema Imune. 9 ABSTRAT Araújo Cáo, Mirleide. Assessment of levels of tumor necrosis factor (TNF-α) and leucocyte count in rats (Rattus norvegicus) after procedure autohemotherapy. In 2013. 42p. Dissertation (Master in Veterinary Science) - Center for Agricultural Sciences, Federal University of Espírito Santo, Alegre, ES, 2013. A auto-hemoterapia (AH), utilizada a mais de 30 anos é um procedimento antigo que nos últimos anos, está entre aos estudos que envolvem a medicina humana e veterinária. Ela tem a proposta de estimular o aumento dos macrófagos de modo a combater bactérias, vírus e células cancerosas. Pelo estimulo do sistema retículoendotelial, a medula óssea produz mais monócitos que vão colonizar os tecidos orgânicos e recebem então a denominação de macrófago. Por esta razão foi testado quatificamente o Tnf-α para avaliar o sistema de defesa em ratos que poderia ser empregado, como uma alternativa para contribuir com a imunogenicidade e niveis de proteção em animais de companhia. O TNF-α quando liberado em baixas concentrações age nas células endoteliais promovendo vasodilatação, estimulando a secretarem um grupo de citocinas que tem ação quimiotáxica em relação aos leucócitos, promovendo, um processo inflamatório local que possibilita o combate a quadros infecciosos. Foram serão utilizados 16 ratos hígidos, da linhagem Wistar, de peso médio e idades iguais. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, G1 o grupo controle e G2 o grupo AH. Foram retirados sague para realização do Leucograma, teste de Elisa e da Autohemoterapia, antes da aplicação (M1), 8 horas após aplicação (M2) e 7 dias após aplicação (M3). Para quatificação de TNF-α foi utilizado o kit de ELISA, e a intensidade da cor foi medido a 450 nm. Ao se avaliar nesse trabalho os valores de Fator de Necrose Tumoral (TNF-α) presente, bem como o leucograma de ratos submetidos a dois procedimentos de AH, os resultados revelaram que há um aumento na produção de TNF-α, após a aplicação da AH e que o número de linfócitos e monócitos também aumenta nos momento M2, com uma uma redução na produção de células em M3. Com base no conjunto de dados obtidos neste trabalho, houve alteração nos níveis de TNF-α, com aumento 8 horas e 7 dias após o procedimento de AH. Em relação ao leucograma há aumento do número de células, como os linfócitos e monócitos 8 horas e 7 dias após a aplicação da AH.

A esplenectomia total (ET) acarreta alterações na resposta imune que aumentam o risco de desenvolvimento de infecções graves. Objetivou-se determinar as subpopulações linfocitárias no sangue, nos baços e nos auto-implantes esplênicos (AIE), em ratos submetidos a ET isolada ou combinada com AIE (ET+AIE) e a suplementação dietética com L-glutamina (GLN). Utilizou-se ratos Sprague-Dawley submetidos a operação simulada, ET e ET + AIE, com AIE recuperados após seis e 12 semanas do início do experimento, e com e sem GLN. A suplementação ocorreu diariamente, nos 15 dias que antecederam a coleta sangüínea realizada imediatamente antes dos procedimentos operatórios (D0), após 12 semanas da operação simulada e ET, e após seis e 12 semanas de ET+AIE. As avaliações foram realizadas por meio de hemograma e citometria de fluxo (CF). A análise estatística utilizou testes paramétricos e não-paramétricos, sendo p<0,05 considerado para a rejeição da hipótese nula. ET acarretou diminuição da contagem relativa de linfócitos T totais e T- CD4 no sangue, mas GLN evitou a diminuição do percentual de células T- CD4; AIE, após 12 semanas de experimento, propiciou a manutenção da contagem relativa de linfócitos T totais e T- CD4 no sangue, e dentre esses animais, aqueles que receberam GLN, apresentaram contagens relativas de linfócitos T- CD4 maiores que animais esplenectomizados sem suplementação; AIE, após seis semanas de experimento, associado a GLN, ocasionou contagens absoluta e relativa de linfócitos T- CD4 no sangue significativamente maiores que em animais submetidos ao mesmo procedimento cirúrgico, com o mesmo tempo de avaliação, mas sem GLN; GLN manteve o número de células brancas / g de tecido nos AIE, em comparação ao encontrado nos baços de animais saudáveis; após período de regeneração de 12 semanas, AIE apresentaram contagem relativa de linfócitos B de zona marginal do baço semelhante à encontrada nos baços de animais saudáveis, o que não ocorreu com período de regeneração de seis semanas. O auto-implante esplênico em ratos, após esplenectomia total, associado à suplementação dietética com L-glutamina, foi capaz de reverter alterações observadas em algumas das subpopulações linfocitárias, ocasionadas pela esplenectomia. / Total splenectomy (TS) causes changes in the immune response that increase the risk of development of severe infection. The objective of the present study was to determine the lymphocyte subpopulations in blood, spleen, and splenic auto-implants (SAI) of rats subjected to TS alone or in association with SAI (TS + SAI) and to dietary supplementation with L-glutamine (GLN). Sprague-Dawley rats were subjected to sham surgery, to TS, and to TS + SAI, with SAI retrieved six and 12 weeks after the beginning of the experiment, with and without GLN. Supplementation was provided daily for 15 days preceding the blood collection performed immediately before the surgical procedures (D0), 12 weeks after sham surgery and TS, and six and 12 weeks after TS + SAI. Blood count and flow cytometry were used for the evaluations. Data were analyzed statistically by parametric and nonparametric tests, with the level of significance set at p<0.05. TS caused a reduction in the relative counts of total T and T-CD4 lymphocytes in blood, but GLN prevented the reduction in the percentage of T- CD4. After 12 weeks of the experiment, SAI favored the maintenance of the relative count of total T and T-CD4 lymphocytes in blood, and the animals receiving GLN presented higher relative T-CD4 counts than unsupplemented splenectomized animals. After six weeks of the experiment, SAI combined with GLN caused significantly higher absolute and relative T-CD4 lymphocyte counts compared to animals subjected to the same surgical procedure but receiving no GLN. GLN maintained the number of white cells/g tissue in SAI animals compared to those detected in the spleen of healthy animals. After a 12 week period of regeneration, SAI presented a relative B lymphocyte of the marginal zone of the spleen count similar to that detected in the spleen of healthy animals, a fact that did not occur after period of regeneration of six weeks. Splenic auto-implant in rats after total splenectomy, associated with dietary supplementation with L-glutamine, in some of the lymphocyte subpopulations, was able to reverse the changes induced by splenectomy.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Ciência da Computação. / Made available in DSpace on 2012-10-19T13:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 186109.pdf: 424138 bytes, checksum: 6677a8e74f3c097c80b2ef914b780f7b (MD5) / Este trabalho aborda o problema de segurança em sistemas computacionais considerando a geração, coleta e interpretação dos registros de atividades. Como ponto de partida considerou-se as características dos sistemas de detecção de intrusão estudados, ASAX, IDA, STAT. O propósito deste trabalho é uma solução para o problema de detecção de intrusão observando algumas características do sistema imunológico humano baseado na monitoração dos registros de atividades. Esta abordagem incorpora algumas características encontradas nos sistemas de detecção estudados tais como: análise dos registros de atividades de maneira seqüencial, universalidade no ambiente UNIX, reconhecimento de anomalias, bem como emissão de alarmes ao administrador. Para a implementação da abordagem foram necessários alguns assuntos para embasamento do tema, tais como: os conceitos do sistema imunológico humano, segurança de computadores, detecção de intrusão. Também considerou-se uma abordagem comparativa entre segurança de computadores e o sistema imunológico, levando-se em conta os conceitos e as características do sistema operacional UNIX. Os hosts escolhidos para monitoração pertencem ao parque computacional da UFSC, tendo um período de monitoração de cinco meses. Os registros coletados são classificados em dois conjuntos atividades normais (self) e as atividades intrusas (nonself). A interpretação é feita através de gráficos e tabelas, a qual mostra a natureza das intrusões ocorridas no período de monitoração. E também aponta quais os serviço de rede mais utilizados e por conseqüência apresentam maior vulnerabilidade.

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:30:08Z : No. of bitstreams: 1 000848649.pdf: 1399689 bytes, checksum: ae8884abe366a7d62cbc2bc66d58a529 (MD5) / Introdução: A miastenia gravis é uma doença que afeta a junção neuromuscular e leva a fraqueza da musculatura esquelética. O tratamento atual pode ser clínico ou cirúrgico através da ressecção completa do timo. Objetivo: Comparar, através de uma revisão sistemática da literatura, os resultados do tratamento cirúrgico e clínico da miastenia gravis. Métodos: Foi realizada uma busca nos principais bancos de dados a fim de encontrar ensaios clínicos randomizados que comparassem as duas modalidades terapêuticas. Como não existem estudos dessa categoria, foram selecionados aqueles com menor nível de evidência e que continham as duas intervenções, com pelo menos 10 pacientes em cada braço do estudo. A análise estatística foi feita com software StatsDirect, versão 3.0.121. Resultados: A busca encontrou 592 artigos na base Medline, 1925 artigos na base Embase e 204 artigos na base Lilacs. Após a exclusão dos estudos duplicados, 51 artigos foram analisados integralmente e nove foram selecionados para esta revisão. O número total de pacientes avaliados foi de 3.211. A mortalidade nos grupos cirúrgico e clínico foram respectivamente de 7 e 19%, com diferença estatística significante. A taxa de remissão nos grupos foi de 17% para o grupo cirúrgico e de 13% para o clínico, sem significância estatística. Para o desfecho melhora, o grupo cirúrgico apresentou uma taxa de 23% e o clínico de 29%, também sem diferença estatística. Conclusões: Apesar da baixa evidência disponível, a timectomia pode ser considerada uma opção terapêutica na miastenia gravis, com menores índices de mortalidade e taxas de remissão e controle semelhantes ao tratamento clínico / Introduction: Myasthenia gravis is a disease that affects the neuromuscular junction and leads to weakness of the skeletal muscles. Current treatment is guided by the clinical and surgical conduction through the complete resection of the thymus. Objective: Compare, through a systematic review, the results of surgical and medical treatment of myasthenia gravis. Methods: A search was conducted in major databases to find randomized controlled trials that compared the two treatment modalities. As there are no studies that category, were selected studies with a lower level of evidence and that contained both interventions and at least 10 patients in each arm of the study. Statistical analysis was performed with StatsDirect version 3.0.121 software. Results: The search found 592 articles in Medline, 1925 articles in the Embase and 204 articles in the Lilacs. After exclusion of duplicate studies, 51 articles were fully analyzed and nine were selected for this review. The total number of patients was 3,211. The mortality in the surgical and medical groups were respectively 7 and 19%, with significant differences. The remission rate in both groups was 17% for the surgical group and 13% for clinical, without statistical significance. To improve the outcome, the surgical group had a rate of 23% and 29% of the clinical, also no statistical difference. Conclusion: Despite the low available evidence, thymectomy may be considered a therapeutic option in myasthenia gravis, with lower rates of mortality and rates of remission and control similar to clinical treatment Keywords: myasthenia gravis, thymectomy, clinical treatment

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-22Bitstream added on 2014-06-13T19:32:59Z : No. of bitstreams: 1 melo_gd_me_araca.pdf: 620979 bytes, checksum: ecb7701e7865b9152a891623adce1b62 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Para investigar a patogênese das alterações encefálicas durante a leishmaniose visceral, a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, IL-12p40, IFN-e TNF-e das citocinas anti-inflamatórias IL-10 e TGF- foi avaliada por meio de RT-qPCR no encéfalo de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum (= chagasi). No encéfalo dos cães infectados houve aumento da expressão gênica de IL-1, IL-6, IFN- e TNF-, associada ao decréscimo da expressão de IL-10 e TGF-. Por outro lado, a expressão gênica da citocina pró-inflamatória IL-12p40 mostrou-se reduzida no encéfalo de cães com LV. Esses dados indicam a presença de um ambiente pró-inflamatório no encéfalo de cães com leishmaniose visceral, já que IL-1, IL-6 e TNF-, principalmente, é tida como um fator chave para a iniciação, manutenção e persistência da inflamação. Ainda, não foi detectada correlação entre o perfil de citocinas expresso com a manifestação clínica ou com a carga parasitária periférica de Leishmania, sugerindo que as alterações encefálicas são decorrentes da própria resposta imune do hospedeiro, independentemente da fase em que a doença se encontra / To investigate the pathogenesis of the brain alterations during visceral leishmaniasis, the gene expression of the pro-inflammatory cytokines IL-1, IL- 6, IL-12p40, IFN-and TNF-, and the anti-inflammatory cytokines IL-10 and TGF-was evaluated in the brain of dogs naturally infected with Leishmania infantum (syn. chagasi) by means of RT-qPCR. In the brain of the infected dogs, there was noticed up-regulation of IL-1, IL-6, IFN- and TNF-gene expression, in association with down-regulation of IL-10 and TGF-. On the other hand, the gene expression of IL-12p40 was down-regulated in the brain of the dogs with visceral leishmaniasis. These data indicate the presence of a pro- inflammatory milieu in the brain of dogs with visceral leishmaniasis, since IL-1, IL-6 and TNF-are considered key factors for the initiation, maintenance and persistence of inflammation. Furthermore, it was not detected correlation between the cytokine profile with the clinical manifestation or with the peripherical parasite density of Leishmania, which suggests that the brain alterations are due to the host immune response, regardless of the stage of the disease