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Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-04T19:05:43Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Émelin Alves dos Santos - 2016.pdf: 1617820 bytes, checksum: 16ea9a34990cb6d247fd464223a95256 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-05T12:41:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Émelin Alves dos Santos - 2016.pdf: 1617820 bytes, checksum: 16ea9a34990cb6d247fd464223a95256 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-05T12:41:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Émelin Alves dos Santos - 2016.pdf: 1617820 bytes, checksum: 16ea9a34990cb6d247fd464223a95256 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-04 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Strongyloidiasis is mainly predominant in regions of tropical and subtropical climates may present asymptomatic limited to the gastrointestinal tract. However, immunosuppression can cause hyperinfection and dissemination of larvae. Diabetes Mellitus (DM) causes immune dysregulation, became the individual more susceptible to secondary infections as strongyloidiasis. The chronicity of the disease in this group patients difficult the diagnosis, this fact conduct to research new methodologies such as circulating immune complex detections. Currently, there are few reports in literature on the evaluation immunological profile of strongyloidiasis in patients with DM and epidemiological research this disease important for monitoring the number of cases. In this context, this study had as objective determine serum levels of specific IgG antibodies and circulating immune complex in serum samples of infected patients and control individuals negative by ELISA. The survey was conducted with patients attended at the diabetes ambulatory in Jataí - GO and nondiabetic individuals residing in the city. The authorization for collect blood samples was obtained by signature Term of Informed Consent (TIC) it is characterized individuals in two groups: Group I patients with DM1 and 2, Group II individuals negative control for S. stercoralis and DM. Serum samples were tested by ELISA for detection of IgG and circulating immune complexes. We analyzed 50 serum samples from Group I and 50 in Group II, 30% were male and 70% female, for both groups. A total of 19 (38%) serum sample were positive for IgG in Group I and 2 (4%) for Group II, the majority were female age between 57 and 69 years. For detection circulating immune complexes only one sample was positive in Group I (2%) and Group II (0%). The seroprevalence of IgG anti-Strongyloides detection in diabetic patients was high when compared to the control group, detection of circulating immune complexes in Group I was low. In this context, we emphasize the importance the realization of immune complex research by ELISA as complementary tool in diagnosis of active infection S. stercoralis. / A estrongiloidíase é predominante principalmente em regiões de climas tropicais e subtropicais, podendo apresentar-se assintomática quando limitada ao trato gastrointestinal. No entanto, a imunodepressão pode levar a quadros de hiperinfecção e disseminação das larvas. O Diabetes Mellitus (DM) provoca disfunção do sistema imune, tornando o indivíduo mais susceptível a infecções secundárias, como a estrongiloidíase. A cronicidade da doença neste grupo de pacientes dificulta o seu diagnóstico, fato este que tem levado a pesquisa de novas metodologias, como a detecção de imuncomplexos circulantes. Atualmente, existem poucos relatos na literatura sobre a avaliação do perfil imunológico da estrongiloidíase em pacientes com DM, sendo a investigação epidemiológica desta doença importante para o acompanhamento do número de casos. Neste contexto, o presente estudo tem como objetivo determinar os níveis séricos de anticorpos IgG específicos e imunocomplexos circulantes em amostras de soros de pacientes infectados e de indivíduos controle negativo, por ELISA. A pesquisa foi realizada com pacientes atendidos no ambulatório de diabetes da prefeitura de Jataí - GO e indivíduos não diabéticos residentes no município. A autorização para coleta das amostras de sangue foi obtida pela assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE), sendo os indivíduos caracterizados em dois grupos: Grupo I pacientes portadores de DM1 e 2, Grupo II indivíduos controle negativo para S. stercoralis e DM. As amostras de soro foram testadas pela técnica imunoenzimática ELISA para detecção de IgG e imunocomplexos circulantes. Foram analisadas 50 amostras de soro do Grupo I e 50 do Grupo II, sendo que 30% eram do sexo masculino e 70% do sexo feminino, para ambos os grupos. Um total de 19 (38%) amostras de soro foram reagentes para IgG no Grupo I e 2 (4%) para o Grupo II, sendo a maioria do sexo feminino com faixa etária entre 57 e 69 anos. Para detecção de imunocomplexos circulantes, apenas uma amostra foi reagente no Grupo I (2%) e nenhuma no Grupo II (0%). A soroprevalência para detecção de IgG anti-Strongyloides em pacientes diabéticos foi elevada quando comparado ao grupo controle, enquanto que a detecção de imunocomplexos circulantes no Grupo I foi baixa. Neste contexto, ressalta-se a importância da realização da pesquisa de imunocomplexos por ELISA como ferramenta complementar para o diagnóstico da infecção ativa por S. stercoralis.

Strongyloides venezuelensis é um parasita intestinal de ratos frequentemente utilizado como modelo para o estudo da estrongiloidíase humana e animal. O objetivo deste estudo foi comparar os métodos parasitológicos, sorológico e molecular no diagnóstico da infecção experimental por S. venezuelensis em ratos (Rattus norvegicus). Amostras de fezes e soro foram colhidas e analisadas até o 60º dia pós-infecção (d.p.i.). Os métodos parasitológicos (contagem de ovos por gramas de fezes e cultura em carvão) foram positivos do 5º ao 45º d.p.i. Utilizando o teste sorológico (imunoenzimático, ELISA), os níveis séricos de anticorpos IgG aumentaram até o 28º d.p.i., e posteriormente reduziram até o 60º d.p.i. A reação em cadeia da polimerase (PCR) detectou DNA específico de S. venezuelensis nas amostras de fezes do 5º até 21º d.p.i. e do 2º até o 8º d.p.i. nas amostras de soro. Conclui-se que a detecção de DNA de S. venezuelensis, a partir de amostras de soro, é uma ferramenta diagnóstica promissora. Portanto, o presente estudo apresenta uma importante contribuição na melhoria do diagnóstico da estrongiloidíase experimental. / Strongyloides venezuelensis is an intestinal parasite of rats frequently used as a model for studying animal and human strongyloidiasis. The aim of this study was to evaluate the parasitological, serological and molecular methods for the diagnosis of experimental S. venezuelensis in rats (Rattus norvegicus). Stool and serum samples were collected and analyzed up to 60 days post-infection (d.p.i.). The parasitological methods (eggs per gram of feces and charcoal culture) were positive from 5 to 45 d.p.i. Using an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) serum levels of IgG antibodies increased up to 28 d.p.i. and thereafter decreasing by 60 d.p.i. Polymerase chain reaction (PCR) assays detected S. venezuelensis DNA in stool samples of rats from 5 to 21 d.p.i. and in serum samples from 2 to 8 d.p.i. In conclusion, detection of S. venezuelensis DNA from serum samples is a promising diagnostic tool. The present study presents an important contribution to improve the diagnosis of experimental strongyloidiasis.

Solanum lycocarpum A. St.- Hil. (Solanaceae) é uma espécie nativa do Brasil distribuída nas regiões sudeste e centro-oeste do país. O fruto desta planta é popularmente conhecido por fruta do lobo\". O consumo destes frutos impede o desenvolvimento de uma parasitose renal (Dioctophyna renale) que afeta lobos (Chrysocyon brachyurus). Estes frutos contêm dois principais heterosídeos alcaloídicos: solamargina (SM) e solasonina (SS), sendo ambos derivados da aglicona solasodina (SD). Doenças parasitárias, como leishmaniose, esquistossomose e estrongiloidíase estão diretamente ligadas a questões socioeconômicas representando um grande problema de saúde pública principalmente em regiões tropicais e subtropicais. Portanto, é extremamente importante a busca de novos fármacos para estas e outras doenças negligenciadas. O presente trabalho descreve a obtenção do extrato alcaloídico (EA) a partir dos frutos da lobeira, o isolamento dos heterosídeos alcaloídicos majoritários e da aglicona SD, bem como a avaliação de suas atividades in vitro leishmanicida, estrongiloicida e esquistossomicida. Além disso, a atividade esquistossomicida do EA também foi avaliada em modelo animal. O EA foi obtido a partir de frutos secos e triturado por meio de extração ácido-base. SM e SS foram isolados por cromatografia em camada delgada preparativa ou por cromatografia flash. SD foi obtida a partir da hidrólise ácida do EA, e purificada por cromatografia em coluna clássica utilizando eluição por gradiente. As estruturas dos compostos isolados foram confirmadas por análises de RMN e espectrometria de massas. Nas avaliações biológicas observaram-se atividade leishmanicida, estrongiloicida e esquistossomicida do EA. Os compostos isolados, SM, SS e a mistura equimolar foram ativos contra L. amazonensis. Além disso, esses compostos foram capazes de reduzir a atividade motora de vermes adultos de S. mansoni, separar os pares de verme adulto em macho e fêmea, causar a morte dos vermes, alterar o tegumento e reduzir o desenvolvimento dos ovos in vitro. A SD foi inativa contra L. amazonensis e vermes adultos de S. mansoni. O EA avaliado in vivo mostrou atividade esquistossomicida, diminuindo o número de ovos e granulomas no fígado dos animais tratados. / The Brazilian Solanaceae plant, Solanum lycocarpum A. St.-Hil. is distributed in the Southeast and Middle West of the country. The fruit of this plant is popularly known as fruta do lobo (wolf-fruit). The intake of these fruits prevents renal parasitism (Dioctophyna renale) which affects wolves (Chrysocyon brachyurus). These fruits contain two major alkaloid heterosides (solamargine (SM) and solasonine (SS)) bearing both the same aglycone, solasodine (SD). Among the parasitic diseases, such as leishmaniasis, strongyloidiasis and schistosomiasis stand out in terms of socioeconomic and public health importance in tropical and subtropical areas. Its extremely important to search for new drugs to treat these and other neglected diseases. The present work reports the obtainment of the alkaloidic extract (AE) of the S. lycocarpum fruit, the isolation of the major alkaloid heterosides and to obtain the aglycone. The obtained samples were evaluated for the in vitro leishmanicidal, strongyloicidal and schistosomicidal activities. Also, the schistosomicidal activity of the AE was evaluated in an animal model. The AE was obtained from dried and grounded fruits by using acid-base extraction. SM and SS were isolated either by preparative thin layer chromatography or by flash chromatography. SD was obtained by acid hydrolyses of the AE, and it was purified by silica gel column chromatography using gradient elution. The structures of the isolated compounds were confirmed by analysis of NMR and mass spectrometry. The analysis of the obtained results for the biological evaluation showed that the AE displays leishmanicidal, strongyloicidal and schistosomicidal activities. The isolated compounds, SM, SS and their equimolar mix were actived against L. amazonensis. These compounds also were able to reduce the mobility, to separate the worm into male and female, to modify the tegumental and to cause the death of the adults worms besides reducing the development of eggs. The SD was inactive against L. amazonensis and S. mansoni adult worms. When AE was evaluated in vivo showed activity as schistosomicidal, decreasing the number of eggs and granulomas in the liver of the treated mice.

Thesis (Ph.D. (Tropical Medicine))--Mahidol University, 2003.

Strongyloides venezuelensis é um parasita intestinal de ratos frequentemente utilizado como modelo para o estudo da estrongiloidíase humana e animal. O objetivo deste estudo foi comparar os métodos parasitológicos, sorológico e molecular no diagnóstico da infecção experimental por S. venezuelensis em ratos (Rattus norvegicus). Amostras de fezes e soro foram colhidas e analisadas até o 60º dia pós-infecção (d.p.i.). Os métodos parasitológicos (contagem de ovos por gramas de fezes e cultura em carvão) foram positivos do 5º ao 45º d.p.i. Utilizando o teste sorológico (imunoenzimático, ELISA), os níveis séricos de anticorpos IgG aumentaram até o 28º d.p.i., e posteriormente reduziram até o 60º d.p.i. A reação em cadeia da polimerase (PCR) detectou DNA específico de S. venezuelensis nas amostras de fezes do 5º até 21º d.p.i. e do 2º até o 8º d.p.i. nas amostras de soro. Conclui-se que a detecção de DNA de S. venezuelensis, a partir de amostras de soro, é uma ferramenta diagnóstica promissora. Portanto, o presente estudo apresenta uma importante contribuição na melhoria do diagnóstico da estrongiloidíase experimental. / Strongyloides venezuelensis is an intestinal parasite of rats frequently used as a model for studying animal and human strongyloidiasis. The aim of this study was to evaluate the parasitological, serological and molecular methods for the diagnosis of experimental S. venezuelensis in rats (Rattus norvegicus). Stool and serum samples were collected and analyzed up to 60 days post-infection (d.p.i.). The parasitological methods (eggs per gram of feces and charcoal culture) were positive from 5 to 45 d.p.i. Using an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) serum levels of IgG antibodies increased up to 28 d.p.i. and thereafter decreasing by 60 d.p.i. Polymerase chain reaction (PCR) assays detected S. venezuelensis DNA in stool samples of rats from 5 to 21 d.p.i. and in serum samples from 2 to 8 d.p.i. In conclusion, detection of S. venezuelensis DNA from serum samples is a promising diagnostic tool. The present study presents an important contribution to improve the diagnosis of experimental strongyloidiasis.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-10-20T15:45:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcia Carolina Mazzaro - 2017.pdf: 2663799 bytes, checksum: 4e703b3e54caaae256aa324970808c41 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-10-23T10:05:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcia Carolina Mazzaro - 2017.pdf: 2663799 bytes, checksum: 4e703b3e54caaae256aa324970808c41 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T10:05:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcia Carolina Mazzaro - 2017.pdf: 2663799 bytes, checksum: 4e703b3e54caaae256aa324970808c41 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-30 / Strongyloides stercoralis is an intestinal nematode that infects approximately 100 million people worldwide, mainly in tropical and subtropical regions. Most S. stercoralis carriers are asymptomatic or oligo-symptomatic, which does not mean absence of pathogenic action. Extra-intestinal manifestations can lead to severe and life-threatening conditions, especially in immunocompromised patients. The medical literature has case reports of disseminated strongyloidiasis in diabetic patients, but no studies have determined the relationship between diabetes and strongyloidiasis. The objective of this study aims to evaluate the parasitological and molecular profile of strongyloidiasis in patients with type 2 diabetes mellitus (DM2) and to analyze their value in the detection of chronic asymptomatic infection in these patients. The population for this research were patients from Diabetes Outpatient Clinic of Jataí -GO and other non - diabetic individuals living in the city. Fresh stool samples were obtained from 149 individuals, and were characterized in two groups: Group I (97) patients with DM2, Group II (52) individuals not carrying DM2. The fecal samples provided were submitted to parasitological methods of Hoffman, Rugai and agar plate culture, and subsequently, to molecular analysis by Polymerase Chain Reaction (PCR). The overall positivity of S. stercoralis by parasitological techniques was 2,6 % (4/149), and only one DM2 patient was positive for the infection. With PCR, the positivity was 16.1% (24/149), 9,3% (9/97) in the group I, and 28,8% (15/52) in the group II. DM2 showed to be a protective factor for strongyloidiasis (OR 0,252 IC95% 0,101 a 0,628 p=0,003). There was no agreement between the parasitological methods and PCR in the detection of S. stercoralis. Thus, the PCR technique using primer species-specific for S. stercoralis showed a greater ability to detect infection in asymptomatic diabetic and non-diabetic patients. / milhões de pessoas no mundo, principalmente em regiões tropicais e subtropicais. A maioria dos portadores de S. stercoralis são assintomáticos ou oligoassintomáticos, o que não significa ausência de ação patogênica. As manifestações extra-intestinais podem levar a quadros graves e potencialmente fatais principalmente em pacientes imunocomprometidos. Na literatura são descritos casos de estrongiloidíase disseminada em pacientes diabéticos, porém não há estudos que determinam a relação existente entre o diabetes e o desenvolvimento da estrongiloidíase. O Objetivo desse estudo foi avaliar o perfil parasitológico e molecular da estrongiloidíase em pacientes portadores Diabetes mellitus tipo 2 (DM2) e analisar sua performance na detecção de infecção crônica assintomática nesses pacientes. A pesquisa foi realizada com pacientes atendidos no ambulatório de diabetes da prefeitura de Jataí - GO e indivíduos não diabéticos residentes no município. Amostras fecais frescas foram obtidas de 149 indivíduos, sendo caracterizados em dois grupos: Grupo I (97) pacientes portadores de DM2, Grupo II (52) indivíduos não portadores de DM2. As amostras fecais fornecidas foram analisadas pelos métodos parasitológicos de Hoffman, Rugai e cultura em placa de ágar, e posteriormente submetidas à análise molecular por técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizando primer específico. A positividade geral de S. stercoralis pelas técnicas parasitológicas foi de 2,6%(4/149), e apenas um paciente DM2 foi positivo. Com a utilização de técnica de PCR, a positividade geral foi de 16,1% (24/149), sendo 9,3% (9/97) no Grupo I, e 28,8% (15/52) no Grupo II. DM2 mostrou ser um fator de proteção para estrongiloidiase (OR 0,252 IC95% 0,101 a 0,628 p=0,003). Não houve concordância entre os métodos parasitológicos e PCR na detecção de S. stercoralis. Desta forma, a técnica de PCR utilizando primer espécie-especifico para S. stercoralis apresentou maior capacidade de detecção de infecção em portadores assintomáticos diabéticos e não diabéticos.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-10T20:40:36Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-12T15:53:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T15:53:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-07 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Opportunistic infections are frequently observed in patients with HIV / AIDS. Among the most common parasites, have the nematode Strongyloides stercoralis and intestinal coccidia responsible for aggravating the situation of patients, often recurrent cases and chronic nature. The aim of this study was to evaluate the prevalence of intestinal parasites with emphasis on infections caused by S. stercoralis and intestinal coccidia in patients with HIV/AIDS attended at Serviço de Assistência Especializada (SAE) in the municipality of Jataí-GO, correlating with clinical, laboratory and socioepidemiological parameters. Was a harvested three stool sample on alternate days and processed by Lutz techniques, Rugai, agar plate culture, Ritchie and specific staining, Ziehl-Neelsen modified, Kinyoun and rapid method of Safranin. Data were analyzed using GraphPad Prism version 5.0 software and the values of p <0.05 were considered statistically significant. Fecal samples were analyzed three collected on alternate days in 90 patients, totaling 270 samples. The age ranged from 23 to 77 years, with mean and median of 42 years, the majority of female patients (54.44%). The prevalence was 28.88% for intestinal parasites, of these, 3.8% for S. stercoralis, Cryptosporidium sp. and C. belli, respectively. There was a significant correlation between positive for intestinal parasites stratified by clinical status (OR: 11.42; 95% CI: 2.18 to 59.6) and the use of antiretroviral therapy TARV (p = 0.0419) as a protective factor against opportunistic infections. The smoking (OR: 6.522- 95: 1.1 to 36.0) showed significance when correlated with the increase in viral load. Furthermore, there correlation between parasitic association with CD4 + lymphocyte counts (p = 0.0132) and type of sex (p = 0.0001). We conclude that the low prevalence of S. stercoralis and intestinal coccidia is due to the widespread use of TARV among patients in this county. In addition, the parameters analyzed are of great importance to understand the parasites acquisition risk in this population, and assist in establishing specific and early diagnosis of strategies that improve the quality of life of these patients. / As infecções oportunistas são frequentemente observadas em pacientes portadores do vírus HIV/aids. Dentre os parasitos mais comuns, tem-se o nematódeo Strongyloides stercoralis e os coccídios intestinais responsáveis por agravar o quadro clínico dos pacientes, muitas vezes por casos recorrentes e de caráter crônico. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a prevalência de enteroparasitos com ênfase em infecções causadas por S. stercoralis e coccídios intestinais em pacientes portadores do vírus HIV/aids atendidos no Serviço de Assistência Especializada (SAE) do município de Jataí-GO, correlacionando com os parâmetros clínicos, laboratoriais e socioepidemiológicos. Foi colhida três amostras de fezes em dias alternados e processadas pelas técnicas de Lutz, Rugai, cultura em placa de ágar, Ritchie e as colorações específicas, Ziehl-Neelsen Modificado, Kinyoun e o Método rápido da Safranina. Os dados foram analisados utilizando o software GraphPad Prism versão 5.0 e os valores de p <0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Foram analisadas três amostras fecais colhidas em dias alternados de 90 pacientes, totalizando 270 amostras. A idade variou de 23 a 77 anos, com média e mediana de 42 anos, sendo a maioria dos pacientes do sexo feminino (54,44%). A prevalência foi 28,88% para de enteroparasitos, destes, 3,8% para S. stercoralis, Cryptosporidium sp. e C. belli, respectivamente. Verificou-se correlação significativa da positividade para parasitos intestinais estratificados pelo status clínico (OR: 11,42; IC95%: 2,18-59,6) e pelo uso da Terapia Antiretroviral (TARV) (p=0,0419) como um fator protetor contra as infecções oportunistas. O tabagismo (OR: 6,522- IC95:1,1-36,0) demonstrou significância quando correlacionado com o aumento da carga viral. Além disto, verificou correlação entre associações parasitárias com contagem de linfócitos TCD4+ (p= 0,0132) e tipo de relação sexual (p=0,0001). Conclui-se que a baixa prevalência de S. stercoralis e coccídios intestinais seja devido ao amplo uso da TARV nos pacientes deste município. Além disto, os parâmetros analisados são de grande relevância para compreender a situação de risco de aquisição de parasitos nesta população, além de auxiliar no estabelecimento de estratégias de diagnóstico específico e precoce que melhoraram a qualidade de vida destes pacientes.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-07-03T21:14:49Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Fernandes Carvalho - 2017.pdf: 1530180 bytes, checksum: c6d17beae996f702776fe8cf31bc7025 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-07-10T13:58:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Fernandes Carvalho - 2017.pdf: 1530180 bytes, checksum: c6d17beae996f702776fe8cf31bc7025 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T13:58:27Z (GMT). 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In this context, the objective of this study was to evaluate the anthelmintic potential of the ethanolic extract, ethyl acetate fraction, aqueous fraction, and essential oil rich in alpha bisabolol of S. guianensis as well as of the alpha bisabolol isolated in the control of S. venezuelensis. We carried out the Eggs Hatching Tests (EHT) and Larval Motility Tests (LMT) initially with ethanolic extract, essential oil and alpha bisabolol isolated at concentrations of 0.2 to 1.0 mg/mL, and finally fractionated ethyl acetate and aqueous fractions of ethanolic extract at concentrations of 0.05 to 0.8 mg/mL were tested. We used as positive controls, albendazole in EHT and ivermectin in LMT and as negative controls, filtered water and DMSO 1%. Fresh feces of gerbils were used to perform the EHT and stool culture in vermiculite for LMT. Was incubated with 50μL of tested compounds with eggs or larvae containing approximately 50 specimens in eppendorf tubesfor TEO and TML. The tests were performed in duplicate with the reply, and after incubation at 28 °C for 48 hours was performed counting the specimens in the EHT, and LMT, counts were performed at intervals of 24, 48 and 72 hours. The counts in the two tests were perfomed under optical microscopy. All the substances tested showed positive ovicidal activity equivalent to the positive control, and caused changes in the morphology of eggs. Only ethyl acetate and aqueous fractions showed a concentration-dependent effect in egg assays. In the TML, there was no time dependent relationship, only the ethanolic extract and the aqueous fraction of S. guianensis presented efficiency equivalent to the positive control. With the exception of alpha bisabolol alone, the other compounds had a concentration-dependent effect on TML. The higher concentration of the ethanolic extract caused changes in the cuticle of the analyzed larvae. The phytochemical tests of the ethanolic extract showed the presence of phenolic compounds, tannins and flavonoids. It is suggested from the results that there is synergism between the chemical constituents of the different compounds analyzed in the TEO and TML, and the presence of tannins and flavonoids in the ethanolic extract and its fractions influenced the observed ovicidal and larvicidal activity. It is concluded that S. guianensis showed in vitro antiparasitic potential mainly of the ethanolic extract and its fractions in the different forms of S. venezuelensis. / A estrongiloidíase é uma doença negligenciada com prevalência subestimada ocasionada principalmente pela espécie Strongyloides stercoralis, geralmente é assintomática, mas potencialmente fatal em indivíduos imunocomprometidos. Trata-se de uma infecção de difícil diagnóstico devido a eliminação de larvas discreta e irregular, e com alto impacto em saúde pública. Dentre os medicamentos disponíveis para o tratamento da estrongiloidíase, estão o albendazol e ivermectina, mas devido aos efeitos colaterais e o desenvolvimento da resistência, tem-se buscado novas alternativas terapêuticas para o controle do gênero Strongyloides sp. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar o potencial anti-helmíntico do extrato etanólico, fração acetato de etila, fração aquosa e óleo essencial rico em alfa bisabolol de Siparuna guianensis bem como do alfa bisabolol isolado no controle de S. venezuelensis. Realizou-se Testes de Eclosão de Ovos (TEO) e Testes de Motilidade Larval (TML) inicialmente com o extrato etanólico, óleo essencial e alfa bisabolol isolado nas concentrações de 0,2 à 1,0 mg/mL e, por fim, foram testadas as frações acetato de etila e aquosa fracionadas do extrato etanólico nas concentrações de 0,05 à 0,8 mg/mL. Foram utilizados como controles positivos o albendazol no TEO e a ivermectina no TML e, como controles, água filtrada e DMSO 1%. Foram utilizadas fezes frescas de gerbilos para realização do TEO e cultura de fezes em vermiculita para o TML. Foi incubado 50 μL dos compostos testados com ovos ou larvas contendo aproximadamente 50 espécimes em tubos eppendorfs para o TEO e TML. Os testes foram feitos em duplicata com réplica, e após incubação à 28°C por 48 horas realizou-se a contagem dos espécimes no TEO, e no TML, as contagens foram realizadas em intervalos de 24, 48 e 72 horas. As contagens nos dois testes foram realizadas em microscopia óptica. Todas as substâncias testadas apresentaram atividade ovicida equivalente ao controle positivo e, provocaram alterações na morfologia dos ovos. Apenas as frações acetato de etila e aquosa apresentaram efeito concentração dependente nos ensaios com ovos. No TML, não houve relação tempo dependente, apenas o extrato etanólico e a fração aquosa de S. guianensis apresentou eficiência equivalente ao controle positivo. Com exceção do alfa bisabolol isolado, os demais compostos apresentaram efeito concentração dependente no TML. A maior concentração do extrato etanólico provocou alterações na cutícula das larvas analisadas. Os testes fitoquímicos do extrato etanólico mostraram a presença de compostos fenólicos, taninos e flavonoides. Infere-se a partir dos resultados que existe sinergismo entre os constituintes químicos dos diferentes compostos analisados no TEO e TML e, que a presença de taninos e flavonoides no extrato etanólico e em suas frações influenciou na atividade ovicida e larvicida observada. Conclui-se que S. guianensis apresentou in vitro potencialidade antiparasitária principalmente do extrato etanólico e suas frações nas diferentes formas de S. venezuelensis.

Solanum lycocarpum A. St.- Hil. (Solanaceae) é uma espécie nativa do Brasil distribuída nas regiões sudeste e centro-oeste do país. O fruto desta planta é popularmente conhecido por fruta do lobo\". O consumo destes frutos impede o desenvolvimento de uma parasitose renal (Dioctophyna renale) que afeta lobos (Chrysocyon brachyurus). Estes frutos contêm dois principais heterosídeos alcaloídicos: solamargina (SM) e solasonina (SS), sendo ambos derivados da aglicona solasodina (SD). Doenças parasitárias, como leishmaniose, esquistossomose e estrongiloidíase estão diretamente ligadas a questões socioeconômicas representando um grande problema de saúde pública principalmente em regiões tropicais e subtropicais. Portanto, é extremamente importante a busca de novos fármacos para estas e outras doenças negligenciadas. O presente trabalho descreve a obtenção do extrato alcaloídico (EA) a partir dos frutos da lobeira, o isolamento dos heterosídeos alcaloídicos majoritários e da aglicona SD, bem como a avaliação de suas atividades in vitro leishmanicida, estrongiloicida e esquistossomicida. Além disso, a atividade esquistossomicida do EA também foi avaliada em modelo animal. O EA foi obtido a partir de frutos secos e triturado por meio de extração ácido-base. SM e SS foram isolados por cromatografia em camada delgada preparativa ou por cromatografia flash. SD foi obtida a partir da hidrólise ácida do EA, e purificada por cromatografia em coluna clássica utilizando eluição por gradiente. As estruturas dos compostos isolados foram confirmadas por análises de RMN e espectrometria de massas. Nas avaliações biológicas observaram-se atividade leishmanicida, estrongiloicida e esquistossomicida do EA. Os compostos isolados, SM, SS e a mistura equimolar foram ativos contra L. amazonensis. Além disso, esses compostos foram capazes de reduzir a atividade motora de vermes adultos de S. mansoni, separar os pares de verme adulto em macho e fêmea, causar a morte dos vermes, alterar o tegumento e reduzir o desenvolvimento dos ovos in vitro. A SD foi inativa contra L. amazonensis e vermes adultos de S. mansoni. O EA avaliado in vivo mostrou atividade esquistossomicida, diminuindo o número de ovos e granulomas no fígado dos animais tratados. / The Brazilian Solanaceae plant, Solanum lycocarpum A. St.-Hil. is distributed in the Southeast and Middle West of the country. The fruit of this plant is popularly known as fruta do lobo (wolf-fruit). The intake of these fruits prevents renal parasitism (Dioctophyna renale) which affects wolves (Chrysocyon brachyurus). These fruits contain two major alkaloid heterosides (solamargine (SM) and solasonine (SS)) bearing both the same aglycone, solasodine (SD). Among the parasitic diseases, such as leishmaniasis, strongyloidiasis and schistosomiasis stand out in terms of socioeconomic and public health importance in tropical and subtropical areas. Its extremely important to search for new drugs to treat these and other neglected diseases. The present work reports the obtainment of the alkaloidic extract (AE) of the S. lycocarpum fruit, the isolation of the major alkaloid heterosides and to obtain the aglycone. The obtained samples were evaluated for the in vitro leishmanicidal, strongyloicidal and schistosomicidal activities. Also, the schistosomicidal activity of the AE was evaluated in an animal model. The AE was obtained from dried and grounded fruits by using acid-base extraction. SM and SS were isolated either by preparative thin layer chromatography or by flash chromatography. SD was obtained by acid hydrolyses of the AE, and it was purified by silica gel column chromatography using gradient elution. The structures of the isolated compounds were confirmed by analysis of NMR and mass spectrometry. The analysis of the obtained results for the biological evaluation showed that the AE displays leishmanicidal, strongyloicidal and schistosomicidal activities. The isolated compounds, SM, SS and their equimolar mix were actived against L. amazonensis. These compounds also were able to reduce the mobility, to separate the worm into male and female, to modify the tegumental and to cause the death of the adults worms besides reducing the development of eggs. The SD was inactive against L. amazonensis and S. mansoni adult worms. When AE was evaluated in vivo showed activity as schistosomicidal, decreasing the number of eggs and granulomas in the liver of the treated mice.