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Estudo histoquímico e ultra-estrutural da distribuição das fibras da matriz extracelular na prega vocal humana fetal no período perinatal / Histochemical and ultrastructural study on the distribution of the extracellular matrix fibers in the human fetal vocal fold

Luciana Miwa Nita 12 March 2008 (has links)
Acredita-se que nos humanos, o ligamento vocal se desenvolva após o nascimento. No entanto, não há consenso na literatura sobre qual a faixa etária de seu aparecimento. Muitos estudos indicam que no neonato, a lâmina própria da prega vocal apresenta-se com algumas fibras esparsas sem uma organização particular. O principal objetivo deste estudo foi obter informação a respeito das fibras colagênicas e do sistema elástico (sob a luz dos conhecimentos atuais sobre a matriz extracelular), na lâmina própria de pregas vocais de fetos no período perinatal. Laringes obtidas por autópsia de fetos entre sete a nove meses foram estudadas através de microscopia de luz e eletrônica de transmissão. Fibras contendo colágeno foram identificadas através do Método da Picrossírius-polarização, fibras do sistema elástico foram descritas utilizando-se o método de Resorcina-fucsina de Weigert após oxidação com oxona. Os resultados histoquímicos coincidem com as observações da microscopia eletrônica, evidenciando populações de fibras de colágeno segregadas em diferentes compartimentos na lâmina própria. Assim, em sua região central as fibras de colágeno se mostraram finas, fracamente birrefringentes de coloração esverdeada, enquanto que as regiões superficiais e profundas apresentaram fibras grossas de colágeno com forte birrefringência de cor vermelho-amarelada, quando estudadas através do método da Picrossírius-polarização. Estas características sugerem que as fibras finas da região central são compostas principalmente por colágeno tipo III, enquanto o colágeno tipo I predomina nas regiões superficial e profunda, em concordância com as observações da literatura relacionada com o estudo da prega vocal de adultos. Assim como o componente colagênico, as fibras do sistema elástico mostraram uma distribuição diferencial ao longo da lâmina própria. Em certo sentido, esta distribuição é complementar àquela das fibras de colágeno: a região central, na qual fibras colagênicas eram escassas e finas, apresentou maior densidade de fibras do sistema elástico, em comparação às regiões superficial e profunda. Assim, a presença de um padrão de distribuição diferencial das fibras da matriz extracelular na prega vocal humana fetal equivalente à descrição clássica do ligamento vocal adulto nos permitiu concluir que o ligamento vocal já está presente ao nascimento. As implicações funcionais destes achados foram discutidas. O conceito corrente de que os estímulos externos, como a fonação, são essenciais para a determinação da estrutura em camadas da lâmina própria, faz com que nossos resultados sejam surpreendentes ao evidenciar a presença de uma distribuição complexa e organizada dos componentes do tecido conjuntivo na lâmina própria de pregas vocais de fetos no período perinatal. A idéia de que a contribuição genética poderia desempenhar um papel importante na organização destas camadas, independentemente do estímulo mecânico, poderia explicar melhor a presença das estruturas observadas já ao nascimento, uma vez que o mecanismo genético pode agir antes de qualquer estímulo mecânico externo, como a fonação. / It is currently believed that, in humans, the vocal ligament develops after birth. However, there is no consensus in the literature about the age of its surge. Most papers describe that in the newborn, the lamina propria shows the presence of some sparse fibers without any particular organization. The main purpose of this study was to obtain information regarding collagenous and elastic system fibers (in the light of the current knowledge on extracellular matrix) in the lamina propria of fetal vocal fold. Larynges obtained from autopsy of human fetuses aged seven to nine months were studied by means of light and electron microscopy. Collagen containing fibers were assessed by the Picrosirius-polarization method, elastic system fibers were described using Weigert\'s resorcin-fuchsin with previous oxidation with oxone. The histochemical results coincide with the electron microscope observations in showing collagen populations segregated into different compartments of the lamina propria. Thus, in its central region the collagen shows up as thin, weakly birefringent, greenish fibers while the superficial and deep regions consist of thick collagen fibers which display a strong birefringence of red or yellow color when studied with the aid of the Picrosirius-polarization method. These characteristics strongly suggest that the thin fibers in the central region are composed mainly of type-III collagen, whereas type-I collagen predominates in the superficial and deep regions, in agreement with the observations in the literature pertaining to studies of adult vocal folds. As well as collagen, the elastic system fibers show a differential distribution throughout the lamina propria. This distribution is complementary, in a sense, to that of the collagen fibers: the central region, with thin collagenous fibers, presents the greatest density of elastic system fibers in comparison to the superficial and deep regions. Thus, the presence of a differential distribution of the extracellular matrix fibers in the fetal vocal fold equivalent to the classical description of the adult vocal ligament allowed the conclusion that a vocal ligament is already present in the newborn. The functional implications of the foregoing findings are discussed. Current ideas sustaining that stimuli like phonation are essential to the determination of the layered structure of the lamina propria would make it surprising that a newborn baby could present a complex and organized distribution of connective tissue components as our results show to be the case. The idea that genetic contrivance instead should play a role in the organization of these layers seems to explain better the observed structures once it would act before any mechanical stimulus similar to phonation could take place.
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Tratamento de retrações gengivais em pacientes fumantes graves através de duas técnicas cirúrgicas: estudo clínico, laboratorial e histológico / Treatment of gingival recession in severe smokers using two surgical techniques: clinical, laboratorial and histological study

Danilo Maeda Reino 19 February 2010 (has links)
Objetivo: Este trabalho avaliou o recobrimento radicular obtido por duas técnicas de cirurgia plástica periodontal em pacientes fumantes graves, através de análises clínica, histológica e laboratorial. Materiais e Métodos: Foram selecionados 20 pacientes fumantes graves que apresentavam ao menos duas retrações classes I ou II de Miller em dentes não molares, bilateralmente. Os parâmetros clínicos avaliados foram: profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI), altura (AR) e largura das retrações (LR), altura (AM) e espessura da mucosa queratinizada (EM) e altura e base das papilas mesiais e distais à retração. Um lado recebeu retalho posicionado coronalmente, enquanto no outro lado foi utilizada a técnica de retalho estendido. Ambos os procedimentos foram associados ao enxerto de tecido conjuntivo subepitelial. Biópsias foram feitas durante os procedimentos cirúrgicos para quantificação dos vasos sanguíneos utilizando de avaliação imunohistoquímica. Coleta de saliva foi realizada pré tratamento e após 3 e 6 meses, como forma de avaliar, por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA), a exposição ao fumo durante o período completo do estudo. Resultados: Os parâmetros clínicos avaliados não apresentaram diferença estatística entre grupos ou intra-grupos. Os pacientes mantiveram a mesma exposição ao fumo durante os 6 meses avaliados. O recobrimento radicular obtido foi baixo para ambas as técnicas estudadas (43,18% para técnica padrão e 44,52% para técnica teste). O retalho apresentou menor quantidade de vasos sanguíneos do que o tecido do enxerto (13,49 ± 5,48 contra 18,69 ± 4,87, p= 0,0001). Conclusão: O fumo prejudicou intensamente os resultados de ambas as técnicas empregadas, reduzindo o recobrimento radicular, a frequência de recobrimento total e a quantidade de vasos sanguíneos nos tecidos. Não houve diferença entre as técnicas testadas. / Background: The aim of this study was to evaluate the root coverage obtained by two different periodontal plastic techniques in severe smokers, analyzing clinical, laboratorial and histological parameters. Methods: Twenty severe smokers were selected. Each patient had bilateral Miller class I or II gingival recessions in non-molar teeth. Clinical measurements of probing pocket depth (PPD), clinical attachment level (CAL), recession height (RH) and recession width (RW), keratinized mucosa height (KMH) and keratinized mucosa thickness of (KMT) and height and width of the adjacent papillae were determined at baseline, 3 and 6 months. One side received coronally positioned flap, while the other side received the extended flap technique, both procedures in conjuction with the subeptelial connective tissue graft (SCTG). Biopsies from SCTGs and flaps were prepared for immunohistochemistry. Blood vessels were identified and counted by coexpression of Factor-VIII related antigen stained endothelial cells. Salivary cotinine samples were taken at baseline and after 3 and 6 months, as an indicator of the level of exposure to nicotine. Results: Between groups or intra groups analysis showed no statistical differences for the evaluated clinical parameters. Patients maintained the same exposure to smoke during the 6 months evaluation periods. Both techniques had low root coverage (standard technique: 43.18% and test technique: 44.52%). Histomorphometry of biopsies revealed blood vessel densities of 13.49 ± 5.48 vessels/200x field for the flaps, and of 18.69 ± 4.87 vessels/200x field for the grafts (p = 0.0001). Conclusion: The extend flap technique did not differ from standart technique for recession treatment of severe smoking patients.
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Estudo da mucosa da língua e da superficie de interface epitélio-tecido conjuntivo da preguiça-de-coleira (Bradypus torquatus, Iliger, 1811), empregando os métodos de microscopia de luz e eletrônica de varredura / Study of the lingual mucosa and surface of interface epithelium-connective tissue of the maned sloth (Bradypus torquatus, Iliger, 1811), employing light and scanning electron microscopy methods

Edson José Benetti 21 December 2005 (has links)
Estudo das superfícies dorsal e ventral da língua e da superfície de interface epitélio-tecido conjuntivo de Bradypus torquatus, foi realizado empregando-se os métodos de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. As línguas de Bradypus torquatus foram removidas, dissecadas e seccionadas em 3 partes: rostral, média e caudal e tratadas pelos métodos de microscopia de luz e eletrônica de varredura. Os resultados revelaram que a língua apresenta um ápice arredondado, um corpo e uma raiz. A mucosa dorsal mostra três tipos de papilas linguais: filiformes, fungiformes e vaIadas e uma superfície inferior lisa. Histologicamente, observou-se que a superfície dorsal da língua contém as papilas filiformes, fungiformes e vaIadas, distribuídas nas regiões rostral, média e caudal. A camada epitelial é de espessura variável e possui os estratos basal, espinhosa, granular e córnea, mostrando as células epiteliais. A lâmina própria é caracterizada por um tecido conjuntivo denso formando as projeções papilares longas, curtas e arredondadas. As imagens tridimensionais obtidas pela microscopia eletrônica de varredura, mostraram numerosas papilas filiformes localizadas essencialmente nas regiões rostral e média. Poucas papilas fungiformes estão presentes na superfície dorsal da língua, tendo na maioria localizada nas margens da extremidade rostral da língua, exibindo as formas arredondadas e baixas. Elas são cobertas de células epiteliais queratinizadas. Na região caudal notou-se duas papilas vaIadas, contendo valas profundas e a superfície coberta de epitélio escamoso estratificado onde pode ser identificados poros gustativos. Nas papilas fungiformes identificou-se vários poros gustativos na superfície. As amostras tratadas com a solução de hidróxido de sódio e examinado ao microscópio eletrônico de varredura, revelaram após a remoção total da camada epitelial, o tecido conjuntivo denso em disposição original apresentando papilas conjuntivas de diferentes formas e tamanhos. As regiões rostral e média evidenciaram numerosas papilas correspondentes às filiformes e fungiformes e na região caudal, a papila conjuntiva da papila vaIada apresentou uma forma alongada. Na superfície foram notadas pequenos forames de ductos de glândulas salivares e projeções papilares maiores e menores em aspectos tridimensionais. Na superfície de interface epitélio-tecido conjuntivo, foram notados espessos feixes de fibras colágenas. Cortes corados por Picro-sírius e analisados por meio de microscopia de luz polarizada evidenciaram a coloração de papilas conjuntivas em aspecto vermelho indicando a presença de fibras colágenas do tipo I e fibras colágenas de coloração esverdeada, tipo III. / The study of the dorsal and lingual surfaces and the surface of interface epithelium-connective tissue of Bradypus torquatus\'tongue was performed employing the light and scanning electron microscopy techniques. The tongue of Bradypus torquatus were removed, dissected and sectioned in three parts: rostral, medium and caudal regions and prepared by light and scanning electron microscopy methods. The results revealed that the tongue present a round apex, dorsum and a root. The dorsal mucosae showed three lingual papillae: filiforms, fungiforms and vallate and a ventral smooth surface. Histologically, it was observed that the dorsal surface of tongue contains the filiform, fungiform and vallate papillae located in the rostral, medium and caudal regions.The epitheliallayer is variable in thickness and possess the basal, spinosum, granular and queratinized layers, showing the epithelial cells. The lamina propria is characterized by a dense connective tis sue forming the long, short and rounded papilar projections. The three-dimensional images obtained by scanning electron microscopy, showed numerous filiform papillae located essentially in the rostral and medium regions. Few fungiform papillae are present in the dorsal surface of tongue, usually located in the border of rostral apex of tongue exhibiting the rounded and low in formo They are covered by queratinized epithelial cells. In the caudal region was noted two vallate papillae containing a deep vala and the surface was covered by stratified squamous epithelial cells. The superior third of surface of vallate papillae was covered by stratified squamous epithelial cells where may be identified the gustatory taste pores. In the fungiform papillae, several taste pores are located on the surface. The samples treated with NaOH solution and examined by scanning electron microscopy revealed afier removal of epitheliallayer, the dense connective tissue- in original disposition, presenting different sizes and shapes of conjuntive papillae. The rostral and medium regions envidentiated numerous papillae corresponding to the filiform and fungiform papillae and in the caudal region, the connective tissue papillae of vallate papillae presented a round formo On the surface were noted small foraminae of lingual salivary gland ducts and small and great papillary projections in three-dimensional images. AIso, on the surface of interface epithelium-connective tissue, were noted thick bundles of collagen fibers. The specimens stained with Picrosirius and examined by po larized light microscopy revealed the connective tissue stained in red colour indicating the collagen fibers type I and the type III, those stained in green colour collagen fibers.
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Matrizes tridimensionais de colágeno aniônico: elastina como suporte para reconstrução de tecidos moles: um estudo da integração matriz:tecido / Tridimentional collagen:elastin matrices as scaffold for soft tissue reconstruction: matrix:tissue integration study

Diderot Rodrigues Parreira 21 January 2005 (has links)
Este trabalho visou estudar a integração de implantes de colágeno aniônico:elastina obtidos a partir de pericárdio bovino acelularizado e com densidade de carga negativa variável. As cargas negativas foram introduzidas na forma de grupos carboxílicos, por hidrólise seletiva e controlada de grupos carboxamidas de asparagina e glutamina contidos na estrutura primária da proteína. Foram estudados materiais hidrolisados por 24 e 48 horas de tratamento correspondendo, respectivamente, a 46 '+ OU -' e 87 '+ OU -' cargas negativas adicionais em relação ao colágeno nativo. Os implantes foram introduzidos no subcutâneo de rato por tempos de 14, 60, 120 e 180 dias. Os materiais foram caracterizados por análise térmica, microscopia eletrônica de varredura e de transmissão, e os explantes avaliados por microscopia de luz (colorações de Hematoxilina: Eosina, tricrômico de Masson e Verhoeff). O objetivo foi avaliar o uso de matrizes com colágeno modificado para a reconstrução de tecidos moles. Diferentemente do tecido nativo (pericárdio bovino), a resposta biológica de matrizes de colágeno:elastina polianiônica após 14 dias do implante foi caracterizada por uma progressiva redução na fibrose, porém mais importante, não foram observadas células características de resposta inflamatória crônica, particularmente nos materiais tratados quimicamente. Após 180 dias, a maioria dos implantes estavam integrados à região implantada. Tais resultados sugerem que matrizes acelulares de colágeno:elastina preparadas pela desvitalização de tecido natural podem ser suportes bastante úteis para a reconstrução de tecidos moles, devido ao seu elevado grau de biocompatibilidade e integração / This work studied the integration of acellular polyanionic collagen:elastin matrices derived of bovine pericardium (BP) with variable negative charge. Negative charges were introduced in the material by selective hydrolisis of carboxamide side chain groups from Asn and Gln present in the primary structure of the protein. Hydrolized materials after 24 and 48 hours of treatment, respectively with 46 '+ OU -' and 87 '+ OU -' extra negative charges, were studied. Implants were placed in the subcutaneous of rats for periods of 14, 60, 120 and 180 days. Materials were characterized by differential scanning calorimetry, SEM and TEM, and explants analysed by optical microscopy (H.E., Masson tricromic and Verhoeff stains). The purpose of this work was to evaluate the use of modified collagen matrices for soft tissue reconstruction. Differently from native tissue (BP), the biological response of polyanionic collagen:elastin matrices after 14 days from implantation was characterized by a progressive decrease in fibrosis, but most important, no characteristic cells of a chronic inflammatory response were observed. After 180 days, most of the implants were integrated to the implant region. The results suggest that acellular collagen:elastin matrices prepared by devitalization of natural tissue due to their high degree of biocompatibility and integration may be potentially useful as a scaffold for soft tissue reconstruction
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Capilaroscopia na DMTC: um processo dinâmico associado ao envolvimento intersticial pulmonar e à gravidade de doença / Capillaroscopy in MCTD: a dynamic process associated to lung interstitial involvement and disease severity

Diogenes, Adriana de Holanda Mafaldo 03 October 2006 (has links)
Selecionamos consecutivamente 63 pacientes com doença mista do tecido conectivo (DMTC) (Kasukawa, 87) para determinar a relevância do padrão SD. Ter uma capilaroscopia periungueal (CPU) até cinco anos antes do início do estudo foi o principal critério de inclusão. Na entrada, avaliamos o envolvimento de órgãos e os auto-anticorpos. A idade média e o tempo de doença foram 45,3 + 10 e 8,45 + 5,42 anos, respectivamente. O padrão SD foi observado em 41 pacientes na entrada (65%) e em 45 na CPU prévia (71,5%), p = 0,20. Dez pacientes (16%) alteraram a CPU, 7 normalizaram e 3 desenvolveram padrão SD. O tempo de doença, número e freqüência de órgãos envolvidos foram semelhantes em pacientes com e sem padrão SD. Em contraste, a análise de cada parâmetro do padrão SD mostrou uma freqüência significativamente menor de áreas avasculares (AA) moderadas/graves na entrada, comparada com a CPU anterior (26,5 e 53%, p = 0,013). Além disto, 76% dos pacientes com doença intersticial pulmonar (TCAR) tiveram AA na entrada, enquanto apenas 24% dos pacientes com esta alteração não apresentavam este achado à CPU (p = 0,017). Adicionalmente, reduzida densidade capilar foi freqüentemente observada em pacientes submetidos à terapia imunossupressora, quando comparados com o grupo sem este tratamento (66,7 e 33,3%, p = 0,001). A CPU na DMTC é um processo dinâmico e a análise de cada parâmetro do padrão SD parece ser um bom indicador de doença intersticial pulmonar e gravidade de doença. / For determining the clinical relevance of SD-pattern in MCTD, sixty-three MCTD patients (Kasukawa´s criteria) were consecutively selected. The main inclusion criterion was availability of previous nailfold capillaroscopy (NC) 5 years before inclusion. At entry, organ involvement and autoantibody evaluation were performed. The mean age and disease duration were 45.3 + 10 and 8.45 + 5.42 years, respectively. SD-pattern was observed in 41 patients at entry (65%) and in 45 at previous NC (71.5%), p = 0.20. Ten patients (16%) changed NC, 7 normalized, and 3 developed SD-pattern. Disease duration, number and frequency of organ involvement were similar in patients with and without SD-pattern. In contrast, analysis of each SD-pattern parameter revealed a significant lower frequency of moderate/severe avascular areas (AA) at entry compared to previous examination (26.5 vs. 53%, p = 0.013). Moreover, 76% of patients with interstitial lung disease (HRCT) had AA at entry, whereas only 24% of patients with this alteration did not have this NC finding (p = 0.017). Furthermore, reduced capillary density was frequently observed in patients taking immunosuppressive therapy than those without (66.7 vs. 33.3%, p = 0.001). NC in MCTD is a dynamic process and analysis of each SD-pattern parameter seems to be a good indicator of lung involvement and disease severity
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Capilaroscopia na DMTC: um processo dinâmico associado ao envolvimento intersticial pulmonar e à gravidade de doença / Capillaroscopy in MCTD: a dynamic process associated to lung interstitial involvement and disease severity

Adriana de Holanda Mafaldo Diogenes 03 October 2006 (has links)
Selecionamos consecutivamente 63 pacientes com doença mista do tecido conectivo (DMTC) (Kasukawa, 87) para determinar a relevância do padrão SD. Ter uma capilaroscopia periungueal (CPU) até cinco anos antes do início do estudo foi o principal critério de inclusão. Na entrada, avaliamos o envolvimento de órgãos e os auto-anticorpos. A idade média e o tempo de doença foram 45,3 + 10 e 8,45 + 5,42 anos, respectivamente. O padrão SD foi observado em 41 pacientes na entrada (65%) e em 45 na CPU prévia (71,5%), p = 0,20. Dez pacientes (16%) alteraram a CPU, 7 normalizaram e 3 desenvolveram padrão SD. O tempo de doença, número e freqüência de órgãos envolvidos foram semelhantes em pacientes com e sem padrão SD. Em contraste, a análise de cada parâmetro do padrão SD mostrou uma freqüência significativamente menor de áreas avasculares (AA) moderadas/graves na entrada, comparada com a CPU anterior (26,5 e 53%, p = 0,013). Além disto, 76% dos pacientes com doença intersticial pulmonar (TCAR) tiveram AA na entrada, enquanto apenas 24% dos pacientes com esta alteração não apresentavam este achado à CPU (p = 0,017). Adicionalmente, reduzida densidade capilar foi freqüentemente observada em pacientes submetidos à terapia imunossupressora, quando comparados com o grupo sem este tratamento (66,7 e 33,3%, p = 0,001). A CPU na DMTC é um processo dinâmico e a análise de cada parâmetro do padrão SD parece ser um bom indicador de doença intersticial pulmonar e gravidade de doença. / For determining the clinical relevance of SD-pattern in MCTD, sixty-three MCTD patients (Kasukawa´s criteria) were consecutively selected. The main inclusion criterion was availability of previous nailfold capillaroscopy (NC) 5 years before inclusion. At entry, organ involvement and autoantibody evaluation were performed. The mean age and disease duration were 45.3 + 10 and 8.45 + 5.42 years, respectively. SD-pattern was observed in 41 patients at entry (65%) and in 45 at previous NC (71.5%), p = 0.20. Ten patients (16%) changed NC, 7 normalized, and 3 developed SD-pattern. Disease duration, number and frequency of organ involvement were similar in patients with and without SD-pattern. In contrast, analysis of each SD-pattern parameter revealed a significant lower frequency of moderate/severe avascular areas (AA) at entry compared to previous examination (26.5 vs. 53%, p = 0.013). Moreover, 76% of patients with interstitial lung disease (HRCT) had AA at entry, whereas only 24% of patients with this alteration did not have this NC finding (p = 0.017). Furthermore, reduced capillary density was frequently observed in patients taking immunosuppressive therapy than those without (66.7 vs. 33.3%, p = 0.001). NC in MCTD is a dynamic process and analysis of each SD-pattern parameter seems to be a good indicator of lung involvement and disease severity
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Perfil de textura em conserva de carne bovina (Corned Beef) submetida a diferentes tratamentos térmicos e sua relação com a concentração das proteínas dos tecidos muscular e conjuntivo colagenoso

Montezuma, Ronaldo [UNESP] 12 March 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-12Bitstream added on 2014-06-13T18:52:40Z : No. of bitstreams: 1 montezuma_r_me_rcla.pdf: 2261471 bytes, checksum: e8de3c70b94bdde4b8cd09e24247eaf2 (MD5) / O objetivo desta pesquisa foi determinar o Perfil de Textura (TPA) em formulações comerciais de “carne bovina em conserva” (corned beef) enlatada processada termicamente e avaliar sua relação com os valores de esterilização (F0), com a Concentração da Proteína do Tecido Conjuntivo Colagenoso (CCTP) e com a Concentração da Proteína do Tecido Muscular (MTP). Foram selecionados 14 lotes de produção de corned beef em latas tronco trapezoidais de 340 g correspondentes ao padrão continental Campden A e destes foram retiradas 24 latas do produto dos sub lotes submetidos ao processamento térmico. Destas latas foram retiradas seis amostras aleatórias para determinação do TPA e para análise da composição visando determinação da Proteína do Tecido Conjuntivo Colagenoso (CCTP), da Proteína do Tecido Muscular (MTP) e do Conteúdo Carne Magra (LMC). As latas de corned beef analisadas foram submetidas a tratamentos térmicos de 75,0 a 76,7 minutos, com a temperatura da autoclave a 121o C e resfriamento a 35o C durante 60 minutos, obtendo-se valores de F0 no centro de massa do produto variando de 14,8 a 20 minutos. Os parâmetros de TPA dureza, fraturabilidade, coesividade, elasticidade, adesividade, mastigabilidade, gomosidade e resiliência foram determinados no bloco integral do produto bloco resfriado a 4ºC em oito pontos na superfície. Os mesmos blocos do produto utilizados para determinação do TPA foram analisados quanto à composição média, apresentando concentração de 0,4 a 2,5% para CCTP, de 21,7 a 25,3% para MTP e de 102,79 a 107,95% para LMC. Os tratamentos de corned beef avaliados apresentaram diferenças significativas pelo teste de Tukey nas médias dos parâmetros dureza, gomosidade, mastigabilidade, adesividade e elasticidade. Os três primeiros parâmetros apresentaram correlações significativas fortemente negativas com o valor... / The objectives of this research were the determination of the texture profile of canned corned beef thermally processed and to evaluate its relationship with the sterilization value (F0) and the composition. Fourteen production batches of Campden A grade 340-g corned beef cans were selected, from which twenty-four cans of the thermal process sub-batches were retrieved. From the sub-batches, six random sample cans were taken and its content submitted to the Texture Profile Analysis (TPA) and to the composition analysis to determine the concentration of the Collagenous Connective Tissue Protein (CCTP), the Muscular Tissue Protein (MTP) concentration and the Lean Meat Content (LMC). The corned beef samples analyzed were submitted to thermal treatments at 121o C (retort steam temperature) for varying heating times, from 75 to 76 minutes and cooled at 35o C (retort water temperature) during 35 minutes, to obtain F0 values at the product center point varying from 14.8 to 20 minutes. The TPA parameters were determined in 8 points of the whole corned beef loaf of each sample, previously chilled and stabilized at 4o C temperature, to obtain hardness, fracturability, cohesiveness, elasticity, adhesiveness, springiness, gumminess, chewiness and resilience. The same sample material were then analyzed in terms of average composition of the product, resulting in concentrations in the range of 0.4 to 2.5% for CCTP, 21.7 to 25.3% for MTP and content from 102.8% to 108.0% for LMC. The treated corned beef samples analyzed showed significant differences in the means for hardness, adhesiveness, chewiness and elasticity. These parameters showed dependence with the sterilization value (F0), revealing negative strong significant correlation for F0 with hardness, gumminess and chewiness. The MTP and LMC values showed a high positive significant correlation with cohesiveness. It was observed a high... (Complete abstract click electronic access below)
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O papel do acúmulo do colágeno miocárdico intersticial na sobrevida dos pacientes com miocardiopatia dilatada idiopática e chagásica / The role of myocardial interstitial collagen in the survival rate of patients with idiopathic and chagasic cardiomyopathy.

Nunes, Vera Lopes 29 July 2004 (has links)
As miocardiopatias dilatadas representam 87% das miocardiopatias e apresentam evolução adversa com grande morbi-mortalidade. Vários marcadores de prognóstico são bem definidos, entretanto, um marcador estrutural se faz necessário. Estudamos através da realização da biópsia endomiocárdica e exame ecocardiográfico, 9 indivíduos sem doença estrutural miocárdica (controle) e 45 pacientes com miocardiopatia dilatada grave de etiologia idiopática (MCDI) e chagásica (MCDC). Observamos se havia relação entre a quantidade de colágeno miocárdico intersticial (FVCI) e a sobrevida destes pacientes, se a FVCI diferia entre as etiologias, e se a fibrose interferia na função e geometria do miocárdio. Observamos que a FVCI foi 15x maior nos miocardiopatas em relação ao grupo controle, mas não diferiu em relação às MCDI e MCDC (FVCI % MCDC = 6,83 ± 5,47; MCDI = 5,75 ± 4,45; controle = 0,42 ± 0,14*; p<0,001). Não houve relação da FCVI com a sobrevida dos pacientes com miocardiopatias (MCDI-FVCI £5,53 (20,0%) ou >5,53 (0,0%) (p=0,249), e na MCDC-FVCI £5,53 (0,0%) ou >5,53 (7,7%) (p=0,587) e apenas na MCDI a fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE) teve relação com a FVCI. O diâmetro diastólico final do ventrículo esquerdo não se correlacionou com a FCVI nas duas etiologias. Conclusão: a fibrose miocárdica não diferiu entre as duas etiologias, não se correlacionou com o prognóstico das MCDC e MCDI e apenas na MCDI ela se correlacionou com a FEVE. / Dilated cardiomyopathies represent 87% of all cardiomyopathies and they have adverse prognosis with high morbidity and mortality. There are several prognostic markers, however, a structural one has not been described yet. Seems to be very important to find out whether morphological changes upon myocardial structure would affect the prognosis. We studied, using endomyocardial biopsy and 2D-echocardiogram, 9 patients with no structural myocardial changes (control) and 45 patients with severe dilated cardiomyopathies. They were divided according the etiology of cardiomyopathy into idiopathic group (IDCM) or Chagas group (CDCM). We analyzed the correlation between interstitial myocardial collagen (ICVF) and survival rates. We also evaluated the difference of ICVF between these groups and whether it correlates with geometric and functional changes of the heart. We observed that ICVF was 15 times higher in cardiomyopathies patients than in control group, but it did not differ between CDCM and IDCM (ICVF% CDCM = 6.83 ± 5.47; IDCM = 5.75 ± 4.45; control = 0.42 ± 0.14*; p<0.001). The ICVF did not correlate to survival rate in cardiomyopathies patients (IDCM-ICVF £5.53 (20.0%) or >5.53 (0.0%) (p=0.249), and CDCM-ICVF £5.53 (0.0%) or >5.53 (7.7%) (p=0.587). We observed a significant correlation between ICVF and left ventricular ejection fraction (LVEF) only on DMC, the ICVF did not correlate to left ventricular diastolic diameter in either etiology. Conclusion: the myocardial fibrosis did not differ between these two etiologies, it did not correlate to prognosis either in the IDCM or CDCM and only in the IDCM the ICVF correlated to the LVEF.
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"Influência da composição de carreador biodegradável na viabilidade do implante de células mesenquimais indiferenciadas do tecido adiposo humano" / Influence of scaffold composition in the viability of implantation of human adipose derived undifferentiated mesenchymal cells

Dietrich, Isa 09 December 2004 (has links)
Células mesenquimais indiferenciadas humanas foram obtidas por digestão enzimática e centrifugação do produto de lipoaspiração, expandidas in vitro, e implantadas no tecido subcutâneo de camundongos atímicos. No grupo I, cada animal recebeu o implante de uma membrana de 0,25cm2 de ácido glicólico e carbonato de trimetileno semeada com 1 x 106 destas células .No grupo II, cada um recebeu a injeção de 0,2ml de gel de ácido hialurônico reticulado contendo o mesmo número destas células. Com três semanas de implante, células humanas e vasos foram identificados nos dois carreadores. Entretanto, com oito semanas, somente no gel de ácido hialurônico as células humanas e os vasos estavam presentes / Human undifferentiated mesenchymal cells were obtained by enzymatic digestion and centrifugation of the product of liposuction. These cells were expanded, in vitro, and implanted subcutaneously in athymic mice. In group I, each animal received the implant of a 0,25cm2 membrane of glycolic acid and trimethylene carbonate, seeded with 1 x 106 of these cells. In group II, each one received 0,2 ml of cross-linked hyaluronic acid gel containing the same amount of these cells. With three weeks of implantation, human cells and vessels were identified in both carriers. However, with eight weeks of implantation, only in hyaluronic acid gel human cells and vessels were present
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Envolvimento da neuraminidase-1 na atrofia muscular / The role of neuraminidase-1 in muscle atrophy

Rizzato, Vanessa Rodrigues 18 August 2014 (has links)
Sialidose é uma doença neurossomática causada pela deficiência congênita da neuraminidase-1 (Neu1), enzima envolvida na regulação do catabolismo de sialoglicoconjugados nos lisossomos. Com o acúmulo de sialoglicoconjugados, ocorre comprometimento sistêmico e neurológico. Achados histológicos musculares incluem expansão da matriz extracelular (MEC) devido à proliferação anormal de fibroblastos, invasão das fibras musculares por componentes da MEC, fragmentação do citoplasma, formação vacuolar e atrofia das fibras musculares. Entretanto o mecanismo da atrofia muscular na deficiência de Neu1 não está completamente esclarecido, sendo o objetivo desse estudo. Desnervou-se o músculo gastrocnêmio direito de camundongos com deficiência de Neu1 (Neu1 -/-) e de controles Neu1 +/+. Os animais foram eutanasiados 0, 3, 7, 14 e 21 dias pós desnervação. Os músculos desnervados e contralaterais foram submetidos às seguintes análises: 1) histologia geral e medida da área transversa das fibras; 2) autofagia, através da avaliação da presença de vacúolos autofágicos por estudo ultraestrutural e da análise da expressão da proteína LC3; 3) ativação do sistema lisossomal, por reação de fosfatase ácida e análise da expressão proteica de catepsina L e lamp1; 4) deposição de colágeno e infiltração de tecido conjuntivo no tecido muscular; 5) níveis das proteínas Akt e GSK3b; 6) expressão dos atrogenes MuRF1 e Atrogina-1; 7) níveis da proteína MyoD, relacionada à diferenciação muscular; e 8) expressão dos genes Neu1, Neu2, Neu3 e Neu4. Os animais Neu1-/- apresentaram menor peso corporal e muscular compararando-se com animais Neu1 +/+. Houve redução progressiva da área das fibras dos músculos desnervados em relação aos músculos contralaterais. Os animais Neu1-/- apresentaram atrofia muscular basal, com aumento acentuado dos espaços endomisiais e perimisiais. Ocorreu formação de vacúolos autofágicos a partir de 14 dias de desnervação tanto em animais Neu1+/+ quanto em Neu1-/-. Os níveis de expressão proteica de catepsina L e de lamp1 aumentaram a partir de 14 dias de desnervação, mais notadamente em músculos desnervados de camundongos Neu1-/-. A expressão proteica de colágeno III mostrou-se aumentada em animais Neu1-/-, principalmente após desnervação. A expressão proteica da forma fosforilada do Akt (forma ativada) diminuiu após 21 dias de desnervação principalmente em músculos desnervados de animais Neu1+/+. Os níveis de PGSK3 b, forma inativa de GSK3b, diminuíram após a desnervação, em animais Neu1+/+ e animais Neu1-/-. Houve aumento na expressão gênica de Atrogina-1 e MuRF1 após 3 e 7 dias de desnervação, respectivamente; a expressão gênica de Atrogina-1 nos camundongos Neu1-/- teve um aumento atrasado, mostrando diferença significante após 7 dias de desnervação. Não houve diferença significativa entre níveis proteicos de MyoD. A expressão gênica de Neu1 mostrou-se elevada em músculos desnervados de animais Neu1+/+. Conclui-se, portanto, que a Neu1 parece atuar na regulação da massa muscular principalmente controlando o processo de ativação do sistema lisossomal, porém aparentemente sem afetar a autofagia / Sialidosis, a severe neurosomatic disease, results from congenital neuraminidase-1 (Neu1) deficiency. This enzyme regulates the catabolism of sialoglycoconjugates in the lysosomes. Systemic and neurologic manifestations occur due to the sialoglycoconjugates accumulation. In the mouse model for Neu1 deficiency, the muscle histologic findings include extracellular matrix (ECM) expansion, due to abnormal fibroblast proliferation, muscle fibers invasion by ECM components, cytoplasm fragmentation, vacuolar formation and muscle atrophy. Nevertheless the mechanisms of muscle atrophy in Neu1 deficiency are not completely known. This study was designed to investigate Neu1 involvement in muscle atrophy process. Denervation of gastrocnemius muscle was performed by sectioning sciatic nerve from Neu1 deficient mice (Neu1 -/-) and from normal control Neu1 +/+; the animals were euthanized 0, 3, 7, 14 and 21 days after denervation. Denervated and control muscles were collected and submitted to several analysis: 1) histological; 2) autophagic vacuoles formation, performed by ultrastructural analysis and LC3 protein expression; 3) acid phosphatase reaction, lamp1 and cathepsin L protein expression, to analyze lysosomal activation; 4) collagen deposition and fibrous formation; 5) proteins involved with muscle trophism, Akt and GSK3b; 6) MuRF1 and Atrogin-1 gene expression; 7) MyoD protein expression; 8) Neu1, Neu2, Neu3 and Neu4 genes expression. Neu1 -/- mice presented decreased body and muscle weight comparing to Neu1 +/+ animals. Muscle fiber cross-sectional area was reduced in denervated muscles comparing to contralateral muscles. Neu1 -/- mice muscles presented basal atrophy and increase of endomisial and perimisial spaces, which became more evident after denervation. After 14 days of denervation, autophagosome formation was noticed on Neu1 +/+ and Neu1-/- animals. Cathepsin L protein levels were increased after 14 and 21 days of denervation, especially in denervated muscles from Neu1 -/- mice. Lamp1 protein expression was increased in Neu1-/- animals. Type III collagen protein levels were increased in Neu1-/- animals. There were no significant differences between MyoD protein levels. P-Akt, active form of Akt protein levels, decreased after 21 days of denervation, especially in denervated muscles from control group animals, indicating that protein synthesis is decreased. P-GSK3b, inactive form of GSK3b decreased in denervated muscles from Neu1 -/- and Neu1 +/+ animals, which indicates that this protein remained activated during muscle atrophy process. There were significant differences in Atrogin-1 and MuRF1 gene expression levels after 3 and 7 days of denervation. Neu1 -/- animals muscles presented a delayed Atrogin-1 response. Neu1 gene expression was increased in denervated muscles from Neu1 +/+ mice. These findings suggest that Neu1 seems to act in the regulation of muscle mass mainly by controlling the process of lysosomal system activation, but apparently without affecting autophagy

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