Com o objetivo de analisar a influência do fenômeno de congelamento e o tempo de criopreservação sobre as propriedades biomecânicas de tendões, os autores estudaram 40 tendões de Aquiles obtidos de 20 cadáveres humanos. De cada cadáver foram retirados dois tendões, sendo que um foi testado a fresco e o contralateral congelado a - 85o C, durante um período de seis ou 12 semanas. Os corpos de prova foram submetidos a ensaios de tração, com análise de suas propriedades biomecânicas. Os resultados foram comparados estatisticamente pelo método de "t-student", com índice de significância de 0,05, não havendo diferença significativa entre os grupos "congelado" e "a fresco" / For the purpose of analyzing the influence of the freezing phenomenon and cryopreservation time over the biomechanical properties of tendons, the authors studied 40 Achilles tendons from 20 human cadavers. Each cadaver had two tendons removed, one of which was tested whilst fresh and its contralateral whilst frozen at - 85o C, for a period of six or 12 weeks. The trial items were submitted to tensile testing in order to analyze their biomechanical properties. The results were compared statistically using the T-Student method, with a significance ratio of 0.05, there being no significant difference between the 'frozen' group and the 'fresh' group

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T13:42:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitoTratamentoEuterpe.pdf: 1788654 bytes, checksum: e0867245790bc25fdec23f03b4ff05e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-04-03T15:23:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitoTratamentoEuterpe.pdf: 1788654 bytes, checksum: e0867245790bc25fdec23f03b4ff05e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-03T15:23:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitoTratamentoEuterpe.pdf: 1788654 bytes, checksum: e0867245790bc25fdec23f03b4ff05e9 (MD5) Previous issue date: 2016-09-09 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O tendão de Aquiles é o maior e mais forte tendão do corpo humano, seu uso em excesso induz o surgimento de microtraumas e ativação de vias de sinalização que levam a uma resposta inflamatória. O extrato etanólico de Euterpe Oleracea(açaí)é um produto natural extraído do fruto dessa palmeira. Apesar de evidências apontarem um efeito anti-inflamatório e antioxidante desse produto, não há dados na literatura sobre tais efeitos na lesão tendínea. Assim, o objetivo do trabalho foi investigar o efeito anti-inflamatório e pró-regenerativo do extrato etanólico de Euterpe oleracea em modelo de ruptura total do tendão de Aquiles em ratos. Esse trabalho foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa animal da instituição (CEPAE-UFPA/206-14). Os animais foram distribuídos em quatro grupos (n=24): controle; veículo (salina 0,9%); extrato de E. oleracea (extrato etanólico de Euterpe oleracea,125μg/ml) e metilprednisolona (30 mg/ml). Após os respectivos tratamentos, o tecido foi analisado em 7, 14 ou 21 dias pós-injúria (dpi) por histoquímica com hematoxilina eosina e autofluorescência do colágeno. Imunofluorescência para COX2 e mensuração dos níveis de nitrito pelo método de Griess foi realizado em 7dpi. O tratamento com o extrato de E. Oleracea acelerou a organização tecidual e melhorou a orientação das células, um efeito semelhante ao anti-inflamatório esteroidal metilprednisolona. O tratamento com o produto natural levou a um alinhamento precoce das fibras de colágeno, bem como na matriz, de modo geral, se comparado aos demais grupos, o que foi observado no 7dpi e mantido em 14 e 21 dpi. O tratamento com o extrato de E. oleracea ou metilprednisolona reduziram a marcação para COX2 se comparado ao veículo em 7 dpi. Redução nos níveis teciduais de nitrito foi observado em 7dpi nos grupos tratados com extrato de E. oleracea(20.80 ± 2.54 μm/ml) e metilprednisolona (19.40 ± 2.31 μm/ml) se comparado ao grupo veículo (29.33 ± 3.98μm/ml). O tratamento com extrato de E. oleracea melhorou o padrão de organização tecidual, reduziu a marcação para COX2 e os níveis de nitrito, sugerindo efeito anti-inflamatório e antioxidante. Nossos achados destacam que o extrato de E. oleracea representa um produto natural com potencial aplicação no reparo do tendão de Aquiles. / Achilles tendon is the largest and strongest tendon in the human body, its excessive use induces microtrauma and activation of signaling pathways that lead to an inflammatory response. The ethanolic extract of Euterpe oleracea(açaí) is a natural product extracted from the fruit of the palm tree.Although evidence suggests an anti-inflammatory and antioxidant effect of this product, there is no data in the literature about such effects on tendon lesion. The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory and pro-regenerative effects of ethanolic extract of Euterpe oleracea in a rat model of total Achilles tendon rupture. This study was approved by the Animal Research Ethics Committee (CEPAE-UFPA/206-14). The animals were divided into four groups (n = 24): control; vehicle (0.9% saline); E. oleracea extract (125 μg/mL ethanolic extract of Euterpe oleracea) and methylprednisolone (30 mg/ml). After the respective treatments, the tissue was analyzed at 7, 14 or 21 days post-injury (dpi) by immunohistochemistry with hematoxylin/eosin and collagen autofluorescence. Immunofluorescence for COX2 and measurement of nitrite levels by Griess method were performed at 7 dpi. Treatment with E. oleracea extract accelerated tissue organization and orientation of the cells, similarly to the anti-inflammatory steroid methylprednisolone. This natural product led to an early alignment in collagen fibers as well as in the overall matrix structure when compared to the other groups, which was observed at 7 dpi and maintained at both 14 and 21 dpi. Treatment with E. oleracea extract or methylprednisolone reduced COX2 labeling in comparison to the vehicle at 7 dpi. Reduction in nitrite tissue levels was observed at 7 dpi in groups treated with E. oleracea extract (20.80 ± 2.54 μm/ml) and methylprednisolone (19.40 ± 2.31 μm/ml) compared to vehicle group (29.33 ± 3.98 μm/ml). Treatment with E. oleracea extract improved tissue organization and reduced both COX2 labeling and nitrite levels, suggesting anti-inflammatory and antioxidant effects. Our findings highlight E. oleracea extract as a natural product with potential application in Achilles tendon repair.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1361.pdf: 7031010 bytes, checksum: e59579f600a182ade6d5f0cd26523978 (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Universidade Federal de Sao Carlos / There is a rapid increase in the size of the elderly population due to a complex interaction of medical and epidemiological factors. Also, there is a parallel increase in morbidity associated with age-related delayed tendinopathy healing, and treatment of such acute and chronic condition costs the Health Services over 1 Billion dollars per year. Despite the obvious clinical impact, the basic cellular and molecular mechanisms underlying impaired human tendon healing are largely unknown. However, recent reports have showed the action mechanism of low level laser therapy (LLLT) in producing accelerated tendon healing, but the real effects of this therapy associated with aging effects are not yet known. This study evaluated the effects of the LLLT on repair process of rat calcaneal tendon in two different ages. Eighty male Wistar rats were divided in 2 experimental groups with 40 rats at each one: young group (4 weeks old, body mass = 111.3±34,3g) and mature adult group (27 weeks old, body mass = 385.4±34,3g). The young group was subdivided in subgroup Y3J (12 session, total energy = 101.7mJ, laser 685nm, 5.4W/cm2, 3J/cm2), subgroup Y10J (12 session, total energy = 339.6mJ, laser 685nm, 5.4W/cm2, 10J/cm2); subgroup YPL (placebo treatment) and subgroup YCL (no treatment). The mature adult group was subdivided in subgroup A3J (12 session, total energy = 101.7mJ, laser 685nm, 5.4W/cm2, 3J/cm2), subgroup A10J (12 session, total energy = 339.6mJ, laser 685nm, 5.4W/cm2, 10J/cm2); subgroup APL (placebo treatment) and subgroup ACL (no treatment). All animals had the medial region of right calcaneal tendon totally tenotomized. They were sacrified on the 13th post-operate day and their tendons were surgically removed for a quantitative and qualitative analysis The Atomic Force Microscopy analysis showed better organization quality (alignment, thickness and aggregation) of collagen bounds in mature irradiated groups. However, it was found differences (p < 0.05) in thickness of collagen bundles (TCBs) for several intersections among subgroups. The subgroup A10J presented greatest TCBs (5.69±0.69), and the ACL subgroup presented smallest TCBs (4.51±0.6) in the mature group. The dimensional data showed higher differences in the irradiated subgroup in mature group when compared to the same subgroup in young group. Histological analysis showed increase (p < 0.05) in the number of capillar vessels and fibroblast cell proliferation after LLLT in both young and mature groups, however the higher modulation was observed in the mature group. Minor influence of laser radiation in the young group may be justified by divergence on chemistry, physics and metabolic age-related. Maybe the accumulated oxidative stress resulting from a gradual shift in the redox status of tissues should be a key mechanism underlying the aging process and the higher laser effect noted in the mature group. Age should be considerated an important parameter to LLLT. / O envelhecimento biológico é uma das principais causas para a predisposição do tendão aos processos degenerativos, patológicos e retardo da reparação tecidual.Várias modalidades terapêuticas são utilizadas para promover a aceleração e melhora do reparo tendíneo, dentre elas a terapia laser de baixa intensidade (LLLT). Porém são pouco conhecidos os reais efeitos desta terapia quando se associa um fator potencialmente decisivo na resposta celular como o envelhecimento. Este estudo avaliou através de técnicas de microscopia de luz comum e de força atômica os efeitos da LLLT, aplicada na reparação do tendão calcanear em duas fases maturacionais. Um grupo de ratos jovens (4 semanas de idade, n = 40, massa = 111,3±8,3g), subdividido aleatoriamente em 4 subgrupos contendo cada um 10 animais: J3J (dose 3J/cm2, energia total = 101,7mJ), J10J (10J/cm2, energia total = 339,6mJ), placebo - JPL (dose 0J/cm2), controle - JCL (nenhum tratamento); e um grupo adulto (27 semanas de idade, n = 40, massa = 385,4±34,3g), subdividido aleatoriamente em 4 subgrupos: A3J (dose 3J/cm2, energia total = 101,7mJ), A10J (dose 10J/cm2, energia total = 339,6mJ), placebo - APL (dose 0J/cm2), controle - ACL (sem tratamento). Todos os animais foram submetidos ao procedimento de tenotomia radical do tendão direito, entre a inserção calcanear e a transição miotendínea, sem posterior tenorrafia. O laser utilizado (685nm, 5,4W/cm2) foi aplicado em 12 sessões, uma vez ao dia, em um único ponto sobre a região da lesão. No 13º dia pós-operatório os animais foram sacrificados e seus tendões removidos, processados e analisados qualitativa e quantitativamente, por meio de microscopia de força atômica (MFA) e análise histológica por morfometria. A análise dos dados mostrou significativa alteração (p< 0,05) da resposta do tecido à irradiação laser, tanto de forma idade-dependente como dose-dependente, sendo que, os resultados demonstram maior relevância para o grupo adulto que para o jovem. Comparativamente, o grupo adulto apresentou qualitativamente maior resposta biológica na agregação, organização, alinhamento do colágeno. Quantitativamente, o grupo adulto apresentou melhor resposta para a dose de 10J/cm2 principalmente em relação à angiogênese, contagem de fibroblastos e espessura dos feixes de colágeno. Esses resultados possivelmente podem ter uma relação com o maior estresse oxidativo característico ao incremento da idade.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissACBS.pdf: 10545595 bytes, checksum: 079933a164ff065ae11e54e43ae5200a (MD5) Previous issue date: 2004-12-20 / The purpose of this study was to analyze the 660 nm GaAlAs laser effect with 10 mW and 40 mW, during 10 seconds, on angiogenesis process and repair quality after partial lesion of Achilles tendon in rats. It was used 104 male rats, that 96 rats had been submitted to lesion by a falling of 186 g from a height of 20 cm, above the right tendon. These rats had been randomly divided in 3 groups, treated in 3 (n = 32), 5 (n = 32) and 7 (n = 32) days, respectively. Each of these groups was divided again into 4 subgroups, which were submitted to laser with mean output of 10 mW (n = 8) and 40 mW (n = 8), a sham treatment (n = 8), and a group with no treatment (n = 8). The analyzes were made by vessels count that have been previous prepared with nanquim ink and by a semiqualitative analyze of polynuclear cells presence, mononuclear cells presence, collagen organization and neovascularization. A fourth group with 8 animals was established as control, without lesion and used as reference for qualitative analyze. The comparison of the groups made evident that the animals submitted to laser showed more vessels number than the control groups (p<0,05) and the 40 mW subgroup showed better vascularization than the others after 3 days of irradiation. (p<0,01). The semiqualitative analyze showed statistical difference (p<0,05) when considering collagen organization and neovascularization in the comparison between the 10 mW, 40 mW and control. Qualitatively, the groups treated with laser showed better repair aspect. The results permit us to conclude that Low Level Laser Therapy with 660 nm promoted an increase of the blood vessels number and better repair quality and the mean output of 40 mW had begun the neovascularization precocious, showing significant difference after 3 days of application. / A proposta desse estudo foi analisar os efeitos do laser AsGaAl, de 660 nm, com 10 mW e 40 mW de potência de saída, aplicado durante 10 segundos, no processo de angiogênese e qualidade de reparo após lesão parcial do tendão calcâneo de ratos. Foram utilizados 104 ratos machos, sendo que 96 foram submetidos à lesão com a queda de um peso de 186 gramas na altura de 20 cm sobre o tendão direito. Estes foram divididos aleatoriamente em 3 grupos, tratados em 3 (n = 32), 5 (n = 32) e 7 (n = 32) dias, respectivamente. Cada um desses grupos foi ainda dividido em 4 subgrupos, submetidos ao laser com potência de saída de 10 mW (n = 8) e 40 mW (n = 8), grupo placebo (n = 8) e grupo sem tratamento (n = 8). As análises foram feitas através da contagem dos vasos que foram previamente corados com tinta nanquim e por meio de uma análise semiqualitativa da presença de células polimorfonucleares, mononucleares, organização de colágeno e neovascularização. Um quarto grupo com 8 animais foi estabelecido como controle padrão, sem lesão que foi utilizado como referência para a análise qualitativa. A comparação dos grupos evidenciou que os animais irradiados mostraram maior número de vasos do que os grupos controle (p<0,05) e o subgrupo de 40 mW apresentou melhor vascularização que os demais após 3 dias de irradiação (p<0,01). A análise semiqualitativa evidenciou diferença estatística (p<0,05) quando foi considerada a organização de colágeno e a neovascularização na comparação entre os grupos 10 mW e 40 mW com os controle. Qualitativamente os grupos tratados com laser apresentaram melhor aspecto do reparo. Os resultados nos permitem concluir que a terapia laser de baixa intensidade, com comprimento de onda de 660 nm promoveu aumento na neovascularização e melhora na qualidade de reparo e a potência de saída de 40 mW iniciou a neovascularização precocemente, mostrando diferença significativa após 3 dias de aplicação.

Com o objetivo de analisar a influência do fenômeno de congelamento e o tempo de criopreservação sobre as propriedades biomecânicas de tendões, os autores estudaram 40 tendões de Aquiles obtidos de 20 cadáveres humanos. De cada cadáver foram retirados dois tendões, sendo que um foi testado a fresco e o contralateral congelado a - 85o C, durante um período de seis ou 12 semanas. Os corpos de prova foram submetidos a ensaios de tração, com análise de suas propriedades biomecânicas. Os resultados foram comparados estatisticamente pelo método de "t-student", com índice de significância de 0,05, não havendo diferença significativa entre os grupos "congelado" e "a fresco" / For the purpose of analyzing the influence of the freezing phenomenon and cryopreservation time over the biomechanical properties of tendons, the authors studied 40 Achilles tendons from 20 human cadavers. Each cadaver had two tendons removed, one of which was tested whilst fresh and its contralateral whilst frozen at - 85o C, for a period of six or 12 weeks. The trial items were submitted to tensile testing in order to analyze their biomechanical properties. The results were compared statistically using the T-Student method, with a significance ratio of 0.05, there being no significant difference between the 'frozen' group and the 'fresh' group

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-18T21:18:10Z No. of bitstreams: 1 Anna Cristina de Farias Marques.pdf: 2073138 bytes, checksum: 63fce77ba3e8c96e01965f2b4cecc62c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-18T21:18:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anna Cristina de Farias Marques.pdf: 2073138 bytes, checksum: 63fce77ba3e8c96e01965f2b4cecc62c (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / This study investigates the effect of low-level laser therapy (LLLT) on collagen type I and III, matrix metalloproteinase (MMP), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in experimentally induced tendinopathy in female aged rats. Tendinopathy was induced by collagenase peritendinous of the Achilles tendon. Forty-two Wistar rats (Norvegicus albinus) were used; groups consisted of 36 aged animals (18 months old; mean body weight, 517.7 ± 27.54 g) and 6 adult animals (12 weeks old; mean body weight, 266 ± 19.30 g). The animals were randomlydivided in three groups: control, aged tendinopathy, and aged tendinopathy LLLT; the aged groups were subdivided according to experimental periods: 7, 14, and 21 days. LLLT involved a gallium-arsenide-aluminum laser (Theralaser, DMC®) with active medium operating at wavelength 830 ± 10 nm, 50 mW power, 0.028 cm2 laser beam, 107 J/cm2 energy density, 1.7 w/cm2 power density, and 6 J of energy, with a frequency of 3 times per week, until euthanasia. VEGF, MMP-3, and MMP-9 were analyzed by immunohistochemistry, and collagen type I and III by Sirius red. LLLT increased the deposition of collagen type I and III in a gradual manner, with significant differences relative to the group aged tendonitis (p<0.001), and in relation to VEGF (p<0.001); decreased expression of MMP-3 and 9 was observed in group aged tendinopathy (p<0.001). LLLT, therefore, increased the production of collagen type I and III, downregulated the expression of MMP-3 and MMP-9, and upregulated that of VEGF, with age and age-induced hormonal deficiency. / O objetivo deste estudo foi investigar O Efeito da terapia Laser de baixa intensidade no Colágeno tipo I e III, Metaloproteinase e VEGF em Modelo Experimental de Tendinopatia, em ratas fêmeas idosas. A colagenase foi induzida na região peritendínea no tendão Calcâneo dos animais. Quarenta e duas ratas Wistar (Norvegicus albinus) foram utilizadas no estudo, com grupos consistindo de 36 animais idosos (18 meses de idade; com média da massa, 517.7 ± 27.54 g) e 6 animais adultos (12 semanas de idade; média da massa, 266, 19:30 0 ± g). Os animais foram randomizados e divididos em três grupos, Controle, tendinopatia idoso e tendinopatia Laser idoso, e subdividido em três grupos experimentai, 7, 14 e 21 dias. O tratamento com Laser de baixa intensidade foi aplicado utilizando um Laser Arseneto de Galium e Alumínio (AsGaAl) (Theralaser, DMC®) operando no comprimento de onda de 830nm (±10nm), 50 mW de potência, saída do feixe de 0,028 cm2, densidade de energia de 107J /cm2, densidade de potência 1,7 w/cm2 e energia de 3 J, com uma frequência de 3 vezes por semana, até a data da eutanásia (7, 14 e 21 dias). Foram analisados VEGF e MMP 3 e 9 por meio de Imunohistoquímica e Colágeno tipo I e III por Sirius red. Os resultados sugerem que a Terapia a Lesar de Baixa Intensidade foi capaz de aumentar os níveis de Colágeno tipo I e III de maneira gradual e com significante diferença no grupo Tendinpatia Idoso (p<0,001), isso pode ser observado em relação ao VEGF (p<0.001), foi também observado diminuição da expressão de MMP 3 e MMP 9 em relação ao grupo tendinopatia Idoso, com diferença estatística (p<0,001). Nós concluímos que a terapia Laser de Baixa Intensidade foi capaz de diminuir a produção de Colágeno tipo I e III, reduzir a expressão de MMP 3 e 9, e aumentar a expressão de VEGF, mesmo nas ratas fêmeas idosas com deficiência hormonal causada pela idade.

Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-09-21T16:23:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InibicaoNitrergicaLocal.pdf: 1790723 bytes, checksum: 5ed20bd490d92e565a6c597c03db4c77 (MD5) / Rejected by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br), reason: on 2017-10-10T17:00:33Z (GMT) / Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-10-17T18:25:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InibicaoNitrergicaLocal.pdf: 1790723 bytes, checksum: 5ed20bd490d92e565a6c597c03db4c77 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-11-24T14:43:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InibicaoNitrergicaLocal.pdf: 1790723 bytes, checksum: 5ed20bd490d92e565a6c597c03db4c77 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-24T14:43:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InibicaoNitrergicaLocal.pdf: 1790723 bytes, checksum: 5ed20bd490d92e565a6c597c03db4c77 (MD5) Previous issue date: 2011-05-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A prevalência de lesões tendíneas tem aumentando pela constante exigência de movimentos repetitivos em atividades ocupacionais e recreacionais da sociedade. As principais características dessa injúria envolvem disfunção cicatricial e perda de matriz extracelular (ME). Nesse tecido, a ME é constituída basicamente por colágeno tipo I, e a perda dessa proteína aliada a problemas na remodelagem é considerado um dos principais responsáveis pelo quadro sintomatológico e funcional da injúria. Somando-se a isso, a literatura reporta que a expressão das óxido nítrico sintase estão reguladas positivamente ao longo do processo de reparo. Nesse contexto, a proposta do trabalho é averiguar a influência do sistema nitrérgico local na recuperação histológica e funcional do tendão. Para isso, o trabalho conta com o modelo experimental de ruptura do tendão de Aquiles, possibilitando instaurar um quadro de tendinopatia crônica nos animais. O acompanhamento dos grupos controle, ruptura+veículo (Salina 0,9%), ruptura+L-nitro-arginina-metil-éster (LNAME, 5mM) e ruptura+nitroprussiato de sódio (SNP, 3mM) prosseguiram até o 21° dia, estipulado para a coleta de amostras. A fim de avaliar a produção de óxido nítrico, o método de dosagem de Griess foi usado. Os parâmetros funcionais foram caracterizados pelo índice funcional de Aquiles (IFA), obtidos em 0, 7, 14 e 21 dias. Amostras também foram reservadas para processamento histomorfológico e autofluorescência. O ganho de massa corporal também foi avaliado. Conseguimos caracterizar o efeito das drogas no tecido sem fortes influências sistêmicas pela manutenção do peso corporal e níveis de nitrito plasmático. O L-NAME gerou uma significativa redução na densidade celular, inibiu a formação de vasos entre a malha colágena, melhorou a organização tecidual e restabeleceu precocemente o padrão funcional em 21 dias após a injúria. Por outro lado, os tratamentos com SNP e veículo mantiveram a desorganização do tecido e desempenho funcional insatisfatório. Juntos, nossos resultados sugerem um efeito benéfico da inibição local da NOS após a ruptura para a remodelagem tecidual, contribuindo para a regeneração do tendão. / The tendon injuries prevalence has been increased usually by repetitive movements in the occupational and recreational activities of society. The main features this injury involve healing dysfunction and loss of extracellular matrix. At this tissue, the extracellular matrix is basically made of type I collagen and the loss of this protein associated with problems in the remodeling have been considered the major responsible for the symptomatic and functional effects of injury. Additionally the literature reports the nitric oxide synthase expression was up-regulated throughout the repair process. At this context the propose of this work is investigated the nitrergic local inhibition in tissue and functional recovery after tendon injury. We used a experimental model of Achilles tendon rupture for establish pathophysiological changes similar to chronic tendinopathy. The animals were divided into experimental groups control, injury+vehicle (saline, 0,9%), injury+L- Nω-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 5mM) and injury+sodium nitroprusside (SNP, 3mM), which were followed until the 21º day, when were killed to collect samples. In order to access nitric oxide production Griess nitrite assay was used. Functional recovery was calculated by Achilles Functional Index (AFI) in 0, 7, 14 and 21 days. Tendons were also processed for histomorphological and autofluorescence analysis. The body weight gain was also evaluated. We characterized the effect of drugs about tissue without stronger systemic influences by maintenance of body weight and plasmatic levels of nitrite. The L-NAME led to significant decrease in the cellular density, vessel formation between collagen network, accelerated the tissue organization and restored early the functional pattern at 21 days after injury. On the other hand, the treatment with SNP and vehicle remained the tissue disorganization and low functional performance. Taken together our results suggest a positive effect of local suppression of NOS after rupture for tissue remodeling, contributing to tendon regeneration.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-22T12:48:30Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_RegeneracaoTendineModelo.pdf: 5002611 bytes, checksum: 610099ff23155f2d7fd67af96fcab4b9 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-03-27T12:23:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_RegeneracaoTendineModelo.pdf: 5002611 bytes, checksum: 610099ff23155f2d7fd67af96fcab4b9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T12:23:29Z (GMT). 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A proposta deste estudo é averiguar a existência de plasticidade central e a influência do NO na plasticidade periférica, limitação funcional e regeneração tendínea em modelo murino. Para estudar os efeitos do NO na plasticidade periférica, utilizamos animais controle (CTRL, sem lesão) ou tratados com salina (SAL, NaCl 0,9%), L-nitro-arginina-metil-éster (L-NAME, inibidor da síntese de NO) ou nitroprussiato de sódio (SNP, doador de NO) em dias alternados até o 21º dia pós-lesão (DPL). Para avaliar a ocorrência de plasticidade central (segmento L5), apenas a lesão foi realizada e a medula coletada em 2 ou 21 DPL. Analisamos a integridade e a organização tecidual nas amostras de tendão por H&E, microscopia eletrônica de transmissão e imunofluorescência, que também foi usada para avaliar a plasticidade periférica. Para verificar a recuperação funcional do tendão, determinamos o índice funcional de Aquiles, o ângulo articular e o campo aberto. No estudo da medula espinhal, investigamos a reatividade glial e o envolvimento neuronal após a injúria através de colocalizações com o indicador de ativação celular c-Fos. Os achados desta pesquisa mostram que a inibição do NO promove a organização tecidual em associação ao aumento da síntese, secreção e deposição de colágeno. Além disso, a administração local de L-NAME parece favorecer a diferenciação celular para tipos morfológicos análogos a tenócitos e melhorar a organização de ramos nervosos por dentre a malha de colágeno em correlação com a recuperação funcional em 21 DPL. Por outro lado, o aumento nos níveis de NO através de SNP promoveu uma piora em quase todos os parâmetros analisados. Nossos dados mostram ainda que a injúria tendínea desencadeia um processo de plasticidade central com aumento da reatividade glial em 2 DPL e da ativação celular ipsilateral à lesão em 2 e 21 DPL. Em suma, nossos achados indicam a ocorrência de plasticidade central após a lesão tendínea e o favorecimento do reparo tecidual e da plasticidade periférica através do bloqueio nitrérgico, revelando aspectos fundamentais da recuperação tecidual que podem representar novos alvos para uma nova abordagem terapêutica em lesões tendíneas. / Tendon injuries cause strong impact on people due to pain and functional limitation resulting therefrom. After injury, the tissue starts to present a network of nerves. Furthermore, there is evidence for the occurrence of central plasticity after injury. Among the molecular factors involved in injury repair, nitric oxide (NO) is implicated in tissue remodeling, but its effects are not yet well understood. The purpose of this study is to ascertain the existence of central plasticity and the influence of NO in peripheral plasticity, functional limitation and tendon regeneration in murine model. To study the effects of NO in peripheral plasticity, we used control animals (CTRL, without injury) or animals treated with saline (SAL, 0.9% NaCl), L-nitro-arginine-methyl-ester (L-NAME, NO-synthesis inhibitor) and sodium nitroprusside (SNP, NO donor) every other day until the 21st day post injury (DPI). To evaluate central plasticity (L5 segment), an injury was performed alone and the spinal cord collected at 2 or 21 DPI. We analyzed the integrity and tissue organization in tendon samples by H&E, transmission electron microscopy and immunofluorescence, which was also used to evaluate peripheral plasticity. To assess tendon functional recovery, we determined the Achilles functional index, the joint angle and the open field. In spinal cord studies, we investigated glial reactivity and neuron involvement after injury by co-localizations with the cell activation indicator c-Fos. The findings of this research show that NO inhibition promotes tissue organization in association to an increase in collagen synthesis, secretion and deposition. Besides, L-NAME local administration seems to favor cell differentiation to tenocyte-like morphological types and improve the organization of nerve branches in between the collagen mesh in correlation with functional recovery at 21 DPI. On the other hand, increased levels of NO by SNP promoted worsening in almost all parameters analyzed. Our data also show tendon injury triggers a central plasticity process with an increase in glial reactivity at 2 DPI and ipsilateral cell activation at 2 and 21 DPI. Afterall, our findings point out occurrence of central plasticity after tendon injury and favoring of tissue repair and peripheral plasticity through nitrergic blockage, unraveling fundamental aspects of tissue recovery that may represent new targets for a therapeutical approach in tendon injuries.