Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000386680-0.pdf: 5694528 bytes, checksum: b449d9dde8f5f2112de1c98de09f8c96 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The undiscriminated use of antifungal drugs has been associated to Candida sp. antifungal resistance, requiring new alternative methods for treatment of oral candidosis. The application of photodynamic therapy (PDT) have been investigated on inactivation of human-host pathogenic microorganisms. The present study was conducted to evaluate in vitro PDT action on Candida sp. and epithelial cells. Thirtyeight Candida sp. cultures obtained from patients' oral candidosis and HEp-2 cell cultures were submitted to PDT. Indium-gallium-aluminum-phosphide (InGaAIP) laser was applied in 100 J/cm2, 270 J/cm2 and 450 J/cm2 doses associated with 100 mg/mL of methylene blue photosensitiser. After PDT, the viability of CFUs (colony formation units) and epithelial cells were quantified. The three doses applied led to a significant inactivation of Candida sp. The 450 J/cm2 dose was the most efficacious, leading to 72.42% Candida sp. CFUs inactivation (P<0.05), followed by 270 J/cm2 and 100 J/cm2, for which inactivation rates were 45.87% and 22.83%, respectively. Candida albicans was significant more susceptible to treatment, showing 50.44 % CFUs inactivation rate, while other Candida species showed 41.18% (P<0.05). After PDT, HEp-2 cells showed almost the same viability irrespectively the three different doses applied (P>0.05). HEp-2 cells viability, evaluated just after PDT, unrespective the dose applied, was of 70.81%, being significatively lower than that observed in the control-group (86.21%). Methylene blue and laser PDT on 100, 270 and 450 J/cm2 doses led to significant inactivation of Candida sp., being C. albicans more susceptible than other Candida species. Epithelial cells photodynamic inactivation rate was 2.24-fold lower than the rate observed in Candida sp. This fact suggests a safety margin to in vivo application. Further in vitro and in vivo studies employing animal models are needed to better confirm these results. / O uso indiscriminado de antifúngicos tem acarretado resistência da Candida sp., o que requer novas alternativas de tratamento para a candidose oral. A aplicação da terapia fotodinâmica (PDT) tem sido investigada na inativação de microrganismos patogênicos ao hospedeiro humano. O presente estudo teve por objetivo avaliar, in vitro, a ação da PDT sobre a viabilidade da Candida sp. e de células epiteliais. Culturas de Candida sp. obtidas a partir da coleta de amostras de 38 pacientes portadores de candidose oral e culturas de células HEp-2 foram submetidas à PDT. Foi empregado o laser diodo fosfeto de índio-gálio-alumínio (InGaAlP) nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 associado ao fotossensibilizador azul de metileno na concentração de 100 Rg/mL. Após o tratamento, a viabilidade das unidades formadoras de colônias (UFCs) e das células epiteliais foi quantificada. As três dosimetrias empregadas determinaram inativação significativa da Candida sp. (p<0,05). A dosimetria de 450 J/cm2 foi a mais eficaz, inativando 72,42% das UFCs de Candida sp., seguida pelas dosimetrias de 270 J/cm2 e 100 J/cm2 com inativação média de 45,84% e 22,83% respectivamente. A Candida albicans foi significativamente mais sensível ao tratamento, com inativação média de 50,44% das UFCs, enquanto as outras espécies de Candida apresentaram inativação média de 41,18% (p<0,05).Depois de submetidas à PDT, as células HEp-2 exibiram viabilidade semelhante nas diferentes dosimetrias (p>0,05). A viabilidade média das células HEp-2, avaliada imediatamente após a PDT, independentemente da dosimetria aplicada, foi de 70,81%, sendo esta significativamente menor do que a do grupo-controle, que foi de 86,21% (p<0,05). A PDT com azul de metileno e laser nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 determinou inativação significativa da Candida sp., sendo a C. albicans mais sensível que as outras espécies. As células epiteliais HEp-2 foram menos sensíveis à PDT do que a Candida sp., apresentando média de inativação fotodinâmica 2,24 vezes menor que a das células fúngicas, fato que indica a existência de uma margem de segurança para aplicação in vivo. São necessários novos estudos in vitro e em modelos animais para melhor fundamentarem-se os resultados obtidos.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2014. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2015-02-03T12:19:16Z No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2015-02-10T16:21:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-10T16:21:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_JeffersonBrunoPereiraRibeiro.pdf: 1823020 bytes, checksum: 49ac554d7e44d30b39885986770a3523 (MD5) / A escassez de fármacos é uma preocupação e objeto de estudo para a descoberta de alternativas eficazes para o tratamento da leishmaniose tegumentar (LT). A formulação tópica tem sido almejada devido sua baixa toxicidade. O desenvolvimento de terapias alternativas, como a multimodal, é importante no enfrentamento da resistência às drogas. O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia in vivo da terapia fotodinâmica (TFD) tópica com ftalocianina cloro-alumínio lipossomal para o tratamento da LT, isoladamente e em associação com a terapia sistêmica com miltefosina. Foram formados 5 grupos, cada um com 6 camundongos isogênicos, adultos, fêmeas, da espécie Mus musculus, cepa C57BL/6: (1) Controle negativo, sem infecção e sem tratamento; (2) Controle positivo, infectado e não tratado; (3) Miltefosina 200 mg, diariamente, e TFD com ftalocianina cloro-alumínio lipossomal (FCL), em dias alternados; (4) Apenas Miltefosina; e (5) Apenas TFD com FCL. Os esquemas terapêuticos duraram 20 dias. Confirmou-se a infecção dos animais, realizando cultura em meio NNN da linfa colhida da pata dos animais. Vias de administração adotadas foram miltefosina oral e FCL tópica. Para a aplicação da TFD, os animais foram anestesiados com a associação de xilazina e quetamina. Os animais foram avaliados por: (i) medição das patas e (ii) critérios parasitológicos. As análises estatísticas foram realizadas com software SPSS®. O número de parasitas viáveis por pata foi determinado pelo programa Elida®. Observou-se maior eficácia para o grupo que utilizou a associação de TFD com FCL e miltefosina (p<0,05), no qual houve uma redução maior de parasitas quando comparada aos outros dois grupos, cujos resultados do tratamento foram semelhantes ao grupo controle negativo (p<0,05). A TFD com FCL, quando usada isolada, demonstrou baixa eficácia quando comparada ao grupo controle negativo e grupo padrão ouro (miltefosina) (p<0,05). ________________________________________________________________________ ABSTRACT / Shortage of drugs is a concern and object of studies for the discovery of effective alternative for Cutaneous Leishmaniasis (CL) treatment. Topic formulation has been aimed due its low toxicity. Development of alternative therapies, as multimodal, is important to confront the drug resistance. This study aims to compare the in vivo effectiveness of topic photodynamic therapy (PDT) with liposomal chloro-aluminuim phthalocyanine (LCP) in treatment of CL, isolated and associated with systemic therapy with miltefosine. 5 groups were adopted each one with 6 isogenic adult female mice, Mus musculus species, C57BL/6: (i) Negative Control, without infection and without treatment; (ii) Positive Control, infected but not treated; (iii) Miltefosine 200mg, daily, and PDT with LCP on alternating days; (iv) only Miltefosine; and (v) only PDT with LCP. Therapeutic schemes lasted 20 days. Animal infection has been confirmed, performing culture in NNN of the collected lymph paw of animals. The adopted routes of administration were oral miltefosine and topic LCP. For PDT implementation, animals were anaesthetized with the association of xylazine and ketamine. Animals were evaluated by: (i) paw measuring; and (ii) parasitological criteria. Statistics analysis were performed by specific statistics software [SPSS™]. The number of feasible parasites by paw was determined by a software for parasite data counting [Elida™]. It was observed greater effectiveness for the group that used the association of PDT with LCP and miltefosine (p<0.05), which had a greater reduction in parasites when compared to the other two groups, wherein the result of treatment was similar to the Negative Control group (p<0.05). PDT with LCP, when isolated, demonstrated low effectiveness when compared to the Negative Control and gold standard group (miltefosine) (p<0.05). Association of miltefosine and PDT with LCP represents hopes for CL, an increasing dermatological disease among several countries.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-03-04T20:34:14Z No. of bitstreams: 1 2014_RoulaKozak.pdf: 1063118 bytes, checksum: 52c44499a97f1667f309fbae073b7be7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-03-05T18:04:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RoulaKozak.pdf: 1063118 bytes, checksum: 52c44499a97f1667f309fbae073b7be7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RoulaKozak.pdf: 1063118 bytes, checksum: 52c44499a97f1667f309fbae073b7be7 (MD5) / A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade importante não invasiva no tratamento de casos selecionados de carcinoma basocelular, a neoplasia maligna mais frequente em humanos. A eficácia da TFD no tratamento do carcinoma basocelular nodular (CBCn) não está bem estabelecida, havendo taxas de cura e recorrência variáveis na literatura. A melhora da ação dos agentes fotossensibilizantes em termos de especificidade, potência e penetração cutânea constitui uma importante perspectiva para o aprimoramento da TFD. Nesse aspecto, a nanotecnologia e seu potencial em aprimorar os sistemas de liberação de fármacos são bastante promissores. No presente trabalho, foi estudada a eficácia e tolerabilidade de dois precursores fotossensibilizantes no tratamento do carcinoma basocelular nodular com até 2mm de profundidade, o ácido aminolevulínico em nanoemulsão lipídica polimérica, o Nano-ALA, e o metil-aminolevulinato, o M-ALA. Participaram do estudo 24 pacientes com o total de 30 lesões de CBCn, divididos aleatoriamente em dois grupos de tratamento. Foram realizadas duas sessões padronizadas de TFD com intervalo de uma semana e após três meses foi realizada excisão cirúrgica da área tratada: 26 lesões (86,7%) localizavam-se em face e 16 (53,3%) situavam-se em área de alto risco. No total, a taxa de cura histológica foi de 50% e não houve diferença significativa entre os dois grupos (M-ALA = 62,5% e Nano-ALA = 35,7%; P = 0,14). Alguns fatores podem ter influenciado negativamente nesse resultado do Nano-ALA, como maior número de lesões em áreas de alto risco e a presença de tipos e subtipos diferentes do CBCn nesse grupo. O tratamento em geral foi bem tolerado, com escores de dor, eritema e edema semelhantes nos dois grupos. O único preditor de má resposta encontrado foi a localização do tumor em áreas de alto risco. Em conclusão, o desempenho do Nano-ALA em termos de eficácia e tolerabilidade foi semelhante ao do M-ALA na TFD para CBCn. A taxa de cura relativamente baixa no presente trabalho reforça que a TFD no tratamento do CBCn deve ser indicada em casos selecionados e usada com cautela. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Photodynamic therapy (PDT) is an important noninvasive strategy of treatment for selected cases of basal cell carcinoma (BCC), the commonest malignancy in humans. The efficacy of PDT in the treatment of nodular BCC (BCCn) is not established, with cure and recurrence rates highly variable. The improvement of photosensitizing agents in terms of specificity, potency and skin penetration is an important perspective for achieving better results with PDT. In this regard, Nanotechnology and its potential in improving drug releasing systems are very promising. In this study, the efficacy and side effects of two photosensitizing precursors in the treatment of BBCnup to 2 mm deep were investigated, the aminolevulinic acid in polymeric lipid nanoemulsion, the Nano-ALA, and methyl-aminolevulinate, the M-ALA. The study included 24 patients with a total of 30 BCCn lesions, randomly divided into two treatment groups. Two standard PDT sessions were performed one week apart and three months later the treated area underwent surgical excision. 26 lesions (86.7%) were located in the face and 16 (53.3%) were at high risk area. In total, the histological cure rate was 50% and there was no significant difference between the two groups (M-ALA = 62.5% and Nano-ALA = 35.7%; P = 0.14). Some factors may have impaired Nano-ALA results, such as a greater number of lesions at high risk areas and the presence of different types and subtypes of BCCn in this group. The treatment was overall well tolerated, with pain scores, erythema and edema similar in both groups. The only poor response predictor was the location of the tumor in high-risk areas. In conclusion, the performance of Nano-ALA in terms of efficacy and tolerability was similar to that of M-ALAin PDT for BCCn. The relatively low cure rate in this study suggests that PDT in the treatment of CBCn should be indicated in selected cases and used with caution.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5738_1.pdf: 4090287 bytes, checksum: 69ee8078428761702e0ffb0a96beb37e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Nanopartículas de prata são empregadas com freqüência na Biomedicina em biossensores, técnicas de diagnóstico preventivo, melhoras na aquisição de imagens e como agentes terapêuticos. Muitas vezes, estas aplicações estão fundamentadas nas propriedades ópticas, oriundas da ressonância dos plasmons. O objetivo desta tese foi a preparação e caracterização de nanopartículas de prata a partir de diferentes técnicas para aplicação em espectroscopia óptica e terapia fotodinâmica. Foram empregados três métodos diferentes de síntese: o primeiro trata-se da síntese proposta pro Lee e Meisel, seguida da ablação a laser; o segundo refere-se à síntese de nanopartículas de prata revestidas por pectina e o último método, refere-se à preparação de nanopartículas de prata funcionalizadas com grupamentos amina, revestidas com Jeffamina. Também foram sintetizadas membranas de celulose impregnadas com nanopartículas de prata, para posterior aplicação no combate de infecções da cavidade oral. As partículas com revestimento de pectina foram avaliadas em meios fluorescentes (triptofano e pontos quânticos de CdTe/CdS), promovendo um aumento da fluorescência. Quando as mesmas nanopartículas foram testadas com a riboflavina, observou-se um aumento na geração de oxigênio singleto, pois as nanopartículas de prata auxiliam o aumento da população dos estados excitados tripletos

A terapia fotodinâmica apresenta-se como uma possível alternativa terapêutica para o tratamento de infecções localizadas, porém, para sua aplicação clínica, as variáveis relacionadas à eficiência fotodinâmica devem ser analisadas para a obtenção de resultados satisfatórios. Os objetivos deste trabalho foram investigar a dinâmica de agregação dos fotossensibilizadores azul de metileno e azul de orto-toluidina em diferentes solventes, caracterizar os solventes em relação ao oxigênio molecular disponível em cada solução e seu respectivo pH, observar o efeito da temperatura, sangue e saliva na agregação dos fotossensibilizadores, monitorar a dinâmica de fotodegradação em função da exposição radiante e irradiância, avaliar a eficiência fotodinâmica microbiologicamente e através da produção de 1O2. Os solventes utilizados foram água deionizada, água destilada, água estéril, solução salina 0,9% e solução salina 0,45%. Em cada uma das soluções, foi realizado teste de pH e medição de oxigênio dissolvido por sonda apropriada. Os efeitos de fluidos, temperatura e concentração na agregação dos fotossensibilizadores foram analisados através de espectroscopia de absorção óptica. A dinâmica de fotodegradação foi testada com diferentes exposições radiantes e irradiâncias, nos comprimentos de onda adequados para cada composto. As irradiações foram realizadas com emissão de banda larga e banda estreita. A eficiência fotodinâmica foi avaliada através da medição direta da luminescência do oxigênio singleto em ?=1270nm, em dois solventes. Testes microbiológicos foram realizados com culturas de Escherichia coli. Os resultados obtidos demonstram que a dinâmica de agregação está diretamente relacionada com solvente e concentração: a solução salina apresentou diferença em relação aos demais solventes em todos os quesitos analisados. Dos solventes testados, a água deionizada apresentou os melhores resultados. A dinâmica de fotodegradação está relacionada, em sua magnitude, com a exposição radiante e, em sua dinâmica, com a irradiância. O uso de banda larga para irradiação foi mais efetivo para na fotossensibilização letal. Portanto, para a aplicação clínica da terapia, o substrato deve ser considerado. Apropriadas condições de irradiação, solvente e concentração de fotossensibilizador aumentam a eficiência do processo. / Photodynamic therapy may be a viable alternative to treat localized infections, although to obtain a resourceful clinical application, parameters linked with photodynamic efficiency must be analyzed in order to achieve quantifiable results. The aims of this study were to investigate the aggregation dynamic of the photosensitizers methylene blue and orto-toluidine blue in different solvents; to characterize the solvents regarding to available molecular oxygen and pH; to observe the effect caused by temperature, blood and saliva on photosensitizer aggregation, to monitor the photobleaching dynamic as a function of fluence and irradiance, and to evaluate the photodynamic efficiency in such conditions. The tested solvents were deionized water, distillated water, sterile water, and saline solution 0.9%. In each solution, the pH and molecular oxygen availability were measured with the appropriated device. The effects of organic fluids, temperature and concentration on aggregation were analyzed through optical absorption spectroscopy. The photobleaching dynamic was tested regarding radiant exposure and irradiance with the appropriated wavelength for each compound. The irradiations were performed with broad band and narrow band light sources. The photodynamic efficiency was evaluated through singlet oxygen luminescence measurement in ?=1270nm and microbiological tests were performed with cultures of Escherichia coli. The results demonstrated that the aggregation dynamic is directly linked with solvent and concentration: the saline solution presented different results in all tested conditions. Deionized water presented the best results. The photobleaching dynamic is correlated in its magnitude with the radiant exposure and its dynamic is associated with irradiance. The use of broad band to perform the irradiation was considered more effective for lethal photosensitization. Therefore, for the clinical application of this therapy, the substrate must be taking into account, and appropriated parameters of irradiation and photosensitizer presentation increase the efficiency of the process.

A terapia fotodinâmica apresenta-se como uma possível alternativa terapêutica para o tratamento de infecções localizadas, porém, para sua aplicação clínica, as variáveis relacionadas à eficiência fotodinâmica devem ser analisadas para a obtenção de resultados satisfatórios. Os objetivos deste trabalho foram investigar a dinâmica de agregação dos fotossensibilizadores azul de metileno e azul de orto-toluidina em diferentes solventes, caracterizar os solventes em relação ao oxigênio molecular disponível em cada solução e seu respectivo pH, observar o efeito da temperatura, sangue e saliva na agregação dos fotossensibilizadores, monitorar a dinâmica de fotodegradação em função da exposição radiante e irradiância, avaliar a eficiência fotodinâmica microbiologicamente e através da produção de 1O2. Os solventes utilizados foram água deionizada, água destilada, água estéril, solução salina 0,9% e solução salina 0,45%. Em cada uma das soluções, foi realizado teste de pH e medição de oxigênio dissolvido por sonda apropriada. Os efeitos de fluidos, temperatura e concentração na agregação dos fotossensibilizadores foram analisados através de espectroscopia de absorção óptica. A dinâmica de fotodegradação foi testada com diferentes exposições radiantes e irradiâncias, nos comprimentos de onda adequados para cada composto. As irradiações foram realizadas com emissão de banda larga e banda estreita. A eficiência fotodinâmica foi avaliada através da medição direta da luminescência do oxigênio singleto em ?=1270nm, em dois solventes. Testes microbiológicos foram realizados com culturas de Escherichia coli. Os resultados obtidos demonstram que a dinâmica de agregação está diretamente relacionada com solvente e concentração: a solução salina apresentou diferença em relação aos demais solventes em todos os quesitos analisados. Dos solventes testados, a água deionizada apresentou os melhores resultados. A dinâmica de fotodegradação está relacionada, em sua magnitude, com a exposição radiante e, em sua dinâmica, com a irradiância. O uso de banda larga para irradiação foi mais efetivo para na fotossensibilização letal. Portanto, para a aplicação clínica da terapia, o substrato deve ser considerado. Apropriadas condições de irradiação, solvente e concentração de fotossensibilizador aumentam a eficiência do processo. / Photodynamic therapy may be a viable alternative to treat localized infections, although to obtain a resourceful clinical application, parameters linked with photodynamic efficiency must be analyzed in order to achieve quantifiable results. The aims of this study were to investigate the aggregation dynamic of the photosensitizers methylene blue and orto-toluidine blue in different solvents; to characterize the solvents regarding to available molecular oxygen and pH; to observe the effect caused by temperature, blood and saliva on photosensitizer aggregation, to monitor the photobleaching dynamic as a function of fluence and irradiance, and to evaluate the photodynamic efficiency in such conditions. The tested solvents were deionized water, distillated water, sterile water, and saline solution 0.9%. In each solution, the pH and molecular oxygen availability were measured with the appropriated device. The effects of organic fluids, temperature and concentration on aggregation were analyzed through optical absorption spectroscopy. The photobleaching dynamic was tested regarding radiant exposure and irradiance with the appropriated wavelength for each compound. The irradiations were performed with broad band and narrow band light sources. The photodynamic efficiency was evaluated through singlet oxygen luminescence measurement in ?=1270nm and microbiological tests were performed with cultures of Escherichia coli. The results demonstrated that the aggregation dynamic is directly linked with solvent and concentration: the saline solution presented different results in all tested conditions. Deionized water presented the best results. The photobleaching dynamic is correlated in its magnitude with the radiant exposure and its dynamic is associated with irradiance. The use of broad band to perform the irradiation was considered more effective for lethal photosensitization. Therefore, for the clinical application of this therapy, the substrate must be taking into account, and appropriated parameters of irradiation and photosensitizer presentation increase the efficiency of the process.

A Periodontite é uma doença de etiologia multifatorial que acomete os tecidos de suporte dentário resultando em perda progressiva de inserção e perda óssea. Este estudo clínico controlado, aleatorizado e duplo-cego avaliou a eficácia da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa), em aplicações múltiplas, como terapia adjuvante ao tratamento periodontal cirúrgico em pacientes com Periodontite Crônica Avançada (PCA). Dezesseis voluntários foram submetidos ao modelo de estudo do tipo boca dividida, recebendo tratamento de acesso cirúrgico associado a raspagem e alisamento radicular (RAR) adjunto à TFDa em protocolo de aplicação nos períodos de 0, 2, 7 e 14 dias pós-operatórios (Grupo Teste - GT), ou apenas tratamento de acesso cirúrgico associado a RAR (Grupo Controle - GC). Todos os pacientes receberam orientação de higiene oral e acompanhamento por 90 dias pós-cirúrgicos. Os seguintes parâmetros clínicos e microbiológicos foram avaliados: Nível clínico de inserção (NCI), Profundidade de sondagem (PS), Recessão gengival (RG), Sangramento à sondagem (SS), Índice de placa (IP) e contagem de 40 espécies microbianas subgengivais (checkerboard DNA-DNA hybridization). Os dados foram coletados nos períodos baseline (pré-terapia básica), 60 dias (30 dias após terapia não cirúrgica) e 150 dias (90 dias pós-cirurgia). Uma redução significativa na PS foi observada aos 150 dias para o GT, quando comparado ao GC no mesmo período (p &lt; 0,05). O ganho do NCI foi significativamente maior no GT entre os tempos de 60 e 150 dias (p &lt; 0,05). As mudanças da microbiota subgengival foram similares entre os grupos (p &gt; 0,05), mas o Grupo Teste apresentou quantidades mais elevadas de bactérias compatíveis com saúde periodontal no período final do experimento em relação ao GC (p &lt; 0,05). Concluiu-se que a utilização da TFDa em aplicações múltiplas, como terapia adjuvante ao tratamento cirúrgico periodontal, produziu melhoras significativas nos parâmetros clínicos no período de 90 dias de avaliação / Chronic Periodontitis is a multifactorial disease which results in tooth supporting tissues loss. This double-blind randomized controlled clinical trial assessed the efficacy of multiple sessions of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) as an adjunct to surgical periodontal treatment in patients with severe chronic periodontitis (SCP). Sixteen volunteers were selected into this Split-mouth study. They were subjected to scaling and root planning in open flaps (SRP) combined with aPDT at 0, 2, 7, and 14 postoperative days (Test Group - TG), or only SRP (Control Group CG). All patients were instructed about oral hygiene and were followed up for 90 days after surgery. The following clinical and microbiological parameters were assessed: clinical assessment level (CAL), probing depth (PD), gingival recession (GR), bleeding on probing (BOP), plaque index (PI). Levels of 40 subgingival species were measured by checkerboard DNA-DNA hybridization at baseline, 60 (30 days after non-surgical therapy) and 150 days (90 days post-surgery). Data were collected at baseline (pre-intervention), at 60 days (30 days after the end of nonsurgical therapy), and at 150 days (90 days after surgery). A significant reduction in PD was observed at 150 days for the TG, when compared to the CG (p &lt; 0.05). CAL gain was significantly higher in the TG at 60 and 150 days (p &lt; 0.05). Changes in the subgingival microbiota were similar between the groups (p &gt; 0.05), but the TG revealed a larger number of bacteria associated with periodontal disease at the end of the experiment compared to the CG (p &lt; 0.05). In conclusion, multiple sessions of aPDT as an adjunct to surgical periodontal treatment significantly improved clinical parameters at 90 postoperative days

A Terapia Fotodinâmica (TFP) é uma técnica para tratamento de câncer que usa um fotossensibilizador (FS) na presença de luz e oxigênio gerando espécies altamente reativas de oxigênio que levam as células tumorais à morte. <br />Neste trabalho foi realizado um estudo comparativo com três FSs: Photogem&reg; (PG), um derivado de hematoporfirina que está sendo usado em TFD no Brasil; Photodithazine&reg; (PZ), um derivado hidrossolúvel de mono-L-aspartil clorina, que está na fase clínica para aprovação e Hipericina (HY), um pigmento fotoativo encontrado na planta Hypericum perforatum e usado na medicina popular que está sendo considerado como um promissor agente fotodinâmico para o tratamento de tumores. Este estudo utilizou uma Hipericina sintetizada no Brasil e diversos parâmetros para comparar os três FSs: a concentração inibitória média (IC50) em linhagens celulares; a constante de velocidade de fotoxidação da albumina de soro bovino na presença dos FSs e luz determinada pelo decréscimo na fluorescência da BSA em 340 nm; a fotoxidação do ácido úrico acompanhada pelo decréscimo da banda característica do ácido úrico em 290 nm após irradiação na presença dos FSs como uma estimativa indireta do rendimento quântico de formação de oxigênio singlete (&Delta;&Phi;); o rendimento quântico de fluorescência utilizando rodamina B como padrão; a acumulação dos FSs em células em função do tempo de incubação e a estimativa da quantidade de radicais livres formados após irradiação através da técnica de captura de spins. Todos os resultados obtidos evidenciam uma maior eficiência fotodinâmica da HY seguida pelo PZ e depois por Photogem e, portanto sugerem a Hipericina como o FS de maior potencial para utilização em Terapia Fotodinâmica. / Photodynamic Therapy (PDT) is a technique for the cancer treatment that uses a photosensitizer (FS) in the presence of light and oxygen which combined are able to generate highly reactive oxygen species that lead to tumor cells death. <br />In this investigation, a comparative study with three FSs: Photogem &reg; (PG), a hematoporphyrin derivative being used in PDT in Brazil; Photodithazine &reg; (PZ), a soluble derivative of mono-L-aspartyl chlorin, which is in clinical phase for approval and Hypericin (HY), a photoactive pigment found in the plant Hypericum perforatum and used in popular medicine that is being considered as a promising agent for photodynamic treatment of tumors. The present study used a Hypericin synthesized in Brazil and several parameters to compare these three FSs: the mean inhibitory concentration (IC50) in cell lines; the rate constant for the photooxidation of bovine serum albumin in the presence of light and the FSs determined by the decrease in the fluorescence of BSA at 340 nm; the photooxidation of uric acid assessed by the decrease of the characteristic band of uric acid at 290 nm after irradiation in the presence of the FSs as an indirect estimate of the quantum yield of formation of singlet oxygen (&Delta;&Phi;); the quantum yield of fluorescence using rhodamine B as a standard; the accumulation of FSs in cells as a function of the incubation time, and the estimative of the produced free radicals after irradiation by the technique of spin trapping. All the results show a higher photodynamic efficiency of HY followed by PZ and then by Photogem suggesting Hypericin as the FS with the greatest potential for use in Photodynamic Therapy.

Entre os métodos de prevenção da cárie dentária, os controles mecânico e químico do biofilme dentário são de grande relevância neste processo. O controle mecânico é eficaz desde que executado diariamente e sistematicamente envolver todas as superfícies dentárias expostas ao meio bucal. Ele pode ser realizado pelo odontólogo por meio da profilaxia profissional e pelo próprio paciente pela escovação dentária. O controle químico do biofilme dentário deve ser empregado de forma suplementar, quando o controle mecânico não puder ser realizado diariamente ou se for realizado de forma inadequada acarretando o risco do acúmulo do biofilme dentário e como consequência, a ocorrência de lesões de cárie dentária e/ou da doença periodontal. O ideal seria associar ambos os métodos, para que um compense a deficiência do outro. É nesta direção que inúmeros estudos são feitos nos últimos anos. Para o controle químico, são relatadas na literatura inúmeras substâncias antimicrobianas. Dentre os agentes químicos recomendados, a clorexidina (CLX) tem se mostrado eficiente para esta finalidade, porém, sua aplicação apresenta limitações como: manchamento de áreas desmineralizadas dos dentes e perda do paladar, condições estas que limitam seu uso por tempo prolongado. Sendo assim, a busca de alternativas para o controle microbiano do biofilme dentário é de grande relevância para se somar aos esforços ora empreendidos neste sentido. Nas últimas décadas o emprego da luz associada a corantes surgiu como um tratamento alternativo ao uso de agentes antimicrobianos tradicionais. Este tratamento é chamado terapia fotodinâmica (TFD), sendo recentemente também chamado de Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDA). Na TFDA, a luz interage com o corante que está associado ao microorganismo, sendo capaz de inibir sua proliferação ou eliminá-lo completamente. Poucos são os estudos que avaliam a ação antimicrobiana da TFD sobre biofilmes cariogênicos. A comprovação da eficácia dessa terapia sobre o biofilme dentário humano poderá ter um impacto positivo para a Odontologia, favorecendo a implantação de novos protocolos de controle químico do mesmo. Este estudo teve como objetivo analisar comparativamente o efeito da clorexidina e da TFDA (com dois tipos de fotossensibilizadores: Azul de Toluidina O (TBO) e Clorofila Líquida (CL)) sobre biofilmes dentários humanos formados in situ. Voluntários utilizaram um dispositivo intrapalatino contendo espécimes de esmalte dental, sobre os quais biofilme dentário foi formado. Após 48 horas, diferentes terapias foram aplicadas sobre o biofilme: (1) água destilada: controle negativo; (2)CLX; (3) irradiação por laser; (4) TBO; (5) TBO +laser; (6) CL; (7) CL + laser. O biofilme então foi coletado e solubilizado. Em seguida, amostras foram semeadas em placas de Petri com diferentes meios de cultura, para contagem do número de microrganismos totais, estreptococos totais, Streptococcos mutans, Lactobacilos e Candida albicans. Amostras também foram coradas com Laranja de Acridina e visualizadas em microscopia de fluorescência, para análise da viabilidade das células presentes. Os resultados dos plaqueamentos apenas nos deram informações sobre os microrganismos totais e estreptococos totais, mostrando que a única redução significante dos microorganismos em relação ao grupo (1) ocorreu no grupo tratado por CLX (2). As outras terapias mostraram uma sensível redução. A viabilidade por microscopia por fluorescência se mostrou semelhante em todos os grupos. A clorexidina, portanto, comprovou seu efeito antimicrobiano, porém mais estudos precisam ser realizados para verificar o real papel da TFD sobre biofilme dentário humano. / The mechanical and chemical controls of dental plaque are important methods of caries prevention. The mechanical control is efficient if its run properly and daily. It can be made by a dentist (professional cleaning) or by patients themselves (toothbrushing). The chemical control should be used additionally, when the mechanical control cant be performed properly, them the biofilm can accumulate and in consequence, there are risks of dental caries or periodontal disease. For chemical control, many antimicrobial substances are related in literature. Several studies have shown that chlorexidine (CLX) is an effective antimicrobial substance against dental plaque. However, it presents some limitations like: tooth staining, loss of taste, conditions that limit its use by prolonged periods. Therefore, the search by new alternatives in microbial control of plaque is very important for improvement the treatment. In last decades, the use of light for activation of a photosensitizer appears like an alternative treatment with antimicrobial function. This treatment is called Photodynamic Therapy (PDT), recently Photochemotherapy (PACT). In PACT, the light activates a photosensitizer that is bond in microorganism and it can kill it or inhibit its growing. If this treatment is effective on human dental plaque, it will have positive impact for Dentistry and new protocols of chemical control will be developed. The present study aim was analyze the chlorexidine effect and the PDT effect (using Toluidine blue (TBO) and Liquid Chlorophyll (LC) like photosensitizer) in human natural dental plaque formed in situ. Volunteers wore a palatal appliance containing bovine enamel blocks, where the biofilm was formed. After 48 hours, different therapies were performed on plaque: (1) distilled water: negative control; (2) CLX; (3) Laser irradiation; (4) TBO; (5) TBO + Laser; (6) CL; (7) CL + Laser. The plaque samples were collected and dispersed. Next, serial dilutions were prepared and seeded onto different culture broth for the determination of the number of colony-forming units per gram (CFU/g) of total microorganisms, total Streptococcus, Streptococcus mutans, Lactobacillus and C. albicans. Samples were stained with acridine orange to analyze cells viability. The results can reveal only information about total microorganism and total Streptococcus. When the groups (2-7) were compared with the group (1), significant microbial reduction was observed only in group treated with CLX (3). The other therapies showed only a discrete reduction in relation of group (1). The cell viability showed similar results in all groups. Therefore, the CLX proved its antimicrobial effect. More studies are necessary for exact evaluation of effect of TFD on dental plaque human.

As infecções do trato respiratório inferior lideram entre as principais causas de morbidade e mortalidade no mundo. Um dos grandes problemas associados ao tratamento das infecções do sistema respiratório, como as pneumonias, advém da crescente resistência aos mais modernos antibióticos adquirida pelos microrganismos. A terapia fotodinâmica, uma técnica baseada na interação da luz com uma substância fotoativa para causar dano oxidativo a células, tem se destacado como uma interessante alternativa para diversas doenças como diferentes tipos de câncer e infecções. Neste trabalho foi realizada, com experimentos in vitro, uma prova de princípio da possibilidade de inativar, com um protocolo eficiente e seguro, uma das bactérias mais comumente encontradas em quadros de pneumonia, a Streptococcus pneumoniae, com terapia fotodinâmica infravermelha mediada pela indocianina verde. Duas fontes de luz, uma a base de lasers emitindo 780 nm e outra construída com LEDs emitindo 850 nm, foram comparadas para avaliar sua eficiência. Experimentos com a bactéria foram realizados para determinação dos melhores parâmetros de inativação microbiana. Em seguida, ensaios de citotoxicidade foram feitos com macrófagos RAW 264.7 com o intuito de averiguar se as condições microbicidas não apresentavam atividade tóxica para células fagocitárias do sistema imune. Foi possível delinear os parâmetros de concentração de indocianina, tempo de incubação e dose de luz que apresentassem atividade microbicida e que não fossem tóxicas para as células. A interação da terapia fotodinâmica com a ação fagocitária dos macrófagos sobre as bactérias foi avaliada pelo estabelecimento de co-cultura dessas espécies. Concluiu-se que, utilizando-se LEDs de 850 nm fornecendo uma dose de luz de 10 J/cm2 as amostras contendo indocianina verde 5&mu;M, é possível inativar S. pneumoniae de modo eficiente e auxiliar a ação fagocitária de macrófagos. / The lower respiratory tract infections lead among the main causes of morbidity and mortality worldwide. A major problem associated with respiratory tract infections, e.g. pneumonia, stems from from the increasingly resistance to most modern antibiotics developed by microorganisms. Photodynamic therapy, a technique based on the interaction of light and a photoactive substance to cause oxidative damage to cells, has emerged as an attractive alternative for several diseases such as different kinds of cancer and infections. In this work, with in vitro experiments, we accomplished a proof of concept for the possibility of inactivating, with an efficient and secure protocol, one of the most commonly found bacteria in pneumonia cases, Streptococcus pneumoniae, with infrared photodynamic therapy mediated by indocyanine green. Two light sources, one based on 780 nm lasers and the other built with 850 nm LEDs, were compared to evaluate their efficiency. Experiments with bacteria determined the best parameters microbial inactivation. Then, cytotoxicity assays with RAW 264.7 macrophages analyzed if the microbicidal parameters had toxic effects on immune cells. It was possible to delineate the indocyanine concentration parameters, incubation time and dose of light to obtain microbicidal results that weren´t toxic to the cells. Interaction of photodynamic therapy with the phagocytic action of macrophages on the bacteria was assessed by establishing a co-culture with these species. We concluded that, using 850 nm LEDs providing a light dose of 10 J/cm2 to samples containing 5&mu;M indocyanine green, it is possible to inactivate S. pneumoniae and efficiently assist the phagocytic action of macrophages.