O gênero Salvia L. (Lamiaceae), constituido de aproximadamente 900 espécies, possui 60 representantes no Brasil. Dentre suas propriedades medicinais destacam-se as atividades antitumoral, anti-inflamatória, cicatrizante e antibacteriana. Óleos essenciais e diterpenos de núcleos abietano, clerodano, primarano estão entre os principais constituintes químicos relatados para as espécies. O objetivo deste trabalho foi a caracterização química dos óleos essenciais obtidos por hidrodestilação de seis espécies de Salvia nativas da região Sul do Brasil (S. guaranitica, da Seção Coerulae; S. ovalifolia, S. cordata e S. borjensis, da Seção Rudes e S. procurrens e S. uliginosa, da Seção Uliginosae), utilizando cromatografia à gás/espectrometria de massas. A análise química dos óleos essenciais mostrou que todas as espécies apresentaram apenas sesquiterpenos, além de compostos alifáticos como aldeidos e ácidos graxos de cadeia longa. Entre estes últimos, nonadecanal estava presente em todas as espécies, sendo abundante (13% a 56%) em S. procurrens, S. ovalifolia e S. borjensis. Em relação à composição dos sesquiterpenos, observou-se que espatulenol estava presente em quantidades relativamente grandes (10% - 40%) nas espécies S. cordata, S. borjensis e S. ovalifolia. Estas espécies também apresentaram β-cariofileno, sesquiterpeno encontrado, ainda, em S. guaranitica. S. cordata apresentou o sesquiterpeno epi-globulol (32,3%) e 2E, 6Z-farnesol (11,4%). O óleo essencial de S. uliginosa apresentou ácido hexadecanóico (30,1%), n-nonadecano (17,5%) e nonadecanal (4,5%) como componentes majoritários. Os óleos essenciais e os extratos diclorometano das espécies da Seção Uliginosae (S. uliginosa e S. procurrens) mostraram atividade contra Staphylococcus aureus, quando testados pelo método de bioautografia. As analises preliminares sugerem a presença de diterpenos de núcleo abietano-quinona nos extratos orgânicos destas espécies. Os extratos diclorometano dessas duas espécies foram também avaliados quanto à atividade amebicida contra amebas de vida livre Acanthamoeba polyphaga. Entre estes, apenas o de S. uliginosa foi ativo, apresentando 100% de atividade nas concentrações de 7,5 e 5 mg/mL. / The genus Salvia L. (Lamiaceae) has about 900 species, 60 of them found in Brazil. Among the medicinal properties it is possible to highlight anti-tumor, anti-inflammatory, antioxidant and antibacterial activities. Essential oils and diterpenes with abietane, clerodane and primarane skeletons are the main componentes of these plants. In this sense, the purpose of this study was to characterize the essential oils obtained by hydrodistillation from Salvia species native to southern Brazil (S. guaranitica, Section Coerula; S. ovalifolia, S. cordata and S. borjensis, Section Rudes and S. procurrens and S. uliginosa, Section Uliginosae), using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Chemical analysis of the essential oils showed that all species had only sesquiterpenes, and aliphatic compounds such as aldehydes and long chain fatty acids. Among the latter, nonadecanal was present in all species, being abundant (13% to 56%) in S. procurrens, S. borjensis and S. ovalifolia. Regarding the composition of the sesquiterpenes, it was observed that spathulenol was present in relatively large amounts (10% - 40%) in S. cordata, S. borjensis and S. ovalifolia oils. These species also showed β-caryophyllene, a sesquiterpene also found in S. guaranitica. S. cordata showed the sesquiterpene epi-globulol (32.3%) and 2E, 6Z-farnesol (11.4%). S. uliginosa essential oil presented hexadecanoic acid (30.1%), n-nonadecane (17.5%) and nonadecanal (4.5%) as the main compound. The essential oils and the dichloromethane extracts of of the species from the Section Uliginosae (S. uliginosa and S. procurrens) demonstrated antimicrobial activity against Staphylococcus aureus when investigated by the bioautography method. Preliminary analyses indicated theat the main compounds present in the organic extracts are diterpenes with the abietane type-diterpene quinone nucleous. The dichloromethane extracts of these two species were also evaluated for the activity against Acanthamoeba polyphaga. Only the extract of S. uliginosa was active, with 100% activity at concentrations of 7.5 and 5 mg/mL.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edinilze Souza Coelho Oliveira.pdf: 4961035 bytes, checksum: f6de1b94d1c9a5c50a72d78882119b88 (MD5) Previous issue date: 2012-09-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Leishmaniasis is considered by the World Health Organization as one of the most severe infections, due to have high capacity to produce deformities. The existing drugs are highly toxic and the parasites have been showed resistance to these drugs. Scientific researches have been proven the antiparasitic potential of extracts and compounds isolated from plant species. The subject of this work is to obtain essential oils from leaves of three species of from Myrtaceae: Eugenia patrisii, Marlierea umbraticola and Myrciaria floribunda, two species from Myristicaceae: Virola mollissima and V. theiodora, one specie from Annonaceae: Bocageopsis multiflora and one specie from Lauraceae: Endlicheria bracteolata, collected at the Adolpho Ducke Forest Reserve, Manaus, AM. The collections were performed in two periods: winter (April) and summer (September). The analysis of essential oils of E. patrisii, M. floribunda, B. multiflora and V. mollissima by GC-MS showed a high percentageof sesquiterpenes, while oils M. umbraticola and V. theiodora presented the monoterpenes as main constituents. The essential oil of the fresh leaves from E. bracteolata presented a differential when extracted in the month of April. There was observed the precipitate during the extraction and when analyzed by GC-MS showed a chromatographic profile of about 73.7% oxygenated sesquiterpenes. However, the oil of the dry season showed the hydrocarbons sesquiterpene as major constituents. The solid material obtained from E. bracteolata was purified, and guaiol was identified by MS, NMR and comparison with the literature data. The study with the heartwood from V. mollissima led to obtain a precipitate of the hexane extract and isolation of neolignans carinatin and dehydrodieugenol. Concerning the pharmacological tests, essential oils and extracts of low polarity were tested on the promastigotes of Leishmania amazonensis. In this context, the oil V. mollissima showed highr activity (IC50 of 19.7g/mL). The neolignan carinatina showed lower activity with value IC50 of 53.9g/mL. The essential oils from B. multiflora and M. umbraticola were the most active with IC50 of 14.8 and 21.1g/mL, respectively. The extracts that showed highest activity on promastigotes from L. amazonensis were subjected to the cytotoxicity analysis in non-infected macrophages, and oil from V. mollissima was the most toxic with IC50 of 17.16g/mL 10 compared to standard pentamidine (IC50 = 24.40 g/mL), while the oil from B. multiflora showed less toxicity with IC50 = 42.71g/mL. When evaluated against brine shrimp Artemia salina, all the oils exhibited high toxicity compared to standard lapachol (LC50 = 10.47g/mL), being the essential oil from E. bracteolata the most toxic with LC50 of 0.53g/mL. The antioxidant activity evaluation against the radical free DPPH below 28% of activity to the essential oils. In contrast, the neolignan deidrodieugenol and precipitate obtained from V. mollissima, exhibit high antioxidant activity with IC50=10.68 and IC50=6.87g/mL, respectively. / A leishmaniose é considerada pela Organização Mundial de Saúde como uma das mais graves infecções existentes, por causa da sua alta capacidade de produzir deformidades. Os medicamentos existentes são de elevada toxicidade e o parasita tem apresentado resistência a esses medicamentos. Pesquisas científicas tem comprovado o potencial antiparasitário de extratos e substâncias isoladas de espécies vegetais. Este trabalho teve como objetivo principal a obtenção de óleos essenciais das folhas de três espécies da família Myrtaceae: Eugenia patrisii, Marlierea umbraticola e Myrciaria floribunda, duas espécies da família Myristicaceae: Virola mollissima e V. theiodora, uma espécie da família Annonaceae: Bocageopsis multiflora e uma espécie da família Lauraceae: Endlicheria bracteolata, ocorrentes na Reserva Florestal Adolpho Ducke, Manaus, AM. As coletas foram realizadas em dois períodos correspondentes ao inverno (abril) e verão (setembro). As análises dos óleos essenciais de E. patrisii, M. floribunda, B. multiflora e V. mollissima por CG-EM evidenciaram alta porcentagem de sesquiterpenos, enquanto que os óleos de M. umbraticola e V. theiodora apresentaram monoterpenos como constituintes majoritários. Já o óleo essencial das folhas frescas de E. bracteolata apresentou um diferencial quando extraído no mês de abril. Um precipitado foi observado durante a extração e quando analisado por CG-EM apresentou um perfil cromatográfico com cerca de 73,7% de sesquiterpenos oxigenados. Entretanto, o óleo da estação seca apresentou sesquiterpenos hidrocarbonetos como constituintes principais. O material sólido obtido de E. bracteolata foi purificado, e o guaiol foi identificado por EM, RMN e comparação com dados descritos da literatura. O estudo com o cerne de V. mollissima levou a obtenção de um precipitado do extrato hexano e ao isolamento das neolignanas carinatina e deidrodieugenol. Concernente aos ensaios farmacológicos, os óleos essenciais e extratos de baixa polaridade foram testados frente às formas promastigotas de Leishmania amazonensis. Nesse contexto, o óleo de V. mollissima exibe maior atividade (CI50 de 19,7 g/mL) e a neolignana carinatina apresenta menor atividade com valor de CI50 de 53,9 g/mL. Em relação aos óleos das demais espécies, os 8 óleos essenciais de B. multiflora e de M. umbraticola foram os mais ativos com CI50 de 14,8 e 21,1 g/mL, respectivamente. Os extratos que demonstraram maior atividade sobre as formas promastigotas de L. amazonensis foram submetidos ao ensaio de citotoxicidade em macrófagos não parasitados, sendo o óleo de V. mollissima o mais tóxico com CI50 de 17,16 g/mL em comparação ao padrão pentamidina (CI50 = 24,40 g/mL), enquanto que o óleo de B. multiflora apresentou menos toxicidade com CI50 de 42,71g/mL. Quando avaliados frente ao microcrustáceo Artemia salina, todos os óleos apresentaram elevada toxicidade em relação ao padrão lapachol (CL50 =10,47g/mL), sendo o óleo essencial de E. bracteolata o mais tóxico com CL50 de 0,53g/mL. A avaliação da atividade antioxidante frente ao radical livre DPPH demonstrou que os óleos apresentaram atividade abaixo de 28%. Em contrapartida, a neolignana deidrodieugenol e o precipitado obtido de V. mollissima, apresentam atividade bastante pronunciada com CI50=10,68 e CI50=6,87 g/mL, respectivamente. Palavras-chave: Óleos essenciais, análise cromatográfica, leishmaniose,

This study has aimed to evaluate the effects of treatments with essential oil (OAT) and infusion of Aloysia triphylla (IAT) on microbiological, chemical and sensory stability of silver catfish (Rhamdia quelen). α-citral (29.4%) and β-citral (20.8%) were the main components of OAT, followed by limonene (11.9%). Major compounds identified in the IAT were isoquercetrin > rosmarinic acid > luteolin. Experiments were divided in four parts in which the first has was aimed at evaluating the antimicrobial activity of OAT against foodborne bacteria strains, the microbiological stability of silver catfish fillets refrigerated after dipping in OAT solution and the microbiological changes during the ice storage of whole silver catfish previously sedated with OAT during the transport in vivo. In vitro assays revealed that the OAT has strong inhibitory activity against Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, and moderate inhibitory activity against Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Salmonella Typhimurium, Salmonella Choleraesuis and Salmonella Enteritidis, but does not inhibit Pseudomonas aeruginosa. Fillets imersed in 30 or 40 μL/L of OAT had lower mesophilic and psychrotrophic counts than control (p<0.05) during storage. Entire refrigerat fish that were previously sedated with 40 μL/L of OAT slowed lower counts for psychrotrophic at the 7th and 28th days of storage than control (p<0.05), whereas the mesophilic counts were similar to the control during storage. The 2nd experiment has aimed at determine whether the use of OAT in the water (0, 30 or 40 μL/L) to sedate silver catfish during transport action would delay the chemical and the sensory post mortem changes of refrigerated whole fish. Fresheness of entire silver catfish was extented by sedation with 40 μL/L of OAT as indicated by the delay in the onset of rigor mortis and in the degradation of inosine 5'-monophosphate into inosine compared to the control (p<0.05). Fish exposed to 30 or 40 μL/L OAT received lower demerit scores than the control (p <0.05) in sensory evaluation after 10 days of storage, whereas fish treated with 40 μL/L of OAT had higher shelf life (35 days in ice) than the control (p<0.05). In the 3rd experiment, we assessed whether the use of OAT in the water to sedate silver catfish during transport would influence the lipid stability of fish fillets during frozen storage (17 months). The fillets from fish exposed to 30 and 40 μL/L of OAT had higher initial content of primary products of lipid oxidation (conjugated dienes, CD) than control fillets, whereas the fillets from fish exposed to 40 μL/L of OAT had lower content of secondary products of lipid oxidation (thiobarbituric acid reactive substances, TBARS) after 6, 9 and 17 months of frozen storage than control fillets (p<0.05). The 4th experiment was aimed at evaluating the in vitro antioxidant activity of IAT and the lipid stability and instrumental color of frozen fillets after immersion in distilled water (control) or IAT (1, 2.5 or 5%). The antioxidant effect of IAT (1-5%) was demonstrated as the treated fillets had lower CD values after 7 months of storage, as well as lower TBARS value than control after 4, 7 and 10 months of storage. Regardeless of the storage time, the treatment with 5% IAT reduced brightness, increased the yellowness and chroma compared to control fillets, whereas the treatment with 2.5% IAT only increased the yellowness. However, the total color change during the storage of fillets treated with 2.5 and 5% IAT was lower than in control fillets (p <0.05). These results indicate that OAT has antimicrobial activity against foodborne bacteria. Furthermore, the use of OAT as a sedative in the transport of silver catfish extended the freshness and increased shelf life of the refrigerated whole fish, and also delayed lipid oxidation of the fillets during frozen storage. Dipping silver catfish fillets in IAT delayed lipid oxidation and color changes during frozen storage, which can extend the shelf life of fillets. These results indicate the great potential of A. triphylla in the fish processing sector as a pre-slaughter treatment (sedative) or in the post-slaughter period (natural food additive). / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial de Aloysia triphylla (OAT) e da infusão de A. triphylla (IAT) na estabilidade da carne de jundiá (Rhamdia quelen) com ênfase nas alterações microbiológicas, químicas e sensoriais do pescado. O α-citral (29,4%) e o β-citral (20,8%) foram os compostos majoritários do OAT, seguidos do limoneno (11,9%). Na IAT foram identificados como compostos majoritários a isoquercetrina > ácido rosmarínico > luteolina. No 1º experimento avaliou-se a atividade antimicrobiana do OAT contra cepas isoladas de alimentos, a estabilidade microbiológica de filés refrigerados após imersão em solução de OAT, bem como as alterações microbiológicas durante a armazenagem sob refrigeração de jundiás inteiros previamente sedados com OAT durante o transporte in vivo. Os ensaios in vitro revelaram que o OAT apresenta ação inibidora forte contra Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, e moderada contra Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Salmonella Typhimurium, Salmonella Choleraesuis e Salmonella Enteritidis, mas não inibe Pseudomonas aeruginosa. Os filés imersos em OAT 30 ou 40 μL/L apresentaram menores contagens de micro-organismos mesófilos e psicrotróficos que o controle (p<0,05) ao longo do armazenamento. Os peixes sedados com 40 μL/L de OAT durante o transporte tiveram contagens de psicrotróficos menores que o controle após 7 e 28 dias (p<0,05), enquanto as contagens de mesófilos foram semelhantes ao controle durante o armazenamento. No 2º experimento foi investigado se o uso do OAT na água (0, 30 ou 40 μL/L) como sedativo durante o transporte de jundiás pode retardar as modificações químicas e sensoriais do pescado inteiro refrigerado. A exposição do jundiá a 40 μL/L de OAT durante o transporte retardou o início do rigor mortis, bem como a degradação de inosina 5´-monofosfato em inosina comparado ao controle (p<0,05), prolongando o frescor do pescado. Os peixes expostos a 30 ou 40 μL/L de OAT receberam menor escore sensorial de demérito que o controle (p<0,05) após 10 dias de armazenamento, enquanto os expostos a 40 μL/L de OAT apresentaram maior vida útil (35 dias em gelo) que o controle (p<0,05). No 3º experimento foi avaliado se o uso do OAT na água como sedativo durante o transporte de jundiás influencia a estabilidade lipídica dos filés do pescado durante o congelamento. A exposição 30 e 40 μL/L de OAT resultou em maior teor inicial de produtos primários da oxidação lipídica (dienos conjugados, DC) nos filés, enquanto os filés dos peixes expostos a 40 μL/L de OAT apresentaram menor teor de produtos secundários da oxidação lipídica (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, TBARS) que os peixes controle após 6, 9 e 17 meses de congelamento (p<0,05). No 4º experimento avaliou-se a atividade antioxidante da IAT in vitro e a estabilidade lipídica e cor instrumental de filés congelados após a imersão em água destilada (controle) ou IAT (1, 2,5 ou 5%). O efeito antioxidante da IAT (1-5%) foi constatado pelos menores valores DC após 7 meses de congelamento, bem como valor de TBARS inferior ao controle após 4, 7 e 10 meses de congelamento nos filés tratados. Independente do tempo de armazenagem, o tratamento com IAT 5% reduziu a luminosidade, aumentou a tendência ao amarelo e o croma comparado aos filés controle, enquanto o tratamento com IAT 2,5% aumentou apenas a tendência ao amarelo. No entanto, a variação total de cor dos filés tratados com IAT 2,5 e 5% ao longo do congelamento foi menor que nos filés controle (p<0,05). Os resultados indicam que o OAT possui atividade antimicrobiana contra patógenos e micro-organismos indicadores de qualidade dos alimentos. Além disso, a utilização do OAT como um sedativo na água de transporte de jundiás prolongou o frescor e aumentou a vida útil do pescado inteiro refrigerado, além de retardar a oxidação lipídica dos filés durante o armazenamento congelado. A imersão de filés de jundiás na IAT retardou a oxidação lipídica e as mudanças na coloração durante o armazenamento congelado, podendo estender a vida útil dos filés. Estes resultados indicam o grande potencial da A. triphylla na área de processamento pescados, tanto no tratamento pré-abate (sedativo) como pós-abate (aditivo alimentar natural).

The increasing expansion of aquaculture, the stress on the animals in farming systems and the adverse effects caused by conventional anesthetics has encouraged the search for natural anesthetics, safer, more effective, with lower side effects and less residual waste. In this context, this work aimed to evaluate the anesthetic potential of the essential oil (EO) from leaves of Nectandra megapotamica in fat snook (Centropomus parallelus) and its chemical composition. For extraction of the EO, the leaves were separated in young (EO-Y) or old (EO-O) and chemical composition analysis was performed by GC/MS. The major constituents of the Y and O-EOs were: bicyclogermacrene (46.5/34.6%), α-pinene (26.8/26.2%), β-pinene (7.9/12.3%), and germacrene D (9.6/9.1%). In the first experiment, four different concentrations of each EO were tested in fat snook acclimated to two salinities (zero and 33 ppt) to evaluate anesthesia induction and recovery time. In the second experiment, two concentrations of EO-O were tested in fish acclimated to both salinities for the evaluation of stress parameters (glucose, lactate, Na+ and K+ plasma levels) caused by handling. In the third experiment, the fish were transported in plastic bags, supplied with both water salinities and two concentrations of EO-O for evaluation of water quality and mortality after transport. Mild sedation was achieved at 30 μL L-1 and deep anesthesia at 150 μL L-1 with both EO. The EO-O was not able to avoid the stress of handling, as evidenced by elevated glucose and lactate plasma levels observed in all treatments and controls. The treatments did not change significantly the plasma Na+ and K+ levels in the fish kept at both salinities. During transportation, the use of EO-O did not improve the water quality and post-transport mortality. On the contrary, the fish transported with the highest concentration of EO-O in seawater had significantly higher mortality than the other groups. In conclusion, the EO of N. megapotamica at the tested concentrations was efficient to induce sedation and anesthesia in fat snook, but was not effective in preventing the stress generated by handling and transport of this species. / A crescente expansão da aquicultura, o estresse imposto aos animais nos sistemas de cultivo e os efeitos adversos causados pelos anestésicos de uso convencional têm levado ao incentivo da pesquisa por anestésicos de origem natural, eficazes e mais seguros, com menos efeitos colaterais e menores efeitos residuais. Neste contexto, esta dissertação objetivou a avaliação do potencial anestésico do óleo essencial (OE) das folhas de Nectandra megapotamica em robalos-peva (Centropomus parallelus) e sua caracterização química. Para a extração do OE, as folhas foram classificadas em jovens (OE-J) e velhas (OE-V) e a análise de sua composição química foi realizada por CG/EM. Os constituintes majoritários foram: biciclogermacreno (46.5/34.6%), α-pineno (26.8/26.2%), β-pineno (7.9/12.3%) e germacreno D (9.6/9.1%). O potencial anestésico do OE foi avaliado através dos tempos de indução e recuperação da anestesia e as respostas bioquímicas geradas pelo manuseio e transporte dos peixes. No primeiro experimento, quatro concentrações de cada OE foram testadas em robalos-peva aclimatados a duas salinidades (0 e 33 ) para avaliar os tempos de indução e recuperação da anestesia. No segundo experimento, duas concentrações do OE-V foram testadas em robalos-peva aclimatados às duas salinidades para avaliar os parâmetros bioquímicos relacionados ao estresse (níveis plasmáticos de glicose, lactato, Na+ e K+) causado pelo manuseio. No terceiro experimento, os peixes foram transportados em sacos plásticos nos dois tipos de água e com duas concentrações do OE-V, com a finalidade de avaliar a qualidade da água e a mortalidade pós-transporte. Ambos OEs produziram sedação leve na concentração de 30 μL L-1 e anestesia profunda com 150 μL L-1. O OE-V não foi eficaz em evitar o estresse do manuseio, pois os elevados níveis plasmáticos de glicose e lactato observados nos controles também foram detectados nos grupos tratados. Os tratamentos não modificaram significativamente os níveis séricos de Na+ e K+ nos peixes em ambas as salinidades. Durante o experimento de transporte, o uso do OE-V não preveniu a deterioração da qualidade da água nem a mortalidade pós-transporte. Ao contrário, o grupo transportado com a concentração mais elevada do OE-V em água salgada apresentou uma mortalidade significativamente maior em relação aos demais grupos. Concluindo, o OE de N. megapotamica mostrou-se eficiente para indução de sedação e anestesia em robalos-peva nas concentrações testadas, mas não foi eficaz em prevenir o estresse gerado pelo manuseio e transporte nessa espécie.

The presente work describes the results obtained from the phytochemical studies bioguided of crude extracts of the bark of A. salzmannii, a species belonging to the Annonaceae family, front to tests of antioxidant, antimicrobial, and insecticide activities against larvae of the mosquito Aedes aegypti. From the hexane extract were isolated five compounds, been three sesquiterpenes (caryophyllene oxide, spathulenol, and selin-11-en-4a-ol); and two steroids (stigmast-4-en-3-one and - sitosterol). From the chloroform alkaloidal fraction of the methanolic extract were isolated seven alkaloids: liriodenine, 10-methoxyliriodenine, anonaine, asimilobine, reticuline, cleistopholine, and a mixture of alkaloids anonaine and xylopine. The assay of antioxidant activity revealed that the methanol extract (3583.02 μmol of TE g-1) and its fractions, chloroform alkaloidal fraction (5291.77 μmol of TE g-1) and chloroform neutral fraction (2047.54 μmol of TE g-1) showed significant antioxidant activity, mainly the chloroform alkaloidal fraction. Among the alkaloids isolated and tested, asimilobine was the most active of them with antioxidant activity of 2.09 TE relative. For antimicrobial assay, the best results were observed for methanol extract and chloroform alkaloidal fraction against Staphylococcus aureus (ATCC14458), Escherichia coli (ATCC 10799), Candida tropicalis (ATCC 157), and C. dubliniensis (ATCC 777). Among the alkaloids isolated and tested, all showed significant results with MIC values between 25-100 mg.mL-1, mainly the alkaloids anonaine, asimilobine, and liriodenine against Staphylococcus aureus penicilinase- (8-), S. epidermidis (ATCC 12228), S. epidermidis (6ep), and Candida dubliniensis (ATCC 778157). To the test of larvicidal activity, only the hexane extract and the fractions of methanol extract showed activity below 700 mg.mL-1. The caryophyllene oxide showed activity of 167 mg.mL-1. The results obtained confirm that A. salzmannii is a typical species of the Annonaceae family, and a promising source of biologically active compounds. / O presente trabalho descreve os resultados obtidos a partir do estudo fitoquímico biomonitorado dos extratos brutos das cascas de Annona salzmannii, uma espécie pertencente a família Annonaceae, frente a testes de atividades antioxidante, antimicrobiana e larvicida contra o Aedes aegypti. Do extrato hexânico foram isoladas cinco substâncias, sendo três sesquiterpenos (óxido de cariofileno, espatulenol e selin-11-en-4a-ol); e dois esteróides (estigmast-4-en-3-ona e - sitosterol). Da fração clorofórmica alcalóidica, proveninente do extrato metanólico, isolou-se sete alcalóides: liriodenina, 10-metoxiliriodenina, anonaina, asimilobina, reticulina, cleistofolina e uma mistura dos alcalóides anonaina e xylopina. O ensaio de atividade antioxidante revelou que o extrato metanólico (3583,02 μmol de TE g-1) e suas respectivas frações, fração clorofórmica alcalóidica (5291,77 μmol de TE g-1) e fração clorofórmica neutra (2047,54 μmol de TE g-1) apresentaram expressiva atividade antioxidante, com destaque para a fração clorofórmica alcaloídica. Dentre os alcalóides isolados e testados, asimilobina foi o mais ativo com atividade antioxidante de 2,09 TE relativo. Para o ensaio de atividade antimicrobiana, os melhores resultados foram observados para o extrato metanólico e a fração clorofórmica alcaloídica contra Staphylococcus aureus (ATCC14458), Escherichia coli (ATCC 10799), Candida tropicalis (ATCC 157) e C. dubliniensis (ATCC 777). Dentre os alcalóides isolados e testados, todos apresentaram resultados significativos com valores de CIM entre 25-100 mg.mL-1, com destaque para os alcalóides anonaina, asimilobina e liriodenina frente a Staphylococcus aureus penicilinase-(8-), S. epidermidis (ATCC 12228), S. epidermidis (6ep) e Candida dubliniensis (ATCC 778157). Para o teste de atividade larvicida, apenas o extrato hexânico e as frações provenientes do extrato metanólico apresentaram atividade abaixo de 700 mg.mL-1. O óxido de cariofileno apresentou atividade de 167 mg.mL-1. Os resultados obtidos confirmam que A. salzmannii é quimicamente uma espécie típica da família Annonaceae, além de uma fonte promissora de substâncias biologicamente ativas.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-06-21T14:43:48Z No. of bitstreams: 1 viniciuscariusdesouza.pdf: 3785363 bytes, checksum: 7063d6c5f5cef353643903ad5f125c48 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-07T19:09:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 viniciuscariusdesouza.pdf: 3785363 bytes, checksum: 7063d6c5f5cef353643903ad5f125c48 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T19:09:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 viniciuscariusdesouza.pdf: 3785363 bytes, checksum: 7063d6c5f5cef353643903ad5f125c48 (MD5) Previous issue date: 2016-03-03 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Lippia alba, popularmente conhecida por erva-cidreira, é uma espécie vegetal amplamente distribuída pelas Américas e encontrada praticamente em todo o território brasileiro. Esta espécie possui importante uso na medicina tradicional para o tratamento de cólicas, indigestão, náuseas, espasmos, diarreia, disenteria, doenças respiratórias, problemas hepáticos e no tratamento de sífilis e gonorreia. As folhas de L. alba, as quais são preparadas sob a forma de infusão ou decocção e ingeridas por via oral, produzem um óleo essencial rico em moléculas iso-prenóides denominadas terpenóides. Estes compostos não são apenas de interesse farmacológico, mas também industrial já que são usados na confecção de fragrâncias. A composição dos óleos essenciais pode variar em função de diferentes fatores abióticos e genotípicos, como por exemplo nível de ploidia. Neste contexto, os objetivos deste trabalho foram caracterizar o transcriptoma de folha da espécie L. alba e buscar sequencias putativas de enzimas envolvidas na produção de metabólitos secundários. O transcriptoma foi sequenciado pela plataforma Miseq (Illumina) com bibliotecas pairedend de 300 bp. O sequenciamento resultou em um total de 47.498.310 reads paired-end (23.749.155 reads para cada end sequenciado) de 35-308 bp, compreendendo 12.148.327.567 nucleotídeos (-12 Gb). A montagem de novo dos transcritos foi processada a partir do software Trinity que gerou 193.532 transcritos, sendo 128.209 unigenes, com o valor de N50 igual a 1.187 bp. Um total de 86.122 ORF (Open Read Frame) foi obtido e a seguir submetido ao algoritmo de alinhamentos BlastP, o qual encontrou 75.533 sequências com referência no banco de dados NR (Non-Redundant) de proteínas. Aproxima-damente, 78,4% dessas sequências foram anotadas funcionalmente a partir do pipeline utiliza-do pelo software Blast2GO. As análises das sequências anotadas revelaram prováveis enzimas para síntese de terpenóides como geraniol e linalol/nerolidol. Para validação da montagem e anotação, foram realizados ensaios de qPCR para amplificação de sequências de 13 genes para controles endógenos e 4 genes de terpeno sintases. Os resultados obtidos aqui corroboram outros estudos de transcriptoma de espécies não modelo usando tecnologias de sequenciamento de alto-desempenho. / Lippia alba, popularly known as erva-cidreira, is a widely distributed specie in Americas and it is found throughout Brazil. This specie has important using in popular medicine for cramp-ing, indigestion, nausea, diarrhea, dysentery, respiratory diseases, liver disorders treatment and infectious diseases such as syphilis and gonorrhea. The leaves of L. alba, which are pre-pared by infusion or decoction and orally ingested, producing an essential oil rich in terpene compounds. These compounds are of pharmacological and industrial interest, due to their use in fragrance preparation. Interestingly, the composition of essential oils change according to different abiotic factors and genetic variations such as ploidy level. In this context, the aims of this work were to characterize the transcriptome of leaves of L. alba (linalool chemotype) and to search putative enzymes sequences involved in production of secondary metabolites. The transcriptome was sequenced by Miseq platform (Illumina) running pair-end libraries 300 bp. The sequencing resulted in 47,498,310 reads (23,749,155 reads for each end sequenced) of 35-308 bp, comprising 12,148,327,567 nucleotides (-12 Gb). The de novo assembly of tran-scripts was processed by Trinity software and generated 193,532 transcripts, in 128,209 uni-genes, with N50 equal to 1,187 bp. 86,122 ORFs (Open Read Frame) were obtained and sub-mitted to BlastP algorithm, finding 75,533 sequences included in NR (Non-Redundant) pro-tein database. Approximately 78.4% of these sequences were functionally annotated using Blast2Go pipeline. Analysis of annotated sequences revealed putative enzymes for synthesis of terpenoids such as geraniol and linalool/nerolidol. For assembly and annotation validation, qPCR assay were realized by amplification of 13 endogenous control genes and 4 terpene synthases genes. The results found here corroborate transcriptome studies in non-model or-ganisms using high-performance sequencing technologies.