O infarto agudo do miocárdio (IAM) é um evento que acomete milhares de pessoas ao redor do mundo. Após o IAM são desencadeados diversos processos, como alterações na expressão de proteínas envolvidas na contratilidade cardíaca e no remodelamento cardíaco após o IAM, bem como o desequilíbrio no estado redox da célula, que podem levar a um grave prognóstico. A utilização dos hormônios da tireoide vem sendo amplamente estudada na tentativa de desenvolver um método terapêutico eficiente para o tratamento do IAM. Desta forma, o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da tiroxina (T4) sobre a expressão e a concentração de antioxidantes e pró-oxidantes e sobre a expressão de proteínas relacionadas ao metabolismo do cálcio, e suas possíveis relações com a melhora na função cardíaca após o IAM. Foram utilizados ratos Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais: SHAM, infartado (IAM) e infartado e tratado com T4 nas doses de 1,2, 2,4 e 6,0 mg/L de água de beber. O tratamento foi iniciado 24 horas após a indução do IAM e após 14 dias foram coletados dados morfométricos e ecocardiográficos, além de analisadas as expressões das proteínas cálcio ATPase do retículo sarcoplasmático (SERCA2a), fosfolambam (PLB), fator nuclear eritroide do tipo 2 (Nrf2) e hemeoxigenase 1 (HO-1). Também foram quantificadas as concentrações de peróxido de hidrogênio (H2O2) e de glutationa total em homogeneizado de tecido cardíaco. Os animais infartados, tratados ou não, apresentaram hipertrofia cardíaca independente da dose do tratamento. O IAM provocou uma redução da função cardíaca, e o tratamento com T4 não foi capaz de reverter esses efeitos. A expressão das proteínas PLB e Nrf2 diminuiu após o IAM. Os animais tratados com T4 em suas doses mais altas apresentaram valores da expressão da proteína Nrf2 semelhantes aos animais do grupo SHAM. Os grupos infartado e tratado com T4 nas doses de 2,4 e 6,0 mg/L apresentaram valores de expressão da SERCA2a maiores quando comparados com o grupo SHAM. As concentrações de H2O2 e de glutationa total não foram alteradas após o IAM, e o tratamento com T4 também não alterou estes parâmetros. Em suma, uma vez que a dose de T4 de 6,0 mg/L modulou a expressão do Nrf2, uma proteína importante para o estado redox da célula, sugerimos que poderia estar ocorrendo uma adaptação de sistemas antioxidantes distintos dos analisados neste estudo e que também são regulados por este fator de transcrição. / The acute myocardial infarction (AMI) is an event that affects thousands of people around the world. After AMI are triggered several processes, such as changes in expression of proteins involved in cardiac contractility and cardiac remodeling, as well as the cell redox state imbalance, which can lead to serious prognosis. The use of thyroid hormones has been widely studied in an attempt to develop an efficient therapeutic method for treatment of AMI. Thus, the objective of this study was to investigate the effects of thyroxine (T4) on expression and concentration of antioxidant and pro-oxidants and the expression of proteins related to calcium metabolism, and their possible relationships with improvement in cardiac function after AMI. Wistar rats were divided into the following groups: SHAM, myocardial infarction (AMI) and myocardial infarction and treated with T4 at doses of 1,2, 2,4 and 6,0 mg / L of drinking water. Treatment was initiated 24 hours after induction of AMI and after 14 days were collected morphometric and echocardiographic data, and analyzed protein expression of sarcoplasmic reticulum calcium ATPase (SERCA2a), phospholamban (PLB), nuclear factor erythroid type 2 (Nrf2) and hemeoxygenase 1 (HO-1). Also were quantitated concentrations of hydrogen peroxide (H2O2) and total glutathione in homogenized of cardiac tissue. The infarcted animals, treated or not, showed cardiac hypertrophy, independent of the dose of treatment. The AMI has caused a decline in cardiac function parameters, and treatment with T4 was not able to reverse these effects. The protein expression of PLB and Nrf2 decreased after AMI. Animals treated with T4 in their higher doses had values of Nrf2 protein expression similar to those animals of the SHAM group. The infarcted groups and treated with T4 at doses of 2.4 and 6.0 mg / L had higher SERCA2a expression when compared to the sham group. The concentrations of H2O2 and total glutathione were not altered after AMI, and treatment with T4 did not alter these parameters. In short, since the treatment dose of 6.0 mg / L modulates the expression of Nrf2, an important protein for the redox state of the cell, we suggest what might be going on an adaptation of antioxidant systems distinct from those analyzed in this study and are also regulated by this transcription factor.

L'épithélium intestinal est caractérisé par un renouvellement et une différenciation continus dépendant des cellules souches somatiques situées au fond des cryptes. Le renouvellement rapide est assuré par plusieurs réseaux de voies signalisation dont la dérégulation peut être à l'origine de l'initiation et/ou de la progression tumorale. Mon laboratoire d'accueil a décrit l'implication des hormones thyroïdiennes et de leur récepteur nucléaire TRa1 dans le contrôle de l'homéostasie de l'épithélium intestinal via la régulation de la voie Wnt/b-caténine d'une part et l'implication de TRa1 dans l'induction de tumeurs intestinales grâce à des souris surexprimant TRa1 d'autre part. De plus, dans un contexte APC muté, l'expression transgénique de TRa1 accélère la progression tumorale et favorise la dissémination métastatique. Des analyses transcriptomiques mettent en évidence une forte activation de la voie Wnt par TRa1. Ces résultats ont été confirmés chez l'homme en étudiant la régulation de la voie Wnt par TRa1 dans des carcinomes colorectaux (CRC). Nous avons confirmé la surexpression de TRa1 dans les tumeurs humaines et validé son impact sur la voie Wnt tant dans les tumeurs humaines que dans des lignées cellulaires et sur leur agressivité. L'ensemble des données montre une forte implication de TRa1 dans la tumorigenèse chez la souris et chez l'homme et ouvrent des portes pour des recherches visant TRa1 comme cible de traitement thérapeutique contre le cancer / The intestinal epithelium is characterized by constant renewal and differentiation due to the presence of stem cells located at the bottom of the crypts. This permanent renewal depends on the crosstalk between several signaling pathways whose alteration can lead to tumor initiation and progression. Our team demonstrated the implication of the thyroid hormones and their nuclear receptor TRa1 in the control of the intestinal epithelium homeostasis through the regulation of the Wnt pathway. Moreover, the overexpression of TRa1 in the intestinal epithelium of mice is sufficient to promote tumor initiation, and in an APC loss of function context, it accelerates tumor progression highlighting its oncogenic potential. Through gene expression profiling, we highlighted an activation of the Wnt pathway activity by TRa1 during tumor progression. We next confirm these results in human patient samples by demonstrating that high TRa1 expression in tumors invariably is associated with an increased Wnt pathway activity. In addition, in CRC cell lines, TRa1-associated WNT pathway activation enhances their aggressiveness. Altogether these results showed the implication of TRa1 in intestinal carcinogenesis and open avenues for new therapeutic treatment against TRa1 targeting TRa1

A manipulação de materiais em escala nanométrica representa uma das fronteiras em nanociência e nanotecnologia, devido à possibilidade de controle de propriedades específicas do material. No caso de materiais biológicos, em particular, a manipulação e imobilização na forma de filmes ou camadas ultrafinas é crucial para seu emprego em dispositivos biotecnológicos. Neste trabalho, objetivou-se o estudo de detecção de diferentes hormônios tireoidianos (HTs) e análogos a partir da imobilização da região LBD do receptor de hormônio tireoidiano humano TRTRβ1 em um eletrodo interdigitado, para o desenvolvimento de um biossensor capacitivo. Este sistema consiste em um arranjo estrutural na forma de filme fino capaz de distinguir a interação específica receptor-ligante de outras interações possivelmente interferentes, visando a quantificação dos níveis de HTs. Para isto, a técnica de SAMs (Self-Assembled Monolayers) foi empregada, por permitir um alto controle da espessura e ordenamento molecular dos filmes, assim como a preservação das atividades das biomoléculas. Análises espectroscópicas e morfológicas foram realizadas para o estudo de adsorção das biomoléculas no filme. As interações específicas receptor-ligante foram avaliadas por meio de respostas elétricas (impedância) do biossensor contendo o TRβ1-LBD imobilizado em um filme orgânico ultrafino, e também por SPR (Surface Plasmon Resonance). Os resultados mostraram a capacidade dos eletrodos contendo TRTRβ1-LBD de detectar e diferenciar entre diferentes HTs em concentrações da ordem de nanomolar, compatível com níveis fisiológicos, evidenciando o grande potencial de aplicação para este sistema no diagnóstico e tratamento de disfunções tireoidianas. / Manipulation of materials at the nanoscale represents one of the frontiers in nanoscience and nanotechnology, mainly due to the possibility of specific controlling, improved properties, not observed if conventional bulk processing is applied. For biomolecules, in particular, processing via immobilization in the form of nanostructured films has allowed their use in biotechnological applications and devices. In this master dissertation, we aimed at investigating the immobilization of the LBD domain of human thyroid hormone receptor TRTRβ1 on interdigitated electrodes, to be used as capacitive biosensors for thyroid hormones (THs) and analogues detection. The nuclear receptors were immobilized via SAMs (Self-Assembled Monolayers), since this technique allows a high control of molecular order and thickness of the films, as well as the preservation of biological activities. Spectroscopic and morphological analyses were performed to investigate the adsorption of biomolecules on the nanostructured film. The interactions between receptor - ligand were also evaluated by means of electrical response (impedance) and SPR (Surface Plasmon Resonance). The bioelectrodes containing immobilized TRTRβ1 were capable of detecting and distinguishing among different HTs, including T3, T4, TRIAC and GC-1 at concentrations down to nanomolar, compatible with physiological levels. The latter results point to the possibility of applications of the bioelectrodes in the diagnosis and treatment of thyroid dysfunctions.

O infarto agudo do miocárdio (IAM) é um evento que acomete milhares de pessoas ao redor do mundo. Após o IAM são desencadeados diversos processos, como alterações na expressão de proteínas envolvidas na contratilidade cardíaca e no remodelamento cardíaco após o IAM, bem como o desequilíbrio no estado redox da célula, que podem levar a um grave prognóstico. A utilização dos hormônios da tireoide vem sendo amplamente estudada na tentativa de desenvolver um método terapêutico eficiente para o tratamento do IAM. Desta forma, o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da tiroxina (T4) sobre a expressão e a concentração de antioxidantes e pró-oxidantes e sobre a expressão de proteínas relacionadas ao metabolismo do cálcio, e suas possíveis relações com a melhora na função cardíaca após o IAM. Foram utilizados ratos Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais: SHAM, infartado (IAM) e infartado e tratado com T4 nas doses de 1,2, 2,4 e 6,0 mg/L de água de beber. O tratamento foi iniciado 24 horas após a indução do IAM e após 14 dias foram coletados dados morfométricos e ecocardiográficos, além de analisadas as expressões das proteínas cálcio ATPase do retículo sarcoplasmático (SERCA2a), fosfolambam (PLB), fator nuclear eritroide do tipo 2 (Nrf2) e hemeoxigenase 1 (HO-1). Também foram quantificadas as concentrações de peróxido de hidrogênio (H2O2) e de glutationa total em homogeneizado de tecido cardíaco. Os animais infartados, tratados ou não, apresentaram hipertrofia cardíaca independente da dose do tratamento. O IAM provocou uma redução da função cardíaca, e o tratamento com T4 não foi capaz de reverter esses efeitos. A expressão das proteínas PLB e Nrf2 diminuiu após o IAM. Os animais tratados com T4 em suas doses mais altas apresentaram valores da expressão da proteína Nrf2 semelhantes aos animais do grupo SHAM. Os grupos infartado e tratado com T4 nas doses de 2,4 e 6,0 mg/L apresentaram valores de expressão da SERCA2a maiores quando comparados com o grupo SHAM. As concentrações de H2O2 e de glutationa total não foram alteradas após o IAM, e o tratamento com T4 também não alterou estes parâmetros. Em suma, uma vez que a dose de T4 de 6,0 mg/L modulou a expressão do Nrf2, uma proteína importante para o estado redox da célula, sugerimos que poderia estar ocorrendo uma adaptação de sistemas antioxidantes distintos dos analisados neste estudo e que também são regulados por este fator de transcrição. / The acute myocardial infarction (AMI) is an event that affects thousands of people around the world. After AMI are triggered several processes, such as changes in expression of proteins involved in cardiac contractility and cardiac remodeling, as well as the cell redox state imbalance, which can lead to serious prognosis. The use of thyroid hormones has been widely studied in an attempt to develop an efficient therapeutic method for treatment of AMI. Thus, the objective of this study was to investigate the effects of thyroxine (T4) on expression and concentration of antioxidant and pro-oxidants and the expression of proteins related to calcium metabolism, and their possible relationships with improvement in cardiac function after AMI. Wistar rats were divided into the following groups: SHAM, myocardial infarction (AMI) and myocardial infarction and treated with T4 at doses of 1,2, 2,4 and 6,0 mg / L of drinking water. Treatment was initiated 24 hours after induction of AMI and after 14 days were collected morphometric and echocardiographic data, and analyzed protein expression of sarcoplasmic reticulum calcium ATPase (SERCA2a), phospholamban (PLB), nuclear factor erythroid type 2 (Nrf2) and hemeoxygenase 1 (HO-1). Also were quantitated concentrations of hydrogen peroxide (H2O2) and total glutathione in homogenized of cardiac tissue. The infarcted animals, treated or not, showed cardiac hypertrophy, independent of the dose of treatment. The AMI has caused a decline in cardiac function parameters, and treatment with T4 was not able to reverse these effects. The protein expression of PLB and Nrf2 decreased after AMI. Animals treated with T4 in their higher doses had values of Nrf2 protein expression similar to those animals of the SHAM group. The infarcted groups and treated with T4 at doses of 2.4 and 6.0 mg / L had higher SERCA2a expression when compared to the sham group. The concentrations of H2O2 and total glutathione were not altered after AMI, and treatment with T4 did not alter these parameters. In short, since the treatment dose of 6.0 mg / L modulates the expression of Nrf2, an important protein for the redox state of the cell, we suggest what might be going on an adaptation of antioxidant systems distinct from those analyzed in this study and are also regulated by this transcription factor.

Objectives: The introduction of neonatal screening programs (NSP) led to an increased in detection of congenital hypothyroidism (CH). This increase may be due to ethnic composition (predominance of Iberian and Asian people), environmental factors (temperature and iodine intake) and inclusion of cases of transient CH and hyperthyrotropinemia, defined by moderate elevation of TSH with normal T4. The main objectives of this study were to evaluate, in children with altered neonatal screening tests in the NSP in the Northeastern Brazilian Sergipe state, the evolution for permanent or temporary condition and to evaluate the mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation. Subjects and methods: Review of medical records of children with altered neonatal and confirmatory TSH from 2004 to 2010 (levels more than 5.2 μU/ml and 4.2 μU/ml, respectively), followed at the Clinic of Pediatric Endocrinology of the University Hospital of the Federal University of Sergipe. From the confirmatory serum TSH values, children were classified as initial CH: serum TSH > 10.0 μU/ml; or suspect CH: serum TSH > 4.2 μU/ml and ≤ 10.0 μU/ml. According to follow-up parameters, the final diagnosis included three categories. Permanent CH: Serum TSH > 10.0 μU/ml, independent of T4 levels or current use of thyroxine; or without l-thyroxine use serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml, but with low free T4 or total T4. Hyperthyrotropinemia: children without l-thyroxine use with serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml with normal free T4 and total T4. Transient TSH elevation: Initial CH or suspect CH children which normalized in the follow up without l-thyroxine treatment (serum TSH ≤ 4.2 μU/ml, free T4 ≥ 0.79 ng/dl and total T4 ≥ 7.2 μg/dl). The mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation in the period was calculated by dividing the number of children with each category for the total number of children screened. Results: The initial diagnosis included 37 cases of initial CH (18.1%) and 167 suspect CH (81.9%). The final diagnosis included 46 cases of permanent CH (22.5%); 56 hyperthyrotropinemia (27.5%) and 102 transient TSH elevation (50.0%). Out of the 37 cases of initial CH, it was found 23 (62.2%) of permanent CH; 9 (24.3%) of hyperthyrotropinemia; and 5 (13.5%) of transient TSH elevation. Out of the 167 suspects, it was found 23 (13.8%) of permanent CH, 47 (28.1%) of hyperthyrotropinemia and 97 (58.1%) of transient TSH elevation. We found a mean incidence of 1:4166 of permanent CH, 1:3448 of hyperthyrotropinemia and 1:1887 of transient TSH elevation. 86.5% of children with an initial diagnosis of CH and 41.9% of suspicions have permanent condition (CH or hyperthyrotropinemia). Conclusions: The follow-up of children with initial diagnosis and suspicion is necessary to characterize the permanence or not of the disorder, since the prediction of the evolution of children with initial CH or suspect is difficult. / Objetivos: A introdução dos programas de triagem neonatal (PTN) propiciou o aumento na detecção do hipotireoidismo congênito (HC). Este aumento pode estar ligado à composição étnica (predomínio em ibéricos e asiáticos), fatores ambientais (temperatura e ingestão de iodo) e inclusão de casos de HC transitório e da hipertirotropinemia, definida pela elevação moderada do TSH com T4 normal. Os objetivos principais deste estudo foram avaliar em crianças com teste de triagem neonatal alterado no PTN em Sergipe, no nordeste do Brasil, a evolução para condição permanente ou transitória e avaliar a incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH. Sujeitos e métodos: Foi realizada revisão dos prontuários das crianças convocadas no período de 2004 a 2010, com TSH neonatal e confirmatório alterados (maior que 5,2 μU/ml e 4,2 μU/ml, respectivamente), acompanhados no Ambulatório de Endocrinologia Pediátrica do Hospital Universitário da Universidade Federal de Sergipe. A partir dos valores do TSH sérico confirmatório, as crianças foram classificadas como HC inicial: TSH sérico > 10,0 μU/ml; ou suspeito HC: TSH sérico > 4,2 μU/ml e ≤ 10,0 μU/ml. De acordo com parâmetros do seguimento, o diagnóstico final incluiu três categorias. HC permanente: TSH sérico > 10,0 μU/ml, independente de valores de T4 ou do uso de l-tiroxina; ou sem l-tiroxina com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, mas com T4 livre ou T4 total baixos; Hipertirotropinemia: Criança sem l-tiroxina, com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, com T4 livre e T4 total normais; Elevação transitória do TSH: Criança HC inicial ou suspeito HC que normalizou no seguimento, sem a l-tiroxina (TSH sérico ≤ 4,2 μU/ml, T4 livre ≥ 0,79 ng/dl e T4 total ≥ 7,2 μg/dl). A incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH no período foi calculada dividindo-se o número de crianças com cada uma das três condições pelo número total de crianças triadas. Resultados: No diagnóstico inicial tivemos 37 casos de HC inicial (18,1%) e 167 suspeitos HC (81,9%). No diagnóstico final tivemos 46 casos de HC permanente (22,5%); 56 de hipertirotropinemia (27,5%) e 102 de elevação transitória do TSH (50,0%). Dos 37 casos HC inicial encontramos 23 (62,2%) de HC permanente; 9 (24,3%) de hipertirotropinemia; e 5 (13,5%) de elevação transitória do TSH. Dos 167 suspeitos encontramos 23 (13,8%) de HC permanente, 47 (28,1%) de hipertirotropinemia e 97 (58,1%) de elevação transitória do TSH. Encontramos uma incidência média de 1:4166 de HC permanente, 1:3448 de hipertirotropinemia e 1:1887 de elevação transitória do TSH. 86,5 % das crianças com diagnóstico inicial de HC e 41,9 % das suspeitas apresentam condição permanente (HC ou hipertirotropinemia). Conclusões: O seguimento das crianças seja com o diagnóstico inicial de HC ou de suspeição é necessário para caracterizar a permanência ou transitoriedade do distúrbio, haja vista que a predição da evolução destas crianças é difícil.

Pesticides are among the most important risk factors for the health of workers and the environment. Many are recognized for their actions as endocrine disruptors, leading to changes in thyroid function markers. The aim of the study was to investigate the association between occupational exposure to organophosphate pesticides and thyroid function markers growers. The study enrolled 208 rural workers involved in the orange culture Boquim municipality in April 2015 to April 2016. They answered the questionnaire containing demographic information, health profile and occupational risk. Blood samples were collected for analysis of thyroid function. A large part of the workers live in the countryside 131 (72.0%), belong to social classes D and E (50.8%) and are predominantly male 161 (77.4%). The health profile analysis showed the presence of characteristic symptoms often associated with organophosphate poisoning. Muscle weakness has been reported (45.9%), skin disorders (36.3%), tremor night (17.2%) and seizures (2.2%). With regard to occupational variables, most responders reported having some kind of long, direct or indirect, with the pesticide (92.3%) and were exposed to pesticides to a period longer than five years (66.1%). Biochemical markers of thyroid function were analysed: TSH (thyroid stimulating hormone) with 10.5% of changed values, free T4 (thyroxine) with 41.4% of the reduced values, total T3 (triiodothyronine) with 21.8% of altered values. Altered levels of anti-thyroid peroxidase (anti-TPO) and of anti-thyroglobulin (anti-Tg) were found in 14.7% and 9.3% of cases, respectively. TSH levels and altered T3 predominated in women, and reduced free T4 predominated in men; all had a higher frequency in the fifth decade of life. The presence of positive autoimmunity predominated in women and had a higher frequency in the fourth decade of life for Anti-TPO and fifth for Anti-Tg. Conclusion: The exposure variables to organophosphate pesticides evaluated in this population showed no association with changes in serum TSH, free T4 and total T3 and with overt hypothyroidism diagnosis, subclinical hypothyroidism and hyperthyroidism. / Os agrotóxicos estão entre os mais importantes fatores de risco para a saúde dos trabalhadores e para o meio ambiente. Muitos são reconhecidos por suas ações como disruptores endócrinos, levando a alterações nos marcadores de função tireoidiana. O objetivo do estudo foi investigar a associação entre a exposição ocupacional aos agrotóxicos organofosforados e os marcadores de função tireoidiana de citricultores. Participaram do estudo 208 trabalhadores rurais envolvidos na cultura de laranja do município de Boquim no período de abril 2015 a abril 2016. Responderam o questionário contendo informações sociodemográficas, perfil de saúde e de risco ocupacional. Foram colhidas amostras de sangue dos trabalhadores para a análise da função tireoidiana. A maior parte dos trabalhadores moram na zona rural 131 (72,0 %), pertencem às classes sociais D e E (50,8%) e são predominantemente homens 161 (77,4%). A análise do perfil de saúde demonstrou presença de sintomatologia característica frequentemente associada à intoxicação por organofosforados. Foi relatado fraqueza muscular (45,9%), alteração na pele (36,3%), tremor noturno (17,2%) e convulsões (2,2%). Com relação às variáveis ocupacionais, a maioria dos entrevistados relataram ter algum tipo de contanto, direto ou indireto, com o agrotóxico (92,3%) e estavam expostos aos pesticidas a um período superior a 5 anos (66,1%). Os marcadores bioquímicos da função tireoidiana analisados foram: TSH (hormônio tireoestimulante) com 10,5% dos valores alterados, T4 livre (tiroxina) com 41,4% dos valores reduzidos, T3 total (triiodotironina) com 3,2% de valores alterados. Níveis alterados de anticorpo anti-tireoperoxidase (Anti-TPO) de e anti-tireoglobulina (Anti-Tg) foram encontrados em 14,7% e em 9,3% dos casos, respectivamente. Os níveis de TSH e T3 total alterados predominaram nas mulheres e os de T4 livre reduzidos predominaram nos homens; todos tiveram uma frequência de valores alterados maior na quinta década de vida. Já a presença de autoimunidade positiva predominou nas mulheres e teve uma frequência maior na quarta década de vida para o Anti-TPO e quinta para o Anti-Tg. Conclusão: As variáveis de exposição aos pesticidas organofosforados avaliadas nessa população não demonstraram associação com alterações dos hormônios TSH, T4 livre e T3 Total e com os diagnósticos de hipotireoidismo franco, hipotireoidismo subclínico e hipertireoidismo. / Lagarto, SE

Orientador: Mario Roberto Marostica Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-14T20:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Berno_LucianeIsabel_M.pdf: 1103514 bytes, checksum: 7482258c3423d699ee03f85080189d7a (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar os efeitos do selênio oriundo da torta de castanha do Brasil sobre a concentração dos hormônios da tireóide, níveis de glutationa reduzida e alguns parâmetros bioquímicos de ratos Wistar decorrentes da ingestão de dietas com diferentes proporções de torta de castanha. Assim, o estudo se iniciou com o recebimento das amêndoas de castanha do Brasil, provenientes da indústria Juta e Castanha?, localizada na cidade de São Paulo. Em seguida procedeu-se à sua prensagem para desengorduramento parcial das castanhas ¿ o produto obtido desse processo foi denominado ¿torta desengordurada de castanha¿. Para dar continuidade ao trabalho, foi determinada a composição centesimal das fontes protéicas utilizadas no estudo, torta desengordurada de castanha do Brasil e caseína, utilizada como proteína padrão. A partir desses dados, foram confeccionadas as dietas dos animais com 12% de proteína. As dietas continham diferentes teores de torta e caseína como fontes de proteína, resultando em oito dietas diferentes, sendo elas: G1: 100% caseína com mix-mineral AIN 93G; G2: 100% caseína com mix-mineral AIN 93G elaborado com exclusão de Se; G3: 65% caseína, 35% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G elaborado com exclusão de Se; G4: 65% caseína, 35% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G; G5: 75% caseína, 25% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G elaborado com exclusão de Se; G6: 75% caseína, 25% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G; G7: 87,5% caseína, 12,5% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G elaborado com exclusão de Se; G8: 87,5% caseína, 12,5% torta de castanha do Brasil; com mix-mineral AIN 93G. O ensaio biológico contou com 64 animais, divididos em oito grupos de oito animais cada, acondicionados em gaiolas separadas, sob ciclo claro/escuro de 12 horas, com temperatura e umidade controladas, durante o período de 28 dias do ensaio biológico. O consumo de dieta e o ganho de peso foram monitorados. Ao final do experimento, os animais foram mortos por decapitação e o sangue foi coletado para realização das análises propostas. Os níveis dos hormônios da tireóide apresentaram-se, para todos os grupos, dentro dos parâmetros descritos na literatura como ideais para roedores. Os grupos alimentados com as dietas que continham torta de castanha do Brasil apresentaram níveis de T3 significativamente maiores (1,19 a 1,41 nmol/L) que os encontrados nos grupos alimentados somente com caseína (1,04 e 1,07 nmol/L), o que revela que a torta de castanha do Brasil é um alimento que pode influenciar positivamente o metabolismo da tireóide. A análise da concentração sanguínea de glutationa reduzida revelou que, assim como a caseína (proteína padrão), a torta de castanha do Brasil apresenta características nutricionais que contribuem para a manutenção adequada dos níveis sanguíneos de glutationa (88,49 a 94,70 mg/dl). No entanto, outros fatores, que não só as diferentes concentrações de selênio consumidas pelos animais influenciaram os níveis de glutationa SH sanguínea encontrados. Os resultados dos parâmetros bioquímicos analisados, glicemia (79,05 a 139,76 mg/dl) e colesterol (34,73 a 87,42 mg/dl), levaram à conclusão de que torta de castanha do Brasil, não só influencia positivamente o metabolismo da tireóide, mas também o metabolismo dos glicídios e lipídeos. Para a análise estatística utilizou-se o software SAS INSTITUTE (1999). A análise de variância (ANOVA) foi calculada e as médias comparadas por meio do teste de Tukey, com 5% de significância / Abstact: The objective of this study was to evaluate the effects of selenium of the defatted cake from Brazil nuts on the concentrations of thyroid hormones, levels of reduced glutathione and some biochemical parameters of rats resulting from ingestion of diets with different proportions of defatted cake. The study began on receiving the Brazil nuts from Jute and Castanha® industry, located in São Paulo. Then the nuts were pressed partially eliminating the oil - the product of this process was called 'defatted cake' The centesimal composition of protein sources used in the study was determined: defatted cake of the Brazil nut and casein (the later used as protein reference), and diets were prepared with 12% of protein. The diets contained different levels of defatted cake and casein, resulting in eight different diets, which were: Diet 1: (Standard diet) AIN 93G diet (protein source: casein, mineral mix AIN 93); Diet 2: (Control diet) AIN 93G diet (protein source: casein, mineral mix AIN 93 without selenium); Diet 3: AIN 93 Diet (protein sources: 65% casein/35% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN 93 without selenium); Diet 4: AIN 93G diet (protein sources: 65% casein/35% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN 93); Diet 5: AIN 93 Diet (protein sources: 75% casein/25% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN 93 without selenium); Diet 6: AIN 93G diet (protein sources: 75% casein/25% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN-93); Diet 7: AIN 93 Diet (protein sources: 87,5% casein/12,5% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN 93 without selenium); Diet 8: AIN 93G diet (protein sources: 87,5% casein/12,5% Brazil nut defatted cake, mineral mix AIN-93). The assay had 64 animals, divided into eight groups with eight animals each, and packed in separate cages, on cycles light/dark of 12 hours, with controlled temperature and humidity during the 28 days of the assay. The consumption of diet and weight gain was monitored. At the end of the experiment, the animals were killed by decapitation and blood was collected to perform the analysis proposed. The levels of thyroid hormones showed an increase for all groups, remaining the value described in the literature as ideal for rodents. The groups fed the diets containing defatted cake of the Brazil nut showed higher levels of T3 than those found in the groups fed only casein, which shows that Brazil nut cake may positively influence the thyroid metabolism. The analysis of blood concentration of reduced glutathione revealed that the Brazil nut defatted cake presents nutritional characteristics that contribute to the maintenance of adequate blood levels of glutathione. However, other factors, independent of selenium concentrations consumed by the animals influenced the levels of blood glutathione. The biochemical parameters examined, glucose and cholesterol, lead to the conclusion that the Brazil nut defatted cake influence positively not only the thyroid metabolism, but also the metabolism of carbohydrates and lipids / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

Tendo em vista a ocorrência de alterações no sistema imune relacionadas ao hipertireoidismo e à participação do sistema complemento (SC) em processos imunológicos, torna-se importante investigar se os hormônios tireoidianos teriam algum efeito sobre o SC. O SC é composto de uma série de proteínas séricas e de membrana que estão envolvidas em processos da resposta imune. Considerando que os hormônios tireoidianos estão envolvidos em uma série de processos biológicos, e que tanto o hipo- quanto hipertireoidismo podem acarretar alterações importantes nestes processos, os objetivos deste trabalho foram estudar o impacto de níveis séricos elevados de hormônios tireoidianos sobre a atividade do sistema complemento e produção de anticorpos. Foram utilizados ratos machos wistar para o modelo experimental de hipertireoidismo, investigando-se a atividade lítica das vias clássica/lectina e alternativa através de ensaios hemolíticos; os níveis séricos de fator B da via alternativa através do emprego de reagente deficiente de fator B; e a produção de anticorpos anti-hemácia de carneiro (SRBC) empregando ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) e ensaios de plaque forming cell (PFC). O hipertireoidismo induzido não resultou em alterações da atividade lítica das vias clássica/lectina. Entretanto, a elevação dos níveis séricos de hormônios tireoidianos provocou uma redução da atividade lítica de via alternativa, de forma significante em doses de 1, 5, 50 e 100g de levotiroxina/200g de peso animal após 14 dias de tratamento, e com dose a partir de 0,15g de triiodotironina/200g de peso animal, após 7 e 12 dias de tratamento. Os níveis séricos funcionais de fator B foram reduzidos nestas condições. Além disso, ocorre redução da resposta de produção de anticorpos em ratos tratados com T3 e imunizados com SRBC. Estes resultados mostram que níveis elevados de hormônio tireoideano reduzem a capacidade funcional da via alternativa do SC , avaliada pelo desencadeamento da lise em decorrência da interação com hemácias de coelho. Esta redução poderia levar a uma menor geração de fragmentos com atividade nos processos de seqüestro e apresentação do antígeno e interação com as células envolvidas na resposta imune, resultando em títulos menores de anticorpos produzidos. Estudos adicionais são necessários para avaliar estas possibilidades. As observações deste estudo podem auxiliar para o melhor entendimento do impacto biológico das disfunções hormonais sobre a atividade do sistema complemento. / Considering the alterations of the immune system that occur in the hyperthyroidism, and the involvement of the complement system (CS) in immune processes, this work aimed to investigate the effect of high levels of thyroid hormones on the CS and on the antibody production. The CS comprehends a group of serum and membrane proteins which activation leads to the generation of protein fragments or complexes with important biologic functions, such as participation in events of the immune response. Wistar adult male rats treated with thyroid hormones were used as experimental model of hyperthyroidism, to evaluate the lytic activity of classical/lectin and alternative pathways of the CS through hemolytic assays; the serum levels of factor B employing serum deficient of this component (RB); and the production of anti-sheep red blood cells (SRBC) antibodies through enzyme linked immunosorbent (ELISA) and plaque forming cell (PFC) assays. Classic and lectin pathways activity was not affected in the hyperthyroidism. However in this condition the alternative pathway activity was significantly reduced at doses of 1; 5; 50 and 100 g of thyroxine (T4) /200g of animal weight/day after 14 days of treatment, or crescent doses starting from 0,15 g of triiodothyronine (T3) for periods of 7 and 12 days of treatment. The serum levels of factor B were also reduced in these conditions. In addition, there was a reduction of the antibody response in rats treated with T3 and immunized with SRBC. These results show that the functional capacity of alternative pathway is decreased in consequence of high levels of thyroid hormones as evaluated by its lytic potency triggered by the rabbit erythrocytes. This could them lead to a reduced generation of complement fragments active in antigen sequestering and presentation, and on the interaction of cells in the immune response decreasing the antibody production. Additional studies are required to evaluate these possibilities.

A creatina (Cr) é uma reserva de fosfato de alta energia, sendo a fonte mais rápida de restauração do ATP intracelular. O hormônios tireoideano participa de forma importante na manutenção da taxa metabólica, aumentando a síntese e consumo de ATP, por meio da regulação de diferentes genes-alvo. Neste sentido, avaliamos o efeitos do HT sobre a expressão gênica do transportador de Cr nos músculos esqueléticos e cardíaco de ratos. O tratamento com o hormônio regula estes processos, porém de forma distinta nos diferentes tipos de músculos. / Creatine (Cr) is a high-energy phosphate reservoir and the fastest source for intracellular ATP regeneration. The thyroid hormone plays a key role on the maintenance of basal metabolic rate, increasing the synthesis and the degradation of ATP through regulation of target-genes. In this study, we explore the effects of thyroid hormone on Cr transporter gene expression and regulation of intracellular pool of Cr in skeletal and cardiac muscles in rats. The hormone can regulate these processes in distinct ways in different muscle types.

Abstract Colorectal cancer is the second most common malignancy in the Western World. The overall 5-year survival is still only 50–60%. Thus, better prognostic markers are needed to improve survival of the disease. Most colorectal cancers develop from pre-existing adenomas including conventional, flat and serrated adenomas. The most important prognostic factors include tumour stage, histologic subtype and poor differentiation. The prognosis of colorectal cancer depends mainly on tumour stage. The growth of colorectal cancer is determined by cell proliferation, differentation and apoptosis. The progression of colorectal cancer is associated with the growth pattern of colorectal cancer and its invasive margin. Cancer cell budding means the presence of cells scattered in the stroma at the invasive margin, and is associated with β-catenin, an adhesion protein involved in the nuclear Wnt/β-catenin pathway. Hormones may be directly involved in the growth of a cancer, for example sex hormones play an important role in the development of most gynaecological cancers. The knowledge about the dependency of cancers on other hormones, such as thyroid hormones, is limited. This thesis focuses on factors affecting growth and prognosis in colorectal cancer. Antibodies for Ki-67, caspase cleavage site for keratin 18, β-catenin and TRβ1 were used to determine their possible associations with colorectal cancer growth patterns and the characteristics of the invasive margin. Apoptosis and proliferation were decreased at the invasive margin, particularly in serrated adenocarcinomas. The invasive margin showed a presence of budding cell clusters in 24.0% of the cases and this predicted a very poor 5-year-survival (15.4%, P < 0.00001), but nuclear β-catenin accumulation did not predict budding. Thyroid hormone receptor TRβ1 was associated with polypoid growth, presence of KRAS mutations and also with a higher WHO histological grade and advanced Dukes' stage, and in in vitro analysis, thyroid hormone T3 had a modulatory effect on colorectal cancer cell protein synthesis and apoptosis. In conclusion, the growth type of colorectal cancer, i.e. conventional polypoid, flat or serrated, has an association with the characteristics of the invasive margin. Budding margin is associated with poor prognosis in colorectal cancer, and could be utilised in diagnostic pathology. Association of TRβ1 expression with polypoid growth pattern and the presence of KRAS mutations suggest that abnormalities in thyroid hormone signalling involving TRβ1 play a role in the development of some types of colorectal adenocarcinomas.