As cianobactérias (algas azuis) são organismos procariontes, fotossintéticos, encontrados em praticamente todo tipo de habitat líquido e que podem formar grandes massas superficiais de cor verde intensa denominadas florações. O aparecimento de florações na superfície da água ocorre com uma incidência cada vez mais elevada e é considerado um risco potencial à saúde, devido à natureza tóxica de algumas algas. As cianobactérias podem produzir hepatotoxinas, neurotoxinas e dermatotoxinas, que já causaram reações adversas e morte de animais e seres humanos. A maioria das hepatotoxinas são microcistinas (MCs), uma família de toxinas produzidas por espécies de cianobactérias de água doce. A MC-LR foi a primeira a ser identificada é a mais estudada, pois tem sido associada à maioria dos casos de intoxicação envolvendo cianotoxinas. O presente trabalho visou avaliar a toxicidade causada em camundongos pela exposição prolongada ao extrato aquoso de uma floração de cianobactérias contendo microcistinas. Para tanto, camundongos machos Swiss receberam o extrato (300 ou 900 mg/kg) por quatro semanas, sendo avaliados: ganho de peso, consumo de ração e água, comportamento no campo aberto (CA) e no labirinto em cruz elevado (LCE), hemograma, bioquímica sanguínea, achados anatomopatológicos e presença de MC no plasma e fígado. Além disso, quantificou-se as MCs presentes no extrato e avaliou-se in vitro a morte celular de leucócitos expostos a esse extrato e à MC-LR. A análise química do extrato mostrou que este possui, além das MCs, anabaenopeptinas; dentre as MCs foram encontradas a MC-LR, MC-RR, MC-YR e [D-Asp3] MC-LR. A exposição prolongada ao extrato por 28 dias não alterou o ganho de peso e o peso relativo de órgãos. Na necropsia também não foram observadas alterações macroscópicas, contudo alterações histopatológicas foram encontradas no fígado e no rim. No fígado foram observados focos discretos de necrose lítica hepatocelular associada a infiltrado de neutrófilos e células mononucleares. No rim, o tratamento com o extrato aumentou significativamente a intensidade de nefrose tubular, sendo esta mais acentuada nos animais tratados com a maior dose. O tratamento prolongado com o extrato em ambas doses causou efeitos comportamentais dosedependentes no CA: aumento significativo da distância percorrida, do número de entradas, do tempo em movimento e do número de levantamentos no centro do CA, além de um aumento do tempo de permanência no centro, com conseqüente diminuição deste parâmetro na periferia. No entanto, nenhum dos parâmetros avaliados no LCE foi alterado. A exposição prolongada ao extrato causou alterações sutis em parâmetros hematológicos e bioquímicos, caracterizadas por tendência de diminuição de leucócitos e de aumento dos níveis de creatinina sérica nos animais tratados com a maior dose do extrato. O tratamento prolongado com o extrato permitiu a detecção de MC apenas no fígado. Tanto a MC-LR como o extrato promoveram aumento das taxas de apoptose em leucócitos de camundongo in vitro. Finalizando, observou-se que a exposição prolongada a uma floração contendo MCs causou baixa toxicidade e efeitos comportamentais dose-dependentes, mostrando que o comportamento animal é bastante útil para avaliar efeitos mais sutis de agentes tóxicos sobre o sistema nervoso central. / Cyanobacteria (blue-green algae) are prokaryotic and photosynthetic organisms found in practically every type of liquid habitat and that can form great superficial masses of intense green color called blooms. The development of algal blooms on water surface occurs with a higher incidence and is recognised as being a potential health hazard due to the toxic nature of some algae. Cyanobacteria can produce hepatotoxins, neurotoxins and dermatotoxins, which already caused adverse effects and death of animals and human beings. Most of the hepatotoxins are microcystins (MCs), a family of toxins produced by species of freshwater cyanobacteria. MC-LR was the first to be identified and is the more studied, therefore, it has been associated to most of the cases of intoxication involving cyanotoxins. The present study was performed to evaluate the toxicity in mice after prolonged exposure to a cyanobacteria bloom extract containing microcystins. For this, male Swiss mice were treated with the extract (300 or 900 mg/kg) for four weeks and was evaluated: weight gain, food and water consumption, behavior in the open field (OF) and in the elevated plus-maze (EPM), blood count, clinical biochemistry, anatomopathological findings and presence of MC in the plasma and liver. Besides, the MCs present in the extract were quantified and the cellular death of leukocytes exposed in vitro to MC and to the extract was evaluated. The chemical analysis of the extract showed that it presented, besides MCs, anabaenopeptins; the MCs found were MC-LR, MC-RR, MC-YR and [D-Asp3] MC-LR. The prolonged exposure to the extract for 28 days did not alter the weight gain and the relative weight of organs. At necropsy, macroscopic alterations were not observed, however, histopathological alterations were found in the liver and in the kidney. In the liver, discreet necrosis focuses associated with neutrophils and mononuclear cells were found. In the kidney, the treatment with the extract increased significantly the intensity of tubular nephrosis, and this was more accentuated in the animals treated with the largest dose. The prolonged treatment with both doses caused dose-dependent behavioral effects in the OF: significant increase of moved distance, number of entries, time moving and rearing in the center of the OF, besides an increase of time spent in the center, with consequent decrease of this parameter in the periphery. None of the parameters evaluated in EPM were altered. The prolonged exposure to the extract caused subtle alterations in hematological and biochemical parameters, characterized by tendency for leukocyte decrease and increase of the levels of serum creatinine in the animals treated with the largest dose of the extract. The prolonged treatment with the extract allowed the detection of MC just in the liver. As much MC-LR as the extract promoted increase of the apoptosis levels in mouse leukocytes in vitro. Concluding, it was observed that the prolonged exposure to the cyanobacteria bloom containing MCs caused low toxicity and dose-dependent behavioral effects, showing that animal behavior is useful to evaluate subtler effects of toxic agents on the central nervous system.

O presente trabalho teve o objetivo de avaliar os efeitos da fumonisina B1 (FB1) sobre a produtividade e a qualidade dos ovos de codornas em início de postura. Para esse fim, 128 aves de 7 semanas de idade foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos experimentais (32 aves por grupo), tendo sido administrada ração contendo 0 (controle), 10, 50 e 250 mg de FB1/kg, durante 28 dias. Cada tratamento esteve constituído por quatro replicatas de oito codornas. A produção e o peso dos ovos foram avaliados diariamente. O consumo de ração e a conversão alimentar foram mensurados semanalmente. Os ovos produzidos no último dia de cada período de 7 dias foram coletados e submetidos à analise individual de densidade, unidade Haugh e percentual de peso da casca em relação ao peso total do ovo. No vigésimo oitavo dia experimental, foram coletadas amostras de sangue para análise de perfil de função hepática (proteína total, albumina, AST, GGT e ácido úrico) e hemograma. Dezesseis aves de cada tratamento foram sacrificadas por deslocamento cervical, e os fígados, rins e coração foram removidos, pesados e submetidos à análise histopatotológica. Comparado com os grupos controles, as codornas alimentadas com ração contendo concentração >= 50 mg de FB1/kg reduziram (p < 0,05) o consumo de alimentos e apresentaram menor (p < 0,05) ganho de peso. Entretanto, a conversão alimentar foi aumentada (p < 0,05) apenas para as aves que receberam 250 mg de FB1/kg na dieta. A produção média de ovos apresentou-se significativamente menor (p < 0,05) para o grupo exposto a 250 mg de FB1/kg. O peso dos ovos diminui significativamente (p < 0,05) para as aves alimentadas com ração contendo concentração de 250 mg de FB1/kg. As médias de densidade e unidade Haugh não foram afetadas (p > 0,05) pela FB1. O peso das cascas dos ovos diminuiu (p < 0,05) nos grupos que receberam concentração >= 50 mg de FB1/kg na dieta. Entretanto, o percentual de casca não foi afetado pela FB1. Comparados com os grupos controle, os tratamentos que receberam concentração >= 50 mg de FB1/kg na dieta apresentaram maior (p < 0,05) peso relativo de fígado. Os pesos relativos do rim e do coração não foram afetados (p > 0,05) pela FB1. Comparando-se com o controle, as aves que receberam concentração de 250 mg de FB1/kg na dieta apresentaram redução (p < 0,05) da porcentagem do hematócrito. Os demais parâmetros do hemograma avaliados não foram afetados (p > 0,05) pela FB1. Com exceção do número de leucócitos aumentado no tratamento 10 mg de FB1/kg de ração (p < 0,05), os parâmetros do leucograma avaliados não foram afetados pela FB1 (p > 0,05). O valor de AST para o tratamento 250 mg de FB1/kg de ração encontrou-se aumentado (p < 0,05) quando comparado ao controle. Os outros parâmetros de bioquímica sérica avaliados no presente estudo não foram afetados pela FB1 (p > 0,05). Com relação aos achados histopatológicos, não houve diferença entre os tratamentos, em tecido hepático, renal e miocárdio, comparando-se com o grupo controle. Esses resultados sugerem que codornas são sensíveis aos efeitos tóxicos da FB1, em níveis que foram descritos como sendo de ocorrência natural, em condições de campo. Os dados indicaram que a exposição a FB1 em níveis >=50 mg de FB1/kg podem afetar adversamente o desempenho de codornas, o que enfatiza a importância do controle da contaminação por FB1 nas rações de codornas. / A 28-d experiment was conducted to evaluate the effect of fumonisin B1 (FB1) on egg production and egg quality of young laying Japanese quail fed contaminated rations. To this end, 128 7-wk-old birds were randomly distributed into four experimental groups (32 birds per group) and given rations containing 0 (controls), 10, 50 and 250 mg FB1/ kg feed. Each treatment consisted of four replicates of eight quail. Egg production and egg weights were checked daily. Feed consumption and feed use were determinated weekly. Eggs laid in the last day of each 7-d period were collected and subjected to individual analysis for specific gravity, Haugh units and percentage eggshells. On day 28, 12 quail from each treatment (4 replicates of 3 birds each) were bled by cardiac puncture and samples used for serum chemistry analyses (total protein, albumin, AST, GGT, and uric acid). Sixteen quail from each treatment were sacrificed by cervical dislocation, and liver, kidney, and heart were removed, weighed and collected for histopathological examination. Compared with controls, quail fed >= 50 mg FB1/ kg had reduced (p < 0.05) feed intake and lower (p < 0.05) body weight gain. However, feed use was only reduced (p < 0.05) for birds fed 250 mg FB1/ kg. Average egg production was significantly lower (p < 0.05) for group exposed to 250 mg FB1/ kg. Egg weight was significantly decreased (p < 0.05) for birds fed 250 mg FB1/ kg. Average specific gravity and Haugh units were not affected (p > 0.05) by FB1. Eggshell weight was reduced (p < 0.05) for birds fed >= 50 mg FB1/ kg. However, percentage eggshell was not affected by FB1. Compared with controls, quail fed >= 50 mg FB1/ kg had increased (p < 0.05) relative liver weight. Relative kidney weight and relative heart weight were not affected (p > 0.05) by FB1. Compared with controls, birds fed 250 mg FB1/ kg diet had reduced (p < 0.05) hematocrits. FB1 had no effet on hematological values evaluated (p > 0.05) but on hematocrits. Despite the icreased (p < 0.05) on total white blood cell count for quail fed 10 mg FB1/ kg diet, FB1 had no effect on heterophil, lymphocyte and monocyte counts (p > 0.05). Compared with controls, AST concentrations were higher (p < 0.05) in quail fed 250 mg FB1/ kg diet. It was not observed any histopathological change in liver, kidney and heart samples from any treatment group, compared with controls. These results suggest that quail are sensitive to the toxic effects of FB1 at levels that have been reported to occur in feedstuff under field conditions. Data indicated that exposure to FB1 at levels >= 50 mg/ kg could adversely affect quail performance, emphasizing the importance of controlling fumonisin contamination in quail rations.

As cianobactérias (algas azuis) são organismos procariontes, fotossintéticos, encontrados em praticamente todo tipo de habitat líquido e que podem formar grandes massas superficiais de cor verde intensa denominadas florações. O aparecimento de florações na superfície da água ocorre com uma incidência cada vez mais elevada e é considerado um risco potencial à saúde, devido à natureza tóxica de algumas algas. As cianobactérias podem produzir hepatotoxinas, neurotoxinas e dermatotoxinas, que já causaram reações adversas e morte de animais e seres humanos. A maioria das hepatotoxinas são microcistinas (MCs), uma família de toxinas produzidas por espécies de cianobactérias de água doce. A MC-LR foi a primeira a ser identificada é a mais estudada, pois tem sido associada à maioria dos casos de intoxicação envolvendo cianotoxinas. O presente trabalho visou avaliar a toxicidade causada em camundongos pela exposição prolongada ao extrato aquoso de uma floração de cianobactérias contendo microcistinas. Para tanto, camundongos machos Swiss receberam o extrato (300 ou 900 mg/kg) por quatro semanas, sendo avaliados: ganho de peso, consumo de ração e água, comportamento no campo aberto (CA) e no labirinto em cruz elevado (LCE), hemograma, bioquímica sanguínea, achados anatomopatológicos e presença de MC no plasma e fígado. Além disso, quantificou-se as MCs presentes no extrato e avaliou-se in vitro a morte celular de leucócitos expostos a esse extrato e à MC-LR. A análise química do extrato mostrou que este possui, além das MCs, anabaenopeptinas; dentre as MCs foram encontradas a MC-LR, MC-RR, MC-YR e [D-Asp3] MC-LR. A exposição prolongada ao extrato por 28 dias não alterou o ganho de peso e o peso relativo de órgãos. Na necropsia também não foram observadas alterações macroscópicas, contudo alterações histopatológicas foram encontradas no fígado e no rim. No fígado foram observados focos discretos de necrose lítica hepatocelular associada a infiltrado de neutrófilos e células mononucleares. No rim, o tratamento com o extrato aumentou significativamente a intensidade de nefrose tubular, sendo esta mais acentuada nos animais tratados com a maior dose. O tratamento prolongado com o extrato em ambas doses causou efeitos comportamentais dosedependentes no CA: aumento significativo da distância percorrida, do número de entradas, do tempo em movimento e do número de levantamentos no centro do CA, além de um aumento do tempo de permanência no centro, com conseqüente diminuição deste parâmetro na periferia. No entanto, nenhum dos parâmetros avaliados no LCE foi alterado. A exposição prolongada ao extrato causou alterações sutis em parâmetros hematológicos e bioquímicos, caracterizadas por tendência de diminuição de leucócitos e de aumento dos níveis de creatinina sérica nos animais tratados com a maior dose do extrato. O tratamento prolongado com o extrato permitiu a detecção de MC apenas no fígado. Tanto a MC-LR como o extrato promoveram aumento das taxas de apoptose em leucócitos de camundongo in vitro. Finalizando, observou-se que a exposição prolongada a uma floração contendo MCs causou baixa toxicidade e efeitos comportamentais dose-dependentes, mostrando que o comportamento animal é bastante útil para avaliar efeitos mais sutis de agentes tóxicos sobre o sistema nervoso central. / Cyanobacteria (blue-green algae) are prokaryotic and photosynthetic organisms found in practically every type of liquid habitat and that can form great superficial masses of intense green color called blooms. The development of algal blooms on water surface occurs with a higher incidence and is recognised as being a potential health hazard due to the toxic nature of some algae. Cyanobacteria can produce hepatotoxins, neurotoxins and dermatotoxins, which already caused adverse effects and death of animals and human beings. Most of the hepatotoxins are microcystins (MCs), a family of toxins produced by species of freshwater cyanobacteria. MC-LR was the first to be identified and is the more studied, therefore, it has been associated to most of the cases of intoxication involving cyanotoxins. The present study was performed to evaluate the toxicity in mice after prolonged exposure to a cyanobacteria bloom extract containing microcystins. For this, male Swiss mice were treated with the extract (300 or 900 mg/kg) for four weeks and was evaluated: weight gain, food and water consumption, behavior in the open field (OF) and in the elevated plus-maze (EPM), blood count, clinical biochemistry, anatomopathological findings and presence of MC in the plasma and liver. Besides, the MCs present in the extract were quantified and the cellular death of leukocytes exposed in vitro to MC and to the extract was evaluated. The chemical analysis of the extract showed that it presented, besides MCs, anabaenopeptins; the MCs found were MC-LR, MC-RR, MC-YR and [D-Asp3] MC-LR. The prolonged exposure to the extract for 28 days did not alter the weight gain and the relative weight of organs. At necropsy, macroscopic alterations were not observed, however, histopathological alterations were found in the liver and in the kidney. In the liver, discreet necrosis focuses associated with neutrophils and mononuclear cells were found. In the kidney, the treatment with the extract increased significantly the intensity of tubular nephrosis, and this was more accentuated in the animals treated with the largest dose. The prolonged treatment with both doses caused dose-dependent behavioral effects in the OF: significant increase of moved distance, number of entries, time moving and rearing in the center of the OF, besides an increase of time spent in the center, with consequent decrease of this parameter in the periphery. None of the parameters evaluated in EPM were altered. The prolonged exposure to the extract caused subtle alterations in hematological and biochemical parameters, characterized by tendency for leukocyte decrease and increase of the levels of serum creatinine in the animals treated with the largest dose of the extract. The prolonged treatment with the extract allowed the detection of MC just in the liver. As much MC-LR as the extract promoted increase of the apoptosis levels in mouse leukocytes in vitro. Concluding, it was observed that the prolonged exposure to the cyanobacteria bloom containing MCs caused low toxicity and dose-dependent behavioral effects, showing that animal behavior is useful to evaluate subtler effects of toxic agents on the central nervous system.

O presente trabalho teve o objetivo de avaliar os efeitos da fumonisina B1 (FB1) sobre a produtividade e a qualidade dos ovos de codornas em início de postura. Para esse fim, 128 aves de 7 semanas de idade foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos experimentais (32 aves por grupo), tendo sido administrada ração contendo 0 (controle), 10, 50 e 250 mg de FB1/kg, durante 28 dias. Cada tratamento esteve constituído por quatro replicatas de oito codornas. A produção e o peso dos ovos foram avaliados diariamente. O consumo de ração e a conversão alimentar foram mensurados semanalmente. Os ovos produzidos no último dia de cada período de 7 dias foram coletados e submetidos à analise individual de densidade, unidade Haugh e percentual de peso da casca em relação ao peso total do ovo. No vigésimo oitavo dia experimental, foram coletadas amostras de sangue para análise de perfil de função hepática (proteína total, albumina, AST, GGT e ácido úrico) e hemograma. Dezesseis aves de cada tratamento foram sacrificadas por deslocamento cervical, e os fígados, rins e coração foram removidos, pesados e submetidos à análise histopatotológica. Comparado com os grupos controles, as codornas alimentadas com ração contendo concentração >= 50 mg de FB1/kg reduziram (p < 0,05) o consumo de alimentos e apresentaram menor (p < 0,05) ganho de peso. Entretanto, a conversão alimentar foi aumentada (p < 0,05) apenas para as aves que receberam 250 mg de FB1/kg na dieta. A produção média de ovos apresentou-se significativamente menor (p < 0,05) para o grupo exposto a 250 mg de FB1/kg. O peso dos ovos diminui significativamente (p < 0,05) para as aves alimentadas com ração contendo concentração de 250 mg de FB1/kg. As médias de densidade e unidade Haugh não foram afetadas (p > 0,05) pela FB1. O peso das cascas dos ovos diminuiu (p < 0,05) nos grupos que receberam concentração >= 50 mg de FB1/kg na dieta. Entretanto, o percentual de casca não foi afetado pela FB1. Comparados com os grupos controle, os tratamentos que receberam concentração >= 50 mg de FB1/kg na dieta apresentaram maior (p < 0,05) peso relativo de fígado. Os pesos relativos do rim e do coração não foram afetados (p > 0,05) pela FB1. Comparando-se com o controle, as aves que receberam concentração de 250 mg de FB1/kg na dieta apresentaram redução (p < 0,05) da porcentagem do hematócrito. Os demais parâmetros do hemograma avaliados não foram afetados (p > 0,05) pela FB1. Com exceção do número de leucócitos aumentado no tratamento 10 mg de FB1/kg de ração (p < 0,05), os parâmetros do leucograma avaliados não foram afetados pela FB1 (p > 0,05). O valor de AST para o tratamento 250 mg de FB1/kg de ração encontrou-se aumentado (p < 0,05) quando comparado ao controle. Os outros parâmetros de bioquímica sérica avaliados no presente estudo não foram afetados pela FB1 (p > 0,05). Com relação aos achados histopatológicos, não houve diferença entre os tratamentos, em tecido hepático, renal e miocárdio, comparando-se com o grupo controle. Esses resultados sugerem que codornas são sensíveis aos efeitos tóxicos da FB1, em níveis que foram descritos como sendo de ocorrência natural, em condições de campo. Os dados indicaram que a exposição a FB1 em níveis >=50 mg de FB1/kg podem afetar adversamente o desempenho de codornas, o que enfatiza a importância do controle da contaminação por FB1 nas rações de codornas. / A 28-d experiment was conducted to evaluate the effect of fumonisin B1 (FB1) on egg production and egg quality of young laying Japanese quail fed contaminated rations. To this end, 128 7-wk-old birds were randomly distributed into four experimental groups (32 birds per group) and given rations containing 0 (controls), 10, 50 and 250 mg FB1/ kg feed. Each treatment consisted of four replicates of eight quail. Egg production and egg weights were checked daily. Feed consumption and feed use were determinated weekly. Eggs laid in the last day of each 7-d period were collected and subjected to individual analysis for specific gravity, Haugh units and percentage eggshells. On day 28, 12 quail from each treatment (4 replicates of 3 birds each) were bled by cardiac puncture and samples used for serum chemistry analyses (total protein, albumin, AST, GGT, and uric acid). Sixteen quail from each treatment were sacrificed by cervical dislocation, and liver, kidney, and heart were removed, weighed and collected for histopathological examination. Compared with controls, quail fed >= 50 mg FB1/ kg had reduced (p < 0.05) feed intake and lower (p < 0.05) body weight gain. However, feed use was only reduced (p < 0.05) for birds fed 250 mg FB1/ kg. Average egg production was significantly lower (p < 0.05) for group exposed to 250 mg FB1/ kg. Egg weight was significantly decreased (p < 0.05) for birds fed 250 mg FB1/ kg. Average specific gravity and Haugh units were not affected (p > 0.05) by FB1. Eggshell weight was reduced (p < 0.05) for birds fed >= 50 mg FB1/ kg. However, percentage eggshell was not affected by FB1. Compared with controls, quail fed >= 50 mg FB1/ kg had increased (p < 0.05) relative liver weight. Relative kidney weight and relative heart weight were not affected (p > 0.05) by FB1. Compared with controls, birds fed 250 mg FB1/ kg diet had reduced (p < 0.05) hematocrits. FB1 had no effet on hematological values evaluated (p > 0.05) but on hematocrits. Despite the icreased (p < 0.05) on total white blood cell count for quail fed 10 mg FB1/ kg diet, FB1 had no effect on heterophil, lymphocyte and monocyte counts (p > 0.05). Compared with controls, AST concentrations were higher (p < 0.05) in quail fed 250 mg FB1/ kg diet. It was not observed any histopathological change in liver, kidney and heart samples from any treatment group, compared with controls. These results suggest that quail are sensitive to the toxic effects of FB1 at levels that have been reported to occur in feedstuff under field conditions. Data indicated that exposure to FB1 at levels >= 50 mg/ kg could adversely affect quail performance, emphasizing the importance of controlling fumonisin contamination in quail rations.

A ativação excessiva dos receptores NMDA tem sido descrita no disparo da morte neuronal que ocorre em doenças, como o glaucoma. É possível que a combinação de subunidades (NR2A-D) possa ativar vias de sinalização intracelulares que resultam na morte ou sobrevivência. Nosso objetivo foi investigar o envolvimento de subunidades NR2 e Rac1, membro da família Rho GTPase, na morte de neurônios da retina. A morte induzida por glutamato in vitro foi reduzida após a inibição de Rac1 e bloqueio de NR2B, mas não das subunidades NR2C/D. Resultados semelhantes foram obtidos in vivo após injeção intravítrea NMDA, e a detecção de Rac1 ativo, principalmente, nos processos de glia de Müller foi inibida pelo bloqueio NR2B. Além disso, a produção de TNF-<font face=\"Symbol\">&#945; após a injeção de NMDA foi reduzida pelo bloqueio de NR2B e Rac1. Assim, nossos resultados sugerem que a excitotoxicidade via receptores NR2B/NMDA ativa Rac1 em células da glia de Müller, que por sua vez controla a produção de TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 possível responsável pela morte de células ganglionares da retina. / Overactivation of NMDA receptors has been described to trigger neuronal death that occurs in diseases such as glaucoma. It is possible that the combination of subunits (NR2A-D) activate intracellular signaling pathways that result in death or survival. Our aim was to investigate the involvement of NR2 subunits and Rac1, a member of Rho GTPase family, in retinal neuronal death. Glutamate-induced neuronal death in vitro was reduced after Rac1 inhibition and by NR2B blocking, but not NR2C/D subunits. Similar results were obtained in vivo after NMDA intravitreous injection, although active Rac1 was mainly detected in Müller glia processes, and it was inhibited by NR2B blockade. In addition, TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 level after NMDA injection were reduced by NR2B blocking and Rac1. Thus, our results suggest that excitotoxicity via NR2B/NMDA receptors activate Rac1 in Müller glia cells, which in turn controls the TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 production that triggers retinal ganglion cell death.

Estudamos nos camundongos geneticamente selecionados para alta (AIRmax) ou baixa (AIRmin) resposta inflamatória aguda os efeitos tóxicos do DMBA na medula óssea e sua repercussão na resposta imunológica após 24 horas. O tratamento diminuiu a produção de IgG anti-HGG e a migração celular para o tecido subcutâneo após injeção sc com Biogel nos AIRmin, como também causou hipocelularidade, principalmente de neutrófilos maduros. Contudo, houve um aumento de blastos e neutrófilos imaturos. A análise do ciclo celular em células Lin- revelou bloqueio da fase S nos AIRmin tratados com DMBA. A cinética de dano no DNA mostrou que o reparo no DNA é mais rápido em AIRmax. Os níveis de expressão do gene parp-1 triplicou em AIRmax, enquanto que nos AIRmin aumentou p53 e caspase-3. Os AIRmin tratados com DMBA apresentam perda da capacidade proliferativa e de diferenciação quando estimuladas in vitro com fatores hematopoéticos. O DMBA causou mielotoxicidade nos AIRmin, podendo afetar o desenvolvimento da resposta imune, enquanto AIRmax foram resistentes a esses efeitos. / We investigated in mice genetically selected for high (AIRmax) or low (AIRmin) acute inflammatory response the toxic effects of DMBA treatment on the BM and its impact on the immune response. DMBA treatment diminished specific IgG anti-HGG production and the cellular migration to the inflammatory site after sc injection of biogel in AIRmin, and hypocellularity in BM, mostly in the neutrophil. However we observed an increase of immature cells. Cell cycle analysis of Lin cells showed a decrease of cells in S stage from DMBA-treated AIRmin mice. The kinetics of cell repair demonstrated the early removal of DNA lesion from DMBA-treated AIRmax mice. The parp-1 gene showed 3 fold increased mRNA expression in AIRmax cells, however in AIRmin mice there was an increase in p53 and caspase-3 mRNA mRNA expression. Myeloid cells from DMBA treated AIRmin mice showed low differentiation and proliferation capacities after in vitro hematopoietic factors. DMBA treatment produced myelotoxicity in AIRmin mice, affecting immune response development, but AIRmax mice were resistant.

Estudamos nos camundongos geneticamente selecionados para alta (AIRmax) ou baixa (AIRmin) resposta inflamatória aguda os efeitos tóxicos do DMBA na medula óssea e sua repercussão na resposta imunológica após 24 horas. O tratamento diminuiu a produção de IgG anti-HGG e a migração celular para o tecido subcutâneo após injeção sc com Biogel nos AIRmin, como também causou hipocelularidade, principalmente de neutrófilos maduros. Contudo, houve um aumento de blastos e neutrófilos imaturos. A análise do ciclo celular em células Lin- revelou bloqueio da fase S nos AIRmin tratados com DMBA. A cinética de dano no DNA mostrou que o reparo no DNA é mais rápido em AIRmax. Os níveis de expressão do gene parp-1 triplicou em AIRmax, enquanto que nos AIRmin aumentou p53 e caspase-3. Os AIRmin tratados com DMBA apresentam perda da capacidade proliferativa e de diferenciação quando estimuladas in vitro com fatores hematopoéticos. O DMBA causou mielotoxicidade nos AIRmin, podendo afetar o desenvolvimento da resposta imune, enquanto AIRmax foram resistentes a esses efeitos. / We investigated in mice genetically selected for high (AIRmax) or low (AIRmin) acute inflammatory response the toxic effects of DMBA treatment on the BM and its impact on the immune response. DMBA treatment diminished specific IgG anti-HGG production and the cellular migration to the inflammatory site after sc injection of biogel in AIRmin, and hypocellularity in BM, mostly in the neutrophil. However we observed an increase of immature cells. Cell cycle analysis of Lin cells showed a decrease of cells in S stage from DMBA-treated AIRmin mice. The kinetics of cell repair demonstrated the early removal of DNA lesion from DMBA-treated AIRmax mice. The parp-1 gene showed 3 fold increased mRNA expression in AIRmax cells, however in AIRmin mice there was an increase in p53 and caspase-3 mRNA mRNA expression. Myeloid cells from DMBA treated AIRmin mice showed low differentiation and proliferation capacities after in vitro hematopoietic factors. DMBA treatment produced myelotoxicity in AIRmin mice, affecting immune response development, but AIRmax mice were resistant.

A ativação excessiva dos receptores NMDA tem sido descrita no disparo da morte neuronal que ocorre em doenças, como o glaucoma. É possível que a combinação de subunidades (NR2A-D) possa ativar vias de sinalização intracelulares que resultam na morte ou sobrevivência. Nosso objetivo foi investigar o envolvimento de subunidades NR2 e Rac1, membro da família Rho GTPase, na morte de neurônios da retina. A morte induzida por glutamato in vitro foi reduzida após a inibição de Rac1 e bloqueio de NR2B, mas não das subunidades NR2C/D. Resultados semelhantes foram obtidos in vivo após injeção intravítrea NMDA, e a detecção de Rac1 ativo, principalmente, nos processos de glia de Müller foi inibida pelo bloqueio NR2B. Além disso, a produção de TNF-<font face=\"Symbol\">&#945; após a injeção de NMDA foi reduzida pelo bloqueio de NR2B e Rac1. Assim, nossos resultados sugerem que a excitotoxicidade via receptores NR2B/NMDA ativa Rac1 em células da glia de Müller, que por sua vez controla a produção de TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 possível responsável pela morte de células ganglionares da retina. / Overactivation of NMDA receptors has been described to trigger neuronal death that occurs in diseases such as glaucoma. It is possible that the combination of subunits (NR2A-D) activate intracellular signaling pathways that result in death or survival. Our aim was to investigate the involvement of NR2 subunits and Rac1, a member of Rho GTPase family, in retinal neuronal death. Glutamate-induced neuronal death in vitro was reduced after Rac1 inhibition and by NR2B blocking, but not NR2C/D subunits. Similar results were obtained in vivo after NMDA intravitreous injection, although active Rac1 was mainly detected in Müller glia processes, and it was inhibited by NR2B blockade. In addition, TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 level after NMDA injection were reduced by NR2B blocking and Rac1. Thus, our results suggest that excitotoxicity via NR2B/NMDA receptors activate Rac1 in Müller glia cells, which in turn controls the TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 production that triggers retinal ganglion cell death.

Crotamina é um peptídeo de baixo peso molecular composto de 42 resíduos de aminoácidos. A presença de nove resíduos de lisina e três pontes dissulfeto confere a crotamina compactibilidade elevada, estabilidade, carga positiva líquida, apresentando similaridade estrutural com defensina, um peptídeo antimicrobiano do epitélio humano. Crotamina até 10,0 mM é inócua para células normais (e.g., fibroblastos humanos e células-tronco embrionárias de murinos), mas letal para células tumorigênicas CHO-K1. Aqui, nós demonstramos que 1 mg crotamina (0,2 mM) foi citotóxica para céluas B16-F10, Mia Paca-2 e SK-Mel-28 células in vitro, como se provou pelos ensaios de MTT, coloração com Hoechst 33342 e Iodeto de Propídio. Adicionalmente, nós avaliamos o efeito citotóxico da crotamina sobre a invasão do melanoma cutâneo primário produzido pela implantação de células B16-F10 em camundongos C57BL/6J. O efeito da crotamina em melanoma cutâneo foi estudado em dois grupos de camundongos (tratados com crotamina e não tratados), sendo cada grupo composto por 35 camundongos. Cada animal do grupo, tratado com crotamina, recebeu diariamente 1,0 mg/100 mL de crotamina (2 mM) , enquanto aqueles não tratados receberam apenas placebo. O tratamento com crotamina durou 21 dias. O atraso da implantação do tumor e redução da mortalidade foi observado para o grupo tratado com crotamina quando comparados ao grupo controle não-tratados. O peso médio d o tumor no grupo não tratado foi 4,60 g, enquanto nos tratados com crotamina foi de apenas de 0,27 g, quando detectados. O cálculo de sobrevida estimado de Kaplan Meier indicou que o grupo tratado com crotamina apresentou diferenças significativas, número de sobreviventes (n = 28/35), em comparação ao grupo não tratado (n = 7/35). Os dados de nossa pesquisa demonstram que a crotamina possui in vitro e in vivo uma atividade citotóxica específica e seletiva contra tipos de tumores de crescimento rápido e agressivo. / Crotamine is a low molecular weight peptide composed of 42 amino acid residues. The presence of nine lysine residues and three disulfide bonds confers to crotamine high compactness, stability, net positive charge, and overall structural similarity to b-defensin 2, an antimicrobial peptide from the human epithelia. Crotamine, up to 10.0 mM, is innocuous to normal cells (e.g., human fibroblasts and murine embryonic stem cells), but lethal for tumorigenic CHO-K1 cells. Herein, we demonstrated that 1 mg of crotamine (0,2 mM) was cytotoxic for B16-F10, Mic PaCa-2 and SK-Mel-28 cells in vitro, as proved by MTT assay, Hoechst 33342 and Propidium iodide staining. Additionally, we evaluate the cytotoxic effect of crotamine on primary invasion of cutaneous melanoma produced by injection of B16-F10 cells into C57Bl/6J mice. The effect of crotamine on cutaneous melanoma was studied on two groups of mice (crotamine-treated and non-treated), each composed by 35 mice. Each animal in crotamine-treated group received daily 1 mg/100 mL of crotamine (2 mM), while those non-treated received placebo. Crotamine treatment lasted for 21 days. The delay of tumor implantation and reduction of death was observed for crotamine-treated group when compared to control non-treated group. Average weight of tumor in non-treated group was 4.60 g, while in crotamine-treated, was only about 0.27 g, if detectable. The Kaplan Meier estimator indicated that crotamine-treated group present significant survival number (n=28/35) in comparison with non-treated group (n=7/35). Data from our research demonstrate that crotamine possesses in vitro and in vivo specific and selective cytotoxic activity against aggressive and fast growing types of tumor.

Crotamina é um peptídeo de baixo peso molecular composto de 42 resíduos de aminoácidos. A presença de nove resíduos de lisina e três pontes dissulfeto confere a crotamina compactibilidade elevada, estabilidade, carga positiva líquida, apresentando similaridade estrutural com defensina, um peptídeo antimicrobiano do epitélio humano. Crotamina até 10,0 mM é inócua para células normais (e.g., fibroblastos humanos e células-tronco embrionárias de murinos), mas letal para células tumorigênicas CHO-K1. Aqui, nós demonstramos que 1 mg crotamina (0,2 mM) foi citotóxica para céluas B16-F10, Mia Paca-2 e SK-Mel-28 células in vitro, como se provou pelos ensaios de MTT, coloração com Hoechst 33342 e Iodeto de Propídio. Adicionalmente, nós avaliamos o efeito citotóxico da crotamina sobre a invasão do melanoma cutâneo primário produzido pela implantação de células B16-F10 em camundongos C57BL/6J. O efeito da crotamina em melanoma cutâneo foi estudado em dois grupos de camundongos (tratados com crotamina e não tratados), sendo cada grupo composto por 35 camundongos. Cada animal do grupo, tratado com crotamina, recebeu diariamente 1,0 mg/100 mL de crotamina (2 mM) , enquanto aqueles não tratados receberam apenas placebo. O tratamento com crotamina durou 21 dias. O atraso da implantação do tumor e redução da mortalidade foi observado para o grupo tratado com crotamina quando comparados ao grupo controle não-tratados. O peso médio d o tumor no grupo não tratado foi 4,60 g, enquanto nos tratados com crotamina foi de apenas de 0,27 g, quando detectados. O cálculo de sobrevida estimado de Kaplan Meier indicou que o grupo tratado com crotamina apresentou diferenças significativas, número de sobreviventes (n = 28/35), em comparação ao grupo não tratado (n = 7/35). Os dados de nossa pesquisa demonstram que a crotamina possui in vitro e in vivo uma atividade citotóxica específica e seletiva contra tipos de tumores de crescimento rápido e agressivo. / Crotamine is a low molecular weight peptide composed of 42 amino acid residues. The presence of nine lysine residues and three disulfide bonds confers to crotamine high compactness, stability, net positive charge, and overall structural similarity to b-defensin 2, an antimicrobial peptide from the human epithelia. Crotamine, up to 10.0 mM, is innocuous to normal cells (e.g., human fibroblasts and murine embryonic stem cells), but lethal for tumorigenic CHO-K1 cells. Herein, we demonstrated that 1 mg of crotamine (0,2 mM) was cytotoxic for B16-F10, Mic PaCa-2 and SK-Mel-28 cells in vitro, as proved by MTT assay, Hoechst 33342 and Propidium iodide staining. Additionally, we evaluate the cytotoxic effect of crotamine on primary invasion of cutaneous melanoma produced by injection of B16-F10 cells into C57Bl/6J mice. The effect of crotamine on cutaneous melanoma was studied on two groups of mice (crotamine-treated and non-treated), each composed by 35 mice. Each animal in crotamine-treated group received daily 1 mg/100 mL of crotamine (2 mM), while those non-treated received placebo. Crotamine treatment lasted for 21 days. The delay of tumor implantation and reduction of death was observed for crotamine-treated group when compared to control non-treated group. Average weight of tumor in non-treated group was 4.60 g, while in crotamine-treated, was only about 0.27 g, if detectable. The Kaplan Meier estimator indicated that crotamine-treated group present significant survival number (n=28/35) in comparison with non-treated group (n=7/35). Data from our research demonstrate that crotamine possesses in vitro and in vivo specific and selective cytotoxic activity against aggressive and fast growing types of tumor.