Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-09-14T20:23:33Z No. of bitstreams: 1 2012_LucianaLandimCarneiroEstevanato.pdf: 3781878 bytes, checksum: 2a85d2f18eeb46885b9b7eba257b273e (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2012-09-19T11:13:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_LucianaLandimCarneiroEstevanato.pdf: 3781878 bytes, checksum: 2a85d2f18eeb46885b9b7eba257b273e (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-19T11:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_LucianaLandimCarneiroEstevanato.pdf: 3781878 bytes, checksum: 2a85d2f18eeb46885b9b7eba257b273e (MD5) / Este trabalho visou investigar um novo sistema nanoestruturado para tratamento do câncer de mama, baseado em nanocápsulas de ácido poli(láctico-co-glicólico) (PLGA), que são biocompatíveis, e co-encapsularam nanopartículas magnéticas (NPM) e Selol. NPM possuem inúmeros papéis no tratamento do câncer, inclusive destruição seletiva de células tumorais por magnetohipertermia; enquanto que o Selol, uma mistura hidrofóbica contendo selênio, aumenta a eficácia terapêutica de quimioterápicos. A amostra de nanocápsulas magnéticas de Selol (NCMagh-SE) foi caracterizada, e a sua toxicidade e efeito antitumoral foram avaliados por meio de estudos in vitro e in vivo. Na caracterização por microscopia eletrônica, zetasizer e espalhamento de luz dinâmica, as nanocápsulas de NCMagh-SE apresentaram-se monodispersas e com carga de superfície positiva. A toxicidade in vitro de (NCMagh-SE) foi avaliada em células de adenocarcinoma mamário murino (4T1) e humano (MCF-7) e em células normais de mama (MCF-10A). A citotoxicidade, avaliada pelo método do MTT, foi dependente da dose, do tempo e da linhagem celular. Em doses de 25 μg/mL de Selol + 1,25x109 partículas/mL e 50 μg/mL de Selol + 2,5x109 partículas/mL, NCMagh-SE reduziu em 38%, em média, a viabilidade das células tumorais, porém sem efeito nas células normais. Análises por microscopia de luz, revelaram maior captação de NCMagh-SE pelas células tumorais. NCMagh-SE induziu morte celular por apoptose e fragmentaçao do DNA, conforme análises por citometria de fluxo. Interessantemente, após 4 horas de tratamento com NCMagh-SE, não foi observada citotoxicidade em células 4T1. Entretanto, a exposição ao campo magnético alternado (CMA), após tratamento com NCMagh-SE, reduziu a viabilidade celular significativamente. Ainda, em células MCF-7, NCMagh-SE reduziu a viabilidade celular independentemente da exposição ao CMA, porém a toxicidade aumentou significativamente após exposição ao CMA. Sob ação do CMA e com 100 μg/mL de Selol + 5x109 partículas/mL, a viabilidade celular foi significativamente diminuída para 48,22%, enquanto que sem o CMA era de 62,20%. Os estudos in vivo em camundongos BALB/C, portadores de tumor ortotópico autólogo mamário induzido por células 4T1, não mostraram toxicidade relevante após o tratamento com NCMagh-SE, por meio de análises hematológicas, bioquímicas, genotóxicas e histológicas dos órgãos. Entretanto, foi verificado aumento da necrose tumoral nos camundongos induzida pelo tratamento com NCMagh-SE. Quando o tratamento era associado à administração do quimioterápico Paclitaxel, a necrose tumoral era ainda mais evidente. A exposição ao CMA, posterior ao tratamento combinado de NCMagh-SE e Paclitaxel via intratumoral, aumentou ainda mais o efeito antitumoral do tratamento, diminuindo em aproximadamente 70% o volume do tumor em comparação aos camundongos do grupo controle tratado com solução salina. Neste contexto, nossos resultados mostram o potencial de NCMagh-SE para tratamento do câncer de mama, incluindo a sua capacidade de potencializar o efeito quimioterápico do Paclitaxel, além de induzir magnetohipertermia. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was to investigate a new nanostructured system for treatment of breast cancer, based on nanocapsules of poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA), which are biocompatibles, and entrapped both magnetic nanoparticles (MNP) and Selol. MNP have many roles in cancer treatment, including the selective destruction of tumor cells by magnetohyperthermia; while Selol, a hydrophobic mixture containing selenium increases the efficacy of chemotherapeutic agents. The sample of magnetic nanocapsules of Selol (NCMagh-SE) was characterized, and their toxicity and antitumor effect were evaluated by in vitro and in vivo assays. The characterization by electron microscopy, zetasizer, and dynamic light scattering, showed NCMagh-SE with monodisperse feature and positive charge. In vitro toxicity of (NCMagh-SE) was evaluated in murine (4T1) and human (MCF-7) breast adenocarcinoma cells, plus in normal breast cell line (MCF-10A). Cytotoxicity, measured by MTT assay, was dose, time and cell line dependent. At doses of 25 μg/mL of Selol + 1.25x109 particles/mL and 50 μg/mL of Selol + 2.5x109 particles/ mL, NCMagh-SE reduced the neoplastic cells viability by 38%, with no effect on normal cells. Analysis by light microscopy, showed higher uptake of NCMagh-SE by tumor cells. NCMagh-SE induced cell death by apoptosis and DNA fragmentation in analyzes performed by flow cytometry. Interestingly, NCMagh-SE was not cytotoxic to 4T1 cells after 4 hours of treatment with NCMagh-SE. However, exposure to the alternating magnetic field (AMF), subsequently to treatment with NCMagh-SE, decreased significantly the cell viability. Also, NCMagh-SE reduced the MCF-7 cells viability regardless of exposure to AMF, but the citotoxicity increased significantly after exposure to the AMF. Under the action of AMF and NCMagh-SE (100 μg/mL of Selol + 5x109 particles/mL), the cell viability was significantly reduced to 48.22%, whereas without AMF was 62.20%. In vivo studies in BALB/c mice, bearing orthotopic breast adenocarcinoma induced by 4T1 cells, showed no significant toxicity after treatment with NCMagh-SE in hematological, biochemical, histological and genotoxic analysis. Nonetheless, NCMagh-SE increased the tumor necrosis in mice. When this treatment was associated with intravenous administration of Paclitaxel, tumor necrosis was more evident. Exposure to AMF, after the combined intratumoral treatment of NCMagh-SE and Paclitaxel, increased the antitumor effect of the treatment, decreasing approximately 70% of the tumor volume in relation to control group treated with saline. Thus, the results show the potential of NCMagh-SE for breast cancer treatment, including their ability to enhance the chemotherapeutic effect of Paclitaxel and to induce magnetohyperthermia.

Tese (doutorado)—Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, 1997. / Submitted by Leandro Silva Borges (leandroborges@bce.unb.br) on 2013-05-10T20:46:33Z No. of bitstreams: 1 1997_PatriciaMedeirosSouza.pdf: 1534767 bytes, checksum: 365a8ec90fb84017f722bf205b63b6d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-10T20:46:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1997_PatriciaMedeirosSouza.pdf: 1534767 bytes, checksum: 365a8ec90fb84017f722bf205b63b6d5 (MD5) / Este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos do metronidazol sobre a função hepática, um medicamento comumente empregado no tratamento da tticommúase vaginal e outras parasitoses, alem de infecções anaeróbias bacterianas. Para tal, empregaram-se 72 ratos albinos Wistar, machos, tratados com metronidazol 7,5 mg/kg, 15 mglkg e 30 mg/kg ou com solução de NaCl 0,9% (controle), em duas aplicações diárias, por 4 dias, via ip. Após 48, 72 e 96 horas do inicio dos tratamentos, collieram-se amostras de sangue para a dosagem da atividade sérica das enzimas ALT(alanina aminotransferase) e AST(aspartato anúnotransferase). Os resultados apontaram que, comparado ao controle, o metronidazol (15 mg/kg e 30 mg/kg) provoca um aumento significante (p<0,05) na atividade enzimática da AL T, sendo este efeito já observado após 48 horas de tratamento. Já o aumento da atividade sérica da AST somente ocorreu nos animais tratados com o metronidazol 30 mg/kg, após 96 horas de tratamento, sendo este efeito reversivel após a retirada da droga. Concluiu-se que o metronidazol, quando empregado em doses maiores e mesmo por tempo restrito, em ratos, aumenta a atividade sérica das enzimas ALT e AST, efeito este reversivel após a retirada da droga. _____________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this work was to study the effects of metronidazole, a compound employed in trichomoniases and anaerobic infections treatment, upon hepatíc function. For this purpose, 72 male rats Wistar (220 ± 20 g) were treated with metronidazole 7.5 mgfkg, 15 mg/kg and 30 mgfkg or saline (control), BID, for 4 days, intraperitoneal route. 48, 72 e 96 hours after the beginning o f the treatment, blood samples were collected to measure the ALT and AST senun activities. The results showed that metronidazole !5 mgfkg and 30 mgfkg promote a significant increase (p<0,05) of AL T values, observed 48 h after treatment The increase of AST activity only happened 96 h after treatment with metronidazole 30 mgfkg. The reference values of the both enzyme activities became returned to the basal leveis after the drug withdrawal. We conclude that the metronidazole does not promote pennanent alterations in hepatic function, when employed in short time periods, even in high dosage, in rats.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-09-23T16:10:57Z No. of bitstreams: 1 2013_JoiceVinhalCostaOrcine.pdf: 3662475 bytes, checksum: 957d8fa01a8694e1accece65acec7a26 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-09-27T13:07:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_JoiceVinhalCostaOrcine.pdf: 3662475 bytes, checksum: 957d8fa01a8694e1accece65acec7a26 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-27T13:07:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_JoiceVinhalCostaOrcine.pdf: 3662475 bytes, checksum: 957d8fa01a8694e1accece65acec7a26 (MD5) / Cogumelos da espécie Agaricus sylvaticus têm sido amplamente utilizados como suplemento dietético, apesar de que ainda não foram completamente estudados, o que gera a necessidade de pesquisas acerca da segurança quanto ao seu uso. O objetivo deste estudo foi determinar a composição química, atividade antioxidante, citotoxicidade, genotoxicidade e antigenotoxicidade do cogumelo Agaricus sylvaticus. Foram avaliados umidade, proteínas, lipídeos, carboidratos, minerais, vitamina C e vitaminas lipossolúveis. Foi determinada a atividade antioxidante dos extratos aquoso, etanólico e etéreo do cogumelo Agaricus sylvaticus, utilizando-se o teste do “2,2-difenilpicril-hidrazila”. A citotoxicidade do cogumelo em estudo foi avaliada por meio do teste de hemólise em eritrícitos humanos, e teste do azul de tetrazólio utilizando-se linhagens de células tumorais e não-tumorais. A genotoxicidade e antigenotoxicidade dos extratos aquosos do cogumelo Agaricus sylvaticus foram avaliadas através do teste SMART, em asa de Drosophila melanogaster, e pelo teste do micronúcleo, utilizando-se camundongos Mus musculus (Swiss Webster). O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa em Animais, da Universidade Federal de Goiás. Observou-se que o cogumelo Agaricus sylvaticus apresenta rica composição química, além de interessante atividade antioxidante. Os resultados acerca de sua toxicidade mostram que o cogumelo Agaricus sylvaticus não apresenta-se tóxico em eritrócitos humanos, células não tumorais (NIH3-T3) e células tumorais (OSCC-3). Através dos resultados do teste SMART foi possível observar que o cogumelo Agaricus sylvaticus não apresenta efeito genotóxico, e apresenta fraco efeito protetor contra danos provocados pela mitomicina, nas concentrações avaliadas. Quando avaliados os efeitos genotóxicos e antigenotóxicos do cogumelo Agaricus sylvaticus por meio do teste do micronúcleo, foi possível observar que o cogumelo A. sylvaticus apresentou atividade genotóxica e antigenotóxica em todas as concentrações testadas, nos tempos de 24 e 48 horas, indicando o efeito Janus do composto. Dessa forma, estudos clínicos randomizados são necessários para elucidar as consequências no uso terapêutico e/ou efeitos benéficos dos achados. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Agaricus sylvaticus mushroom have been widely used as nutritional complement, inspide does not exist so many studies about them, what causes the necessity of more studies about its safe use. The purpose of the present study was to determine the chemical composition, antioxidants activity, citotoxicity, genotoxicity and antigenotoxic of the A. sylvaticus mushroom. It was evaluate the moisture, proteins, ash, lipids, total dietary fiber, carbohydrates, fat-soluble vitamins and vitamin C. It was also observed the antioxidant potential of the aqueous, alcoholic and ethereal A. sylvaticus mushroom extracts, by the 2,2- difenilpicril-hidrazila assay. The citotoxicity of the aqueous extract of A. sylvaticus mushroom was estimate on human erythrocytes, and tetrazolium assay, in cultures of non-tumor cells and tumor cells. The genotoxic and antigenotoxic action of A. sylvaticus extract was evaluated by the somatic mutation and recombination test (SMART) in Drosophila melanogaster and by the frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes in Mus musculus (Swiss Webster). The study was approved by the Animal Ethics Committee of the Federal University of Goiás. Through this study it was able to observe the rich chemical composition of A. sylvaticus and its great antioxidant potential. The toxicity results suggest that A. sylvaticus mushroom has no toxicity on human erythrocytes, non-tumor cells (NIH3-T3) and tumor cells (OSCC-3). By SMART test, we observed that A. sylvaticus mushroom was not genotoxic, and the co-treatments with mitomicin demonstrated that the mushroom extract have some anti-mutagenic activity in all concentrations evaluated. The results obtained from the evaluation of mutagenicity and antimutagenicity of this mushroom, using the micronucleus assay, showed that A. sylvaticus mushrrom has both mutagenic and antimutagenic effect in all doses, at 24 and 48 hours, suggesting the Janus effect of the extract. Thus, clinic randomized studies comes important to prove the consequences of the terapeutic and/or the positive effects found.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-10T11:30:14Z No. of bitstreams: 1 2013_LucianaSoaresGueirosdaMotta.pdf: 2659892 bytes, checksum: 8bcbcf9f2c3af1859bc45fd1ebd6ee8c (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-03-10T12:09:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LucianaSoaresGueirosdaMotta.pdf: 2659892 bytes, checksum: 8bcbcf9f2c3af1859bc45fd1ebd6ee8c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-10T12:09:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LucianaSoaresGueirosdaMotta.pdf: 2659892 bytes, checksum: 8bcbcf9f2c3af1859bc45fd1ebd6ee8c (MD5) / A ayahuasca é uma infusão vegetal psicoativa da Amazônia preparada a partir do cipó de Banisteriopsis caapi, que contém alcalóides ß-carbolinas inibidores de monoamina oxidase, enzima que degrada o neurotransmissor serotonina. Além disso, essa infusão contém folhas de Psycotria viridis, constituída por N, N-dimetiltriptamina (DMT), agonista de receptores de serononina. No Brasil, o chá é utilizado em contexto ritualístico principalmente pelas religiões União do Vegetal, Barquinha e Santo Daime. No presente estudo, ratas Wistar foram expostas via gavagem a doses relacionadas com a dose usual ingerida no ritual da UDV, 150 mL para uma pessoa de 70 kg (1X). O estudo de toxicidade aguda seguiu o protocolo OECD 423/2001, indicou uma DL50 maior que 50X. Uma hora após a administração única das doses 30X e 50X, os animais foram avaliados quanto à função comportamental nos testes de campo aberto, labirinto em cruz elevado e natação forçada, indicando diminuição da locomoção e potencial efeito antidepressivo. Animais tratados com 30X mostraram alta atividade neural, indicada pela marcação de c-fos, nas regiões do núcleo da rafe, núcleo amidaloide e formação hipocampal. A toxicidade reprodutiva do chá de ayahuasca foi avaliada de acordo com o protocolo OECD 414/2001. Ratas prenhes receberam o chá diariamente do 6˚ ao 20˚ dia gestacional nas doses 1, 2, 4 e 8X e a cesária foi realizada no 21˚ dia. Pelo menos um animal tratado, em todas as doses, apresentou piloereção, tremores e letargia. Onze animais no grupo 4X e 13 animais no grupo 8X foram a óbito durante o experimento. O peso do útero gravídico de ratas do grupo 8X foi significativamente menor que o controle. Ratas tratadas tiveram um maior número de reabsorções totais e precoce e menor número de fetos que ratas controle. Foram observadas alterações no fígado, posicionamento de testículo e ovários, forma irregular do ureter, ventrículos laterais cerebrais dilatados e 3˚ ventrículo cerebral dilatado nos fetos de animais tratados. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Ayahuasca is a psychoactive beverage prepared with the vine of Banisteriopsis caapi, which contains ß-carbolines, an inhibitor of monoamine oxidase, enzyme that degrades the neurotransmitter serotonin, and the leaves of Psychotria viridis, which contains N,N-dimethyltryptamine (DMT), an agonist of serotonin receptors. The beverage is used in Brazil in the religious rituals of União do Vegetal (UDV) other religious groups. In the present study, wistar female rats were orally exposed to doses related to the usual dose taken during the UDV ritual, 150 mL by a 70 kg person (1X). The acute toxicity study, conducted according to the OECD 423/2001 protocol, showed a LD50 higher than 50X. Behavioural functions were investigated one hour after dosing once at 30 and 50X using the open field, elevated plus maze and forced swimming tests. Treated animals showed a significant decrease in locomotion in the open field and elevated plus maze and increase mobility in the forced swimming test which suggested that ayahuasca has an antidepressant effect. Treated animals at 30X showed higher neuronal activity, indicated by c-fos marked neurons, in dorsal raphe nuclei, amygdaloid nucleus and hippocampal formation brain regions. Fluoro-Jade B neuron staining indicated brain injury in the treated animals. Reproductive toxicity was evaluated according to the OECD 414/2001 protocol. Pregnant rats were exposed daily from the 6th to the 20th gestational day at the doses of 1, 2, 4 and 8X, and the cesarean performed at the 21st day. At least one animal from each treated group showed piloerection, tremor and lethargy. Eleven animals from the 4X and 13 animals from the 8X group died during the study. Rats from the 8X group had lower uterus weight than controls, and treated rats had a higher number of total and early absorptions and lower number of fetus than controls. Morphological alterations observed in fetus from treated groups were found in liver, ureter and brain, in addition to wrong positioning of testis and ovaries.

Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T03:39:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CaballeroCordoba_GlenysMabel_D.pdf: 7981896 bytes, checksum: 693ad083bcb92275a981ffbc5d81f448 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Buscando novas alternativas para a utilização de resíduos industriais, foi pesquisado o aproveitamento da levedura de cerveja (Saccharomyces carlsbergensis) como fonte protéica. Suspensões de levedura desamargada com 40% de células (v/v), foram rompidas por método mecânico, utilizando-se moinho Dyno-mill com 70% da câmara preenchida com esferas de vidro (0,2 a 0,6 mm de diâmetro), na velocidade de 2400rpm, fluxo de alimentação de 4,8 L/h e temperatura de 15°C. O extrato protéico proveniente das células rompidas foi adicionado de perclorato de sódio (NaClO4) até atingir a concentração 0,5M para redução química do conteúdo de ácido ribonucléíco (RNA), logo após acrescido de ácido clorídrico (HCl) para precipitação isoelétrica da proteína, obtendo-se o concentrado protéico de levedura com 78% de proteína e 2,26% de RNA. O tratamento com perclorato ocasionou diminuição do conteúdo de lisina disponível e do escore químico (EQ=92%), quando comparado com as células de levedura rompidas (EQ=100%). O concentrado protéico de levedura obtido com perclorato de sódio (CPP) apresentou melhores índices de digestibilidade aparente, valor biológico e utilização líquida aparente, quando comparado com as células de levedura íntegras e rompidas. Os ensaios de toxicidade subcrônica revelaram que os ratos alimentados com dietas contendo concentrado proteico de levedura mostraram consumo protéico e ganho de peso, significativamente inferior (p < 0,05) aos grupos que receberam células de levedura rompida (CLR) e caseína (CAS). A ingestão de proteínas de leveduras causou alterações nos níveis séricos de aminotransferases e creatinina, os níveis de ácido úrico e uréia permaneceram dentro da faixa dos limites normais de referência. As excreções urinárias de creatinina; uréia e ácido úrico associados aos resultados séricos não revelaram injúrias renais provocadas pelas dietas. Nas análises de órgãos não foram observadas mudanças patológicas no conteúdo lipídico e protéico dos tecidos renais e cerebrais em conseqüência do consumo de proteínas de levedura, porém houve aumento no conteúdo de lipídios hepáticos e diminuição do teor de proteínas totais do fígado em raios alimentados com células de levedura rompidas (CLR) e concentrado protéico de levedura obtido com perclorato de sódio ( CPP ). / Abstract: The objective of this research was the study of brewer's yeast as an alternative source of nutrients in human foods. Suspensions (40% v/v) debittered yeast cells were macanically ruptured in Dynomill with 70% of its chamber filled with glass spheres (0.2 to 0.6 mm in diameter), 2,400rpm, feeding rate of 4.8 L/h and temperature of 15°C. Protein was extracted from the disrupted cells suspension with 0.5 M NaClO4 and precipitated at isoelectric pH (4.2) with HCl solution. The precipitate (protein concentrate) contained, after washing and freeze drying, 78% protein and 2.26% RNA. Available lysine was only 92% compared to the broken cells suspensions and integral cells. The yeast protein concentrate presented higher apparent digestibility, apparent biological value and apparent NPU compared to lyophilized integral or broken cells suspension. The toxicological assays revealed that rats fed the protein concentrate showed reduced protein consumption and body weight gain (p< 0.05) relative to the groups receiving dehydrated broken yeast cells and casein. Yeast protein caused abnormal alterations of blood serum levels of amino transferases and creatinine. The levels of uric acid and urea remained in the reference normal range. Urine excretion of creatinine, urea and uric acid, related to blood serum levels, did not show any organic injury that could be attributed to the diets. Organ analysis did not show pathological changes in the concentration of lipids and protein in the rat kidneys and brains due to yeast protein intake, however an increase in lipids and decrease in protein content was observed in the liver of rats fed yeast broken ceils and the protein concentrate obtained with the sodium perchlorate treatment. / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador: Maria Edwirges Hoffmann / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T06:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soraggi_ClaudiadeLourdes_M.pdf: 3971152 bytes, checksum: 2c9cdc0034b1af2dd8a732337813ec00 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Estudos sobre as relações de estrutura e atividade citotóxica tem sido essenciais para o desenvolvimento de novas drogas farmacológicas. Neste trabalho nós investigamos a citotoxicidade de uma série de novas estruturas relacionadas a compostos sintéticos, denominados y-aminoálcoois: 2-pentanolbenzilamina (PBA) e 2-pentanol-fenilamina PP A), e as tetrahidro-1,3-oxazinas correspondentes 2-pentanol benziloxazina (PBO) e 2-pentanol-feniloxazina (PPO). A relevância biológica dos y-aminoálcoois e seus derivados é devida à sua vasta aplicação farmacológica. Primeiramente, nós analisamos a citotoxicidade de alguns compostos padrões como: Álcool Alflico, Butanol-1 e Heptanol-1 em culturas de células V79 (fibroblastos de hamster chinês), por diferentes técnicas in vitro. O método que apresentou maior sensibilidade para as análises de citotoxicidade dos álcoois estudados, foi o ensaio da proliferação celular, o qual utilizamos para as avaliações de toxicidade celular dos y-aminoálcoois PBA, PP A e seus derivados PBO e PPO, respectivamente. As potências relativas de toxicidade foram comparadas, através da determinação dos valores de ID50, (dose requerida para induzir 50% de inibição), obedecendo a seguinte ordem: PPO>PBO>Heptanol1>PBA>PP A>Butanol1>A.Alílico Também analisamos a atividade de cada composto sintetizado em relação à inibição da taxa de síntese de DNA. A síntese de DNA foi determinada pela medida da incorporação de [3H]-timidina nas culturas expostas. Os resultados nos mostraram que as oxazinas PBO e PPO, comportaram-se como potentes inibidores sobre a síntese de DNA para células V79, enquanto que os y-aminoálcoois PBA e PPA afetaram fracamente a taxa de síntese, na mesma faixa de concentração (0,5-5,0 mM) e que as oxazinas derivadas dos y-aminoálcoois, P BO e P PO são agentes genotóxicos potentes para fibroblastos V79, indicando que a atividade antireplicativa destes compostos está provavelmente relacionada com a ciclização das moléculas, apontando assim para o possível uso destes derivados de y-aminoálcoois como agentes antineoplásicos / Abstract: Studies on structure-activity relationships are essential for the development of new pharmacological drugs. In this work we have investigated the cytotoxicity of new structurally related synthetic compounds, the y-aminoalcohols 2-pentanol-4 benzylamine (PBA), 2-pentanol-4-phenylamine (PPA) and the corresponding tetrahydro-I,3-oxazines, 2-pentanol-4benzyloxazine (PBO) and 2-pentanol-4-phenyloxazine (PPO). The biological relevance of y-aminoalcohols and derivatives is based on their wide pharmacological application. We have firstly analysed the cytotoxicity of standard compounds to cultured hamster cells (V79 line), the alcohols Butanol-1, Heptanol-land Allyl Alcohol, by measuring of different endpoints. The Growth Inhibition Assay was the most sensitive endpoint to evaluate alcohols cytotoxicity. For this reason it was been used for evaluation of the y-aminoalcohols PBA, PPA and the oxazines PBO,PPO, respectively. The relative potencies were compared by determining the midpoint cytotoxicity, or ID50 value (dose required to induce 50% inhibition) for each compound. According to this, it was obtained the following order: PPO>PBO>Heptanol-l>PBA>PP A>But-l>A. Alcohol We analysed further the activity of each synthetic compound upon DNA synthesis in V79 cells. The DNA synthesis rate was determined by measuring 3H-thymidine uptake in exposed cultures. The results showed that the oxazines PBO and PPO were potent inhibitors of DNA synthesis in V79 cells, while the yaminoalcohols PBA and PP A affected only slightly the rate of synthesis, in the same concentration range (0.5-5.0 mM). These results indicate that the antireplicative activity of these oxazines is probably related to molecular cyclization. Our data point to the possible use of the oxazines PBO and PPO as antineoplasic agents / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T03:07:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Poletto_MariaInezFernandes_M.pdf: 2067785 bytes, checksum: f3d25a2f0bb30e3c816874732eb7aba8 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este trabalho foi realizado com o objetivo de isolar e carac terizar quimicamente uma proteína tóxica das glândulas submandibulares de camundongos machos, e observar histológica e macroscopicamente seu efeito biológico. Foram utilizadas 34 g de glândulas submandibulares de camundongos machos, de 3 meses de idade, para a obtenção do extrato glandular cru. Este extrato foi aplicado a uma coluna de DEAE Celulose equilibrada com tampão Tris HCI 0,05 M pH 7,6. A coluna foi lavada com 800 ml do mesmo tampão. O eluente obtido constitui a Fração I. Após a lavagem a coluna foi eluída seqüencialmente, com tampão Tris - NaCI 0,1 M (Fração, II) e tampão Tris - NaCI 0,3 M (Fração III). As frações protéicas foram concentradas por ultrafiltração e avaliada sua atividade tóxica e enzimática (Hidrólise do éster sintético BAPNA). A fração mais ativa (lI), foi dialisada contra tampão Tris - HCI pH 7,6 e aplicada a uma coluna de DEAE-Sephadex equilibrada com o mesmo tampão. As proteínas da coluna foram eluídas seqüencialmente por diferença de pH com os tampões Fosfato 0,1 M pH 7,0; 6,0 e 5,0. A fração mais ativa foi a obtida com tampão Fosfato 0,1 M pH 7,0 ('F IND. 2' 'P IND. 1'). Esta fração foi aplicada a uma coluna de Sephadex G-100 e as frações protéicas foram eluídas com o Tampão Tris HCI 0,05 M pH 7,0. A fração mais ativa, determinada pelos ensaios de toxicidade foi a 'F IND. 2' 'P IND. 1' -1. Eletroforese em gel de poliacrilamida desta fração apresentou uma banda de proteína e a determinação do peso molecular foi realizada utilizando-se da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% contendo SDS. Os resultados obtidos da cromatografia em DEAE Celulose apresentaram três picos de proteínas, eluídas seqüencialmente por força iônica com soluções de NaCI; a eluição da Fração II da coluna de DEAE Sephadex por diferença de pH apresentou dois picos de proteínas. A fração ativa corresponde ao Pico I, eluído com Tampão Fosfato 0,1 M pH 7,0. Todas as frações apresentaram atividade esterásica, utilizando o BAPNA como substrato. As alterações dos órgãos dos ratos injetados com a fração ativa, mostrou pulmão hemorrágico, pâncreas' com inflamação aguda e degeneração, fígado hemorrágico e estômago engurgitado, repleto de suco gástrico de baixa acidez. A caracterização química e a atividade biológica desta proteína nos leva a concluir que ela é uma esterase com características tóxicas especiais que diferem das outras esterases tóxicas isoladas das glândulas submandibulares de camundongos, o que vem certificar que as glândulas submandibulares de camundongos machos são ricas em proteínas tóxicas e que a maioria delas apresenta atividade esteroproteolítica / Abstract: The purpose of this study was to isolate and to characterize a toxic protein from male mice submaxillary glands. The crude extract was obtained from 34 gr. of male adult mice. The extract was applied to a column of DEAE Cellulose. Initially the column was washed with 800 ml of Tris-HCL buffer. Then the column was sucessively eluted with Tris-NaCl 0.1M (fraction II), Tris-NaCl .3 M (fraction III). All these fractions were concentrated by ultracentifugation and the biological activity was testes by subcutaneous injection into adult female rats (toxic activity) and enzymatic activity was carried out using BAPNA as substrate. The highest toxic fraction, the fraction II, was dialyzed against Tis-HCL and further fractionated wit DEAE Sephadex A-50 and eluted with a Phosphate 0.1 pH gradient (pH range from 5.0 to 7.0). ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Odontologia

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T13:00:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodriguezCarvajal_JaimeAntonio_D.pdf: 7418205 bytes, checksum: 44f4a47d48d171c03138c929be69d78f (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Foi estudada a atividade antiulcerogênica, a toxidade aguda e subcronica e a citoxicidade da trans-desidrocrotomina (DHC) um pequeno diterpno isolado da arvore Cróton cajucara Benth. As propriedades antiulcerogênicas da DHC foram estudadas em quatro modelos de úlcera gástrica induzida em rato. A administração oral de DHC 100mg/Kg mostrou um significativo efeito antiulcerogênico nos modelos de úlcera induzida por estresse hipotérmico, etanol e ligadura do piloro. Não foram observados efeitos significativos sobre as lesões gástricas induzidas pela indometacina nem modificações em alguns parâmetros gástricos como conteúdo de muco, taxa de secreção gástrica, pH e conteúdo de ácido depois do tratamento com DHC.OS efeitos toxicológicos agudos da DHC foram avaliados em camundongos. Os valores das 'LD IND. 50¿ foram 876,0 mg/Kg e 47,2 mg/Kg para as mudanças oral e intraperitoneal respectivamente. No experimento de toxicidade subcrônica ratos machos e fêmeas Wistar foram tratados oralmente durante 35 dias com doses de DHC 25,50, 100 mg/Kg. Ao término do tratamento foi observado aumento significativo, do peso dos fígados, dose ¿ dependente nos ratos de ambos os sexos e redução significativa no nível plasmático da fosfotalase alcana e do colesterol além do aumento da enzima gama glutamil transpeptidase na dose alta (100mg/Kg) em ratos fêmeas / Abstract: The major diterpene isolated from Cróton cajucar Benth trans-Dehydrocrotonin (DCD), was assayed for antiulcerogenic activity, acute and subcronic and toxicity and citotoxicity. The antiulcerogenic properties of DHC were studied on four induced gastric models in rat. The oral dose of 100 mg/Kg DHC showed a dignificance antiulcerogenic effect on hypothermic restrain stress, ethanol and pylorus ligature ulcers. No significance changes were found after DHC treatment on indomethacin-induced gastric lesions r on some gastric parameters such as wall mucus secretion rate, pH and total acid content. Acute toxilogical effects of DHC were assessed in mice. The 'LD IND.50¿ values were 876,0 mg/Kg and 47,2 mg/Kg for oral and intraperictoned administrations, respectively.In the subchoronic toxicity experiment rats were orally a significant dose-dependent increase in liver weighth was observed in both male and femele rats. Whereas in felefe rats a significance reduction in plasma alkaline.phospate and cholesterol levels and a increase sof gamma glutamyl trasnspeptasee and cholesterol levls and an icrease aos ggamma glutamyl transpeptidase was found only at high as doses (100 mg;/Kg ). The subcronic admintration of DHC also induc, noted by turgid tume-faction, microvamuete degeneration and cuclear alternatives . Depise the good ant-ucerogenic ou results suggest that the long term use of DHC my induce damage / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador : Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T17:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_RenataBaldissera_M.pdf: 16871013 bytes, checksum: 3ffd8ef2534e4a4cb6e6dae0d944d6a6 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Uma grande proporção dos pacientes com Doença de Hodgkin e Linfoma não-Hodgkin recidivarão ou não atingirão remissão completa com quünioterapia inicial. O manuseio destes pacientes é usualmente desapontador e a taxa de sobrevida a longo prazo, é inferior a 10%. Resultados de várias séries têm demonstrado que, terapia de alta dose seguida por transplante autólogo de medula óssea ou céluas progenitoras periféricas, pode conseguir melhores taxas de sobrevida livre de doença, a longo prazo, em uma proporção substancial de pacientes. Alta dose de CY, seguida por fatores de crescimento hematopoiéticos, é o regime mais amplamente utilizado para mobilização e coleta de células progenitoras periféricas. O principal objetivo deste estudo prospectivo, foi demonstrar o papel da alta dose de ciclofosfamida em reduzir o crescimento tumoral e promover eficiente mobilização de células CD34+. Além disso, determinar a efetividade da alta dose de CY + VP-16 (+/-MfX na DH), seguida por autotransplante, como terapia de salvamento em pacientes portadores de doença recidivada ou persistente. À partir de 1997 a 2000, 35 pacientes com mediana de idade de 33 anos, portadores de LNH (60%) ou DH (40%) recidivados ou refratários, submeteram-se à tratamento com terapia de escalonamento de dose (CY+ VP-16+/- MfX), seguido por transplante autólogo de células progenitoras periféricas. De acordo com a intenção de tratar, 35 pacientes, foram evoluídos. A mediana global de seguimento foi de 574 dias. 33 pacientes (94.2%) foram submetidos à megaterapia seqüencial e autotransplante com CPP. Estes, receberam uma mediana de 6.42xl08/kg de células CD34+. Os pacientes quimiossensíveis (n=25) e quimionesistentes (n=lO), apresentaram taxas de sobrevida global de 96% e 15%, respectivamente (P=O.0005), à ciclofosfamida. As taxas de SG, ao autotransplante, foram de 92% para os pacientes quimiossensíveis, e 0%, para os pacientes quimiorresistentes (P=O.OO05). Mortalidade relacionada à ciclofosfamida foi de 6.5%. A mortalidade relacionada ao autotransplante foi de 6.00,10. Os resultados são semelhantes e comparam-se favoravelmente à literatura. Alta dose de CY, seguida por megaterapia seqüencial e autotransplante, mostrou ser efetiva e segura, como terapêutica de salvamento em pacientes portadores de LNH a DH, agressivos, com aceitável mortalidade relacionada ao procedimento / Abstract: A substantial proportion of patients with Hodgkjn's Disease (HD) and Non-Hodgkin Lymphoma (NHL) will relapsed or fail to attain a complete remission with initiaI chemotherapy. The management of patients with refractory or relapsing HD or NID is usually disappoing and the long term survival rate is less than 10% .Results of several series demonstrated that High dose therapy followed by ABMT or PBSCT cam yield long term disease-free survival in a substantial proportion of patients, with low transplant-related mortality.High-Dose Cyclophosphamide (HDCY) followed by growth factors is the most widely used chemotherapy for the collection of PBPC. The aim this study, a CIinical Trial non-Randomised Prospective analysis, was to demonstrate the role of High-dose Cyclophospbamide (CY) in reducing tumour burden, promoting efficient mobilisation of CD34+ and also determining the effectiveness of HDCY followed by higb dose of VP-16 and MTX (HD) with PBPC autografting as salvage treatment for these patients. From 1997 to 2000, 35 patients with median age of 33 years (15-65), affected by aggressive NHL (60%) or by IHD (40%)persistent or relapsed disease, were enrolled and treated using high dose escalation (HDCY plus IHDVP-16 plus/minus HDMTX) followed by autologous Peripheral Blood Progenitor Cell Transplantation. According to "Intention to Treat" basis, 35 patients affected by malignant lymphomas were evaluated. The Overall median follow-up was 574 days. 33 patients (94.2%) underwent PBPC autografting and received a median of 6.42 xl08 /Kg (1.0729.3) of CD34+ cells. Chemosensitive patients (n=25) and chemoresistant patients (n=10) at HDCY presented Overall Survival of 96% and 15%, respectively (P=0,0005). Overall Survival was 92% for chemosensitive and 0% for still chemoresistant patients before Transplantation (P=0,0005). Mortality was 6.0% (two patients) related to HDCY and two (6.5%) transplant-related. These results are similar to those reported in the literature. IHDCY + VP-I6 and MTX (HD) followed by autologous PBPC showed to be effective and safe as salvage treatment in chemosensitive patients affected by aggressive NHL and HD, with acceptable mortality related-sequential treatment / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T02:40:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_PatriciadaSilva_D.pdf: 8064368 bytes, checksum: 2703101b81b02efc2135d7099952c15f (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Croton cajucara Benth (sacaca) é uma espécie vegetal encontrada na região amazônica e é populannente utilizada para o tratamento de distúrbios digestivos. Foram investigadas a atividade anti-ulcerogênica e a citotoxicidade de compostos sintetizados a partir da desidrocrotonina, constituinte majoritário obtido das cascas de sacaca. Através de modelos de úlceras agudas, induzi das por agentes como etanol/HCI, indometacina e estresse, em camundongos, foi possível constatar que os derivados U (ciclohexenona reduzida) e IV (amida) reduziram significativamente as lesões ulcerativas na maioria dos modelos estudados. O derivado lU (ciclohexenona e lactona reduzidas) não aprçsentou efeito protetor sobre a mucosa gástrica. A citotoxicidade destes compostos foi avaliada em células V79 e hepatócitos usando três diferentes ensaios de viabilidade: incorporação do vermelho neutro, redução do MTT e conteúdo de ácidos nucleicos. O derivado 11 apresentou um efeito citotóxico basal sobre as células V79 (ICso entre 350 e 540 Jlm). Contudo, em cultura de hepatócitos foi verificado um efeito citotóxico seletivo observado através de uma toxicidade elevada (ICso 8 JlM) avaliada através da redução do MIT. O derivado 111 apresentou menor citotoxicidade quando comparado com a desidrocrotonina, derivado 11 e derivado IV (ICso = 1800 JlM verificado através do conteúdo de ácidos nucleicos). Os resultados obtidos neste estudo indicam que a atividade anti ulcerogênica da desidrocrotonina e dos derivados é dependente da presença de aceptores de Michael e que, a citotoxicidade está diretamente relacionada com a presença do anel da lactona / Abstract: Croton cajucara Benth is a plant species growing in the Amazon region which is popularly used to treat disorders of the digestive tract. It was investigated the antiulcerogenic activity of the bark of the sacaca. Using acute ulcer models induced byagents such as ethanol/HCI, indomethacin and stress in mice, we observed that the compound II (cyc1ohexenone moiety reduced) and compound IV (amide) significantly reduced the u1cerative lesions in the various models studied. The cytotoxicity of these derivatives from DHC was assayed on V79 cell and hepatocyte. Three independent endpoints for cytotoxicity were evaluated: the neutral red uptake (NRU), tetrazolium reduction (MTT) and nuc1eic acid content (NAC). Compound II showed a basal cytotoxic effect in V79 cells (lCso values of 540 and 350 /lM in the NRU and NAC tests, respectively). However, compound II showed in hepatocyte a selective toxicity evaluated by MTT reduction (lCso = 8 /lM). Compound III was less toxic than the others DHC derivatives (lCso = 1800 /lM) in V79 cells based on NAC assay. The results in this study indicate that the antiulcerogenic activity of the dehydrocrotonin and derivatives is dependent of the Michael acceptor presence in these compounds and the toxicity is related with the lactone presence / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular