Submitted by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-06-29T16:40:55Z No. of bitstreams: 1 TESE versão final revisada Milena.pdf: 3169354 bytes, checksum: 555c7286b985337912d7ce6a096ab2f0 (MD5) / Approved for entry into archive by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-06-29T16:41:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE versão final revisada Milena.pdf: 3169354 bytes, checksum: 555c7286b985337912d7ce6a096ab2f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T16:41:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE versão final revisada Milena.pdf: 3169354 bytes, checksum: 555c7286b985337912d7ce6a096ab2f0 (MD5) / Os bastões de luz química são dispositivos usados na pesca comercial para atrair peixes, por meio da técnica conhecida como espinhel de superfície. Nesses dispositivos, a luz é produzida por uma reação de quimiluminescência, que ocorre quando os conteúdos dos compartimentos se misturam,por quebra da ampola de vidro interna. Apesar do uso excessivo e indevido destes dispositivos, os riscos de contaminação ao ambiente costeiro ainda não foram devidamente pesquisados e avaliados. Por exemplo, existem registros de mais de 5.500 bastões terem sido recolhidos em 2004 nos 172 km de praias da Costa dos Coqueiros na Bahia. Este trabalho teve por objetivo identificar, por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas (GC-MS), as principais substâncias presentes na fração solúvel em água do mar (FSA) do conteúdo de bastões de luz comercializados e descartados na costa da Bahia, assim como avaliar os efeitos do tempo,temperatura e exposição à luz solar na estabilidade das suas FSA e os seus possíveis efeitos ambientais adversos por meio de testes de toxicidade de curta duração com embriões da ostra Crassostrea rhizophorae. Bastões novos foram adquiridos em lojas de artigos de pesca de Salvador, BA. Além destes, dispositivos descartados foram coletados em praias da Costa dos Coqueiros, na Bahia. O conteúdo dos bastões foi diluído na proporção 1/9 em água esterilizada com salinidade 28 e mantido durante 20 horas sob agitação, obtendo-se assim a FSA. Dentre os métodos de extração testados e otimizados o de Headspace, acoplado com a análise por GC-MS foi o mais eficiente permitindo a identificação de dezenove substâncias. A identificação dos compostos foi realizada através da comparação de seus espectros de massas aos existentes na biblioteca eletrônica NIST 147. Quanto ao dimetil ftalato (DMP) e dibutil ftalato (DBP), compostos predominantes no conteúdo dos bastões e nas FSA, foram identificados por comparação a padrões. Os valores de concentração efetiva das FSA que causam alterações em 50% dos organismos (CE50) foram obtidos pelo método Trimmed Spearman-Karber. No conteúdo da ampola interna, além do DBP predominante na composição, foram identificados outros ésteres de ácido ftálico, registrando-se também o ácido 3,5,6-triclorosalicílico, 1[3H]Isobenzofuranona e 2,4,6-triclorofenol. Na solução que circunda a ampola, além do DMP, foi possível identificar o 2-etil nitrofenilacetato. As FSA testadas demonstraram alta toxicidade. Para os bastões novos, a CE50 média foi de 0,35±0,06% e mesmo para FSA preparadas a partir de bastões após um ano de sua ativação, a toxicidade se manteve alta, com CE50 igual a 0,65%. As FSA, tanto do conteúdo que circunda a ampola, como o de dentro da ampola, demonstraram persistência na toxicidade após seis meses, apresentando CE50 = 0,54% e CE50 = 1,45%, respectivamente. Apesar dos testes isolados com o DBP e o DMP, compostos predominantes no conteúdo dos bastões, terem também demonstrado efeito tóxico, as demais substâncias presentes nos bastões potencializaram a sua toxicidade e persistência no ambiente. Estudos adicionais demonstraram que alterações de temperatura e exposição ao sol num período de seis meses não causaram mudanças significativas na toxicidade das FSA. Os resultados deste trabalho apontam para a importância de se estudar com maior detalhe a composição dos bastões de luz e os seus efeitos tóxicos sobre organismos, já que demonstraram efeitos tóxicos nos testes realizados no laboratório, tendo as substâncias contidas nos bastões apresentado elevada persistência no ambiente.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-24T02:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 247984.pdf: 1084532 bytes, checksum: 35bfd4a83f40163d95d430c351ff93b0 (MD5)

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-09-17T11:30:11Z No. of bitstreams: 1 2008_DianaBritoJustaNeves.pdf: 555466 bytes, checksum: b4c9442d91d15c44e0d370cd00fe317c (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-09-21T12:51:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_DianaBritoJustaNeves.pdf: 555466 bytes, checksum: b4c9442d91d15c44e0d370cd00fe317c (MD5) / Made available in DSpace on 2009-09-21T12:51:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_DianaBritoJustaNeves.pdf: 555466 bytes, checksum: b4c9442d91d15c44e0d370cd00fe317c (MD5) Previous issue date: 2008-10-21 / A Leishmaniose é uma das doenças parasitárias mais importantes no mundo, sendo prevalente em 88 países. Mais de 180 mil casos de Leishmaniose Cutânea (LC) ou Mucosa foram notificados no Brasil entre 2001 e 2006. O tratamento de primeira escolha para a LC utiliza antimoniais pentavalentes, medicação introduzida há várias décadas e que apresenta uma série de efeitos colaterais, alguns podendo levar ao óbito. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as concentrações de antimônio no plasma e pele de pacientes sob tratamento com antimônio pentavalente (Glucantime®) e sua relação com os efeitos colaterais apresentados. Foram avaliados 19 pacientes com LC sob tratamento intravenoso na dose convencional (20 mg Sbv/kg/dia), 2 na dose baixa (5 mg Sbv/kg/dia) e 3 com aplicação intralesional (até 4,0 mL/semana). Durante o tratamento, os pacientes foram submetidos a exames de sangue periódicos e entrevistados semanalmente quanto à incidência de efeitos colaterais. As concentrações de antimônio em amostras de plasma e pele foram determinadas por Plasma Indutivamente Acoplado com Espectrometria de Massas (ICP-MS), com LOD = 0,020 µg/L e LOQ = 0,068 µg/L no plasma, e LOD = 0,008 µg/L e LOQ = 0,028 µg/L na pele. Para os pacientes do tratamento convencional a concentração média inicial de antimônio no plasma foi de 3,39 µg/L; no final do tratamento foram de 0,21 e 125,8 mg/L, quando coletadas antes e após a aplicação do medicamento, respectivamente. Na pele, a concentração média no final do tratamento foi de 9,24 µg/g. Para esse grupo de pacientes, os principais efeitos colaterais apresentados foram artralgia e mialgia, e as principais alterações laboratoriais, linfocitose e aumento de amilase. Foram encontradas diversas correlações significativas entre as concentrações de antimônio, os efeitos sintomáticos e as alterações laboratoriais. Este achado confirma a hipótese de que existe uma relação dose-dependente entre a concentração de antimônio no plasma e na pele e os efeitos colaterais apresentados. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis is one of the most important parasitic diseases in the world, being prevalent in 88 countries. Over 180 thousand cases of Mucosal or Cutaneous Leishmaniasis (CL) were notified in Brazil between 2001 and 2006. The first choice treatment for CL uses pentavalent antimonials, medication introduced decades ago that presents a series of side effects, some of them life-threatening. The present work aimed at evaluating the levels of antimony in plasma and skin of patients being treated with pentavalent antimonial (Glucantime®) and its relationship with reported side effects. Were evaluated 19 patients treated endovenously at the conventional dose (20 mg Sbv/kg/day), 2 with a smaller dose (5 mg Sbv/kg/day) and 3 treated intralesionally (up to 4,0 mL/week). During the treatment, the patients were submitted to periodic blood exams and interviewed weekly about the incidence of side effects. The levels of antimony in plasma and skin samples were determined by Inductively Coupled Plasma with Mass Spectrometry (ICP-MS), with a LOD = 0,020 μg/L and LOQ = 0,068 μg/L for plasma, and LOD = 0,008 μg/L and LOQ = 0,028 μg/L for skin. The patients from the conventional treatment presented a mean initial antimony plasma concentration of 3,39 μg/L; at the end of the treatment, these levels were 0,21 and 125,8 mg/L when samples were collected before and after the Glucantime® application, respectively. The mean antimony level in skin at the end of the treatment was 9,24 μg/g. The main side effects reported by these patients were arthralgia and myalgia; laboratory results showed mainly lymphocytosis and increase in amylase levels. We found many significant correlations between antimony concentrations, side effects and laboratory alterations, confirming the hypothesis of a dose-dependent relationship between antimony concentration in plasma and skin and reported side effects.

Avaliou-se a segurança de um fitoterápico, constituído de extratos fluidos de Aristolochia cymbifera (“cassaú”), Plantago major L.(“transagem”), Luehea grandiflora Mart.(“açoita-cavalo”), Myrocarpus frondosus Allemão (“cabreúva”), Piptadenia colubrina Benth (“angico”) (Cassaú Composto® ), através de estudos de toxicidade aguda e subcrônica, tendo como base a resolução Nº 90, de 16 de março de 2004 da ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Para o teste de toxicidade aguda, ratos Wistar de ambos os sexos foram tratados por via oral com uma única dose de 26 ml/kg, correspondendo a 20 vezes a dose terapêutica indicada pelo fabricante para seres humanos adultos. Os resultados revelaram haver sinais de toxicidade sistêmica com o aparecimento de ataxia, porém de forma transitória e reversível, não causando interferência no desenvolvimento ponderal dos animais, nos consumos de água e ração, nas produções de urina e fezes, bem como alterações macroscópicas nos órgãos dos animais. Avaliou-se também a exposição a doses repetidas do fitoterápico (toxicidade subcrônica). Constituiram-se 4 grupos experimentais (10 animais/sexo/dose), onde administrou-se por via oral a ratos Wistar, durante 30 dias, doses diárias de 1,3 ml/kg, 6,5 ml/kg e 13 ml/kg, respectivamente a dose terapêutica indicada pelo fabricante para seres humanos adultos, 5 vezes, e 10 vezes a dose terapêutica, além de um grupo controle, onde administrou-se o veículo do fitoterápico. Os resultados revelaram ausência de toxicidade sistêmica, fundamentados na ausência de alterações hematológicas e bioquímicas sangüíneas, bem como peso e análises histopatológicas dos órgãos, nos diferentes grupos. As flutuações nos consumos de água e ração, bem como produções de urina e fezes, não influenciaram de maneira negativa o desenvolvimento ponderal dos animais. Concluiu-se portanto, que a utilização do fitoterápico nas doses e períodos referidos pode ser considerado segura.

Avaliou-se a influência do extrato hidroalcoólico e da infusão das folhas de Morus nigra L. em diferentes ensaios biológicos (uterotrófico em ratas adultas ovariectomizadas e em pré-púberes, e pubertal) em ratas Wistar. O objetivo dos ensaios foi avaliar a atividade estrogênica de Morus nigra observando-se o desenvolvimento uterino de ratas adultas ovariectomizadas e pré-púberes, e, a manifestação da abertura do canal vaginal, regularidade do ciclo estral e desenvolvimento uterino de ratas do desmame à puberdade. Os protocolos realizados foram embasados nos padrões estabelecidos pela Organization for Economic Co-operation and Development (OECD) – Programa para a validação de ensaios uterotróficos como rastreamento de possíveis substâncias com atividades estrogênicas in vitro. O material vegetal foi coletado a campo, na cidade de Porto Alegre, RS e utilizado ainda fresco para a preparação da infusão e do extrato hidroalcoólico sendo o primeiro preparado por maceração mecânica das folhas (20g de folhas frescas) em 200ml de água destilada, e o segundo por maceração de 100g de folhas em 1000ml de solução hidroalcoólica (1:1), com posterior concentração em rotavapor à vácuo, ambos conservados sob refrigeração durante o período dos ensaios biológicos. O cálculo do resíduo seco para estas amostras foi efetuado com base na evaporação em estufa de volumes conhecidos em frascos de Becker, resultando em (média ± desvio padrão) 5,4 ± 0,32mg/ml de 7 amostras para a infusão e 123,1 ± 0,17mg/ml de 9 amostras para o extrato hidroalcoólico. As ratas foram tratadas diariamente, por via oral com sonda flexível ou rígida, com 0,4mg/kg de benzoato de estradiol (controle positivo), 10ml/kg de óleo de canola (controle), 615,3mg/kg de extrato hidroalcoólico 50% ou 27,0mg/kg de infusão das folhas de Morus nigra L.. Os ensaios uterotróficos tiveram uma duração de 7 dias, para fêmeas ovariectomizadas e de 3 dias, para as pré-púberes, e o ensaio pubertal (subcrônico) cerca de 35 dias. Os resultados revelaram, no ensaio com ratas adultas ovariectomizadas, um aumento da massa corporal relativa dos grupos tratados com óleo de canola (controle) e extrato das folhas de Morus nigra L.em relação aos demais grupos (estradiol- controle positivo- e infusão das folhas de Morus nigra L.), bem como o aumento da massa relativa do útero úmido e seco dos grupos tratados com estradiol e infusão de Morus nigra, acompanhado de retorno ao ciclo estral somente no grupo estradiol; em relação aos demais órgãos, houve redução significativa da massa de fígado e rins do grupo infusão de Morus nigra em relação ao demais grupos. No ensaio uterotrófico em ratas pré-púberes, os resultados demonstraram um aumento da massa corporal dos animais tratados com infusão de Morus nigra e um aumento na massa relativa do útero úmido e seco do grupo estradiol em relação aos demais. Nas fêmeas tratadas subcronicamente no ensaio pubertal, o grupo estradiol apresentou uma antecipação da abertura do canal vaginal, uma redução significativa da massa dos ovários e um aumento igualmente significativo na massa relativa do fígado em relação aos demais grupos e um aumento igualmente significativo na massa relativa do rim direito em comparação ao grupo controle. Conclui-se que o extrato hidroalcoólico e a infusão das folhas de Morus nigra não apresentaram atividade estrogênica (nas doses administradas) nos protocolos avaliados. / The influence of Morus nigra leaves was studied by using biological assays of uterotrofic models in Wistar rats. The present study was undertaken in order to evaluate a oestrogenic activity of Morus nigra extract or infusion throught: the uterine development of ovariectomized rats treated with extract or infusion of Morus nigra leaves; the manifestation of secondary sexual characteristics such as timing of vaginal opening and uterine development of immature rats treated with extract or infusion of Morus nigra leaves and the manifestation of secondary sexual characteristics: estral cycle and uterine development in rats treated with extract or infusion of Morus nigra leaves, since the weaning until puberty. The biological assays showed in this work were based on OECD studies (Organization for Economic Co-operation and Development - Program to validate the uterotrophic bioassay to screen compounds for in vitro estrogenic responses). Field collected plants (Morus nigra fresh leaves) were used for the infusion and hydroalcoholic extract by mechanical maceration in water or hydroalcoholic solution (1:1), respectively. Both samples were conserved in refrigerator. Residuous material was dryed (at room temperature) and evaporated in glasses, in order to evaluate their inicial and final weigth resulting in 5,4 ± 0,32mg/ml of 7 samples of infusion and 123,1 ± 0,17mg/ml of 9 samples of hydroalcoholic extract. The animals were treated with oestradiol (0,4mg/kg), canola oil (10ml/kg), hydroalcoholic extract 50% (615,3mg/kg) and infusion (27mg/kg) of Morus nigra fresh leaves by oral gavage. The rats were treated for 7,3 and approximately 35 days, respectively, in each experiment. It has been observed in ovariectomized rats that the body weight was reduced at the oestradiol and infusion groups, comparing to the others (canola oil, Morus nigra extract). Furthermore, results showed a significant increase of the body weight for the groups treated with canola oil and Morus nigra extract; results also showed a significant increase in the uterine weight for the groups treated with infusion and oestradiol, and an important return of the cycle phase for the animals treated with oestradiol , at the other organs, it has been observed a significant decrease of liver and kidneys weight for the group treated with Morus nigra infusion, comparing to the others. Both experiments with immature rats were compared: results showed a body weight gain of the rats treated with infusion of Morus nigra leaves, nevertheless, the oestradiol group had anticipation of vaginal opening, and an important increase of the uterine weight. The subchronical bioassay with immature rats showed an anticipation of vaginal oppening, and also, a decrease in ovarian weight and an increase of the right kidney and liver weigh .The main conclusion highlighs that hydroalcoholic extract and infusion of Morus nigra leaves did not show an oestrogenic activity for the protocols and doses considered.

VASCONCELLOS, Marne Carvalho de. Estudo de toxicologia clínica e genotoxicidade do fitoterápico tamaril cápsula, em voluntários sadios. 2004. 159 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-07T12:54:19Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:52:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Tamaril® is a phytomedicine constituded of 5 medicinal plants well known for their laxative proprieties: Cassia fistula (soft extract), Cassia angustifolia (Senna), Coriandrum sativum L. e Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz) and Tamarindus indicus L. (soft extract). Every medication to be launched on the market must succeed in a series of research steps, where clinical toxicology evaluation is an important one among them. Genotoxic assessment, which aims on the processes altering DNA integrity, is a relatively recent field in drug development and stands on the interface between toxicology and genetics. This study consisted on the evaluation of clinical safety and genotoxic potential of Tamaril® capsules in healthy volunteers. The clinical evaluation consisted of an open study with 25 healthy volunteers of both sexes (13 males and 12 females) who received a daily oral dose of two capsules Tamaril® for 28 consecutive days. The volunteers were selected for the study if considered in good health after criterious clinical, physical and laboratorial evaluations. At the end of the 28 study days, blood samples (5 mL) were collected from each volunteer for the genotoxic assessment of Tamaril® on peripheral lymphocytes through the comet assay. The mean age of the volunteers was of 30.1± 6.9 years and the body mass index was of 24.21±3.00 Kg/cm2 on the pre-study evaluation and 24.26±3.05 Kg/cm2 on the post-study. Hematological, hepatic, renal and metabolic functions, as well as sodium and potassium did not show signs of abnormality in any volunteer throughout the weeks of the study. Soften faces, abdominal pain and flatulence were the adverse events regularly observed. Through the comet assay, score 1 DNA damage was most frequently registered on peripheral lymphocytes of volunteers treated with Tamaril® (p<0.05). Clinical and genotoxic evaluation of healthy volunteers receiving Tamaril® for 28 uninterrupted days did not show signs of toxicity related to the treatment. / O Tamaril® é um fitoterápico composto de cinco plantas medicinais: Cassia fistula (extrato mole), Cassia angustifolia (Sene), Coriandrum sativum L., Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz), e Tamarindus indicus L. (extrato mole); todas com conhecida ação laxativa. Todo medicamento que vai ser registrado pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), passa por diversas etapas de pesquisa sendo uma delas a toxicologia clínica. A genotoxicidade é uma especialidade relativamente recente, e se situa na interface entre a toxicologia e a genética. Esta visa o estudo dos processos que alteram o DNA (ácido desoxirribonucléico). O objetivo desse estudo foi avaliar a segurança e o potencial genotóxico da formulação de Tamaril® cápsulas em voluntários saudáveis. O ensaio clínico consistiu de um estudo aberto com 25 voluntários de ambos os sexos, (13 homens e 12 mulheres), que receberam diariamente duas cápsulas de Tamaril® v.o. por 28 dias ininterruptos. Os voluntários foram incluídos no estudo após avaliação clínica, exames físicos e laboratoriais. Ao final de 28 dias, amostras de sangue (5mL) foram coletadas de cada voluntário, para avaliar o efeito genotóxico do Tamaril® em linfócitos periféricos humanos através do teste do cometa. A idade média dos voluntários foi de 30,1 ± 6,9 anos e o índice de massa corpórea foi de 24,21 ± 3,00 Kg/ cm2 no pré-estudo e 24,26 ± 3,05 Kg/ cm2 no pós-estudo. As funções hematológica, hepática, renal e metabólica, bem como os eletrólitos sódio e potássio foram analisados semanalmente através dos exames laboratoriais, os quais não evidenciaram sinal de toxicidade, estando todos os resultados dentro da faixa de normalidade. Fezes pastosas, dor abdominal e flatulência foram os eventos adversos mais observados. Pelo teste do cometa, foram observados danos tipo 1 (p<0,05) nos linfócitos periféricos dos voluntários tratados com Tamaril®. Os estudos de Toxicologia Clínica e genotoxicidade não evidenciaram nenhuma toxicidade nos voluntários tratados com Tamaril® por 28 dias ininterruptos 2 cápsulas por dia v.o.

A Colômbia é o país com as maiores reservas de carvão da América Latina, localizadas principalmente no norte do país, na região da Costa Atlântica. Nos departamentos de La Guajira, Cesar e Córdoba são encontrados 90% do carvão térmico. Nestas regiões, a mineração de carvão acontece a céu aberto, ocorrendo a liberação de material particulado com uma mistura de compostos químicos no ambiente. Esta mistura complexa está associada à indução de efeitos genotóxicos em diferentes organismos. Ainda assim, é pouca a informação da composição química e dos efeitos biológicos gerados pelo carvão da Colômbia. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os principais compostos químicos do carvão betuminoso da mina El Cerrejón e sub-betuminoso da mina La Guacamaya, Colômbia, e avaliar seus efeitos biológicos utilizando modelos in sílico, in vitro e in vivo. A caracterização das amostras de carvão identificou os principais óxidos inorgânicos, elementos inorgânicos e hidrocarbonetos aromáticos policíclicos. Alguns destes compostos podem induzir a geração de Espécies Radicais de Oxigênio (ERO), que leva a estresse oxidativo, e provoca a interrupção do ciclo celular como reação aos danos no DNA Além disso, os carvões betuminoso e sub-betuminoso da Colômbia induzem citotoxicidade, lesões primárias no DNA e instabilidade cromossômica em níveis similares, associadas ao dano oxidativo detectado in vitro. Da mesma forma, foi demostrado in vivo que a inalação subaguda de carvão sub betuminoso, produz acumulação de pó de carvão no tecido do pulmonar, resultando na indução de ERO e lesões primárias no DNA em células do sangue periférico e pulmão, além de provocar um aumento nos níveis das defesas antioxidantes e a liberação de citocinas pró-inflamatório. Em conclusão, os efeitos observados in sílico, in vitro e in vivo estão relacionados com a capacidade de alguns compostos químicos do carvão da Colômbia de induzir a geração de estresse oxidativo celular e tecidual. / Colombia has the largest coal reserves in Latin America. Mineral reserves are located mainly in the north (Caribbean region), where 90% of the thermal coal is located in the departments of La Guajira, Cesar, and Córdoba. In these regions, coal mining is open-pit, which is related to the release of particulate material into the environment with a mixture of chemical compounds. This complex mixture is associated with thegenotoxic effects in different organisms. However, the information about chemical composition and biological effects generated by coal in Colombia is scarce. Our objective was to characterize the main chemical compounds of the bituminous coal from El Cerrejón and sub-bituminous mine from La Guacamaya mine in Colombia and to evaluate the biological effects using in vitro, in vitro, and in vivo models. Characterization of the carbon samples identified the main inorganic oxides, inorganic elements, and polycyclic aromatic hydrocarbons Some of these compounds may induce the generation of ROS, which leads to oxidative stress and cause cell cycle disruption as a reaction to DNA damage. In addition, bituminous and subbituminous coals induce cytotoxicity, primary DNA damage, and chromosomal instability at similar levels associated with oxidative damage detected in vitro. Likewise, it has been shown that subacute inhalation of sub-bituminous carbon, produces accumulation of coal dust in lung tissue in vivo. This leads to the induction of ROS and, consequently, causes oxidative stress, primary lesions in the DNA in cells of the peripheral blood and lung. In addition, it causes increased levels of antioxidant defenses and markers of oxidative damage, as well as the release of proinflammatory cytokines. In conclusion, the effects observed in vitro, in vitro and in vivo are related to the ability of some chemical compounds of coal in Colombia to induce oxidative stress.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Farmácia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317557.pdf: 1330917 bytes, checksum: 93e905f6e7542b036c55bb0fca30b398 (MD5) Previous issue date: 2013 / Sugere-se que a exposição ocupacional a agrotóxicos pode levar a uma grande diversidade de alterações bioquímicas que podem ser correlacionadas ao desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. Nosso estudo investigou as alterações bioquímicas induzidas pela exposição aguda (in vitro) ou crônica (durante o período gestacional e lactacional) ao herbicida Roundup® sobre fatias de hipocampo de ratos de 15 dias de idade. Para o tratamento in vivo as ratas prenhas receberam 1% de Roundup® (0,36% glifosato) na água de beber desde o 5º dia gestacional até os filhotes completarem 15 dias de vida pós-natal, sendo que os controles receberam apenas água durante o mesmo período. Para o tratamento in vitro, fatias de hipocampo de ratos imaturos foram incubadas por 30 minutos com ou sem 0,01% de Roundup® (0,0036% de glifosato). Agonista e antagonistas de receptores glutamatérgicos do tipo NMDA (NMDA/glicina, AP-5 e MK-801), inibidores das vias de sinalização da CaMKII, ERK/MAPK, PKA e PLC/PKC (KN-93, PD98059, H89, Ro31-8220 e U73122, respectivamente) e bloqueador de canal de cálcio dependente de voltagem do tipo-L (nifedipina) foram utilizados para determinar os mecanismos envolvidos na neurotoxicidade do Roundup® no hipocampo de ratos. Também foram determinados marcadores bioquímicos e de dano oxidativo, assim como a possível indução de excitotoxicidade glutamatérgica, através do estudo das alterações no influxo de 45Ca2+, bem como na captação, liberação e metabolismo do glutamato em fatias de hipocampo. Os resultados obtidos após o tratamento in vivo mostraram que a exposição ao Roundup® durante os períodos pré- e pós-natal aumentou o influxo de 45Ca2+; diminuiu captação de [3H]-glutamato e os níveis de GSH; promoveu acúmulo de 14C-MeAIB; aumentou atividade das enzimas gama glutamil transferase (?-GT) e aspartato aminotransferase (AST), assim como inibiu a atividade da glicose-6-P desidrogenase (G6PD), alanina aminotransferase (ALT) e glutamina sintetase (GS) no hipocampo de ratos imaturos. Além disso, observou-se que o pesticida induziu a ativação/fosforilação da ERK1/2, JNK1/2, Akt e GSK3?. No tratamento in vitro os resultados demonstraram que a exposição ao glifosato-Roundup® aumentou o influxo de 45Ca2+; diminuiu a captação e aumentou a liberação de [3H]-glutamato; diminuiu os níveis de GSH; aumentou a lipoperoxidação; promoveu acúmulo de 14C-MeAIB; inibiu a atividade enzimática da ?-GT, AST/ALT, G6PD e GS no hipocampo de ratos imaturos. Além disso, observou-se que o mecanismo de toxicidade do agrotóxico induz o influxo de Ca2+ via ativação do receptor NMDA para glutamato e abertura dos canais de Ca2+ dependentes de voltagem do tipo L. Além disso, o mecanismo do Roundup® também envolve a modulação das vias de sinalização da CaMKII, ERK/MAPK e PLC/PKC. Em conjunto, nossos resultados sugerem o envolvimento de excitotoxicidade glutamatérgica, estresse oxidativo e de cascatas de sinalização celular nos efeitos do Roundup® sobre o hipocampo de ratos. O entendimento dos alvos celulares e moleculares de ação do Roundup®, assim como das vias de sinalização celular moduladas por este agrotóxico poderão indicar futuros alvos para intervenção preventiva, terapêutica e/ou diagnóstica em prol da saúde dos indivíduos expostos.<br> / Abstract : It has been suggested that occupational exposure to pesticides may lead to biochemical changes which might be related to neurodegenerative conditions. Our study investigated the biochemical changes induced by acute (in vitro) or chronic (during the pre- and post-pregnancy) exposure to Roundup® on hippocampal slices from 15 days old rats. For in vivo treatment, pregnant females received 1% Roundup® (glyphosate 0.36%) in drinking water from gestational day 5 until the day of the experiments, which were carried out by using 15-day old pups. Control groups received only water during the same period. For in vitro treatment, hippocampal slices from immature rats were exposed to 0.01% Roundup® (0.0036% glyphosate) for 30 minutes. Glutamate receptor agonist and antagonists (NMDA/Gly, AP-5, MK-801), inhibitors of CaMKII, ERK/MAPK, PKA e PLC/PKC (KN-93, PD98059, H89, Ro31-8220 e U73122, respectivelly) and L-type voltage-dependent calcium channel blocker (nifedipine) were used in order to investigate the mechanisms underlying Roundup® neurotoxicity in rat hippocampus. The effect of the pesticide on 45Ca2+ influx, enzymatic activities, as well as on the uptake, release and metabolism of glutamate were determined in hippocampal slices in order to investigate the participation of oxidative damage and glutamatergic excitotoxicity in the mechanism of Roundup® neurotoxicity. The results obtained after treatment in vivo showed that exposure to Roundup® during gestational and lactational period increased 45Ca2+ influx; decreased glutamate uptake and GSH levels; promoted 14C-MeAIB accumulation; increased the activity of the enzymes aspartate aminotransferase (AST) and gamma glutamyl transferase (?-GT) and inhibited the activity of glucose-6-P dehydrogenase (G6PD), alanine aminotransferase (ALT) and glutamine synthetase (GS) in immature rat hippocampus. Furthermore, it was observed that the pesticide induced activation/phosphorylation of ERK1/2, JNK1/2, Akt and GSK3ß. On the other hand, the acute (in vitro) exposure do the pesticide increased 45Ca2+ influx; decreased [3H]-glutamate uptake and increased its release; decreased GSH levels; increased lipid peroxidation; promoted 14C-MeAIB accumulation; inhibited the enzymatic activity of ?-GT, AST/ALT, GS and G6PD in immature rat hippocampus. Moreover, it was observed that Roundup® exposure leads to calcium overload through NMDA receptor activation and L-type voltage dependent Ca2+ channels opening. Also, the mechanism of pesticide toxicity involves activation of kinase cascades such as CaMKII, ERK/MAPK and PLC/PKC. Taken together, our results suggested the involvement of glutamatergic excitotoxicity, oxidative stress and the modulation of signaling pathways in mechanism of Roundup®. The knowledge of the molecular and cellular targets of Roundup®, as well as the signaling pathways modulated by this pesticide may indicate future targets for clinical intervention of exposed individuals.

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-30Bitstream added on 2015-04-09T12:47:36Z : No. of bitstreams: 1 000817489.pdf: 1268930 bytes, checksum: 26ee30b87bdf495b35fd877730980728 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O uso de sedimentos formulados em laboratório vem sendo largamente adotado e recomendado por organizações de proteção ambiental e outras entidades internacionais de importância, como U.S.EPA, OECD e ASTM, devido, principalmente, à sua fácil reprodutibilidade por diferentes laboratórios e por ser livre de organismos e contaminantes indesejados no estudo. Visando a representatividade de ambientes lóticos tropicais, este estudo propôs analisar diferentes formulações de sedimento para a aplicação em estudo toxicológico de interferentes endócrinos (IE), sendo eles o 17β-estradiol (E2) e 17α-etinilestradiol (EE2). Foram avaliados os parâmetros oxigênio dissolvido, dureza e pH de 5 formulações de sedimento durante um período de 15 dias e a adaptação da espécie bentônica Hyalella azteca com relação aos parâmetros sobrevivência, crescimento e reprodução. A toxicidade do E2 e EE2, ambos à concentração de 30 ng/L, foi verificada sobre o organismo nectônico Ceriodaphnia dubia, exposto por 8 dias em solução extraída da formulação de sedimento que continha menor quantidade de matéria orgânica, contaminada em laboratório. Os parâmetros avaliados foram sobrevivência e reprodução, sendo utilizados os métodos estatísticos de Kruskal- Wallis, teste t e teste t por bioequivalência. O comportamento químico dos compostos foi analisado quanto ao tempo de degradação em ambiente com sedimento formulado (após 2, 24 e 48 horas de contato) e à capacidade de retenção ao sedimento após 2 horas de contato através de quantificação por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS). Os resultados mostraram que os sedimentos formulados contendo menores proporções de matéria orgânica (1 e 3% em massa) tiveram melhor estabilização em relação ao pH e também boa aceitação pela espécie H. azteca. Porém, o ambiente composto pelo mesmo sedimento não foi ideal para testes com C. dubia ... / The use of laboratory-formulated sediments have been widely adopted, and recommended by environmental protection organizations and other international agencies as USEPA, OECD, and ASTM, mainly for easy reproducibility by different laboratories, and for being free of unwanted contaminants and indigenous organisms. Aiming at the representation of tropical lotic environments, different sediment formulations were analyzed for use in toxicology studies of endocrine disruptors (EI), namely 17β-estradiol (E2) and 17α-ethinyl estradiol (EE2). Five different formulations were evaluated regarding dissolved oxygen, water hardness and pH over a period of 15 days, and on the adaptation of the benthic species Hyalella azteca regarding survival, growth, and reproduction parameters. The toxicity of E2 and EE2, both at the concentration of 30 ng/L, was observed in the nektonic organism Ceriodaphnia dubia, exposed to a solution extracted from spiked formulated sediment containing a minor amount of organic matter in a 8-days test. Survivability and reproduction parameters were evaluated using Kruskal-Wallis, t-test and bioequivalence t-test statistical methods. Chemical behavior of the compounds was analyzed regarding environmental degradation time in formulated sediment (after 2, 24, and 48 hours of contact), and sediment retention capacity after 2 hours of contact by quantification by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Results showed that the formulated sediments which contained smaller fractions of organic matter (1% and 3% dry weight) had better stabilization in relation to pH, and good acceptance by the species H. azteca. However, the formulated sediment environment was not ideal for C. dubia, which was therefore replaced by filtered interstitial water for E2 and EE2 tests. There was a statistically significant reduction in the number of newborns when exposed to control sediment and contaminants (Kruskal-Wallis, t-test, and bioequivalence ...

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:30Z : No. of bitstreams: 1 000830249.pdf: 1786712 bytes, checksum: cd3a66c152a39617ca6b200b1730f410 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / No presente trabalho, ensaios de toxicidade com o metalóide arsênio, o metal cobalto e o contaminante emergente17β-estradiol foram estudados na presença e ausência das substâncias húmicas aquáticas (SHA) e suas frações de diferentes tamanhos moleculares (<5, 5-10; 10-30; 30-100 e >100 kDa), utilizando-se os organismos Ceriodaphnia dubia e Pseudokirchneriella subcapitata. Aos ensaios utilizando-se o organismo C. dubia, a influência das SHA em contato com o metal arsênio na redução da toxicidade por análise estatística aumentou a reprodução. Nas diferentes frações de SHA observou-se variação de toxicidade nas frações de tamanhos moleculares maiores, na seguinte ordem crescente de toxicidade: F1=F2<F3<F4=F5. Em relação ao cobalto, apesar da não redução de toxicidade notou-se a influência do tamanho molecular das SHA na toxicidade entre as frações utilizando-se concentração de 50 μgL-1, onde as frações com base no tamanho molecular apresentaram a seguinte ordem de toxicidade: F5=F4<F3<F2<F1. Os ensaios utilizando-se P. subcapitata mostraram que a presença das SHA mesmo que isoladamente, causou inibição no crescimento do organismo em quase todas as concentrações das três substâncias estudadas, relacionada a composição, ligações presentes no extrato de SHA e interações entre a superfície da alga e a matéria orgânica. Assim, os ensaios de toxicidade aliados aos estudos químicos revelam que a substâncias húmicas apresentaram comportamento diferente tanto no que diz respeito ao organismo testado como a qual substância está interagindo, podendo atuar tanto como minimizadores ou como potencializadores dos efeitos tóxicos em diferentes organismos / At this work, toxicity tests using metalloid arsenic, metal cobalt and emerging contaminant 17β-estradiol were studied in the presence and absence of aquatic humic substances (AHS) and its fractions of different molecular sizes (<5, 5-10; 10-30; 30-100 and > 100 kDa), using the Ceriodaphnia dubia and Pseudokirchneriella subcapitata organisms. The tests using C. dubia, influence of AHS contact arsenic metal in toxicity reducing by statistical analysis AHS and the different fractions showed different behavior in each other, reducing toxicity fractions of larger molecular size, in decreasing order of toxicity: F1 = F2 <F3 <F4 = F5. In regard to cobalt despite, the toxicity reduction was not observed the influence of the molecular size of AHS in toxicity between fractions using a concentration of 50 μgL-1, where fraction of molecular size showed the following order of toxicity: F5 F4 = <F3 <F2 <F1. Assays using P. subcapitata shown that presence of AHS even alone, cause an inhibition in the growth of the organism in almost all concentrations of the three substances studied, related composition, bonds present in the extract SHA and interactions between the surface seaweed and organic matter. Thus, combined with the test chemical toxicity studies show that the humic substances was much different behavior with regard to the test organism and which is interacting substance, which may act either as or as potentiators of minimizing toxic effects in different organisms