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A ação contra hegemônica da sociedade envelhecida, para a garantia da reprodução social, através do empreendedorismo

Oliveira, Jose Bernardo Enéias de 12 June 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-25T20:21:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose Bernardo Eneias de Oliveira.pdf: 7503922 bytes, checksum: 38e1b7c5e0a0d70391181c2111f702b1 (MD5) Previous issue date: 2015-06-12 / The research project investigates a social phenomenon that presents itself today in various parts of the world: the aging associated with entrepreneurship and their transformations in emancipatory process. Our focus is Brazil, further in São Paulo-SP, it is both great diversity of migrants from various other locations, broadened the range to take senior status, the umbrella of behavior and social relations, in time and space and socio-economic dimension, with a range of development opportunities. It is important to do so, the scene of the hegemonic and contrahegemônica neoliberal globalization, parts of the capitalist system. The study seeks opportunities for the elderly to continue to play socially, through new forms of business, using alternative employment and production models, increasingly acquainting human potential, with knowledge and skills development, adapting to the environment . The line of research studies social, cultural and anthropological, referring to the analysis of demographic aging and proposing alternatives for the country, a capitalist approach to economic and public policy, can support the society that is aging in sharp speed, with the point main analysis of its action and its potential before the (re) socialization and life cycle. Presentation of the research aims, without losing the anthropological approach and sociologist, give theoretical support to Geronte process of adapting to social changes through their potential for autonomy, to freely manage your life and your own choices, with the chances of survival resulting from their entrepreneurship and emancipatory knowledge / O projeto de pesquisa investiga um fenômeno social que se apresenta, hoje, em varias partes do mundo: o envelhecimento associado ao empreendedorismo e suas transformações num processo emancipatório. Nosso foco é o Brasil, mais aprofundadamente no município de São Paulo-SP, que, reunindo grande diversidade de migrantes de várias outras localidades, amplia o universo para exame da condição do idoso, na égide de comportamento e relações sociais, no tempo e espaço e na dimensão socioeconômica, com um leque de possibilidades de empreendimento. É relevante, para isso, o cenário da globalização neoliberal hegemônica e contrahegemônica , partes do sistema capitalista . O estudo busca possibilidades do idoso de continuar a reproduzir socialmente, através de novas formas de negocio, utilizando alternativas de empregabilidade e de modelos de produção, cada vez mais se inteirando ao potencial humano, com conhecimento e desenvolvimento de habilidades, adaptando-se ao ambiente. A linha de pesquisa estuda questões sociais, culturais e antropológicas, remetendo a analise do envelhecimento demográfico e propondo alternativas para que o País, numa abordagem capitalista das políticas econômicas e públicas, possa sustentar a sociedade, que está envelhecendo em velocidade acentuada, tendo como ponto principal a análise de sua ação e seu potencial diante da (re) socialização e do ciclo de vida. O encaminhamento da pesquisa pretende, sem perder o enfoque antropológico e sociólogo, dar sustentação teórica ao processo de adaptação do geronte às mudanças sociais através de seu potencial de autonomia, no sentido de gerenciar livremente sua vida e suas próprias escolhas, com as possibilidades de sobrevivência resultantes de seu empreendedorismo e conhecimento emancipatório
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A construção de uma nova cultura do conhecimento: a experiência do Centro Popular de Cultura e Desenvolvimento

Silva, Gabriela Marques Mendes da 07 August 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-25T20:21:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GABRIELA MARQUES MENDES DA SILVA.pdf: 5845578 bytes, checksum: 1c642ab6b53eec10563d9ecdbcf227d7 (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / The crisis of human civilization is directly associated to the structure of its thought process, especially in Western societies, because this is based on a paradigm of logic that simplifies, reduces and fragments people's understanding of reality and the world around them. The current educational practice, which is carried out and concentrated in schools, is inadequate to the task of developing citizens who can learn to deal with the complexity of the modern world and its challenges. Complex thinking, then, as proposed by Edgar Morin, is one possible approach to enable the construction of a new culture of knowledge, which can contribute to a worldview in which human beings reposition their thinking in favor of life, by becoming conscious of their situation in the context of the planet they inhabit, and by recognizing their identity and their earthly community. When applied to educational practice, the concept of complexity makes it possible to reconnect bodies of knowledge that enable the recognition of global problems and that create awareness of the political, social and ethical needs that are necessary for a fundamental civilizing posture: in solidarity with, and responsible for, emerging transformations. This study will analyze the activities of the Popular Center for Culture and Development, located in the city of Araçuaí in the State of Minas Gerais, Brazil, as an alternative method of learning, based on the application of the concept of complexity in its educational practices and organization, and which has resulted in significant and positive transformations in the communities where it has been adopted, and which is now recognized as an important reference in education and in sustainable community development. It is a space in which the individual's experience is broadened, by the continuous and motivating practice of social transformation and the realization of a situation that is based on respect for life, both in the present and in the future. The individual, increasingly aware of his/her own humanity, is nourished, simultaneously and in a complementary manner, by utopia and reality on the path to building a planetary ethic / A crise da vida humana está associada diretamente com a estrutura do pensamento, principalmente das sociedades ocidentais, por reproduzir uma lógica de um paradigma que simplifica, reduz e fragmenta a compreensão que se tem da realidade e do mundo. A prática educacional atual, exercida e concentrada nas instituições escolares, se mostra insuficiente para o desenvolvimento de cidadãos que aprendam a lidar com a complexidade do mundo contemporâneo e seus desafios. O pensamento complexo, proposto por Edgar Morin, torna-se uma abordagem possível para a construção de uma nova cultura do conhecimento, contribuindo para uma outra possível visão de mundo, em que o ser humano se reposiciona em favor da vida, pela consciência de sua condição perante ao contexto planetário em que habita, ao reconhecer sua identidade e a sua comunidade de destino terrestre. Aplicada à prática educacional, a complexidade faz com que seja possível religar saberes para o reconhecimento de problemas globais e a tomada de consciência das necessidades políticas, sociais e éticas necessárias para a fundamental postura civilizatória: solidária e responsável pelas transformações emergentes. A atuação do Centro Popular de Cultura e Desenvolvimento, na cidade de Araçuaí, em Minas Gerais, será analisada neste trabalho como uma experiência alternativa à escolarização, que reflete, em exercício educacional e organizacional, a concepção complexa, transformando de forma significativa e positiva comunidades onde atua, sendo hoje reconhecida como uma grande referência de educação e desenvolvimento comunitário sustentável. Um espaço em que se amplia a experiência do indivíduo, pela prática da transformação social contínua e motivadora da realização de um presente e de um futuro em que se respeite a vida. Cada vez mais consciente da sua própria humanidade, o indivíduo nutre-se, simultaneamente e de forma complementar, da utopia e da realidade rumo à construção de uma ética planetária
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Complementariedade do processo inovativo no Brasil: a decisão de produzir ou comprar inovação

Aguiar, Fernando Amaral de 31 July 2018 (has links)
Submitted by Biblioteca Digital de Teses e Dissertações (sdi@ucb.br) on 2018-11-08T17:02:24Z No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) / Approved for entry into archive by Biblioteca Digital de Teses e Dissertações (sdi@ucb.br) on 2018-11-08T17:03:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-08T17:03:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) Previous issue date: 2018-07-31 / Studies on the impact of technological innovation on the economy have spread through the literature. A specific field seeks to understand the advantages that a company or an industry has in deciding to produce technology internally or to buy it from third parties and to apply to existing processes. This paper reproduces the study by Cassiman and Veugelers (2006) and questions whether there is complementarity in the innovative process of the transformation industry in Brazil. The goal is to understand if the results found by the Belgian authors would be similar or different to Brazil, given the peculiarities of the Brazilian innovation sector. The evidence suggests that it is more advantageous for the transformation industry to buy technology rather than to invest in the creation of innovations within the sector. Therefore, the innovative process lacks complementarity. A possible explanation for this finding regards some particularities of Brazil, such as low labor productivity, excessive bureaucracy, low protection of intellectual property, but further investigation is necessary to distinguish the effects of those variables. This work is a pioneer in this topic for Brazil, and, for such reason, it does not exhaust the possibilities of inclusion of variables in the proposed models. The goal here is to introduce the subject and to raise discussions. / Estudos relacionados ao impacto da inovação tecnológica na economia têm tomado cada vez mais espaço na literatura. Um campo específico busca compreender as vantagens que possui uma empresa ou um setor ao decidir produzir tecnologia internamente ou comprá-la de terceiros para aplicar nos processos já existentes. Este trabalho reproduz o artigo de Cassiman e Veugelers (2006) e busca entender se existe complementariedade no processo inovativo da indústria de transformação no Brasil. O objetivo é compreender se, dadas as peculiaridades do setor inovativo brasileiro, os resultados obtidos seriam semelhantes ou distintos daqueles encontrados no artigo dos autores belgas. Conclui-se que é mais vantajoso para a indústria de transformação comprar tecnologia pronta ao invés de investir na criação de inovações internas, não existindo, portanto, complementariedade no processo inovativo. Particularidades do caso brasileiro poderiam explicar tais resultados, a exemplo de baixa produtividade da mão de obra, intensa burocracia, baixa proteção da propriedade intelectual. Contudo novos estudos são necessários para se determinar os efeitos de cada uma dessas variáveis, etc. Este trabalho é pioneiro neste tema para o Brasil, e, por este motivo, não exaure as possibilidades de inclusão de variáveis nos modelos propostos. O objetivo é introduzir o assunto e suscitar discussões relacionadas ao tema.
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Complementariedade do processo inovativo no Brasil: a decisão de produzir ou comprar inovação

Aguiar, Fernando Amaral de 31 July 2018 (has links)
Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2018-11-29T17:59:35Z No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2018-11-29T17:59:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-29T17:59:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandoAmaraldeAguiarDissertacao2018.pdf: 613142 bytes, checksum: ca63fd03e438b9af6ede8dbd384e42aa (MD5) Previous issue date: 2018-07-31 / Studies on the impact of technological innovation on the economy have spread through the literature. A specific field seeks to understand the advantages that a company or an industry has in deciding to produce technology internally or to buy it from third parties and to apply to existing processes. This paper reproduces the study by Cassiman and Veugelers (2006) and questions whether there is complementarity in the innovative process of the transformation industry in Brazil. The goal is to understand if the results found by the Belgian authors would be similar or different to Brazil, given the peculiarities of the Brazilian innovation sector. The evidence suggests that it is more advantageous for the transformation industry to buy technology rather than to invest in the creation of innovations within the sector. Therefore, the innovative process lacks complementarity. A possible explanation for this finding regards some particularities of Brazil, such as low labor productivity, excessive bureaucracy, low protection of intellectual property, but further investigation is necessary to distinguish the effects of those variables. This work is a pioneer in this topic for Brazil, and, for such reason, it does not exhaust the possibilities of inclusion of variables in the proposed models. The goal here is to introduce the subject and to raise discussions. / Estudos relacionados ao impacto da inovação tecnológica na economia têm tomado cada vez mais espaço na literatura. Um campo específico busca compreender as vantagens que possui uma empresa ou um setor ao decidir produzir tecnologia internamente ou comprá-la de terceiros para aplicar nos processos já existentes. Este trabalho reproduz o artigo de Cassiman e Veugelers (2006) e busca entender se existe complementariedade no processo inovativo da indústria de transformação no Brasil. O objetivo é compreender se, dadas as peculiaridades do setor inovativo brasileiro, os resultados obtidos seriam semelhantes ou distintos daqueles encontrados no artigo dos autores belgas. Conclui-se que é mais vantajoso para a indústria de transformação comprar tecnologia pronta ao invés de investir na criação de inovações internas, não existindo, portanto, complementariedade no processo inovativo. Particularidades do caso brasileiro poderiam explicar tais resultados, a exemplo de baixa produtividade da mão de obra, intensa burocracia, baixa proteção da propriedade intelectual. Contudo novos estudos são necessários para se determinar os efeitos de cada uma dessas variáveis, etc. Este trabalho é pioneiro neste tema para o Brasil, e, por este motivo, não exaure as possibilidades de inclusão de variáveis nos modelos propostos. O objetivo é introduzir o assunto e suscitar discussões relacionadas ao tema.
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Delineamentos ótimos visando a possibilidade de transformação na variável resposta

Reis, Cássio Pinho dos January 2019 (has links)
Orientador: Luzia Aparecida Trinca / Resumo: Nas mais diversas áreas do conhecimento se procura aumentar a eficiência dos delineamentos experimentais, principalmente, para minimizar os custos das pesquisas. O uso dos delineamentos ótimos, com seus diferentes critérios de otimização, é fundamental para se obter resultados que maximizam a informação em estudos experimentais. A maioria dos métodos pressupõe homogeneidade de variâncias, a qual nem sempre é veri cada no conjunto de dados. O objetivo deste trabalho é desenvolver uma metodologia para construção de delineamentos ótimos exatos e cientes em situações de variância não homogênea. Assume-se que linearidade e homoscedasticidade são obtidas via o uso de transformações da família Box-Cox e, além de critérios de otimização puros, critérios compostos que combinam duas propriedades são propostos. Resultados para vários exemplos sob os modelos de primeira e segunda ordem são obtidos e discutidos. / Abstract: In several areas of knowledge we seek to increase the efficiency of experimental designs, mainly in order to minimize the costs of reaserch. The use of optimal design with different optimization criteria is fundamental to obtain results that maximize the information in experimental studies. Most of the methods assume homogeneity of variances, which is not always verified in the data set. The goal of this work is to develop a methodology to construct exact optimal or efficient designs in situations of nonhomogeneous variance. It is assumed that application of a transformation from the Box-Cox family accomplish both linearity and homocedasticity. Pure design criterion as well as compound criteria using two desired properties are used. Results for several examples assuming first and second order models are presented and discussed. / Doutor
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Estudo e análise de poligonais segundo a NBR 13.133 e o sistema de posicionamento global. / Study and analyse of transverse with NR 13.133 and the global position system.

Maia, Túle Cesar Barcelos 29 December 1999 (has links)
Com o desenvolvimento de novas tecnologias, os instrumentos utilizados para levantamentos na Mensuração sofreram profundas modificações. Muitos equipamentos e técnicas foram substituídos e outros até se tornaram obsoletos. O aparecimento de novas opções e técnicas de medições criam sempre dificuldades na vinculação entre levantamentos. Atualmente se utilizam as estações totais e o GPS (global positioning system) para levantamentos de pontos e áreas criando diferentes superfícies de referência e de projeção, tornando difícil a análise dos dados observados em conjunto das diferentes técnicas. Para tanto é necessário transformar as observações de um sistema de referência para outro, tornando-as compatíveis. Como não se tem uma descrição da maneira de proceder ao ajustamento dos dados das diferentes técnicas, este trabalho tem por objetivo o ajustamento destas observações (GPS e estação total) combinados e em separado e comparar os resultados das coordenadas e precisões com as precisões estabelecidas pela NBR 13.133 de 1994. / The development of new tecnologies brought deep modifications in the instruments used for surveying in the measuration. Many equipaments and techinics were substituted and others became obsolete. The new options and technics of measuring always bring dificulties in the link among surveying nowadays it is used Total Stations and GPS (global positioning system) to surveying of points and areas creating different surface of reference and projections; making the analyse of observed data difficult considering the set of different technics. For this, it is necessary to change the observations of a system to another, making them compatible. As we do not have a detailed descriptions of the way to proceed the adjustament of the data from different technics, the aim of this work is to adjust these aobservations (GPS and total station) combined and apart to comper the results of the coordinates and precisions stablished by NBR13.133 of 1994.
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\'Já me transformei\': modos de circulação e transformação de pessoas e saberes entre os Huni Kuin (Kaxinawá) / I have already shifted: modes of circulation and transformations of people and knowledge among Huni Ku People (Kaxinawá)

Oliveira, Alice Haibara de 04 July 2016 (has links)
Esta dissertação é um trabalho sobre regimes de conhecimentos e seus modos de circulação e transformação entre os Huni Ku (Kaxinawá), tendo como linhas condutoras, narrativas, cantos e práticas rituais, relacionados a processos de aprendizado e transformação da pessoa. A partir do encontro com colaboradores huni ku que atuam em diferentes áreas de saber e realizam ampla circulação, foi constituída a base deste trabalho, fundamentado em seus discursos, que trazem experiências, percepções e reflexões acerca de seus modos de saber e de relações estabelecidas com outros regimes de conhecimentos, especialistas que são, nos encontros e traduções de mundos, linguagens e perspectivas. / This dissertation is a study on the knowledge regimes and modes of circulation and transformation among the Huni Ku People (Kaxinawá), conducted by narratives, songs and ritual practices related to learning processes, preparation and transformation of the person. this work is based on through the encounter with huni ku contributors who work in different areas of knowledge and who conduct wide circulation of this knowledge. The study was based on their speech conveys their experience, perceptions and reflections on their modes of knowledge and the relations to other knowledge regimes, since they are specialists in encounters, translation of worlds, languages and perspectives.
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Géons topológicos em uma teoria de Gauge discreta / Topological Geons in a Discrete Gauge Theory

Silva, Ivan Pontual Costa e 21 June 2001 (has links)
Géons topológicos podem ser vistos como um tipo de excitação localizada na topologia espacial. Nesta dissertação, estudamos um modelo físico simples, dado por uma teoria de Yang-Mills-Higgs com simetria de gauge descrita por um grupo de Lie compacto G, e com quebra espontânea de simetria para um subgrupo finito H G. Esta teoria é definida em um espaço-tempo de (2 + 1)d com topologia da forma x IR, onde descreve o plano com um único géon. Estudamos mais especificamente o setor de baixas energias dessa teoria, deduzindo o espaço de configuração clássico e quantizando-o. A quantização é feita identificando certa álgebra que descreve matematicamente o sistema, analisando com detalhes sua estrutura e buscando suas representações irredutíveis. Cada representação é então interpretada como um determinado setor de um géon da teoria. Em outras palavras, cada uma destas representações irredutíveis descreve um tipo de géon diferente. Em seguida, mostramos como estender essa descrição para um número N qualquer de géons. A teoria aqui desenvolvida pode ser vista como um \"toy model\" para o estudo das consequências de se ter uma topologia espacial não-trivial, e em particular, o estudo das propriedades físicas de géons. / Topological geons can be viewed as a sort of localized excitations in spatial topology. In this dissertation, we study a simple physical model, given by a Yang-Mills-Higgs theory with a gauge symmetry described by a compact Lie group G, spontaneously broken down to a finite subgroup H C G. We shall consider this theory to be defined on a (2 + 1)d spacetime with topology of the form E x IR, where describes a plane with a single geon. More specifically, we investigate the low energy sector of this theory, obtain its classical configuration space and quantize it. Quantization is accomplished by identifying a certain algebra, which mathematically describes the system, analyzing its structure in detail and obtaining its irreducible representations. Each such representation is then interpreted as an specific geonic sector of the theory. In other words, each one of the irreducible representations describes a distinct geon type. Moreover, we show how the above description can be extended to any number N of geons. The theory developed here may be viewed as a toy model for studying the consequences of non-trivial spatial topology, and in particular the study of the physical properties of geons.
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Caracterização anatômica da organogênese in vitro e transformação genética via Agrobacterium tumefaciens em Citrus sp. / Anatomical analysis of in vitro organogenesis and Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation in Citrus sp.

Almeida, Weliton Antonio Bastos de 28 October 2002 (has links)
A transformação genética vem sendo, cada vez mais, incorporada em programas de melhoramento genético de diversas espécies. Esta técnica permite a incorporação de gene(s) exógeno(s) no genoma das plantas, modificando características específicas. Assim, apresenta-se como uma importante ferramenta de auxílio ao melhoramento convencional de citros, que possui uma série de limitações impostas pela sua biologia reprodutiva. Entretanto, a transformação genética requer o estabelecimento prévio de sistemas de regeneração de plantas in vitro como requisito essencial para sua execução. Portanto, o objetivo deste trabalho foi estabelecer as condições de cultivo in vitro para organogênese e transformação genética de laranja 'Hamlin', laranja 'Pera', laranja 'Valência', laranja 'Natal' (Citrus sinenis L. Osbeck) e limão 'Cravo' (Citrus limonia L. Osbeck), realizando-se a caracterização anatômica do processo. Buscou-se, inicialmente, otimizar o processo de organogênese e regeneração de plantas in vitro, a partir de segmentos de epicótilo. Explantes foram introduzidos em meio de cultura MT suplementado com BAP, nas concentrações 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 ou 4,5 mg.L -1 . Avaliaram-se o percentual de explantes responsivos e o número de brotações maiores ou iguais a 1,0 cm por explante responsivo. As brotações obtidas foram transferidas para meios de enraizamento, que se constituíram do MT + 1,0 mg.L -1 de NAA, MT + 1,0 mg.L -1 de IBA e MT na ausência de auxina. A concentração de BAP que melhor favoreceu a indução da organogênese foi 1,0 mg.L -1 para as laranjas doces e 0,5-2,5 mg.L -1 para o limão 'Cravo'. O meio de enraizamento com melhor resposta foi o MT + 1,0 mg.L -1 de IBA, para todos os cultivares estudados. Procedeu-se análise anatômica da organogênese in vitro, nas condições ótimas obtidas no trabalho anterior. As gemas adventícias tiveram origem endógena, formando-se a partir de zonas meristemáticas do câmbio vascular, caracterizando-se em organogênese direta. Desenvolveram-se, também, experimentos para estudar a transformação genética, via Agrobacterium, em segmentos de epicótilo de laranja 'Natal', laranja 'Valência' e limão 'Cravo'. Neste caso, estudou-se o tempo de inoculação com Agrobacterium, o período de co-cultivo, a utilização de acetoseringona e a temperatura de incubação durante o co-cultivo e o seccionamento do explante. Plantas transgênicas foram obtidas utilizando-se um período de inoculação de 20 minutos com Agrobacterium tumefaciens (EHA-105), co-cultivo por 3 dias na ausência de acetoseringona no meio de cultura e temperatura de co-cultivo de 23-27 °C. Finalmente, desenvolveu-se um estudo da indução da organogênese, análise histológica e transformação genética, a partir de segmentos internodais de plantas adultas das laranjas 'Hamlin', 'Pera', 'Valência' e 'Natal'. A organogênese foi induzida em meio de cultura DBA3, modificado, suplementado com 1,0 mg.L -1 de BAP e 0,5 mg.L -1 de NAA. Em função dos cortes histológicos concluiu-se que as gemas adventícias formaram-se na superfície do calo, o qual originou-se de sucessivas divisões celulares do câmbio, caracterizando-se em organogênese indireta. Plantas transgênicas de tecido adulto de laranja 'Hamlin' e laranja 'Valência' foram obtidas utilizando-se um dia de co-cultivo a 24 ºC, com ou sem o seccionamento do explante para Hamlin e apenas com o seccionamento do explante para Valência. / Genetic transformation has been more frequently associated with conventional genetic breeding programs of different species. It allows for the introduction of exogenous gene(s) into the plant genome, with the possibility of altering specific characteristics. Thus, it can be an important tool for Citrus conventional breeding programs, which present several limitations imposed by the characteristics of the reproductive biology of this genus. For the success of the transformation system, however, the previous establishment of an efficient in vitro regeneration system is required. The objective of this research was to define in vitro culture conditions for the organogenesis and genetic transformation of Hamlin, Pera, Valencia and Natal sweet oranges (Citrus sinensis L. Osbeck) and Rangpur lime (Citrus limonia L. Osbeck) with the anatomical characterization of the process. Initially, the optimization of the in vitro organogenesis process and plant recovery was attempted using epicotyl segments as explants. For organogenesis induction, the explants were placed in MT culture medium supplemented with BAP (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; 2.5; 3.0; 3.5; 4.0 or 4.5 mg.L -1 ). The percent of responsive explants and the number of adventitious shoots per explant (> 1.0 cm) were evaluated. The shoots were transferred to rooting media, consisting of MT medium supplemented with NAA or IBA, or absence of auxin. The best BAP concentration for organogenesis induction was 1.0 mg.L -1 for the sweet oranges and between 0.5 and 2.5 mg.L -1 for Rangpur lime. The best rooting medium was MT with 1.0 mg.L -1 IBA for all the cultivars. Anatomical analysis was done to describe the optimized culture conditions. Adventitious buds originated endogenously from meristematic regions of the vascular cambium, characterizing a direct organogenesis. Studies were also done to analyze the genetic transformation of the sweet orange cultivars Natal and Valencia and Rangpur lime via Agrobacterium. Several experiments were installed to define the period of Agrobacterium inoculation and co-cultivation, the presence or absence of acetoseryngone, the temperature of incubation and the explant condition (with or without a longitudinal cut). Transgenic plants were obtained using an inoculation period of 20 minutes and co-cultivation for 3 days at 23-27 °C in absence of acetoseryngone in the culture medium. Finally, a study of organogenesis induction, histological characterization and genetic transformation from internodal segments of mature plants of sweet orange cultivars Hamlin, Pera, Valencia and Natal was conducted. Organogenesis was induced in DBA3 modified medium supplemented with 1.0 mg.L -1 BAP and 0.5 mg.L -1 NAA. Histological analysis showed that the adventitious buds formed indirectly from the callus formed by successive cell divisions from the vascular cambium. Transgenic plants from mature tissue of Hamlin and Valencia sweet oranges were obtained using one day of co-cultivation at 24°C with or without the longitudinal sectioning of the explant for Hamlin and only when the explant was longitudinally sectioned for Valencia.
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Transformação genética de laranja doce com uma construção gênica do tipo hairpin de um fragmento do gene da V-ATPase-A de Diaphorina citri Kuwayama / Sweet orange genetic transformation with a hairpin type construction gene fragment of V-ATPase-A of Diaphorina citri Kuwayama

Silva, Tatiane Loureiro da 12 December 2013 (has links)
O Brasil é o maior produtor de laranja doce no mundo. Entretanto, a cultura enfrenta grandes problemas, devido ao ataque de pragas e doenças, o que reduz a produtividade da cultura. Entre estas doenças, destaca-se o huanglongbing (HLB), doença associada a três espécies da bactéria Candidatus Liberibacter. No Brasil, o psilídeo Diaphorina citri é o inseto transmissor do HLB. A falta de cultivares de laranja doce resistentes ao HLB torna a transformação genética de plantas uma medida em potencial para o controle desta doença. Plantas transgênicas de laranja doce expressando um RNA de dupla fita (dsRNA) de um gene essencial à sobrevivência de D. citri podem resultar no controle do inseto por meio do mecanismo de RNA de interferência. Tal mecanismo resulta na degradação do RNAm homólogo ao dsRNA. Este trabalho teve por objetivo produzir plantas transgênicas de laranja doce, expressando um fragmento do gene DcV-ATPase-A de D. citri, em uma construção gênica tipo hairpin. Dessa forma, o silenciamento gênico por RNA de interferência seria ativado no psilídeo quando este for submetido à alimentação nas plantas transgênicas. O trabalho foi iniciado com a elaboração da construção gênica contendo uma sequência repetida e invertida do gene DcV-ATPase-A de D. citri, para formação de um hairpin. Segmentos de epicótilo, provenientes de sementes germinadas in vitro das laranjas \'Hamlin\', \'Pêra\' e \'Valência\' (Citrus sinensis L. Osbeck) foram utilizados como fontes de explantes para a transformação genética via Agrobacterium tumefaciens. Paralelamente aos experimentos de transformação genética, insetos adultos de D. citri foram submetidos a experimentos de alimentação artificial, contendo RNA de dupla fita (dsRNA) ou pequenos RNA interferentes (siRNA) da DcV-ATPase-A. Ao final do período de alimentação, foram avaliadas o número de insetos vivos e a expressão relativa do RNAm da DcV-ATPase-A. Através de PCR e Southern blot, a transgenia foi confirmada em 26 e 39 plantas de laranja \'Hamlin\' e \'Valência\', respectivamente. A transgenia não foi confirmada nas plantas regeneradas de laranja \'Pêra\'. O número de inserções no transgene variou de 1 a 4 cópias. A produção dos siRNAs foi confirmada em 10 plantas de laranja \'Valência\', através de siRNA blot. O uso de dietas artificiais contendo dsRNA ou siRNA do gene DcV-ATPase-A não resultou em diferenças significativas no número de insetos vivos, ou no nível de expressão relativa do RNAm do gene DcV-ATPase-A em insetos adultos de D. citri. / Brazil is the largest sweet orange producer in the world. However, this crop faces major problems due to the attack of pests and diseases that reduce its productivity. Among the diseases, stands out the huanglongbing (HLB), disease associated with three different species of the Candidatus Liberibacter bacteria. In Brazil, the psyllid Diaphorina citri is the insect vector of HLB. The absence of resistant sweet orange cultivars to HLB makes the genetic transformation of plants a potential methodology to control this disease. Sweet orange transgenic plants engineered to express double strand RNA (dsRNA) of an essential gene for D. citri survival could result in insect control by RNA interference. This mechanism results in degradation of homologous RNAm to dsRNA. The aim of this work was to produce transgenic sweet orange plants expressing a fragment of D. citri DcV-ATPase-A gene, in a hairpin construction aiming gene silencing by RNA interference in D. citri, when fed on sweet orange transgenic plants. The work started developing a gene construct containing an inverted and repeated sequence of DcV-ATPase-A gene, to form a hairpin. Epicotyl segments collected from in vitro germinated seedlings of \'Hamlin\', \'Pêra\' and \'Valência\' sweet oranges (Citrus sinensis L. Osbeck) were used as explants for the genetic transformation experiments via Agrobacterium tumefaciens. At the same time, adults of D. citri underwent artificial diet experiments containing dsRNA or siRNA of DcV-ATPase-A. At the end of feeding time, the survival of insects and the relative expression of DcV-ATPase-A RNAm were evaluated. Through PCR and Southern blot analysis, 26 \'Hamlin\' and 39 \'Valência\' sweet orange transgenic lines were confirmed. None of the regenerated \'Pêra\' plants were transgenic. The transgenic plants had 1 to 4 T-DNA insertions. The siRNA products were observed in 10 \'Valência\' plants, through siRNA blot. The artificial diets containing dsRNA or siRNA of DcV-ATPase-A resulted in no differences in the number of live insects and in the relative expression of DcV-ATPase-A RNAm in adult insects.

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