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Desenvolvimento e validação de um método computadorizado para avaliação do consumo alimentar, preenchido por indivíduos adultos utilizando a Web / Development and validation of a self-administered computerized on-line method to assess food consumption in healthy adults

Galante, Andréa Polo 05 December 2007 (has links)
Objetivo: O principal objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método computadorizado para avaliação do consumo alimentar, preenchido por indivíduos adultos utilizando a Web. Metodologia: Foi desenvolvido um sistema computadorizado contendo base de dados de alimentos provenientes das principais Tabelas de Composição de Alimentos. No total, 561 indivíduos manifestaram interesse em participar da pesquisa. Após os critérios de exclusão adotados, 93 indivíduos fizeram parte da amostra. Para a validação, foi utilizado como método de referência o Recordatório de 24 horas (R24h) aplicado por telefone. Foi solicitado o preenchimento de 3 registros alimentares (RAPls) on-line em dias alternados e, no dia seguinte ao seu preenchimento, os mesmos indivíduos foram entrevistados por telefone. Utilizaram-se teste de Kolmogorov-Smirnov e ajustes pela variância intrapessoal e pela energia para as variáveis dietéticas, coeficientes de correlação de Pearson e de Spearman, teste t-pareado e teste de Wilcoxon, classificação dos indivíduos em quartis, Kappa ponderado e os gráficos de 81and Altman. Resultados: A amostra final foi constituída por 60 indivíduos, dos quais 72% eram do gênero feminino e 70% possuíam curso superior completo. Em relação ao estado nutricional, 55% dos entrevistados eram eutróficos. Lipídio, cálcio, ferro, sódio, vitamina 86 e vitamina C apresentaram médias estatisticamente iguais entre ambos os métodos. Os coeficientes de correlação após os ajustes foram todos estatisticamente significantes e variaram de 0,31 (Vitamina 86) a 0,87 (energia). A concordância bruta entre os quartis após o ajuste variou de 40% (carboidratos) a 61,7% (energia), enquanto para os quartis opostos variou de 6,7% (vitamina C) a 21,7% (sódio). Observou-se que todos os nutrientes e energia apresentaram valores acima de 0,40 para o Kappa ponderado. Conclusões: O sistema computadorizado NutriQuanti, quando preenchido por usuários da internet, apresentou bom desempenho para classificar os indivíduos segundo seu consumo de energia e os nutrientes avaliados / Objective: The main purpose of this study was to develop and validate a self-administered computerized method to assess food consumption in adults using the internet. Methods: A computerized program containing a food nutrient database from the main food composition tables has been developed. Five hundred and sixty one individuais have manifested interest in participate in the study. After application of the exclusion criteria, the sample consisted of 93 individuais. For validation of the computerized method, the 24h-recall method administered by telephone was used as reference. The individuais were asked to complete 3 food records on the internet, in alternate days. After completing each food record, the same individuais were interviewed by telephone. The following statistical tests were used: Kolmogorov-Smirnov, adjustment for the intraindividual portion of the variance and for energy intake for the diet variables, Pearson and Spearman correlation coefficients, t-test for paired samples and Wilcoxon test, cross-c1assification, weighted Kappa and 81and Altman graphics. Results: The final sample consisted of 60 individuais, of whom 72% were female and 70% had completed graduated course. As far as nutritional status, 55% were eutrophic. Mean intake of fat, calcium, iron, sodium, vitamins 86 and C were statistically the same (similar) between the two methods. After adjustment, all correlation coefficients were statistically significant and varied from 0.31 (Vitamin 86) to 0.87 (energy). The raw concordance between quartiles, after adjustment, varied from 40% (carbohydrate) to 61.7% (energy), and for the opposite quartiles varied from 6.7% (vitamin C) to 21.7% (sodium). Ali the nutrients, as well as the energy, have shown values above 0.40 for the weighted Kappa test. Conclusions: The self-administered on-line NutriQuanti computerized program has performed well when classifying the individuals according to their energy and nutrient intake.
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Desenvolvimento e validação de um método computadorizado para avaliação do consumo alimentar, preenchido por indivíduos adultos utilizando a Web / Development and validation of a self-administered computerized on-line method to assess food consumption in healthy adults

Andréa Polo Galante 05 December 2007 (has links)
Objetivo: O principal objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método computadorizado para avaliação do consumo alimentar, preenchido por indivíduos adultos utilizando a Web. Metodologia: Foi desenvolvido um sistema computadorizado contendo base de dados de alimentos provenientes das principais Tabelas de Composição de Alimentos. No total, 561 indivíduos manifestaram interesse em participar da pesquisa. Após os critérios de exclusão adotados, 93 indivíduos fizeram parte da amostra. Para a validação, foi utilizado como método de referência o Recordatório de 24 horas (R24h) aplicado por telefone. Foi solicitado o preenchimento de 3 registros alimentares (RAPls) on-line em dias alternados e, no dia seguinte ao seu preenchimento, os mesmos indivíduos foram entrevistados por telefone. Utilizaram-se teste de Kolmogorov-Smirnov e ajustes pela variância intrapessoal e pela energia para as variáveis dietéticas, coeficientes de correlação de Pearson e de Spearman, teste t-pareado e teste de Wilcoxon, classificação dos indivíduos em quartis, Kappa ponderado e os gráficos de 81and Altman. Resultados: A amostra final foi constituída por 60 indivíduos, dos quais 72% eram do gênero feminino e 70% possuíam curso superior completo. Em relação ao estado nutricional, 55% dos entrevistados eram eutróficos. Lipídio, cálcio, ferro, sódio, vitamina 86 e vitamina C apresentaram médias estatisticamente iguais entre ambos os métodos. Os coeficientes de correlação após os ajustes foram todos estatisticamente significantes e variaram de 0,31 (Vitamina 86) a 0,87 (energia). A concordância bruta entre os quartis após o ajuste variou de 40% (carboidratos) a 61,7% (energia), enquanto para os quartis opostos variou de 6,7% (vitamina C) a 21,7% (sódio). Observou-se que todos os nutrientes e energia apresentaram valores acima de 0,40 para o Kappa ponderado. Conclusões: O sistema computadorizado NutriQuanti, quando preenchido por usuários da internet, apresentou bom desempenho para classificar os indivíduos segundo seu consumo de energia e os nutrientes avaliados / Objective: The main purpose of this study was to develop and validate a self-administered computerized method to assess food consumption in adults using the internet. Methods: A computerized program containing a food nutrient database from the main food composition tables has been developed. Five hundred and sixty one individuais have manifested interest in participate in the study. After application of the exclusion criteria, the sample consisted of 93 individuais. For validation of the computerized method, the 24h-recall method administered by telephone was used as reference. The individuais were asked to complete 3 food records on the internet, in alternate days. After completing each food record, the same individuais were interviewed by telephone. The following statistical tests were used: Kolmogorov-Smirnov, adjustment for the intraindividual portion of the variance and for energy intake for the diet variables, Pearson and Spearman correlation coefficients, t-test for paired samples and Wilcoxon test, cross-c1assification, weighted Kappa and 81and Altman graphics. Results: The final sample consisted of 60 individuais, of whom 72% were female and 70% had completed graduated course. As far as nutritional status, 55% were eutrophic. Mean intake of fat, calcium, iron, sodium, vitamins 86 and C were statistically the same (similar) between the two methods. After adjustment, all correlation coefficients were statistically significant and varied from 0.31 (Vitamin 86) to 0.87 (energy). The raw concordance between quartiles, after adjustment, varied from 40% (carbohydrate) to 61.7% (energy), and for the opposite quartiles varied from 6.7% (vitamin C) to 21.7% (sodium). Ali the nutrients, as well as the energy, have shown values above 0.40 for the weighted Kappa test. Conclusions: The self-administered on-line NutriQuanti computerized program has performed well when classifying the individuals according to their energy and nutrient intake.
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Validação de métodos para as técnicas de WDXRF e OES -spark, na análise de aços. Cálculo de incerteza de medição para amostras de processo, aço classe API / VALIDATION OF METHODS FOR WDXRF AND OES-SPARK TECHNIQUES IN STEEL ANALYSIS. DETERMINATION OF THE UNCERTAINTY OF MEASUREMENTS FOR API STEEL PLANT SAMPLE

Silva, Carlos Eduardo da 18 February 2009 (has links)
Em conseqüência do aumento da demanda de gás e petróleo no mercado nacional e internacional, as especificações e certificações dos resultados de analises químicas de tubos para gasodutos e oleodutos têm se tornados cada vez mais exigentes. Um contínuo desenvolvimento tem sido realizado para a melhoria de aços microligados da classe API (American Petroleum Institute). As propriedades do aço dependem do controle da composição química e parâmetros de processo durante sua fabricação. Neste trabalho, foi realizada comparação das incertezas de medição entre as técnicas de espectrometria de fluorescência de raios X por comprimento de onda (WDXRF) e de emissão óptica com fonte de arco voltaico (OES-spark) nas análises de acompanhamento de processo na produção de aços classe API. Usualmente, este tipo de análise requer menos de 40 segundos para completa caracterização química para ajuste nos parâmetros de processo de produção. As principais fontes de influência nas análises químicas foram avaliadas por planejamento de experimentos. Os elementos constituintes e traço como Al, Si, P, S, Ti, V, Cr, Mn, Co, Ni, Cu, As, Nb, Mo e Sn foram determinados utilizando as metodologias normalizadas pela ASTM E-322, E-415, E-1009 e E-1085. Os materiais de referência certificados 185A e 187A da CMI (Czech Metrology Institute) foram utilizados para avaliação dos métodos. As incertezas das medições de resultados e a validação com relação a repetitividade e reprodutibilidade das medições foram obtidas conforme os testes estatísticos, recomendados pela norma ISO/IEC 17025. A incerteza de medição para cada elemento é discutida para ambas as técnicas. / The increase of gas and petroleum demanding in the national and international markets, the specification and certification of the chemical analysis results of gas and oil pipe-line have became more and more challenging. A continuous development has been outlined to improve API grade alloy steels (American Petroleum Institute). The steel properties depend on the chemical composition control and process parameters during its manufacturing. In this work, a comparison of the measurement uncertainty between X-ray fluorescence (WD system) and Optical Emission (OES-spark) spectrometries, for API grade steel plant samples analysis, was outlined. Usually, this kind of analyze requires less than 40 seconds for full chemical characterization for adjustment in the process parameters production. The main influence source in the chemical analysis was evaluated for design of experiments. The constituents and trace elements such as Al, Si, P, S, Ti, V, Cr, Mn, Co, Ni, Cu, As, Nb, Mo and Sn were determined using the ASTM E-322, E-415, E-1009 and E-1085 standard methodologies. The 185A and 187A certified reference materials from CMI (Czech Metrology Institute) were used for evaluation of the methods. The uncertainty of the measurement, precision, accuracy, repeatability and reproducibility of the measurements were obtained applying statistic tests, recommended by ISO/IEC 17025. The uncertainty of measurement for each element is discussed for both techniques.
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Padronização e validação do teste de neutralização por redução de placas de Lise em placa de 96 poços para avaliar a imunogenicidade do componente caxumba da vacina MMR / Standardization and validation neutralization test by reduction of lysis plaques on a 96 well plate to evaluate the immunogenicity of the mumps component of MMR

Miranda, Emily Hime January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-03-04T13:55:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 9.pdf: 3952596 bytes, checksum: cfcd87da861ff1eb06b00de845149fc4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A caxumba é uma doença infecto-contagiosa imunoprevinível por vacinação. A imunogenicidade vacinal é avaliada através de testes sorológicos que detectam anticorpos neutralizantes, que são considerados correlatos de proteção. O Teste de Neutralização (PRNT) apresenta vantagens frente a outros testes por ser mais específico na detecção desses anticorpos neutralizantes. O presente estudo visou padronizar e validar a técnica. Durante a padronização foram definidos o M.O.I de 0,001 e o melhor dia de pico de vírus infeciosos (3 dias), para definir um protocolo de produção viral. A partir do vírus produzido foram avaliados qualitativamente o fenótipo da placa de lise e a diluição viral em diferentes condições analíticas. Os seguintes parâmetros foram definidos: diluição viral de 1:1600 para obter 30 placas de lise/poço, bicarbonato de sódio como tampão no meio de cultura, meio semi-sólido com carboximetilcelulose (CMC) 1,5%, tempo de adsorção de 3 horas e tempo de incubação final de 4 dias. Para avaliar o impacto do tempo de neutralização na potência viral e no de título de anticorpos neutralizantes, dois intervalos de tempo (1 e 2 horas) foram testados e a neutralização por 2 horas se demonstrou mais adequada ao ensaio. Posteriormente, foi definido um ponto de corte de 23, utilizando um painel sorológico contendo 126 soros pré e pós-vacinais de crianças imunizadas com a vacina tríplice viral. O ponto de corte foi determinado como a área sob a curva ROC usando os resultados de ELISA previamente avaliados em comparados com os resultados de PRNT. Dentre os resultados analisados, 35% foram concordantes na positividade dos resultados em ambos os testes. Valores preditivos positivos de 95,373 e valores negativos 97,680 determinam a real presença ou não da doença. Critérios de aceitação para o teste foram estabelecidos como: faixas de variação do end point do vírus (13 a 22) e faixas de variação dos controles (baixo, médio e alto). Também foi estabelecido como as amostras indeterminadas devem ser tratadas. Posteriormente, o PRNT foi submetido ao processo de validação, avaliando os parâmetros de linearidade, especificidade, exatidão e precisão, conforme preconizado pela RDC 27 da ANVISA. Nas análises de precisão foram obtidos coeficientes de variação a 15% para o limite inferior de quantificação do método (LIQ) e 20% para as demais concentrações. O mesmo ocorreu nas análises de exatidão. Quanto a seletividade, não foi detectada reação cruzada nas amostras quando desafiadas com o vírus de sarampo. / Mumps is an infectious disease preventable by an available vaccine. Vaccine immunogenicity is evaluated by serological tests for detection of neutralizing antibodies, which are considered the correlate of protection. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) shows advantages for neutralizing antibodies’ dosage because of its better specificity when compared to other tests. The present study aims to standardize and validate this technique. During the standardization process, it was defined the multiplicity of infection of 0,001 and the viral peak production on the third day, for defining a viral production protocol. From the virus lot produced, it were qualitatively evaluated the plaque phenotypes and viral dilutions under different analytical conditions. The following parameters were defined: viral dilution of 1:1600 to achieve 30 plaques per well; sodium bicarbonate as buffer of the culture media, semisolid overlay media content of 1,5% of carboxymethylcellulose (CMC); adsorption time of 3 hours and final incubation of 4 days. In order to evaluate the impact of incubation time for neutralization step on viral potency and neutralizing antibodies’ titers, two intervals (1 and 2 hours) were evaluated and the 2-hour neutralization time was considered more appropriate. After that, a cutoff value of 23 was defined using a serological panel containing 126 pre and post- vaccination sera of children immunized with MMR vaccine. The cutoff value was defined from the area under the ROC curve using ELISA data previously analyzed in comparison with PRNT results. Among the results, there were 35% of positive results in agreement in both tests. Positive predictive value of 95.373 and negative predictive value of 97.680 determine the actual presence or absence of disease. Acceptance criteria for the test were established such as: viral endpoint range (13 to 22) and titer variation ranges for control samples (low, medium and high titer). It was also determined how indeterminate samples should be treated. Finally, PRNT were submitted to validation regarding linearity, specificity, accuracy and precision as recommended by RDC 27 of ANVISA. Regarding the precision analyses, coefficient of variations lower than 15% were achieved for the sample with the lower limit of quantification, and lower than 20% for the other sample concentrations tested. The same occurred in the accuracy analyses. Regarding specificity, no cross reaction was detected in the samples when challenged with measles virus.
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Resíduos agrotóxicos em lodo de estação de tratamento de água para consumo humano: validação de metodologia analítica utilizando cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) / PESTICIDES RESIDUES IN WATER TREATMENT PLANT SLUDGE: VALIDATION OF ANALYTICAL METHODOLOGY USING LIQUID CHROMATOGRAPHY COUPLED TO TANDEM MASS SPECTROMETRY (LC-MS/MS)

Luiz Fernando Soares Moracci 16 September 2008 (has links)
O quadro evolutivo da agricultura brasileira resulta em benefícios à população exigindo crescentes avanços tecnológicos no setor. Constantemente, novos agrotóxicos são introduzidos estimulando estudos científicos com a finalidade de determinar e avaliar os impactos na população e no meio ambiente. No presente trabalho, a matriz avaliada foi o lodo gerado no processo de tratamento de água para consumo humano, coletado na região do Vale do Ribeira, SP. A técnica empregada foi a cromatografia líquida de fase reversa acoplada à espectrometria de massas triploquadrupolar em tandem com ionização por electrospray. Os compostos foram extraídos previamente da matriz. O desenvolvimento da metodologia exigiu tratamento dos dados para que esses pudessem ser utilizados e transformados em informações confiáveis. Os processos envolvidos foram avaliados usando o conceito da validação de ensaios químicos. Os indicadores avaliados foram seletividade, linearidade, intervalo de trabalho, sensibilidade, exatidão, precisão, limite de detecção, limite de quantificação e robustez. Esses indicadores produziram valores quantitativos e qualitativos que foram estatisticamente evidenciados de forma objetiva. A metodologia desenvolvida e validade é simples. Como resultado, mesmo explorando a sensibilidade da técnica, os compostos estudados não foram encontrados no lodo da ETA de Registro. Isso leva a crer que esses compostos podem estar presentes em concentrações muito baixas, podem sofrer degradação durante o tratamento da água ou não são retidos completamente pela ETA. 7 / The evolving scenario of Brazilian agriculture brings benefits to the population and demands technological advances to this field. Constantly, new pesticides are introduced encouraging scientific studies with the aim of determine and evaluate impacts on the population and on environment. In this work, the evaluated sample was the sludge resulted from water treatment plant located in the Vale do Ribeira, São Paulo, Brazil. The technique used was the reversed phase liquid chromatography coupled to electrospray ionization tandem mass spectrometry. Compounds were previously liquid extracted from the matrix. The development of the methodology demanded data processing in order to be transformed into reliable information. The processes involved concepts of validation of chemical analysis. The evaluated parameters were selectivity, linearity, range, sensitivity, accuracy, precision, limit of detection, limit of quantification and robustness. The obtained qualitative and quantitative results were statistically treated and presented. The developed and validated methodology is simple. As results, even exploring the sensitivity of the analytical technique, the work compounds were not detected in the sludge of the WTP. One can explain that these compounds can be present in a very low concentration, can be degraded under the conditions of the water treatment process or are not completely retained by the WTP.
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Determinação da composição corporal de caprinos da raça Saanen pelo método de absortometria de raios-X de dupla energia (DXA) /

Ribeiro, Paola Rezende January 2019 (has links)
Orientador: Kléber Tomás de Resende / Resumo: RESUMO - A absortometria de raios-X de dupla energia (DXA) é um método não-invasivo para mensurar a composição corporal de animais que representa uma alternativa aos métodos padrões de dissecação e análise química, por ser uma técnica de fácil aplicabilidade e que possibilita o acompanhamento das variações na composição corporal do animal ao longo de sua vida. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar a capacidade do método DXA em determinar a composição corporal de caprinos submetidos a dois níveis nutricionais. Para isso, foram utilizados 36 machos Saanen, castrados, divididos em três faixa etárias (3, 5 e 7 meses), cada faixa etária era composta por 12 animais, que foram divididos em dois regimes alimentares: sendo 6 animais mantidos sob regime alimentar ad libitum (AL) definido como o consumo sob mantença com adicional para ganho de 150 g.dia-1; e 6 animais mantidos sob regime alimentar ao nível de mantença (M). Assim que atingiram a idade pré-estabelecida os animais foram mantidos em jejum de líquido e sólidos por 24 horas e escaneados no aparelho DXA Hologic (Discovery Wi). Posteriormente, foram abatidos sendo realizada análise química do corpo inteiro para comparação entre os métodos. O pernil esquerdo foi seccionado da carcaça total escaneado pelo aparelho DXA, e então, dissecado em osso, músculo e tecido adiposo, cada componente foi analisado individualmente no DXA, e posteriormente submetido a análise química para servir de referência aos parâmetros DXA obtidos c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: ABSTRACT - Dual-energy X-ray absorptiometry (DXA) is a noninvasive method to measure the body composition of animals that represents an alternative to comparative slaughter, since it is a technique that is easy to apply and allows monitoring of the variations in the animal's body composition throughout its productive life. The objective was to evaluate the use of DXA method in determining the body composition of goats submitted to two nutritional levels. For this, 36 Saanen males, castrated, were divided into three age groups (3, 5 and 7 months), each age group was composed of 12 animals, 6 of which were kept under diet ad libitum (AL), consumption under maintenance additional for gain of 150 g.day-1; and 6 under maintenance level (L). As soon as they reached the pre-established age, the animals were fasted for 24 hours and scanned in the Hologic DXA device (Discovery Wi). Then, the animals were slaughtered and whole body chemical analysis was performed for comparison between methods. The left leg was sectioned from the total carcass and scanned by the DXA device, after that, it was dissected into bone, muscle and fat, each component was individually analyzed by DXA, and then chemical analysis was performed to be reference for in vivo DXA parameters. The design was completely randomized in 3x2 factorial, with six replications. No significant differences were found for the interaction between age and food level. The relationship between the comparative slaughter method and in ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Desenvolvimento de imunoensaios e biossensores para determinação de LDL eletronegativa / Development of immunoassays and biosensors for electronegative LDL quantification

Faulin, Tanize Espirito Santo 05 August 2010 (has links)
A lipoproteína de baixa densidade eletronegativa (LDL-) é um importante antígeno envolvido na patogênese da aterosclerose. A LDL(-) provoca resposta inflamatória e imunológica, levando à produção de autoanticorpos anti-LDL(-) e a formação subsequente de imunocomplexos (IC-LDL-), os quais também contribuem com o processo aterosclerótico. Diante disso, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e validação de imunoensaios para quantificação plasmática de LDL(-), anti-LDL(-) e IC-LDL(-), assim como o desenvolvimento de ferramentas aplicáveis em um biossensor para LDL(-). Após a padronização de cada ELISA, foram avaliadas as características de desempenho dos métodos: limites de detecção (LD) e quantificação (LQ), precisão intra e inter-ensaios, exatidão, linearidade de diluição e interferentes. Os LD e LQ do ELISA para LDL(-) foram 0,423 mg/L e 0,517 mg/L de LDL(-), respectivamente. As concentrações plasmáticas de LDL(-) apresentaram linearidade quando os plasmas foram diluídos 1:1000, 1:2000, 1:4000 e 1:8000. Os LD e LQ do ELISA para anti-LDL(-) foram 0,0028 mg/L e 0,0032 mg/L de anti-LDL(-), respectivamente. Os plasmas apresentaram linearidade na diluição quando diluídos 1:100, 1:200, 1:400 e 1:800. Os LD e LQ do ELISA para IC-LDL(-) foram 0,023 g/L e 0,034 g/L de IC-LDL(-), respectivamente. Os plasmas apresentaram linearidade quando diluídos 1:12,5, 1:25, 1:50 e 1:100. Os três ELISAs apresentaram precisão intra e inter-ensaios e recuperação dentro dos limites requeridos para imunoensaios. Para o desenvolvimento de um biossensor para LDL(-), uma proteína recombinante, denominada GFP5-scFv, foi expressa em bactérias Escherichia coli da linhagem BL21(DE3). Para obtenção dessa proteína foi realizada a inserção da sequência de DNA de um fragmento variável de cadeia única (scFv) anti-LDL(-) em um vetor bacteriano com a sequência de DNA da proteína verde fluorescente (GFP5). Dessa forma, a GFP5-scFv é fluorescente e tem afinidade pela LDL(-). Também foram sintetizadas nanopartículas de ouro, as quais podem ser eficientemente utilizadas na supressão da emissão da fluorescência de GFP5-scFv. Portanto, os imunoensaios validados e os aplicativos desenvolvidos para o biossensor são ferramentas que tem potencial para serem utilizadas na avaliação da patogênese da aterosclerose. / The electronegative low-density lipoprotein (LDL) is an important antigen involved in the pathogenesis of atherosclerosis. The LDL(-) causes inflammatory and immune response, leading to production of autoantibodies anti-LDL(-) and the subsequent formation of immune complexes (IC-LDL), which also contribute to the atherosclerotic process. Thus, this study aimed to develop and validate immunoassays for quantification of plasma LDL(-), anti-LDL(-) and LDL-IC(-) as well as developing tools applicable to a biosensor for LDL(-). After the standardization of each ELISA, were evaluated the performance characteristics of methods: limits of detection (LD) and quantification (LQ), intra- and inter-assays precision, accuracy, linearity of dilution and interferences. The LD and LQ of LDL(-) ELISA were 0.423 mg/L and 0.517 mg/L of LDL(-), respectively. Plasmas showed linearity when diluted 1:1000, 1:2000, 1:4000 and 1:8000. The LD and LQ of anti-LDL(-) ELISA were 0.0028 mg/L and 0.0032 mg/L of anti-LDL(-), respectively. Plasmas showed linearity when diluted 1:100, 1:200, 1:400 and 1:800. The LD and LQ of IC-LDL(-) ELISA were 0.023 g/L and 0.034 g/L of LDL-IC(-), respectively. Plasma showed linearity when diluted 1:12.5, 1:25, 1:50 and 1:100. The three ELISAs showed good intra- and inter-assays precision and recovery within the limits required for immunoassays. To develop a biosensor for LDL(-), a recombinant protein, called GFP5-scFv was expressed in Escherichia coli BL21(DE3) strain. The obtainment of this protein was performed inserting the DNA sequence of an anti-LDL(-) single chain variable fragment (scFv) in a bacterial vector with a DNA sequence of green fluorescent protein (GFP5). Thus, the scFv-GFP5 is fluorescent and has affinity for LDL(-). Were also synthesized gold nanoparticles, which can be efficiently used for quenching the fluorescence emission of GFP5-scFv. Therefore, immunoassays validated and developed applications for the biosensor are tools that have potential to be used in evaluating the pathogenesis of atherosclerosis.
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Desenvolvimento e validação de método para a extração e quantificação de compostos fenólicos em sedimento. Estudo de caso: Reservatório Guarapiranga, SP / Development and validation method for extraction and quantification of phenolics compounds in sediment. Case study: Reservoir Guarapiranga, SP

Adame, Gisele 16 September 2016 (has links)
Compostos fenólicos vêm despertando preocupação nos últimos anos e incitando grande atenção em todo o mundo ao desenvolvimento de métodos de determinação e monitoramento contínuo no ambiente devido a sua elevada toxicidade e persistência no meio ambiente, principalmente no sedimento, que devido sua característica em acumular compostos faz desse um dos compartimentos mais importantes na avaliação do nível de contaminação de ecossistemas aquáticos continentais. Neste estudo foi desenvolvido um método analítico utilizando cromatografia a gás acoplada ao detector de espectrometria de massas (GC/MS) para a determinação de seis compostos fenólicos e foi avaliada a presença dos mesmos em amostras de sedimento do Reservatório Guarapiranga, um reservatório de usos múltiplos da água, destinado principalmente para abastecimento público de água potável da Região Metropolitana de São Paulo. Para garantir a reprodutibilidade do método de forma confiável atendendo aos objetivos e qualidade propostos, a metodologia desenvolvida foi submetida ao processo de validação, em que os parâmetros seletividade, linearidade, faixa de trabalho, limite de detecção, limite de quantificação, tendência/recuperação, precisão (repetitividade, precisão intermediária e reprodutibilidade) e robustez foram avaliados. A metodologia aqui proposta mostrou ser adequada para alcançar o objetivo de avaliar os compostos em estudo, e pela sua aplicação foi constatada a presença dos compostos fenol e 3-metilfenol no sedimento do reservatório. Nas amostras de sedimento coletadas em 2011, o fenol foi o composto encontrado com maior frequência, com alguns resultados acima do LQ, principalmente em pontos com maior influência urbana, em concentrações de 0,09 a 0,19 μg g-1. Também foi encontrado o 3-metilfenol com resultados acima do LQ em dois pontos de coleta, G-11 e G-13, nas concentrações de 0,10 e 0,19 μg g-1 respectivamente. Já na coleta realizada em outubro de 2014, o composto 3-metilfenol foi quantificado em dois pontos de coleta, G-02 e G-07, nas concentrações de 0,07 e 0,08 μg g-1 respectivamente, sendo detectado abaixo do LQ em diversos pontos ao longo do reservatório. A presença destes compostos mesmo em baixas concentrações pode indicar uma contaminação decorrente de atividades industriais nas margens do reservatório e considerando-se que os compostos em sedimento com o tempo podem ser liberados na coluna dágua e causar contaminação na água de abastecimento este estudo fornece subsídios para revisão da legislação vigente que não estabelece limites para os compostos fenólicos na matriz de estudo. / Phenolic compounds are molecules with increased toxicity and persistence in the environment, mainly in the sediment. Furthermore, these molecules are capable of accumulate compounds, making them one of the most important at the evaluation of the contamination level on aquatic ecosystems in the continent. These features increased the preoccupation in the last years, inciting great attention around the globe about the development of methods to determine and continuously monitor these compounds in the environment. In this study, a new analytical methodology was developed using gas chromatography mass spectrometry system (GC/MS) at the determination and evaluation of six phenolic compounds in sediment samples of the Guarapiranga Reservoir, a water reservatory with multiple uses, intended primarily for public drinking water supply in the Metropolitan Region of São Paulo, Brazil. This methodology was submitted to the validation process, to ensure the reproducibility of the method in a trustworthy way, according to the objectives and quality proposed. Selectivity, linearity, working range, detection limit, quantification limit, trend/recovery, precision (repeatability, intermediate precision and reproducibility) and robustness are the parameters evaluated in this process. This methodology revealed itself adequate to achieve the goal of evaluating the compounds studied. Through this method, it was verified that the compounds phenol and 3-methylphenol are present at the reservoir´s sediment. In sediment samples collected in 2011, phenol was the compound found most frequently, with some results above LQ, especially on points with greater urban influence, in concentrations from 0.09 to 0.19 μg g-1. It was also found 3-methylphenol with results above LQ on two collected points, G-11 and G-13 at concentrations of 0.10 and 0.19 μg g-1 respectively. In 2014, the 3-methyl phenol compound was quantified in two collected points, G-02 and G-07 at concentrations of 0.07 and 0.08 μg g-1 respectively, being detected below the LQ at various points along the reservoir. The presence of these compounds, even in low concentrations, can indicate a contamination from industrial activities at the reservoir margin. Considering that these compounds in the sediment can, with time, be released in the water column and contaminate the water supply, this study provides subsidies for a review of the current legislation, that do not sets limits to the concentration of phenolic compounds on sediment matrix.
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Validação dos dados do satélite CALIPSO utilizando um sistema lidar de retroespalhamento elástico e o fotômetro solar da rede  AERONET / CALIPSO satellite validation using an elastic backscattering lidar system and the AERONET sunphotometer data

Lopes, Fábio Juliano da Silva 05 July 2011 (has links)
Os aerossóis e nuvens desenvolvem um papel muito importante nos processos climáticos terrestres por meio das suas contribuições diretas e indiretas no balanço radiativo da atmosfera. A dificuldade na previsão dos processos de mudanças climáticas estão associadas às incertezas na distribuição e propriedades dos aerossóis e nuvens, assim como em suas interações em escala global. Tendo como principal objetivo desenvolver estudos que ajudem na diminuição dessas incertezas, a NASA, em parceria com a agência espacial francesa CNES, desenvolveu a missão do Satélite CALIPSO, que possui a bordo um sistema Lidar denominado CALIOP capaz de estudar o perfil e a distribuição vertical dos aerossóis e nuvens e os processos de interação entre eles. Uma vez que as propriedade ópticas medidas pelo CALIOP são recuperadas utilizando um complexo conjunto de algoritmos, torna-se necessário o desenvolvimento de estudos e metodologias de validação para inferir qual a acurácia das medidas desse sistema. Nesse contexto, foi desenvolvida uma metodologia de avaliação e validação dos valores de Razão Lidar utilizados a priori pelos algoritmos do CALIOP utilizando dois instrumentos de sensoriamento remoto instalados em solo, um sistema Lidar de retroespalhamento elástico instalado no IPEN - São Paulo e o fotômetro solar da rede AERONET instalado em cinco diferentes localidades, Rio Branco - Acre (RB), Alta Floresta - Mato Grosso (AF), Cuiabá - Mato Grosso (CB), Campo Grande - Mato Grosso do Sul (CG) e São Paulo - São Paulo (SP). Foram determinados os dias de medidas correlativas entre os sistemas em solo e o CALIOP e analisados os dados para os dias de medidas com condições livre de nuvens e com trajetórias de massas de ar se deslocando das regiões de medidas do satélite para as regiões de medidas pelos instrumentos fixos. Foram calculados novos valores de Razão Lidar obtidos pelo Modelo Aeronet/Caliop (Modelo A/C) proposto. Esses valores mostraram-se coerentes com aqueles utilizados inicialmente pelo algoritmo do sistema CALIOP. Realizando uma comparação quantitativa, obteve-se uma diferença percentual de 2,17 ± 30,12%, esse valor mostra-se compatível com outros valores obtidos na literatura de validação desse sistema Lidar a bordo do Satélite CALIPSO. Essa subestimação nos valores de Razão Lidar utilizados pelo CALIOP pode estar ocorrendo devido um problema no processo de calibração dos dados do sistema CALIOP, uma vez que o território brasileiro se encontra na região da Anomalia do Atlântico Sul (SAA). A diferença percentual dos valores de Razão Lidar utilizados pelo CALIOP com aqueles obtido por meio de medidas com o sistema Lidar do IPEN forneceram valores de 2,34 ± 17,53%, demonstrando que o modelo de validação proposto é aceitável e acurácia nos valores de Razão Lidar utilizados a priori pelo CALIOP está dentro das margens de incerteza de 30%. / Aerosol and clouds play an important role in the Earths climate process through their direct and indirect contributions to the radiation budget. The largest difficulty in predicting the climate change processes is associated with uncertainties in the distribution and properties of aerosols and clouds, as well as their interactions on a global scale. The CALIPSO mission was developed as part of the NASA program, in collaboration with the French space agency CNES, with the main goal to develop studies that will help to quantify the uncertainties about aerosols and clouds. The CALIPSO satellite carried a Lidar system on board, named CALIOP, as a primary instrument, able to provide the aerosol and cloud vertical profiles and distribution, as well as their interactions. Once the optical properties measured by CALIOP are retrieved, using a complex set of algorithms, it is necessary to study and develop methodologies in order to assess the accuracy of the CALIOP products. In this context, a validation methodology was developed in order to verify the assumed values of the Lidar Ratio selected by the CALIOP algorithms, using two ground-based remote sensing instruments, an elastic backscatter Lidar system (MSP) installed at IPEN in São Paulo and the AERONET sunphotometers operating at five different locations in Brazil, Rio Branco - Acre (RB), Alta Floresta - Mato Grosso (AF), Cuiabá - Mato Grosso (CB), Campo Grande - Mato Grosso do Sul (CG) e São Paulo - São Paulo (SP). Those days when the CALIOP system and ground-based instruments spatially coincided, were selected and analyzed under cloud-free conditions, as well as days when the trajectories of air masses indicated the transport of air parcels from the CALIOP track towards the ground-based sensors. The Lidar Ratio values from the Aeronet/Caliop proposed model was determined and showed good consistency with those initially assumed by the CALIOP Algorithm. Based on the quantitative comparison, a mean difference of 2,17 ± 30,12%. This value shows to be in good agreement with other papers in the CALIPSO validation literature, demonstrating the accuracy of the proposed model. The apparent underestimation in the CALIOP Lidar Ratio values indicates a possible problem with the calibration process, since the Brazilian territory is in the so-called South Atlantic Anomaly (SSA) Region. The Lidar Ratio retrieved by the MSP-Lidar system at IPEN provided a mean difference of 2,34 ± 17,53%, confirming that the accuracy in the Lidar Ratio assumed a priori by the CALIOP algorithms is within the uncertainty range of 30%.
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Body Image Quality of Life Inventory - BIQLI: Adaptação para o português e validação para pacientes brasileiros, vítimas de queimaduras / Body Image Quality of Life Inventory- BIQLI: Adaptation to Portuguese and validation for Brazilian burn-victim patients

Assunção, Flávia Fernanda de Oliveira 19 September 2011 (has links)
O Body Image Quality of Life Inventory (BIQLI) é um instrumento composto por 19 itens e avalia o impacto positivo ou negativo da imagem corporal sobre alguns aspectos da vida: emoções, convívio social, alimentação, sexualidade, bem-estar emocional, exercícios, relacionamentos entre amigos, família e trabalho/escola. Originalmente proposto no idioma inglês, esse instrumento apresenta uma escala bipolar de resposta com sete opções. Os objetivos deste estudo metodológico foram adaptar o BIQLI para o português-Brasil e avaliar confiabilidade e validade da versão adaptada do instrumento, em uma amostra de pacientes brasileiros, vítimas de queimaduras. O processo de adaptação seguiu as seguintes etapas: tradução do BIQLI para o português por dois tradutores, obtenção da versão consensual em português, avaliação pelo Comitê de Juízes para análise das equivalências semântica, idiomática, conceitual e cultural, back-translation por dois tradutores americanos, obtenção da versão consensual em inglês, comparação da versão consensual em inglês com a versão original do BIQLI, envio da versão consensual em inglês a um dos autores do instrumento original, análise semântica dos itens e pré-teste da versão adaptada do BIQLI em pacientes brasileiros que sofreram queimaduras. A validade de construto foi avaliada pelo teste de correlação de Pearson entre os resultados obtidos pela aplicação do BIQLI e os resultados da avaliação de construtos correlatos - autoestima (com aplicação da Escala de Autoestima de Rosenberg) e qualidade de vida (com a aplicação da Burns Specific Health Scale- Revised). Para verificar o número de componentes do BIQLI e visando à comparação com outros estudos, foram realizados a análise dos componentes principais e o teste para comparação de grupos distintos. A confiabilidade foi avaliada pela consistência interna de seus itens (Alfa de Cronbach). O nível de significância adotado foi de 0,05. Participaram da etapa de validação 77 pacientes, com idades entre 18 e 62 anos, em atendimento no ambulatório da Unidade de Queimados do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. A média dos valores obtidos para cada um dos 19 itens do BIQLI foi de 0,62 (Desviopadrão - D.P. = 1,1) e para o escore total do BIQLI foi de 11,8 (D.P. = 20,9). Com relação à validade de construto, obtiveram-se correlações moderadas entre as medidas de imagem corporal e autoestima (r= 0,30 e p= 0,008) e correlações moderadas entre as medidas de imagem corporal e as obtidas nos domínios afeto e imagem corporal (r= 0,45 e p= 0,000) e relações interpessoais ( r= 0,33 e p= 0,003) da BSHS-R. Com relação à confiabilidade, obtivemos um alto valor para a consistência interna da versão adaptada do BIQLI (Alfa = 0,90). A análise fatorial realizada com um único fator previamente determinado explicou 37,30% da variância de resposta, de forma que a menor carga encontrada foi 0,395. Concluímos que a versão adaptada do BIQLI atendeu aos critérios de validade e confiabilidade, mantendo as propriedades da versão original. / The Body Image Quality of Life Inventory (BIQLI) is an instrument composed of 19 items and assesses the negative or positive body-image impact over a few aspects of life: emotions, social life, diet, sexuality, emotional well-being, exercise, relationship with friends, family and work/school. Originally proposed in the English language, this instrument presents a bipolar response scale with seven options. The objective of this methodological study was to adapt the BIQLI to Brazilian Portuguese and assess the reliability and validity of the instrument\'s adapted version, in a sample of Brazilian patients victims of burns. The adaptation process followed the following steps: translation of the BIQLI into Portuguese by two translators, obtainment of the consensual Portuguese version, assessment by the Judging Committee to analyze the semantic, idiomatic, conceptual and cultural equivalence, back-translation by two American translators, obtainment of the consensual English version, comparison of the consensual English version with the original BIQLI version, forwarding of the consensual English version to one of the authors of the original instrument, semantic analysis of the adapted BIQLI version items and pre-testing on Brazilian patients that suffered burns. The validity of the construct was assessed through the Pearson correlation test between the results obtained through applying the BIQLI and the results of the correlate construct assessments - self-esteem (applying the Rosenberg Self-Esteem Scale) and quality of life (applying the Burns Specific Health Scale- Revised). To check the number of components in the BIQLI and aiming at the comparison to other studies, the main components were analyzed and the test to compare different groups was performed. The reliability was assessed through the internal consistency of its items (Cronbach Alpha). The significance level adopted was of 0.05. Seventy-seven patients, aged between 18 and 62 being treated at the outpatient clinic of the Ribeirão Preto Medical School Clinical Hospital Burn Unit participated in the validation phase. The mean of the values obtained for each one of the 19 items in the BIQLI was of 0.62 (Standard Deviation - S.D. = 1.,1) and for the total BIQLI score 11.8 (S.D. = 20.9). With regards to the construct validity, moderate correlations were obtained between the body-image and self-esteem measurements (r= 0.30 and p= 0.008) and moderate correlations between the body-image measurements and those obtained from the affection and body-image (r= 0.45 and p= 0.000) and interpersonal-relations ( r= 0.33 and p= 0.003) domains of the BSHSR. As to the reliability, we obtained a high value for the internal consistency of the adapted BIQLI version (Alpha = 0.90). The factorial analysis performed with a single predetermined factor explained 37.30% of the response variance, in such a way that the lowest load found was of 0.395. We concluded that the adapted BIQLI version met the validity and reliability criteria, maintaining the properties of the original version.

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