Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 123.pdf: 1294684 bytes, checksum: 49987dde78a9f73cea93a1d2691f5c4f (MD5) Previous issue date: 2006 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 123.pdf: 1294684 bytes, checksum: 49987dde78a9f73cea93a1d2691f5c4f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O presente estudo teve como proposta o monitoramento da resistência a drogas antimicrobianas entre 390 isolados de Salmonella Typhimurium de diversas fontes (animal, ambiental, alimentar, humana e de matéria-prima/rações) de contaminação da cadeia alimentar no Brasil, no período de 1999 a 2003. Todas as regiões geográficas brasileiras foram contempladas. Para o desenvolvimento deste trabalho, além da avaliação do perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, foram utilizadas ferramentas epidemiológicas mais comumente usadas para este sorovar (lisotipia, perfil plasmidial e PFGE). Das 390 cepas avaliadas neste estudo, 346 apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, sendo Tetraciclina (85,84 por cento), Nitrofurantoína (67,63 por cento), Cloranfenicol (30,93 por cento) e Ácido Nalidíxico (26,01 por cento) os mais prevalentes. Três cepas apresentaram resistência à ceftriaxona e uma ao imipenem e todas as cepas foram susceptíveis à ciprofloxacina. Foram obtidos 72 perfis de susceptibilidade. O fagotipo prevalente em todos os anos, fontes e regiões geográficas foi o DT193. A multirresistência esteve associada em 44,13 por cento dos isolados deste fagotipo. Também foi caracterizado o fagotipo DT104 multirresistente. Este foi o primeiro relato deste fagotipo no Brasil. Foram caracterizados, no total, 14 fagotipos. Noventa e nove isolados foram submetidos à análise do perfil plasmidial, obtendo-se 28 perfis distintos. Treze isolados humanos foram submetidos à técnica de PFGE com a enzima XbaI. Foram identificados sete perfis de macrorrestrição, sendo encontrada clonalidade entre os isolados testados. / The present study aimed at monitoring the resistance to antimicrobian drugs in 390 isolates of Salmonella Typhimurium from different sources (animal, environmental, alimentary, human and from raw material/feed animal of contamination of the food chain in Brazil, from 1999 to 2003, including all geographic regions of this country. For such, as well as an evaluation of the profile of susceptibility to antimicrobian drugs, the epidemiological tools most commonly employed for this serovar (phage typing, plasmid profile and PFGE) were used. From the 390 isolates evaluated in the present study, 346 showed resistance to at least one antimicrobian drug, the most prevalent of which being Tetracycline (85,84%), nitrofurantoin (67,63%), chloramphenicol (30,93%) and naladixic acid (26,01%). Three isolates showed resistance to ceftriaxone and one to imipenem. All strains were susceptible to ciprofloxacin. A total of 72 profiles of susceptibility were obtained. The prevalent phage type in every year, source and geographic regions was the DT193. A multiresistance was found in 44,13% of the isolates of this phage type. The multiresistant phage type DT104 was also characterized. This was the first report of this phage type in Brazil. A total of 14 phage types were characterized. Ninety-nine isolates were subjected to the analysis of the plasmidial profile, from which 28 distinct profiles were obtained. Thirteen human isolates were subjected to the PFGE technique with the enzyme XbaI. Seven macrorestriction profiles were identified, with clonality having been found among the tested isolates.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 116.pdf: 1356327 bytes, checksum: be79ab2e79362b06e440aaf115bd4b8e (MD5) Previous issue date: 2007 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 116.pdf: 1356327 bytes, checksum: be79ab2e79362b06e440aaf115bd4b8e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O registro sanitário de produtos é uma importante ferramenta de controle e proteção à saúde.Verifica-se, entretanto, que muitos produtos são registrados como alimentos ou cosméticos, apesar de utilizados pela população devido às suas ações terapêuticas, popularmente conhecidas. O objetivo desta dissertação é comparar as diferentes formas de enquadramento sanitário de produtos de origem natural como alimento, medicamento e cosmético. Foi conduzida uma análise retrospectiva, no período de 2000 a 2005, em três bases de dados: sítio eletrônico da ANVISA, DATA VISA e I-HELPS, a fim de quantificar quais os produtos de origem natural possuíam registro como alimento ou cosmético e tinham processos de registro como medicamento. Como resultado, encontrou-se os seguintes produtos com interface na área de alimento e medicamento: óleo de fígado de bacalhau, óleo de peixe, Allium sativus, Pauliniacupana, lecitina de soja, gelatina, Saccharomyces cerevisiae, Oenothera biennis e Plantagoovat. Foram contabilizados 627 processos de registro de alimentos e 90 de medicamentos.Foram aceitas 539 solicitações de registro como alimento (86 por cento) e 296 encontram-se vigentes.Foram aprovadas 60 solicitações de registro como medicamento (67 por cento dos registros concedidos) e 34 estão válidos. Na interface entre cosmético e medicamentos foram encontrados produtos com os seguintes ativos: Amica montana, Aloe vera, Calendula officinalis, Virginiana Hamamelis, Symphytum officinale e própolis. Foram contabilizados 1103 processos como cosmético e apenas 50 como medicamento. Foram deferidas 942 solicitações de registro de cosméticos (85 por cento) e 908 estão vigentes. Foram aceitos 25 registros como medicamento (50 por cento) e13 encontram-se válidos. Observa-se desta forma que há uma entrada muito maior de processos de registro em outras categorias do que na de medicamentos.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 135.pdf: 776769 bytes, checksum: f129272df03f69a6afaf9f2356ac9f1b (MD5) Previous issue date: 2006 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 135.pdf: 776769 bytes, checksum: f129272df03f69a6afaf9f2356ac9f1b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Este trabalho teve como objetivo detectar, identificar e quantificar a soja geneticamente modificada presente em alimentos obtidos por vários tipos de processamento

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 87.pdf: 692507 bytes, checksum: e3a37710da30b2110d2adef882a97ca9 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 87.pdf: 692507 bytes, checksum: e3a37710da30b2110d2adef882a97ca9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Since 1945, Brazil did not issue pharmaceutical patents. This situation has change following the new Industrial Property Law (LPI nº. 9279/96) enactment in 14/05/1996, according to TRIPS Agreement disposal on patentability of all technological sectors. By one hand, pharmaceutical patents are an important mechanism to encourage innovation. By the other, they create monopolies, ensuring pharmaceutical companies the power to establish high prices during the protection period. Also, they delay the introduction of generic competitors into the market, which could enhance access to medicines. Brazilian National Health Surveillance Agency (ANVISA) participates in the examination of pharmaceutical patent applications by means of a legal mechanism of “prior consent”. This examination is aimed at a more restrictive interpretation of patentability criteria. The goal is not to enact undue patents, which do not aggregate any technological or therapeutic advance, but generally contributes to improperly extend market exclusivity of pharmaceutical products. Secondary patents on new pharmaceutical dosage forms are one kind of market exclusivity extension, as may be the case for modified release tablets. This work analyzes the profile of patent applications filed in Brazil for modified release tablets from 01/01/95 to 31/12/07. Applications were searched in the European Patent Office and in the Brazilian National Institute of Indústrial Property databases. Analysis was aimed at investigating whether the development of these formulations would be justifiable by a therapeutic advance point of view or would only serve as strategies of market dominance. Results showed that the United States, along with European countries, were responsible for 80% of the applications, while only 1% were carried out by Brazilians. Most of applications for modified release tablets were directed for active ingredients acting in the nervous system (33.3%), in the alimentary treat and metabolism (16.4%), and in the cardiovascular system (15.5%). Detailed analysis of patent applications identified cases where this kind of formulation is useful, even crucial, as is the case of proton pump inhibitors. Nevertheless, it was also observed that in most situations this kind of incremental modification does not represent a real advance, being only a patent extension strategy.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 84.pdf: 3245314 bytes, checksum: c5a4897524b601c32c4331343e8de94c (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 84.pdf: 3245314 bytes, checksum: c5a4897524b601c32c4331343e8de94c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Um procedimento analítico é considerado apropriado para uma aplicação específica quando é capaz de gerar resultados confiáveis (precisos e exatos), que possibilitem a tomada de decisão com grau de confiança adequado. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a confiabilidade dos resultados gerados a partir das verificações físicas e químicas do ensaio de dissolução de medicamentos feitos no INCQS no período de 1983 a 2008. Os resultados obtidos nas verificações químicas, dos comprimidos de referência contribuíram para a sustentação dos procedimentos analíticos empregados desde a implantação deste ensaio no contexto das análises no Departamento de Química do INCQS. A partir dos porcentuais dissolvidos das substâncias ativas (prednisona e ácido salicílico) presentes nos comprimidos de referência ao longo dos anos, construíram-se tabelas e gráficos, o que propiciou avaliar o desempenho do instrumental de dissolução. A avaliação das diversas fontes que poderiam contribuir para a incerteza do resultado de dissolução utilizando-se a ferramenta Diagrama de Causa e Efeito foi determinante para a visualização e identificação das principais contribuições na incerteza total do resultado final. / An analytical procedure is considered adequate for a specific application when it is able to produce reliable results (precise and accurate), that make it possible to reach a conclusion with a suitable degree of confidence. The purpose of this study is to assess the reliability of the results generated by the physical and chemical inspections of drug dissolution assays carried out at the INCQS from 1983 to 2008. The results obtained from such chemical inspections (of the reference tablets) contributed to support the analytical procedures applied since the implementation of this assay, in the context of the analyses in the INCQS Department of Chemistry. Tables and charts were produced based on the dissolved percentages of the active substances (prednisone and salicylic acid) observable in the reference tablets over the years, making it possible to evaluate the performance of the method of dissolution. The evaluation of the various sources that could contribute to the uncertainty of the dissolution result, using as a tool, the Cause and Effect Diagram, was crucial for the visualization and identification of the main contributions to the overall uncertainty of the final result. In order to perform this study, it was necessary make an evaluation of: the uncertainty of the chemical substance of reference (uncertainty of 0.5), the uncertainty of the declared concentration of the active substance, prednisone, in the reference tablet (5 % of 10 mg), and the influence of the instrumental system (with the 12 readings of absorbance used for the calculation of the concentration of the active substance released into each dish from the reference tablet). The realization of this study led to the conclusion that the main contributions to the uncertainty of the percentage of the active substance, prednisone, released from its matrix (the reference tablet), in the dissolution medium, were: the relative uncertainty of the CP2 standard reading (2.2 %), the relative uncertainty of the spectrophotometer (4.9 %), and the relative uncertainty of the sample reading (92.9 %), in relation to the relative Uncertainty of the % of dissolution. The latter is the main and major source of uncertainty, because in the dissolution assay what is assessed is the variability of the product.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 114.pdf: 598002 bytes, checksum: 3c505a008627bfa98ab5aadf9fc1f388 (MD5) Previous issue date: 2007 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 114.pdf: 598002 bytes, checksum: 3c505a008627bfa98ab5aadf9fc1f388 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Clorofenóis consistem de um grupo de 19 isômeros incluindo mono-, di-, tri- e tretraclorofenóis, e o pentaclorofenol (PCF). São substâncias orgânicas sintéticas obtidas em larga escala industrial e comercial. Muitos são utilizados como agrotóxicos, principalmente como fungicidas para preservação de madeira. A presença de clorofenóis em sistemas hídricos é de grande interesse, devido à variedade de fontes contaminantes e propriedades físico-químicas dessas substâncias. O processo de desinfecção da água para consumo humano por cloração em presença de substâncias fenólicas pode resultar na formação de clorofenóis. O 2,4,6- Triclorofenol (2,4,6-TCF) é o principal isômero formado através desse processo. Clorofenóis são especialmente tóxicos e potencialmente carcinogênicos. Muitos são considerados poluentes prioritários para serem monitorados em água pela União Européia e pela agência de proteção ambiental dos Estados Unidos. A Portaria n. 518/2004, norma de potabilidade vigente no Brasil, inclue dois clorofenóis: 2,4,6-TCF e PCF, e estabelece o valor máximo permitido de 200 ng/mL e 9 ng/mL, respectivamente. Este estudo teve por objetivo implementar e validar metodologias analíticas para determinação de clorofenóis em água para consumo humano, em níveis de concentração exigidos, utilizando técnica de Cromatografia à Gás acoplada ao Detector Seletivo de Massas (CG-DSM). Incluem-se outros congêneres, além dos contemplados na referida portaria, sabendo-se do potencial de contaminação e da toxicidade dos mesmos. Foi avaliada a qualidade da água de sistemas e soluções alternativas de abastecimento do Município do Rio de Janeiro. Dois métodos analíticos foram validados, os quais demonstraram serem adequados aos objetivos do estudo. Podem ser utilizados em rotinas de controle e ações de vigilância da qualidade da água para consumo humano. As substâncias investigadas incluem todos os isômeros tri- e tetraclorofenóis, e o pentaclorofenol. / Chlorophenols consist of a group of 19 different isomers which include mono-, di-, tri- and tetrachlorophenols, and pentachlorophenol (PCF). They are synthetic organic compounds, obtained on large industrial and commercial scales. Many of them are widely used as pesticides, mainly as fungicides for wood protection. The presence of chlorophenols in the aquatic environment is of great concern, due to their physical and chemical proprieties and the variety of contamination sources. Drinking water disinfection by chlorination treatments may form chlorophenols when phenolic compounds are already present in raw water. 2,4,6- Triclorofenol (2,4,6-TCF) is the main isomer formed through this process. According to the International Agency for Research on Cancer, Chlorophenols are classified as. possibly carcinogenic compounds (Group 2B). Therefore, most of them are considered high-priority pollutants in water by the European Union and the United States Environmental Protection Agency. Regulation Nº. 518/2004, the effective Brazilian potability norm, includes two chlorophenols: 2,4,6-TCF and PCF, and establish the maximum concentration acceptance of 200 ng/mL and 9 ng/mL, respectively. The objective of this study was to implement and validate analytical methods for the determination of chlorophenols in drinking water at levels of the concentration limits established in the potability norm. Two methods were validated for the determination of pentachlorophenol and all isomers of the tri- and tetrachlorophenols. Instrumental analysis has been done by gas chromatography and mass spectrometry. Both methods had shown to be suitable in the scope of the study, fast, easy to execute and not expensive. All studied analytes presented linear working range and correlation coefficients between 0,9988 and 0,9997. The recovery rates varied from 75 to 103%, and variation coefficients were all lower than 15%. After validation, water quality was evaluated in samples collected from common water supply systems and alternative solutions in the Municipality of Rio de Janeiro. 2,4,6-TCF residues were detected in 36% of the 28 analysed samples, varying from 0,008 to 0,238 ng/mL, and all other analytes were below quantitation limit. These results indicate that chlorophenols levels in the sampled drinking water supplies are well below the regulation limits. The validated methods had been shown to be suitable for application in quality control routines and surveillance action by public health authorities.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:10:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 125.pdf: 2499208 bytes, checksum: 842ce0f6ce03412a6ce888b2a55c1319 (MD5) Previous issue date: 2007 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 125.pdf: 2499208 bytes, checksum: 842ce0f6ce03412a6ce888b2a55c1319 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Certos ensaios toxicológicos utilizados no controle de qualidade de produtos têm sido questionados por grupos defensores do bem estar dos animais por levarem ao sacrifício e sofrimento injustificado de um número extraordinário de animais. Além de questões éticas, abusca por métodos alternativos é uma questão de grande relevância para os laboratórios oficiais de controle da qualidade. O método HET CAM (Hens Egg Test-Chorion Allantoic Membrane) vem sendo estudado como método alternativo ao teste de irritação ocular em coelhos. No entanto, estudos que busquem avaliar a relação entre os efeitos induzidos in vivo em outras mucosas (e.g. mucosa oral) e o HET CAM são ainda escassos. Neste sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial de irritação de dentifrícios de uso adulto, apreendidos por Secretarias Estaduais e/ou Municipais de Saúde, e de uso infantil, adquiridos comercialmente no Município do Rio de Janeiro; comparando os resultados obtidos em ensaio in vivo com aqueles obtidos no método HET CAM, abordando as vantagens e desvantagens de cada método. O teste in vivo de irritação da mucosa oral foi realizado em hamsters, conforme preconizado pela ISO 10.993 Parte 10. Dependendo do seu potencial irritante, um produto é classificado como nãoirritante(NI), minimamente irritante (IMin), irritante leve (IL), irritante máximo (IM) e irritante severo (IS). Para o teste in vitro, seguiu-se o método oficial de avaliação do potencial irritanteno ovo de galinha, tendo como princípio a observação dos efeitos irritantes quando em contato com a membrana córion-alantóide do ovo no décimo dia de incubação / Animal welfare groups criticize some toxicological assays, applied in the quality control of products, because of the unjustified suffering of an extraordinary number of animals. Apart from the ethical reasons, the search for alternative methods is a matter of great relevance to the official quality control laboratories. The method HET-CAM (Hens Egg Test-Chorion Allantonic Membrane) is under study as an alternative for the eye irritation test, which is normally performed in rabbits. Studies that intend to evaluate the correlation between the effects induced in vivo in other mucosa (for example oral mucosa) and the HET-CAM, however, are scarce. In this logic, the main goal of the present study was to evaluate the irritation potential of adult’s toothpaste, confiscated by the Secretary of Health from Rio de Janeiro State and/or City, and of commercially available infant’s toothpaste, comparing the results obtained in vivo with the ones obtained with the HET-CAM method. The advantages and disadvantages of both methods were also considered. The oral mucosa irritation test in vivo was performed in hamsters, as established by ISO 10.993-Part 10. The products were classified, according to the irritability potential, as follows: not irritant (NI), minimally irritant (IMin), slightly irritant (IL), maximally irritant (IM) and severely irritant (IS). Concerning the in vitro test, the official method for the evaluation of the irritant potential for application of products on the chorion allantonic membrane of hen eggs was performed and the principle followed was that only eggs at the tenth incubation day were used for the application of substances and observation of effects. In the HET-CAM method, two autonomous analysts tested the products pure (100%) and 10% (triplets) diluted, in independent assays. This test allows the following classification: NI, IL, IM and IS. Twenty products were analyzed, 10 products for adults and the other 10 for infants. In the in vivo method, all products for adults were considered irritants. Within the infant’s products, 60% were considered not irritant or minimally irritant, whereas all the rest were classified as slightly irritant. Except for one adult product, all the other toothpastes studied in this monograph presented a pH level within the security range recommended by the international norm ISO11.609. Concerning HET-CAM, there was no disagreement between the two analysts for the final classification of the products 10% diluted. For the analyses of the pure products, however, divergence on the classification established by the two analysts was observed. The study of the correlation between the values of the scores obtained in vivo and in vitro showed that the irritation index obtained in hamsters associated better with the HET-CAM method performed with the diluted products when compared to the results obtained for the pure products. With the purpose of evaluating the grade of predictability of the in vitro test in comparison to the animal model, a cut-off was established for differentiation between products with low irritancy potential (Ii ≤4,99) and the ones with irritant potential (Ii ≥5,00). Parameters like precision (85%), sensibility (100%) and specificity (50%) were determined. Our study allow us to conclude that, although a satisfying correlation between the results obtained in vitro with the oral mucosa irritation test in hamsters was observed, there is a tendency of overestimation of the results with the HET-CAM method. It is, therefore, recommended that products classified as positive with the HET-CAM might be submitted to further investigation using other in vitro assays (such as citotoxicity, RBC, isolated eye etc) in order to confirm the label of irritant

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 107.pdf: 2520157 bytes, checksum: 93334c0f181c08b7be000b7a1441e401 (MD5) Previous issue date: 2008 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 107.pdf: 2520157 bytes, checksum: 93334c0f181c08b7be000b7a1441e401 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A quantidade de bacilos viáveis presentes na vacina BCG é um importante requisito de qualidade deste produto, pois permite avaliar a consistência de produção. A contagem de colônias em meio sólido é o método oficial recomendado pela Organização Mundial da Saúde e pela Farmacopéia Brasileira para a determinação da viabilidade do BCG. A difícil dispersão do BCG e seu crescimento lento conferem limitações ao método oficial, como a variabilidade dos resultados, a baixa reprodutibilidade e o prolongado tempo de análise. Este trabalho avaliou a aplicabilidade da técnica de redução do sal de tetrazol XTT como método alternativo para a determinação do número de viáveis em vacinas produzidas com o BCG Moreau-RJ. Foi demonstrada a linearidade das técnicas de redução do XTT realizadas com base em Kairo et al. (1999) e em Argüelles et al (2005) em 3, 24 e 48 horas de incubação. Os ajustes lineares foram obtidos pela técnica de redução do XTT a 1 mg/mL baseada em Kairo et al. (1999), com coeficiente de determinação (RP2P=0,99), em conformidade com a Resolução N. 899/2003 da ANVISA referente à validação de métodos bioanalíticos. O melhor ajuste abrangeu as concentrações de vacina de 2,0 a 16,0 x 10P6 PUFC/mL após 24 e 48 horas de incubação a 37C. Nestas condições de ensaio os números de viáveis obtidos preliminarmente para cinco lotes de vacina BCG intradérmica empregados na rotina de imunização do país e para três amostras da vacina de referência BRABCG003 foram fortemente correlacionados (r=0,96) àqueles fornecidos pelo método tradicional de cultivo em meio de Lowenstein-Jensen. Com base nos valores de referência preconizados pela Farmacopéia Brasileira, observou-se 100 por cento de concordância na interpretação final dos resultados fornecidos pelos dois métodos para os cinco lotes de vacina avaliados. / The number of culturable particles in the BCG vaccine is an important requirement of quality control, therefore it allows to evaluate the production consistency. The colony counting on solid medium is the official method recommended by the World Health Organization and by the Brazilian Pharmacopeia to determine the viability of the BCG on final lots. The nature of the organism (difficult dispersion and slow growth) confers inter-laboratory variation of results and time consuming characteristics to the current test. The present work evaluated the applicability of the reduction of the salt of tetrazol XTT as an alternative method to determine the number of viable units in vaccines produced with the BCG Moreau-RJ. The method was linear by the techniques of reduction of the XTT based on Kairo et. (1999) and on Argüelles (2005) after 3, 24 and 48 hours of incubation. The linear adjustment was obtained by assays of reduction of XTT at 1 mg/mL based on Kairo et al. (1999), with coefficient of determination (RP2P=0,99) required by the Resolution N° 899/2003 / ANVISA concernem to the validation of bioanalitical assays. Optimal calibration curves enclosed vaccine concentrations from 2,0 x 10P6 Pto 16,0 x 10P6 PCFU/mL after 24 and 48 hours of incubation at 37 °C. With these conditions the numbers of viable units obtained from five lots of intradermal vaccines used in the brazilian routine of immunization and from three samples of the reference vaccine BRABCG003 had been strongly correlated (r=0,96) to those provided by the current method of culture in Lowenstein-Jensen. Thus, we observed 100% of agreement between the final interpretations of the two methods of analysis considering the range of values referred by the Brazilian Pharmacopeia to BCG vaccine. Therefore, beyond the strong correlation with the official method, the reduction length of assay from 4 weeks to 48 hours, the relative low cost and the easiness of execution represent strong incentives to the validation of the reduction of XTT as an alternative method to replace the counting of colonies in Lowenstein-Jensen.

Made available in DSpace on 2015-02-20T12:56:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 73.pdf: 645663 bytes, checksum: 1fdb98e2621023f13d0c6a16004b1cbd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A segurança e a eficácia da imunoterapia antienvenenamento ofídico estão intimamente relacionadas à pureza e a uma cuidadosa determinação da potência do soro (atividade biológica). A metodologia atualmente utilizada apresenta importantes limitações, as quais este trabalho objetiva contribuir. A mesma é adotada como oficial pela Farmacopéia Brasileira, tendo sido preconizada em 1996 pela Portaria nº 174/MS. Observações preliminares deste estudo identificaram, principalmente, um alto índice de invalidação de ensaios e uma baixa repetibilidade e reprodutibilidade, representado por diferenças significativas no ensaio de potência nos resultados obtidos pelo INCQS e pelos laboratórios produtores, enfatizando a necessidade de aperfeiçoar a metodologia analítica para a determinação da potência do soro antibotrópico. De acordo com as recomendações do Workshop on the Standardization and Control of Antivenoms , coordenado pela Quality Assurance and Safety of Biologicals Unit da OMS em 2001, o estabelecimento de venenos e antivenenos de referência é essencial para a padronização destes ensaios e para permitir a comparação lote a lote, assim como a comparação entre laboratórios. Neste trabalho, apresentamos os resultados de um estudo interlaboratorial para o estabelecimento de veneno e antiveneno botrópico de referência, visando o aperfeiçoamento do controle da qualidade dos soros antibotrópicos, com ênfase na metodologia analítica para a determinação da potência, com a participação de todos os laboratórios brasileiros produtores de soro antibotrópico. Este estudo foi realizado em duas etapas. A primeira compreendeu a reavaliação da potência do lote nº 05 do Veneno Botrópico de Referência BRA/BOT/05, a avaliação da potência do candidato a Soro Antibotrópico de Referência Nacional BRA/ANTIBOT/01, e a avaliação da aplicabilidade de um controle da dose desafio de veneno referente a cinco vezes o valor de dose letal média (5 DL50). / A segurança e a eficácia da imunoterapia antienvenenamento ofídico estão intimamente relacionadas à pureza e a uma cuidadosa determinação da potência do soro (atividade biológica). A metodologia atualmente utilizada apresenta importantes limitações, as quais este trabalho objetiva contribuir. A mesma é adotada como oficial pela Farmacopéia Brasileira, tendo sido preconizada em 1996 pela Portaria nº 174/MS. Observações preliminares deste estudo identificaram, principalmente, um alto índice de invalidação de ensaios e uma baixa repetibilidade e reprodutibilidade, representado por diferenças significativas no ensaio de potência nos resultados obtidos pelo INCQS e pelos laboratórios produtores, enfatizando a necessidade de aperfeiçoar a metodologia analítica para a determinação da potência do soro antibotrópico. De acordo com as recomendações do “Workshop on the Standardization and Control of Antivenoms”, coordenado pela “Quality Assurance and Safety of Biologicals Unit” da OMS em 2001, o estabelecimento de venenos e antivenenos de referência é essencial para a padronização destes ensaios e para permitir a comparação lote a lote, assim como a comparação entre laboratórios. Neste trabalho, apresentamos os resultados de um estudo interlaboratorial para o estabelecimento de veneno e antiveneno botrópico de referência, visando o aperfeiçoamento do controle da qualidade dos soros antibotrópicos, com ênfase na metodologia analítica para a determinação da potência, com a participação de todos os laboratórios brasileiros produtores de soro antibotrópico. Este estudo foi realizado em duas etapas. A primeira compreendeu a reavaliação da potência do lote nº 05 do Veneno Botrópico de Referência BRA/BOT/05, a avaliação da potência do candidato a Soro Antibotrópico de Referência Nacional BRA/ANTIBOT/01, e a avaliação da aplicabilidade de um controle da dose desafio de veneno referente a cinco vezes o valor de dose letal média (5 DL50). A segunda etapa compreenderá a comparação da metodologia de determinação da potência do Soro Antibotrópico pela determinação da Dose Efetiva Média – DE50 (Potência Absoluta) com a metodologia da Potência Relativa frente ao Soro Antibotrópico de Referência, através da determinação da potência de amostras codificadas. Esta monografia, entretanto irá tratar apenas do estabelecimento do veneno e antiveneno de referência. Os resultados obtidos permitiram a avaliação das precisões intraensaios, interensaios e interlaboratorial, a freqüência de ensaios inválidos assim como as diferentes interpretações dos laboratórios, INCQS e produtores nacionais à monografia do Soro Antibotrópico da Farmacopéia Brasileira.

Made available in DSpace on 2015-02-20T12:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 94.pdf: 738482 bytes, checksum: 667de0856e030e189a750c7b2df0e974 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O gênero Enterococcus inclui aproximadamente 30 espécies, algumas das quais muito freqüentemente envolvidas com alimentos e ambientes relacionados, e cuja diferenciação com identificação precisa torna-se muitas vezes problemático, quando estas questões baseiam-se apenas em características fenotípicas que, mesmo assim, permitem separar estes microrganismos em cinco grupos fisiologicamente diferentes. A dificuldade para categorizar inequivocamente as espécies dos enterococos com base somente nas características bioquímicas pode estar relacionado com uma heterogeneidade bastante alta dos aspectos fenotípicos, independentemente da origem dos isolados, devendo ainda ser considerado o fato de haver bastante similaridade das exigências nutricionais entre os enterococos e outras bactérias ácido lácticas. Por estas razões as técnicas moleculares tornaram-se um importante instrumento para caracterização destes microrganismos. Dentre estas, aquelas que se baseiam no uso do 16S rRNA como molécula alvo têm sido consideradas como excelentes opções com propósitos de identificação. A técnica PCR/RFLP fundamenta-se em uma metodologia baseada na amplificação por PCR e nos perfis de restrição obtidos após o uso de enzimas selecionadas com base na sua habilidade de revelar polimorfismo nos fragmentos de DNA ou RNA analisados. Este trabalho tem como objetivo implantar a técnica da PCR/RFLP com as enzimas DdeI, HaeIII e HinfI associada a alguns testes bioquímicos para uma identificação de Enterococcus spp. isolados de amostras de queijo Minas tipo frescal. / O gênero Enterococcus inclui aproximadamente 30 espécies, algumas das quais muito freqüentemente envolvidas com alimentos e ambientes relacionados, e cuja diferenciação com identificação precisa torna-se muitas vezes problemático, quando estas questões baseiam-se apenas em características fenotípicas que, mesmo assim, permitem separar estes microrganismos em cinco grupos fisiologicamente diferentes. A dificuldade para categorizar inequivocamente as espécies dos enterococos com base somente nas características bioquímicas pode estar relacionado com uma heterogeneidade bastante alta dos aspectos fenotípicos, independentemente da origem dos isolados, devendo ainda ser considerado o fato de haver bastante similaridade das exigências nutricionais entre os enterococos e outras bactérias ácido lácticas. Por estas razões as técnicas moleculares tornaram-se um importante instrumento para caracterização destes microrganismos. Dentre estas, aquelas que se baseiam no uso do 16S rRNA como molécula alvo têm sido consideradas como excelentes opções com propósitos de identificação. A técnica PCR/RFLP fundamenta-se em uma metodologia baseada na amplificação por PCR e nos perfis de restrição obtidos após o uso de enzimas selecionadas com base na sua habilidade de revelar polimorfismo nos fragmentos de DNA ou RNA analisados. Este trabalho tem como objetivo implantar a técnica da PCR/RFLP com as enzimas DdeI, HaeIII e HinfI associada a alguns testes bioquímicos para uma identificação de Enterococcus spp. isolados de amostras de queijo Minas tipo frescal. Vinte e uma espécies de referência do gênero Enterococcus foram utilizadas para o estabelecimento dos perfis de restrição. Cinquenta e quatro isolados de leite e frango que apresentaram perfis fenotípicos típicos, atípicos e alguns sem identificação quanto à espécie estocados em nosso laboratório foram utilizados para testar a técnica desenvolvida e 21 isolados provenientes do queijo Minas tipo frescal foram utilizados para confirmar a utilidade da técnica. Ao utilizarmos a técnica PCR/RFLP obtivemos 5 perfis de restrição diferentes e, quando associados alguns testes bioquímicos, foi possível obter uma identificação rápida e precisa da maioria das espécies de Enterococcus.