Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T14:29:38Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Talita Gomes Calaça Menezes.pdf: 1231976 bytes, checksum: 91cc807014e048a87337c8b9ec973630 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Talita Gomes Calaça Menezes.pdf: 1231976 bytes, checksum: 91cc807014e048a87337c8b9ec973630 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-03-17 / O surgimento e disseminação de bactérias multirresistentes consistem em relevantes problemas de saúde pública. Infecções ocasionadas por Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) multirresistente podem apresentar elevada morbimortalidade. Considerando que a vancomicina consiste no fármaco referência da terapêutica de infecções por MRSA multirresistentes, ela deve ser alvo de estudos que visem a melhoria da sua eficácia. Nesse âmbito, moléculas de origem naturais como o ácido úsnico (AU) e a β-lapachona (β-lap) possuem ação antimicrobiana frente a S. aureus. Por outro lado, a encapsulação de fármacos em sistemas nanoestruturados apresenta diversas vantagens decorrentes da liberação controlada do fármaco, dentre as quais aumento da eficácia e diminuição de toxicidade. O objetivo deste estudo consistiu em formular e caracterizar lipossomas contendo vancomicina (VAN-lipo), avaliar a atividade antimicrobiana frente a isolados clínicos de MRSA e verificar o sinergismo com AU e β-lap. Os lipossomas contendo vancomicina foram obtidos pelo método modificado de desidratação-reidratação. Os ensaios de susceptibilidade microbiana foram realizados por microdiluição em caldo de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Para avaliar o sinergismo entre as moléculas livres e os lipossomas foram utilizados o método checkerboard e o teste epsilométrico modificado (E-test). Os VAN-lipo apresentaram tamanho de partícula de 136 ± 0,246 nm e eficiência de encapsulação de 36,15 %. Os resultados obtidos sugerem que a interação in vitro entre VAN e AU é do tipo aditiva (FICI = 0,515), porém, a encapsulação do AU em lipossomas (AU-lipo) acarretou em sinergismo com a VAN (FICI = 0,276). A interação entre VAN e β-lap foi sinérgica (FICI = 0,453) e a encapsulação da β-lap em lipossomas melhorou o nível da interação com VAN (FICI = 0,358). β-lap e AU também apresentaram interação do tipo sinérgica. Os ensaios de sinergismo empregando o método E-test reproduziram os resultados obtidos com o método checkerboard em cerca de 82% dos ensaios. O presente estudo demonstrou que a VAN combinada com AU-lipo ou com β-lap ou β-lap-lipo inibe sinergicamente isolados MRSA multirresistentes. Diante disto, conclui-se que a β-lap e o AU, assim como os lipossomas contendo estas moléculas, podem ser importantes promotores da melhoria da atividade antibacteriana da vancomicina, com potencial aplicação na terapêutica de infecções por MRSA multirresistentes.

Orientador: Fernanda Lourenção Brighenti / Resumo: Este trabalho está dividido em 2 publicações cujos objetivos foram: a) realizar uma revisão sistemática da literatura, seguida de uma metanálise sobre a eficácia da terapia fotodinâmica (TFD) nos micro-organismos responsáveis pela cárie dentária (Publicação 1); b) avaliar o potencial in vitro dos óleos essenciais de Coffea arabica, Matricaria recutita e Eugenia uniflora e dos extratos vegetais de Senna splendida, Senna reticulata e Senna Macranthera para serem utilizados como monoterapia na terapia fotodinâmica sobre suspensões de micro-organismos de interesse médico-odontológico. Publicação 1: A questão de pesquisa e as palavras-chave foram construídas de acordo com a estratégia do PICO. A pesquisa do artigo foi realizada nas bases de dados Embase, Lilacs, Scielo, Medline, Scopus, Cochrane Library, Web of Science, Science Direct e Pubmed. Ensaios clínicos randomizados e estudos in vitro foram selecionados na revisão. O estudo foi conduzido de acordo com as diretrizes do PRISMA para revisão sistemática. Publicação 2: Foram utilizadas as seguintes cepas de referência em suspensão: Cutibacterium acnes ATCC 6919, Streptococcus mutans ATCC 35688, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922 e Candida albicans ATCC 90028. Os materiais vegetais foram testados nas concentrações de 50 μg/mL (extratos) ou 2% (óleos essenciais). Foram estudados cinco grupos: controle negativo, material vegetal sem exposição a luz (FS-luz), material vegetal com exposição a luz (FS+luz),... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Uma característica importante de um higienizador de prótese total refere-se à sua ação antimicrobiana. Este estudo avaliou, por meio de estudo in vitro, o efeito de higienizadores de próteses totais a base de peróxido alcalino frente a biofilmes microbianos formados em superfícies de resina acrílica. A partir de matrizes circulares metálicas (15mm x 3mm), foram confeccionados corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550), os quais foram esterilizados em micro-ondas (650W, por 6 minutos) e inoculados com suspensão de 107 UFC/mL dos microrganismos: Candida albicans (Ca), Candida glabrata (Cg), Staphylococcus aureus (Sa), Streptococcus mutans (Sm), Bacillus subtilis (Bs), Enterococcus faecalis (Ef), Escherichia coli (Ec) e Pseudomonas aeruginosa (Pa). Após contaminação, os corpos de prova foram incubados a 37ºC por 48hs e, em seguida, por meio de uma cesta de aço inoxidável, foram imersos em Béquer com as seguintes soluções, de acordo com as instruções do fabricante (n=10): Grupo CP (Controle positivo)- Solução PBS; Grupo MI - NitrAdine, Medical Interporous; Grupo EF - Efferdent Plus; Grupo CT - Corega Tabs e Grupo CN - (Controle negativo - n=5) - sem contaminação e imersão em PBS. Em seguida, foram lavados (PBS) e imersos em meio de cultura Letheen, para a avaliação da esterelidade e obtenção das diluições seriadas, as quais foram semeadas em meios de cultura específicos. Após incubação (37ºC por 24hs), de acordo com morfologia típica, o número de colônias características foi mensurado e o número de UFC/mL calculado. Os dados foram transformados em log10 (UFC+1) e analisados estatisticamente (Kruskal-Wallis e Dunn) (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram diferença significativa entre os grupos para os microrganismos avaliados (Ca p<0,001; Cg p<0,001; Sm p< 0,001; Sa p<0,001; Bs p=0,005; Ef p<0,001; Ec p<0,001 e Pa p<0,001), havendo redução significativa de UFC de Ca [MI: 0,81 (0,17 a 2,51)], Cg [MI: 0,00 (0,01 a 2,40)], Sa [MI: 0,00 (-0,15 a 1,43)], Sm [MI: 0,00 (-0,09 a 1,21); EF: 2,00 (0,77 a 2,49)], Bs [CT 0,00 (-0,19 a 1,64)], Ef [MI: 0,00 (-0,18 a 0,88)], Ec [MI: 0,00 (-0,44 a 1,15); EF: 0,00 (-0,09 a 1,15); CT: 0,00 (-0,21 a 0,99)] e de Pa [MI: 0,00 (-0,20 a 0,53)] quando comparados aos grupos controles positivos. Concluiu-se que o higienizador NitrAdine foi o mais efetivo, causando diminuição o número de UFC em 7 dos 8 microrganismos testados / The antimicrobial action is an important characteristic of a denture cleanser. This study evaluated, through in vitro study, the efficacy of alkaline peroxides about the antimicrobial action against microbial biofilms on acrylic resin surfaces. Denture base acrylic resin specimens (Lucitone 550; n=190) were obtained from circular metal matrix (15 mm x 3 mm) and sterilized with microwave (650W, for 6 minutes), contaminated with suspension 107 UFC/mL of Candida albicans (Ca), Candida glabrata (Cg), Staphylococcus aureus (Sa), Streptococcus mutans (Sm), Bacillus subtilis (Bs), Enterococcus faecalis (Ef), Escherichia coli (Ec) and Pseudomonas aeruginosa (Pa). After contamination, the specimens were incubated at 37 ° C for 48 hours and then through a stainless steel basket, were immersed in becker with the following solutions according to the manufacturer\'s instructions (n=10): Group CP (Positive Control) - PBS solution; Group MI - NitrAdine, Medical Interporous; Group EF - Efferdent Plus; Group CT - Corega Tabs e Group CN - (Negative Control - n=5) - no contamination and immersed in PBS. After incubation (37ºC por 24hs), in accordance with characteristic morphology, the number of characteristic colonies was counted and the number of CFU/mL calculated. Data were processed following transformation into the formula log10 (CFU +1) and statistically analyzed (Kruskal-Wallis and Dunn) (&alpha;=0.005). The results showed significant differences between groups for evaluated microorganisms (Ca p<0,001; Cg p<0,001; Sm p< 0,001; Sa p<0,001; Bs p=0,005; Ef p<0,001; Ec p<0,001 e Pa p<0,001), with a significant reduction in the number of CFU the Ca [MI: 0,81 (0,17 a 2,51)], Cg [MI: 0,00 (0,01 a 2,40)], Sa [MI: 0,00 (-0,15 a 1,43)], Sm [MI: 0,00 (-0,09 a 1,21); EF: 2,00 (0,77 a 2,49)], Bs [CT 0,00 (-0,19 a 1,64)], Ef [MI: 0,00 (-0,18 a 0,88)], Ec [MI: 0,00 (-0,44 a 1,15); EF: 0,00 (-0,09 a 1,15); CT: 0,00 (-0,21 a 0,99)] and Pa [MI: 0,00 (-0,20 a 0,53)] when compared with CP Groups. It was concluded that the cleanser NitrAdine was the most effective, causing a decrease the number of CFU in 7 of 8 microorganisms tested

Uma característica importante de um higienizador de prótese total refere-se à sua ação antimicrobiana. Este estudo avaliou, por meio de estudo in vitro, o efeito de higienizadores de próteses totais a base de peróxido alcalino frente a biofilmes microbianos formados em superfícies de resina acrílica. A partir de matrizes circulares metálicas (15mm x 3mm), foram confeccionados corpos de prova de resina acrílica termopolimerizável (Lucitone 550), os quais foram esterilizados em micro-ondas (650W, por 6 minutos) e inoculados com suspensão de 107 UFC/mL dos microrganismos: Candida albicans (Ca), Candida glabrata (Cg), Staphylococcus aureus (Sa), Streptococcus mutans (Sm), Bacillus subtilis (Bs), Enterococcus faecalis (Ef), Escherichia coli (Ec) e Pseudomonas aeruginosa (Pa). Após contaminação, os corpos de prova foram incubados a 37ºC por 48hs e, em seguida, por meio de uma cesta de aço inoxidável, foram imersos em Béquer com as seguintes soluções, de acordo com as instruções do fabricante (n=10): Grupo CP (Controle positivo)- Solução PBS; Grupo MI - NitrAdine, Medical Interporous; Grupo EF - Efferdent Plus; Grupo CT - Corega Tabs e Grupo CN - (Controle negativo - n=5) - sem contaminação e imersão em PBS. Em seguida, foram lavados (PBS) e imersos em meio de cultura Letheen, para a avaliação da esterelidade e obtenção das diluições seriadas, as quais foram semeadas em meios de cultura específicos. Após incubação (37ºC por 24hs), de acordo com morfologia típica, o número de colônias características foi mensurado e o número de UFC/mL calculado. Os dados foram transformados em log10 (UFC+1) e analisados estatisticamente (Kruskal-Wallis e Dunn) (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram diferença significativa entre os grupos para os microrganismos avaliados (Ca p<0,001; Cg p<0,001; Sm p< 0,001; Sa p<0,001; Bs p=0,005; Ef p<0,001; Ec p<0,001 e Pa p<0,001), havendo redução significativa de UFC de Ca [MI: 0,81 (0,17 a 2,51)], Cg [MI: 0,00 (0,01 a 2,40)], Sa [MI: 0,00 (-0,15 a 1,43)], Sm [MI: 0,00 (-0,09 a 1,21); EF: 2,00 (0,77 a 2,49)], Bs [CT 0,00 (-0,19 a 1,64)], Ef [MI: 0,00 (-0,18 a 0,88)], Ec [MI: 0,00 (-0,44 a 1,15); EF: 0,00 (-0,09 a 1,15); CT: 0,00 (-0,21 a 0,99)] e de Pa [MI: 0,00 (-0,20 a 0,53)] quando comparados aos grupos controles positivos. Concluiu-se que o higienizador NitrAdine foi o mais efetivo, causando diminuição o número de UFC em 7 dos 8 microrganismos testados / The antimicrobial action is an important characteristic of a denture cleanser. This study evaluated, through in vitro study, the efficacy of alkaline peroxides about the antimicrobial action against microbial biofilms on acrylic resin surfaces. Denture base acrylic resin specimens (Lucitone 550; n=190) were obtained from circular metal matrix (15 mm x 3 mm) and sterilized with microwave (650W, for 6 minutes), contaminated with suspension 107 UFC/mL of Candida albicans (Ca), Candida glabrata (Cg), Staphylococcus aureus (Sa), Streptococcus mutans (Sm), Bacillus subtilis (Bs), Enterococcus faecalis (Ef), Escherichia coli (Ec) and Pseudomonas aeruginosa (Pa). After contamination, the specimens were incubated at 37 ° C for 48 hours and then through a stainless steel basket, were immersed in becker with the following solutions according to the manufacturer\'s instructions (n=10): Group CP (Positive Control) - PBS solution; Group MI - NitrAdine, Medical Interporous; Group EF - Efferdent Plus; Group CT - Corega Tabs e Group CN - (Negative Control - n=5) - no contamination and immersed in PBS. After incubation (37ºC por 24hs), in accordance with characteristic morphology, the number of characteristic colonies was counted and the number of CFU/mL calculated. Data were processed following transformation into the formula log10 (CFU +1) and statistically analyzed (Kruskal-Wallis and Dunn) (&alpha;=0.005). The results showed significant differences between groups for evaluated microorganisms (Ca p<0,001; Cg p<0,001; Sm p< 0,001; Sa p<0,001; Bs p=0,005; Ef p<0,001; Ec p<0,001 e Pa p<0,001), with a significant reduction in the number of CFU the Ca [MI: 0,81 (0,17 a 2,51)], Cg [MI: 0,00 (0,01 a 2,40)], Sa [MI: 0,00 (-0,15 a 1,43)], Sm [MI: 0,00 (-0,09 a 1,21); EF: 2,00 (0,77 a 2,49)], Bs [CT 0,00 (-0,19 a 1,64)], Ef [MI: 0,00 (-0,18 a 0,88)], Ec [MI: 0,00 (-0,44 a 1,15); EF: 0,00 (-0,09 a 1,15); CT: 0,00 (-0,21 a 0,99)] and Pa [MI: 0,00 (-0,20 a 0,53)] when compared with CP Groups. It was concluded that the cleanser NitrAdine was the most effective, causing a decrease the number of CFU in 7 of 8 microorganisms tested

O uso indiscriminado de antimicrobianos pode estar associado ao fenômeno da resistência microbiana, levando ao insucesso no tratamento das infecções e impulsionando a busca por novas alternativas terapêuticas, dentre elas, os bioativos obtidos a partir de fontes vegetais. Foi avaliada a atividade antimicrobiana de extratos hidroetanólicos de plantas sobre bactérias Gram positiva, Gram negativa, leveduras, Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis pela técnica de difusão em agar e microdiluição em caldo. Dentre os extratos avaliados pelo método de difusão em agar, o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a mais expressiva média de halos de inibição de crescimento frente aos microrganismos utilizados, seguido por Bidens pilosa flor, E. pyriformis folha, M. cauliflora folha e E. pyriformis semente que apresentaram estatisticamente a mesma média de formação de halos inibitórios sobre bactérias Gram positivas, Gram negativas e leveduras. Os extratos de Heliconia rostrata não apresentaram atividade. Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis mostraram-se resistentes a todos os extratos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). As bactérias Gram negativas E. coli, E. cloacae, S. marcescens e P. aeruginosa também apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade frente aos extratos (p>0.05). O perfil de senbilidade dos fungos C. albicans e S. cerevisiae foram comparáveis entre si e entre as bactérias Gram positivas B. subtilis, E. faecalis e Gram negativa S. typhimurium (p>0.05). Os extratos que apresentaram ação inibitória através do ensaio de microdiluição em caldo foram os mesmos extratos ativos no teste de difusão em agar. A avaliação da citotoxicidade foi realizada sobre células C6-36 de larvas de mosquito Aedes albopictus. Os extratos de caule e flor de Heliconia rostrata, folha e caule de Plinia cauliflora, semente de Anonna crassiflora e caule, flor e raiz de Bidens pilosa não apresentaram toxicidade nas concentrações avaliadas. Os maiores índices de seletividade foram apresentados pelos extratos de A. crassiflora caule e B. pilosa flor para S. aureus, apresentando potencial para estudos como futuros candidatos a fármacos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). Dos microrganismos que apresentaram alguma sensibilidade a qualquer um dos extratos, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. cloacae e E. coli foram estatisticamente, igualmente os menos sensíveis. Apenas os extratos de B. pilosa folha apresentou igualdade, estatisticamente significativa, da média de efetividade inibitória quando comparado ao controle positivo, a clorexidina / The indiscriminate use of antibiotics may be associated with the phenomenon of microbial resistance, leading to infections treatment failure and boosting the search for new therapeutic alternatives, among them, the bioactive obtained from plant sources. We evaluated the antimicrobial activity of hydroethanolic extracts of plants on Gram positive, Gram negative bacteria, yeasts, Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium bovis H37 through agar diffusion and broth microdilution techniques. Among the extracts evaluated through agar diffusion method, the leaf extract of Bidens pilosa showed the most significant average halos of growth inhibition against microorganisms used, followed by flower of Bidens pilosa leaf E. pyriformis, sheet M. cauliflora seed and E. pyriformis showed that statistically the same average formation of inhibitory halos on Gram positive bacteria, Gram negative bacteria and yeast. Extracts of Heliconia rostrata showed no activity. Mycobacterium bovis and Mycobacterium tuberculosis H37 were resistant to all extracts. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). Gram negative bacteria E. coli, E. cloacae, S. marcescens and P. aeruginosa also showed the same sensitivity profile compared to extracts (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were comparable between the Gram-positive B. subtilis, E. faecalis and Gram negative bacteria S. typhimurium (p> 0.05). The extracts which showed inhibitory action by microdilution sample test were the same active extracts as in agar diffusion test. The Cytotoxicity assessment was performed on cell C6-36 larvae of Aedes albopictus. The extracts of Heliconia rostrata’s stem and flower, Plinia cauliflora’s leaf and stem, crassiflora Annona’s seed and stem, Bidens pilosa's root and flower showed no toxicity at the evaluated concentrations. The highest selectivity were presented by stem extracts of A. crassiflora and Bloom B. pilosa as for S. aureus there is potential for studies on future drug candidates. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were compared one another and to B. subtilis, E. faecalis Gram positive and S. typhimurium Gram negative bacteria (p> 0.05). Among the microorganisms which showed some sensitivity to any of the extracts, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. and E. cloacae coli were statistically also less sensitive. Only the leaf extracts of B. pilosa showed statistically significant equality of the average inhibitory effectiveness when compared to the positive control and chlorhexidine

Atualmente, S. aureus meticilina resistente (MRSA) é o mais importante patógeno nosocomial, devido à sua multirresistência aos antimicrobianos disponíveis, o que direciona esforços na busca de novas alternativas terapêuticas. Neste estudo foi avaliada a ação antimicrobiana de extratos vegetais contra isolados MRSA do ambiente aéreo, identificados previamente. Os extratos de Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata e Plinia cauliflora foram obtidos por maceração em álcool etílico a 70%, submetidos à rota evaporador e liofilizados. Estes foram testados quanto à ação antimicrobiana pela técnica de difusão em ágar. Posteriormente, realizou-se a concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição em caldo. Testes de toxicidade em cultura celular e análise fitoquímica dos extratos complementaram a análise, onde a maioria dos extratos apresentou baixa toxicidade, presença de alcalóides, flavonóides, taninos e saponinas. Os extratos da folha, casca do fruto e caule de Plinia cauliflora, caule e folha de Eugenia pyriformis, caule, polpa, casca do fruto e folha de Annona crassiflora e flor, caule e folha de Bidens pilosa foram efetivos contra as amostras multirresistentes analisadas, sendo que o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a melhor atividade antibacteriana in vitro por ambos os métodos avaliados. / Currently S. aureus methicillin resistant (MRSA) is the most important nosocomial pathogen due to multidrug resistance to available antimicrobials, which directs efforts in the search for new therapies. In this study we evaluated the in vitro antimicrobial activity of plant extracts against ambient aerial isolates of MRSA previously identified. The hydroethanolic extracts of Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata and Plinia cauliflora were obtained by steeping in ethyl alcohol, 70%, evaporated and lyophilized. The antimicrobial activity was evaluated by agar diffusion and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) by microdilution broth. Toxicity testing in cell culture and phytochemical analysis complemented the analysis where most of the extracts showed low toxicity, presence of alkaloids, flavonoids, tannins and saponins. The extracts of leaf, stem and fruit rind of Plinia cauliflora, stem and leaf of Eugenia pyriformis, stem, pulp, fruit rind and leaf of Annona crassiflora and flower, stem and leaf of Bidens pilosa were effective against multidrug-resistant samples analyzed being that the leaf extract of Bidens pilosa showed the best in vitro anti-MRSA activity by both methods evaluated. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

As plantas têm sido utilizadas para fins terapêuticos desde a antiguidade, sendo que atualmente, através de estudos de segurança, de eficácia e de qualidade, são alternativas como possíveis fitoterápicos, ou através de triagens prospectivas, promissoras fontes de moléculas-protótipo candidatas a fármacos. Nos últimos anos, o surgimento de micro-organismos multi-resistentes aos agentes antimicrobianos disponíveis na prática médica tem sido razão de constante preocupação por parte da comunidade cientifica, direcionando a busca por novos antimicrobianos. Talinum patens (L.) Willd (Talinaceae) uma planta encontrada na flora brasileira é amplamente utilizada na culinária e com finalidades terapêuticas na medicina popular. Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi realizar o estudo farmacognóstico de T. patens, incluindo a avaliação das atividades antibacteriana, antifúngica, anti-micobacteriana, leishmanicida e sequestrante de radicais do extrato hidroetanólico seco das folhas, e suas frações: hexânica, acetato-etílica, butanólica e aquosa, além da citotoxicidade. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada através dos métodos de difusão em agar e microdiluição em caldo, com obtenção através deste último da concentração inibitória mínima (CIM). O extrato seco apresentou CIM de 250 e 500 µg/ml contra Serratia marcescens e Staphylococcus aureus respectivamente; a fração hexânica, por sua vez, mostrou-se mais eficaz contra bactérias Gram-positivas e leveduras com CIM de 31,2 µg/ml para Micrococcus luteus e Candida albicans e a fração acetato-etílica, contra bactérias Gram-negativas, CIM de 31,2 µg/ml para Escherichia coli. Adicionalmente, na triagem fitoquímica, o extrato seco mostrou reação positiva para saponinas, esteroides e taninos, a fração hexânica mostrou reação positiva para esteroides e a acetato-etílica para saponinas e esteroides. Portanto, as frações hexânica e acetato-etílica das folhas de T. patens apresentaram promissora atividade antimicrobiana, sendo candidatas a estudos futuros na busca de substâncias com ação antimicrobiana, na busca por novos fármacos com atividade frente a bactérias Gram negativas, positivas e fungos patogênicos. Adicionalmente, o extrato seco demonstrou boa atividade sequestrante de radicais DPPH e quantidade significativa de polifenóis (17,4 mg GAE/g de extrato). O extrato seco e as frações com melhor ação antimicrobiana mostraram baixa citotoxicidade. Foram propostos, por espectrometria de massas, os esteroides estigmasterol, b-sitosterol e campesterol como metabólitos presentes nas folhas de T. patens. / Plants have been used for therapeutic purposes since ancient times, and currently, through studies of safety, efficacy and quality they become possible alternatives as herbal medicines, or through prospective trials, promising sources of molecules prototype drug candidates. In recent years, the emergence of multi-resistant micro-organisms to antimicrobial agents available in medical practice has been the reason for continued concern by the scientific community, directing search for new antimicrobials. Talinum patens (L.) Willd (Talinaceae) is a plant widely used in cooking and for therapeutic purposes in folk medicine. In this context, the objective of this research was to carry out a pharmacognostic study of T. patens, including the evaluation of antibacterial, antifungal, anti-mycobacteria, leishmanicidal and radical scavenger from dry leaves hydroethanolic extract and its fractions: hexane, ethyl acetate, butanol and water. Evaluation of the antimicrobial activity was performed by the methods of agar diffusion and broth microdilution, getting through the minimum inhibitory concentration (MIC). Dried extract showed MIC of 250 and 500 mg/​​ml against Serratia marcescens and Staphylococcus aureus respectively, and the hexane fraction was more effective against Gram-positive bacteria and yeasts with MIC of 31.2 mg /ml for Micrococcus luteus and Candida albicans. Ethyl acetate fraction was active against Gram-negative bacteria with MIC of 31.2 mg/ml for Escherichia coli. In addition, at phytochemical screening, dried extract showed a positive reaction for saponins, steroids and tannins. The hexane fraction showed a positive reaction for steroids and ethyl acetate to saponins and steroids. Therefore, hexane and ethyl acetate fractions from T. patens leaves showed promising antimicrobial activity, being candidates for future studies in research for substances with antimicrobial activity and new drug candidates against Gram-negative and positive bacteria and pathogenic fungi. Additionally, dried extract showed good scavenging activity of DPPH radicals and significant concentration of polyphenols (17.4 mg GAE/g extract). It was proposed by mass spectrometry, as secondary metabolites, the steroids stigmasterol, kaempsterol and b-sitosterol. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O auxílio terapêutico exercido pelas própolis de abelhas Apis mellifera é conhecido desde tempos imemoriais e suas propriedades têm sido amplamente estudadas. Contudo, as própolis produzidas por abelhas sem ferrão foram ainda pouco investigadas. Desta forma, este trabalho se propôs a avaliar algumas características químicas e atividades biológicas de própolis de abelhas sem ferrão da espécie Frieseomelitta varia obtidas em épocas e locais diferentes. Para tanto, obtiveram-se extratos etanólicos de própolis coletadas na região de Alfenas-MG (Fv1, Fv2 e FvA), os quais foram avaliados quanto ao perfil de absorção da luz UV visível, composição por flavonoides (com base em quercetina), compostos fenólicos (com base em ácido gálico) e perfil químico por cromatografia em camada delgada (CCD). Adicionalmente, Fv1, Fv2 e FvA foram submetidos a testes in vitro que analisaram suas atividades antimicrobiana, antioxidante e antiproliferativa. O espectro de absorção da luz UV visível apresentou picos característicos de fenólicos e flavonoides e os testes quantitativos mostraram baixos valores destes compostos fitoquímicos. A CCD, por sua vez, revelou a presença de terpenoides em todas as amostras. Quanto às propriedades biológicas, verificou-se baixa atividade antioxidante. As atividades antimicrobiana e antiproliferativa, no entanto, foram bastante relevantes. A amostra Fv1 mostrou capacidade para inibir totalmente o crescimento de células de câncer de ovário multirresistente a drogas em uma concentração de 7,6µg/mL, valor inferior ao necessário do padrão Doxorrubicina para inibir esta mesma linhagem celular. Nos testes de atividade antimicrobiana, Fv1 também se destacou por sua ação bactericida sobre Streptococcus agalactiae em concentração contida entre 15,62-31,25µg/mL, valor também inferior ao obtido com o padrão Cloranfenicol. Os resultados encontrados nesta pesquisa evidenciam o grande potencial biológico das própolis de Frieseomelitta varia, que pode se modificar conforme local e época de coleta. / The therapeutic aid exercised by propolis of honeybee Apis mellifera is known since immemorial times and their properties have been widely studied. However, the stingless bee propolis has been little investigated. In this way, this work proposed to assess some chemical characteristics and biological activities of propolis produced by Frieseomelitta varia stingless bees. The samples (Fv1, Fv2 and FvA) were obtained in different times and places in the city of Alfenas-MG. Extraction were made with them in ethanol and the resultant extracts were submitted to some evaluations: UV-visible absorption profile, composition by flavonoids (quercetin), phenolic compounds (based on Gallic acid) and chemical profile by thin-layer chromatography (TLC). Additionally, Fv1 Fv2 and FvA were examined by in vitro biological assays, such as antimicrobial, antioxidant and antiproliferative activities. The absorption spectrum of UV-visible light showed characteristic peaks of phenolic compounds and flavonoids, on the other hand, the quantitative tests showed low values of these phytochemicals. The TLC result revealed the presence of terpenoides in all the samples. With regard to biological properties, low antioxidant activity was found. However, the antimicrobial and antiproliferative results, were quite relevant. The sample Fv1 showed ability to inhibit fully the growth of ovarian cancer cells resistant to drugs at a concentration of 7.6µg/mL, below the required value of the standard Doxorubicin to inhibit this same cell line. In the antimicrobial assays, Fv1 also stood out for its bactericidal action on Streptococcus agalactiae in concentration contained between 15.62 -31.25µg/mL, also lower than the value obtained with the standard Chloramphenicol. The results found in this research show the great biological properties of Frieseomelitta varia propolis, which can change according to location and time of collection. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A espécie Leonotis nepetifolia é amplamente distribuída no Brasil e no mundo, é uma erva daninha utilizada com diversas finalidades terapêuticas pela população, porém há poucos estudos a cerca de sua composição química e atividade biológica. O presente estudo tem a finalidade de caracterizar quimicamente os extratos hidroetanólicos de caule, folhas, glomérulo e raízes de L. nepetifolia e avaliar a atividade biológica destes. A caracterização química foi realizada em cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado ao detector de arranjo de diôdos. Quanto o perfil químico dos extratos, foi quantificado o teor de fenóis e flavonoides totais. A atividade antirradicalar foi avaliada pelos testes de DPPH˙ e poder redutor dos extratos. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo teste de microdiluição em placa para fungos e bactérias. Foi realizada a triagem dos extratos quanto a atividade antileishmania, atividade antiamastigota e antipromastigota em Leishmania amazonensis. A atividade citotóxica dos extratos foi avaliada em macrófagos peritoneais murinos. Os cromatogramas e os espectros em UV/vis revelaram a presença de polifenóis e flavonoides em maior abundancia nos extratos das folhas e glomérulo, comparados com as raízes e caule. Os extratos de folhas e glomérulos apresentaram maior atividade antirradicalar, poder redutor e concentrações quantificadas de compostos polifenólicos e flavonoides. Todos os extratos inibiriam o crescimento de 50% da população bacteriana sendo que extrato do caule apresentou maior atividade frente a bactérias Gram-positivas, principalmente para Bacillus cereus. Todos os extratos foram capazes de inibir o crescimento de 50% e 100% da população fúngica, os extratos das folhas e raízes demonstraram maior atividade contra formas promastigotas e amastigotas de L. amazonensis sendo que o extrato das raízes apresentou maior potencial citotóxico em macrófagos murinos. Os extratos brutos de L. nepetifolia apresentaram atividades significantes que se relacionam com os metabólitos secundários presentes na espécie principalmente os polifenóis e flavonoides caracterizados no presente estudo. / The specie Leonotis nepetifolia is widely distributed in Brazil and worldwide, is a weed treatments used for various purposes by the population, but there are few studies about its chemical composition and biological activity. The purpose of this study is to characterize chemically hydroethanolic extracts of stem, leaves, inflorescences glomerulus and roots of Leonotis nepetifolia and evaluate the biological activity of these. The chemical characterization was performed in HPLC - UV on the chemical profile of the extracts was quantified the level of total phenols and flavonoids. The antioxidant activity was assessed for DPPH˙ and reduce power of the extracts. The microbial activity test was used for broth microdilution methods for bacteria and fungi. We performed screening of the extracts and the activity against promastigotes e amastigotes forms of Leishmania amazonensis. The cytotoxic activity of the extracts was evaluated in murine peritoneal. The chromatograms and UV spectra revealed the presence of polyphenols and flavonoids in greater abundance in extracts of leaves and inflorescences glomerulus, compared with the roots and stem the quantitative analyses showed the same result. The extracts of the stem showed higher activity against Gram positive bacteria, mainly Bacillus cereus, all extracts inhibited the growth of 50% of the bacterial population , all extracts were able to inhibit the growth of 50% and 100% of the extract showed no fungal growth and extracts of the leaves and roots showed greater activity against promastigotes and amastigotes forms of L. amazonensis and the roots extracts showed greater cytotoxic potential in murine macrophages. The crude extracts from Leonotis nepetifolia showed significant activities that relate to the secondary metabolites present in the species mainly polyphenols and flavonoids, performed int this study. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Euphorbia cotinifolia apresenta muitas atividades biológicas sendo utilizada na medicina popular para cauterizar feridas e como um purgante em pequenas doses. O presente estudo teve como objetivo determinar o teor de compostos fenólicos e flavonoides, a atividade antimicrobiana, antioxidante e a toxicidade dos extratos hidroetanólicos de raiz, caule, folha e fruto de E. cotinifolia. Foi realizada triagem fitoquímica, dosagem de compostos fenólicos pelo método de Folin-Ciocalteau, flavonoides pelo método de cloreto de alumínio e análise química por CLAE. A atividade antimicrobiana foi determinada pela técnica de difusão em ágar e a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de diluição em caldo utilizando cepas padrões. Foi determinada também a concentração microbicida mínima (CMM). A atividade antioxidante foi determinada pelo método do sequestro do radical livre DPPH. A citotoxicidade foi avaliada pelo método MTT em cultura celular BHK. Todos os extratos hidroetanólicos de Euphorbia cotinifolia apresentaram compostos fenólicos, bem como a presença de metabólitos secundários como taninos e flavonoides, atividade antimicrobiana e antioxidante. A análise em CLAE sugeriu a presença de ácido cafeico para os extratos de folha fresca e seca e demonstrou uma maior concentração de compostos fenólicos na folha seca. Nenhum dos extratos apresentou atividade antimicobacteriana e citotoxicidade in vitro. / Euphorbia cotinifolia has many biological activities being used in folk medicine to cauterize wounds and as a purgative in small doses. The present study aimed to determine the content of phenolic compounds and flavonoids, antimicrobial and antioxidant activity and toxicity of hydroethanolic extracts of root, stem, leaf and fruit of E. cotinifolia. Was performed chemical screening, measurement of phenolic compounds by Folin-Ciocalteau reagent method, flavonoids by aluminum chloride method, chemical analysis by HPLC. The antimicrobial activity was determined by agar diffusion and minimum inhibitory concentration (MIC) by broth dilution technique using standard strains. The minimum microbicidal concentration (CMM) was also determined. The antioxidant activity was determined by the kidnapping of DPPH free radical method. Cytotoxicity was assessed by the MTT method in BHK cell culture. All hydroethanolic extract of Euphorbia cotinifolia presented phenolic compounds, as well as presence of secondary metabolites such as tannins and flavonoids, antimicrobial and antioxidant activity. The HPLC analysis suggested the presence of caffeic acid for extracts of dry leaf and fresh. Dry leaf showed a higher concentration of phenolic compounds. None of the extracts showed antimicrobial activity and cytotoxicity in vitro. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG